Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Особенности структурных белков спор микроспоридии Paranosema grylli, паразитирующей в сверчке Gryllus bimaculatus

Диссертация: Особенности структурных белков спор микроспоридии Paranosema grylli, паразитирующей в сверчке Gryllus bimaculatus
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Стратегия внутриклеточного паразитизма микроспоридий подразумевает высокую степень интеграции клетки паразита с клеткой хозяина в отношении метаболических путей. Будучи типичными анаэробами, эти облигатные ж паразиты используют в своих целях субстраты промежуточных этапов энергетического обмена своих хозяев. (Долгих и др., 1996, 1997, Weidner et al, 1999). В частности, показано, что микроспоридии… Читать ещё >

Содержание

  • Список основных сокращений
  • Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Своеобразие микроспоридий, как систематической группы внутриклеточных паразитов в свете современных представлений
    • 1. 2. Ультратонкаяморфология стадий цикла развития микроспоридий
      • 1. 2. 1. Жизненные циклы микроспоридий
      • 1. 2. 2. Характерные особенности ультратонкой морфологии микроспоридий
      • 1. 2. 3. Морфология зрелой споры
      • 1. 2. 4. Морфология спороплазмы
      • 1. 2. 5. Морфология меронта
      • 1. 2. 6. Морфология споронта
      • 1. 2. 7. Морфология споробласта
    • 1. 3. Строение и состав оболочки споры микроспоридий
      • 1. 3. 1. Строение экзоспоры
      • 1. 3. 2. Строение эндоспоры
      • 1. 3. 3. Белки оболочки спор
    • 1. 4. Строение и состав полярной трубки споры микроспоридий
      • 1. 4. 1. Тонкая морфология полярной трубки
      • 1. 4. 2. Белки полярной трубки
    • 1. 5. Особенности активации и экструзии полярных трубок спор микроспоридий
      • 1. 5. 1. Искусственные стимуляторы активации спор
      • 1. 5. 2. Механизм активации и экструзии полярных трубок
      • 1. 5. 3. Изменения, претерпеваемые полярной трубкой в процессе экструзии
    • 1. 6. Особенности взаимоотношений микроспоридий с клеткой хозяина
    • 1. 7. Особенности гликозилирования белков эукариот
      • 1. 7. 1. N-гликозширование
      • 1. 7. 2. О-гликозилирование
      • 1. 7. 3. О-гликозилирование по «дрожжевому» типу
  • Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 2. 1. Объекты исследований и методы работы с живыми организмами
    • 2. 2. Методы биохимических исследований
    • 2. 3. Методы микроскопических исследований
  • Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 3. 1. Особенности основного белка оболочки спор микроспоридии Paranosema grylli (р40)
      • 3. 1. 1. Выделение р40 из спор P. gryll
      • 3. 1. 2. Влияние изменений состава компонентов инкубационной среды (раствора 2) и некоторых других факторов на высвобождение р40 и сопутствующих белков
      • 3. 1. 3. Влияние инкубации спор в растворе 2 на окрашивание оболочки ДАФИ
      • 3. 1. 4. Влияние сроков хранения и степени зрелости спор на содержание р40 в их оболочке, и солюбилизацию этого белка в растворе
      • 3. 1. 5. Определение локализации р40 В пробах гомогенатов стадий жизненного цикла P. grylli с помощью ммуноблотинга
      • 3. 1. 6. Выявление р40 в различных фракциях гомогенатов жирового тела зараженных хозяев
      • 3. 1. 7. Выявление локализации р40 в клетках паразита и хозяина, иммунофлюоресцент-ным и иммуноцитохимическим методами
      • 3. 1. 8. Особенности гликозилирования р
    • 3. 2. Особенности белков полярной трубки микроспоридии P. gryll
      • 3. 2. 1. Выделение белков полярной трубки из спор
      • 3. 2. 2. Влияние различных концентраций компонентов раствора для экстракции на высвобождение предполагаемых БПТ
      • 3. 2. 3. Получение поликлональной антисыворотки
      • 3. 2. 4. Очистка полученной антисыворотки и изучение локализации предполагаемых БПТ в клетках микроспоридии методом иммуноблоттинга
      • 3. 2. 5. Выявление локализации БПТметодом иммуннофлюоресцентного анализа
      • 3. 2. 6. Определение локализации БПТметодом иммунной электронной микроскопии
      • 3. 2. 7. Выявление присутствия БПТ в составе оболочки спор методом иммуно-блоттинга
      • 3. 2. 8. Особенности гликозилирования БПТ
    • 3. 3. Белковый состав оболочки спор как видоспецифичный признак у микроспоридий
  • Выводы

Особенности структурных белков спор микроспоридии Paranosema grylli, паразитирующей в сверчке Gryllus bimaculatus (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Микроспоридии (Microsporida) — чрезвычайно своеобразная группа облигатных внутриклеточных паразитов. Круг хозяев этих паразитических организмов охватывает представителей всех типов царства животных, от простейших до млекопитающих. Благодаря специфике морфологии, физиологии и биохимии микроспоридий, их позиция в современной филогенетической системе — предмет неутихающих дискуссий.

Стратегия внутриклеточного паразитизма микроспоридий подразумевает высокую степень интеграции клетки паразита с клеткой хозяина в отношении метаболических путей. Будучи типичными анаэробами, эти облигатные ж паразиты используют в своих целях субстраты промежуточных этапов энергетического обмена своих хозяев. (Долгих и др., 1996, 1997, Weidner et al, 1999). В частности, показано, что микроспоридии способны утилизировать АТФ зараженной клетки (Weidner, Trager, 1973, Vivares and Metenier, 2001). Столь сильная зависимость этих паразитов от своих хозяев привела к значительному упрощению структурно-функциональной организации клеток стадий внутриклеточного развития, что позволяет во многих отношениях рассматривать их как минимальные системы, представляющие огромный интерес в качестве моделей для разнообразных исследований.

Многие энтомопатогенные микроспоридии играют роль важных регуляторов численности вредных видов насекомых и представляют интерес для * защиты растений. На основе микроспоридии Paranosema locustae созданы промышленные биопрепараты «Нолок и «Нолобайт», успешно применявшиеся в борьбе с саранчовыми на территории США, Канады и других стран (Henry et al 1974, 1978, 1981). Вспышки массового размножения саранчи, в последнее время регулярно регистрируемые в нашей стране обостряют интерес к поиску и испытаниям разнообразных средств биологической борьбы с этим опаснейшим вредителем.

Единственной стадией жизненного цикла микроспоридий способной существовать вне организма хозяина, является спора, устройство которой свидетельствует о высоком уровне адаптации к долговременному пребыванию в окружающей среде. Способность споры к длительному сохранению инвазионности и своевременной активации при попадании в организм хозяина важнейшие факторы, определяющие эффективность биопрепарата на основе микроспоридий. Однако критерии, по которым можно судить о степени инвазионности спор, пока никем не разработаны.

Способ передачи спорой инвазионного начала клетке хозяина уникален. Под воздействием ряда стимулов внутри споры происходит резкое увеличение гидростатического давления, что приводит к выбросу (экструзии) особой структуры, получившей название полярной трубки, которая прокалывает плазматическую мембрану клетки хозяина. По просвету полярной трубки в цитоплазму клетки хозяина попадает зародыш микроспоридии — спороплазма. Строение и функционирование аппарата экструзии споры — комплекса взаимосвязанных органелл, обеспечивающих проникновение спороплазмы в клетку, а также механизмы, лежащие в основе сохранения спорой инвазионности в ходе пребывания во внешней среде, вызывают огромный интерес у исследователей. И, если морфология споры детально изучена, то данные о структурных белках, входящих в состав аппарата экструзии споры весьма немногочисленны и выполнены главным образом на представителях рода Encephalitozoon, паразитирующих в позвоночных животных. Изучение упомянутых белков также может послужить ключом к пониманию еще очень мало изученных и уникальных закономерностей функционирования клетки микроспоридий, таких, например, как биосинтез, созревания и транспорт белковых молекул.

Кроме того, наиболее сильное патогенное воздействие этих паразитов на организм хозяина и оказываемые микроспоридиями дистантные эффекты на его репродуктивную и иммунную системы отмечаются на заключительном этапе спорогенеза, когда подавляющее большинство особей паразита представлено зрелыми спорами (Селезнев 1995, Токарев 2002). Упомянутые моменты несомненно связаны с уникальными структурными особенностями споры микроспоридий, что обусловливает актуальность изучения структурных белков спор с точки зрения паразито-хозяинных взаимоотношений.

Оболочка обеспечивает возможность создания внутри споры высокого гидростатического давления — движущей силы выброса полярной трубки. Вместе с тем, она образует поверхность контакта с организмом хозяина и служит мишенью для реакций его иммунной системы при пребывании споры вне клетки хозяина. Оболочка защищает спору от разрушающего воздействия внешних факторов при сохранении ее в окружающей среде. За счет другой органеллы аппарата экструзии — полярной трубки осуществляется проникновение в клетку хозяина инвазионного начала — ключевой этап реализации функционального предназначения споры. Таким образом, структурные белки, входящие в состав оболочки и полярной трубки споры представляют особенный интерес. К моменту начала экспериментальной работы, результаты которой легли в основу настоящей диссертации, не было ни одной публикации, затрагивающей тему структурных белков энтомопатогенных микроспоридий.

Кроме того, достаточно актуальной остается проблема диагностики видов микроспоридий паразитирующих в насекомых и представляющих интерес для защиты растений. По современным требованиям световое микроскопирование уже не решает данной проблемы. Дорогостоящие и трудоемкие тесты, включающие элетронную микроскопию и ПЦР-диагностику, могли бы быть заменены анализом состава белков оболочки спор, что значительно проще методически.

Таким образом, в связи со сказанным выше, целью настоящей работы явилось исследование структурных белков спор микроспоридии Paranosema grylli, играющих ключевую роль в патогенезе микроспоридиоза сверчка Gryllus bimaculatus: основного белка оболочки и белков полярной трубки. Для достижения обозначенной цели предполагалось решение следующих задач:

1. Разработать метод выделения и очистки основного белка оболочки и белков полярной трубки спор P. grylli.

2. Исследовать влияние процесса экструзии, условий хранения на состав белков оболочки спор и изучить возможность использования полученных показателей для оценки их жизнеспособности.

3. Определить внутриклеточную локализацию выделенных структурных белков на разных стадиях развития паразита, выявить особенности гликозилирования их молекул, а также возможную роль данных белков в паразит-хозяинных отношениях.

4. Разработать метод диагностики морфологически сходных видов микроспоридий (на примере рода Paranosema), основывающийся на анализе состава белков оболочки спор.

Выводы.

На основе изучения особенностей белков, количественно преобладающих в составе оболочки и полярной трубки споры — структурах, играющих ключевую роль в реализации спорой ее основных функций — длительном сохранении во внешней среде, своевременной активации и распространения инвазионного начала среди новых хозяев, мы можем сделать следующие выводы:.

1. Впервые для энтомопатогенных микроспоридий на примере P. grylli-, паразитирующей в сверчке G. bimaculatus, идентифицированы и изучены структурные белки споры, играющие ключевую роль в патогенезе микроспоридиоза сверчка.

2. Разработан метод выделения основного белка оболочки спор микроспоридии P. grylli. Данный белок имеет массу около 40 кДа и в значительных количествах высвобождается в среду при стимуляции экструзии полярных трубок in vitro и постепенно исчезает из оболочки спор в ходе их хранения спор.

3. Количество р40 в оболочке может служить показателем срока хранения и жизнеспособности спор. Таким образом, впервые получены критерии, возможно позволяющие контролировать активность спор микроспоридий и их способность к экструзии зародышей и заражению насекомых хозяев.

4. р40 является белком экзоспоры зрелых спор и наружной электронноплотной оболочки клеток спорогональных стадий развития микроспоридии.

5. Основной белок оболочки спор P. grylli в значительных количествах присутствует также в жировом теле насекомого-хозяина, содержащего паразита на заключительном этапе спорогонии, где ассоциирован со структурами неизвестной функции. Мы предполагаем, что данные структуры представляют собой дериваты наружной оболочки споробластов, которые становятся «излишками» при дегидратации и компактизации клеток в период превращения споробластов в споры.

6. Полученные впервые данные о выделении микроспоридиями в клетку хозяина субстанции белковой природы, совпадающем по времени с наиболее явными патологическими нарушениями в организме насекомого, могут свидетельствовать об участии р40 в развитии данных нарушений при микроспоридиозе G. bimaculatus, вызываемом P. grylli.

7. Основной белок оболочки спор P. grylli является О-маннозилированным белком. Такой тип гликозилирования характерен для дрожжей и данный результат, впервые полученный на уровне молекулы белка можно считать еще одним свидетельством в пользу филогенетического родства микроспоридий и грибов.

8. Впервые у энтомопатогенной микроспоридии идентифицированны и выделены белки полярной трубки (БПТ). Для трех БПТ имеющих молекулярные массы 56 (БПТ-1), 46 (БПТ-2) и 34 (БПТ-3) кДа методом иммунофлюоресцентного анализа и иммунной электронной микроскопии подтверждена локализация в полярной трубке спор и зачатках этой структуры у споробластов.

9. Достоверно показано, что три белка полярной трубки (БПТ-1, БПТ-2 и БПТ-3) в существенных количествах содержатся также в наружной электронноплотной оболочке клеток преспоровых стадий и экзоспоре зрелых спор, что говорит о способности микроспоридий использовать одни и те же белки для построения разных структур.

10. Продемонстрирована исключительно высокая интенсивность гликозилирования БПТ-1, обусловленная, вероятно, функциональной специализацией данного белка.

11. Показана возможность использования для дифференциальной диагностики морфологически сходных видов микроспоридий нового метода, основанного на анализе состава белков оболочки спор.

Показать весь текст

Список литературы

  1. ., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. 1994. Молекулярная биология клетки.,.2. М. Мир.- 544 с.
  2. В.В. 1997. Особенности углеводного и энергетического обмена микроспоридий Nosema grylli и их патогенного воздействия на организм насекомых-хозяев. Дисс. на соиск. уч. ст. канд. биол. наук. СПб., 130 с
  3. В.В., Семенов П. Б., Григорьев М. С. 2002. Особеннсости энергетического обмена микроспоридии Nosema grylli при внутриклеточном развитии. Паразитология, 36, 6: 493−501
  4. В.В., Семенов П. Б. 2003. Особеннсости катаболизма трегалозы в спорах микроспоридии Nosema grylli. Паразитология, 37, 4: 333−341
  5. Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. 1991. Справочник биохимика. .:Мир,. 544 с.
  6. И.В. Микроспоридии. 1985. Протозоология. Вып. 10.
  7. Е.С., Соколова Ю.Я, Скарлато С. О. 1997. Хромососные ДНК и размер генома микроспоридии Nosema grylli. ДАН, Клеточная биология: 97−101
  8. К.В. 1997. Микроспоридиоз сверчка Gryllus bimaculatus, вызванный Nosema?? у//г.:Автореф. дис. канд. биол. наук. СПб
  9. ЮЛ. 1990. Ультраструктурные изменения в клетках чешуекрылых при микроспоридиозе и их роль в оценке патогенных форм: Дисс. на соиск. уч. ст. к.б.н. JL, — 265 с.
  10. Ю.Я., Селезнев К. В., Долгих В. В., Исси И. В. 1994 Микроспоридия Nosema grylli п. sp. из сверчка Gryllus bimaculatus. Паразитология, 28, 6: 488−493
  11. ЮЛ., Сундуков В. В., 1999. Подавление эстеразной активности как специфичная черта патогенеза микроспоридиоза сверчка Gryllus bimaculatus. Паразитология, 33, 527−535.
  12. В.М. 1996. Молекулярная биология. Структура и функции белка. М, Высшая школа, 336 С.
  13. Е.П. Вредные саранчовые насекомые в СССР. 1970. М. «Колос». 280 С
  14. W., Ferguson D.J., Kohler К., Gross U. 2000. Developmental expression of a tandemly repeated, glycine- and serine-rich spore wall protein in the microsporidian pathogen Encephalitozoon cuniculi. Infect, and Immunol. 68: 2268−2275.
  15. C., Canning E.U., Metener G., Vivares C.P. 1999. Comparision of two isolates of Encephalitozoon hellem and E. intestinalis by pulsed Field Gel Electrophoresis. Eur. J. Protistol., 35: 194−196.
  16. E., Selmi M.G., Lupetti P., Corona S., Gatti S., Scaglia M., Sacchi L. 1996. Microsporidian spore wall: ultrastructural findings on Encephalitozoon hellem exospore. J. Euk. Microbiol, 43: 181−186.
  17. M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72: 248−254.
  18. A., Takvorian P.M. 1999. Developmental morphology and life cycles of the microsporidia. In: The Microsporidia and Microsporidiosis. M. American Society for Microbiology, Washington, D.C.: 85−128.
  19. Delbac F, Duffieux F, Peyret P, David D, Metenier G, Vivares CP 1996. Identification of sporal proteins in two microsporidian species: an immunoblotting and immunocytochemical study. J Euk Microbiol 43: 101
  20. Delbac F, Duffieux F, David D, Metenier G, Vivares CP 1998a Immunocytochemical identification of spore proteins in two microsporidia, with emphasis on extrusion apparatus. J Euk Microbiol 45: 224−231
  21. F., Duffieux F., David D., Metenier G., Vivares C.P. 1998 b. Immunocytochemical identification of spore proteins in two microsporidia, with emphasis on extrusion apparatus. J. Euk. Microbiol., 45: 224−231.
  22. M., Pavan C., 1965 Changes in chromosomes induced by microorganism infection. Proc. nation. Acad. Sci. Washington,.54: 1321−1327.
  23. M., Pavan C., Basile R., 1969. Effects of a virus and a microsoridian infections in chromosomes of various tissues of Rhynchosciara angelae (Nonato et Pavan, 1951). Rev. Brasil. Biol., 29 (2): 191−206.
  24. V., Sokolova J., Issi I. 1997. Activities of enzymes of carbohydrate and energy metabolism of the spores of the microsporidian, Nosema grylli. J. Euk. Microbiol., 44: 246−249.
  25. V. 2000. Activities of enzymes of carbohydrate and energy metabolism of the intracellular stages of the microsporidian Nosema grylli. Protistology, 1: 87−91
  26. V.V., Semenov P.B. 2003 The spore wall and polar tube proteins of the Microsporidian Nosema grylli: the major spore wall protein is released before spore extrusion. Tsitologija 45: 324−329
  27. Duffieux F., Peyret P., Roe B.E., Vivares C.P. 1999. First report on the systematic sequencing of the small genome of Encephalitozoon cuniculi: gene organization of a 4,3 kbp region on chromosome I. Microb. Сотр. Genomics, 3:1−11.
  28. V. Y., Ovchinnikov S.A., 1992 Inhibition of acid phosphatase in the black fly immature larvae caused by microsporidia Amblyospora. Eur. J. Protistol., 28 (3): 336−337.
  29. E., Ruiz L., Undeen A.H. 1994. Monovalent cations induce microsporidian spore germination in vitro. J. Euk. Microbiol., 41: 464−468.
  30. Т., Hasegawa M. 1996. Origin and early evolution of eukaryotes inferred, from the amino acid sequences of translation elongation factors lalpha/Tu and 2/G. Adv. Biophys., 32: 73−120.
  31. Hayman J. R, Hayes S. F, Amon J, Nash T. E 2001 Developmental Expression of Two Spore Wall Proteins during Maturation of the Microsporidian Encephalitozoon intestinalis. Infect. Immun., 69: 7057−7066
  32. Henry, J, E., Oma, E. A and Oganser, J. A. Relative effectiveness of ULV spray against grasshoppers.J. Econ. Entomol, 71, 1978
  33. Henry, J, E., and Oma, E. A. Pest control by Nosema locustae, a Pathogen of Grasshoppers and Crickets. Microbial Control of Pests and Plant Diseases, London N.-Y.Toronto Sydney San-Fransisco, 1981.
  34. R.P., Logson J.M., Healy В., Dorey M.W., Doolittle W.F. 1999 Microsporidia are releated to fungi: evidence from the largetst subunit of RNA polymerase and other proteins. Proc. Natl. Acad. Sci. USA: 109−116
  35. Jurand A., Simoes L.C.G., Pavan C., 1967 Changes in the ultrastructure of salivary gland cytoplasm in Sciara ocellaris (Comstock, 882) due to microsporidian infection. J. Insect Physiol., 13: 795−803.
  36. Т., Hayasaka S. 1987. An Enzyme-linked immunosorbent assay to detect alkali-soluble spores surface antigens of strains of Nosema bombycis (Microspora: Nosematida). J. Invertebr. Pathol., 50: 118−123.
  37. P.J., Doolittle W.F. 1996. Alpha-tubulin from early-diverging eukaryotic lineages and the evolution of the tubulin family. Mol. Biol. Evol., 13 (10): 112- 117.
  38. Keohane E.M., Takvorian P.M., Cali A, Tanowitz H.B., Wittner M., Weiss L.M. 1996 Identification of a microsporidian polar tube protein reactive monoclonal antibody. J. Euk. Microbiol., 43: 26−31
  39. E.M., Weiss L.M. 1999. The structure, function, and composition of the microsporidian polar tube. In: The Microsporidia and Microsporidiosis. American Society for Microbiology, Washington, D.C.: 196−224.
  40. Kim J., Ogawa K. And Wakabayashi H. 1994. Lectin-reactive components of the microsporidian Glugea plecoglossi and their relationship to phagocytosis by head kidney macrophages of Plecoglossus altivelis. Dis. Aquat. Org., 39: 59−63
  41. M., Weiser J., 1985. Different course of proteolytic inhibitory activity and proteolytic activity in Galleria mellonella larvae infected by Nosema algerae and Vairimorpha heterosporum. J. Invertebr. Pathol., 45,41−46.
  42. Kurtti T.J., Ross S.E., Liu Y., Munderloh U.G. 1994. In vitro developmental biology and spore production in Nosema furnacalis (Microspora: Nosematidae).i .hwertehr. Pathol., 63: 188−196.
  43. U.K. 1970. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterophage T4. Nature., 227: 680−685.
  44. R. 1986. Development, ultracytology and classification of microsporidia. In J.O. Corillis and D.J. Patterson (ed) Progress in Protistology. Biopress, Ltd., Bristol, United Kingdom., 1: 325−390.
  45. Larsson J. I. R. 1994. Trichoctosporea pygopellita gen. et sp. nov., a microsporidian parasite of the mosquito Aedes vexans. Arch. Protistenk., 144: 147−161.
  46. Letich G.J., He Q., Wallace S., Visvesvara G. S.1993. Inhibition of spore polar filament extrusion of the microsporidium, Encephalitozoon hellem, isolated from an AIDS patient. J .Euk. Microbiol., 40: 711−717.
  47. Lom J., Corliss O. 1967. Ultrastructure observation on the development of the microspodian protozoon Plistophora hyphessobryconis. J. Protozool., 14: 141 152.
  48. M.J., Cali A. 1993. Ultrastractural study of the development of Vairimorpha necatrix (Kramer, 1965) in larvae of the corn earworm, Heliotis zeae (Boddie) with emphasia on sporogony., J. Euk. Microbiol., 40: 701−710.
  49. C., Basile R. 1966 Chromosome changes induced by infections in58. tissues of Rhynchosciara angelae. Science., 151: 1556−1558.
  50. J., Weidner E. 1985. The microsporidian spore invasion tube. Discharge activation begins with pH triggered Ca influx. J. Cell Biol., 100: 1834−1838/
  51. P.A., Kimball R.F., Pavan C.C., 1967. Response of Rynchosciara chromosomes to microsporidian infection: increased polyteny and generalized puffing. Exp. Cell Res., 47: 408−422.
  52. Sokolova J. J., Dolgikh V.V., Weck-Heimann A., Entzeroth R. 2000. Analysis of antibodies raised against soluble and membrane bound proteins of Nosema grylli (Microspora) spores. Cytologia., 42: 993−1003.
  53. Sprague V, Benchel J.J., Hazard E.I. 1992. Taxonomy of phylum Microsporidia. Crit. Rev. Microbiol., 18: 285−395
  54. V., Vernick S.H. 1969.Light and electron microscope observations on Nosema nelsoni (Microsporidia, Nosematidae) with particular reference to its Golgi complex J. Protozool., 16(2): 264−271
  55. Sthral-Bolsinger S., Immervoll Т., Deutzman R. and Tanner W. 1993. PMT1, the gene for a key enzyme of protein O-glycosylation in Saccharomyces cerevisiae. Biochemistry, 90: 8164−8168
  56. Sthral-Bolsinger S. and Scheinost A. 1999 Transmembrane topology of an evolutionary conserved family of protein o-mannosyltransferases. J. Biol. Chem., 274: 9068−9075
  57. Timpel C., Sthral-Bolsinger S, Ziegelbauer K. 1998. And Ernst. Multiple functions of Pmtl-p- mediated O-mannosylation in the fungal pathogen Candida albicans. J. Biol. Chem., 273: 20 837−20 846
  58. B.S., Marchand B. 1986. Genese des differents organites de la spore uninuclee d’Amblyospora culicis (Protozoa, Microspora). Arach. Protistkend., 132:231−244.
  59. Undeen A.H., Vander Meer R.K., Smith В J., Aveiy S.W. 1984. Effect of gamma-radiation of Nosema algerae (Microsporia: Nosematida) spore viability, germination and carbohydrates. J. Protozool., 31: 479−482.
  60. Undeen A.H., Avery S.W.1988. Effect of anions on the germination of Nosema algerae (Microsporia: Nosematida). J. Invertebr. Pathol. 52: 84−89.
  61. A.H. 1990. A proposed mechanism for the germination of microsporidian spores. J. Theor. Biol., 142: 223−325
  62. A.H., Epsky N.D. 1990. In vitro and in vivo germination of Nosema locustae (Microsporia: Nosematida) spores. J. Invertebr. Pathol., 56: 371−379.
  63. A.H., Frixione E. 1991. Structural alteration of plasma membrane in spores of the microsporidium Nosema algerae on germination., J.Protozool. 38: 511−518
  64. Van de Peer Y., Ben Ali A., Meyer A. 2000. Microsporidia accumulating molecular evidence that a group of amitochondriate and suspectedly primitive eukaryotes are just curious fungi. Gene., 246: 1−8
  65. Xu J., Takvorian P., Cali A. And Louis Weiss. 2003. Lectin binding jf the Major Polar tube protein (PTP1) and its role in invaision. J. Euk. Microbiol., 600−601
  66. J. 1976. Structure of Microsporidia. Comparative Pathobiology, 1: 1109.
  67. J.W., Gochnauer T.A. 1971. Trehalase activity associated with spores of Nosema apis. J. Invertebr. Pathol., 17:.38−41.
  68. J. 1965. Etude au microscopie electronicue de la morphologie et du developpment de quelqeues microsporidies. C.R. Acad. Soc., 261:3467−3470.
  69. Vavra J., Larsson J.I.R. 1999. Structure of the microsporidia. In: The Microsporidia and Microsporidiosis. American Society for Microbiology, Washington, D.C.: 7−84.
  70. D., Porchet E., Vivier E., Vavra J., Torpier G.A. 1991. A freez-fracture study of microsporidia (Protozoa, Microspora). II The extrusion apparatus: filament, polaroplast, posterior vacuole. Eur. J. Protistol., 29: 370−380
  71. C.P., Metenier G. 2000. Towards the minimal eukaryotic parasitic genome. Current Opinion in Microbiology., 3: 463−467.
  72. Vossbrinck C., Maddox J., Friedman S., Debrunner-Vossbrinck B., Woese C. 1987. Ribosomal RNA sequence suggests microsporidia are extremely ancient eukaryotes. Nature., 326: 411−414.
  73. E. 1992. Cytoskeletal proteins expressed by microsporidian parasites. Subcell. Biochem., 18: 385−389.
  74. E., Findley A.M., Dolgikh V., Sokolova J. 1999. Microsporidian iochemistry and physiology. In: The Microsporidia and Microsporidiosis. M. Wittner (ed.). American Society for Microbiology, Washington, D.C.: 172−195.
  75. S., Spiro R.G. 1996. Endoplasmic reticulum kifunensine-resistant alpha-mannosidase is enzymatically and immunologically related to the cytosolic alpha-mannosidase. Arch. Biochem. Biophys. 325:113−123.
  76. L.M. 2001. Microsporidia: emerging pathogenic protists. Acta Trop., 78: 89−102.
  77. C., Inoue S., Funakoshi M., Kawarabata Т., Hayasaka S. 1994A new method for inoculation of poor germinator, Nosema sp. NIS Mil (Microsporida, Nosematida), into an insect cell culture. J. Euk. Microbiol., 42(2): 191−195.
  78. Zhu X., Wittner M., Tanowitz H.B., Cali A., Weiss L.M. 1994. Ribosomal RNA sequences of Enterocytozoon bieneusi, Septata intestinalis and Ameson michaelis: phylogenetic construction and structural correspondence. J. Euk. Microbiol., 41:204−209.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!