Усовершенствование лабораторной диагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота
Развитие промышленного животноводства, требующее создания производственных комплексов, обострило проблему респираторно-кишечной патологии крупного рогатого скота в хозяйствах РФ. Ежегодно по этой причине гибнет до 30% телят в возрасте от одного до шести месяцев (18,27,56,57,139).Наряду с респираторно-кишечными болезнями незаразного происхождения регистрируются заболевания телят и взрослых… Читать ещё >
Содержание
- Список условных обозначений и сокращений
- Общая характеристика работы
- 1. Обзор литературы
- 1. 1. Общая характеристика аденовирусов
- 1. 1. 1. Общая характеристика представителей
- 1. 1. Общая характеристика аденовирусов
- 1. 2. Общие сведения об аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Историческая справка
- 1. 3. Структурная характеристика аденовириона
- 1. 3. 1. Строение вирусного нуклеокапсида
- 1. 4. Физико-химические свойства структурных белков аденовириона
- 1. 4. 1. Основной структурный белок аденовириона — гексон
- 1. 4. 2. Структурные белки аденовириов
- 1. 4. 3. Антигенная структура белков аденовирусов
- 1. 4. 4. Антигенные свойства гексона
- 1. 5. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных
- 1. 6. Использование PJIA в диагностики вирусных заболеваний
- 2. 1. Материалы
- 2. 1. 1. Биологические препараты
- 2. 1. 2. Питательные среды и реактивы
- 2. 2. Методы исследования
- 2. 2. 1. Получение монослойной культуры клеток ТБ
- 2. 2. 2. Получение монослойных культур перевиваемых линий клеток MDBK, ЛЕК, ППЭК
- 2. 2. 3. Получение монослойной перевиваемой культуры клеток почек теленка Taurus 1 (Т — 1)
- 2. 2. 4. Получение монослойных культур перевиваемых линий клеток Taurus 2 (Т- 2), Taurus 4 (Т -4)
- 2. 2. 5. Культивирование аденовируса на перевиваемой линии
- 2. 2. 6. Получение аденовируса Bovine-10 методом суспензионного культивирования в перевираемой линии клеток MDBK
- 2. 2. 7. Клонирование аденовирусов методом бляшек
- 2. 2. 8. Экстракция гексонов аденовирусов
- 2. 2. 9. Гидрофобная хроматография
- 2. 2. 10. Анионообменная хроматография
- 2. 2. 11. Электрофорез в полиакриламидном геле
- 2. 2. 12. Постановка реакции нейтрализации
- 2. 2. 13. Постановка реакции гемагглюпгинации
- 2. 2. 1. 4. Получение гипериммунных сывороток
- 2. 2. 1. 5. Статистическая обработка данных
- 3. 1. Эпизоотологический мониторинг за период 1998—2003 гг. на некоторые вирусы, вызывающие респираторно — кишечную патологию крупного рогатого скота в хозяйствах РФ
- 3. 1. 2. Изучение роли аденовируса крупного рогатого скота в хозяйствах Московской области за период 1998—2003 гг.
- 3. 2. 1. Скрининг клеточных культур, чувствительных к аденовирусам крупного рогатого скота
- 3. 2. 2. Клонирование аденовирусов под агаровым покрытием
- 3. 2. 3. Культивирование аденовируса в культуре клеток
- 3. 2. 4. Культивирование аденовируса первого типа в суспензионной культуре клеток MDBK
- 3. 3. 1. Получение реагентов набора PJIA
- 3. 3. 2. Получение аденовирусных антигенов
- 3. 3. 3. Получение гипериммунных сывороток к гексону аденовируса первого серотипа Bovine
- 3. 3. 4. Получение конъюгатов для постановки PJIA
- 3. 3. 5. Результаты подбора условий проведения PJIA
- 3. 3. 6. Апробация набора реагентов PJIA
Усовершенствование лабораторной диагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность темы
Развитие промышленного животноводства, требующее создания производственных комплексов, обострило проблему респираторно-кишечной патологии крупного рогатого скота в хозяйствах РФ. Ежегодно по этой причине гибнет до 30% телят в возрасте от одного до шести месяцев (18,27,56,57,139).Наряду с респираторно-кишечными болезнями незаразного происхождения регистрируются заболевания телят и взрослых животных вирусной этиологии. Наиболее актуальными являются заболевания с точки зрения эпизоотологии и экономического ущерба являются заболевания, вызываемые следующими вирусами: парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, респираторно-синтициальный. К их числу относятся и аденовирусы. Часто эти заболевания протекают, смешено в различных сочетаниях, а также с участием пастерелл, сальмонелл, диплококков, микоплазм, хламидий и других микроорганизмов.
По данным МЭБ аденовирусную инфекцию (АВИ) более 40 лет регистрируют во многих странах мира (Англии, США, Венгрии, Болгарии, Голландии, Канаде, Австрии и др.). Первые сообщения о неблагополучии хозяйств в отношении данного заболевания в СССР появились в конце 60-х годов (Алиева Н.А., 1967: Гуненков В. В. и др ., 1969). Но до сегодняшнего дня роль аденовирусов в респираторно-кишечной патологии у КРС в нашей стране мало изучена, а вопросы о циркуляции различных серотипов возбудителя изучены недостаточно. Аденовирусную инфекцию диагностируют преимущественно у молодняка крупного рогатого скота, она характеризуются острым течением, поражением органов дыхания пищеварения, конъюнктивитом. У взрослых животных инфекция проходит бессимптомно, и они являются вирусоносителями. Установлено, что аденовирусы являются иммунодепрессантами и способствуют развитию вторичной инфекции. Клинико-эпизоотологическая диагностика АВИ КРС затруднена из-за сходства с другими заболеваниями, поэтому главная роль отводится лабораторной диагностике. Она основана на: -выделении аденовирусов из патологического материала в первичных культурах клеток тестикул бычка (ТБ), почках эмбриона коровы (ПЭК), легких эмбриона коровы (ЛЭК).Однако, методика получения первичных культур клеток трудаёмкая. В связи с этим подбор универсальной перевиваемой культуры клеток является актуальной задачей- - идентификации выделенных изолятов в реакции преципитации (РДП), реакции иммунофлуоресцеции (РИФ), реакции связывания комплемента (РСК), электронной микроскопии. Однако эти методы дают ответ на вопрос лишь о принадлежности выделенных изолятов к той или иной антигенной подгруппе, или к семейству аденовирусов. Создание же системы типовой идентификации, является сегодня перспективным направлением—ретроспективной диагностике, исследование парных сывороток крови в серологических реакциях РНГА, ИФА, РН. Два последних метода из-за их высокой себестоимости практически не используются.
Реакция непрямой гемагглютинации используется для диагностики аденовирусной инфекции в России на протяжении более чем 15 лет. Единственными и существенными недостатками РНГА являются то, что в качестве носителя для антигенов используются эритроциты барана, которые трудно поддаются контролю, и длительность хранения таких препаратов не превышает шести месяцев. Перспективным и актуальным на сегодняшний день является замена биологических носителей на синтетические, полимерные микросферы, которые могут быть охарактеризованы по заряду, химическому строению, диаметру, распределению частиц по размеру и сохраняют стабильные свойства от партии к партии. Они используются для создания латексных диагностикумов. (17,48,55,).
Цель и задачи исследований. Целью исследований явилось изучение распространения аденовирусной инфекции крупного рогатого скота в некоторых регионах России и усовершенствование её лабораторной диагностики.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1 .Изучить распространение аденовирусной инфекции крупного рогатого скота в некоторых регионах России;
2.Провести скрининг культур клеток, чувствительных к аденовирусам двух подгрупп и определить эффективный способ культивирования, для крупномасштабного получения вируссодержащего материала;
3.Повысить инфекционную активность эталонных штаммов аденовирусов крупного рогатого скота, для создания коллекции референс-штаммов;
4.Получить гипериммунные сыворотки к гексону на основе оптимизированной схемы иммунизации животных;
5.Разработать условия проведения реакции латекс — агглютинации на основе полученных реагентовб. Определитъ диагностические возможности и апробировать тест-систему реакции латекс — агглютинации для выявления антител против аденовирусов крупного рогатого скота в пробах сывороток крови, полученных от спонтанно инфицированных и вакцинированных животных;
Научная новизна. Изучено распространение аденовирусной инфекции в некоторых регионах России, в том числе и Московской области за период 1998 -2003 г. Полученная коллекция эталонных штаммов аденовирусов крупного рогатого с высоким инфекционным титром 6,5 — 9,5- ТЦД so/ш, позволяет идентифицировать антитела к аденовирусам в сыворотке крови КРС в РН, РЗГА. Получена коллекция эталонных штаммов аденовирусов крупного рогатого скота (с первого по десятый серотип) с высокими инфекционными титрами.
Разработан крупномасштабный способ получения аденовируса (А. с. № 1 540 070 СССР). Впервые рекомендована единая перевиваемая линия клеток Т-1 для культивирования аденовирусов КРС как I, так и II антигенных подгрупп.
Отработан способ суспензионного культивирования на перевиваемой линии MDBK аденовирусов I подгруппы. Отработан метод постановки реакции нейтрализации для серодиагностики аденовирусной инфекции КРС микрометодом (рационализаторское предложение № 150 от 05.06.89г). Разработан способ получения латексного диагностикума для постановки реакции латекс — агглютинации (патент РФ № 2 004 121 606/15 (23 348) от 15.07.2004г).
Впервые в качестве антигенов в методе PJIA для выявления специфических антител в крови крупного рогатого скота использованы структурный белок аденовируса Bovine — 10. Оптимизирована схема получения гипериммунных сывороток к гексону аденовируса Bovine — 10 на кроликах, для использования в качестве референс-сывороток. Разработана технология производства PJIA-диагностикума для обнаружения антител против аденовирусов КРС.
Практическая значимость. Усовершенствован метод серодиагностики аденовирусной инфекции КРС в РИГА (А.с «Способ получения эритроцитарного антигенного диагностикума» № 1 774 540 от 8 июля 1992 г) .Предложена единая перевиваемая культура клеток Т-1 для выделения и культивирования аденовирусов КРС .
Разработан «Способ постановки реакции нейтрализации для серодиагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота микрометодом» рационализаторское предложение № 150 от 05.06.89 г. Разработан «Способ очистки аденовирусов крупного рогатого скота» рационализаторское предложение № 159 от 18.09.1989 г. Разработан и утверждён в установленном порядке Главным Управлением Ветеринарии 21 января 2004 г. «Набор эритроцитарных диагностикумов для серодиагностики инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3), вирусной диареи (ВД), аденовирусной (АДЕНО), респираторно-синцитиальной (PC) инфекций и хламидиоза крупного рогатого скота в реакции непрямой гемагглютинации (РИГА)», который удостоен золотой медали ВДНХ в 2005 году. Разработано «Временное наставление по применению набора PJIA-диагностикума для серодиагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота». Разработаны «Технические условия набора PJIAдиагностакума для серодиагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота».
Апробация работы. Результаты работы доложены и обсуждены на научно-производственной конференции молодых ученых ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К. И. Скрябина (Москва, 2002), Ш Международной Российско — Иранской конференции «Сельское хозяйство и природные ресурсы"(Москва, 2003), научно-производственной конференции, посвященной 100-летию профессора Н. Г. Кондюрина «Актуальные вопросы микробиологии и инфекционной патологии"(Омск, 2004), научно-производственной международной конференции молодых ученых «Научные основы производства ветеринарных, биологических препаратов» (Щелково, 2004), на межкафедральном совещании профессорско — преподавательского состава ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К. И. Скрябина (Москва, 2006).
Основные положения н результаты, выносимые на защиту:
1. Широта распространения аденовирусной инфекции крупного рогатого скота в некоторых регионах России;
2. Создание коллекции референс — штаммов аденовирусов КРС в высоком инфекционном титре;
3. Скрининг культур клеток, чувствительных к аденовирусам двух подгрупп и способов крупномасштабного получения вируссодержащего материала;
4. Получение гипериммунных сывороток крови к гексону на основе оптимизированной схемы иммунизации животных;
5. Технология разработки РЛА для выявления антител против аденовирусов крупного рогатого скота на основе получения высокоактивных вируссодержащих клеточных суспензий специфических антигенов-гексонов и гипериммунных сывороток.
6. Оптимизации условий проведения PJIA по выявлению антител к аденовирусам крупного рогатого скота.
7. Результаты апробации разработанной тест-системы РЛА в экспериментальных и производственных условиях.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 научных работ, получено 3 авторских свидетельства, 1 патент и 2 рационализаторских предложения.
Объём и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 130 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, описания материалов и методов исследований, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы (158 источников, из которых 76 отечественных и 82 иностранных). Работа содержит 16 таблиц и 16 рисунков, 6 страниц приложений.
5. ВЫВОДЫ.
1. Изучено распространение и установлена этиологическая роль аденовирусов крупного рогатого скота в некоторых регионах России, процент больных животных колебался в пределах от 3,0% до 12,4%. В хозяйствах Московской области от 6,8% до 15%.
2. Проведен скрининг клеточных культур клеток и способов культивирования аденовирусов КРС. Показано, что перевиваемая линия клеток почки теленка Т-1 является единой чувствительной культурой клеток для аденовирусов I и II серологических подгрупп. Установлено, что при крупномасштабном получении аденовирусов методами суспензионного культивирования и в клетках, выращенных на микроносителях, их инфекционная активность достигает 7,5- 9,5 Ig ТЦД50/ мл.
3. Получена коллекция эталонных штаммов аденовирусов с первого по десятый серотип с высоким инфекционным титром 6,5 — 9,5 Lg ТЦД 50 /ш, что позволит идентифицировать антитела против аденовирусов в сыворотках крови КРС в РН, РЗГА.
4. Оптимизирована схема получения гипериммунных сывороток крови на кроликах к гексону аденовируса Bovine-Ю для РЛА тестсистемы с титром антител 11,8 Log 2.
5.Разработаны условия проведения реакции латекс — агглютинации. Впервые в качестве специфических антигенов в тест-системе РЛА по выявлению антител к аденовирусам крупного рогатого скота использованы структурные белки аденовируса — гексоны, которые при иммобилизации на полимерные микросферы образуют ковалентную связь с высокой специфичностью и активностью, что позволяет выявлять антитела к аденовирусам крупного рогатого скота.
6. Разработан метод выявления антител к аденовирусам крупного рогатого скота в сыворотке крови больных, реконвалесцентов и вакцинированных животных. Показана высокая чувствительность и специфичность реагентов РЛА. Диагностическим титром антител при аденовирусной инфекции крупного рогатого скота по результатам исследования сыворотки крови в РЛА следует считать 1: 8 и выше. 7. Установлена диагностическая чувствительность разработанной тестсистемы по отношению к РНГА которая составила 98,9%, специфичность 99,2%. Результаты РЛА и РНГА совпадали в 99,2% случаев, коэффициент корреляции составил 0,9, Р < 0,05.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖИШЬ.
Материалы исследований по разработке технологии РЛА тестсистемы для выявления антител к аденовирусам крупного рогатого скота вошли следующие (нормативные) документы:
— технические условия по изготовлению и контролю набора для серодиагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота методом РЛА. Утвержденные 12 апреля 2006 г, ректором МГАВМ и Б им. К. И. Скрябина.
— Методические указания по серодиагностике аденовирусной инфекции крупного рогатого скота методом РЛА. Утвержденные 12 апреля 2006 г, ректором МГАВМ и Б им. К. И. Скрябина.
— Методические рекомендации по использованию метода гибридизации (с помощью молекулярных зондов) для диагностики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Утверждены ГУВ Госагропрома СССР от 30 марта 1989 г.
— Методические указания по серодиагностике аденовирусной инфекции крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа (ИФА). Утверждены ГУВ Госагропрома СССР 18 мая 1989 г.
— Методические указания по серодиагностике аденовирусной инфекции крупного рогатого скота в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА). Утверждены ГУВ Госагропрома СССР 10 апреля 1989 г.
— ТУ и временные методические указания на набор эритроцитарных диагностикумов для серодиагностики инфекционного ринотрахеита, парагриппа-З, вирусной диареи, аденовирусной, респираторно-синцитиальной инфекций и хламидиоза крупного рогатого скота в реакции непрямой геммаглютинации (РНГА). Утвержденные ГУВ МСХ РФ 21.01.2004 г.
Я благодарю сотрудников кафедры и лаборатории ветеринарной вирусологии МГАВМиБ им. К. И. Скрябина профессора Р. В. Белоусова, доцента кафедры И. В. Третьякову, а также сотрудников лаборатории генной инженерии вирусов ВНИИСБ РАСХН ведущих научных сотрудников С. Н. Хилько и Л. В. Верховскую, профессора кафедры «Высокомолекулярных соединений Московской Государственной Академии Тонкой Химической Технологии» им. М. В. Ломоносова Грицкову И. А., сотрудников ФГУ ЦНМВЛ Хромову Э. С., Калмыкова М. В., Виткову О. Н., Михайлову В. В., за оказанную помощь ценные консультации.
Список литературы
- Алиева Н.А. Выделение аденовирусов коров при пневмонии телят.// Н. А. Алиева, М. К. Ганиев, Р. С. Дрейзин / Известия Акад. наук Азерб. ССР, Баку. 1967. — т. 2. N1. С.108−112.
- Белоусова Р.В. Аденовирусная инфекция крупного рогатого скота./ Р. В. Белоусова. // Ветеринария. 1986. — N 4. — С. 42−46.
- Белоусова Р.В. Лабораторная диагностика и специфическая профилактика аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Р. В. Белоусова. // Автореферат дис. док. вет.наук. Москва. — 1989.
- Белоусова Р.В. Культивирование аденовируса первого типа в суспензионной культуре клеток. // Р. В. Белоусова, Т. П Лобова, Т. И. Пономарева /Сбор. науч. трудов MB, А им. К. И. Скрябина. 1989. — С. 169−171.
- Белоусова. Р.В. Иммуноферментный метод диагностики аденовирусной инфекции КРС.// Р. В. Белоусова, И. В. Третьякова / Достижения науки и техники //. Ж. 1990. -N 1. — С. 25−27.
- А.с. № 1 540 070 СССР, от 1 октября 1989 г. Способ выращивания вирусов -возбудителей респираторных и кишечных заболеваний крупного рогатого скота // Р. В. Белоусова, В. Н. Сюрин, М. А. Завальный, В. Н. Муравьёв, И. В. Третьякова, Т. М. Бабурина (СССР). 3 е., ил. 1.
- Белоусова Р. В. Аденовирусная инфекция крупного рогатого скота. // Р. З. Нургазиев, B.C. Фролов, В. И. Корольков /Ветеринария, — 1989.-№ 1.-С. 29−30.
- Белоусова Р. В. Аденовирусная инфекция крупного рогатого скота в эксперименте .// Р.В.Белоусова/Ветеринария.- 1982.-№ 4.- С. 45 -46.
- Белоусова Р.В. Профилактика аденовирусной инфекции крупного рогатого скота.//Р.В. Белоусова. /Информ. листок № 413−88.- Москов. Обл. террит. ценр. науч.- тех. информации и пропаганды.- 1988.
- Бейлли Н. Статистические методы в вирусологии.// Н. Бейлли // М: Медицина. Ж- 1962.-С. 29−31.
- Брок И. Приготовление препаратов иммуноглобулинов.// И. Брок/ Иммуносорбенты. В кн.: Иммунологические методы. Г. Фримеля. М: Медицина .-1987.-С. 330−438.
- Григорьев В.Т. Структурный и иммунологический анализ продуктов протеолиза гексонов аденовирусов приматов.// В. Т. Григорьев, С. Н. Хилько, Т. И. Тихоненко / Молекулярная биология. 1985. — Т.19. — вып.6. — С. 1526−1536.
- Григорьев В.Т. Условия стабильности четвертичной структуры и антигенной активности гексона аденовируса.// В. Г. Григорьев, С. Н. Хилько, Т. П. Тихоненко и др /Биохимия.- 1985. т. 50. — вып. 2 — С. 258−263.
- И.А Грицкова И. А. Адсорбция белков на полистирольных микросферах и постановка реакции латекс -агглютинации.// И. А Грицкова, Нусс П. В., Дорохова Е. А, Гусев С. А, Крашенинникова И. Г., Аль- Хаварин Д. И / Коллоидный журн.-1994, Т.56.И2.4.- С.491−495.
- Гуненков. В.В. Основные направления изучения вирусных пневмоэшеритов.// В. В. Гуненков, Р. В. Белоусова, В. Н. Сюрин /Ветеринария.- 1982.- N 4.- С. 65−66.
- Дяченко Н.С. Аденовирус, клетка, организм.// Н. С. Дяченко, Л. Н. Носач, Д. Беренчи /Киев: Наук, думка. 1988. — С.23
- Дьяконов Л.П. Культивирование клеток и тканей животных .// Л. П. Дьяконов В.Ф. Глухов., А. А. Поздняков., Г. Ф. Денисенко., Т. П. Калмыкова. / Уч- пособие. Ставрополь .-1986 г. с.56−59., 61 -63.
- Дяченко Н.С. Новые подходы к совершенствованию диагностики аденовирусной инфекции.// Н. С. Дяченко, Н. П. Ванцак, Л. А. Тарасишин и др. /- Тез. Докл. XI Укр. респ. съезда микробиол., «Эпидимиология. и паразитология. Киев, 1985. — С.59.60.
- Дяченко Н.С. Пути использования гексона аденовирусов в диагностической практике.// Н. С. Дяченко, JI.H. Носач, Н. П. Ванцак и др/ Вопр. вирусол. И гигиены- в Лит. ССР, — 1979. -С. 194−195.
- Исакова В.Р. Получение и характеристика иммунологической специфичности моноклональных антител против структурных белков аденовирусов. //В.Р. Исакова / Автореферат дис. канд. биол. наук. 1991. — C. IO-14.
- Кирасова М.А. Иммуноэлектрофоретический анализ в системах антител против гексонов аденовирусов крупного рогатого скота Ад bos3 и Ад bos7 // М. А. Кирасова, С. Н. Хилько, О. В. Карпова, Р. В. Белоусова, В. Н. Сюрин /Докл. ВАСХНИЛ.- 1987.-№ 4.-С.34−37.
- Коленкова Л.М. Изучение некоторых биологических свойств аденовирусов крупного рогатого скота.// Л. М. Коленкова, О. Б. Литвинов, Р. В. Белоусова /Проблемы биологии и патологии сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. Моск.Веет.акад., 1987.-С.103−106.
- Коленкова Л.М. Патогенность полевых изолятов аденовирусов телят. // Л.М.
- Коленкова, Р. В. Белоусова, И. А. Бурцева, В. Н. Сюрин /Проблемы ветеринарной биологии: Сб.науч. тр. Моск. Вет. акад., 1984.- С.23−28.
- Кис В. И. Серопрофилактика вирусных пневмоэнтеритов телят в промышленных хозяйствах.// В. И. Кис /Автореферат Дис.кан.вет.наук. 1980. — С. 16.
- Ковалишин Г. Г. Сравнительное изучение гексонов некоторых аденовирусов рода Mastadenovirus.// Г. Г. Ковалишин, С. Н. Хилько, Б. С. Народицкий / Микробиология журнал. 1986. — т. 48. — N 2. — С. 50−55.
- Кругляк В.А. Клонирование фрагментов ДНК аденовирусов крупного рогатого скота ВАУЗ в плазмиде рИС 19 // В. А. Кругляк, Р. В. Белоусова, Т. И. Понаморёва, Б. С. Народицкий, В. Н. Сюрин, Т. И. Тихоненко / Сб. научных трудов. ВАСХНИЛ.-№ 11.- С. 41−43.
- Литвинов О.Б. Антигенные и иммуногенные свойства инактивированной аденовирусной вакцины // О. БЛитвинов, Р. В. Белоусова, В. Н. Сюрин, Л. М. Коленкова, И. А Бурцева /Проблемы ветеринарной иммунологии: Тр. ВИЭВ.-1983.-Т. 57.-С. 116−119.
- Миронова Л.Л. Акт внедрения Т-1 на Покровском биозаводе, от 12.06.1989. Л. Л. Миронова, Р. В. Белоусова, Т. П. Лобова и др.
- Мубарак И. Лабораторная диагностика заболеваний телят, вызываемых аденовирусами.// К. К. Вертинская, В. В Гуненков /Ветеринария. 1972. — N.5. — С.106.108.
- Мелик-Андреасян Г. Г. Иммунологические методы в диагностике вирусного гепатита. // Г. Г. Мелик-Андреасян, И. Ф. Баринский, А. Е. Ясин и др. / В кн: Вопросы эпидемиологической иммунологии. М., 1980, с. 81−84.
- Михайлова. Э.Г. Исследование антигенной специфичности белков аденовирусов крупного рогатого скота реакцией пассивной гемагглютинации.// Э. Г. Михайлова. Р. В. Белоусова, Е.К. Киселёва/Микробиол. журнал.- Киев, 1988.- С. 90−91.
- Э.Г. Михайлова. Сравнение специфичности и чувствительности реакции пассивной гемаггтотинации и других методов индикации антител к аденовирусам. // Э. Г. Михайлова, Н. С. Дяченко, Л. А Тарасишин /- Микробиол. ж. 1986. — т.48. — N 6. — С. 80−82.
- Ницмане А.К. Проблемы энзоотических болезней в индустриальном животноводстве. Профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных .// А. К. Ницмане, А. Д. Жильинский, Бригманес А. Ю. Бригманес/ 1979. -вып. 177.-С. 68−72.
- Носач. Л.Н. Изучение антигенного родства аденовирусов человека и крупного рогатого скота методом флуоресцирующих антител // Л. Н. Носач, Л. М. Коленкова /Микробиол.Журнал.- Киев, 1985.- С.67−70.
- Носач Л.Н. Иммуннофлуоресцентное изучение специфичности детерминант гексона в инфицированных аденовирусами клетках.// Л. Н. Носач / Микробиол. журнал, 1982. — т. 44. — С. 65−70.
- Носач Л.Н. Цитопатология аденовирусной инфекции.// Л. Н. Носач, Н.С.
- Дяченко ./Киев: Наук, думка. 1982. — С. 124.
- Носач JI.H. Характеристика внутриядерных вкточений, образующихся при репродукции аденовирусов крупного рогатого скота.// JI.H. Носач, Р. Б. Белоусова, Н. С. Дяченко и др. /Цитология и генетика. 1986. — т. 20. -N. 1. — С. 51−54.
- Остерман JI.A. Хроматография белков и нуклеиновых кислот.// JI.A. Остерман./ М: Наука, — 1985.115.
- Простяков А.П. Иммунологические методы исследования с сельском хозяйстве.// А. П. Простяков. / Журнал Всесоюзного химического общества. 1982. — т. 2. — N.4. -С. 103−107.
- Резников Ю.П. Латексный тест в диагностике внутриутробной инфекции .//Ю.П. Резников /Серна Ф.Р. Ж. Лабор. Дело, 1974, № 11,с. 682- 684.
- Тарасишин Л.А. Иммунохимический анализ гексона аденовируса крупного рогатого скота типа 3 .// Л. А. Тарасишин, С. Н. Хилько, Р. В. Белоусова /Сб. науч. тр. ин-та молекулярной биологии и генетики АН УССР.- Киев, 1986, — С. 90−91.
- Сюрин В. Н. Вирусные болезни животных .//В.Н.Сюрин, Белоусова Р. В. /Учебник М, Высш. Школа. 1995 г.
- Сюрин В.Н. «Вирусные болезни животных».// АЯ. Самойленко, В. Б. Соловьев и др. / Москва, ВНИТИБП, 1998.
- Сюрин В. Н. Методы лабораторной диагностики вирусных болезнейживотных.// Р. В Белоусова, Н. В. Фомина / М.: Наука. 1986. — С. 212−220.
- Сюрин В.Н. Достижения биотехнологии в диагностике и профилактике вирусных болезней животных.// В. П. Карелин, И. В. Непоклонова / Вестник с./х. науки. 1984. — N 3 (330) — С. 106−114.116
- Тарасишин JI.A. Метод радиоиммунологического анализа и его применение в вирусологии. //Л.А. Тарасишин. / Вопросы вирусологии. 1980. — т. 25. — N 1. — с.5−10.
- Тарасишин Л.А. Радиоиммунологический анализ гексона аденовируса обезьян SA7.//Л.А. Тарасишин Дяченко Н. С., Ванцак Н. П. /Вопр. вирусологии. 1980. — Т.2. С. 192−197.
- Третьякова И.В. Иммуноферментный анализ, как метод серодиагностики аденовирусной инфекции КРС.// И. В. Третьякова, Р. В. Белоусова, Л. В. Верховская / Сб.матер. межд. конфер.: Казань. 2000. — С. 135−137.
- Третьякова И.В. Использование ИФА для серодиагностики аденовирусной инфекции КРС.// И. В. Третьякова, Р. В. Белоусова, Т. П. Лобова / Ветеринария. -1989.-N28.-С.28−32.
- Тарасишин Л.А. Иммунохимический анализ гексона аденовируса крупного рогатого скота типа 3 .// Л. А. Тарасишин, С. Н. Хилько, Р. В. Белоусова /Сб. науч. тр. ин-та молекулярной биологии и генетики АН УССР.- Киев, 1986.- С. 90−91.
- Тарасишин Л.А. Антигенные детерминанты гексона аденовируса крупного рогатого скота // Л. А. Тарасишин, С. Н. Хилько, Н. С. Дяченко, О. В. Карпова, Р.В. Белоусова//Вопросы вирусологии.-1986.-№ 5.- С. 620−623.
- Третьякова И.В. Получение гипериммунных сывороток к некоторым гексонам аденовирусов крупного рогатого скота.// И. В. Третьякова, Р. В. Белоусова, Р. З. Нургазиев и др/ Достижения науки и техники АПК. 1989. — N 1. — С. 45−47.
- Фомина Н.В. Аденовирусная инфекция животных// Н. В. Фомина /Москва: Колос. 1995.
- Фролов B.C. Динамика антител у коров и телят, вакцинируемых противаденовирусной инфекции.// B.C. Фролов Белоусова Р. В. /Ветеринария, — 1985. -№ 5.-С. 38−42.
- Хилько С.Н. Гексон аденовирусов: Структура., изменчивость и антигенные детерминанты.// С. Н. Хилько, В. Г. Григорьев, О. В. Чайка и др. /Мол.ген., микроб. И вир.- 1984.-N1.-С. 15−19.
- Хилъко С.Н. Иммуноферментный анализ гексонов аденовирусов. Определение антител от 117 гипериммунизированных кур.// С. Н. Хилъко, М. А Кирасова, Е. Г. Пиккер, С. Д. Осидзе / Мол. генетика, микроб, и вир. 1989. — N 9. С. 43−48.
- Хилько С.Н. Способ получения аденовирусных антигенов.// С. Н. Хилъко, Т. И. Пономарева, В. Г. Григорьев /Авторское свидетельство N 1 364 342. 1986.
- Хилько С. Н Антигенные детерминанты гексона аденовируса крупного рогатого скота типа 3. // С. Н. Хилько, Н. Г. Дяченко, О. В. Карпова, Р. В. Белоусова / Вопр. вирусологии. 1986. — т. 31. — N 5. — С. 620−623.
- Хилько С.Н. Специфичность и выраженность отдельных антигенных детерминант в гексонах аденовирусов.// С. Н. Хилько, Е. К. Киселева, М. А. Кирасова / Вирусы и вирусные заболевания. Киев: Наукова думка, — 1988. — в. 16. — с. 49−60.
- Чайка Н.А. Реакция агглютинации латекса.// Н.А. Чайка/ В кн. Серологическая диагностика бактериальных инфекций. М., 1976, с. 42−43.
- Юминова Н.В. Иммунологические реакции и их значение в оценке качествапротивовирусных вакцин. // Н. В. Юминова, С. С Цианова/. Профилактика, вирусных инфекций в свете современных достиж. иммунол./ М: 1986. — С. 45−46.
- Ясин. А. Е. Сравнительная оценка некоторых серологических методов диагностики вирусного гепатита А.// А. Е. Ясин, И. Ф. Баринский, И. П. Павлова и др./ Вопр. вирусол. 1981,№ с. 120- 122.
- Adam Е. Delineation of antigenic determinants of. adenovirus hexson by monoclonal antibodies.// E. Adam, J. Erdei, Lengyel A. Lengyel / Intervirology. 1985. — v. 28. — n 4. — p. 222−227.
- Adam .E.Az adenovirus hexon antigens zerkezetenek virsgalata monoclonal is antitestekel. //E. Adam / Kiserl. Orvosnud. 1985. У. 37. — N1. — p. 27−35.
- Adam. E. Determination of different antigenic sites on the adenovirus hexon using monoclonal antibodies.// E. Adam, I. Nasz, A. Lengyel /Arch. Virol. 1987. v. 93. — n. 3−4.-p. 261−272.
- Adam E. Detection of adenovirus hexon using monoclonal antibodies for antigen capture in ELISA.//1. Nasz, Lengyel A. / Acta microbiol. Hung. 1986. У. 33. — p. 317 324.
- Adrian T. Immunological and biochemical characterisation of human adenoviruses of subgenus B. DNA restriction analysis. // T. Adrian R. Wigand, J. Hierholzer /Ibit. 1985. -У. 84.-n. l.-p. 79−89.
- Aymard M. Determination of antineuraminidase antibody titres in human sera by inhibition of the agglutination of fetuin-latex by influenza viruses.// M. Aymard, G. Quash, J. Million // J. Biol. Stand., 1982, V. 10, N 2, p. 125−133.
- Aldasy. P. Pneumoenteritic in calves caused by adenovirusus.// P. Aldasy. A. Bartha /Acta. Vet. Hung. 1965. — v.15. — p. 167−175.
- A1-Kyjaj M. Latex agglutination- test and HAA.//M. Al-Kyjaj, H. Schonthal /Brit. Med. J., 1972, V. 3, N 5829, p. 769.
- Baber. D. Isolation of bovine adenoviruses types 3, 4 and 8 free-living afiiean buffa lOes (syncerus caffer).//D.Baber. /Res. Vet. Sci. 1981. — У. 31. — p.69−76.
- Bartha. A. Proposal for subg rouping of bovine adenoviruses. //A. Bartha. / Aeta. Vet. Aead. Sci. Hung./ 1969. — У. 19 (3) — p. 319−321.
- Bartha.A. Isolation of adenovirus strains ealves with virus diarrhoea. // A. Bartha. P. Aldasy /Aet. Vet. Aead. Sei. Hung. 1964. — У. 3. — p. 239−245.
- Bartha.A. Further two serotypes of bovine adenoviruses (serotype 4 and 5). A. Bartha .P. Aldasy // Aeta. Vet. Acad./ -1966. У. 16. — p. 107−108.
- Bartha.A New serotype 8 of bovine adenoviruses.// A. Bartha, S. Mathe, P. Aldasy /'Aeta. Vet. Acad. Sei. Hung. 1970. — У. 20. — p. 399−400.
- Bonacker. L Latex agglutination, a rapid screening method for detection of hepatilis-associated antiden.// L. Bonacker. J. Staerk / in: Progress inimmunological standardization, Basel e. A., 1972, vol. 5, p. 70−74.
- Boudin M. Izolation and characterization of adenovirus type 2 (penton base).// M. Boudin. M. D. Moncany / Birology. 1979. — У. 92. -. p. 125- 138.
- R.M. Burnett. R.M. Progress in under stading adenovirus architecture.// R.M. Burnett. M. Roqerts./ Biophys. J.- 1986. У. 49. — П.1. — p. 22−24.
- Brade. H. Bildung and Persistenz latexagglutination-shemmender Antikyrper in RhesusafFen nach Infektionmit coxsackievirus Тур B4.// H. Brade, M. Klein, W. Schmidt /- z. Immunforsch., 1976, bd 151, N 5, S. 461−465.
- Comeck G. Caracterization of adenovirus type 5 hexon.// G. Comeck, P. Sigler, H. Ginsberg /Mol. Biol. 1971 — У. 57. — p. 397−401.
- Carvajal. C. Analysis and comparison of two methods to delect hepatitis В antigen.// C. Carvajal, J. DiBella, J. Stincer/ M. Amer. J. Clin. Path., 1976, v. 65, N 4, p. 547−549.
- Castellano. G. Evaluation of commercially available diagnostic test for rubella.//
- G.Castellano, D Madden, G. Hazzard/. -J. Dis., 1981, V. 143, N 4, p. 578−584.
- Docrfler. W. Adenovirus DNA the. niral genome and its expression.// W. Docrfler. /1986. USA.-p. 485.12U
- Dorsett. P. Characterization of type 5 adenovirus fiber protein.// P. Dorsett, H. Ginsberg /J. Virol. 1975. — У. 15. — p. 208−210.
- Elazhary. M. The cultivation of bovine adenovirus type 8 in culture of suspended MDBK cells.// M. Elazhary, J Derbyshire / Vet. Microbiol. 1978. — У. 2. — n. 4. — p. 283 -288.
- Engler J. The nucleotide sequence of the polypeptide IX gene of hunian adenovirus types 3.// J. Engler / Gene. 1981. — У. 13. — p. 387−392.101a. Fenan J. Avian adenoviruses a review. J. Fenan, B. Adair // Avian Pathol. — 1977. -У. 6.-p. 189−217.
- Fliut. S. Adenovirus cytopathology. //S. Fliut / Cor. Virol. Vol. 19. New York, London 1984. — p. 297−358.
- Fayram. S. Fluorescence immunoassay and passive latex agglutination as alternatives to hemagglutination inhibition for detectingrubellaimmune status.// S. Fayram. /Nakasone A., Aarnaes S. et al. J. Clin. Microbiol., 1983, v. 17, N 4, p. 685−688.
- Freeman. S. Evalution of a latex agglution test for detection of antibies to rubella virus in selected sera .// S. Freeman, L. Clark, N. Dumas / J. Clin. Microdiol. 1983, v. 18, N 1, p. 197−198.
- Ни S. Sequence homology between bovine and human adenoviruses.// S. Ни, W.
- Hays, Potts D. / J.Virol. 1984. — У. 49. — n. 2. — p. 604- 608.
- Hopkins. R. Latex agglunation test for detection of Australia antigen among blood donors and patients. R. Hopkins. // J. Clin. Patryl., 1974, v. 27, N 1, p. 40−44.
- Ishibashi. M. The polypeptides of adenovirus v. 1. The early and late glycopeptides of adenovirus. M. Ishibashi. // Virology. 1974. — v. 58. — p. 345−361.
- Ishibashi M. Adenoviruses of animals.// M. Ishibashi, H. Yasue / Adenoviruses. NewYork, London. 1984. — p. 497−521, 550−562.
- Kawaguchi. H. Fundamental study on latex reagents for agglutination tests.//H. Kawaguchi, J. Sakamoto, У. Ohtsua, T. Ohtake, H. Sekiguchi, H. Iri /Biomaterialsl989, v. l 0, N4, p.225−229.
- Kjellen. H. Role of adenovirus antigens in the induction of virus neutralizing > antibodies. H. Kjellen, H. Pereira // J. Gen. Virol. 1968. — v. 2. — p. 177−185.
- Limet. J.N. Parti’Cle counting immunoassay (P ASIA) of ferritin.// J.N. Limet, С D. Collet-Cassart, C. G Magnusson, P. Saugave, C.K. Cambioaso, P.L. Masson / J.Clin.Chem.Clin. Biochem., 1982, v. 20, N3, p. 141−146.
- Lowke. G. Detection of hepatitis В surface antigen by latex agglu tination.// G. Lowke. / Пат. США, GOln 31/02, № 3 992 517, заяшт, 19.02.75, опубл. 16.11.76.
- Nasz. J. The composed antigenic structure of the adenovirus hexon protein.// J. Nasz /Rev. Roum. Med. Virol./ 1988. — У. 39. — n. 4. — p. 267−280.
- Nermut. M. The architecture of adenoviruses. //M. Nermut. / Arch. Virol. 1980. — У. 64. — p. 175−196.
- Obi. O. Serological survey of adenovirus antibodies in domestic animals in Nigeria.// O. Obi. /Taylor W. Com. Immun. Microbiol. Infect. Dis. 1984. — У. 7. — p. 63 -68
- Pereiro. H. Crystalization of adenovirus protein.// H. Pereiro, R. Valentine, Russell W. Russell./Nature.- 1968. 219. — p. 946−941.
- Oreskes. J. The mechanism of particulate carrier reactions. I. Adsorption of human-gamma-globulin to polystyrene latex particles.// J. Oreskes, J. Singer / J. Immunol., 1961, v. 86, N3, p. 338−343.
- Parikh G. Detection and titration of viruses and antibodies using latex.// G. Parikh /Пат. США, mi. GOln 31/00, № 3 826 613, заявл. 6.03.73, опубл. 30.07.74.
- Parikh. G. Latex bead resetting method for cell surface antigens.// G. Parikh. T. Higgins / J. Immunol. Meth., 1982, v. 53, N 3, p. 367−372.
- Polesky. H. Comparison of viral hepatilis marker test methods basedon AABB-Cap survey data.// H. Polesky, S Hanson / Amer. J. Clin. Path., 1981, v. 76, N 4, p. 521−524.
- Prokopov N. Synthesis of monodisperse functional polymeric microspheres forimmunodiagnostic research.// N. Prokopov /Successes of chemistry Journal v.65 (2), 1996, p.178−192.
- Polymeric Dispersions: Principles and Applications (NATO Asi Series. Series E, Applied Sciences, Vol 335.)// Ed. by J.M. Asua /-N.-Y.: Kluwer Academic P.1997,p.349.
- Polymer Latexes: Preparation, Characterization, and Applications (ACS Symposium, No 492) // Ed. by E.S. Daniels, E.D., Sudol, M.S. El-Aasser /- .-N.- У.: Kluwer Academic P.-1998, p.437.
- Philip J. The isolation of bovine adenovirus serotypes 4 and 7 in Britain.// J. Philip / Res. Vet. Sci.- 1972. У. 13. — p. 386−387.
- Quash. G. The preparation of latex particles with covalently bound polyamines, IgG and measles agglutinins and their use in visual agglutition test. .// G. Quash, A. Roch, A. Niveleau./ J. Immunol. Meth., 1978, v. 22, N ½, p 165−174.
- Querfurth. G. Protein A coated latex-linked antisera new reagents for test permitting the use of antisera unsuitable for the latex test.// G. Querfurth, H. Paul / Phytopathol. Z., 1979, Bd 94, N 30, S. 282−285.
- Torrance. L. Use of protein A to improve sensitization of latex particles with antibodies to plant viruses.// L. Torrance. /Ann. Appl. Biol., 1980, v. 96 N 1 p. 45 50.
- Thomas. N.E. Measurement of antigen concentration by an ultrasoundenhanced latex immunoagglutination assay.//N.E. Thomas. / Ultrasound Med. Biol, 1996, У. 22, N 9, p.1277−1284.
- Ginsberg H. Adenovirus structural proteins.// H. Ginsberg / in Comprehensive Virology./1979. Plenum Press, New York, — У. 13. — p. 409−475.
- Ginsberg. H. A proposed terminology or the adenovirus antigens and virion morphological.// H. Ginsberg, H. Pereira, R. Valentine /Virology. 1966. — У. 28. — p. 782−783.
- Rosen. L Iemagglytination of adenoviruses.// L. Rosen / Virology. 1985. — У. 5. -p. 574−577.
- Remington. J. Ddetection of immunoglobulin M antibodies with antigen-tagged latex particles in an immunosorbent assay.// J. Remington, W. Eimstad, F. Araujo, J.Clin./ Microbiol., 1983, v. 17, N 5, p. 939−931.
- Sizov. J. Adenovirus infection .in cattle in Bulgaria.// J. Sizov/ Vet. Med. Nauk. -1982.-У. 19.-p.22−27.
- Sizov. J. Role of bovine adenovirus in diseases. // J. Sizov / Vet. Med. Nauk. 1981. -У. 18.-p. 3−7.
- Sanekata. T. Detection of rotavirus in faeces by latex agglutination.// T.
- Sanekata. Y. Yoshida, H. Okada / -J. Immunol. Meth. 1981. v. 41. N 3. p. 377−385.
- Schmidt. W. Ein Latex-Agglutinationtest zur Tpenbestimmung von Enteroviren.// ^ W. Schmidt, M. Klein / Arch. Ges. Vrusforsch., 1973, Bd 43, N 3, p. 213−220.
- Schmidt. W. A new method ror the determination of virus specific IgG and IgM antibodies.// W. Schmidt, M. A .Klein /-Arch. Ivrol., 1980, v. 66, N 1, p. 67−70.
- Schmidt. W. Persistenz latexagglutinationshemmender und neutralisierender Antikorper gegen Enteroviren in der gesunden Bevolkrung. // W. Schidt, H. Brade, M. Klein, U. Kramer/-Dtsch. med Wschr., 1975, Bd 100, N 33, p. 1663−1666.
- Schmidt. W. Del Latex-IgM-Test in derVirusdiagnostikrBestimmung von Zytomegalie-Antikorpern.//W. Schidt /-Zbl. Bakt., I. Abt. Orig. A, 1981, Bd 250, N½, p. 25−33.
- Thomas. N.E. Measurement of antigen concentration by an ultrasoundenhanced latex immunoagglutination assay.// N.E. Thomas. / Ultrasound Med. Biol., 1996, У. 22, N 9, p.1277−1284.
- Valee. P. Antigens and structure ofthe adenovirus.// P. Valee, H. Pereira / J. Mol. Biol. 1965. — У. 13.-p. 13−20.
- Vizantiadis. A. Detection of Australia antigen by immunoradiometric assay and other methods.//. A. Vizantiadis, B. Danilidis, J. Liatsis, D. Valtis /- In: Radioimmunoassay and related procedures in medicine. Vienna, 1974, vol. 2, p. 389−398.
- Weissfeld. A. New latex agglutination test for rapid determination of rubells immune status.// A. Weissfeld, A. Sonnenwirth/ J Clin. Microbiol., 1982, v.16 N5 p. 971 — 972.
- Wild. T. The use of measles latex reagent for the determination of measles antibodies and specific test for multiple sclerosis.// T. Wild, G. Quash, R. Waroc/ Med. Microbiol. Immunol., 1978. v. 166, N. 1, p. 219 — 226.
- Wigand. R. Classification and epidimiology of adenoviruses Adenovirus DNA.// R. Wigand, T. Adrain/Fd. W. Deerfler. Boston. I. Vijnoff. Publ. 1986. — p. 409−441.
- Wilcox. W. Production of specific neutralizing antibody with soluble antigens of type 5 adenovirus.// W. Wilcox, H. Ginsberg / Proc. Soc. Ep. Biol. Med. 1963. — У. 114. — p. 19−24.
- Wilcox. W. Antigenic determinants of adenovirus capsid. 1. Measurement ofantibody cross reactivity. // W. Wilcox, V. Mautner /J. Immunol. — 1970. — У. 116. — p. 19−24.
- Yuonnet. A. Detection latex agglutination test virus HBs .// A. Yuonnet, J. Perrin, F. Barin / Ann. Microbiol., 1982, v. 133 A, N 3 .p. 503 — 504.
- Zalan. E. Eliminftion of non specific refction in latex agglutination test for the detection of hepatitis assopciated antigen.// E. Zalan, C. Wilson, N. LabrofTsky / - Arch. Ges Virusiforsch., 1973, v. 40 .p. 171 — 173.