Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Выделение и характеристика новых сериновых протеиназ растений

Диссертация: Выделение и характеристика новых сериновых протеиназ растений
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Важной для фундаментальных и практических областей знаний задачей, стоящей перед исследователями, является изучение протеолитических ферментов, участвующих в онтогенезе и других процессах жизнедеятельности растений. Установлено увеличение протеолитической активности в периоды прорастания семян, старения листьев и формирования репродуктивных органов, а также при солнечных и химических ожогах… Читать ещё >

Содержание

  • Список сокращений

1. Современные представления о сериновых протеиназах растений (литературный обзор).

1.1. Сериновые протеиназы.

1.1.1. Общие сведения о сериновых протеиназах.

1.1.2. Механизм катализа сериновых протеиназ.

1.2. Сериновые протеиназы растений.

1.2.2. Химотрипсины и АТФ-регулируемые сериновые протеиназы растений.

1.2.3. Трипсины растений.

1.2.4. Субтилизины растений.

1.2.5. Неклассифицированные сериновые протеиназы растений.

Выделение и характеристика новых сериновых протеиназ растений (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Протеолиз — ферментативный гидролиз амидных связей в белках и пептидах — один из универсальнейших и важнейших химических процессов живой природы. Нет такого организма, где этот процесс не происходил бы с той или иной степенью интенсивности [1].

Важной для фундаментальных и практических областей знаний задачей, стоящей перед исследователями, является изучение протеолитических ферментов, участвующих в онтогенезе и других процессах жизнедеятельности растений. Установлено увеличение протеолитической активности в периоды прорастания семян, старения листьев и формирования репродуктивных органов, а также при солнечных и химических ожогах растений, повреждении микроорганизмами и насекомыми [2].

Наиболее изучены сегодня цистеиновые протеиназы некоторых тропических растений, которые в значительном количестве содержатся в латексе папайи, фикуса, соке ананаса. Ряд этих ферментов используется в медицине и промышленности [3]. Кроме того, из растений выделены аспартильные, сериновые и металлопротеиназы.

Сериновые протеиназы семейства субтилизина впервые были выделены и охарактеризованы из прокариот, а именно бацилл. В последние 10 лет эти ферменты были обнаружены у растений, животных и человека. Субтилизины растений и животных значительно отличаются от ферментов бацилл, но имеют сходство в строении активных центров. Это слабо изученная и разнородная группа ферментов.

Коллагенолитические протеиназы растений также практически не изучены и не классифицированы. В связи с этим субтилизиноподобные ферменты растений, гидролизующие коллаген, представляют несомненный научный и практический интерес.

Одуванчик лекарственный — Taraxacum officinale Webb. s. I относится к растениям семейства сложноцветные Compositae. Корни одуванчика богаты латексом, содержат инулин, сахара с/-фруктозу, J-манит, витамины А, В, С, Д, холин, жирные масла, дубильные вещества, белки, смолы, слизи, органические кислоты и минеральные соли. Кроме того, в латексе корней одуванчика обнаружены: тараксацин, тараксецерин, инозит, воск, а также, ферменты [4].

Подорожник большой — Plantago major I. растение семейства подорожниковые Plantaginaceae. В состав сока листьев подорожника входят слизи, полисахариды, горькие и дубильные вещества, а также гликозид аукубин (ринантин) [5].

Одуванчик лекарственный и подорожник большой растения, широко используемые во многих областях официальной и традиционной медицины. В частности препараты, полученные из этих растений, используются для лечения таких заболеваний как стенокардия, коронарная недостаточность, заболевания желудочно-кишечного тракта и печени, а также для лечения ран и воспалений [6]. Однако более широкое применение экстрактов этих растений в современной медицине сдерживается отсутствием сведений об их качественном и количественном составе.

Анализ известных литературных источников показал, что протеиназы обнаруживаются в большинстве вегетативных (побегах, корнях) и генеративных (цветках, плодах, семенах) органов растений, часто протеиназами богаты латексы растений. В результате предварительных опытов, проведенных в лаборатории химии белка кафедры химии природных соединений химического факультета МГУ им. М. В. Ломоносова было установлено, что в латексе одуванчика содержится протеиназа, гидролизующая Gip-AJa-Aia-Leu-pNA — синтетический субстрат субтилизиноподобных сериновых протеин аз.

Настоящая работа посвящена изучению субтилизинов лекарственных растений: тараксализина из латекса корней одуванчика лекарственного Taraxacum officinale Web. s. I. и плантаголизина из листьев подорожника большого Plantago major I. и созданию эффективных методов их выделения.

Выводы работы:

1. Разработаны эффективные методы очистки тараксализина из латекса корней одуванчика и плантаголизина из листьев подорожника включающие аффинную и ионообменную хроматографии, а также гель-фильтрацию. Для выделения тараксализина впервые предложен новый аффинный сорбент — сефароза-А1а-А1а-Ьеи-тгр, который в качестве лиганда содержит модифицированный аналог субстрата.

2. Впервые выделены в гомогенном состоянии и охарактеризованы две сериновые протеиназы из лекарственных растений Taraxacum officinale Web. s. I. и Plantago major l. Изученные энзиматические и физико-химические характеристики протеиназ позволяют отнести эти ферменты к субтилизиноподобным сериновым протеиназам.

3. Впервые с помощью гель-фильтрации выделен и частично охарактеризован физиологический субстрат тараксализина. Установлено, что субстратом тараксализина, являются белки латекса с молекулярными массами 148 и 132 кДа с pi 6,7 и 5,6 соответственно.

4. Динамика накопления тараксализина в латексе корней одуванчика по гидролизу субстрата Glp-Ala-Ala-Leu-pNA демонстрирует два пика: после появления растений из-под снега и в период массового цветения одуванчика и образования семян.

5. Впервые, в условиях in vitro, показана коллагенолитическая активность для сериновой протеиназы высшего растенияплантаголизина из листьев подорожника. Фермент гидролизует, а и цепи одновременно, до низкомолекулярных продуктов (< 14 кДа). Это позволяет подойти к изучению действия протеиназы in vivo.

3.5.

Заключение

.

Тараксализин — фермент латекса корней одуванчика ингибируется специфическими ингибиторами сериновых протеиназ — DFP и PMSF. Энзиматические и физико-химические свойства фермента сходны с таковыми для сериновых протеиназ растений, хотя не идентичны им. Это позволяет с уверенностью утверждать, что обсуждаемый фермент представляет собой сериновую протеиназу. рН-оптимумом активности тараксализина находится в щелочной области рН, что свойственно субтилизиноподобным сериновым протеиназам. Фермент проявляет высокое сродство к Glp-Ala-AIa-Leu-pNA — типичному синтетическому пептидному субстрату сериновых протеиназ семейства субтилизина. Наибольшее сходство характера специфичности действия тараксализина на В-цепь окисленного инсулина наблюдается с субтилизиноподобной сериновой протеиназой увядающих листьев подсолнечника [69] и типичным бактериальным субтилизином BPN'. Молекулярная масса фермента — 67 кДа, это соответствует значениям молекулярных масс известных субтилизинов из растений, которые за редким исключением являются высокомолекулярными белками. N-концевая последовательность фермента имеет наибольшее сходство (40% на протяжении 15 N-концевых остатков) с типичным бактериальным субтилизином Карлсберг.

Таким образом, тараксализин может быть определен как субтилизиноподобная сериновая протеиназа. Ближайшими гомологами тараксализина являются маклюр ализин и тиолзависимая субтилизиноподобная сериновая протеиназа из увядающих листьев подсолнечника.

Плантаголизин — фермент листьев подорожника теряет свою активность в присутствии ингибиторов сериновых протеиназ — DFP и PMSF. Кроме того, фермент ингибируется ионами Hg2 Энзиматические и физико-химические свойства плантаголизина в значительной степени похожи на таковые для сериновых протеиназ растении. Таким образом, плантаголизин можно классифицировать как тиолзависимую сериновую ттротеиназу.

Плантаголизин проявляет наибольшую активность в щелочной области рН, что характерно для субтилизиноподобных сериновых протеиназ. Фермент гидролизует Glp-Ala-Ala-Leu-pNA — типичный синтетический пептидный субстрату сериновых протеиназ семейства субтилизина. Субстратная специфичность протеиназы, определенная по гидролизу В-цепи окисленного бычьего инсулина свидетельствует о сходстве фермента с бактериальным субтилизином BPN'. Молекулярная масса плантаголизина невелика — 19 кДа, подобные молекулярные массы имеют субтилизинподобная сериновая протеиназа увядающих листьев подсолнечника — 25 кДа [69], некоторые субтилизины бацилл. Найденная для плантаголизина N-концевая последовательность из 19 остатков обнаружила сходство на 37% с субтилизиноподобной протеиназой из дрожжей Schizosaccharomyces pombe.

Таким образом, плантаголизин является тиолзависимой сериновой протеиназой семейства субтилизина. Ближайший аналог плантаголизина — тиолзависимая субтилизиноподобная сериновая протеиназа из увядающих листьев подсолнечника.

Данные о способности плантаголизина расщеплять коллаген I типа в условиях in vitro открывают перспективы изучения действия фермента на коллаген и его растительные аналоги in vivo, а также позволяет подойти к изучению вопросов, связанных с влиянием фермента на рубцовую ткань.

Тот факт, что изучаемые ферменты способны гидролизовать пептидные субстраты сериновых протеиназ плазмы крови человека и тромбин открывает возможности изучения влияния этих протеиназ на различные компоненты крови и систему гемостаза.

Интерес для дальнейшего изучения представляет физиологическая роль ферментов, их природных субстратов и ингибиторов в растениях.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В. К. Химия протеолиза. М.: Наука, 1991. — с. 6, 36 — 63, 307 -310, С. 367.
  2. М. Н., Камалова Т. Г. Протеазы листьев в онтогенезе растений. Физиология и биохимия культурных растений. 1983. т. 15. № 2. с. 107- 115.
  3. В. В. Протеолитические ферменты. М.: Наука, 1971. — с. 267 -271, С. 414.
  4. В. А. Пряновкусовые растения. М.: Госторгиздат, 1946. — с. 44 -47, С. 107.
  5. М. А. Лекарственное растительное сырье и препараты. М.: Высшая школа. 1987. — с. 38 — 39, С. 192.
  6. Н. М. Гомеопатическая фармакодинамика. М.: Эверест, 1994. -с. 265 — 298, С. 457.
  7. Barr P. J. Three mamalian proprotein converting eiLzymes: furin, PC 1, PC 2. Cell. 1991. vol. 66. № 1. p. 1 — 3.
  8. Julius D., Broke A., Blair A., Kanisawa R., Thorner J. Isolation of the putative structural gene of yeast prepro-aipha-factor. Cell. 1984. vol. 37. № 2. p. 1075 -1089.
  9. В. M. Молекулярная биология. Структура и функции белков. -М.: Высшая школа, 1996. с. 220, 225 — 233, С. 336.
  10. Ю.Румш Л. Д. Химия протеолиза. Биоорганическая химия. 1994. т. 20. № 2. с. 85 94.
  11. Dutoit P. Isolation and partial characterization of a protease from Agave. Biochimica etBiophysicaActa. 1976. vol. 381. № 2. p. 895−901.
  12. Batt R., Wallace W. Characteristics of the active site and substrate specificity of a maize root endopeptidase. Biochimica et Biophysica Acta. 1989. vol. 990. p. 109−112.
  13. Goodfellow V. J., Solomonson L. P., Oaks A. Characterization of a maize root proteinase. Plant Physiology. 1993. vol. 101. № 2. p. 415−419.
  14. Bagarozzi D. A. Jr., Pike R., Potempa J., Travis J. Purification and characterization of a novel endopeptidase in rageweed (, Ambrosia artemiifolia) pollen. Biological Chemistry. 1996. vol. 271. № 42. p 26 227 26 232.
  15. Wallace W., Shannon J. D. Isolation and characterization of peptide hydrolases from the maize root. European Journal Biochemistry. 1979. vol. 102. № 1. p. 399−408.
  16. Wallace W., Batt R. G. Characteristics of the active site and substrate specificity of a maize root endopeptidase. Biochimica et Biophysica Acta. 1989. vol. 990. № l.p. 109−112.
  17. Wallace W. A nitrate reductase inactivating enzyme from the maize root. Plant Physiology. 1973. vol. 52. № 3. p. 197−201.
  18. Wallace W. Effects of NR inactivating enzyme and NAD (P)H on the NR from higher plants and Neurospora. Biochimica et Biophysica Acta. 1975. vol. 377. № 2 l.p. 239−250.
  19. Wallace W., Batt R. G. A comparsion of the effect of trypsin and a maize root proteinase on nitratereductase and other enzymes from maize. Biochimica et Biophysica Acta. 1983. vol. 744. № 2. p. 205 211.
  20. Shibata D., Doi E. A novel type of substrate specificity of rice BAPAse (benzoil-L-argmme-p-mtrianilide hydrolase) with mixed endopeptidase and carboxypeptidase. Cell Physiology. 1984. vol. 25. № 8. p. 1421 1429.
  21. Nishikata M. Trypsin protease from soybean seeds. Purification and some properties. Biochemistry {Токую). 1984. vol. 95. № 4. p. 1169 1177.
  22. Guo Z, J., Lamb C., Dixon R. A. A serine protease from suspension-cultured soybean cells. Phytochemistry. 1998. vol. 47. № 4. p. 547 553.
  23. Basu P. S., Biwas C., Majhi R., Datta Т. K. Serine proteinase from rice bean. Indian Journal Biochemical Biophysics. 1996.vol. 33. № 6. p. 491 -497.
  24. M. А., Емцева И. Б., Курсанова Т. А. Выделение и свойства протеолитического фермента из семян гречихи. Доклады Академии наук СССР. 1973. т. 209. № 5. с. 1215 1218.
  25. Kovacs P., Dufkova-Baranceva J., Psenak М. Proteinase and a-N-Benzoii-DL-Argimne-p-nitroanilide hydrolase on Poppy seedlings. Biolodia (Bratislava). 1985. vol. 40. № 4. p 345 356.
  26. Prentise N., Burger W. C., Moeller M. Partial purification and characterization of peptide hydrolase from germinated wheat. Phytochemistry. 1968. vol. 7. p. 1899- 1905.
  27. Prentise N., Burger W. C., Kastenschmindt J., Moeller M. Peptide hydrolase in wheate embryo. Phytochemistry. 1970. vol. 9. p. 41−47.
  28. Soedigdo R., Graber М. Purification and some properties of a protease from pea-seeds. Biochimica et Biophysica Acta. 1960. vol. 44. p. 315 323.
  29. Caldwell B. J., Sparrow L. G. Partial purification and characterization of two peptide hydrolases from Pea seeds. Plant Physiology. 1976. vol. 57. p. 795 -798.
  30. Hobday S. M., Thurman D. A., Barbey D. J. Proteolytic and trypsin inhibitory activities in extracts of germinating Pisum. Phytochemistry. 1973. vol. 12. p. 1041 1046.
  31. Davies H. Chapman J. The control of food mobilization in seed of Cucumis sativus L. The influence of embryonic axis and test on protein and lipid degradation. Planta. 1979. vol. 146. № 5. p. 579 584.
  32. Cameron E., Mazelis M. A nonproteolytic «trypsin like» enzyme. Purification and properties of arachain. Plant Physiology. 1971. vol. 48. № 3. p. 278 — 281.
  33. Mainguy D., van Huystee R., Hayden D. Fofm and function of a protease in cotyledons of germination peanut (Arachis hypogaea) seeds. Journal Agriculture Food Chemistry. 1978. vol. 26. № 1. p. 229 231.
  34. Satoch S., Fujii T. Presence of serine enzymes in endoplasmic reticulum of Spinach callus. Plant Cell Physiology. 1985. vol. 26. № 6. p. 1037 1044.
  35. Santarius K., Belitz U. P. Proteinase activity in potato plants. Planta. 1978. vol. 141. № 2. p. 145- 153.
  36. Racusen D., Foots M. An endopeptidase of bean leaves. Canadian Journal of Botany. 1970. vol. 48. № 2. p. 1017 1021.
  37. James F., Broquisse R., Suire C., Pradet A., Raymond P. Purification and biochemical characterisation of a vacuolar serine endopeptidase induced by glucose starvation in maize roots. Biochemistry. 1996. vol. 320. p. 283 292.
  38. Ferrari L., Alpi A., Balestreri E. Characterization of an endopeptidase from alfalfa (Medicago saliva L.) leaves. Plant Physiology. 1988. vol. 132. p. 74 -79.
  39. Bagarozzi D. A. Jr., Potempa J., Travis J. Purification and charactirization of an arginine-specific peptidase from ragweed (Ambrosia artemisiifolia) pollen. Am. J. Respir. Cell Molecular Biology. 1998. vol. 18. № 3. p. 363 369.
  40. CatsimpoolasN., Funk S. K., Wana J., Kenney J. Isoelectric isolation and some properties of a protease from soybean seeds. Scientific Food Agriculture. 1971. vol. 22. № 2. p. 79 82.
  41. Nishikata M. Inhibition stydies of Soybean trypsin-like enzyme. Biochemistry. 1985. vol. 97. № 6. p. 1541 1549.
  42. Doi E., Shibata D., Matoba Т., Yonezawa D. Characterization of benzoil-L-arginine p-nitrianilide hydrolase in rice embryo. Agricultural and Biological Chemistry. 1980. vol. 44. № 7. p. 164- 1642.
  43. Shibata D., Doi E. Purification and characterization of rice embryo BAPAase (benzoil-L-axginine p-nitrianilide hydrolase) with mixed endopeptidase and carboxypeptidase. Cell Physiology. 1984. vol. 25. № 8. p. 1411 1419.
  44. Kaneda M., Tominago N. Isolation and characterization of a proteinase from sarcocaip of melon fruit. Biochemistry. 1975. vol. 78. № 3. p. 1287- 1296.
  45. Rudenskaya G. N., Bogdanova E. A., Revina L. P., Golovkin B. N., Stepanov V. M. Macluralisin a serine proteinase from fruits of Maclura pomifera (Raf.) Scheid. Planta. 1995. vol. 196. № 1. p. 174 — 179.
  46. Tornero P., Conejero V., Vera P. Primary structure and expression of a pathogen-induced protease (PR-P69) in tomato plants: Similarity of functional domains to subtilisin-like endoproteases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. vol. 93. № 13. p. 6332−6337.
  47. Kaneda M., Minematsu Y., Powers J. C., Tominago N. Specificity of cucumisin hydrolysis of peptid thiobenzyl esters. Agricultural and Biological Chemistry. 1986. vol. 50. № 4. p. 1074 1076.
  48. Yamagata H., Ucno S., Iwasaki T. Isolation and Characterization of a possible native cucumisin from developing melon fruits and its limited autolysis to cucumisin. Agricultural and Biological Chemistry. 1989. vol. 53. № 4. p. 1009 1017.
  49. Uchikoba Т., Niidome Т., Sata I., Kaneda M. Protease D from sarcocarp of honeydew melon fruit. Phytochemistry. 1993. vol. 33. № 5. p. 1005 1008.
  50. Kaneda M., Sobue A., Eida S., Tominago N. Isolation and characterization of proteinases from the sarcocarp of snake-gourd fruit. Biochemistry. 1986. vol. 78. № 3. p. 1287- 1296.
  51. Uchikoba Т., Horita H., Kaneda M. Protease from the sarcocarp of yellow snake-ground fruit. Phytochemistry. 1990. vol. 29. № 6. p. 1979- 1981.
  52. Kaneda M., Tominago N. Isolation and characterization of a proteinase from Benincasa ceriferaL. Phytochemistry. 1977. vol. 16. № 3. p. 345 346.
  53. Uchikoba Т., Yonezawa H., Kaneda M. Cucumisin like protease from the sarcocarp of Benincasa hispida var. Ryukyu. Phytochemistry. 1998. vol. 49. № 8. p. 2215−2219.
  54. Curroto E., Gonzales G. Isolation and characterization of protease from Cucurbita ficifolia. FEBSLetters. 1989. vol. 337. № 2. p. 363 365.
  55. Dryjanski M., Otliwski J., Polanowski A., Wilusz T. Serine proteinase from Cucurbita ficifolia seed: purification on native squash trypsin inhibitor (CMTII). Biological Chemistry Hoppe Seyler. 1990. vol. 371. p. 889 895.
  56. Г. H., Степанов В. М., Захарова Ю. А., Ревина Л. П., Ходова О. М. Тиолзависимая сериновая протеиназа из листьев подсолнечника -близкий аналог сериновых протеиназ бактерий. Биохимия. 1987. т. 52. № 10. с. 1753 1755.
  57. Ribeiro A., Akkermans A. D. L., van Kammen A., Bisseling Т., Pawlowski. К. A nodule-specific gene encoding a subtilisin-like protease is expressed in early stages of actinorhizal nodule development. Plant Cell. 1995. vol. 7. № 6. p. 785 -794.
  58. Uchikoba Т., Yonezawa H., Kaneda M. Cleavage specificity of cucumisin a plant serine protease. Biochemistry {Tokyo). 1995. vol. 117. № 5. p. 1126 -1130.
  59. Gankel F. A., Gasser H. G. Proteinase К from Trifirachium album Limber. European Journal of Biochemistry. 1989. vol. 179. № 1. p. 185 194.
  60. Kaneda M., Ohmine M., Yonezawa U., Tominago N. Amino acid sequence around the reactive serine of cucumisin from melon fruit. Biochemistry. 1984. vol. 95. № 2. p. 815−821.
  61. Yamagata H., Masuzawa Т., Nagaoka Y., Ohnish Т., Iwasaki Т., Cucumisin, a serine protease from melon fruits, shares structural homology with subtilisin and is generated from a large precursor. Biological Chemistry. 1994. vol. 66. № 52. p. 32 725−32 731.
  62. Yonezawa H., Uchikoba Т., Kaneda M. Identification of the reactive histidine: modification with peptidyl chloromethyl keton derivative of peptide substrate. Biochemistry {Tokyo). 1995. vol. 118. № 2. p. 917 920.
  63. Schaller A., Ryan C. A. Identification of a 50-kDa systemin-binding protein in tomato plasma membranes having Kex2p-like properties. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. vol 91. № 25. p. 11 802 11 806.
  64. Jiang L., Rogers J. C. Functional analysis of a Golgi-localized Kex2p-like protease in tobacco suspension culture cells. Plant Cell. 1999. vol. 18. № 1. p. 23 -32.
  65. Meichtry J., Amrhein N., Schaller A. Characterization of the subtilase gene family in tomato (.Lycopersicon esculentum Mill.). Plant Molecular Biology. 1999. vol. 39. № 4. p. 749 760.
  66. Neuteboom L. W., Vetch-Tello L. M., Clijdesdale O. R., Hooykaas P. J., van derZaal B. J. A novel subtilisin-like protease gene from Arabidopsis thaliana at sites of lateral root emergence. DNA Research. 1999. vol. 6. № 1. p. 13 19.
  67. Cohen L. W., Coghlan V. M., Dihel L. C. Cloning and sequencing of papain -encoding cDNA. Gene. 1986. vol. 48. № 2. p. 219 227.
  68. Silen J. L., McGrath C. N., Smith K. R., Agard D. A. Molecular analysis of the gene encoding a-lytic protease evidence from a preproenzyme. Gene. 1988. vol. 339. № 2. p. 237 244.
  69. Zhu X., Ohta Y., Jordan F., Inorye M. Pro-sequence of subtilisin can guide the refolding of denatured subtilisin in an intermolecular process. Nature. 1989. vol. 339. № 6224. p. 483 484.
  70. Berger D., Altmann T. A subtilisin-like serine protease involved in the regulation of stomatal density and distribution in Arabidopsis thaliana. Genes Development. 2000. vol. 14. № 9. p. 1119- 1131.
  71. Vera P., Conejero V. Pathogenesis-related proteins of tomato. P-69 as an alkaline endoproteinase. Plant Physiology. 1988. vol. 87. p. 58 63.
  72. Fischer W. Christ U. Baumgartner M. Erismann К. H. Mosinger E. Pathogenesis-related proteins of tomato: biochemical and immunological characterization. Physiology and Molecular Plant Pathology. 1989. vol. 35 p. 67−83.
  73. Vera P., Conejero V. Effect of ethephon on protein degradation and the accumulation of «pathogenesis-related» (PR) proteins in tomato leaf discs. Plant Physiology. 1990. vol. 92. p. 227 233.
  74. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Isolation and characterization of euphorbain 1, a proteinase from the latex of Euphorbia lathyris. Biochimica et BiophysicaActa. 1983. vol. 746. № 3. p. 154−159.
  75. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Euphorbain p, a serine protease from the Euphorbiapulcherrima. Phytochemistry. 1984. vol. 23. № 3. p. 682 683.
  76. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Three serine proteases from the latex of Euphorbia cyparissias. Phytochemistry. 1985. vol. 24. № 2. p. 925 928.
  77. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Four serine proteases from the latex of Euphorbia tirucalli. Canadian Journal of Biochemistry and Cell Biology, 1985. vol. 63. № 2. p. 1093 1096.
  78. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Isolation and characterization of proteases from Euphorbia lactea and Euphorbia lactea cristata. Phytochemistry. 1986. vol. 25. № 4. p. 807−810.
  79. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Two proteases from the latex of Euphorbia drupifera. Phytochemistry. 1985. vol. 24. № 12. p. 2843 2845.
  80. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Purification and characterization of hevain, a serine protease from Hevea brasiliensis. Phytochemistry. 1984. vol. 23. № 5. p. 963−970.
  81. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Hevains: serine-centred proteases from latex of Hevea brasiliensis. Phytochemistry. 1986. vol. 25. № 10. p. 2279 -2282.
  82. Lynn К. R., Clevette-Radford N. A. Ficin e a serine-centred protease from Ficus elastica. Phytochemistry. 1986. vol. 25. № 7. p. 1559 — 1561.
  83. Renuka-Prasad К. M., Virupaksha Т. K. Purification and characterization of protease from jakfruit latex. Phytochemistry. 1990. vol. 29. № 6. p. 1763 -1766.
  84. Lynn K. R. Parthenain, a serine protease from Parthenium argentatum. Phytochemistry. 1988. vol. 27. № 7. p. 1987 1991.
  85. Samac D., Storey R. Proteolytic and trypsin inhibitor activity in germination jojoba seeds. Plant Physiology. 1981. vol. 68. № 6. p. 1339 1347.
  86. Akhtaruzzaman M., Kimura Y., Takagi S. Purification and charactirization of a CM-glycinin digesting protease from soybean jackfruit latex. Phytochemistry. 1990. vol. 29. № 6. p. 1763 1766.
  87. Akhtaruzzaman M., Kimura Y., Takagi S. Clycinin A5A4-subunit digesting protease in soybean seeds. Boise Biotechnology and Biochemistry. 1992. vol. 56. № 6. p. 878 883.
  88. Hoober J. K., Hughes M. J. Purification and characterization of a membrane-bound protease from Chlamydomonas reinhadtii. Plant Physiology. 1992. vol. 99. № 2. p. 932 937.
  89. Lynn K. R., Clevette-Radford N. A. Protease from Euphorbiaceae. Phytochemistry. 1988. vol. 27. № 1. p. 45−49.
  90. Л. А., Якушева А. Д., Степанов В. М. Синтез пептидных субстратов субтилизина и их аналогов. Биоорганическая химия. 1977. т. 3. № 2. с. 273 279.
  91. Kuznetsova A. V., Bogacheva A. M., Rudenskaya G. N., Stepanov V. M. Synthesis and application of sorbents for affinity chromatography of serine proteases. Chromatographia. 1997. vol. 45. p. 44−48.
  92. А. В., Руденская Г. H., Богачева А. М., Воюшина Т. Л., Степанов В. М. Аффинные сорбенты на основе морфолидов трипептидов для выделения протеиназ. Биоорганическая химия. 1997. т. 23. № 11. с. 820 -828.
  93. М. М. A rapid and sensitive method of the quantitation microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry. 1976. № 72. p. 248−256.
  94. Spector T. Refinement of the Coomassic blues method of protein quantitation. Analytical Biochemistry. 1978. № 86. p. 142 149.
  95. Heincke R. M., Smith T. L. Cristalline papain. Preparation, specificity and activation. Biochimica et Biophysica Acta. 1967. vol. 139. № 1. p. 405 -420.
  96. Laemmli U. K. Cleavege of structural proteins during the assembly of the head of Bacteriophage T4. Nature. 1970. vol. 227. № 15. p. 680 685.
  97. Г. Н. Новое подсемейство субтилизинов. Биоорганическая химия. 1994. т. 20. № 5. с. 475−484.
  98. Siezen R. J., Leunissen J. A. M. Subtilase: The superfamily of subtilisin-like serine proteases. Protein Science. 1997. vol. 6. p. 501 -523.
  99. Г. H. Аффинная хроматография протеиназ. Биоорганическая химия. 1994. т. 20. № 3. с. 213 229.
  100. Schechter J., Berger A. On the size of active site in proteases. I. Papaine. Biochemical and Biophysical Research communications. 1967. vol. 27. p. 157 -162.
  101. Gron H. Meldal M. Breddam K. Extensive comparison of the substrate preferences of two subtilisins as determined with peptide substrates which are based on the principle of intramolecular quenching. Biochemistry. 1992. vol. 31. № 26. p. 6011−6018.
  102. Kuwabara Т., Suzuki K. A prolyl endoproteinase that acts specifically on extrinsic 18-kDa protein of photosystem II: purification and further characterization. Plant Cell Physiology. 1994. vol. 35. № 4. p. 665 675.
  103. Kuwabara T. Characterization of a prolyl endoproteinase from spinach thylakoids. FEBS Letters. 1992. vol. 300. № 2. p. 127 130.
  104. Yoshimoto Т., Sattar A. K., Hirose W., Tsuru D. Studies on prolyl endoproteinase from shaka shimeji (Lyophyllum cinerascens): purification and enzymatic properties. J. Biochemistry {Tokyo). 1988. vol. 104. № 4. p. 622 -627.
  105. Zamoiodchikova T. S., Vorotyntseva Т. I., Antonov V. K. Duodenasa, a new serine protease of unusual specificity from bovine duodenal mucosa. Purification and properties. Eur. J. Biochemistry. 1995. vol. 227. № 3. p. 866 -872.
  106. Pemberton A. D., Huntley J. F., Miller H. R. Sheep mast cell proteinase-1: characterization as a member of a new class of dual-specific ruminant chymases. J. Biochemistry. 1997. vol. 321. pt. 3. p. 665 670.
  107. Macaldowie C. N., Mackellar A., Huntley J. K. The isolation and purification of a dual specific mast cell-derived protease from parasitised caprine jejunal tissue. Research Veterinary Science. 1998. vol. 64. №. 1. p. 17−24.
  108. KatunumaN., Kido H. Biological functions of serine proteases in mast cells in allergic inflammation. J. Cell Biochemistry. 1988. vol. 38. № 4. p.291 301.
  109. И. M. Биологическая флора Московской области. Одуванчик лекарственный. М.: Московский университет. 1990. — с. 210 — 229. С. 270.
  110. А. М. Structure and function of plant cell proteins. Plant Cell. 1993. vol. 5. p. 9 23.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!