Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Молекулярно-генетические и иммунохимические методы в диагностике, индикации и идентификации возбудителей туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота

Диссертация: Молекулярно-генетические и иммунохимические методы в диагностике, индикации и идентификации возбудителей туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В настоящее время согласно стандартам МЭБ (OIE. World Animal Health in 2005) узаконенными методами диагностики лейкоза крупного рогатого скота являются реакция иммунодиффузии в геле агара (РИД) и метод иммуноферментного анализа (ИФА). Ранее считали, что применение ИФА для выявления анти-ВЛКРС антител ограничено коротким промежутком времени, так как уровень специфических антител растет очень… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 2. 1. Антигенная структура микобактерий
    • 2. 2. Иммунитет при туберкулезе
    • 2. 3. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота
      • 2. 3. 1. Аллергическая диагностика и неспецифические реакции на туберкулин
      • 2. 3. 2. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота иммуноферментным методом
      • 2. 3. 3. Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза
    • 2. 4. Антигенная структура вируса лейкоза крупного рогатого скота
    • 2. 5. Диагностика, профилактика и меры борьбы лейкозом крупного рогатого скота
      • 2. 5. 1. Иммуноферментный анализ и полимеразная цепная реакция в диагностике лейкоза
  • 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 3. 1. Материалы и методы исследования
  • 4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 4. 1. Микобактериальные антигены и их свойства
      • 4. 1. 1. Электрофоретическая подвижность и характеристика антигенных компонентов микобактерий
      • 4. 1. 2. Иммуноблот анализ сероактивных компонентов микобактериальных антигенов
      • 4. 1. 3. Антигенные свойстваППД туберкулинов и ДМСО-антигенов
    • 4. 2. Иммуноферментный анализ для выявления микобактериальных антигенов в патологическом материале
      • 4. 2. 1. Иммуносорбентная очистка иммунных сывороток
      • 4. 2. 2. Тест — система иммунофернментная для типизации микобактерий в патологическом материале
    • 4. 3. Иммуноферментный анализ для выявления специфических антител при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота
      • 4. 3. 1. Дифференциальная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа
    • 4. 4. Диагностическая ценность ЙФА и ПЦР в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота
    • 4. 5. Иммуноферментный анализ в диагностике лейкоза крупного рогатого скота
      • 4. 5. 1. Диагностическая ценность ИФА для выявления антител в сыворотоке крови и молоке при лейкозе крупного рогатого скота
      • 4. 5. 2. Диагностическое значение иммунных комплексов при лейкозе крупного рогатого скота
    • 4. 6. Диагностическая ценность ПЦР для выявления провирусной ДНК ВЛКРС в молоке
    • 4. 7. Динамика изменения титров антител против антигена gp51 инфицированных ВЛКРС животных
    • 4. 8. Динамика антителогенеза у крупного рогатого скота к различным структурным компонентам вируса лейкоза
  • 5. Обсуждение результатов

Молекулярно-генетические и иммунохимические методы в диагностике, индикации и идентификации возбудителей туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Туберкулез и лейкоз крупного рогатого скота наиболее распространенные хронические инфекции в животноводстве и представляют собой важные проблемы не только ветеринарной медицины, животноводства, но биологии и экологии в целом и имеющие непосредственное отношение к безопасности здоровья человека. На современном этапе борьбы с туберкулёзом и лейкозом животных, основой профилактических и оздоровительных мероприятий была и остаётся своевременная и точная диагностика этих инфекций.

Ветеринарная практика нашей страны располагает значительным числом средств и методов для эффективной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота. Следует отметить, что в плане диагностики туберкулеза отечественная ветеринарная наука проделала большой и сложный путь постоянного ее совершенствования. Огромный вклад в изучение эпизоотологии, диагностики и ликвидации туберкулеза сельскохозяйственных животных внесли такие ученые как П. П. Вишневский (1935), М. К. Юсковец (1963), О. В. Мартма (1971), В. П. Урбан (1980), М. А. Сафин (1981), Д. Д. Новак (1977, 1990), Н. М. Колычев (1992), А. С. Донченко (2002, 2004), В. Г. Ощепков (2001,2009), Н. А. Донченко (2008), А. Х. Найманов (1993, 2006, 2009) и другие.

Диагноз на туберкулез ставят комплексным методом на основе эпи-зоотологических, клинических, аллергических, патологоанатом и чески х и лабораторных исследований. Однако не возможно выделить какой-либо один метод диагностики туберкулеза, имеющий значительные преимущества перед другими, скорее они могут взаимодополнять друг друга и поэтому имеют право на существование (С.И.Татьков и др., 2006; В. А. Сазонов и др. 1996). По мнению А. М. Лысенко (1987), Е. В. Маслова (1986), M. Amadori (1998) и др., для диагностики туберкулеза животных наиболее перспективен иммуноферментный анализ, который позволяет ставить диагноз на туберкулез в лабораторных условиях одновременно у большого количества животных, прост в применении и обладает высокой чувствительностью и специфичностью. В связи с этим, получение и изучение антигенных и иммуногенных характеристик микобактериальных антигенов, специфических антител, возможностей их использования для диагностики туберкулеза, дифференциации неспецифических реакций животных на туберкулин в иммунохимических реакциях являются актуальной задачей для ветеринарной практики в плане повышения эффективности диагностики, индикации и идентификации возбудителей туберкулеза крупного рогатого скота.

Определение современными методами уровня и спектра противотуберкулезных антител далеко не исчерпало себя в качестве средства иммунодиагностики и характеристики особенностей течения туберкулеза, а сами противотуберкулезные антитела не достаточно используются для ха рактеристики микобактериальных антигенов, приготовления диагностику-мов и других целей (Л.Н.Черноусова и др., 1995, 2000). Разработка экспресс-методов индикации и идентификации возбудителя туберкулеза из биоматериала животных и дифференциации патогенных микобактерий от атипичных остается актуальной задачей научных исследований (А.Н.Шаров и др., 2000, 2003; М. С. Калмыкова, 2007). Более преспективной в этом отношении, наряду с методами иммуноферментного анализа, является полимеразная цепная реакция (ПЦР). В настоящее время, в диагсностике туберкулеза крупного рогатого скота и идентификации микобактерий, интенсивно разрабатываются различные подходы по применению ПЦР и других приемов генодиагностики (С.Н.Радюк, Г. Р. Мацевич, 1997; Е. Б. Вишневская, 1998; А. Н. Шаров, В. А. Седов, 1998; А. М. Алимов, 1999, 2000; А. Х. Найманов и др., 2004; Н. А. Донченко, 2008 и др.).

В структуре инфекционной патологии лейкоз крупного рогатого скота в РФ занимает лидирующее место и составляет более 50% от других нозологий (М.И.Гулюкин, 2005;). Широкая распространенность лейкоза крупного рогатого скота, отсутствие средств терапии и специфической профилактики определяют актуальность научных исследований по этой проблеме (Г.А.Симонян, 1980; В. А. Бусол и др., 1999; М. И. Гулюкин, 2000, 2002; Л. Г. Бурба, В. М. Нахмансон, А. Ф. Валихов, 1982; П. Н. Смирнов, 1998, 2005; И. М. Донник, 2005; М. А. Амироков, В. В. Храмцов 2007; А. М. Алимов, 2010).

Одним из приоритетных направлений исследований по изучению особенностей и закономерностей инфекционного процесса лейкоза крупного рогатого скота является разработка высокочувствительных методов прижизненной диагностики болезни (В.А.Бусол, 1999; О. А. Верховский и др., 2002; М. И. Гулюкин и др., 2002, 2005, 2007; П. Н. Смирнов, 2005; И. М. Донник и др., 2009. 2010).

В настоящее время, согласно стандартам МЭБ, узаконенными методами диагностики лейкоза крупного рогатого скота являются реакция им-мунодиффузии в геле агара и метод иммуноферментного анализа.

Важным преимуществом иммуноферментных методов, наряду с более высокой чувствительностью и специфичностью, является то, что ИФА позволяет выявлять специфические антитела в пробах сборного молока. Если учесть доступность и простоту выполнения, то ИФА для выявления специфических антител в пробах молока может стать важнейшим элементом в системе противолейкозных мероприятий в хозяйствах (У.К.^иуеп, Я. Р. Маез, 1992; .Т. М. Яагвеапг, О.Г.КеНоп е1 а1., 1997).

Весьма актуальной задачей является изучение иммунологических аспектов патогенеза лейкоза крупного рогатого скота. Определение динамики образования и спектра антител, идентификация и изучение состава иммунных комплексов способствуют расшифровке молекулярно-клеточных механизмов взаимодействия вируса лейкоза с макроорганизмом и объяснению особенностей патогенеза.

Результаты подобных исследований явятся основой для разработки новых высокоспецифичных и ранних методов выявления инфицированно-сти животных возбудителями туберкулеза и лейкоза, а также для создания более надежной системы мер борьбы с этими опасными инфекционными болезнями.

Цель и задачи исследования

Целью нашей работы явилось усовершенствование иммунохимических и молекулярно-генетических методов диагностики туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота, а также средств индикации и идентификации возбудителей этих инфекций. В соответствии с целью решались следующие задачи:

— изучить антигенную структуру микобактерий и выявить наиболее специфичные антигенные компоненты;

— изыскать способы получения высокоспецифичных антигенов микобактерий и антител, обеспечивающих индикацию и идентификацию микобактерий в патологическом материале, и дифференциацию неспецифических реакций на туберкулин методом ИФА;

— определить эффективность иммуноферментного анализа для выявления специфических антител при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота;

— определить диагностическую ценность ИФА и ПЦР в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота;

— изучить динамику образования специфических антител и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови и молоке инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота;

— определить диагностическую ценность ПЦР для выявления прови-руспой ДНК ВЛКРС в ЦИК сыворотки крови и молока;

— разработать ИФА для выявления специфических антител к ВЛКРС в сыворотке крови и молоке, и определить его диагностическую ценность;

— изучить динамики антителогенеза у крупного рогатого скота к различным структурным компонентам вируса лейкоза;

Научная новизна. Иммунохимическими и биохимическими методами изучена антигенная структура микобактерий и разработаны способы получения высокоспецифичных антигенов из инактивированных культур и антител к ним, обеспечивающих индикацию и идентификацию микобактерий в патологическом материале, дифференциацию неспецифических реакций на туберкулин. Установлено, что особенности антителогенеза, диссоциация циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови и молоке, обнаружение провирусной ДНК в их составе являются важными факторами повышения эффективности диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Впервые разработан способ получения антигенов микобактерий, обеспечивающих дифференциальную диагностику туберкулеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа («Способ получения антигена для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота» — положительное решение о выдаче патента РФ на изобретение от 12.08.2010 г., заявка № 2 009 112 145).

Показана высокая информативность разработанного ИФА для выяснения эпизоотической ситуации хозяйств по туберкулезу крупного рогатого скота.

Разработана технология повышения специфичности иммунных сывороток к микобактериальным антигенам, обеспечивающая индикацию и дифференциацию микобактерий в патологическом материале методом иммуноферментного анализа («Белково-глутаральдегидный метод очистки иммунной сыворотки против М. Ьоуіб» — рационализаторское предложение № 314−91 от 5.03.1991).

Разработан ИФА для выявления специфических антител к ВЛКРС в сыворотке крови и молоке с предварительной диссоциацией циркулирующих иммунных комплексов в пробах («Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота» — положительное решение о выдаче патента РФ на изобретение от 26.01.2011 г., заявка РФ № 2 010 100 016) и определена его диагностическая ценность. Установлено, что иммуноферментный анализ с предварительной диссоциацией иммунных комплексов в сыворотке крови и молоке увеличивает выявляемость инфицированных ВЛКРС животных до 20%.

Впервые изучена динамика образования и спектр свободных антител и циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови и молоке коров инфицированных ВЛКРС в естественных условиях. Установлено, что при уменьшении титров свободных антител в сыворотке крови повышается уровень циркулирующих иммунных комплексов. На разных стадиях развития иммунитета при лейкозе крупного рогатого скота спектр антител меняется. Данные факты свидетельствует о том, что разовые серологические тесты, основанные на выявление антител против только одного антигена, в диагностике лейкоза могут быть не эффективными.

Впервые методом полимеразной цепной реакции доказано присутствие в составе циркулирующих иммунных комплексов провирусной ДНК ВЛКРС, что расширяет представления о патогенезе инфекции и способствует дальнейшему совершенствованию методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Практическая значимость работы. Разработанный способ выделения специфических микобактериальных антигенов повышает эффективность прижизненной дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота иммунологическими методами.

Набор препаратов для выявления антител к возбудителю туберкулеза крупного рогатого скота методом ИФА" и «Тест-система иммунофер-ментная для типизации микобактерий в патологическом материале» позволяют выяснить эпизоотическую ситуацию по туберкулезу в хозяйствах, и рекомендуются для включения в комплексную систему мероприятий по борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота.

Разработанный иммуноблот анализ микобактериальных антигенов позволяет идентифицировать микобактерии и может быть использован в качестве дополнительного теста для диагностики туберкулеза.

Для повышения выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота целесообразно проводить ИФА с предварительной диссоциацией циркулирующих иммунных комплексов. Разработанный метод ИФА с предварительной диссоциацией ЦИК в исследуемых пробах открывает широкие перспективы для диагностики данной инфекции методом иммуноферментного анализа молока.

Обнаружение провирусную ДНК и специфических антител путем диссоциации циркулирующих иммунных комплексов повышает эффективное! ь выявления контаминации сборного молока вирусом лейкоза.

Результаты научных исследований успешно апробированы и внедрены в хозяйствах Буинского, Дрожжановского, Зеленодольского, Черем-шанского, Тюлячинского, Нижнекамского, Высокогорского, Арского и др. районов РТ. По результатам исследований подготовлены методические рекомендации, направленные на усовершенствование методов диагностики туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота:

Методические рекомендации по оценке контаминации молока вирусом лейкоза крупного рогатого скота, утвержденные НТС ФГОУ ВПО «КГАВМ», протокол № 5 от 10.02.2011 г. и Ученым советом ГНУ ВНИ-ИВСГЭ и секцией «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» Отделения ветеринарной медицины РАСХН, протокол № 6 от 31.03.2011 г.

Методические рекомендации по диагностике лейкоза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа сыворотки крови и молока, утвержденные НТС ГУВ КМ РТ, протокол № 1 от 21.01,2008 г.

Методические рекомендации по оценке благополучия хозяйств по лейкозу крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа (ИФА) молока, утвержденные НТС ФГОУ ВПО «КГАВМ», протокол № 2 от 4.06.2009. и НТС ГУВ КМ РТ, протокол № з от 8.10.2010г.

Методические рекомендации по дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота методом ИФА, утвержденные НТС ФГОУ ВПО «КГАВМ», протокол № 5 от 10.02.11 г. и НТС ГУВ КМ РТ протокол № 1 от 16.02.2011 г.

Методические рекомендации по оценке благополучия хозяйств по лейкозу крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа и по дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота методом ИФА представлены в Федеральную службу по ветеринарному и фитосанитарному надзору МСХ РФ для утверждения в установленном порядке.

Тест-система иммуноферментная для выявления специфических антител против микобактерий" - утверждены НТС KB И, протокол № 5 от 22.05.92 г.

Тест-система иммуноферментная для типизации микобактерий" -утверждены НТС КВИ, протокол № 5 от 22.05.92 г.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены и одобрены на республиканских и Всероссийских научно-производственных конференциях по актуальным проблемам агропромышленного комплекса (Казань, 1989, 1990, 1991, 1993, 1999, 2004, 2006, 2007, 2008, 2009, 2010) — Всесоюзной научно-технической конференции «Современные проблемы иммунологии, биотехнологии, генной и клеточной инженерии в ветеринарной медицине» (Н.Новгород, 1990) — межвузовской научно-производственной конференции молодых ученых «Вклад молодых ученых и специалистов в научно-технический прогресс с/х производства» (Ставрополь, 1991) — международной научной конференции посвященной 125летию КГ ABM (Казань, 1998) — международной научной конференции «Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе» (Москва, 1999) — международной научно-производственной конференции посвященной 100-летию членкора ВАСХНИИЛ В. Т. Котова (Воронеж, 1999) — республиканских научно-производственных конференциях молодых ученых и специалистов (Казань, 1998, 2000) — международной научной конференции посвященной 70-летию зооинженерного факультета КГАВМ (Казань, 2000) — международной научной конференции «Энтузиазм и творчество студентов в развитии науки» (Троицк, 2000) — Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии» (Киров, 2007) — Международной научно-производственной конференции «Достижения супрамоле-кулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии» (Москва, 2008) — П-м съезде биохимического общества РАН (Москва, 1997) — IV-м съезде Российского общества биохимии и молекулярной биологии (Новосибирск, 2008). Международной научно-практической конференции посвященной 90-летию кафедры биологической и органической химии СПбГАВМ (Санкт-Петербург, 2009).

Публикация результатов исследований. Основные результаты исследований, выполненные по теме диссертации, опубликованы в 44 печатных работах, в том числе в 11 изданиях, рекомендованных ВАК, таких как «Ветеринарный врач», «Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии», «Ученые записки КГАВМ», монография «Иммунофермент-ный анализ в диагностике туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота», I.

Казань, 2011, 148с.

Основные положения, выносимые на защиту:

— изучением антигенной структуры микобактерий получены высокоспецифичные антигены и антитела для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа.

— полимеразная цепная реакция и иммуноферментный анализ на основе очищенных антигенов и антител повышают эффективность диагностики туберкулеза и лейкоза, обеспечивают дифференциацию неспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота, а также индикацию и типизацию микобактерий в патологическом материале.

— инфекционный процесс при лейкозе крупного рогатого скота сопровождается синтезом антител к различным компонентам вируса, уровень которых варьирует в зависимости от стадии болезни.

— диссоциация циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови и молоке, обнаружение провирусной ДНК в их составе повышают эффективность диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 315 страницах стандартного компьютерного набора, содержит 42 таблицы и 26 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследований, заключения и выводов, предложений производству, списка литературы и приложений.

ВЫВОДЫ.

1. Комплекс диагностических мероприятий при туберкулезе и лейкозе крупного рогатого скота должен включать иммунохимические и молекулярно-генетические методы исследований.

2. ДМСО-антигены от вирулентных и инактивированных мико-бактерий имеют разный электрофоретический профиль белковых фракций. Большинство сероактивных фракций ДМСО-антигенов как от живых, так и автоклавированных микобактериальных культур располагаются в диапазоне от 20 до 65 кД. Серопозитивная фракция с Мм бОкД отмечается только в антигенных препаратах М. Ьоу1з и М. ШЬегси1оз1з, что позволяет дифференцировать их от других микобактериальных культур.

3. Антисыворотки, полученные против ДМСО-антигенов микобактериальных культур и истощенные с использованием белково-глутар-альдегидных иммуносорбентов, обладают высокой специфичностью. Использование антисывороток в ИФА позволяет дифференцировать мико-бактериальные антигены с коэффициентами специфичности от 3,6 до 4,5.

4. Иммуноферментный анализ сывороток крови животных дает дополнительную информацию к аллергическим исследованиям, повышается эффективность диагностических мероприятий. Если наряду с аллергическим методом диагностики туберкулеза применять и иммуноферментный метод анализа сывороток крови, то степень достоверно выявленных больных туберкулезом животных составляет 92%.

5. Микобактериальные антигены (ДМСОм-антиген), полученные по предложенному способу, позволяют дифференцировать в ИФА неспецифические реакции на туберкулин вызванные атипичными микобакте-риями со специфичностью более 90%.

6. ИФА и ПЦР являются высокоточными методами исследований туберкулеза. ИФА, как более массовый метод, перспективен в определении статуса стада коров по туберкулезу, позволяет исключить туберкулез у части реагирующих на 1111Д, а также выявить больных туберкулезом из числа не реагирующих на ППД коров в неблагополучных хозяйствах.

7. Значительная часть антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота находится в циркулирующих иммунных комплексах. Титры свободных и «связанных» в ЦИК антител в сыворотке крови с развитием болезни меняются. Изучение динамики образования иммунных комплексов свидетельствует о том, что разовые серологические тесты в диагностике лейкоза крупного рогатого скота не достаточно эффективны. В оздарав-ливаемых от лейкоза хозяйствах необходимо проводить двукратные (с интервалом в 2−3 месяца) исследования сывороток крови методом ИФА с предварительной диссоциацией иммунных комплексов в пробах.

8. Разработанный способ диссоциации иммунных комплексов в пробах сыворотки крови и молока позволяет повысить чувствительность методов ИФА до 20%. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота методом ИФА для выявления специфических антител в молоке, с предварительной диссоциацией ЦИК, не уступает по чувствительности и специфичности современным узаконенным методам диагностики этой инфекции. Данный метод, как экономически более выгодный, может применяться для мониторинга эпизоотической ситуации в хозяйствах.

9. В сыворотке крови и молоке инфицированных ВЛЕСРС коров выявляются иммунные комплексы, содержащие провирусные ДНК. Данный факт раскрывает новые аспекты патогенеза данного заболевания. Про-вирус содержащие иммунные комплексы появляются в основном, в более поздних стадиях болезни, при выраженной вирусемии организма, когда животное становится потенциально опасным источником перезаражения стада. Гематологические изменения в этот период могут оставаться стабильными. Поэтому при лейкозе крупного рогатого скота окончательная постановка диагноза должна быть направлена на обнаружение ДНК вируса в ЦИК методом ТТЦР.

10. Обнаруживаемые в молоке от инфицированных ВЛКРС коров циркулирующие иммунные комплексы, содержащие провирусную ДНК, а также специфические антитела, связанные в иммунных комплексах, являются важным критерием для оценки контаминации сборного молока в лабораториях предприятий по переработке молока и молочных продуктов.

11. Антитела против антигенов ВЛКРС проявляют гомологич-ность белкам гена gag ВИЧ в иммунохимической реакции. Степень гомологии анти-ВЛКРС антител к полипептидам ВИЧ резко меняется с развитием инфекционного процесса. На разных стадиях развития иммунитета при лейкозе крупного рогатого скота спектр свободно циркулирующих в сыворотке крови антител меняется, что свидетельствует о недостаточной эффективности серологических методов, основанных на выявление антител только против одного антигена.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. Методические рекомендации по оценке контаминации молока вирусом лейкоза крупного рогатого скота, утвержденные научно-техническим советом ФГОУ ВПО «КГАВМ» и ученым советом ГНУ ВНИИВСГЭ и секцией «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (2011);

2. Методические рекомендации по оценке благополучия хозяйств по лейкозу крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа (ИФА) молока, утвержденные научно-техническим советом ФГОУ ВПО «КГАВМ», Главного управления ветеринарии Кабинета Министров Республики Татарстан и представленные в Федеральную службу по ветеринарному и фитосанитарному надзору МСХ РФ для утверждения в установленном порядке (2011);

3. Методические рекомендации по дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота методом ИФА, утвержденные научно-техническим советом ФГОУ ВПО «КГАВМ», Главного управления ветеринарии Кабинета Министров Республики Татарстан и представленные в Федеральную службу по ветеринарному и фитосанитарному надзору МСХ РФ для утверждения в установленном порядке (2011);

4. Методические рекомендации по диагностике лейкоза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа сыворотки крови и молока, утвержденные научно-техническим советом Главного управления ветеринарии Кабинета Министров Республики Татарстан (2008);

5. Тест-система иммуноферментная для выявления специфических антител против микобактерий (методические рекомендации, утв. НТС КВИ, 1993);

6. Тест-система иммуноферментная для типизации микобактерий (методические рекомендации, утв. НТС КВИ, 1993);

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Своевременная и точная диагностика туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота была и остается залогом успеха в борьбе с этими инфекциями. Качество массовых диагностических исследований, по результатам которых проводится оздоровление хозяйств, на сегодняшний день остаётся недостаточно эффективным.

В своей работе, мы рассматривали некоторые аспекты диагностических методов применяемых при этих заболеваниях в целях их усовершенствования и повышения экономической эффективности противотуберкулезных и противолейкозных мероприятий проводимых в хозяйствах.

На сегодняшний день из современных методик наиболее доступными для массовых исследований по диагностике инфекционных заболеваний являются методы иммуноферментного анализа. Несмотря на свою высокую специфичность и чувствительность методы ИФА в настоящее время не нашли широкого применения как в диагностике туберкулеза, так и в диагностике лейкоза крупного рогатого скота. Одним из сдерживающих факторов при этом является специфичность применяемых антигенов и антител.

Методами электрофореза, иммуноблоттинга и хроматографии изучали антигенную структуру микобактериальных культур. По результатам исследований оказалось, что наиболее подходящими для получения антигенных препаратов являются автоклавированные микобактериальные культуры. Под действием высокой температуры высокомолекулярные белковые фракции денатурируют. Так, ДМСО-антиген живой культуры М. Ьоуіб на электрофореграммах в 15% ПААГ содержит 63 фракций, а ДМСО-антиген автоклавированной М. Ьоуіб — 51. Кроме того, как показал иммуноблот анализ и по сероактивным фракциям они не совпадают.

Основываясь на полученные результаты разработали способы получения микобактериальных антигенов достаточно высокой специфичности и чувствительности, позволяющих их использовать для диагностики и дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота (ДМСО-антигены).

Иммуноблоты ДМСО-антигенов автоклавированных микобактерий с гипериммунными сыворотками против гомологичных антигенов показали, что большинство сероактивных фракций располагаются в диапазоне от 20 до 65 кД. Количество иммуногенных фракций у разных антигенов по-разному, при этом — мажорных 5−6, а минорных до 10. Большинство общих для всех видов микобактерий антигенных фракций лежат в диапазонах 40−60кд и 20−35 кД. Фракция с Мм 60 кД является характерной только для антигена M. bovis и М.tuberculosis. Выделение этой фракции и использование её в серологических реакциях повысит специфичность методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.

Иммуноблот ДМСО-антигена M. bovis с сыворотками от коров реагирующих на ППД туберкулин, и с сыворотками от больных туберкулезом людей показали, что данный метод успешно может использоваться в прижизненной диагностике и дифференциальной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота, а также туберкулеза у людей.

В целях сравнительного изучения иммуногенности фракций ДМСО-антигенов и ППД-туберкулинов использовали хроматографические методы исследований: ионообменную хроматографию на ДЕАЕ-целлюлозе и гельфильтрацию на сефадексе G-200. Если результаты ионообменной хроматографии, по части специфических фракций, были сопоставимы имму-ноблотанализом (для M. bovis 25фракция — Мм бОкД), то при гельфильтра-ции наиболее специфичными оказались низкомолекулярные фракции. Так, фракция ППД-туберкулииа с Мм 15 кД может быть использована в дифференциальной диагностике туберкулеза животных.

Метод ИФА, с использованием специфических антисывороток, перспективен для выявления и типизации микобактериальных антигенов в патологическом материале от больных туберкулезом животных. Для повышения специфичности полученных иммунных сывороток использовали иммуносорбентную очистку иммунных сывороток. В результате, применение в ИФА гипериммунных сывороток против ДМСО-антигенов микобак-терий истощенных белково-глутаральдегидным иммуносорбентом позволяло дифференцировать микобактериальные антигены с коэффициентами специфичности от 3,6 до 4,5, что позволяет их при типизации этих штаммов.

Используя полученные антигены исследовали методом ИФА пробы сывороток крови коров из различных по эпизоотической ситуации хозяйств.

Обобщая результаты исследований можно сказать, что степень достоверности выявления больных туберкулезом животных аллергической пробой составила 69,7%. Если наряду с аллергическим методом диагностики туберкулеза применять и иммуноферментный метод анализа сывороток крови, то степень достоверно выявленных больных туберкулезом животных составляет 92,4%.

Таким образом, нашими исследованиями установлено, что иммуноферментный анализ сывороток крови животных дает дополнительную информацию к аллергическим исследованиям. Повышается эффективность диагностических мероприятий, что выражается в увеличении количества достоверно выявленных больных туберкулезом животных.

В целях производственного испытания эффективности полученных антигенов в дифференциальной диагностике туберкулеза крупного рогатоI го скота методом ИФА исследовали пробы сывороток крови реагирующих на туберкулин коров из различных хозяйств РТ. Для подтверждения полученных данных совместно ГУВ РТ и Республиканской ветеринарной лабораторией были проведены ряд диагностических мероприятий, в том числе производился контрольный убой животных с последующим исследованием патматериала на выделение чистой культуры возбудителя.

Обобщая полученные результаты, можно сказать, что иммунофер-ментный анализ с использованием ДМСО (м)-антигенов успешно может быть использован в прижизненной дифференциальной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота. Специфичность ДМСО (м)-антигена М. Ьоу1з составляет более 90%.

Эффективность ИФА диагностики туберкулеза с применением ДМСО (м)-антигенов микобактерий была изучена в сравнении с ПЦР. Была исследована эпизоотическая ситуация в 38 хозяйствах РТ.

Полученные данные свидетельствуют о том, что по обнаружению противотуберкулезных сывороточных антител методом ИФА, не всегда удается правильно диагностировать туберкулез крупного рогатого скота. ПЦР в этом отношении является более чувствительным и специфичным методом. Однако, методы ИФА могут помочь в определении статуса стада по туберкулезу. Особенно ценны методы ИФА в ранней диагностике туберкулеза.

Лейкоз крупного рогатого скота относится к числу наиболее распространенных хронических инфекционных болезней сельскохозяйственных животных во многих странах мира, включая Россию. Доля лейкоза в структуре инфекционной патологии крупного рогатого скота составляет более 50%. Уровень инфицированности крупного рогатого скота ВЛКРС составляет в среднем по стране 10,5%, а в отдельных регионах достигает 20−40% и выше.

Вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) относится к семейству ретровирусов, роду дельтаретровирусов. Геномная молекула РНК.

BJIKPC не инфекционна, тогда как вирион, в котором находятся две таких молекулы РНК, ею обладает. Транскрипция вирусных иРНК возможна только, если вирусная ДНК встроена в геном клетки, и она чаще происходит в незрелых В-лимфоцитах, чем зрелых (Н.З.Хазипов, Р. П. Тюрикова, 2008). Если провирус оказывается в активной зоне хромосомы, он может функционировать сразу, если в молчащей — то длительное время может себя не проявлять. Это зависит от многих факторов в конкретной клетке соответствующей фазе её развития.

Изучение гуморального и цитотоксического ответа на ВЛКРС инфекцию показало, что постоянным и характерным признаком инфицированно-сти животных является наличие антител к антигену ВЛКРС, следовательно, одним из важных моментов в диагностике лейкоза крупного рогатого скота является выявление инфицированных животных с помощью разных серологических методов.

В настоящее время согласно стандартам МЭБ (OIE. World Animal Health in 2005) узаконенными методами диагностики лейкоза крупного рогатого скота являются реакция иммунодиффузии в геле агара (РИД) и метод иммуноферментного анализа (ИФА). Ранее считали, что применение ИФА для выявления анти-ВЛКРС антител ограничено коротким промежутком времени, так как уровень специфических антител растет очень быстро и в связи с этим все методы диагностики равны по эффективности. Отчасти это действительно так, если иметь дело с классическим течением инфекционного процесса, однако существует немало факторов, влияющих на их чувствительность. К ним относятся инкубационный период болезни, продолжительность которого может быть до 2 месяцев, и вторичные им-мунодефициты, обусловленные преди послеродовым периодом у коров, некоторыми инфекционными и инвазионными болезнями, применением живых вакцин, а также особенности образования специфических антител и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК).

Известно, что при хронических инфекциях, вызванных вирусами семейства Retroviridae, в биологических жидкостях организма появляются иммунные комплексы «антиген-антитело», которые имеют определенное значение в патогенезе этих инфекций.

Связывание вирусов антителами, лишенными нейтрализирующей активности, имеет одно необычное патологическое следствие: эти иммунные комплексы в результате взаимодействия с Fc-рецепторами поглощаются макрофагами, в которых вирус восстанавливает свою инфекцион-ность (А.В.Абелян, 1997). Вполне возможно, что одна из причин «феномена рецидивов» ВЛКРС инфекций в ранее оздоровленных стадах именно в этом. Кроме того, в результате исследований по выяснению структуры ЦИК нами доказано, что иммунные комплексы могут содержать провирус-ную ДНК вируса лейкоза крупного рогатого скота. Роль этих комплексов в патогенезе ВЛКРС инфекции не известна. Возможно, они формируются в процессе гибели инфицированных B-лимфоцитов путем соединения не встроенных в геном вирусных ДНК с поверхностными IgM, обладающими высокой аффинностью к ДНК. Очевиден тот факт, что появляются они в более поздних стадиях болезни при выраженной вирусемии организма, когда животное становится потенциально опасным источником перезаражения стада. Гематологические изменения в этот период могут оставаться стабильными. Поэтому при лейкозе крупного рогатого скота окончательная постановка диагноза должна быть направлена на обнаружение ДНК вируса в ЦИК методом ПЦР, что исключит необходимость гематологических исследований и повысит эффективность противолейкозных мероприятий.

Иммунные комплексы в сыворотке крови человека и животных могут формироваться из любых классов или подклассов иммуноглобулинов. По данным Н. Ungar-Waron et al. (1992) иммунные комплексы в сыворотке крови ВЛКРС-серопозитивных коров содержат антигены вируса и IgG и.

Соотношение антител в комплексах («связанные антитела») меняется с возрастом животного и стадией болезни. При уменьшении титров свободных антител наблюдается, в большинстве случаев, увеличение титров «связанных» антител, т. е. повышается степень образования циркулирующих иммунных комплексов. При этом титры свободных антител могут снижаться до минимальных значений. Эти данные свидетельствуют о том, что разовые серологические тесты в диагностике лейкоза могут быть не эффективными.

Изучению ЦШС в сыворотке крови и молоке при лейкозе крупного рогатого скота посвящен ряд исследований отечественных и зарубежных исследователей. Большинством из них отмечается, что определение ЦИК имеет большое значение в мониторинге эпизоотической ситуации по лейкозу и может служить индикатором инфицированности животных вирусом.

Диагностика лейкоза крупного рогатого скота методом иммунофер-ментного анализа с выявлением специфических антител в составе иммунных комплексов в сыворотке крови и молоке является весьма перспективным в повышении эффективности диагностических мероприятий и ликвидации этого заболевания.

Существуют различные способы диссоциации иммунных комплексов, которые основаны, главным образом на изменение значений рН и ионной силы раствора, на применение ферментов и др. Однако все эти методы приводят к снижению биологической активности антител и, в конечном итоге, к резкому снижению чувствительности сеологических методов при их определении.

Нами разработан способ обработки проб сыворотки крови и молока позволяющий диссоциировать ЦИК при лейкозе и выявлять в ИФА «связанные» антитела без изменения их активности. В своих ранних исследованиях, методом осаждения в ПЭГ, нами были выделены иммунные комплексы, как в пробах сыворотки крови, так и молока от больных лейкозом коров. Активность «связанных» антител изучали в ИФА и титры достигали до 1:1024. Определение специфичных антител в составе иммунных комплексов позволяет увеличить достоверность выявления больных лейкозом животных по сравнению с традиционно применяемым методом обнаружения свободных антител в сыворотке крови и молоке не менее чем на 20%.

Важным преимуществом иммуноферментных методов перед РИД является то, что ИФА, будучи более чувствительным, позволяет выявлять специфические антитела в пробах молока, молозива и сборного молока. Если учесть доступность и простоту выполнения данного метода, а также трудности, связанные с взятием крови и созданием стрессовых ситуаций для животных, то исследования проб молока и сборного молока являются привлекательными для оценки благополучия хозяйств (мониторинга) по лейкозу крупного рогатого скота.

Возможность повышения чувствительности данного метода, путем предварительной диссоциацией иммунных комплексов в исследуемых пробах, открывает большие перспективы для широкого применения его в практике, как менее трудоемкого. ИФА молока с предварительной диссоциацией ЦИК по чувствительности превосходит РИД анализ в диагностике лейкоза, что в конечном итоге проявляется в более полном выявлении инфицированных ВЛКРС животных. Особенно ценен данный метод для мониторинга эпизоотической ситуации в хозяйствах по сборному молоку.

Считается, что уровень специфических антител отражает степень активности инфекционного заболевания. У зараженных ВЛКРС животных в крови циркулируют антитела к р24, р15, р12, р10, gp30, ёр51 и другим антигенам. В настоящее время большинство серологических реакций применяемых в диагностике лейкоза крупного рогатого скота направлены на выявление анти^р51 антител. Однако титры и спектр антител меняется с развитием инфекционного процесса.

Одним из доказательств этого утверждения являются результаты наших исследований по определению степени активности и спектра антител против ВЛКРС в иммунохимических реакциях с антигенами вируса иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2). При этом установлено, что антитела против антигенов ВЛКРС перекрестно реагируют с как неструктурными (р55, р40), так и структурным (р24/25) белком гена gag ВИЧ в иммунохимической реакции. Степень гомологии анти-ВЛКРС антител к полипептидам ВИЧ резко меняется с развитием инфекционного процесса. Увеличение титра антител против gp51 ВЛКРС в крови у больных лейкозом коров не всегда сопровождается увеличением титра перекрестно-реагирующих антител к антигенам ВИЧ. На разных стадиях развития иммунитета при лейкозе крупного рогатого скота спектр свободно циркулирующих в сыворотке крови антител меняется.

Данный факт свидетельствует о недостаточной эффективности серологических методов, основанных на выявление антител только против одного антигена.

В заключении следует отметить, что наиболее перспективным, в исключении недостатков существующих методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота, может являться применение методов иммуноблот анализа.

Иммуноблотинг позволит изучать титры и спектр антител против всех антигенов ВЛКРС, а также продуктов их расщепления. Изучение спектра и динамики образования антител, ЦИК в крови и молоке животных по стадиям развития инфекции, определение взаимосвязи между антительным спектром и появлением в ЦИК провирусной ДНК позволили бы стандартизировать параметров и разработать тест-систему для диагностики лейкоза методом иммуноблотинга. Такая тест-система способна при массовых исследованиях заменить все серологические и гематологические методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Показать весь текст

Список литературы

  1. А.В. Иммунологическая нейтрализация вируса иммунодефицита человека первого типа/ А.В.Абелян// Успехи современной биологии, 1997. — Т. 117. — № 5. — с.549−967.
  2. В.Г., Грязнева Т. Н., Берестова Ю. О., Аракелов А. Б. Получение хроматографических фракций антигенов M.bovis 8 и их диагностическая оценка//Ветеринарная патология, 2003.-№ 1.-с.121−124.
  3. M.M. Иммуногенетика инфекционных заболеваний /М.М. Авербах, В. И. Литвинов, А. М. Мороз //М.: Медицина, 1985.-253 с.
  4. М.М. Иммунология и иммунопатология туберкулеза / М. М. Авербах. -М.: Медицина, 1976. -312 с.
  5. М.М. Новые туберкулино-провокационные тесты в выявлении скрытой активности туберкулезного процесса /М.М.Авербах,
  6. A.Е.Рабухин, А. С. Борзенко, и др.// Проблемы туберкулеза, 1976. № 2. — С. 26−27.
  7. М.М. Повышенная чувствительность замедленного типа инфекций и инфекционный процесс / М. М. Авербах, В. Я. Гергерт,
  8. B.И. Литвинов. -М.: Медицина, 1975. 248 с.
  9. М.М. Циркулирующие иммунные комплексы и микобакте-риальные антигены в крови больных туберкулезом легких / М. М. Авербах, Р. Ю. Романова, А. Б. Инсанов // ЖМЭИ, 1984. № 12.1. C.91−94.
  10. В.М. Проблемы оздоровления крупного рогатого скота от лейкоза / В. М. Авилов, В. М. Нахмансон // Ветеринария, 1995. № 11.-С. 3−6
  11. Адо А. Д. Общая аллергология / А. Д. Адо.- М., 1978. 427 с.1L Адо А. Д. Общая аллергология /А.Д. Адо. М., 1970. — 543 с.
  12. А.М. Специфические и универсальные праймеры для индикации и идентификации возбудителей бактериальных инфекций / A.M. Алимов, Т. Х. Фаизов, А.З.Равилов// Сб. тезисов докладов 3-й всерос. научно-прак.конф., Москва, 2000.-С.339.
  13. A.M. Влияние термообработки молока на выявляемость провирусной ДНК ВЛКРС в ПЦР/ А. М. Алимов, Т. Р. Якупов, И. Р. Гибадулина // Ученые записки КГАВМ, Казань, 2011.- т.205,-с.3−6.
  14. М.А. Осчновные положения комплексной системы оздоровления и профилактики лейкоза крупного рогатого скота на сельхозпредприятиях Новосибирской области / М. А. Амироков, В. В. Храмцов, С.Н.Магер// Ветеринарный врач, 2007 № 3.- С. 5−6.
  15. Андросова М. В. Иммунологический метод идентификации M. tuberculosis и M. bovis на основе применения моноклональных антител/ М. В. Андросова, М. А. Владимирский, Г. И. Алексеева //Проблемы туберкулеза, 1989.-№ 1.
  16. А.Б. Получение антигена МРВ83 Mycobacterium bovis для диагностики туберкулеза животных методом ИФА/ А.Б.Аракелов// Диссер.канд.биол.наук, Москва, 2006.
  17. А.К. Эффективность применения метода селекции в борьбе с лейкозом крупного рогатого скота / А. К. Аузиня // Лейкоз крупного рогатого скота, Рига. 1974. — С.90−93.
  18. А.И. Антитела к антигенам микобактерий у больных туберкулезом легких / А. И. Аутеншлюс, А. Н. Шкунов // Проблемы туберкулеза, 2004.-№ 11.-е. 37−39.
  19. Т.М. Видоспецифическая и иммунохимическая характеристика антигенов М.ЬоугБ: Дис.. канд. биол. наук / Т.М. Ахметов- Каз. вет. ин-т. Казань, 1990.
  20. К.К. Выживаемость микобактерий туберкулеза бычьего вида во внешней среде / К. К. Байгарин // Вестник с/х науки Казахстана, 1988. № 4. -С.78−80.
  21. И.Н. К мероприятиям по оздоровлению ферм крупного рогатого скота от лейкоза // сб. науч. тр. ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии / И. Н. Барабанов, В, Ф. Гричко, В.М. На-хмансон и др. М.-1994. — Т.93. — Ч.П. — С.52−59.
  22. О.В. Некоторые теоретические концепции иммунологии в период становления ее как науки / О. В. Бароян // Эпидемиологические аспекты современной иммунологии: Сб. ст. — М.: Медицина. 1972.-С. 42−47.
  23. О.В. Эпидемиологические аспекты современной иммунологии / О. В. Бароян // Вестник академии мед. наук СССР. 1974. — С. 70−79.
  24. Н.Д. Инфекционная аллергия / Н. Д. Беклемишев. Алма-Ата: Наука, 1968. — 375 с.
  25. В.И. Лабораторная диагностика туберкулеза животных в РФ / В. И. Белоусов, М. В. Калмыков, Л. А. Таранова // Ветеринарная патология, 2004. № 1−2. — С. 23−25.
  26. В.М. Влияние организационных мер борьбы на оздоровление хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / В. М. Беляров // Тез. докл. Всесоюзн. науч.произв. конф. Новосибирск.-1990.- С. 1617.
  27. Билько И. П. Современные представления об ультраструктуре и функции клеточной стенки микобактерий туберкулеза /И.П.Билько, В. Г. Матусевич //Пробл. туберк., 1986. № 9. 93 с.
  28. Я.А. Туберкулез как антропозооноз / Я. А. Благодарный. Алма-Ата, 1976. 44 с.
  29. Е.Ф. Некоторые данные серологических исследований крупного рогатого скота в неблагополучных по лейкозу хозяйствах / Е. Ф. Бражин, Н. П. Бармашов //Бюлл.ВИЭВ, 1979. В.36. — С.24−25.
  30. В.А. Микобактериоз вызванный M.fortuitum у крупного рогатого скота / В. А. Бродилкин, В. Г. Сафронов, H.A. Мякин // Профилактика и лечение инфекционных и инвазионных заболеваний с/х животных в Нечерноземье.- Горький, 1988. С. 14−16.
  31. А.Ф. Борьба с лейкозом крупного рогатого скота / А.Ф. Буб-лий // Ветеринария, 1980, № 11.- С.34−35.
  32. Л.Г. Временные методические рекомендации по постановке реакции иммунодиффузии для выявления антител к антигену р24 он-корнавируса в сыворотках крови крупного рогатого скота при диаг1 ностике лейкоза / Л. Г. Бурба, А. Ф. Валихов. М., 1976.- 7 с.
  33. Л.Г. Научные основы программы профилактики и борьбы с лейкозами животных / Л. Г. Бурба, В. М. Нахмансон, А. Ф. Валихов // сб. науч. тр. ВИЭВ, 1982.-Т.55. С. 16−20.
  34. В.А. О генетической предрасположенности к лейкозу, к внутриутробной и «горизонтальной» передачи его у крупного рогатого скота / В. А. Бусол, H.H. Доронин, Н. С. Мандыгра и др.// Тез.докл.Всесоюзн.конф. Рига, 1973. — С.32−33.
  35. В.А. Результативность оздоровления неблагополучных по лейкозу стад в Украинской ССР / В. А. Бусол //Тез. докл. респб. на-уч.произ. конф.- Белая Церковь.-1976. С. 63−64.
  36. Бусол В.А.Тест-система для выявления ВЛКРС полимеразной цепной реакцией / В. А. Бусол, О. Ю. Лиманская, А. П. Лиманский, В. И. Цымбал // Ветеринария, 1999.-№ 6.-с.27−30.
  37. А.Ф. Морфология, антигенные свойства вируса и серологическая диагностика онкорнавирусной инфекции крупного рогатого скота: Автореф. дис. д-ра биол. наук / А. Ф. Валихов. Москва, 1978. — 15 с.
  38. А.Ф. Сывороточные преципитирующие антитела к онкор-навирусу типа С / А. Ф. Валихов // Ветеринария, 1976. № 1. — С. 4346.
  39. Л.И. Иммуноферментный метод его настоящее и будущее / Л. И. Ванеева, Н. В. Цветкова // Иммуноогия, 1980. -№ 2. С. 13−19.
  40. В.Н. Микобактериозы и микозы легких / В. Н. Васильев // Медицина и физкультура. — София, 1971. 383 с.
  41. О. А. Иммуноферментный анализ в диагностике лейкоза крупного рогатого скота / О. А. Верховский, В. В. Цибезов, М. В. Баландина, И. В. Непоклонова//Ветеринария, 2002.-№ 12
  42. Ю.К. Биология и изменчивость микобактерий туберкулеза и атипичных микобактерий / Ю. К. Вейсфейлер // Будапешт: АН Венгрия, 1975. 335с.
  43. Ю.К. Биология и изменчивость микобактерий туберкулеза и атипичные микобактерии / Ю. К. Вейсфейллер. (Пер. с нем.). -М., 1975.-334 с.
  44. Е.Б. Особенности выделения ДНК для полимеразной цепной реакции при туберкулезе внелегочных локализаций / Е. Б. Вишневская // Проблемы туберкулеза, 1998. № 5. — С. 40−42.
  45. Вишневский Б.И. M. avium как возбудитель заболевания людей / Б. И. Вишневский, Т. Б. Ильина // Актуальные вопросы микробиологии туберкулеза: Сб. ст. Москва, 1975. — С. 145−151.
  46. П.П. Туберкулез крупного рогатого скота/ П.П.Врішнєвский// Москва, 1951 .-248с.
  47. И.Ф. Иммуноферментный анализ / И. Ф. Вишняков, Л. Я. Цибанова // Ветеринария. -1983. № 9. — С. 303−306.
  48. В.В. Микробиология туберкулеза в фокусе проблем современности / В. В. Власенко. Винница, Гипанис, 1999.
  49. Воспаление, иммунитет и гиперчувствительность- под ред. Мовэта Г. З. М.: Медицина. — 1975. 560 с.
  50. Р.Ф. Теоретическое обоснование, экспериментальное подтверждение путей передачи вируса лейкоза крупного рогатого скота, усовершенствование методов диагностики и мер борьбы с ним: Дис.. д-ра вет. наук / Р. Ф. Галлеев. -Уфа, 2000. — 276 с.
  51. Г. Х. Нетуберкулезные микобактерии и аллергическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота / Г. Х. Гизатуллин, М. А. Сафин // Тезисы докл. Респ.науч.-произв.конф.по туберкулезу. -Минск, 1977. С. 34−36.
  52. Г. Х. О туберкулиновых реакциях, обусловленных атипичными микобактериями / Г. Х. Гизатуллин, Б. Л. Мазур, М. А. Сафин // Ветеринария, 1972. № 9. — С. 52−53.
  53. М.И. Эпизоотологическая оценка методов прижизненной диагностики лейкоза КРС / М. И. Гулюкин, Е. А. Дун, Н. В. Баркова, Н. И. Петров, С.М. Пау// Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. -2000. -№ 3. -С. 60−62.
  54. М. И. Разработка эффективных мероприятий против лейкоза крупного рогатого скота/ М. И. Гулюкин, Л. А. Иванова, Н. В. Замараева, Н. В. Баркова, Г. П. Грек, В. А. Храмцов, А. Донченко.// Ве-теринария-№ 12. -2002.-С.З
  55. М.И. Обзор эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота / М. И. Гулюкин, Г. А. Симонян, Н.А.Ажиркова// Ветеринарная жизнь", 2005- № 6.
  56. М.И. Исключить крайности в проведении противоэпизо-отических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота / М. И. Гулюкин // Ветеринарный консультант, 2005. № 13. — С. 4 — 6.
  57. М.И., Симонян Г. А., Иванова Л. А. и др. Система мониторинга лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации / Под редакцией академика РАСХН М. И. Гулюкина ВИЭВ, Москва, 2007.
  58. Н.Г. Сравнительный анализ разных коммерческих тест-систем и методов в диагностике ВЛКРС/Н.Г.Двоеглазов// Матер. Сибирской междунар.науч.прак.конф.:"Актуальные вопросы ветеринарии". Новосибирск.-2004.-С.304−309.
  59. B.K. Система борьбы с эпизоотологией лейкоза крупного рогатого скота и результаты её реализации в районе / В. К. Двойников, П. Н. Смирнов // Ветеринария, 1994. № 12. — С. 6−9.
  60. М.Ф. Диагностическая ценность полимеразной цепной реакции при туберкулезе / М. Ф. Дзадзиева, Н. В. Жебуртович, A.JI. Бе-седнов и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и микробиологии. 1997. — № 5. — С. 85−87.
  61. .Б. Гетерогенные методы иммуноферментного анализа / Б. Б. Дзантиев // Бюллетень ВИЭВ. -1985. Вып. 58. — С. 10−22.
  62. И.С. К вопросу эпизоотологии лейкоза крупного рогатого скота/И.С. Докукин//науч.тр. КВИ, 1971.-Т.136.- С.5−6.
  63. И.С. Краевая эпизоотология, диагностика и меры борьбы с гемабластозами крупного рогатого скота: Автореф. дис.. д-ра вет. наук / И. С. Докукин. Казань, 1989. — 34 с.
  64. И.М. Иммунный статус крупного рогатого скота, инфицированного вирусом лейкоза/ И. М. Донник, E.H. Шилова, В.Б. Шилов/Материалы международного ветеринарного конгресса 2005 г. Новосибирск.- с. 129
  65. И.М. Региональная молекулярно-генетическая структура вируса лейкоза крупного рогатого скота/ И. М. Донник, М.В.Петропавловский// Ветеринария Кубани, 2010. № 3. — С. 1213.
  66. И.М. Опыт борьбы с лейкозом КРС в Уральском регионе/ И. М. Донник, А. Т. Татарчук, Б. М. Коритняк, С.С.Миронов//Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, 2009.-№ 1.-С. 57−60.
  67. A.C. Внутривенная туберкулиновая проба у кроликов / A.C. Донченко, A.C. Лапыко // Вестник с/х наук, 1971-№ 8- С. 56−60.
  68. A.C. Научно-практические основы профилактики туберкулеза крупного рогатого скота/ A.C. Донченко // Сибирский вестник с.-х. науки. 2004. — № 3. — С. 81−88.
  69. А. С. Дифференциальная диагностика туберкулиновых реакций в благополучных по туберкулезу хозяйствах: Методические рекомендации / A.C. Донченко, H.A. Донченко, Колосов А. А // Новосибирск, 2002.
  70. H.A. Усовершенствование средств и методов диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. .д-ра .вет. наук / H.A. Донченко. Новосибирск, 2008.
  71. P.O. Микробиология туберкулеза / P.O. Драбкина // М.: Медгиз, 1963.-148 с.
  72. М.М. Сравнительное изучение и методы дифференциации микобактерий туберкулеза: Автореф. дис.. канд. вет. наук / М.М. Дыхно- М., 1964. — 29 с.
  73. A.A. Научные основы и практические подходы к разработке новых средств аллергической диагностики и специфической профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис.. .д-ра вет. наук / A.A. Евглеевский- С.-Петербург, 1997.
  74. О.В. Эффективность серологических методов исследования при лейкозе крупного рогатого скота / О. В. Иванов, О. Ю. Иванова, В .П. Федотов и др. // Ветеринария, 2008.- № 7. С. 6−8.
  75. JI.A. Выявление иммунного ответа на вирус лейкоза крупного рогатого скота иммуноферментным методом /Л.А.Иванова// Автореф.дисс.канд.наук. М.-2000.
  76. Т.Б. Бактериологическая и биохимическая идентификация микобактерий / Т. Б. Ильина // Методические рекомендации. Москва, 1975.-21 с.
  77. H.H. Цитогенетический гомеостаз и иммунитет / H.H.
  78. , И.Н. Ильинских, Е.Ф. Бочаров// Новосибирск: Наука, СО. 1986. -254 с.
  79. А.И. О взаимоотношении туберкулеза человека и с/х животных / А. И. Каграманов // Проблемы туберкулеза, 1968. № 2. -С. 16−18.
  80. A.M. Дифференциация и идентификация микобактерий / A.M. Кадочкин // Ветеринария. 1984. — № 9. — С. 62−63.
  81. A.M. Современные данные о возбудителе туберкулеза / A.M. Кадочкин, H.A. Иванова // Ветеринария, 1983. № 6. — С. 30−32.
  82. М.С. Диагностическая ценность ПЦР тест-систем при туберкулезе животных: Автореф. дис.. канд. вет. наук / М. С. Калмыкова. Москва, 2007.
  83. H.H. О роли противотуберкулезных антител к различным химическим субстанциям возбудителя / H.H. Каплин, С. Н. Головачева // Проблемы туберкулеза, 1977. № 5. — С. 64−66.
  84. И.А. Аллергические реакции у телят, зараженных атипичными микобактериями туберкулеза / И. А. Каркадиновская, В. П. Урбан, М. М. Широбокова и др. // Сб. материалов XV научной конференции Ленингр.вет.института. -Ленинград, 1966. С. 16−18.
  85. Ю.Я. Комплексная диагностика туберкулеза / Ю. Я. Кассич, А. Т. Борзяк // Ветеринария, 1985. № 4. — С. 28−29.
  86. К.П. Липосомы как носители полифункциональных имму-ногенов / К. П. Кашкин, В. И. Куликов, Г. А. Голованова и др. // Укр.биохим.журнал. 1987. — Т.59. — № 4. — С.1 009 107.
  87. , И. С. Возможность применения стандартной тест-системы иммуноферментной для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / И. С. Кислицына, Е. Ю. Поливодина, Е. В. Сидорин // Ветеринарная патология, 2003. № 1. — С.115−117.
  88. Г. К. О дифференциации микобактерий туберкулеза / Г. К. Ковалев // Ветеринария, 1984. № 3. — С. 72−73.
  89. С.Г. Биологические и химиотерапевтические ветеринарные препараты/С.Г. Колесов, Н. В. Лихачев Москва, 1963.-321 с.
  90. Л.Б. Современная характеристика кислотоустойчивых микобактерий, выделяемых от крупного рогатого скотаи ее значение в диагностике туберкулеза: Автореф. дис. канд. вет. наук / Л.Б. Колокшанская- Белая Церковь, 1973. — 2 с.
  91. А.Г. Изучение роли молока больных лейкозом коров в горизонтальной передаче лейкоза крупного рогатого скота / А. Г. Коломиец, М. И. Парфанович, М. Д. Коломиец и др. // Вестник АН БССР, 1979.- № 6. С. 93−99.
  92. Н.М. Индикация и обезвреживание микобактерий туберкулеза во внешней среде/ Н.М.Колычев// Омск, 1992.- С. 302.
  93. П.Ф. Эффективность противолейкозных мероприятий с использованием серологического метода диагностики: Теоретические и практические вопросы ветеринарии / П. Ф. Колчин, Г. А. Си-монян. Тарту, 1987. — С. 14−15.
  94. B.C. Оценка реакции иммунодиффузии в комплексе клинико-лабораторных методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота / B.C. Кондратьев, М. А. Хафез // Профилактика и ликвидация заразных болезней с-х животных, Л., 1985.- С.25−31.
  95. М.К. Иммунология и иммунопатология туберкулеза: Автореф. дис. д-ра. мед. наук / М.К. Копылова- М., 1970. — 38 с.
  96. Г. Ф. Биохимические и иммунологические тесты для прижизненной диагностики лейкозов крупного рогатого скота:
  97. Этиология и иммунодиагностика лейкозов крупного рогатого скота / Г. Ф. Коромыслов, Н. М. Климов, И. И. Яременко и др.- Рига, 1979.- С. 84−88.
  98. Г. Ф. Иммуноферментный анализ и применение его в ветеринарии / Г. Ф. Коромыслов, B.C. Авилов // Бюллетень / ВИЭВ. -1985. Вып.58. — С. 6−9.
  99. Т.В. Липиды микобактерий и родственных микроорганизмов /Т.В. Коронели// М.: МГУ, 1984. С. 18−68.
  100. В.А. Заражение телят вирусом лейкоза крупного рогатого скота через слизистые оболочки глаз и носоглотки / В. А. Крикун, М. К. Бутуев, В. П. Шишков // Сб. науч. тр. MB А. М., 1984. -С.13−17.
  101. В.А. Специфическая профилактика лейкоза крупного рогатого скота/ В. А. Крикун, Т. В. Щекотурова // Бюллетень ВИЭВ.-1996.-№ 77.-С.49.
  102. В.Н. Атипичные быстрорастущие микобактерии и их роль в патологии крупного рогатого скота: Автореф. дис.. канд. вет. наук / В. Н. Кудяков. -М., 1984. с.
  103. А.И. Оздоровление животноводческих хозяйств от туберкулеза / А.И. Кузин// М.: Россельхозиздат, 1987. — 141 с .
  104. А.И. Туберкулез сельхоз животных и его профилактика /А.И. Кузин// М.: Агропромиздат, 1992. 189 с.
  105. P.A. Горизонтальная трансмиссия лейкоза крупного рогатого скота онкорнавирусами типа С. / P.A. Кукайн, Л.И. Нашае-ва, C.B. Чапенко и др.// Известия АН Латв.ССР.-1975.-№ 11. С. 4044.
  106. Ф.Р. Совершенствование методов дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота: Дис.. канд. вет. наук / Ф. Р. Латыпов. Н. Новгород, 2008.
  107. В.И. Выделение иммуносорбентной аффинной хроматографией антигена из M.bovis (BCG), его характеристика и использование для определения противотуберкулезных антител/ В. И. Литвинов, Л. Н. Черноусова, Б.Ш.Гильбург//Иммунология, 1988.-№ 5.-с.46−48.
  108. С.И. Иммунные комплексы при лейкозе крупного рогатого скота/ С.И.Логинов// Ветеринарная патология: Современные достижения и проблемы клеточной биотехнологии и иммунологии в ветеринарной медицине, 2003 № 1.- с.85−87.
  109. А.П. Специфические антигены различных штаммов M.bovis/А.П. Лысенко//Ветеринария, 1987,-№ 5.-с.34−36.
  110. А.П. Антигенный состав 1111Д-туберкулинов для млекопитающих / А. П. Лысенко // Ветеринария, 1989.-№ 5.-е. 3
  111. .Л. Новый метод выделения культур бацил Коха из патологического материала / Б. Л. Мазур // Проблемы туберкулеза, 1936. -№ 5. — С. 65−68.
  112. С.А. Роль моноклональных антител в диагностике лейкоза крупного рогатого скота / С. А. Малоголовкин // Вете-ринария, 1997. № 4. — С.16.
  113. H.A. ПЦР-диагностика лейкоза крупного рогатого скота/ Н. А. Мальцева, Г. О. Шайхаев, А. Г. Ирский, С. Г. Постовой и др.//Ветеринарная патология. 2003. № 1. С. 129−131.
  114. З.Б. Имму, но ферментный анализ для выявления бруцеллезных антигенов / З. Б. Маматова, М. И. Искандеров // Ветеринария, 1987. -№ 4. -С. 26−27.
  115. С.Г. Подбор специфических компонентов для постановки иммуноферментного метода с целью выявления маркеров вируса гепатита-А / С. Г. Марданлы, В. И. Васильева, Т. Н. Рыбалкина и др. // Лабораторное дело, 1986. № 5. — С. 294−296.
  116. О.В. Актуальные вопросы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота /О.В. Мартма, К. К. Тяхнас // Ветеринария, 1971.-№ 4. С. 35−38.
  117. О.В. О возбудителях и течении микобактериоза / О. В. Мартма, К. К. Тяхнас // Туберкулез крупного рогатого скота и меры борьбы с ним. Новосибирск, 1986. — № 10. — С. 64−68.
  118. О.В. О течении микобактериоза крупного рогатого скота в Эстонской ССР / О. В. Мартма // Материалы конференции: Эффективность мероприятий по борьбе с туберкулезом животных. -Киев, 1982. С. 23−24.
  119. Маслов Е. В. Оптимизация непрямого иммуноферментного анализа для выявления антител к M. bovis/ Е. В. Маслов, А. А. Бойко, И. А. Хорьков //Ветеринария, 1986.-№ 10.-с.64−68.
  120. Н.В. Повышенная чувствительность замедленного типа / Н.В. Медуницын// М., 1983.- 160 С.
  121. Н.П. Современные подходы к конструированию молекулярных вакцин/ Н. П. Мертвецов, А. Б. Бекмишев, И. М. Савич //Новосибирск, Наука-1987.
  122. Е.Д. Диагностические возможности метода полиме-разной цепной реакции при генитальном туберкулезе женщин / Е. Д. Мирлина, В. А. Ланцов, A.B. Семеновский и др. // Проблемы туберкулеза, 1998. № 1. — С. 46−48.
  123. Ю.А. Иммунологические аспекты патогенеза и диагностики ВИЧ-инфекции.: Автореф. дис. доктора мед. наук/ С. Петербург, 1997, — 40 с.
  124. Л.А. Определение антител иммуноферментным методом / Л. А. Мникова, B.C. Авилов, М. М. Гоголев // Ветеринария, 1983.-№ 4. С. 64−66.
  125. Л.А. Применение иммуноферментного анализа в диагностике ротовирусной инфекции крупного рогатого скота / Л. А. Мникова, B.C. Авилов, М. М. Гоголев // Бюллетень ВИЭВ, 1985. -Вып.58. С. 26−29.
  126. М.М. Биология туберкулезных микобактерий и иммунология туберкулеза / М. М. Модель, В.П. Белогурова// М.: Медгиз, 1956.-316 с.
  127. А.Х. Полимеразная цепная реакция при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота /А.Х. Найманов, Н.П. Овдиен-ко, Е.П. Осипова//Ветеринарная патология, 2004, 1−2(9), С. 96−99.
  128. А.Х. Аллергическая диагностика микобактериапь-ных инфекций крупного рогатого скота- / А. Х. Найманов // Автореферат диссертации доктора ветеринарных наук. Москва, 1993. С. 29.
  129. А.Х. Проблемы диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота в современных условиях /А.Х. Найманов// Ветеринарная патология, 2004- № 1−2(9).- с. 18−23
  130. А.Х. Сравнительная оценка прижизненных методов диагностики туберкулеза крупного рогатого ско-та/А.Х.Найманов//Ветеринария, 2009.-№ 2.-с.7−13.
  131. В.М. Опыт борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / В. М. Нахмансон, Л. Г. Бурба, Е. А. Дун и др. // Ветеринария, 1990.-№ 6. С. 6−10.
  132. В.М. Серологический метод диагностики в системе противолейкозных мероприятий / В. М. Нахмансон, М. И. Гулюкин, Е. А. Дун // Ветеринария, 1997. № 3. — С. 7−10.
  133. В.М. Течение эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота в неоздоравливаемом хозяйстве / В. М. Нахмансон, Л. Г. Бурба, Е. А. Дун и др. / Ветеринария, 1992.- № 6. С. 810.
  134. И.В. Использование ИФА для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота: Дис.. канд. вет. Наук/И.В. Непоклонова. -М., 1985.
  135. Д. Д. Послеубойная диагностика туберкулеза/ Д. Д. Новак //Ветеринария, 1990.-№ 11.
  136. Д.Д. Туберкулез сельскохозяйственных животных / Д.Д. Новак// Алма-Ата, 1977. 140 с.
  137. Д.Д. Специфический компонент ППД туберкулина (СКТ) при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота/
  138. Д.Д.Новак, Б.Н.Шакенов// Материалы 5-й научно-практической конференции НГАУ Новосибирск 2003.
  139. Г. П. Иммуноферментный метод / Г. П. Новошинов // Методические указания, Казань. 1985. -27 с.
  140. A.A. Иммуноферментный анализ для выявления возбудителя туберкулеза крупного рогатого скота в патологическом материале: Дис.. канд. биол. наук / A.A. Нуруллин- Каз. вет. ин-т. Казань, 1987.
  141. Э.М. Опыт диагностики лейкоза крупного рогатого скота и совершенствование мероприятий по борьбе с ним: Лейкозы с-х животных / Э. М. Нымм, Ю.А. Симоварт// М.Колос.-1975. С. 217 220.
  142. B.Е. Шуревский, А. Х. Найманов // Актуальные проблемы инфекционной патологии сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. ВИ-ЭВ. 1985. — Т.62. — С. 8−20.
  143. К.И. Типовая принадлежность МТ сельскохозяйственных животных в Казахстане / К. И. Одаренко // Проблемы с туберкулезом и паратуберкулезом с/х животных. -Алма-Ата. 1965.1. C. 60−69.
  144. Н.И. Полимеразная цепная реакция (система SENX3-REGX3) при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота/ Н.И. Осипова//Ветеринария, 2006- № 3- С. 829.
  145. В.Г. Дифференциальная диагностика туберкулеза с применением хемилюминисцентного метода/ В. Г. Ощепков, Л. А. Таллер, Г. М. Дюсенова, Т. А. Вассимирская, Е.Ю.Секин// Достижения науки и техники АПК, 2009- № 12.-С. 41−43.
  146. В.Г. Культурально-генетический метод диагностики туберкулеза крупного рогатого скота/ В. Г. Ощепков, Л. А. Таллер, Е. Ю. Секин и др.// Достижения науки и техники АПК, 2010- № 5- С. 64−65.
  147. A.M. Факторы неспецифической реактивности крупного рогатого скота к туберкулину, способы их выявления и устранения / A.M. Падалица // Автореф. дис. канд. вет. наук Ин-т экспер. Ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 1998. 19 с.
  148. O.A. Непрямой твердофазный метод иммунофер-ментного анализа, его точность и источники погрешностей / O.A. Пантелеев, Л. И. Ванеева // ЖМЭИ. 1986. -№ 3. — С. 95−99.
  149. O.A. Проблемы подбора концентрации реагентов в твердофазном иммуноферментном методе при определении концентрации антител / O.A. Пантелеев, Л. И. Ванеева, E.H. Демченко // ЖМЭИ. 1987. — № 4. — С. 80−85.
  150. Н.И. Изучение зараженности ВЛКРС молодняка в специализированных хозяйствах по выращиванию нетелей / Н. И. Петров, Д. И. Шелехов // Сб. науч. тр.ДВИ. 1993. — С.28−31.
  151. Н.И. Возрастные особенности проявления вируса лейкоза крупного рогатого скота / Н. И. Петров // Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных: Сб.науч.тр.ЛВИ. J1. -1988. -С.78−81.
  152. Н.И. Сравнительная оценка систем в проведении оздоровительных мероприятий от лейкоза крупного рогатого скота в племенных хозяйствах / Н. И. Петров // Бюлл.ВИЭВ. 1988. — В.67.-С. 73−75.
  153. JI.M. Сравнительное изучение высших жирных кислот липидов M.tuberculosis и M. bovis / JI.M. Пинчук, Г. И. Герасимова, Е. А. Воронцова и др. // Проблемы туберкулеза, 1982. № 3. -С.62−65.
  154. И.В. Вопросы борьбы и диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / И. В. Поддубский // Ветеринария, 1962. № 5. — С. 45−53.
  155. О. К. Медицинская микробиология. — Москва: ГЭО-ТАР-Мед., 2001.- 778с.
  156. В.И. Настоящее и будущее иммуноферментного метода исследования в инфекционной патологии / В. И. Покровский, Т. А. Ермолин, C.B. Шабалина //ЖМЭИД983. № 8. — С. 3−7.
  157. Ю.С. Система оздоровления и профилактики лейкоза крупного рогатого скота / Ю. С. Пристужалов, В. И. Околелов, Г. И. Максимов // Ветеринария, 1996. № 5. — С. 50−51.
  158. А.П. Перспективы иммунохимических методов в ветеринарии / А. П. Простяков // Ветеринария, 1983. № 11. -С. 71−73.
  159. Противотуберкулезный иммунитет. Научный обзор. Под ред. М. М. Авербаха. ВНИИ мед. и мед.-тех.инф.- М., 1973.- 13 с.
  160. С.Н. Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза / С. Н. Радюк, Г. Р. Мацеевич // Лабораторная диагностика, 1997.-С. 11−33.
  161. Ю.А. и др. // Авт. свид. 4 811 056/13. Опубл. 23.12.91., Бюлл.47.
  162. Ю.М. Хирургия туберкулеза легких / Ю. М. Репин // Медицина. Л., 1984. — С.34.
  163. С.С., Гладкова С. Е., Офицеров в.И. Новая тест-система для серодиагностики туберкулеза / Новости «Вектор-Бест» № 9, 1998.
  164. В.И. О миграции микобактерий туберкулеза / В.И. Ро-тов, П. Е. Савченко // Ветеринария, 1971. № 10. — С. 38−39.
  165. В.И. Туберкулез сельскохозяйственных животных /В.И. Ротов, И. И. Кокуричев, П. Е. Савченко и др. // Издательство Киев, 1978.-237 с.
  166. А., Бростофф Дж., Миел Д. Иммунология/Пер. с англ. -М.: Мир, 2000. 592с.
  167. В.А. 13-й съезд. Тезисы: Украинское науч. общество микробиологов, эпидемиологов и паразитологов им. Д. К. Заболотного / В. А. Сазонов, П. З. Протченко, A.B. Филипповский. — Киев, 1996. -С. 65−68.
  168. М.А. Совершенствование методов диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: Дис.. д-ра вет. наук / М.А. Сафин- Каз. вет. институт. Казань, 1981.
  169. М.А. Современные методы борьбы с туберкулезом животных/М.А. Сафин, Г. З. Идрисов// Казань, 1992. 168 с.
  170. В.А. Структура и биология вирусов животных / В. А. Сергеев, Б. Г. Орлянкин. М, 1983.
  171. Г. А. Метол иммунодиагностики в системе мероприятий по борьбе с лейкозами крупного рогатого скота / Г. А. Симонян // Иммунология и иммунотерапия лейкозов человека и живот-ных.-Ташкент, 1984. С. 163−164.
  172. Г. А. Пути передачи оикорнавирусной инфекции в неблагополучных по лейкозу стадах крупного рогатого скота / Г. А. Симонян, Е. Ф. Бражин // Сб. науч. тр. Донского с-х ин-та.-1980. -Т. 15. В.4. — С.62−65.
  173. A.M. Современные проблемы диагностики и профилактики туберкулеза животных /A.M. Смирнов // Ветеринарная патология, 2004- № 1−2(9) — с. 10−13.
  174. П.Н. Особенности патогенеза гемабластозов крупного рогатого скота и перспективы научных исследований в области вирусного лейкоза /П.Н.Смирнов, В. А. Белявская, Е.В.Дробот// Ма-тер.научн.-произ.конф, Екатеринбург- 2005- с. 197−205.
  175. П.Н. Выявление коров, больных лейкозом, путем постановки РИД с р24-антигеном ВЛКРС / П. Н. Смирнов // Методические рекомендации. Новосибирск. — 1991. — 7 с.
  176. П.Н. Использование реакции иммунодиффузии для оценки состояния стад крупного рогатого скота по лейкозу / П. Н. Смирнов, Л. Г. Бурба, А. Т. Левашов и др. // Науч. тех. бюлл. ВАСХ-НИЛ/ Сиб.отд. 1983. — В.37. — С.3−11.
  177. П.Н. Практические аспекты лейкоза крупного рогатого скота / П. Н. Смирнов // Ветеринарная газета, № 13. —1998. — 4 с.
  178. М.И. Живые вакцины: Руководство по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней / М. И. Соколов. М., 1964. — 532 с.
  179. Н.В. Свойства системы JgG JgG человека в различных модификациях иммуноферментного анализа / Н. В. Соколова, Е. М. Гаврилова, A.M. Егорова // ЖМЭИ. -1986. — № 12. — С. 68−72.
  180. В.Н. Вирус лейкоза крупного рогатого скота / В. Н. Сюрин, Р. В. Белоусова, Н.В. Фомина// М.: МВА.1986. С. 76−85 200., Сюрин В. Н. Диагностика вирусных болезней животных / В. Н. Сюрин, Н.В. Фомина// М.:Агропромиздат, 1991. С.38−50
  181. В.Н. Вирусные болезни животных/ В. Н. Сюрин, А. Я. Самуйленко, Б. В. Соловьеви др.// М.: ВНИТИБП, 1998- с. 646.
  182. В.З. Имя ему СПИД/ В.З.Тарантул//Москва, 2005.-398с.
  183. С.И. Применение рекомбинантных видоспецифиче-ских белков М.йдЬегси1оз1з для серологической диагностики туберкулеза / С. И. Татьков, О. В. Насарева, А. Н. Болдарев // Клиническая лабораторная диагностика, 2006. № 12. — С.26.
  184. А.И. Иммунизация живой вакциной против туберкулеза: Профилактика инфекции живыми вакцинами / А. И. Тогунова. -М.: Медгиз, 1960.
  185. А.И. Экспериментальное обоснование вакцинации против туберкулеза /А.И. Тогунова // ЖМЭИ. 1955. С. 3−8.
  186. Р.В. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц / Р.В. Тузова// Минск: Урожай, 1983. 263 с.
  187. В.П. Аллергическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота /В.П. Урбан, М. М. Широбоков, Г. М. Громов // Сб. науч. тр. ЛВИ. Вып. 48. — 1977. С. 68−72.
  188. В.П. Микобактериозы у крупного рогатого скота / Проблемы профилактики и терапии заразных заболеваний с/х животных и птиц / В. П. Урбан, М. М. Широбокова, Ю. Ю. Данко и др.-Л., 1986. -С.104−110.
  189. В.П. Причины аллергических реакций на внутрикожное введение туберкулина у крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу хозяйствах /В.П. Урбан, Ю. Ю. Данко, В. А. Пескова // Сб. науч. тр. ЛВИ. Ленинград, 1988.
  190. К.В. Полимеразная цепная реакция и иммунофер-ментный анализ в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота: Дис. канд. вет. наук / К.В. Усольцев- Каз. вет. ин-т. — Казань, 2001.
  191. Н.З. Использование ИФА для выделения возбудителя туберкулеза в патологическом материале / Н. З. Хазипов, Р.П. Тюри-кова, A.A. Нуруллин //Актуальные вопросы эпизоотологии и меры борьбы с туберкулезом животных: Сб. ст. — Казань, 1989. С. 27−28.
  192. Н.З. Биохимическая структура клеточной стенки ми-кобактерий туберкулеза / Н. З. Хазипов, Р. П. Тюрикова, A.A. Нуруллин // Сб. науч. тр. Казань, 1986. — С. 10−19.
  193. Н.З. Туберкулез крупного рогатого скота /Н.З. Хазипов, М. А. Сафин, Г. З. Идрисов// М. Агропромиздат, 1985.-250 с.
  194. Н.З. Репродукция вируса лейкоза крупного рогатого скота и иммунный ответ на неё/ Н. З. Хазипов, Р.П.Тюрикова//Ученые записки КГАВМ, Казань, 2008- т. 192. С. 152−161.
  195. P.A. Иммуноферментный метод при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота / P.A. Хамзин, М. А. Сафин, К.Г.
  196. Идрисова // Диагностика, профилактика и меры борьбы с туберкулезом животных: Сб.ст. КВИ.- Казань, 1985. С. 6−7.
  197. P.A. Совершенствование диагностики, профилактики и мер ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота в зоне длительного неблагополучия/ Р.А.Хамзин//Диссер.док.вет.наук, Казань, 2006.
  198. H.A. Изучение эффективности различных молеку-лярно-генетических методов идентификации и дифференциации возбудителей туберкулеза и атипичных микобактерий /Н.А.Хаммадов// Автореферат дисс.канд.биол.наук., Казань,-2010.-23С.
  199. М.В. Совершенствование методов дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота: Автореф. дис.. канд. вет. наук / М.В. Харитонов- Каз. вет. ин-т. -Казань, 1983. С. 21.
  200. Ф.Ф. Диагностика и меры борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / Ф. Ф. Хисамутдинов, Г. А. Симонян // Труды I-съезда вет. врачей Республики Татарстан.- Казань.-1996. С. 124 128.
  201. JI.M. Оптимизация аллергической и лабораторной диагностики туберкулеза КРС: Дис. д-ра вет. наук / JI.M. Ходун. Омск, 1996.
  202. А.Г. Современные представления о строении M.Tuberculosis / А. Г. Хоменко, В. В. Ерохин // ЖМЭИ, 1982.-№ 12. -С. 33−40.
  203. Ю.П. Сравнительные результаты исследования сыворотки крови крупного рогатого скота при лейкозе/ Ю.П.Царев// Матер.Сиб.Муждунар.вет.конгресса,-Новосибирск,-2005,-ISBN 5−96 570 029−6.
  204. Н.И. Исследование сыворотки крови реагирующих на туберкулин животных иммуноферментным методом/ Н. И. Цунская, М. А. Владивирский //Сборник научных трудов, Омск.-1988.
  205. Т. Радиоиммунологические методы. / Т. Чард. М.: Мир, 1981.-247 с.
  206. Г. В. Вопросы дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / Г. В. Чепик // Тезисы докладов Всесоюзной научной конференции, Омск.-1980. С. 56−57.
  207. JT.H. Аффинное выделение микобактериальных антигенов на моноклональных антителах / Л. Н. Черноусова, Е. Д. Суранова, О. А. Калинина //Пробл. туберк., 1995. -№ 2. -С.39−42.
  208. А.Н. ПЦР при туберкулезе /А.Н. Шаров, A.A. Ерошен-ко, И. П. Суханов и др. //Ветеринария, 2000.-№ 10- С. 18−22.
  209. А.Н. Эффективность методов прижизненной диагностики туберкулеза / А. Н. Шаров, JI.A. Ерошенко, И. П. Суханов и др.// Ветеринария, 2000. № 2. — С. 16.
  210. А.Н. К вопросу диагностики туберкулеза //Ветеринария, 1982. -№ 9. -С. 40−44.
  211. А.Н., Седов В. А. Тест-системы ПЦР при туберкулезе / А. Н. Шарова, В. А. Седов // Ветеринария, 1998. № 3. — С.20−22.
  212. Ю.Е. Ветеринарное обеспечение агропромышленного комплекса РФ. / Ю. Е. Шатохин // Труды первого съезда вет. врачей РТ. Казань: Тат. кн. изд-во. 1996. — С.35−40.
  213. А.Т. Оздоровление племенных хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / А. Т. Шиков // Ветеринария. Киев, 1979. -Т. 42.- С. 50−53.
  214. В.П. Наступление на лейкозы животных / В. П. Шишков //Наука и человечество. М., 1988. — С-103−113.
  215. И.В. Значение иммунологических реакций при эпизоотическом обследовании свежих и стационарных очагов туберкулеза крупного рогатого скота / H.B. Шлыгин, Э. Д. Лакман // Сб.ст. НИВИ. Вып. 27. — Омск, 1976. — С. 35−41
  216. Г. А. Дифференциация туберкулиновых реакций / Г. А. Юдин // Ветеринария. 1970. — № 11. — С. 68−70.
  217. Г. А. Неспецифические реакции на туберкулин у крупного рогатого скота и их профилактическое значение в системе противотуберкулезных мероприятий: Автореф. дис.. д-ра вет. наук / Г. А. Юдин.-М., 1986,-44 с.
  218. Г. А. О неспецифических туберкулиновых реакциях / Г. А. Юдин // Ветеринария, 1971. № 10. — С. 62−64.
  219. Г. А. О псевдоаллергических реакциях на туберкулин / Г. А. Юдин // Ветеринария, 1973. № 10, С. 8−12.
  220. М.К. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц. / М.К. Юсковец// М.: Сельхозгиз.-1963.
  221. Affronti L.P. Characterization and comparison of mycobacterial antigens by discontinues pore gradient gel electrophoresis/ L.P.Affronti,
  222. G.L.Wright, M. Reich //J. Infect. Immun., 1972.-V.5.-p.474−481.
  223. Aide S.L.M. Evalution of an Ensyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA). Using JgG Antibody to mycobacterium tuberculosis Antigen 5 in the diagnosis of Active Tuberculosis in children/ S.L.M.Alde,
  224. H.M.Pinoseo, F.R.Pelosi et al.// Veterinary Microbilogy.-1988.-V.l 8.-P.51−61.
  225. Alimov A.M. Detection and differentiation of mycobacterium M. bovis by DNA hybridization method /A.M.Alimov, N.Z.Khazipov, T.Kh.Faizov// 5-word congr. University of Afr. Elizabet 1999.-P.22−23.
  226. Amadori M. Antibody Tests for Identification of Mycobacterium bovis infected Bovine Herds / M. Amadpri, S. Tameni, P. S. Cavirani // Journal of Clinical Microbiology. Feb., 1998, p.556−568.
  227. Auer L.A. Antibodies to Mycobacteria in Cattle not infected with Mycobacterium bovis / L.A. Auer, S.M. Schleehauf // Veterinary Micro-bilogy.-1988.-V.18.- P.51−61.
  228. Baelden M.C. Serological analysis of human tuberculosis by an ELISA immunoassay with mycobacterial antigen-60/ M.C.Baelden, B. Vandirelst // J.Inf. Dis., 1990.-v.22.-p.63−66.
  229. Bendixen H. Ergebnisse der kontrol und Tilgungsmassnahmen der Rinderleukosebekampfung / H. Bendixen //Berg., Munch.tierarztl. Wschr.-1963.- V.76. № 5. — P. 112−114.
  230. Bhattacharya A. Antibody-based ELISA for determination of immune complexes in clinical tuberculosis / A. Bhattacharya, S.N. Ranadive, M. Kale et al.// Am. Rev. Respir. Disease, 1986.-v.134, № 2.-p.205−209
  231. Boguslaski R.C. Homogenous immunoassay / R.C. Boguslaski, T.M. Li //Appl. Bioch. and Technol. -1982.V.7 -№ 5. -P.401−414.
  232. Bothamley G. Clinical value of the measurement of Mycobacterium tuberculosis specific antibody in pulmonary tuberculosis /Bothamley G.- Rudd R.- Festenstein F.- Ivanyi J. //Thorax. -1992. -Vol.47. -P.270−275.
  233. Brodeu R.S. Correlation of in vitro immune response with clinical course of malignant neoplasia in dogs/ R.S.Brodeu, I.J.Fidler, S.B.Nielsen // Am. J. Vet. Res., 1975.-v.36.-p.75−80.
  234. Caminero J.A. Value of ELISA using A-60 antigen in the serodi-agnosis of tuberculosis / J.A.Caminero, F.R.Decastro, T. Carrillo et al. // Respiration., 1994.-61:5 (sep.-oct.).
  235. Cardoso M.A. Direct detection of Mycobacterium bovis in bovine lymph nodes by PCR/ M.A.Cardoso, R.F.Cardoso, R.D.Hirata, M.N. Hi-rata// Zoonoses Public Health. 2009 0ct-56(8):465−70. Epub 2009 Jan 17.
  236. Chander S. Comparison between serological and hematological diagnosis of bovine leucosis / S. Chander // Vet.Microbiol. -1976.-V. 192. -P. 1005−1007.
  237. Chapars S.D. An analysis of cross reactions among mycobacteria by in vivo and vitro assays of cellular hypersensitivity / S.D.Chapars, C.J. Maloney // Am. Rev. Respir. Dis., 1978.-117:897−902
  238. Chasey D. A simple and reaped immunoperoxidasae test for the detection of virus antigens in tissue culture / D.A. Chasey // J. Vet. Record. —1980. -№ 14. —P.506−507.
  239. Chucroum N. Tubercle bacillus antigens. Biological properties of two substances isolated from paraffin oil extract of dead tubercle bacilli /N. Chucroum // Am.Rev.Tuberc., 1947.-V.56-p.203−226.
  240. Cho Y.S. Definition of purified enzyme-linked immunosorbent assay antigens from the culture filtrate protein of Mycobacterium bovis by proteomic analysis/ Y.S.Cho, S.E.Lee, Y.J.Ko// J Immunoassay Immuno-chem. 2009−30(3):291−304.
  241. Cho Y. S Enzyme-linked immunosorbent assay of bovine tuberculosis by crude mycobacterial protein 70/ Y.S.Cho, S.C.Jung, J.M.Kim, H.S.Yoo// J Immunoassay Immunochem. 2007−28(4):409−18.
  242. Coates A.R. Antigenic diversity of Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium bovis detected by means of monoclonal antibodies / A.R. Coates, J.Q. Hewitt, B.W. Allen h pp. II Laneet.-1981.-V.l 1.-P.167−169.
  243. Cocito C. Preparation and properties of antigen 60 from Micobacte-rium Bovis BCG / C. Cocito, F. Vanlinden // Clin, and Exp. Immunol., 1986. V.66, № 2. — P.262−272.
  244. Currie G.A. Serum mediated inhibition of the immunological reactions of the patient to his own tumor- a possible role for circulating antigen / G.A.Currie, C. Basham //Brit. J. Cancer., 1972.-v.26.-p.427−438.
  245. Daniel T.M. Evolution of mycobacterial antigens in an ensyme-linked Immunosorbent assay for the serodiagnosis of tuberculosis / T.M. Daniel, S.M. Debanne // J. Med. Microbiol., 1984. V.18, № 3. — P.309−318.
  246. Daniel T.M. Specificity of Mycobacterium tuberculosis antigen 5 determined with mouse monoclonal antibodies / T.M. Daniel, N.J. Gon-chroff, J.A. Katzmann // Infect. Immun.-1984.-V.45.-№ 2.-P.52−55.
  247. Daniel T.M. The serodiagnosis of tuberculosis and other mycobacterial diseases by enzyme-linked Immunosorbent assay / T.M. Daniel, S.M. Debanne // Amer.Rev.respir.Dis., 1987. V.135. P. l 137−1151.
  248. Deshayes L. Identification of structural polypeptides of bovine leulemia vims / L. Deshayes, D. Levy, A.L. Parodi // In Bovine Leukosis: Various Methods of molecular virology.-1977.- P. 57−67.
  249. Dsouza C.D. Use of the recombinant 38-kDa antigen of
  250. M.tuberculosis as an immunogen for specific antisera production / C.D.
  251. Dsouza, G.V. Kadivol, A.M. Samuel // Microbiology and immunology 38:10. 1994. P.797−800.
  252. Engvall E. Enzyme-linked Immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G / E. Engvall, P. Perlann // J. Immuno-chem. 1971-V. 8-P.871−874.
  253. Euteneur B. Compares of the Exoproducts of Gram-negative bacteria by SDS Page / B. Euteneur, M. Loos // Sbl. Bairt., 1985.-v.259.-p.11−19.
  254. Ferrer J.F. Bovine leukosis: Natural transmission and principles of control / J.F. Ferrer // J.A.V.M.A. 1979. — V.175. — P.1281 — 1286
  255. Ferrer J.F. Bovine lymphosarcoma / J.F. Ferrer // Adv.Vet.Sci.Comp.Med., 24: 1−68, 1980.
  256. Ferrer S.F. An evolution of the role of milk in the natural trasmis-sion of BLV / S.F. Ferrer, C.E. Piper // Am.rech.Vet.-1978. v.9.- P.803−807.
  257. Ferrer S.F. Milk of dairy cows frequently contains a leukemogenic virus / S.F. Ferrer, S.S. Kenyon, P. Gupta // Science. -1981.- v.213. № 4511, — P.1014−1016.
  258. Ferrer S.F. Role of colostrum and milk in the natural transmission of the Bovine leukemia virus / S.F. Ferrer, C.E. Piper / Cancer Res., 1981. V.41.-P. 4906−4909.
  259. Fifis T. Purification and charaterization of major antigens from a Mycobacterium bovis culture filtrate/ T. Fifis, C. Costopoulos, A.J.Radford, A. Bacic //Infect. Immun.-1991, March- 59(3): 800−807.
  260. Fitzgerald S.D. Coinfection of cow with Bovine leukemia virus and Mycobacterium bovis / S.D. Fitzgerald, D.G.Sledge, R/Maes// J.Vet. Di-agn. Invest., 2009.-№ 21(6):878−82.
  261. Flensburg J.C. Serological evidence of infection with bovine leukemia virus (BLV) in Danish cattle // An account of the enzootic bovine leucosis control programme 1978/1980 4th Int.Symp.Bovine Leukosis. Bologna. -1982. P.500−508.
  262. Francis J. The sensitivity and specificity of various tuberculin testsIusing bovine PPD and other tuberculins/ J. Francis, R.J.Seiler, I.W.Wilkie et al. // Vet. Ree., 1978.v.l03.-p-420−425.
  263. Garbaccio S.G. Evaluation of an immunomagnetic capture method followed by PCR to detect Mycobacterium bovis in tissue samples from cattle/ S.C.Garbaccio, A.A.Cataldi// Rev Argent Microbiol. 2010 Oct-Dec-42(4):247−53.
  264. Garcia-Drigoza E. Diagnostico de la tuberculosis pulmonal* cronica por el metodo de immunoensaeyc enzimatico (ELISA) / E. Garcia-Drigoza, A. Cutierres-Velasques. Rev.Latinoamer. Microbiol., 1982, v.24, № 3, p. 193−203.
  265. Gamier T. The complete genome sequence of Mycobacterium bovis/ T. Garnier, K. Eiglmeier, J.C.Camus, N. Medina et all. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA., 2003.-v, 100(13).-Jun 24.-p.7877−7882.
  266. Gennaro M.L. Immunologic diagnosis of tuberculosis/ M.L.Gennaro// Clin. Infect. Dis. 2000. Jun- 30 Suppl 3: S. 243−6.
  267. Gilmour N.J.R. The specificity and sensitivity of the fluorescent antibody test incattle experimentally infected with mycobacterium avium and mycobacterium icfinei / N.J.R. Gilmour, K.W. Angus. Res. In Veter. Sc., 1976, vol. 20, № 1. p. 6 — 9.
  268. Giller N. Ingibition of retroviral protease activity by an aspartil proteinase inhibitor/ N. Giller, F.A.Florins, M. Boxus, C. Burteun// Retrovirology 2007.-V.4.-P.-18.
  269. Goren M.B. Roles of lipid contents and hydrogen peroxide susceptibility in determining the quinoa pig virulence of Mycobacterium tuberculosis // M.B. Goren, J.M. Grange, V.R. Abers np. Br., J. Exp. Path., 1982. — v.63. P.693−700.
  270. Grange J. Environtal mycobacterium and BCG Vaccination / J. Grange // Tubercle 1986. — vol. 67. — № 1. — p. 1 — 4.
  271. Grange J.M. Serological tests for tuberculosis: can the problem of low specificity be overcome? / J.M. Grange, T. Kardjito. Indian J. Of Chest Diseases and Appl.Sci., 1982, v.24, № 2−3. P. 108−117.
  272. Grange M.J. The Humoral Immune Respons in Tuberculosis: Its natural, Biological Role and Diagnostic Usefulness / M.J. Grange // Adv.Tuberc.Rev., 1987.-V.21.-P 1−77 (Karget, Basel, 1984).
  273. Gray G.R. The major micolic acids of M. smegmatis / G.R. Gray, M.Y. Wong, S.Y. Danielson//Prog. Lipid. Pes., 1982.-V.21, p.91−107.
  274. Greenwald R.J. Improved serodetection of Mycobacterium bovis infection in badgers using multiantigen test formats/ RJ. Greenwald, S. Esfandiari, R. Lesellier et al. // Diagn. Microbiol. Infect. Dis., 2003.-v.46.-p. 197−203.
  275. Grenner G. Principles and applications of homogenous and heterogeneous enzyme immunoassay / G. Grenner // Hoppe-Seyler's z.Physiol. Chem. -1982. -V.363. -№ 9. -P. 1005−1006.
  276. Gross L. Oncogenic virus / L. Gross // Oxford, pergamon Press.-1974.
  277. Guile H. Responses of bovine T celles to fractionated lysate and culture filtrate proteins of Mycobacterium bovis BCG / H. Guile, L.M.
  278. Fray, E.P. Gormley h Ap. // Veterinary Immunology and Immunopathol-ogy 48: 1995, № l-2.-pl83−190.
  279. Gupta V.K. Antigenic characterization of Mycobacterium Bovis BCG soluble antigens / V.K. Gupta, C.G. Ram, M.P. Bansal // Veterinary Microbiology 38: 1994, № 3. p.227−240.
  280. Gutierrez G. Detection of bovine leukemia virus specific antibodies using recombinant p24-ELISA/ G. Gutierrez, I. Alvarez, N. Fondevila, R. Politzki// Vet Microbiol. 2009 Jun 12−137(3−4):224−34.
  281. Hanna J. Use of PPD and phosphatide antigens in the ELISA to detect the serological respons in experimental bovine tuberculosis / J. Hanna, S.D. Neill, J.J. O Brien // Research in Veterinary Science, 1989.-V.47.-№ 1 .-P.43−47.
  282. Harboe M. Antigens of PPD, old tuberculin and autoclaved Mycobacterium bovis BCG studied by crossed Immunoelectrophoresis //Amer. Rew. Respir. Dis.-1981.-V.124.-p.80−87.
  283. Harboe M. The 38-kDa protein of Mycobacterium tuberculosis: a review I M. Harboe, H.Wiker. //J.Infect.Dis. 1992. Vol.166. P.874−884.
  284. Harboe M. Homology between the MPB70 and MPB83 proteins of Mycobacterium bovis BCG / M. Harboe, S. Nagai, H. Wiker, K. Sletten, S. Haga //Scand.J.Immunol. Vol.42 (1).- 1995.- P.46−51.
  285. Heiander I.U. Isolation and electrophoretic analysis of bacterial lipopolysaccharides/I.U.Helander // Meth. Mol. Characterisat., 1985.-p.263−274.
  286. Hemmatzadeh F. Sequencing and phylogenetic analysis of gp51 gene of bovine leukaemia virus in Iranian isolates/ F. Hemmatzadeh// Vet Res Comrnun. 2007 Aug-31(6):783−9. Epub 2007 Feb 8.
  287. Hill H.R. Enzyme-linked Immunosorbent assay and radioimmunoassay in the serologic diagnosis of infectious diseases / H.R. Hill, J.M. Matsen // J. Infect. Diseases. -1983. -V.147. -№ 2. -P.250−263.
  288. Jackson M. Mycobacterium tuberculosis Des-protein: An immunodominant target for the humoral response of tuberculeus patients/ M. Jackson, D. Portnoi, D. Catheline h jyp. // Infection and immuniti. V.65, № 7, 1997. P.2883−2889.
  289. Jacobs R.M. Inhibition of lymphocyte blastogenesis by sera from cows with lymphoma/ R.M.Jacobs // Am. J. Vet. Res., 1980.-v.41.-p.372−376.
  290. Jeon B.Y. Evaluation of enzyme-linked immunosorbent assay using milk samples as a potential screening test of bovine tuberculosis of dairy cows in Korea/ B.Y.Jeon, S.C.Kim, S. Je, J. Kwak// Res Vet Sei. 2010 Jun-88(3):390−3. Epub 2010 Jan 8.
  291. Jenkins P. The identification of mycobacterium med in clinical pac-tice / P. Jenkins // Bull. un. int. Tuberc. 1988. — vol. 63. — № 3, p. 7 — 9.
  292. Juliarena M.A. Determination of proviral load in bovine leukemia virus-infected cattle with and without lymphocytosis/ M.A. Juliarena, S.E.Guierrez, C. Ceriani// Amer.J.Vet.Pes., 2007., № 68(11): 1220−5.
  293. Kalish S.B. et al. Use of an enzyme-linked Immunosorbent assay technique in the differential diagnosis of active pulmonary tuberculosis in humans / S.B. Kalish, R.C. Radin, J.P. Pheir // J.Infec.Dis., 1983. V.147, — № 3. — P.523−530.
  294. Kemp H.A. Studies on the detrimental effects of bivalent binding in a microtitration plate ELISA and possible remidies / H.A. Kemp, M.R.A. Morgan //J. Immun. Meth. 1986. -V.94. — № 1−2. — P.65−72.
  295. Kono Y. Protection against bovine leukemia virus infection in sheep by active and passive immunization/ Y. Kono, K. Arai, H. Sentsui et. all. //Japan. J. of Vet. Sci., 1986.-v.48.-p.l 17−125.
  296. Kumar S.P. Effect of mononuclear cells or Monocyte culture fluid on the antigen (PPD), induced blastodenic responses of lymphocytes / S.P. Kumar, C.C. Museoplat, D.W. Johnson // Indian vet.J.-1987.-V.64.-P. 1002−1007.
  297. Kuckleburg C.J. Detection of bovine leukemia virus in blood and milk by nested and real-time polymerase chain reactions/ C.J.Kuckleburg, C.C.Chase, E.A.Nelson, S.A.Marras, M.A.Dammen// J Vet Diagn Invest. 2003 Jan-15(l):72−6.
  298. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4/ U.K. Laemmli //Nature, London, 1970.-v.227.-p.680−685.
  299. Lamb R.A. The synthesis of Sendai virus polypeptide in infected cells/ R.A.Lamb, B.V.Many, R.W. Groppin //Virology, 1976.-v.69.-P.116−131.
  300. Larson V.L. Epizootologic studies on the natural transmission of Bovine leukemia / V.L. Larson, P.D. Sorensen II A.J.Vet. Res.-1970.-V.31. -№ 9. -P.1533−1538.
  301. Lazevic V. CD8+ T-cells in tuberculosis/ V. Lazevic, J. Flinn// Am.J.Respir Crit Care Med. vol. l66.p.l 116−1121, 2002
  302. Lee H. Species identification of mycobacteria by PCR-restriction fragment length polymorphism of the rpoB gene / H. Lee, H.J. Pars, S.N. Cho h ap. // J.Clin.Microbiol., 2000. Aug.38(8):2966−71.
  303. Lenzini L. The spectrum of human tuberculosis/ L. Lenzini, P. Rotolli, l.Rotolli. // Clin. Exp. Immunol., 1977.-v.27.-p.230−237.
  304. Licursi.M. Genetic heterogeneity among bovine leukemia virus genotypes and its relation to humoral responses in hosts / M. Licursi, Y. Inoshima, T. Yokoyama, E. Gonzalez, H. Sentsui // Virus.Res.-2002.-V.86.-P.101−110
  305. Lightbody K.A. Mycobacterial antigen-specific antibody responses in bovine tuberculosis: an ELIS A with potential to confirm disease status/ K.A.Lightbody, R.A.Skuce, S.D.Neill, J.M.Polloc //Vet. Rec., 1998.-v.l42.-p.295−300.
  306. Maes R. Evaluation of the avidity of IgG antimycobacterial antibodies in tuberculosis patients serum by an A-60 immunoassay/ R. Maes // Eur. J. Epidemionol., 1991.-v.7.-p.262−265. 1991
  307. Maes R. Development of an enzyme immunoassay for the serodiagnostic of tuberculosis and mycobacterioses / R. Maes, J.P. Homasson, M. Kabin h a p.// Medical Microbology and Immunology.-1989.- VI78.-P.323−335.
  308. Mammerickx M. Experimental Gross-Transmissions of Bovine Leukemia virus (BLV) between several animal species / M. Mammerickx, D. Portetelle, A. Bumy // Zbl.Vet. Med.-1981.-V.28. P.68−81.
  309. Moraes M. Cellular immune responses to Mycobacterium tuberculosis in a patient with Takayasus arteritis / M. Moraes, D. Ordway, L. Oliveira //Rev.Port.Cardiol. 1999. Vol.18. P.359−367.
  310. Mary L.R. Serial circulating immune complex levels and mitogen responses during progressive tumor growth in WF rats/ L.R.Mary, S. Glenn, S.R.Donald et al. // J. Natl. Cancer Inst., 1983.-v70.-p.1113−1118.
  311. Mauch H. Monoclonal antibodies selectively directed against the cell wall surface of M. tuberculosis / H. Mauch, N. Brechwer, H. Sonneborn // J.Clin.Microbiol.-1988.-V.26.-№ 9.-P. 1691 -1694.
  312. G., Katsuko O., Vasio S. // I. Jap. Assoc. J. Infect. Dis -1995. V. 69 № 5 — P.539 — 545.
  313. Michell S. The MPB83 antigen from mycobacterium bovis contains Olinked mannose and (1,3) mannobiose moieties / S. Michell, A. Whelan, P. Wheeler //J.Biol.Chem. Vol.278(4).- 2003.- P. 1815−1820.
  314. Miller D.A. Immunoperoxidase quantitation / D.A. Miller, E.D. Williams // J. Pathol. -1980. -V. 131 № 3. — P. 279−286.
  315. Miller J.M. Precipitating antibody to an internal antigen of the C-type virus associated with bovine lymphosarcoma / J.M. Miller, C. Olson // S.Nat.Cancer Ins. 1972. — V.49. — P. 1459−1462.
  316. Minden P. Immunological evaluation of a component isolated from M. bovis BCG with a monoclonal antibody to M. bovis BCG/ P. Minden, P.J.Keliecher, J.H. Freed et al. // Infec. And Immun., 1984.-V.46.-p.519−525.
  317. Misaki A. Structuraland immunochemical studies on D-arabino-D-mannans and D-mannans of Mycobacterium tuberculosis and other Mycobacterium species / A. Misaki, J. Azuna, Y. Yamamura // J. Biochem., 1977. -V.82. P. 1759−1763.
  318. MorrisY.A. The identification of antigenic determinants of M. bovis Using Monoclonal antibodies / Y.A. Morris, C.Y. Fom // J. General Microbiol.-1985.- V.1131.- P. 1825−1831.
  319. NagyD.W. Use of a polymerase chain reaction assay to detect bovine leukosis virus in dairy cattle/ D.W. Nagy, J.W.Tyler, S.B.Kleiboeker// J Am Vet Med Assoc. 2003 Apr l-222(7):983−5.
  320. Nassau E. Specific tubercle antigen / E. Nassau, A.E. Nelstrop // Tubercle, 1976. — v.57. P. 197.
  321. Nassau E. The detection of antibodies to Mycobacterium tuberculosis by microplate enzyme linked Immunosorbent assay (ELISA) / E. Nassau, E.R. Parson, C.D. Johnson. // Tubercle, 1976, № 57. P. 67−70.
  322. Neill S.D. Isolation of Mycobacterium bovis from the respiratory tracts of skin test-negative cattle/ S.D.Neill, J. Hanna, D.P.Mackie, T.G.D Bryson // Vet.Rec., 1992.-V. 131 .-p.45−47.
  323. Ngo T.T. Separation-free amperometric enzyme immunoassay / T.T. Ngo, J.H. Bovaird, H.M. Lenhoff // Appl. Bichem. Biotechnol. -1985.-V.11.-P. 63−70.
  324. Nguyen V.K. evaluation of an enzyme-linked Immunosorbent assay for detection of antibodies to bovine leukemia virus in serum and milk / V.K. Nguyen, R.F. Maes // J.Clin.Microbiol., 1992.-31(4). 979−981.
  325. Nossal 1.1st die Tuberculose lene boreites uber wundene Krankheit /1. Nossal // Tuber. 1965. — v. 123. — s. 203 — 217.
  326. Nyendak M.R.New diagnostic methods for tuberculosis/ M.R.Nyendak, D.A.Lewinsohn, D.M.Lewinsohn// Curr Opin Infect Dis. 2009 Apr-22(2): 174−82.
  327. Olson C. Role of C-type in bovine lymphosarcoma / C. Olson, L.D. Miller, S.M. Miller // Bibl.Haemat. 1973. — V.39. — P.198−205.
  328. Orr M.B. Experimental challenge of red dur with mycobacterium avium / M.B. Orr, A.R. Hunter, T. Brand// Veterinary Record, 1978, 102, 484−485.
  329. Ostyn A. Glycolipid antigen for use in diagnostic assays for bovine tuberculosis / A. Ostyn, M.A. Lancelle, M.F. Thorel // Research in Microbiology. 148:6, 1997. P.491−500.
  330. W.E. Иммунология / W.E. Paul. 1987.- T.2.- C.30.
  331. Paulsen J. Antibodies to common ovine and bovine C-type virus specific antigen in serum from cheep with spontaneous leukosis and from inoculated animals / J. Paulsen, R. Rudolph, J.M. Miller // Med.Microbiol.Immunol. 1974. — V.159. — P.105−114.
  332. Piper C.E. Prenatal and postnatal transmission of the bovine leukemia virus under natural conditions / C.E. Piper, J.F. Ferrer, D.A. Abt // J.Nat.Cancer.Inst. -1979. V.62. — P. 165−168.
  333. Piper C.E. Seroepidemiological epidence of the horisontal transmission of the bovine C-tipe virus / C.E. Piper, D.A. Abt, S.F. Ferrer // cancer.Res. 1975. — V.35. — P.1714−1716.
  334. Plackett P. An ELISA for the detection anergic Tuberculosis cattle / P. Plackett, J. Ripper, L. Corner и др./ZAustralian Vet.J. -1989. V.66. -№ 1.-P15−19.
  335. Pollok J.M. Dynamic changes in circulating and antigenresponsive T-cell subpopulations post Mycobacterium bovis infection in cattle/
  336. J.M.Pollok, D.A.Pollok, D.G.Campbell et al. // Immunology., 1996.-v-87.-p.236−241.
  337. Portaeis F. The occurense of mycobacteria in the environment of man and animal / F. Portaeis, R. Bonicke// Exc. Med. Int. Congr. 1988. — vol. 37 — ser. — 119, — h. 361 — 368.
  338. Pranav K. Use of immunoprecipitates to produce anti-BCG cell wall antibody of restricted specificity from Mycobacterium BCG/ K. Pranav, J.C.Baae, D. Groothuic //Protides. Biol. Fluids Proc. 33rd Col-log., 1985.-p.671−673.
  339. Ranchoff B.I. Monoclonal antibodies specific to subspecies of mycobacteria / B.I. Ranchoff //Abstr.Ann.Meet.Amer.Soc.Microbiolog., 1986. Ann.Meet. Washington D.C.-1986. -23−28., March.-P.l 13−114.
  340. Ressang AA Enzootische rinderleucose. Diagnostick Versproiding in bestrijding in Nederland/A.A.Ressang, N. Mastenbroeck, J. Quak //Tijdschr. Diergenesk.-1976.- V.101.- № 13. P.711−717.
  341. Ridge S.E. A comparison of two ELISAs for the detection of antibodies to bovine leucosis virus in bulk-milk/ S.E.Ridge, J.W.Galvin// Aust Vet J. 2005 Jul-83(7):431−4.
  342. Ritacco V. Reciprocal cellular and humoral immune responses in bovine tuberculosis/ V. Ritacco, B. Lopez, I.N. De Kantor et al. //Res. Vet. Sei., 1991.-v.50.-p.365−367.
  343. Rodriguez J. G. Amplification of a 500-Base-Pair Fragment from Cultured Isolates of Mycobacterium bovis / J. G. Rodriguez, P. Fissanoti, Del Portillo et al. // Journal of Clinical Microbiology, July 1999, p. 23 302 332, Vol. 37, No. 7.
  344. Rodriguez J.G. Species-specific identification of Mycobacterium bovis by PCR / J.G. Rodriguez, G.A. Mejia, P. Del Portillo h a p.// My-crobiology., 1995.-141:2131−2138.
  345. Roger A. Differenciation serologyque de souches humaines et bovines de bacille tuberculaux par la reaction de mycobacteriostase / A. Roger, F. Roger// C.R.Acad.Sci.Ser.D., 1969.-268. 24.-2978−2981.
  346. Romero R.E. Identification of Mycobacterium bovis in bovine clinical samples by PCR species-specific primers/ R.E.Romero, D.L.Garzon, G.A.Mejia, W. Monroy, L.A.Murillo //J.Vet.Res., 1999. Apr- 63(2): 101−6.
  347. Rosskopf M. Comparison of two ELISA systems for the detection of antibodies against IBR/IPV and against enzootic bovine leukemia virus/ M. Rosskopf, E. Staub, M. Ackermann //Schweiz Arch. Tierheilkd., 1994.-v.l36.-p.58−67.
  348. K.B. «Hamogeneoas» enzyme immunoassay. New immunochemical technique / K.B. Rudenstein, R.S. Schneider, E.F. Ullman // Biochem. Biophys. Res. Common. -1972. -V.47. P.846−851.
  349. Rufka J. The improvement of monitoring methods of cattle infection with bovine leukemia virus (BLV)/ J. Rufka, P. Kubis, E. Buzala, S. Kamiriski// Pol J Vet Sci. 2003 -6(3 Suppl):40−2.
  350. Runyon E.N. Differenciation des mycobacteries anonymes (atipiques) et des bacilles tuberculeux des mammiferes / E.N. Runyon // «Bull. Un. int. tuberc.», 1959, v. 29, h. 72 -82.i
  351. Runyon E.N. Mycobacterial and mycobacterioses //Kekkaku. 1972.-V.47.-№ 10.-P.3 31−337.
  352. Sagata, N. Identification an some biochemical properties of the major XBL gene product of bovine leukemia virus / N. Sagata, M. Tsuzuku-Kawamura, F. Nagyoshi-Aida // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82, 78 797 883
  353. Samuel B. Mycobacterium in arthropods of different biotypes / B. Samuel // Zentrabi. Bacteriol. Parasiten. Infectionskr 1976 — Hyg. Abt. l: Orig. — A-211 — p. 50−57.
  354. Sargeant J.M. Evalution of bulk-milk ELISA test for the classification of herd-level bovine leukemia virus status/ J.M.Sargeant, D.F.Kelton, E.W.Martin, E.D.Mann //Prev. Vet. Med., 1997.-v.-31.-p.223−230.
  355. Schultz R.D. Development of the fetal bovine immune responses: aireview/ R.D. Schultz //Cornell Vet., 633.507−535, 1973.
  356. Schuurs A.N. Affinity Chromatogr. and Related techn / F.N. Schuurs, T.C. Gribnau, J.H. Lauvering // Theor. Aspects and Biomed. Appl. Prjc. Int. Symp. Veldhaven. 1981. — V.l. — P.343−356.
  357. Sechi L.A. Different Strategies for Molecular Differentiation of Mycobacterium bovis Strains Isolated1 in Sardinia, Italy / L.A.Sechi, L. Guido, A.L.Stefano et al. // Applied and Environmental Microbiology, April 1999, p. 1781−1785, Vol. 65.
  358. Seichi L.A. Enterobacterial repetitive intergenic consensus sequences as molecular targets for typing of Mycobacterium tuberculosis strains / L.A. Seichi, S. Zanetti, I. Dupre h flp.// Clin.Microbiol., Jan.1998.-p.128−132.-V.36.
  359. Shmeide H. Strudies an Atypical Mycobacteriosis with special emphasis on the Desease due to Mycobacterium kansasi «Kekkaku» / H. Shmeide. 547 550.
  360. Smith-Franklin B.A. Follicular dendritic cells and the persistence of HIV infectivity: the role of antibodies and Fc receptors/ B.A.Smith-Franklin, B.F.Keele // The Journal of immunology. 2002. — V168. -P.2408−2414.
  361. Sorensen A.L. Purification and characterization of a low-molecular mass T-cell antigen secreted by M. tuberculosis/ A.L.Sorensen, S. Nagai, G. Hauen, P. Andersen et al. // Infec. and Immun., 1999.-v.63 .-p.1710−1717.
  362. Sreevatsan S. A multiplex approach to molecular detection of Brucella abortus and/or Mycobacterium bovis infection in cattle / S. Sreevatsan, J.B. Bookout, F. Ringpis h, zjp. // J.Clin.Microbiol., 2000, Jul- 38(7): 2602−10.
  363. Straus E.W. Binding assay for detection of mycobacteria / E.W. Straus // USA, Montefiore Medical Center, 1983.
  364. Straus E.W. Clinical applications of the radioimmunoassay of secretory tuberculoprotein/ E.W.Straus, M.A.H.Quraishi, S. Levine // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1981.-V78.-p.3214−3217.
  365. Syamalima D. The complete genomic sequence of an in vivo low replicating BLV strain / D. Syamalima, A. Lynn, Dipak K. Dube// Viril-ogyJ., 2009, 6:120.
  366. Taylar F.G.R. Comparison of sensitivities of class specific antibody in Moore serum / F.G.R. Taylar, D. Patel, E. Baerne // J. Immun. Meth. -1983. V.65. — № 1−2. — P. 65−73.
  367. Teifke J.P. Detection of bovine leukaemia virus (BLV) in tissue samples of naturally and experimentally infected cattle/ J.P. Teifke, T.W.Vahlenkamp// Berl Munch Tierarztl Wochenschr. 2008 Jul-Aug-121(7−8):263−9.
  368. Terukazu Odawara Circulating Immune Complex Levels in Cows with Enzootic Bovine Leukosis/ Terukazu Odawara, Misao Onuma, Hiroyasu Yochikawa et al. // Jpn. J. Vet. Sci., 1987.-v.49.-p657−661.
  369. Thoen C.O. Use of enzyme-linked Immunosorbent assay for detecting mycobacterial antigenes in tissues of M. bovis infected cattle / C.O. Thoen, C. Malstrom, K. Mills // Am.J.Vet.Rev., 1981. V. 42. — № 10.-P.1814−1815.i
  370. Thoen C.O. Patogenesis of Mycobacterium bovis infection / C.O. Thoen, E.M. Himes // Prog. Vet. Microbiol. Immun., 1986.- V.2.-p.l98−214.
  371. Towbin H. Electrophoretic transfer of proteins from polyacryla-mide gels to nitrocellulose sheets: Prosedure and some applications/ H. Towbin, T. Staechelin, J. Gordon //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979.-V.76.-P.4350−4354.
  372. Tsai C.M. The analysis of lipopolysaccharido in meningococci polysaccharide vaccines by silver staining following SDS polyacrylamidegel electrophoreats / C.M.Tsai //J. Biological Standartisation, 1986.-V.14-P.25−33.
  373. Ungar-Waron H. Circulating immune complexes in bovine leukemia virus (BLV)-infected cattle/ H. Ungar-Waron, J. Brenner, R. Paz, Z. Trainin// Vet.Immunol.Immunopathol., 1992 Oct: 34 (1−2): 173−9.
  374. Van Weemen B.K. Immunoassay using antigen-enzyme conjugate / B.K. Van Weemen, A.N. Schuurs // FEBS Letters. 1971. — V. 15. -P.232−236.
  375. Waters W.R. Early antibody responses to experimental Mycobacterium bo vis infection of cattle/ W. R, Waters, M.V.Palmer, T.C.Thacker, J.P.Bannantine// Clin Vaccine Immunol. 2006 Jun-13(6):648−54.
  376. Wilcke I. Clinical evaluation of MPT-64 and MPT-59, two proteins secreted from M. tuberculosis, for skin test reagents / Wilcke I., Jensen B., Ravn P// Tuber/Lung Dis., 1996.-V.77.-P.250−256.
  377. Wood R.R. Productional and Characterization of Monoclonal antibodies Specific for M. bovis / R.R. Wood // J.Microbiol.-1988.-V.134. № 9.- P.1599−1604.
  378. Vosloo W. Characterisation of a lipoprotein in Mycobacterium bovis (BCG) with sequence similarity to the secreted protein MPB70 /
  379. W.Vosloo, P. Tippoo, J. Hughes, N. Harriman, M. Emms //Gene. 1997. Vol. l88.-P.-123−128.
  380. WorsaaeA. Monoclonal Antibodies produced in BAL/O. Mice Define New Antigenic Determinants in Culture Filtrate Preparations of M. tuberculosis / A. Worsaae, L. Heronlver // J.Clin.Microbiol. -1988.-V.26.-№ 12.-P. 2608−2616.
  381. Wu D. In vivo transcription of bovine leukemia virus and bovine immunodeficiency-like virus/ D. Wu, K.Murakami. H. Jin, Y. Inoshima//Virus Research 2003.-V.7.-P.81.
  382. Yo Komiso Y. A method for avoiding false-positive reactions in an enzyme-linked Immunosorbent assay for the diagnosis of bovine paratu-berculosis / Y. Yo Komiso, H. Yugi, H.S. Mercal // Jap.J. Vet.Sci. 1985. — V47. — № 1. -P.lll.
  383. Zieba M. Chemical structure of Mycobacterium tuberculosis/ M. Zieba, M. Krawczyk, I. Grzelewska-Rzymowska// Pol Merkur Lekarski. 2006.- Sep-21(123):262−5.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!