Цитоморфологическая характеристика культур клеток рыб и их чувствительность к некоторым вирусам
Благодаря получению однослойных культур клеток гонад карпа в нашей стране впервые в 1970 году был выделен вирус от больных карпов, а при изучении свойств и роли вируса в патологии рыб установили, что этот агент вызывает заболевание названное весенняя вирусная болезнь карпа (Рудиков Н.И., 1986). В 2001 году впервые в России от мальков семги, полученных из оплодотворенной икры, завезенной… Читать ещё >
Содержание
- Список сокращений
- 1. Введение
- 2. Обзор литературы
- 2. 1. Культуры клеток и тканей рыб
- 2. 1. 1. , Первичные культуры. Ю
- 2. 1. 2. Перевиваемые клеточные линии
- 2. 2. Вирусные заболевания рыб
- 2. 2. 1. Инфекционный некроз поджелудочной железы лососевых lf. (IPN)
- 2. 2. 2. Весенняя виремия карпов (SVC)
- 2. 1. Культуры клеток и тканей рыб
- 3. 1. Рыбы
- 3. 2. Культуры клеток
- 3. 3. Вирусы
- 4. 1. Разработка методов получения первичных и субкультур из тканей лососевых рыб (Salmo irideus Gibbons) и их цитоморфологическая характеристика. ^
- 4. 1. 1. Культура клеток из ткани сердца радужной форели
- 4. 1. 2. Культура клеток из ткани почек радужной форели
- 4. 1. 3. Культура клеток из ткани селезенки радужной форели
- 4. 1. 4. Культура клеток из ткани гонад радужной форели
- 4. 2. Разработка методов получения первичных и субкультур из тканей гонад серебряного карася (Carassius carassius L.) и их ^ морфологические свойства
- 4. 3. Разработка методов получения первичных и субкультур из тканей эмбрионов аквариумной рыбы-гуппи (Lebistes ^^ reticulates L.) и их морфологические свойства
- 4. 4. Изучение чувствительности к вирусам первичных и субкультур из тканей рыб
- 4. 4. 1. Чувствительность первичных культур клеток из тканей внутренних органов и субкультуры из ткани гонад радужной форели к вирусу инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых IPN
- 4. 4. 2. Чувствительность первичных и субкультур из ткани гонад серебряного карася к вирусу весенней виремии карпов SVC. ^
- 4. 4. 3. Чувствительность субкультур из ткани эмбрионов аквариумной рыбы-гуппи к вирусам промышленноразводимых ^ рыб
- 4. 5. Изучение цитопатогенного действия штаммов вируса IPN и SVC на перевиваемые культуры клеток лососевых и карповых рыб
- 4. 5. 1. Размножение и титрование референтного и полевого штаммов вируса IPN в перевиваемых культурах клеток СНН-1 ^ и CHSE
- 4. 5. 2. Морфологические изменения перевиваемых культур клеток СНН-1 и CHSE-214, инфицированных полевым и ^ референтным штаммами вируса IPN
- 4. 5. 3. Размножение и титрование полевого штамма IPN в перевиваемой культуре клеток эпителиальной папилломы gj карпа ЕРС
- 4. 5. 4. Сравнительное изучение цитопатогенного действия в перевиваемых культурах клеток сердца кеты СНН-1 и эпителиальной папилломы карпа ЕРС референтного и полевого штаммов вируса IPN и SVC
Цитоморфологическая характеристика культур клеток рыб и их чувствительность к некоторым вирусам (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность проблемы.
Метод культивирования клеток вне организма является большим достижением биологической науки, так как позволяет получать наиболее объективные и надежные данные при диагностике вирусных инфекций, использовать их в биотехнологических процессах при производстве вакцин, для получения интерферона, а также при синтезе моноклональных антител. (Wolf К. et.al., 1980; Sasson А., 1987; Животная клетка в культуре, 2000).
Культуры клеток рыб также являются объектом биотехнологии и вирусологии. Наибольшую потенцию роста in vitro имеют клетки гонад неполовозрелых рыб и их эмбрионы (Dannevig В.Н. et.al., 1997), культуры, приготовленные из зрелых тканей, обладают слабой потенцией роста (Miller N.W. et.al., 1994аRode М. et. al., 1997; Wergeland H.I. et.al., 2001). В некоторых случаях перевиваемые культуры клеток получены из новообразований: саркомы, лимфосаркомы, гепатомы, нефробластомы и оспенной эпителиомы (Soustegard R.A. & Soustegard K.S., 1973; Fijan N., Sulimanovic D. et. al., 1983).
Благодаря получению однослойных культур клеток гонад карпа в нашей стране впервые в 1970 году был выделен вирус от больных карпов, а при изучении свойств и роли вируса в патологии рыб установили, что этот агент вызывает заболевание названное весенняя вирусная болезнь карпа (Рудиков Н.И., 1986). В 2001 году впервые в России от мальков семги, полученных из оплодотворенной икры, завезенной из Норвегии, в культуре клеток сердца кеты был выделен вирус инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых, представитель семейства Birnaviridae (Пичугина Т.Д. с соавт., 2005а).
Таким образом, с возникновением острых вирусных эпизоотии среди карповых и лососевых рыб, появилась необходимость в совершенствовании методов диагностики, основанных на использовании как первичных, так и перевиваемых культур клеток.
В практической вирусологической работе наиболее важным является изучение спектра чувствительности культур клеток к различным вирусам (Kelly R.K. et.al., 1978; Kielian М. et.al., 1990). Не все линии клеток изучены достаточно полно в этом отношении. Так, в культуре клеток FHM реплицируются, по крайней мере, четыре вируса рыб — IPNV, SVCV, VHSV, IHN и два вируса теплокровных животных (Gravell М. et.al., 1965). Культура клеток CHSE — 214, из эмбрионов чавычи, чувствительна к вирусам герпеса лососевых, IHN, IPN и VHS (Kibenge F.S.B. et.al., 2000). Культура клеток из оспенных поражений карпа ЕРС также имеет широкий спектр чувствительности и в ней реплицируются вирусы SVC, VHS, а также вирусы европейского угря. Особый интерес представляет линия клеток радужной форели RTG-2, чувствительная к шести вирусам рыб, а также к вирусам венесуэльского и восточного энцефаломиелитов лошадей, и отека головастиков (Hjalmarsson A. et.al., 1999).
Однако, несмотря на существование большого количества перевиваемых клеточных линий рыб не все из них могут быть использованы в диагностике. Для областных и районных диагностических лабораторий зачастую не представляется возможным и экономически оправданным приобретение из-за рубежа или исследовательских институтов необходимых линий клеток. Более того, работа с зарубежными культурами клеток рыб сопряжена с определенными трудностями при культивировании. В качестве альтернативы при диагностических исследованиях для выделения и накопления вируса возможно использование первичных культур и субкультур клеток, полученных из тканей восприимчивых к данному вирусу рыб (Office International des Epizooties, 2000).
Таким образом, расширение исследований по получению первичных культур клеток и субкультур, чувствительных к определенным вирусам рыб, и создание в дальнейшем отечественных постоянных линий является актуальной научной проблемой.
Цель работы: изучить культурально-морфологические свойства первичных культур клеток, субкультур и клеток перевиваемых линий из тканей различных видов рыб и определить чувствительность к вирусам-возбудителям инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых (IPN) и весенней виремии карпов (SVC). Основные задачи исследований:
• Получить первичиые культуры и субкультуры клеток из тканей внутренних органов и гонад лососевых, карповых и аквариумных рыб и дать цитоморфологическую характеристику.
• Изучить чувствительность культур клеток из тканей лососевых рыб к вирусу инфекционного некроза поджелудочной железы (IPN) лососевых и культур клеток из гонад карася к вирусу весенней виремии карпов (SVC).
• Определить чувствительность и возможность адаптации культуры клеток из эмбрионов аквариумных рыб к вирусам рыб, разводимых в аквакультуре.
• Изучить морфологические изменения в клетках перевиваемых линий СНН-1 и CHSE-214, инфицированных полевым и референтным штаммами вируса IPN.
• Разработать схему преодоления непермиссивности клеток перевиваемой линии эпителиальной папилломы карпа (ЕРС) к вирусу инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых (IPN).
• Изучить в сравнительном аспекте цитопатогенное действие полевого штамма ВС-1, референтных штаммов вируса IPN и SVC на перевиваемые культуры клеток сердца кеты СНН-1 и эпителиальной папилломы карпа ЕРС.
Научная новизна.
Получены субкультуры клеток из первичных культур клеток гонад радужной форели и серебряного карася, дана их цитоморфологическая характеристика и определена чувствительность к вирусам инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых (IPN) и весенней виремии карпов (SVC) соответственно.
Получена и адаптирована для размножения вируса весенней виремии карпов (SVC) субкультура из клеток эмбрионов аквариумной рыбы-гуппи.
Отработана схема перевода непермиссивных клеток эпителиальной паппиломы карпа в состояние пермиссивности по отношению к вирусу инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых (IPN).
Практическая ценность работы заключается в том, что в результате проведенных исследований отработаны методы получения первичных культур и субкультур из внутренних органов и гонад радужной форели, гонад карася и эмбрионов гуппи, чувствительных к вирусам лососевых и карповых рыб и показана возможность использования их в вирусологических исследованиях.
Апробация.
Основные материалы диссертации были доложены и обсуждены на:
Заседании научно-консультативного Совета по болезням рыб Межведомственной Ихтиологической комиссии и Секции патологии рыб и охраны гидробионтов Отделения ветеринарной медицины РАСХН (Москва, 2003 г.);
Конференции «Современные достижения и проблемы клеточной биотехнологии и иммунологии в ветеринарной медицине» (ВИЭВ, 2003 г.);
Second Bilateral Conference «Aquatic & marine animal health» (USA, 2003);
Совещании, посвященном научно-практическим проблемам инфекционной патологии и охраны здоровья рыб, (ВИЭВ, 2004 г.);
Международной конференции «Сохранение генетических ресурсов». (Санкт-Петербург, 2004 г.);
Конференции «30 лет развития современных направлений клеточной биотехнологии» (ВИЭВ, 2005 г.);
Международной научно-практической конференции «Ветеринарная медицина 2005: современное состояние и актуальные проблемы обеспечения ветеринарного благополучия животноводства» (Ялта, 2005 г.);
Межлабораторном совещании научных сотрудников ВИЭВ (2006г.).
Публикации По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ.
Объем и структура работы.
Диссертационная работа изложена на 131 страницах и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложения. Материалы диссертации иллюстрированы 14 таблицами, 25 рисунками.
Список литературы
включает 178 публикаций, в том числе 147 иностранных.
6. Выводы.
1. Отработаны методы получения первичных культур клеток из ткани селезенки, сердца и гонад радужной форели (Salmo irideus Gibbons), изучены их культурально-морфологические свойства и чувствительность к вирусу инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых (IPNV). Титр вируса в культуре сердца форели 104'6−4'8ТЦД50/мл, селезенки — Ю^ТЦДзо/ид, гонад — Ю5'2−5'3ТЦД50/М".
2. Субкультура клеток гонад радужной форели представлена клетками эпителиоподобного типа с 1−3 ядрышками, одной или несколькими мелкими вакуолями по периферии клетки. Без изменения морфологии культура клеток прошла пять пассажей, коэффициент пересева 1:2, 1:3. Культура обладает высокой чувствительностью к вирусу инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых.
IPNV), титр Ю5'5−5'8ТЦД50/мл.
3. Получена первичная и субкультура клеток гонад серебряного карася (Carassuis carassius L.), представленная клетками смешанного типа (эпителиоподобными и небольшим количеством фибробластопобных), ядра крупные с 1−2 разнородными ядрышками. Коэффициент пересева 1:2, проведено пять пассажей. Первичная культура клеток может использоваться для культивирования вируса весенней виремии карпов (SVCV) (титр 106'°ТЦД5о/мл), при субкультивировании на 1−2 пассажах титр вируса составил.
105'8″ 6'°ТЦД5о/мл, с увеличением числа пассажей титр увеличивается до.
106,2−6,5ТЦД5о/мл.
4. Субкультура клеток эмбрионов аквариумной рыбки — гуппи (Lebistes reticulates L.) на уровне первых четырех пассажей представлена фибробластоподобными и эпителиоподобными клетками с преобладанием последних, к 6−7 пассажу происходит увеличение числа фибробластоподобных клеток. Первичная культура клеток гуппи не чувствительна к вирусу весенней виремии карпов (SVC). В субкультуре на втором пассаже отмечено цитопатогенное действие вируса и разрушение монослоя на 4−5 день, в третьем пассаже — на 2−3 день. Субкультура клеток эмбрионов гуппи может использоваться для диагностики и накопления SVCV.
5. Референтный штамм вируса 1PN и полевой штамм ВС-1 реплицируются быстрее в постоянной линии клеток СНН-1 и накапливаются в культуральной жидкости в большем титре, чем в культуре CHSE-214. При заражении культуры клеток СНН-1 ЦПД наступает обычно на 3 день, титр 107'2 — 108'5 ТЦД50/мл, в культуре CHSE-214 в среднем на два дня позже, титр 102'62 -102'8 ТЦД50/мл.
6. Цитопатологические изменения в культурах СНН-1 и CHSE-214, выражались в изменении морфологии клеток, которые становились более вытянутыми, вакуолизации, увеличении ядер и симпластообразовании.
7. Отработана схема, при которой возможно использование культуры клеток эпителиальной паппиломы карпа (ЕРС) для размножения вируса IPN. Культуру выращивают при 20−23°С, после заражения инкубируют при температуре, оптимальной для вируса лососевых — 15 °C. Цитопатогенное действие вируса IPN наблюдается на 5−7 день, титр -106'18 ТЦД50/мл.
Практические предложения.
В результате проведенных исследований отработаны методы получения первичных культур и субкультур клеток из внутренних органов радужной форели (Salmo irideus Gibbons), гонад карася (Carassuis carassius L.) и эмбрионов гуппи (Lebistes reticulates L.). Полученные культуры чувствительны к вирусам лососевых и карповых рыб и рекомендуются для вирусологических исследований. Разработанные методы включены в «Методические рекомендации по культивированию клеток для диагностики вирусных болезней рыб» и утверждены на секции «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины РАСХН 14.02.2006, протокол №.
Список литературы
- Архангельский Д.С., Полякова О. В. Получение первичных культур клеток из гонад судака для вирусологических исследований. // Биол. Основы рыб. хоз-ва водоемов Сред. Азии и Казахстана, Фрунзе, 1978, с.244−245
- Архангельский Д.С., Полякова О. В. Получение первичных культур клеток из гонад судака. //Рыб. хоз-во, 1979, № 1 с.26−28
- Биология клетки в культуре. Отв. редактор А. С. Трошин, // Ленинград, «Наука»., 1984 г.
- Борисова М.Н., Пичугина Т. Д., Завьялова Е. А. Здоровье рыб и безопасность рыбоводных хозяйств // Ветеринарная жизнь, 7 (7) апрель 2004, стр.4
- Гончаров Г. Д., Зубкова Л. А., Степанова М. А. Однослойная клеточная культура почечной ткани леща. // Биол. внутр. вод. Информ. бюллетень, 1970, № 6, с.60−64
- Животная клетка в культуре. Под ред. проф. Дьяконова Л. П., проф. Ситькова В. И. М. // 2000, с. 148−159.
- Завьялова Е.А., Пичугина Т. Д., Дьяконов Л. П., Борисова М. Н. Культура клеток гуппи и ее применение в вирусологических исследованиях //Ветеринарная патология, М., 2003(a), 1(5) с.50−52
- Завьялова Е.А., Дрошнев А. Е., Пичугина Т. Д. Мониторинг в рыбоводстве // Ветеринарная жизнь, (15) август 2004, стр.2
- Завьялова Е.А., Пичугина Т. Д., Дьяконов Л. П., Борисова М. Н. Культуры клеток рыб для вирусологических исследований идиагностики вирусных болезней // Информационный бюллетень «Клеточные культуры» вып.20, Санкт-Петербург, 2005 стр. 53−57
- Лакин Г. Ф. Биометрия, М., Высшая школа, 1990
- Ларцева Л.И., Зубкова Л. А. Культивирование однослойных клеточных культур из кожи и плавников карпа и судака. // Сб. научн. трудов ВНИИПРХ, 1981, вып. 32, с. 25−32
- Наконечная М.Г. К методике получения первичной однослойной клеточной культуры из гонад форели. // Труды ВНИИПРХ, 1978, вып.27, с.94−98
- Никольский В.В., Осадчая Е. Ф. О методике получения первичной культуры почечных клеток карпов. // Материалы Всесоюзной конференции по вопросам ветеринарной вирусологии (1822 февраля 1964 г.) с.66−67
- Осадчая Е.Ф. Методика культивирования однослойных клеточных культур из недозрелых гонад самок карпов. // Рыбное хозяйство. Респ. Межвед. темат. научн. сб., Киев, 1969, вып. 9, с. 88−92
- Осадчая Е.Ф., Лигоцкая В. Н. Вирусологические исследования при изучении этиологии краснухи карпов. // I Всес. симпозиум по инф. Бол. Рыб. (16−19 мая 1972 г.) Тезисы докладов. 1972, с. 35−37
- Осадчая Е.Ф. Применение однослойных клеточных культур из почек и гонад карпа в ихтиопатологии. // Паразаты и болезни рыб и водных беспозвоночных /"Наука" 19 726, с.64−69
- Пичугина Т.Д., Мочалкин В. П., Анисимов М. К., Однослойные культуры клеток эмбрионов гуппи. // Бюллетень ВИЭВ, 1976, вып. 26., с. 32.
- Пичугина Т.Д. Сравнительное изучение изолятов возбудителя весенней вирусной болезни рыб в реакции нейтрализации // Проблемы ветеринарной иммунологии / Тр. ВИЭВ, 1983, т.57, с. 141−143
- Пичугина Т.Д., Борисова М. Н., Завьялова Е. А., Щелкунов И. С., Щелкунова Т. И. Весенняя виремия карпов // Ветеринария, 2004, 5, стр.2 В 30.
- Пичугина Т.Д., Завьялова Е. А., Борисова М. Н., Дьяконов Л. П., Надточей Г. А., Шуляк А. Ф. Выделение вируса инфекционного некроза поджелудочной железы // Ветеринария 2005(a), 1, стр. 31−32.
- Пичугина Т.Д., Завьялова Е. А. Влияние вирусных инфекций на развитие аквакультуры в России // Межведомственный тематический научный сборник «Ветеринарная медицина-85», Харьков, 2005 (б), том 2., стр.906−911.
- Рабкин Е.М., Куденцова Р. А. Приготовление однослойной культуры тканей из гонад карася и карпа. // Ветеринария, 1969, № 12, с.91−92
- Рудиков Н.И. О клеточных культурах из эмбрионов и личинок пресноводных рыб. // «Рыбоводство и болезни рыб». Научн. Труды отделение животноводства и ветеринарии ВАСХНИЛ. М., 1969, с. 221 224
- Рудиков Н.И. Весенняя вирусная болезнь карпа. Автореф. докт. дисс. М. 1986
- Сергеев В.А., Хижинская В. П. — «С.-х.биология» 1967, № 2, с. 18
- Сергеев В.А., Репродукция и выращивание вирусов животных -М. «Колос», 1976
- Тец В.И., Яковлева Г. С. Получение культуры тканей карпа и ее применение при изучении этиологии краснухи рыб. // Научно-технический бюллетень ГосНИОРХ, 1962, № 15, с.73−77
- Щелкунов И.С., Купннская О. А. Продолжительное субкультивирование in vitro клеток ткани хвостового плавника карпа Cyprinus carpio L. // Паразиты и болезни рыб. Сборник научных трудов ВНИРО, М., 2000, с.90−94
- Щелкунова Т.И., Купинская О. А., Мащенко Н. А., Щелкунов И. С. Клеточные линии их тканей сибирского осетра. // Первый конгресс ихтиопатологов России. Астрахань, сентябрь 1997 г., Тезисы докладов. 1997, с.302−303
- Agius С., Mangunwiryo Н., Johnson R.H. & Smail D.A.A more sensitive technique for isolating infectious pancreatic necrosis virus from asymptomatic carrier rainbow trout, Salmo gairdneri Richardson. // J. Fish Diseases. 1982, 5, 285−292.
- Ahne W. Persistent infection in CHSE-214 cell with IPN virus isolated from pike (Exos lucius). // Bull. Off. Int. Epizoot. 1977, 87, 415 417
- Ahne W. Isolation and characterisation of infectious pancreatic necrosis virus from pike (Esox lucius). // Arch. Virol, 1978, 58, 65−69.
- Ahne W. & Negele R.D, Studies on transmission of infectious pancreatic necrosis virus viaeyed eggs and sexual products of salmonid fish. /In: Fish and Shellfish Pathology, Ellis A.E., ed. Academic Press, London, UK, 1985, 261−269.
- Ahne W. Studies on the use of fish tissue cultures for toxicity tests in order to reduce and replace the fish tests. // Zbl. Bact. Hyg. Abt. Orig. -1985.-b. 180. -s. 480−504
- Ahne W. Argulus foliaceus L. and Philometra geometra L. as mechanical vectors of spring viraemia of carp virus (SVCV).J. Fish Dis., 1985a, 8, 241−242.
- Ahne W. Viral infection cycles in pike (Esox lurius L). Z. Angew. Ichthyol., 1985b, 2, 90−95.
- Ahne W. Jorgensen P.E.V., Olesen N.J., Fischer-Scherl T. & Hoffman R. Aquatic Birnaviruses: virus of the serogroup II isolated from an IPN outbreak in brook trout (Salvelinus fontinalis). // Bull. Eur. Ass. Pish Pathol., 1989, 9, 14−16.
- Alonso M., Rodrigues S., Peres-Prieto S.I. (1999) Viral coinfection in salmonids: infectious pancreatic necrosis virus interferes with infectious hematopoietic necrosis virus. Arch/ Virol. 144: 657−673
- Altman P.L. & Dittmer D.S. Biology Data Book, 2nd ed, Vol.1, Fed. Of Am. Soc. For Exp. Biol., Bethesda, Maryland, 1972, p. 519
- Animal cell culture. A practical approach, edited by R.I.Freshney, Cancer Research Campaign, Department of Oncology, University of Glasgow, 1 Horselethill Road, Glasgow, G 12 9LX, UK, 1989
- Bernard J., Lecocq-Xhonneux F., Rossius M., Thiry M.E., de Kinkelin J. Clonning and sequencing the messenger RNA of the N gene of viral hemorrhagic septicemia virus // Gen. Virology 1990, v. 71, p. 16 691 674
- Bootland L. M., Dobos P. & Stevenson R. M. W. Fry age and size effects on immersion immunization of brook trout, -Salvelinus fontinalis Mitchell, against infectious pancreatic necrosis virus. // Journal of Fish Diseases 1990, 13, 113−125.
- Bullock G.L., Rucker R.R., Amend D., Wold K. & Stuckey H.M. Infectious pancreatic necrosis: transmission with iodine-treated and non-treated eggs of brook trout (Salvelinus fontinatis). // J. Fish. Res. Board Can., 1976, 33, 1197−1198.
- Castric J., Baudin-Laurencin F., Coustans M.F. & Auffret M. Isolation of infectious pancreatic necrosis virus, Ab serotype, from an epizootic in farmed turbot, Scophtbalmus maximus. // J. Aquaculture, 1987, 67, 117−126.
- Castric J. Viral diseases in fish mariculture. // Bull. Eur. Ass. Fish. Pathol. 1997, 17: 197−200
- Catalogue of cell lines & hybridomas, 7lh edition, 1992
- Chiou H.Y., Lo C.F., Tung M.C., Wang C.H., Fukuda H. & Sano T. The general characteristics of a birnavirus isolated from cultured loach (Missurnus anguiilicaudatus) in Taiwan, // Fish Pathol. 1993, 28, 1−7.
- Chou H.Y., Li H.J. & Lo C.F. Patogenicity of a birnavirus to hard clam (Meretrix lusoris) and effect of temperature stress on its virulence // J. Fish Patology, 1994, 29, 171−175
- Chou H.Y., Chang S.J., Lee H.Y. & ChiouY.C. Preliminary evidence for the effect of heavy metal cation on the susceptibility of hard clam (Meretrix lusoris) to clam birnavirus infection. // J. Fish Patology, 1998, 33,213−219
- Christie К. E., Havarstein L. S., Djupvik H.O., Ness S. & Endresen C. Characterization of a new serotype of infectious pancreatic necrosis virus isolated from Atlantic salmon. //Archives of Virology 1988, 103, 167−177.
- Clem L.W., Moewus L., Sigel M.N. Studies with cell from marine fish in tissue culture. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med, 1965, V.108, № 3, p.762−766
- Damsgard В., Mortensen A., Sommer A.- I. Effects of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) on appetite and growth in Atlantic salmon, Salmo salarL. //Aquaculture 1998, 163:185−193
- Dannevig B.H., Falk K. & Namork E. Isolation of the causal virus of infectious salmon anemia (ISA) in a long-term cell line from Atlantic salmon head kidney.//J. Gen. Virol, 1995a, 76, 1353−1359.
- Dannevig B.H., Falk K. & Press C.McL. Propagation of infectious salmon anaemia (ISA) virus in cell culture. // Vet. Res. 1995b, 26, 438−442.
- Dannevig B.H., Brudeseth B.E., Gjoen Т., Rode M., Wergeland H. I,
- Evensen 0. & Press C.McL. Characterisation of a long term cell line (SHK-1) developed from the head kidney of Atlantic salmon (Salmo salar L). // Fish Shellfish Immunol. 1997, 7, 213—226.
- De Sena J., Rio G.J. Partial purification and characterization of RTG-2 fish cell interferon. //Infect. Immun. 1975, 11: 815−822
- Dixon P.F. & Hill B.J. Rapid detection of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) by the enzyme-linked immunosorbent assay. // J. Gen. Virol, 1983, 64, 321−330.
- Dobos P., Virus-specific protein synthesis in cell infected by infectious pancreatic necrosis virus.// J. Virology 1977, 21, 242−258
- Dobos P., Hill B.J., Hallet R., Kells D.T.C., Becht H., Tenings D., Biophysical and biochemical characterization of five animal viruses with bisegmented double-stranded RNA genomes. // J. Virology 1979, 32, 593 605
- Dobos P. & Roberts Т.Е. The molecular biology of infectious pancreatic necrosis virus: a review. // Can. J. Gen. Microbiol. 1983, 29, 377−384.
- Dobos P., The molecular biology of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV). // Ann. Rev. Fish. Dis. 1995, 5: 25−54
- Dorson M. & Torchy C. The influence of fish age and water temperature on mortalities of rainbow trout, gairdneri Richardson, caused by a European strain of infectious pancreatic necrosis virus. // Journal of Fish Diseases 1981, 4, 213−221.
- Dorson M. & Torchy C. Experimental transmission of infectious pancreatic necrosis virus via the sexual products. / In: Fish and Shellfish Pathology, Ellis A.E., ed. Academic Press, London, UK, 1985, 251−260.
- Dorson M., de Kinkelin R & Torchy C. Interferon synthesis in rainbow trout following infection with infectious pancreatic necrosis virus. // Fish and Shellfish Immunology 1992, 2, 311−313.
- Elazhary M. A. S. Y., Lagace A., Cousineau G. & Roy R. S. Outbreak of infectious pancreatic necrosis in yearling brook trout (Salvelinus fontinalis). //Journal of the Fisheries 1976, 33, 2621−2625.
- Evensen O. & Rimstad E. Immunohistochemical identification of infectious pancreatic virus in paraffin-embedded tissues of Atlantic salmon (Salmo salar). //J. Vet. Diagn. Invest. 1990, 2, 288−293.
- Faisal M. & Ahne W. Spring viraemia of carp virus (SVCV): comparison of immunoperoxidase, fluorescent antibody and cell culture isolation techniques for detection of antigen. J. Fish Dis., 1984, 7, 57−64.
- Falk K., Namork E., Rimstad E., Mjaaland S. & Dannevig B.H. Characterization of infectious salmon anaemia virus, an orthomyxo-like virus isolated from Atlantic salmon (Salmo salar L).J. Virol., 1997, 71, 9016−9023.
- Fendrick J.L., Groberg W.J.Jr., Leong J.C. Comparative sensitivity of five fish cell lines to wild type infectious haematopoietic necrosis virus from two Oregon sources. // J. Fish Diseases, 1982, 5, № 2, 87−95
- Fijan N., Petrinec Z., Sulimanovic D. & Zwillenberg L.O. Isolation of the causative agent from the acute form of infectious dropsy of carp. Vet. Arch. Zagreb, 1971, 41, 125—138.
- Fijan N. Infectious dropsy in carp — a disease complex. In: Diseases of Fish, Mawdesley Т., ed. Symposia of the Zoological Society of London. Academic Press, London, UK, 1972, 39—51.
- Fijan N., Sulimanovic D., Some properties of the epithelioma papulosum cyprini (EPC) cell line from carp Cyprinus carpio., // Ann.Virol.(Inst. Pasteur), 1983, 134 E. 207−220
- Fryer J.L., Yusha A., Pilcher K.S. The in vitro cultivation of tissue and cells of Pacific salmon and steelhead trout. // Ann. N. Y. Acad. Sci., 1965, 126, № 1, p. 566−586
- Fryer J.L., Lannan C.N. Three decades of fish cell culture: A current listing of cell lines derived from fishes. // J. of Tissue Culture Methods. 1994, V.16. p. 87−94
- Gahlawat S.K., Munro E.S. & Ellis A.E. A non-destructuve test for detection of IPNV-carriers in Atlantic Halibut, Hippoglossus hippoglossus (L.) // J. Fish. Dis. 2004, 27.233−239
- Ghittino P., Fijan N., Kinkelin P // Bull. Office int. epizoot. 1980, 92, № 9−10. p.955−966
- Granzow H., Wieland F., Fichtner D., Enzmann P.J. Studies of the ultrastructure and morphogenesis of fish pathogenic viruses grown in cell culture. // J. Fish Dis. 1997, 20: 1−10
- Gravell M., Malsberger R.G. A permanent cell line from the fathead minnow (Pimephales promelas). // Ann. N.Y. Acad. Sci., 1965, v. 126, № 1, p. 555−565
- Grutzner L. In vitroZuchtung des Leber- und Nierengewebes Von Tinea vulgaris Cuv. (Schleie) in trypsinierten Einschichtgewebekulturen. // Zbl. Bakteriol., Parasitenk., Infektionskrankh. Und Hygiene, 1958, 173, № 3−4, s. 195−202
- Hedrick R.P., Leong J.C., Fryer J.L., Persistent infection in salmonid fish cell with infectious pancreatic necrosis (IPNV). // J. Fish Dis. 1978, 1, 279−301
- Hedrick R.P., Fryer J.L. Persistent infections of salmonid cell lines with infectious pancreatic necrosis virus (IPNV): a model for the carrier state in trout. // Fish Pathol. 1982, 16: 163−172
- Hedrick R.P., Fruer J.L., Chen S.N., Kou G.H. // Ibid., 1983, 18, № 2, p. 91−97
- Heppell J., Berthiaume L., Tarrab E., Lecomte J., Arella M., Evidence of genomic variations between infectious pancreatic necrosis virus strains by restriction fragment profiles. // J. Gen. Virology, 1992, 73. 28 632 870
- Hill B.J. Infectious pancreatic necrosis and its virulence. / In: Microbial Diseases of Fish (Special Publication of the Society for General Microbiology), Roberts R.J., ed. Academic Press, London, UK, 1982, 91 114.
- Hill B.J. Impact of viral diseases of salmonid fish in the European Community. / In: Salmonid Diseases, Kimura Т., ed. Hokkaido University Press, Sapporo, Japan, 1992, 48—59.
- Hill B.J. & Way K. Serological classification of infectious pancreatic necrosis (IPN) virus and other aquatic birnaviruses. // Ann. Rev. Fish Dis., 1995, 5, 55—77.
- Hjalmarsson A., Everitt E., Identification of IPNV-specified components released from productively infected RTG-2 cells following massive cytopatic effect. //Arch. Virol. 1999, 144: 1487−1501
- Isa K., Shima A. Transfection and stable expression of a dominant selective marker Ecogpt in a culture cell line of the fish, Carassius auratus //J. of cell Science. 1987, V.88. p. 219−224
- Jarp J., Gjevre A.G., Olsen A.B., Bruheim T. Risk factors for furunculosis, infectious pancreatic necrosis and mortality in post-smolt of Atlantic salmon, Salmo salar L. // J. Fish Dis. 1994, 18:67−78
- Jensen M.N. Preparation of fish tissue culture for virus research. Bull. Off.Int.Epiz. 1963, 131−134
- Jorgensen P.E. Vestergard, Kehlet N.P. Infectious pancreatic necrosis (IPN) virus in Danish rainbow trout. Their serological and pathogenic properties // Nord. Vet. Med, 1971, 23, N11, 56−575
- Kelly R.K., Souter B.W., Miller H.R. Fish cell lines: comparisons of CHSE-214, FHM and RTG-2 in assaying IHN and IPN viruses. // J. Fish Res. Board Can., 1978, 35. № 7, 1009−1011
- Kibenge F.S.B., Lyaku J.R. Rainnie D., Hammell K.L. Growth of infectious salmon anaemia virus in CHSE-214 cell and evidence for phenotypic differences between virus strains. // J. Gen. Virology 2000, 81: 143−150
- Kielian M., & S. Jungerwirth. Mechanisms of enveloped virus entry into cells. // Mol. Biol. Med. 1990, 7:17−31.
- Kocylowski B. Wplyw czynnikow szodowiskowuch na zapalenie zgorzelinowe skrzeli karpia. // Gosp. Rubna, 1972, V.24, № 1, s.9−11
- Kolbl O., Die Schwimmblasenentzndung des Karpfens: Nachweis eines intrazytoplasmatisch wachsenden Einzelers mittels Gewebekultur. // Zsterreichs Fischerei. 1989, b.42. s.54−60
- Krogsrud J., Hastein Т., Ranningen K. Infectious pancreatic necrosis virus in Norwegian fish farms. / In: Ahne W, Kurstak E (eds) Viruses of lower vertebrates. Springer Verlag, Berlin, 1989, p 284−291
- Kudo S., Kurosava D., Kunimine I., Nobusawa K. a.o. // Jap. J. Ichtiology, 1975, 21, № 4, p. 203−212
- Kunst Lj. Kultura bubresnih stanica sarana. // Vet. Arhiv., 1962, V.32, № 5−6, s.121−126
- Kunst Lj., Fijan N., Preparation of primary monolayer cell cultures of carp ovary. // Vet. Arhiv., 1966, V.36, № 7−8, s.235−238
- Kurath G., Higman K.N., Bjorklund N.V. The NV genes of fish rhabdoviruses: development of RNase protection assays for rapid assessment of genetic variation // Vet. Res. 1995, v. 26, p. 477−485
- Lannan C.N., Fryer J.L. Recommended methods for inspection of fish for the salmonid rickettsia. // Bull. Eur. Ass. Fish Patol. 1991, V. ll, № 4,-p. 135−136
- Li M.F., Stewart J.E. A quantitative study of the effects of naturally occurring supplements of the growth of rainbow trout (Salmo gairdneri) gonadal cells. // Can. J. Microbiol., 1965, v. ll, p. 9−14
- Lorensen N., Olesen N.J., Jorgensen P.E. Neutralization of Egtved virus pathogenicity to cell cultures and fish by monoclonal antibodies to the viral G protein // J. Gen. Virology. 1990, v. 71, p. 561−567
- Lorensen N. Affinity purification of the structural proteins of a fish rhabdovirus by the use of monoclonal antibodies // J. Virol. Methods. -1992, v. 38, p. 297−303
- MacDonald R.D., Ringed plaque formation in infectious pancreatic necrosis correlates with defective interfering particle production. //J.Gen. Virol. 1978, 41, 523−528
- MacDonald R.D., Kennedy J.C., Infectious pancreatic necrosis persistently infect Chinook salmon embryo cells independent of interferon. // Virology 1979, 95, 260−264
- MacDonald R.D., Dobos P., Identification of the proteins encoded by each genome segment of IPNV. // Virology 1981, 114, 414−422
- Malsberger R.G., Cerini C.P., Characteristics of infectious necrosis virus. //J. Bacteriology 1963, 86, 1283−1287
- Malsberger R.G. Multiplication of infectious pancreatic necrosis virus. // Ann. New York Acad. Sci. 1965, 126, 320−327
- McAllister P.E., Reyes X. // J. Fish Diseases, 1984, 7, № 4, p. 319−322
- McAllister P.E. & Owens W.J. Assessment of the virulence of fish and molluscan isolates of infectious pancreatic necrosis virus for salmonid fish by challenge of brook trout, Salvelinus fontinalis (Mitchill). // J. Fish. Dis. 1995, 18, 97−103.
- McKnight I. J. & Roberts R.J. The pathology of infectious pancreatic necrosis. I. The sequential histoparhology of the naturally occurring condition. // Br. Vet. J., 1976, 132, 76−85.
- Melby H.P., Caswell-Reno P. & Falk K. Antigenic analysis of Norwegian aquatic birnavirus isolates using monoclonal antibodies with special reference to fish species, age and health status. // J. Fish Dis. 1994, 17, 85−91.
- Miller N.W., Chinchar V.G., Clem L.W. Development of leukocyte cell line from the channel catfish (Ictalurus punctatus). // J. Tissue Culture Methods. 1994a V. 16. — p. 117−123
- Miller N.W., Rycyzyn M.A., Wilson M.R., Warr G.W., Naftel J.P., Clem L.M. Development and characterization of cannel catfish long-term В cell lines. //J. Immunology. 1994b V. 152. — p. 2180−2189
- Muller H.C., Scholtissek C., Becht H., The genome of infectious bursal diseases virus consist of two segments of double-stranded RNA. // J, Virology 1979, 31, 584−589
- Nakajima K., Maeno Y., Arimoto M., Inouye K. & Sorimachi M. Viral deformity of yellowtail fingerlings. // Fish Pathol. 1993, 28, 125 129.
- Nims L., Fryer J.L. Pilcher K.S. Studies of replication of four selected viruses in two cell lines derived from salmonid fish. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1970, v. 135. p. 6−12
- Novoa A., Figueras A., Puentes C.F., Ledo A. & Toranso A.E. Characterization of a birnavirus isolated from diseased turbot cultured in Spain. //Dis. Aquat. Org, 1993, 15, 163−169.
- Office International des Epizootics, Diagnostic Manual for Aquatic Animal Diseases, 3rd edition, Paris- The office 2000
- Okamoto N., Sano Т., Hedrick R.P. & Fryer J.L. Antigenic relationships of selected strains of infectious pancreatic necrosis virus and European eel virus. // J. Fish Dis., 1983, 6, 19−25
- Okamoto N., Tanigughi N., Seno Y. & Sano T. The relation between the change of quantities of infectious pancreatic necrosis virus in infected rainbow trout fry and the disease process.//Fish PathoL, 1984, 19, 1−4.
- Okamoto N., Shirakura, Т., Nagakura Y., Sano T. The mechanism of interferon with fish viral infection in the RTG-2 cell line. // Fish Pathol. 1993, 18: 7−12
- Olesen N. J., Jorgensen P.E.V., Bloch B. & Mellergaard S. Isolation of an IPN-like virus belonging to the serogroup II of the aquatic birnaviruses from dab (Limanda limanda). // J. Fish dis. 1998, 11, 449−451.
- Pfitzner I., Grutzner L. In vitro-zuchtung des Canaden und Schwimmblasengewebes von Tinea vulgaris Cuv. (Schleie) in trypsinierten Einschichtgewebekulturen. // Zbl. Bakteriol., Parasitenk., Infektionskrankh. Und Hygiene, 1963, 191, № 4, s. 474−485
- Pfitzner I. Cell and tissue culture of fresh water fish in virus research. //Ann. N. Y. Acad. Sci., 1965, V.126, № 1, p. 547−554
- Pichugina T.D., Borisova M.N., Shcelkunova T.I., Shcelkunov I.S., Zavyalova E.A. First Report Of Spring Viremia Of Carp Virus At A
- Fish Farm In Moscow Province, Russia // Second bilateral conference. Aquatic and Marine animal health. 2003, p. 20 (thesis)
- Piper D., Nicholson B.L., Dunn J. Immunofluorescent study of the replication of infectious pancreatic necrosis virus in trout and atlantic salmon cell cultures. // Infection and Immunity, 1973, 8, № 2, 249−254
- Pudovkin D., Wahli T. Evaluation of requirements for successful in vitro maintenance of Ichthyophthirius multifiliis. / 10-th Intern. EAFP Conference «Diseases of Fish and Shellfish», Dublin, Ireland, 9−14 Sept. 2001. Abs. 85
- Rachlin J.W. Perlmutter A., Seeley R.J. Monolayer culture of gonadal tissue of the Zebra danio, Brachydanio rerio. // Progr. Fish-Cult., 1967, V.29, № 4 p.232−234
- Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty percent endpoints. // Amer. J. Hyg. 1938, V.27., № 3, p. 493−497
- Regenmonel V., Fauquet M.H.V., Bishop C.M., Carstens D.H.L., Taxonomy. Classification and Nomenclature of Viruses Seventh Report of the Internetional Committee on Taxonomy of Viruses. Academic Press, San Diego, CA. — 2000
- Reno P. W. Infectious pancreatic necrosis virus and its virulence. / In: Fish Diseases and Disorders. Vol. 3: Viral, Bacterial and Fungal Infections, Woo P.T.K. & Bruno D. W., eds. CABI Publishing, Wallingford, UK, 1999, 1−55.
- Roberts F.L. Fibroblast culture of gonads of Clupea harengus. // Nature, 1966, v.212, № 5070, p.1592−1593
- Roberts R.J., McKnight I.J. The pathology of infectious pancreatic necrosis virus. II. Stress-mediated recurrence. // Br. Vet. J. 1976, 132:209−213
- Rode M., T. Berg and T. Gjeen. Effect of temperature on endocytosis and intracellular transport in the cell line SHK-1 derived from salmon head kidney. //Сотр. Biochem. Physiol. 1997, 117:531−537.
- Rodger H.D. & Frerichs G.N. Clinical infectious pancreatic necrosis virus infection in farmed halibut in the United Kingdom. // Vet. Rec. 1997, 140, 401−402.
- Rodriguez S., Vilas M.P., Alonso M., Perez S.I. Study of a viral-dual infection in rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) by seroneutralization, western blot and polymerase chain reaction assay. // Microbiologia SEM 1995, 11: 461−470
- Sasson A. Biotechnologies: challenges and promises, 2nd edition, Unesco, 1987
- Shcelkunov I.S., Popova A.G., Shcelkunova T.I., Oreshkova S.F., Pichugina T.D., Zavyalova E.A., Borisova M.N. First Report Of Spring Viremia Of Carp Virus In Moscow Province, Russia // Bull. Eur. Ass. Fish Pathol., 25 (5) 2005, p. 203−211
- Shutse H., Mundt E., Mettenleiter T.C. Complete genomic seguence of viral hemorrhagic septicemia virus, a fish rhabdovirus // Virus Genes. 1999. — v. 19, p. 59−65
- Scherrer R., Bic E., Cohen J. Le virus de la necrose pancreatique infectieuse: etude de la replication et de l’introduction de la synthese d’interferon en fonction de l’hote et de la temperature. // Ann. Microbiol. 1974, 125:455−467
- Sigel M.N., Beasley A.R., Trypsin C. Marine teleost fish tissues. // Tissue Cult. Meth. And Appl., New York, 1973, p. 12−14
- Silim A., Etazhary M. A. S. Y. & Lagace A. Susceptibility of trouts of different origin to various isolations of infectious transformation in Atlantic salmon (Salmo salar L.) and subsequent performance in seawater. //Aquaculture 1982, 121, 13−27.
- Smail D. A, Bruno D.W., Dear G., McFarlane L.A., Ross K. Infectious pancreatic necrosis (IPN) virus Sp serotype in farmed Atlantic salmon, Salmo salar L., post-smolls associated with mortality and clinical disease. //J. Fish Dis. 1992, 15:77−83
- Snow M., Gunningham С.О., Melvin W.T., Kurath G. Analysis of the nueleoprotein gene identifies distinct lineages of viral hemorrhagic septicemia virus within the European marine environment. //Vims Res. 1999, v. 63, p. 35−44
- Sommer A.-I., Mennen S. Multiplication and haemadsorbing activity of infectious salmon anaemia virus in the established Atlantic salmon cell line. // J. Gen. Virology 1997, 78: 1891−1895
- Soriamachi M., Sako H. // J. Fish Patology, 1982, 17, № 2 p. 115 118
- Soustegard R.A. & Soustegard K.S. Establishment of a cell line from lymphosarcoma of the muskellunge (Exos masquinougy). // In Vitro 1973, 8: 410
- Stangeland K., Hoie S., Taksdal T. Experimental induction of infectious pancreatic necrosis in Atlantic salmon, Salmo salar L. post-smolts. //J. FishDis. 1996, 19:323−327
- Suzuki S., Nakata Т., Kamakura M., Yoshimoto M., Furucawa., Yamashita Y., & Kusuda R., Isolation of birnavirus from agemaki (jack knife clam) Sinonovacura contricta and survey of the virus using PCR technique. //J. Fisheries Science, 1997, 63, 563−566
- Suzuki S., Kamakura M. & Kusuda R. Isolation of birnavirus from Japanise pearl oyster Pinctada fucata // J. Fisheries Science, 1998a, 64, 3941
- Suzuki S. & Nojima M. Detection of marine birnavivirus in wild molluscan shellfish species from Japan. // J. Fish Patology, 1999, 34, 121 125
- Teninges D., Ohanessian A., Richard-Molard C., Contamine D., Isolation and biological properties of Drosophila X virus. // J. Gen. Virology 1979, 42, 214−254
- Townsley P.M. Wight H.C., Scott M.A. Marine fish tissue culture. // J. Fish. Res. Board Can. 1963, V.20, № 3, p. 679−684
- Underwood В.О., Smale C.J. & Brown F. Relationship of a virus from Tellina tenuis to infectious pancreatic necrosis virus. // J. Gen. Virol. 1977, 36, 93—109.
- Vilas M.P., Rodriguez S., Perez S. A case of coinfection of IPN and IHN virus in farmed rainbow trout in Spain. // Bull. Eur. Ass. Fish Pathol. 1994, 14: 1−4
- Wakabayashi N., Egusa S. Primary monolayer culture of cells derived from kidney tissue of the Japanise eel. // Bull. Japan. Soc. Scient. Fish. 1969, V.35, № 4, p.358−361
- Way K. Rapid detection of SVC virus antigen in infected cell cultures and clinically diseased carp by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).J. Appl. Ichthyol., 1991, 7, 95—107.
- Wergeland H.I., Jakobsen R.A., A salmonid cell line (TO) for production of infectious salmon anaemia virus (ISAV). // Diseases of Aquatic Organisms 2001, 44: 183−190
- Wolf K., Dunbar C.E. Cultivation of adult teleost tissue in vitro. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1957, V.95, № 3, p.455−457
- Wolf K., Dunbar C.E., Snieszko S.F., // Progr. Fish Cult., 1960(a), 22, № 2, p.64−68
- Wolf K., Snieszko S.F., Dunbar C.E. & Pyle E. Virus nature of infectious pancreatic necrosis virus in trout. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1960(b), 104, 105−108.
- Wolf K., Quimby M.C., Pyle E.A., Dexter R.P.// Science, 1960© 32, № 3443. p. 1890−1891
- Wolf К., Quimby M.C. Established eurythermic line of fish cells in vitro. // Science, 1964, v. 135, № 3508, p. 1065−1066
- Wolf K., Vestergard-Jorgensen P.E. Salmonid viruses: double infection of RTG-2 cells with Egtved and infectious pancreatic necrosis viruses. //Arch Ges. Virusforsch 1970, 29:337−342
- Wolf K., Mann J. A. Poikilotherm vertebrate cell line and viruses: a current listing for fishes. // In Vitro, 1980, 16, № 2 p. 168−179.
- Wolf K. Fish Viruses and Fish Viral Diseases. Cornell University Press, Ithaca, NY, USA, 1988, 476 pp.
- Wood E.M., Snieszko S.F., Yasutake W.T. // A.M.A. Arch. Patol., 1955, 60, № 1, p. 26−28