Крымская-Конго геморрагическая лихорадка: этиология, эпидемиология и лабораторная диагностика

Актуальность работы.

Изучение возникающих и вновь возвращающихся вирусных инфекций человека (emerging infectious diseases) является одним из важных направлений в современной медицинской вирусологии. Данная работа посвящена изучению крымской-конго геморрагической лихорадки (KKTJI) — острой лихорадочной природноочаговой инфекции, характеризующейся спорадической заболеваемостью, однако через определенные временные периоды проявляющейся вспышками, которые, как правило, сопровождаются высокой летальностью (до 30−50%).

Проблема изучения ККГЛ имеет почти 60-летнюю историю. Научное обоснование ККГЛ как самостоятельного вирусного природноочагового заболевания человека впервые проведено в 1945 г. М. П. Чумаковым с сотрудниками Всесоюзного института экспериментальной медицины им. М. Горького АМН СССР при активном участии военных врачей (Чумаков, 1946). Летом 1944 г. в Крыму наблюдали острое лихорадочное заболевание людей, характеризовавшееся спорадичностью случаев, рассеянностью их на большой территории степных районов, приуроченностью к периоду полевых работ (май-август) и сопроаождавшееся небывалым увеличением численности клещей Hyalomma marginatum marginatum Koch и частыми указаниями больных на присасывание клещей. В это время впервые была установлена вирусная этиология и природная очаговость нового заболевания человека и предложено его название «крымская геморрагическая лихорадка (КГЛ)» (Чумаков, 1945; Дробинский, 1945; Грифцев, Гордиан, 1945). В бывших советских республиках Средней Азии и Казахстане отмечались острые сезонные лихорадочные заболевания, которые до 1967 г. называли «среднеазиатской геморрагической лихорадкой (СГЛ)' В 1956 г. появилось сообщение о лихорадке Конго в Африке. По мере изучения свойств возбудителей, вызывавших эти заболевания, были получены доказательства идентичности этих возбудителей по биологическим, антигенным, иммуногенным характеристикам, данным электронной микроскопии и возбудитель получил название «вирус крымской-конго геморрагической лихорадки (ККГЛ)» — в английской транскрипции — «virus Crimean-Congo hemorrhagic fever (CCHF)» .

Прогресс в изучении возбудителя ККГЛ, достигнутый в 1967 г. благодаря использованию новорожденных белых мышей как новой лабораторной модели, послужил мощным стимулом для дальнейшего всестороннего изучения этой инфекции в России и за рубежом. В этом сезоне были выделены первые штаммы вируса ККГЛ из крови больных людей (Чумаков и др., 1968; Бутенко, 1971).

К началу нашей работы были известны сведения о геморрагической лихорадки типа крымской в европейской части бывшего СССР, Болгарии и Югославии, среднеазиатской геморрагической лихорадке (по клиническим и патологоанатомическим данным) и первые сообщения о лихорадке Конго на африканском континенте. Наши исследования были начаты в 1967 г. с ретроспективной диагностики вспышки тяжелого заболеваеия неясной этиологии в Таджикистане.

Целью данной работы явилось получение новых данных по этиологии, эпидемиологии ККГЛ и усовершенствование лабораторной диагностики этой инфекции.

В задачи работы входило:

• изучение очагов ККГЛ в европейской и азиатской частях ареала этой инфекциивыявление новых территорий, эндемичных по ККГЛ;

• установление ареала возбудителя ККГЛ;

• сравнительное изучение евроазиатских и африканских штаммов вируса ККГЛ и получение доказательств этиологического единства заболеваний, вызываемых этими штаммами в Европе, Азии и Африке;

• долгосрочный мониторинг европейского очага ККГЛ на территории Астраханской области в межэпидемические годы;

• усовершенствование лабораторной диагностики ККГЛ: разработка диагностических тест-систем для выявления антигена вируса ККГЛ и антител к этому возбудителю на основе использования полученного автором адаптированного к культуре клеток штамма вируса ККГЛ.

Степень достоверности и обоснованности положений и выводов.

Достоверность и обоснованность полученных результатов определяется результатами многократных повторений исследований, комплексным методическим подходом к решению поставленных задач: с помощью вирусологических, серологических, патоморфологических и электронномикроскопических методов, а также молекулярно-биологических методов. Использованы методы статистической обработки полученных результатов.

Научная новизна работы.

Впервые решены многие вопросы этиологии, эпидемиологии и лабораторной диагностики ККГЛ. Выявлены новые территории, эндемичные по ККГЛ (Азербайджан, Армения, Афганистан, Иран, Индия) и получены доказательства этиологического единства заболеваний ККГЛ, регистрируемых в европейских и азиатских регионах, а также на африканском континенте. При изучении известных очагов и вновь обнаруженных очагов ККГЛ получены новые данные о роли различных видов иксодовых клещей и теплокровных животных в распространении возбудителя ККГЛ. На основании проведенных исследований представлена возможная схема циркуляции вируса ККГЛ в природе при участии клещей-доноров и клещей-реципиентов, теплокровных животных-кратковременных доноров вируса и при существовании частичной или полной нейтрализации возбудителя в организме клеща-донора во время его питания на иммунном животном. Впервые проведен долгосрочный (13 лет) мониторинг европейского очага ККГЛ на территории Астраханской области и определены показатели оценки состояния очага этой инфекции (вирусофорность клещей-переносчиков и иммунный статус населения и домашних животных). Впервые показано, что присутствие в клещах Hyalomma marginatum marginatum вируса Баткен, широко распространенного на территории Астраханской области, является фактором снижения спонтанной инфицированности этих клещей вирусом KKTJI. Впервые получен вариант штамма вируса KKTJI, адаптированный к культуре клеток Vero-Еб и обладающий полным цитопатогенным действием на эти клетки. Адаптированный штамм прошел более 100 пассажей в культуре клеток, сохраняет приобретенные свойства и характеризуется высоким уровнем накопления антигенного материала. Результаты этих исследований позволили впервые разработать технологию изготовления двух диагностических тест-систем: для определения антигена вируса ККГЛ на основе ИФА и выявления антител к этому возбудителю на основе непрямого МФА.

Теоретическая значимость работы.

На основании представленных в работе результатов получено более полное представление о возбудителе одной из эпидемиологически значимых и наиболее серьезных природноочаговых вирусных инфекций человекаККГЛ, его взаимоотношениях с переносчиком, способах передачи возбудителя человеку. Впервые на основании сравнительного изучения европейских, азиатских и африканских штаммов доказано этиологическое единство заболеваний, вызываемых этими штаммами в Европе, Азии и Африке. Установлено широкое распространение вируса ККГЛ на трех континентах Восточного Полушария: в 16 странах Европы, Азии и Африки.

Практическая значимость работы.

Выявлены новые очаги этой инфекции, выделены штаммы этого возбудителя. При проведении наблюдений в астраханском очаге ККГЛ в течение 13 лет внесен вклад в практику неспецифических профилактических мероприятий в очаге этой инфекции, что выражалось в использовании ежегодных результатов вирусологических и серологических исследований для проведения противоклещевых обработок домашних животных в конкретных районах области. Адаптация к культуре клеток штамма вируса ККГЛ позволила получить высокоактивный антигенный материал, разработать методы титрования вируса по ЦПД, непрерывно поддерживать вирус в пассажах в культуре клеток, создать технологию изготовления двух диагностических тест-систем: для определения антигена вируса KKTJI и выявления антител к этому возбудителю. Экспериментальные серии диагностикумов были успешно испытаны при дифференциальной диагностике случаев острых сезонных лихорадочных заболеваний в Таджикистане (1987 г.), Ростовской области (1993,1999 гг.), Ставропольском крае (1999;2000 гг.) и республике Калмыкия (2000 г.).

Использование культуры клеток Vero-Еб и адаптированного варианта штамма вируса ККГЛ открывает перспективу получения также и профилактических препаратов против возбудителя этой инфекции.

Создана коллекция штаммов вируса ККГЛ, выделенных в евроазиатском и африканском регионах этой инфекции.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Крымская геморрагическая лихорадка, регистрируемая в Крыму, на юге России, среднеазиатская геморрагическая лихорадка в странах Центральной Азии и лихорадка Конго (Африка) являются этиологически единым заболеванием, вызываемым вирусом крымской-конго геморрагической лихорадки (ККГЛ).

• Ареал возбудителя ККГЛ, установленный на основании данных вирусологического, серологического, эпидемиологического обследования больных ККГЛ, изучения спонтанной инфицированности иксодовых клещей и их прокормителей, иммуноструктуры населения и теплокровных животных, включает территории 16 стран в Европе, Азии и Африке (по материалам 1968;1975 гг.).

• Напряженность очагов ККГЛ на юге России зависит от уровня вирусофорности клещей Hyalomma marginatum marginatum Koch, северная граница ареала которых претерпевает изменения: отмечена тенденция распространения этого вида иксодовых клещей в северном направлении (к северу от 48° с.ш.).

• Разработанные нами диагностикумы эффективны при диагностике ККГЛ, что установлено в ходе обследования острых сезонных лихорадочных заболеваний в Таджикистане (1987 г.), Ростовской области (1993,1999 гг.), Ставропольском крае (1999 и 2000 гг.) и республике Калмыкия (2000 г.).

Апробация работы.

Результаты исследований доложены на: XV научной сессии ИПВЭ АМН СССР, (Москва, 1968) — конференции по итогам научно-исследовательской работы Душанбинского ИЭГ за 1968 г., (Душанбе, 1969) — научно-практической конференции медицинских работников Астраханской области, (Астрахань, 1969) — XVI научной сессии ИПВЭ АМН СССР (Москва, 1969) — International Symposium on tick-borne arboviruses excluding gr. В (Smolenice, 1969) — XVII научной сессии ИПВЭ АМН СССР (Москва, 1972) — IXInternational Congress of tropical Med. and Malaria (Athens,.

1973) — Ш съезде гигиенистов, санитарных врачей, эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов Узбекистана (Ташкент, 1973) — II республиканской конференции по оздоровлению среды и проблемам снижения инфекционных заболеваний (Душанбе, 1974) — XVIII научной сессии ИПВЭ АМН СССР (Москва, 1975) — IVInternational Congress for virology (Hague, Netherlands, 1978) — конференции ИПВЭ АМН СССР (Москва, 1981) — XI Всесоюзной конференции по природной очаговости болезней (Тюмень, 1984) — XII Всесоюзной конференции по природной очаговости болезней, Новосибирск, 1989) — Международном симпозиуме «Арбовирусы и арбовирусные инфекции» (Москва, 1989) — научно-практической конференции, посвященной 75-летию инфекционной службы Удмурдии (Ижевск, 1998) — научной конференции ИПВЭ им. М. ПЛумакова РАМН, посвященной 90-летию со дня рождения академика М. П. Чумакова (Москва, 1999) — VIII Всероссийском съезде эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2002) — научной конференции и VIII съезде Итало-Российского общества по инфекционным болезням (СПб, 2002).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 80 научных работ, в том числе 19 журнальных статей и 9 статей в кн. «Вирусные геморрагические лихорадки», М., 1971.

Объем и структура диссертации.

Диссертация состоит из общей характеристики работы, 8 глав собственных исследований, выводов и списка работ, опубликованных по материалам диссертации. Работа изложена на 120 страницах текста, иллюстрирована 30 таблицами и 7 рисунками.

Благодарности.

Выражаю благодарность Дирекции института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М. П. Чумакова РАМН (директор — академик РАМН С.Г.Дроздов) за предоставленную возможность выполнения данной работы. Я глубого благодарна академику РАМН [М.П.Чумакову! за поддержку при проведении исследований и академику РАМН В. А. Лашкевичу за советы при оформлении диссертации. Эта работа была бы невозможна без коллег и соавторов большинства работ сотрудников Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М. ПЛумакова РАМН на протяжении 1968;1977 гг., моих коллег по совместной работе в последние годы: канд. биолог, наук Каргановой Г. Г., канд. биолог, наук Гмыля А. П. Искренне благодарю коллег из других институтов, принимавших участие в проведении совместных экспериментов: академика РАМН Д. К. Львова, канд. мед. наук Т. М. Скворцову (институт вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН), док. мед. наук |Т.П.Пака| (Душанбинский ИЭГ). Я благодарна всем соавторам моих работ — сотрудникам санэпидслужбы Астраханской области, Ставропольского края, Кзыл-Ординской области Казахстана, Туркменистанасотрудникам Волгоградского противочумного института. Благодарю технический персонал лаборатории геморрагических лихорадок ИПВЭ им. М. П. Чумакова за содействие в выполнении экспериментов.

СОБСТВЕННЫЕ ИСЛЕДОВАНИЯ.

Выводы.

1. В результате комплексного изучения этиологии заболеваний ККГЛ из европейских и азиатских очагов этой инфекции впервые выделены штаммы вируса ККГЛ из крови больных людей в Центральной Азииустановлены сроки появления и сохранения вирусспецифических антител у больных и реконвалесцентов, уровни иммунной прослойки среди населенияполучены доказательства идентичности свойств штаммов вируса ККГЛ, выделенных из крови больных людей в Европе и Азии.

2. Установлены особенности распространения возбудителя ККГЛ в европейских и азиатских очагах этой инфекции: доказана роль 16 видов, 6 родов иксодовых клещей в поддержании очагов ККГЛвпервые выделены штаммы вируса KKTJI из клещей Hyalomma asiaticum, Hyalomma anatolicum, Hyalomma dromedario собранных в странах Центральной Азиив условиях эксперимента впервые показана способность клещей Hyalomma marginatum marginatum передавать вирус KKTJI животному-реципиенту и по ходу метаморфоза и трансовариально своему потомству и сохранять возбудитель в межэпидемический сезон. Определены пороговые уровни инфеционности вируса KKTJI для этого вида иксодовых клещей.

3. Выявлено шесть видов домашних животных-прокормителей имаго иксодовых клещей, имевших антитела к вирусу ККГЛ: ослы, лошади, овцы, козы, коровы, верблюды. Индикаторными видами циркуляции вируса являются: в европейских очагах — коровы, лошади, в азиатских очагахмелкий рогатый скот. В условиях эксперимента у овец, ослов и телят определена кратковременная вирусемия, достаточная для инфицирования иксодовых клещей. Установлено участие в циркуляции вируса ККГЛ зайца-русака, ушастого ежа, обыкновенной полевки, малой белозубки, лесной мыши (Европа), тонкопалого суслика, степной черепахи, домовой мыши, горной лесной мыши, рыжеватой пищухи, персидской песчанки (Азия), газелей и мелких грызунов (Африка). Антитела к вирусу ККГЛ не обнаружены у свиней, домашних и диких птиц.

4. На основании проведенных нами исследований представлена возможная схема циркуляции вируса ККГЛ в природе при участии клещей-доноров и клещей-реципиентов, теплокровных животных-кратковременных доноров вируса и при существовании частичной или полной нейтрализации возбудителя в организме клеща-донора во время его питания на иммунном теплокровном животном.

5. В период долгосрочного мониторинга европейского очага ККГЛ на юге России определены показатели оценки состояния очага этой инфекции в межэпидемические годы. При ежегодной спорадической заболеваемости ККГЛ вирусофорность имаго клещей Hyalomma marginatum marginatum Koch — основного переносчика составила 3,5% (данные БМ) и 9,5% (данные ИФА), иммунный статус сельского населения — 1,5% и домашних животных — 2,0%.

6. Отмечено увеличение числа заболеваний ККГЛ в годы с показателем вирусофорности клещей Hyalomma marginatum marginatum более 3%. Выявлена закономерность увеличения иммунной прослойки среди сельского населения и домашних животных в годы, следующие за годами с высоким уровнем вирусофорности клещей Hyalomma marginatum marginatum. Впервые показано, что присутствие в клещах Hyalomma marginatum marginatum вируса Баткен, широко распространенного на территории Астраханской области, является фактором снижения спонтанной инфицированности этих клещей вирусом ККГЛ, и таким способом влияющим на напряженность очага этой инфекции.

7. По данным многолетних наблюдений и исследований установлена решающая эпидемиологическая роль клеща Hyalomma marginatum marginatum Koch в поддержании очагов KKTJI на юге России. Для данного вида иксодовых клещей характерны: высокий уровень инфицированности вирусом KKTJI (до 5,4%, данные БМ), трансфазовая и трансовариальная передачи возбудителя и сохранение его в межэпидемический сезон.

8. Установлено широкое распространение вируса KKTJI на трех континентах Восточного Полушария: в 16 странах Европы, Азии и Африки. Впервые выявлены природные очаги ККГЛ в Азербайджане, Армении, Афганистане, Иране, Индии и Калмыкии, где до наших исследований не было регистрации случаев этого заболевания. Подтверждены сведения о наличии очагов ККГЛ в Европе: Россия (Ростовская и Астраханская области, Ставропольский край), Украина (Крым), Болгария, Югославияв Азии: Узбекистан, Таджикистан, Туркменистан, Казахстанв Африке: Уганда, Сенегал, Кения.

9. Показана идентичность евроазиатских и африканских штаммов вируса ККГЛ, выделенных из крови больных людей, теплокровных животных и иксодовых клещей. Результаты сравнительного изучения патогенности штаммов для лабораторных животных и культур клеток, их антигенных, патоморфологических характеристик и даные электронной микроскопии подтвердили этот вывод и явились доказательством этиологического единства заболеваний, вызываемых штаммами вируса ККГЛ, циркулирующими в странах Европы, Азии и Африки.

10. Сравнительное изучение штаммов вируса ККГЛ и вируса Хазара, отнесенных в одну серологическую группу найровирусов, показало значительные отличия вируса Хазара по биологическим свойствам, одностороннюю антигенную связь его с одним штаммом вируса ККГЛ, выделенным, как и вирус Хазара, в Пакистане, и установило обособленное место его в этой группе. Данные электронной микроскопии подтвердили принадлежность вируса Хазара к семейству Bunyaviridae.

11. Усовершенствована лабораторная диагностика заболеваний ККГЛ. Полученный автором вариант штамма вируса ККГЛ, адаптированный к культуре клеток Vero-Еб, обладает полным цитопатогенным действием на эти клетки, высоким уровнем накопления антигенного материала. Результаты этих исследований позволили разработать технологию изготовления двух диагностических тест-систем: для определения антигена вируса ККГЛ и выявления антител к этому возбудителю. Экспериментальные серии диагностикумов успешно испытаны при диагностике острых сезонных лихорадочных заболеваний в Таджикистане (1987 г.), Ростовской области (1993, 1999 гг.), Ставропольском крае (19 992 000 гг.) и республике Калмыкия (2000 г.).

12. Создана коллекция штаммов вируса ККГЛ, выделенных в разные годы из крови больных людей, теплокровных животных и иксодовых клещей в европейском, азиатском и африканском регионах ареала этой инфекции. В настоящее время коллекция используется при проведении молекулярно-генетических исследований и востребована исследователями других научно-исследовательских институтов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Чумаков М. П., Шалунова Н. В., Смирнова С. Е., Мартьянова ЛИ., Ясинский А. В., Назаренко С. И. — Этиология вспышки геморрагической лихорадки в Таджикистане в 1967 году (по серологическим данным). -Ж" Здравоохранение Таджикистана", 1968, № 3, с. 20−23.

2. Чумаков М. П., Бутенко А. М., Шалунова Н. В., Мартьянова Л. И., Смирнова С. Е., и др. — Новые данные о вирусе-возбудителе крымской геморрагической лихорадки (КГЛ) — Ж. Вопр. вирусол., 1968, № 3, с. 37.

3. Чумаков М. П., Бутенко А. М., Шалунова Н. В., Мартьянова Л. И., Смирнова С. Е., и др. -Иммунологично единство на щамове на вируса причинител на кримската хеморагична треска в различии области.- Ж. «Епид., микроб, инфекц. болести», 1968, У, № 3, с. 72−77.

4. Chumakov М.Р., Smirnova S.E., Tkachenko Е.А. — Relationship between strains of Crimean hemorrhagic fever and Congo viruses.-Acta virologica, 1970,14, c. 82−85.

5. Smirnova S.E., Zubri G.L., Savinov A.P., Chumakov M.P. — Patogenesis of experimental Crimean hemorrhagic fever infection in newbornwhite mice. -Acta virologica, 1973,17,409−415.

6. Tzypkin L.B., Smirnova S.E., Fleer G.P. — Morphological and immunofluorescente study of Crimean haemorrhagic fever virus interaction with white mouse embryo brain cell culture. — Acta virologica, 1974, 18, 264 267.

7. Shanmugam J., Smirnova S.E., Chumakov M.P. — Presence of antibody to arboviruses of Crimean haemorrhagic fever-Congo (CHF-Congo) group in human beinge and domestic animals in India — Indian J. Med. Res., 1976, № 64, p. 1403−1413.

8. Smirnova S.E., Shestopalova N.M., Reingold V.N., Zubri G.L. — Experimental Hazara virus infection in mice. — Acta virologica, 1977, № 21, p. 128−132.

9. Смирнова C.E., Мамаев В. И., Непесова H.M., Филипенко Н. И., Каляева В. Я. — Изучение циркуляции вируса крымской геморрагической лихорадки в Туркменской ССР. — ЖМЭИ, 1978, № 1, с. 92−97.

10. Smirnova S.E. — A comparative study of the Crimean hemorrhagic fever-Congo group of viruses. — Archives of Virology, 1979,62, 137−143.

11. Smirnova S.E., Karavanov A.S. — Detection of Crimean hemorrhagic fever virus antigen by solid phase enzyme immunosorbent assay. — Acta virologica, 1985,29, 87−90.

12.Смирнова C.E., Скворцова T.M., Седова А. Г., Зимина Ю. В., Львов Д. К. -О вновь выделенных штаммах вируса Баткен. — Ж. Вопр. вирусол., 1988, № 3, с. 360−362.

1 З. Смирнова С. Е., Седова А. Г., Зимина Ю. В., Караванов A.C. — Индикация антигена вируса KKTJI в клещах-переносчиках твердофазным иммуноферментным методом. — Ж. Мед. паразитол., 1989, № 1, с. 69−71.

14.Смирнова С. Е., Седова А. Г., Зимина Ю. В., Караванов A.C.- О случаях крымской-конго геморрагической лихорадки в Астраханской области.-Ж. Вопр.вирусол., 1990, № 3, с. 228−231.

15.Смирнова С. Е., Караванов A.C., Зимина Ю., В., Седова А. Г. — Изучение вирусофорности клещей-переносчиков возбудителя крымской-конго геморрагической лихорадки. — Ж. Мед. паразитол., 1991, № 1, с. 32−34.

16.Маркешин С. Я., Смирнова С. Е., Евстафьев И. Л. — Оценка состояния природного очага крымской-конго геморрагической лихорадки в Крыму. — ЖМЭИ, 1991, № 9, с. 47−50.

П.Смирнова С. Е., Карганова Г. Г., Гмыль Л. В. — Адаптация вируса крымской-конголезской геморрагической лихорадки (ККГЛ) к культуре клеток Vero-E6. — Ж. Вопр. вирусол., 1997, № 6, с. 280−283.

18.Гмыль Л. В., Карганова Г. Г., Смирнова С. Е., Лашкевич В. А. -Вирусспецифические белки вируса крымской-конго геморрагической лихрадки. — Ж. Вопр. вирусол., 2001, № 3, с. 16−21.

19.0нищенко Г. Г., Ломов Ю. М., Марков В. И., Меркулов В. А., Миронов А. Р., Борисевич И. В., Махлай A.A., Васильев Н. Т., Водопьянов С. О., Тихонов Н. Г., Пашанина Т. П., Мананков В. В., Смелянский В. П., Савченко С. Т., Смирнова С.Е.- Лабораторная диагностика вспышки геморрагической лихорадки в станице Обливская Ростовской области: доказательства этиологической роли вируса крымской-конго геморрагической лихорадки.- ЖМЭИ, 2000, № 2, с. 32−36.

20.Чумаков М. П., Смирнова С. Е., Шалунова Н. В., Мартьянова Л. И., Флеер Т. П., Садыкова В. Д., Максумов С. С. — Выделение и изучение вируса из крови больного геморрагической лихорадкой в Самаркандской области Узбекской ССР: штамм Ходжа. — кн. «Вирусные геморрагические лихорадки», М., 1971, с. 21−29.

21.Смирнова С. Е., Данияров O.A., Павлович А. Н., Пак Т. П., Касымов К. Т., Чумаков М. П. — Выделение и изучение штаммов вируса от больных крымской геморрагической лихорадки в Таджикистане. — Там же, М., 1971, с. 30−37.

22.Касымов К. Т., Данияров O.A., Пак Т. П., Павлович А. Н., Смирнова С. Е., Чумаков М. П. — Выделение и изучение вируса крымской геморрагической лихорадки из клещей Hyalomma в Таджикистане. -Там же, с. 38−40.

23.Смирнова С. Е., Згурская Т. Н., Генис Д. Е., Чумаков М. П. — Выделение вируса крымской геморрагической лихорадки из клещей Hyalomma asiaticum, собранных в Кзыл-Ординской области Казахской ССР, — Там же, с. 41−44.

24.Смирнова С. Е., Данияров O.A., Згурская Г. Н., Касымов К. Т., Павлович.

A.Н., Пак Т. П. и др. — Серологическое обследование людей и животных на антитела к вирусу крымской геморрагической лихорадки в Таджикской ССР (по данным 1968 г.) — Там же, с. 66−71.

25.Пак Т. П., Смирнова С. Е., Згурская Т. Н., Ясинский A.B., Бердыев Х. Б., и др. — Результаты серологической разведки на крымскую геморрагическую лихорадку (КГЛ) в Таджикской ССР в 1969 году. — Там же, с. 72−79.

26.Генис Д. Е., Смирнова С. Е., Згурская Т. Н., Чумаков М. П. — Результаты изучения крымской геморрагической лихорадки (КГЛ) в Кзыл-Ординской области Казахской ССР. — Там же, с. 92−99.

27.Смирнова С. Е., Непесова Н. М., Тачмурадов Г., Кирьянова A.M., Чумаков М. П. — Материалы по изучению крымской геморрагической лихорадки в Туркменской ССР. — Там же, с. 86−91.

28.Згурская Г. Н., Березин В. В., Смирнова С. Е., Чумаков М. П. — Изучение вопроса трасмиссии и межэпидемического сохранения вируса крымской геморрагической лихорадки клещами Hyalomma pi. plumbeum Panz. -Там же, М., 1971, с. 217−220.

29.Васильев В. Г., Проценко В. Н., Шкварюк М. С., Смирнова С. Е., и др. -Судьба буковинской геморрагической лихорадки. — кн. «Природноочаговые инфекции и инвазии на территории СССР», Ленинград, 1983, с. 34−35.

30.Василенко С. М., Чумаков М. П., Бутенко A.M., Смирнова С. Е., Теохарова М., Попов В. Г. — К вопросу об этиологии крымской геморрагической лихорадки (КГЛ) в Болгарии. — Материалы XV научной сессии ИПВЭ, М., 1968, вып. 3, с. 90−92.

31. Чумаков М., Бутенко A.M., Шалунова Н. В., Мартьянова Л. И., Смирнова С. Е. — Изучение самаркандского и ростовского штаммов вируса геморрагической лихорадки типа крымской. — Там же, с. 96−97.

32.Ткаченко Е. А., Чумаков М. П., Беляева А. П., Бутенко A.M., Смирнова С. Е., Башкирцев В. Н. — Реакция интерференции при крымской геморрагической лихорадке. — Там же, с. 97−98.

33.Ткаченко Е. А., Чумаков М. П., Бутенко A.M., Смирнова С. Е., Башкирцев.

B.Н., Заводова Т. И. — Применение реакции интерференции в первичной культуре клеток почек хомяка для индикации вируса крымской геморрагической лихорадки.- Там же, с. 98−99.

34.Чумаков М. П., Беляева А. П., Ворошилова М. К., Бутенко А. М., Смирнова.

C.Е., и др. — Прогресс в изучении этиологии, иммунологии, лабораторной диагностики крымской геморрагической лихорадки в СССР и в Болгарии. — Там же, с. 100−103.

35.Касымов К. Т., Данияров О. Н., Павлович А. Н., Пак Т. П., Смирнова С. Е., Чумаков М. П. — Выделение вируса геморрагической лихорадки от больных и клещей в Таджикистане. — Материалы конференции по итогам научно-исследовательской работы ДИЭГ за 1968 г., Душанбе, 1969, с. 131−134.

Зб.Чумаков М. П., Беляева А. П., Ворошилова М. К., Лещинская Е. В., Шалунова Н. В., Семашко И. В., Бутенко A.M., Смирнова С. Е. и др. -Этиология заболевания типа крымской геморрагической лихорадки в различных районах СССР и в Болгарии. — Материалы научно-практической конференции мед. работников Астраханской области, Астрахань, 1969, с.6−9.

37.Чумаков М. П., Смирнова С. Е., Шалунова Н. В., Мартьянова Л. И., Перелатов В. Д., и др. — Изучение ростовских и самаркандского штаммов вируса крымской геморрагической лихорадки (КГЛ) и материалов о заболеваниях типа КГЛ в среднеазиатских республиках и Казахстане. -Там же, с. 14−17.

38.Смирнова С. Е., Згурская Г. Н., Непесова Н. М., Пак Т. П., Чумаков М. П., Чунихин С. П. — Обследование крови животных в Средней Азии на антитела к вирусу крымской геморрагической лихорадки. — Материалы XVI научной сессии ИПВЭ АМН СССР, 1969, вып. 2, с. 146−147.

39.Смирнова С. Е., Згурская Г. Н., Ткаченко Е. А., Чумаков М. П. -Материалы дальнейшего изучения самаркандского и некоторых ростовских штаммов вируса крымской геморрагической лихорадки (КГЛ). — Там же, с. 148−149.

40. Чумаков М. П., Смирнова С. Е., Ткаченко Е. А. — Антигенные взаимосвязи между советскими штаммами вируса крымской геморрагической лихорадки и афро-азиатскими штаммами вируса Конго. — Материалы XVI научной сессии ИПВЭ АМН СССР, 1969, вып. 2, с. 152−154.

41.Чунихин С. П., Чумаков М. П., Бутенко А. М., Тоффлиб Р. и др. -Результаты обследования на антитела к вирусу крымской геморрагической лихорадки сывороток крови людей, домашних и диких животных в республике Сенегал (западная Африка). — Там же, с. 158−160.

42.Чумаков М. П., Исмаилова С. Т., Рубин С. Г., Смирнова С. Е., Згурская Г. Н., Ханкишиев А. Ш., Березин В. В., Соловей Э. А. — Выявление природных очагов крымской геморрагической лихорадки на террритории Азербайджанской ССР по данным серологического обследования домашних животных. — Труды ИПВЭ АМН СССР, 1970, том 18, с. 120 122.

43.Рубин С. Г., Бутенко A.M., Заводова Т. И., Каринская Г. А., Смирнова С.Е.и др. — Разработка и применение мозговых и культуральных антигенов вирусов КГЛ и Конго для серологических исследований.-Материалы III областной научно-практической конференции в Ростове-на-Дону, 1970, с. 25−29.

44.3гурская Г. Н., Попов Г. В., Березин В. В., Смирнова С. Е., Чумаков М. П. -Применение метода флюоресцирующих антител (МФА) для выявления вируса KTJI в клещах-переносчиках. — Вопросы мед. вирусологии. Институт вирусологии им. Ивановского АМН СССР, М., 1971, ч.2, с. 135.

45.Chumakov М.Р., Butenko A.M., Smirnova S.E., Belyaeva A.P., et al — Some results of investigation of Crimean hemorrhagic fever. — Proc. of the International Symposium on tick-borne arboviruses excluding gr. B. (Smolenice, 1969), Bratislava, 1971, p. 167−176.

46.Чумаков М. П., Смирнова C.E. — Изучение взаимосвязей пакистанского вируса Хазара (штамм JC 280) с группой КГЛ-Конго. — Тезисы XVII научной сессии ИПВЭ АМН СССР, М., 1972, с. 339−340.

47.Смирнова С. Е., Чумаков M. IL — Сравнительное изучение штаммов вируса КГЛ и вируса Конго. — Там же, с. 340−341.

48.Смирнова С. Е., Шестопалова Н. М., Рейнгольд В. Н., Чумаков М. П. -Изучение культур тканей, зараженных вирусами группы КГЛ-Конго. -Там же, с. 342−343.

49.3гурская Г. Н., Смирнова С. Е., Чумаков М. П. — Применение метода флюоресцирующих антител (МФА) для обнаружения вируса КГЛ у спонтанно зараженных клещей. — Там же, с. 362−363.

50.Шестопалова Н. М., Рейнгольд В. Н., Смирнова С. Е., Зубри Г. Л., Попов Г. В., Чумаков М. П. — Локализация антигена вируса КГЛ и ультраструктура клеток мозга зараженных белых мышей. — Тезисы XVII научной сессии ИПВЭ АМН СССР, М., 1972, с. 345−346.

51.Зубри ГЛ., Савинов А. П., Смирнова С. Е., Чумаков М. П. -Гистологические и иммунофлюоресцентное исследования новорожденных белых мышей, зараженных вирусом КГЛ. Там же, с. 346−347.

52.3гурская Г. Н., Смирнова С. Е., Березин В. В., Чумаков М. П. — Изучение чувствительности клещей Hyalomma pi. pi. Panz к экспериментальному заражению вирусом КГЛ. — Там же, с. 360−362.

53.Чумаков М. П., Смирнова С. Е. — Обнаружение антител к вирусу КГЛ в сыворотках крови диких и домашних животных из Ирана и Африки. — Там же, с. 367−368.

54. Пак Т. П., Смирнова С. Е., Згурская Г. Н., Данияров О. А., Чумаков М. П. -Сохранение комплементсвязывающих и преципитирующих антител у реконвалесцентов после КГЛ из Таджикской ССР. — Там же, с. 369−370.

55.Смирнова С. Е., Генис Д. Е., Згурская Г. Н., Чумаков М. П. — Выделение вируса КГЛ из крови больного в Кзыл-Ординской области Казахской ССР.-Там же, с. 372.

56.Chumakov V.P., Smirnova S.E., Shalunova N.V., Martyanova L.I., Fleer G.P., et al — Proofs of etiological identity of Crimean haemorrhagic fever and Central Asian haemorrhagic fever. — Proc. of the IX International Congress of tropical Med. and Malaria, Athens, 1973, 1, p. 33−34.

57.Шанмугам Дж., Смирнова C.E., Чумаков М. П. — Обнаружение в Индии антител к вирусам группы КГЛ-Конго в сыворотках крови людей и домашних животных — Труды ИПВЭ АМН СССР, М., 1973, том XXI, вып. 2, с. 149−152.

58.Чумаков М. П., Смирнова С. Е., Шалунова Н. В., Мартьянова Л. И., Флеер Т. П. и др. — К итогам изучения этиологии и эпидемиологии крымской геморрагической лихорадки. — Материалы III съезда гигиенистов, санитарных врачей, эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов Узбекистана, Ташкент, 1973, с. 244−245.

59.Смирнова С. Е., Непесова Н. М., Шанмугам Дж., Мамаев В. И., Чумаков М. П. — Выделение вируса КГЛ из клещей Hyalomma asiaticum, собранных в Туркменской ССР. — Труды ИПВЭ АМН СССР, М., 1974, том XX, вып. 1, с. 176−179 бО. Чумаков М., Андреева С. К., Заводова Т. И., Згурская Т. Н., Костецкий Н. В., Мартьянова Л. И., Никитин A.M., Синяк K.M., Смирнова С. Е. и др. — Вопросы экологии вируса крымской геморрагической лихорадки в природных очагах этой инфекции в Крыму. — Труды ИПВЭ АМН СССР, М., 1974, том. XXII, вып. 2, с. 19−24.

61.Пак Т. П., Данияров O.A., Костюков М. А., Смирнова С. Е., Чумаков М. П., Старков О. С., Куйма А. У., Булычев В. П. — Выделение четырех штаммов вируса крымской геморрагической лихорадки из клещей Hyalomma anatolicum anatolicum Koch 1844 в Таджикистане. — Материалы II республиканской конференции по оздоровлению внешней среды и проблемам снижения инфекционных заболеваний. — Душанбе, 1974, с. 218−220.

62.3гурская Т.Н., Березин В. В., Смирнова С. Е. — Пороговые уровни заразительности крови при вызванной вирусом КГЛ вирусемии у зайцев и кроликов для клеща Hyalomma pi. plumbeum Panz. — Тезисы XVIII научной сессии ИПВЭ АМН СССР, М., 1975, с. 291−292.

63.Згурская Т. Н., Чумаков М., Смирнова С. Е. — Титрование методом непрямой иммунофлюоресценции антител к вирусу КГЛ в каплях взвеси клеток из зараженных культур ткани. — Там же, с. 293.

64.Смирнова С. Е., Чумаков М. П. — Изучение ареала арбовирусов группы КГЛ-Конго. — Там же, с. 356−357.

65.Шестопалова Н. М., Рейнгольд В. Н., Аверина С. М., Смирнова С. Е. -Электронномикроскопическое изучение вируса Хазара в головном мозге белых мышей. — Там же, с. 374−375.

66.Рейнгольд В. Н., Шестопалова Н. М., Смирнова С. Е., Ржахова O.E., Чумаков М. П. — Спиральная укладка тяжа нуклеокапсида внутри вирионов вирусов Хазара и Буниамвера. — Тезисы XV конференции по электронной микроскопии, Прага, 1977, с. 342−343.

67.Chumakov М.Р., Voroshilova М.К., Belyaeva А.Р., Butenko A.M., Donets M.A., Korolev M.B., Smirnova S.E., et al. — Viruses of the Bunyaviridae family isolated in the Soviet Union. — Abstr. of the IV International Congress for virology, Hague, Netherlands, 1978, p. 112.

68.Чумаков М. П., Рубин С. Г., Семашко И. В., Смирнова С. Е., Флеер Г. П., и др. — Некоторые итоги и перспективы исследований по клещевому энцефалиту, КГЛ и другим арбовирусным инфекциям. — Тезисы докладов советско-французского симпозиума по медицинской вирусологии, М., 1980, с. 22−24.

69.Смирнова С. Е., Седова А. Г., Авдиенко Б. В., Зимина Ю. В. — Результаты проверки активности природного очага КГЛ в Астраханской области. -Тезисы конференции ИПВЭ АМН СССР (19−21 мая 1981 г.) М., 1981, с. 242.

70.Смирнова С. Е., Седова А. Г., Зимина Ю. В. — Итоги изучения циркуляции возбудителя КГЛ в Астраханской области. — Тезисы XI Всесоюзной конференции по природной очаговости болезней (Тюмень), М., 1984, с. 155.

71.Смирнова С. Е., Маркешин СЛ., Евстафьев И. Л., Захарова Т. Ф. -Результаты проверки очага Крымской-Конго геморрагической лихорадки в Крымской области. — Тезисы XII Всесоюзной конференции по природной очаговости болезней, (Новосибирск), М., 1989, с. 143.

72.Лещинская Е. В., Костюков М. А., Смирнова С. Е. — Варианты клинического течения Крымской-Конго геморрагической лихорадки. -Арбовирусы и арбовирусные инфекции. Международный симпозиум, М., 1989, с. 30.

73.Кучин В. В., Щаднев В. В., Прометной В. И., Смирнова С. Е., и др. -Сравнительная оценка серологических методов диагностики крымской-конго геморрагической лихорадки в Ростовской области (в эпидсезон 1993 г.) — Материалы научно-практической конференции, посвященной 100-летию образования противочумной службы России (16−18 сентября 1997 г.), том 2, Саратов, 1997, с. 192−193.

74.Смирнова С. Е. — Диагностические тест-системы для индикации возбудителя крымской-конго геморрагической лихорадки (ККГЛ). -Сборник материалов II республиканской научно-практической конференции., посвященной 75-летию инфекционной службы Удмурдии (8−9 апреля 1998 г.), Ижевск, 1998, с. 34−35.

75.0нищенко Г. Г., Тихонов Н. Г., Смирнова С. Е., Пашанина Т. П., Мананков В. В., Смелянский В. П., Савченко С. Т. — Результаты исследования сывороток крови больных из станицы Обливской Ростовской области. -Сборник материалов научной конференции ИПВЭ РАМН, посвященной 90-летию со дня рождения академика М. П. Чумакова (23−25 ноября 1999 г.), М., 1999, с. 76а.

76.Смирнова С. Е., Жилина Н. Я., Ковалев Н. Г., Пугачева О. Н., Сысолятина Г. В. — О случаях крымской-конголезской геморрагической лихорадки в Ставропольском крае. — там же, с. 85.

77.Смирнова С. Е., Карганова Г. Г., Гмыль Л. В., Соболев С. Г., Терешкина Н. В., Ткаченко Е. А. — Сравнительное изучение вируса крымскойконголезской геморрагической лихорадки (KKTJI) в пассажах ин виво и ин витро. — там же, с. 86.

78.Смирнова С. Е., Седова А. Г., Зимина Ю. В., Куликова JI.H., Ткаченко Е. А. — Сероэпидемиологические исследования в европейском очаге крымской-конголезской геморрагической лихорадки. — там же, с. 87.

79.Смирнова С. Е., Карганова Г. Г., Гмыль JI.B., Седова А. Г., Тохов.

Ю.М., Сысолятина Г. В., Ковалев Н. Г., Яшкулов К. Б. -Современное состояние очагов крымской-конго геморрагической лихорадки (ККГЛ) на юге России.- Материалы УШ Всероссийского съезда эпидемиол., микробиол. и паразитологов (26−28 марта 2002 г.), том 1, М., 2002, с. 397−398.

80.Гмыль Л. В., Гмыль А. П., Смирнова С. Е., Карганова Г. Г. -Фенотипические и генетические изменения вируса ККГЛ при адаптации к культуре клеток Vero-E6 — Материалы научной конференции и УШ съезда Итало-Российского общества по инфекционным болезням (5−6 декабря 2002 г.), СПб, 2002, с. 80−81.