Естественное вегетативное возобновление лещины обыкновенной и потенции к регенерации её изолированных структур

Актуальность исследований. Лещина обыкновенная (Corylns avellana L.) как модельный объект выбрана в связи с её сортовым разнообразием и произрастанием в природе и в культуре (Кравченко, 2001; Mehlenbacher, 1991, 2003, Yezhov, Smykov, Khokhlov et al, 2005). Лещина является кустарником (Erdogan, Mehlenbacher, 2000) в естественных условиях легко вегетативно возобновляется и размножается корневищами, отводками (Пятницкий и др., 1963), порослью и зелёными черенками (Аристов, 2000; Березко, 2006; Руднева, 2006; Olsen, Valley, 2002).

Способы размножения и возобновления растений разнообразны и являются одними из составляющих общей адаптивной стратегии видов и популяций. Вегетативное размножение деревьев и кустарников в природе может осуществляться за счёт специализированных или неспециализированных (неотде-лёнпые побеги и ветви или их отдельные части, поросль) органов (Иванова, 1982; Юсуфов, 1982, 1988, Юсуфов и др., 2008; Olsen, Valley, 2002, Mehlenbacher, 2003). Известно около 400 сортов лещины и много гибридных форм, она отличается генетическим разнообразием, что сопровождается различиями в химическом составе веществ, морфологии и биологии цветения (Mehlenbacher, 1991, 2003, Yezhov, Smykov, Khokhlov et al, 2005). Среди рода Corylus встречаются формы 2n=22 и 2n=18. Сравнением 29 генотипов из разных стран у 26 видов выявлены различия по генам ДНК и хлоропластов у древовидных и кустарниковых форм (Erdogan, Mehlenbacher, 2000).

Особенности реализации процессов регенерации, восстановление органов, тканей, клеток и их компонентов, как при естественном их обновлении, так и при повреждении или удалении их частей (Кренке, 1950) имеет значение для выживания организма и используется в биотехнологии растений. Обязательным условием дедифференцировки тканей экспланта и превращения их в каллусные клетки, помимо повреждения является присутствие в них ауксинов и цитоки-нинов (Бутенко, 1999; Егорова, 2003).

В настоящее время проводится изучение процессов регенерации и морфогенеза у изолированных тканей, клеток и протопластов растений in vitro. Лещина отличается крупным зародышем и мясистыми семядолями, покрытыми тонкой кожурой (Николаева, 1979). Имеются сведения о микроразмножении лещины путём использования апекса, побега, а также эксплантов семядолей с БАЛ (0,1 мг/л) для оздоровления посадочного материала от вирусной инфекции (Thomson, Legersted, Mehlenbacher, 1996). Образование эмриоидов отмечали как на средах содержащих ауксины (2,4Д, НУК) и цитокинины (кинетин, БАЛ), так и на средах, дополненных только цитокининами (Яцына, 1997).

В частности, не выяснен вопрос о влиянии состояния развития плодов на реализацию процессов регенерации. Изучение процессов регенерации имеет общебиологическое значение. Выяснение связи между особенностями естественного вегетативного размножения и реализацией процессов регенерации у черенков и различных изолированных структур in vitro имеет значение для познания происхождения процессов регенерации и механизмов их реализации в онтогенезе.

Дели и задачи исследования. Цель работы заключалась в исследовании активности реализации процессов регенерации у различных структур лещины путём использования взаимодополняющих методов и подходов. В соответствии с этой целью были поставлены следующие задачи:

1) изучить особенности естественного вегетативного возобновления лещины в экосистемах с разными антропогенными воздействиями;

2) изучить способность к каллусои корнеобразованию у стеблевых черенков лещины;

3) изучить процессы регенерации у эксплантов различных структур и семядолей лещины при изменении условий культивирования in vitro',.

4) сравнить влияние условий культивирования на морфогенез, и накопление сырой и сухой биомассы эксплантами семядолей;

5)< изучить влияние дифференциации каллуса на морфогенез.

Научная новизна. Впервые показана связь процессов регенерации различных изолированных структур с особенностями проявления естественного вегетативного размножения и возобновления лещины, как модельного объекта. Полученные результаты важны для познания онтои филогенетических механизмов и факторов реализации процессов регенерации у структур, их происхождения, природы и лабильности.

Положения диссертациивыносимые на-защиту.

1. Анализ соотношения программного (наследственной детерминации) и. индуцированного (онтогенетического) контроля в реализации-процессов регенерации.

2. Генетические предпосылки процессов регенерации у структур в пределах индивидуума регулируются и онтогенетическими факторами, что не всегда имеет адаптивный характер.

3. Проявление процессов регенерации у структур в изолированной^ культуре определяется состоянием их дифференциации и возраста.

4. Норма реагирования разных структур на условия определяет возможности реализации процессов регенерации в изолированной культуре.

Теоретическая и практическая значимость исследований. Результаты исследования расширяют представления о происхождении потенции к регенерации у растений и природе их лабильности в онтои филогенезе. Проявление способности и активности к регенерации у структур лещины зависят, как от наследственных факторов, так и от состояния их дифференциации, организации и возраста. Полученные данные вносят определённый вклад в выяснение закономерностей проявления способности и активности к регенерации структурами^ лещины. Конкретизированы условия получения посадочного материала укоренением зелёных стеблевых черенков, разработана методика культивирования эксплантов семядолей in vitro для получения посадочного материала.

Материалы диссертации могут быть использованы при чтении лекций по физиологии растений для студентов высших учебных заведений биологического и сельскохозяйственного профиля. Разработанные методы могут использоваться в ботанических садах, при проведении практических занятий и выполнении курсовых и дипломных работ.

Апробация работы. Результаты исследований докладывались на ежегодных научных конференциях Дагестанского государственного университета (2004;2008) — молодых учёных Дагестанской медицинской академии (2005) — Дагестанского отделения Российского ботанического общества (2006) — Международных научных конференциях «Проблемы биологии, экологии и образования: история и современность» (СПб, 2006) — «Физиология растений — фундаментальная основа современной фитобиотехнологии» (Ростов-на-Дону, 2006) — «Современная физиология растений: от молекул до экосистем» VI съезде ОФР’Рос-сии (Сыктывкар, 2007) — «Биология клеток растений in vitro и биотехнология «(Звенигород, 2008) — «Физико-химические основы структурно — функциональной организации растений» (Екатеринбург, 2008).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 печатных работ, включая 3 статьи в рецензируемом журнале.

выводы.

1. Лещина с естественным вегетативным возобновлением удобная модель для конкретизации роли наследственных и онтогенетических факторов в реализации процессов регенерации.

2. Реализация процессов регенерации зависит от возрастного состояния, организации и условий культивирования структур. Зелёные стеблевые черенки лещины хорошо укореняются и без ИМК в парниках с искусственным туманом.

3. Экспланты семядолей незрелых плодов обладают активностью к регенераци-ии, росту, каллусои корнеобразованию. При культивировании эксплантов семядолей с почечкой развиваются побеги с корнями и зелёными листьями.

4. Биомасса семядолей, каллуса и корней обнаруживает сильную изменчивость, их показатели не всегда коррелируют между собой и зависят от условий культивирования. ИМК стимулирует образование каллуса и корней, а БАП накопление биомассы семядоли.

5. Состояние дифференциации каллуса и частей семядолей оказывает влияние на морфогенез при их пассировании.

6. Факторы эволюции генетических предпосылок развития процессов регенерации и онтогенетических механизмов их реализации нуждаются в дальнейшей конкретизации.

Рекомендации производству.

1. Результаты укоренения зелёных черенков можно использовать для получения посадочного материала.

2. Индукцию побегов у эксплантов молено использовать в селекционных целях для выявления наследственных различий потомства соматических клонов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

На основе проведённых исследований, дана характеристика специфики реализации потенцийк регенерации .у лещины обыкновенной. Изучена связь.

I.. между вегетативным: размножением и способностью к регенерации различных изолированных структур^ Такой сравнительный анализ на примере лещины активно вегетативно возобновляемой в природе и в культуре проведён впервые (Юсуфов и др., 2005), тогда как по травянистым и однолетним растениям имеются данные по исследованию процессов-регенерации (Бутенко, 19 756, 1978; Юсуфов, 1988; Юсуфов, Алиева, 2002; Thomas, Davey, 1975).

Были обследованы три естественные природные местообитания лещины с разным антропогенным воздействием. В процессе антропогенного влияния (вырубка леса, выпас скота) уменьшается количество многолетних побегов — и ухудшается состояние кустов лещиныно активизируются, процессырегенерации. Происходит интенсивное порослеобразование в-насаждениях лещины, но сос тояние экосистем не улучшается. Для познания природы и значения процессов регенерации у растений значимо изучение их проявления у структур с разными уровнями организации. Это лишь позволяет оценить сложность природы, механизмов и факторов регенерации. — ;

Одревесневшие и зелёные черенки обладают неодинаковой активностью к формированию корней. Потенции к регенерации лучше выражены у зелёных черенков (гл. 3.3, табл. 11), которые формируют корни и на-каллусе и без него на побеге. Это служит показателем высокой активности эндогенных ауксинов-в ' тканях черенков (Кефели, 1974; Турецкая и др. 1975), что подтверждается данными при экзогенном введении ИМК в ткани зелёных черенков. Топография и типы закладки корней у черенков характеризуют наследственные и возрастные различия объектов в реализации процессов регенерации (Анели, .1944; Иванова, 1982; Иванова, 1985;Priestley, Swingle, 1929);

Между процессами каллусогенеза и ризогенеза не наблюдается положительная связь, т. к. образование каллуса у черенков не всегда предшествует ри-зогенезу (гл. 3, табл. 9). У черенков ряда древесных отмечена отрицательная корреляция между интенсивным развитием каллуса и ризогенезом (Комиссаров, 1964; Дематрадзе, 1965; Тарасенко, 1967; Иванова, 1982). Положительной корреляции между ростом побегов и корнеобразованием у черенков и эксплантов различных структур не отмечено.

Активность и типы формирования каллуса у изолированных структур относятся к наследственным характеристикам одного из этапов последовательной-реализации сложного процесса регенерации (Бутенко, 1975в), что генетически обусловлено и реализуется специфическими генами (Козырева, 1980). Сложная генетическая природа процессов регенерации вытекает из их вариабельности в зависимости от разных факторов-(возраст, полярность ориентации, соотношение регуляторов роста в тканях, условий культивирования), оказывающих влияние на состояние* растений и его отдельных органов1 (Турецкая, 1961; Юсуфов, 1988), эксплантов изолированных структур и протопластов^кле-ток (Бутенко, 1975вWilson et al, 1984). На юге Дагестана с его знойным летом ранние сроки зелёного черенкования позволяют получить корнесобственные черенки (стандартные саженцы). При культивировании у черенков происходит формирование каллуса и корней и без предобработки ИМК, но активность этих процессов менее выражена. Регенерация зелёных черенков основана на процессе новообразования структурных элементов (придаточных корней и побегов) с помощью стимулирующей роли листьев. При культивировании в условиях искусственного тумана зелёные черенки завершают ризогенез в течение 30−50 су-s ток и дают хороший прирост побегов. К концу лета они достигают высоты 50.

60 см и формируют дополнительные побеги (гл. 3, рис. 9). Экспланты семядолей из сухих плодов и при наличии зародышевой почечки отличаются от экс, плантов незрелых плодов низкой активностью роста и ризогенеза. Регенерация эксплантов семядолей зависит от состояния развития плодов (Юсуфов, Алиханова, 2005). Эти данные расширяют представления о процессах регенерации семядолей in vitro других растений (Dunvell, 1981; Wehner, Locy, 1981; Chandra et al, 1983; Upadhyay, Chandra, 1983; Philip, 1984), которые частично уже были обобщены (Юсуфов, 1988).

У пассированного каллуса и частей семядолей, образовавших исходно корни (гл. 5, табл. 29), процессы роста и ризогенеза реализуются более активно, чем у таковых без корней. Природа этого явления может быть объяснена предопределённостью клеток каллуса к морфогенезу или наличием в них регуляторов роста. Активность к росту и морфогенезу отмечена при культивировании каллуса и части семядоли на среде с ИМК и БАП в соотношениях (1:1) и (1:2). Данные опытов показывают, что пассированный каллус с корнями во всех вариантах по темпам ризогенеза опережает каллус без корней (гл. 5, рис. 25), что свидетельствует о наличии в них заложившихся зачатков корней. В наших опытах не отмечено формирование адвентивных почек на каллусе. Для регуляции морфогенеза почек на эксплантах семядолей лещины необходимо создать соответствующие условия.

В связи с активным естественным вегетативным размножением лещины, приведённые выше данные укоренения одревесневших и зелёных черенков не имеют самостоятельного значения, их следует рассматривать как развитие общей идеи исследования. К тому же результаты черенкования лещины пока очень ограничены и были получены в ранних публикациях (Вехов, Ильин, 1934; Турецкая, 1961; Павленко, 1962; Комиссаров, 1964; Тарасенко, 1967; Иванова, 1982).

Материалы исследования служат подтверждением идеи об онтогенетической лабильности процессов регенерации у растений. В связи с этим немыслим идеальный вид растения, у которого все структуры обладали бы одинаковой активностью реализации указанных процессов (Кренке, 1950). Это даёт основания для критики представлений о роли гипотетической архиплазмы в реализации или не реализации процессов регенерации (Miehe, 1926). Такому выводу проти 105″. воречат данные о различиях в проявлении процессов деления и регенерации у изолированных протопластов и клеток с оболочкой (Бутенко, 1975в), а также разновозрастных стеблевых (Турецкая, 1961; Комиссаров- 1964; Иванова- 1982) и листовых (Дубровицкая,. 1961; Абдуллаева, 1969;: Гаджиева, 1972; Юсуфов, 1982, 1988; 1992) черенков. У черенков активность к регенерации определяется возрастом растений, побегов и листьев, условиями укоренения, включая и полярностью ориентации (Кренке, 1950; Турецкая, 1961):

Сложились представления о роли тотипотентности клеток растений в реализации процессов регенерации у различных структур (Бутенко- 1999). Признание тотипотентности клеток не исключает наличия факторов её ограничивающих. Примером этого служат различия в реализации процессов регенерации у различных структур растений" в пределах индивидуума. Реализация процессов регенерации меняется в зависимости от онтогенетических факторов. Это усложняет обсуждение, вопросов происхожденияэволюции и роли процессов регенерации растений, для их жизнедеятельностичем: уже интересовались на примере животных (Воронцова, Лиознер, 1957; Хэй, 1969; Goss, 1973).

Высказано мнение об универсальном характере распространения? и проявления процессов регенерации в мире растенийчто ранее? допускалось, и для животных (Юсуфов, 1982; Юсуфов, Алиева, 2001; Юсуфов, Магомедова, 2003). В связи с этим, говоря об эволюции указанных процессов, речь’может идти только о причинах проявления отдельных способов и форм у конкретных видов в пределах рода и семейства. Среди способов и форм их реализации встречаются, проявляющиеся только в благоприятных искусственных условиях в изолированной культуре (развитие корней и побегов на листьях, цветках и лепестках), редко или не реализующиеся в естественном состоянии.

Попытки найти связь процессов регенерации с положением видов, родов и семейств в филогенетических системах оказались безуспешными. Конечнонекоторую положительную информацию такого характера можно получить при сравнении между собой в целом голосеменных и покрытосеменных, двудольных и однодольных растений. В тоже время в пределах каждой из этих групп виды и семейства заметно отличаются между собой по способам реализации потенций к регенерации, что теряет необходимость их филогенетических сравнений. При этом достаточно указать на различия в реализации процессов регенерации у черенков разных видов Begonia, Lycopersicum, Populus, Salix и др., чтобы убедиться в таком выводе. Такие различия обнаружены у сортов ряда растений.

Исследования на одном объекте не позволяют делать широкие обобщения. Однако из полученного материала в виде предположения можно высказать некоторые соображения в порядке постановки вопроса. На примере животных выяснена связь процессов регенерации с проявлением способности к их бесполому размножению (Воронцова, Лиознер, 1957; Иванова-Казас, 1977). У лещины с активным вегетативным размножением не все органы и структуры проявляют способность к регенерации. Черенки из развитых побегов с паренхимати-зацией тканей содержащих больше питательных и физиологически активных веществ, отличаются высокой активностью к придаточному корнеобразованию по сравнению с черенками из тонких и одревесневших побегов (Комиссаров, 1964; Иванова, 1982).

Одревесневшие черенки обладают низкой активностью к ризогенезу. Зелёные черенки развивают корни, когда они по состоянию паренхиматизации тканей близки к поросли. Поросль и корневые отпрыски лещины формируют придаточные корни, особенно легко в начальный период их роста, в зелёном состоянии. Несмотря на общность наследственной программы соматических клеток различных вегетативных органов и структур индивидуума, они проявляют существенные различия в активности к регенерации (гл. 3, табл. 11). Эти различия обусловлены направлением специализации в онтогенезе, т. е. изменением уровня одревеснения тканей и организации проводящей системы, темпов роста органов и структур. Отсюда и специфика регенерации одревесневших и.

Известно, что травы формировались из древесных путём ярусной неотении их побегов с паренхимной организацией в виде конечного результата онтогенеза (Тахтаджян, 1964). Травы по своей организации и функциям ближе к па-ренхимному состоянияю побегов древесных. С другой стороны, травам, отличающимся большей паренхиматизацией тела, в целом характерна и высокая активность черенков к ризогенезу (Юсуфов, 1982), несмотря на наличие исключений среди древесных и травянистых форм. Отсюда активность к ризогенезу зелёных черенков лещины следует признать не результатом естественного вегетативного размножения, а реализацией потенций паренхимных клеток к делению. Такой вывод напрашивается и на основании данных по другим древесным растениям, у которых зелёные стеблевые черенки также хорошо укореняются, но в природе вегетативно не размножаются (Турецкая, 1961; Комиссаров, 1964; Тарасенко, 1967).

Экспланты семядолей плодов разной зрелости проявляют различия в регенерации в связи с их физиологическим состоянием, изменением соотношения регуляторов роста в тканях, а также в зависимости от условий освещения при культивировании. Следовательно, на примере эксплантов семядолей и пассированного каллуса реализация процессов регенерации определяется многими онтогенетическими факторами и при сходстве наследственных возможностей.

Экспланты разных частей семядолей отличались по активности формирования адвентивных корней и почек (гл. 4, табл. 19). На морфогенез эксплантов семядолей оказывало влияние введение в среду ИМК и БАП. В вариантах совместного введения в среду ИМК и БАП отмечено формирование адвентивных почек по сравнению с контролем и вариантом с ИМК. Морфологически нижние части семядолей с почечкой и без неё и на минимальной среде проявляли активность к ризогенезу и развитию почек. Корни формировались лучше у эксплантов с почечкой.

Происхождение процессов регенерации у растений приводит к необходимости изучения общих предпосылок на молекулярном и клеточном уровнях (Юсуфов, 1988). Из них вытекают другие различиям проявлении процессов, регенерации у видов и форм, их причины следует искать в экологических особенностях формирования растений, в структурно-функциональной организации их органов.

Семядоли лещины состоят из паренхимной ткани, которая часто даёт начало корневым зачаткам (гл. 4, рис. 10−13). При изучении препаратов продольных микросрезов плодов лещины было отмечено, что семядоли состоят из па-ренхимных клеток (гл. 4, рис. 10). Паренхимная ткань ближе к краю состоит из более мелких клеток, чем в середине. На препаратах микросрезов семядолей видны сосудистые пучки, которых больше в средней части, что значимо для протекания процессов регенерации и-морфогенеза (гл. 4, рис. 12−13).

Разные части эксплантов семядолей отличались по собственной? биомассе и по биомассе сформировавшихся на них каллуса и корней, что связано с различием в темпах деления и дифференциации клеток. Прирост биомассы самого экспланта был характерен для всех вариантов. Низкая величина биомассы каллуса и корней была в варианте контроля и в варианте с ИМК и БАИ в соотношении (1:1) (гл. 4, табл. 20). Варианты культивирования эксплантов нижней части семядолей с почечкой отличались активностью к ризогенезу и на минимальной среде (контроль). Культивирование эксплантов в темноте стимулировало деление клеток каллуса и образование на нём адвентивных корней. На каллусе развивались адвентивные корни чаще всего с отрицательной геотропической реакцией (гл. 4, рис. 22). Свет оказывает влияние на дифференциацию каллуса, задерживая деление его клеток (Бутенко, 1975а, 1977, 1999).

Культивирование стеблевых черенков, эксплантов различных структур и семядолей плодов разной зрелостив зависимости от условий и введения в среду ИМК и БАП обнаруживают различия в реализации процессов роста и регенерации. Данных по регенерации различных структур одного объекта недостативе они не лишены интереса для развития сравнительных исследований в этом направлении. Любая интактная структура растений отличается динамичностью формирования (Sattler, 1992), что делает необходимым её изучение в связшс особенностями дифференциации, специализации, времени и места закладки структур (Fakharia, Evens, 1990; Chapman, 1995; Doman, Montenus, 1995; Gebhart, 1995; Rinald, Leva, 1995; Gillissen, Staveren, Hakkem, Smulders, 1996). Такие различия часто оказываются значимыми и для реализации потенций к регенерации у соматических клеток in vitro (Батыгина и др., 1978; Иванов, 1985, 1993; Бутенко, 1999; Батыгина, 1999). Для-познания природы процессов регенерации растений имеет значение изучение роли структурно-функциональной* дифференциации индивидуума. В связи с проявлением специфики реализации потенций к регенерации у разных видов и органов растений, а также их онтогенетической лабильностью возникает вопрос о происхождении и значимости указанных потенций (Юсуфов, Магомедова, 2003; Goss, 1973; Wills et al 2002). Или «нередки случаи, когда способность к регенерации не имеет никакого значения для выживания обладающих ею животных» (Хэй, 1969: 46).

Различные способы и формы реализации потенций к регенерации у растений сочетаются с универсальным характером их проявления. При постоянной подверженности повреждениям индивидуума, отдельных его органов и структур абиогенными и биогенными факторами (Кренке, 1950) понятны причины универсальной встречаемости проявления потенций к регенерации для восстановления целостности индивидуума, органов и структур в естественных условиях. В этом смысле большая часть способов и форм реализации потенций к регенерации в изолированной культуре не имеет приспособительного, экологического значения, как в случае изолированных листьев и лепестков у многих растений. В перспективе одной из задач является объяснение механизмов сохранения и проявления потенций к регенерации у структур, не реализуемых в ряду поколений. Изучение их природы имеет значение для развития теории регенерации растений.

Итоги работы значимы в практическом и в познавательном отношении. В первом случае важны результаты, характеризующие особенности ризогенеза и роста одревесневших и зелёных черенков лещины. Укореняемость зелёных черенков растений зависит как от факторов внешней среды, так и от биологических особенностей каждого вида и сорта. Зелёные черенки могут быть использованы для размножения в парниках с искусственным туманом при ограниченности маточников. Зелёное черенкование используется для ускоренного выращивания посадочного материала с высоким коэффициентом размножения при низкой затрате ручного труда. А также может быть использовано в селекционных целях при необходимости сохранения и увеличения посадочного материала в слабо развитых отобранных маточниках. Размножение черенками не исключается в познавательных целях, несмотря на активность естественного вегетативного возобновления лещины (гл. 3, табл. 1). Представляет определённый практический и познавательный интерес культивирование эксплантов разных частей семядолей незрелых плодов лещины in vitro.

Главное значение работы — это характеристика особенностей реализации потенций к регенерации различными изолированными структурами и эксплан-тами семядолей плодов лещины. Этот аспект делает её моделью для характеристики природы программной наследственной и индуцированной, онтогенетической реализации потенций к регенерации у растений. Реализация процессов регенерации выражается в изменении количественных (активность) и качественных (наследственная способность) параметров (Юсуфов, 1982). Об этом часто забывают при изучении процессов регенерации. При регуляции условий культивирования и предобработки изолированных структур регуляторами роста часто достигаются изменения в активности к регенерации. Наследственная способность отражает специфику реализации определённого типа морфогенеза, что проявляется в различиях типов и способов регенерации (каллуса, корней, почек, цветков). Наследственная способность к регенерации у растений контролируется онтогенетическими факторами, о чём свидетельствуют данные, о различиях в регенерации у черенков и эксплантов структур (гл. 3 и 4).

Наличие ИМК и БАП не стимулирует накопление сырой и сухой биомассы эксплантами семядолей. Для определения связи между процессами роста, морфогенеза и накопления биомассы семядолями, каллусом и корнями эксплантов были проведены дисперсионный и корреляционный анализы по достоверным данным (гл. 4, табл. 23−28). У сорта Римский положительная величина корреляции между биомассой семядолей и каллуса (+0,54), сухой биомассой семядолей и каллуса (+0,37) и отрицательная (-0,54) между биомассой семядолей и корней (гл. 4, табл. 27, 28).

Дисперсионный и корреляционный анализы были проведены и для определения влияния условий культивирования на накопление биомассы и реализацию процессов регенерации эксплантами семядолей формы Южнодагестанский и сорта Римский. По результатам исследований были сделаны следующие выводы.

Содержание в среде ИМК подавляет накопление сырой биомассы семядолей формы Южно дагестанский и достоверно (7,3%) ограничивает размах изменчивости. БАП не влияет на накопление сырой биомассы эксплантами семядолей формы Южнодагестанский. В вариантах с ИМК и БАП в соотношениях (1:1) и (1:2) сырая биомасса эксплантов семядолей была ниже, чем в контроле.

Активный прирост биомассы семядолей и каллуса у эксплантов по сравнению с контролем был отмечен во всех вариантах у сорта Римский по сравнению с формой Южнодагестанский, особенно в варианте с ИМК и БАП в соотношении (1:1). Дисперсионным анализом было показано достоверное влияние регуляторов роста на накопление сырой биомассы каллуса у сорта Римский, особенно в вариантах с БАП и с ИМК и БАП в соотношении (1:2).

Накопление сырой биомассы адвентивных корней у формы Южнодагестанский и сорта Римский в среде с регуляторами роста, особенно в вариантах с ИМК и БАП в соотношениях (1:1) и (1:2) угнетается. В указанных вариантах отмечено достоверное снижение размаха изменчивости по данному признаку по сравнению с контролем. Сырая биомасса корней формы Южнодагестанский на среде с ИМК и БАП в соотношении (1:2) была низкой из-за ингибирования их дифференциации. У сорта Римский содержание ИМК и БАП в соотношении (1:2) достоверно стимулирует накопление сырой биомассы семядолей, что сопровождается повышением размаха её изменчивости и накоплением сухой биомассы семядолей, а также сырой и сухой биомассы каллуса и корней по сравнению с контролем.

У формы Южнодагестанский отмечена высокая положительная корреляция (+0,86) между сырой биомассой семядолей и каллуса и отрицательная между сырой биомассой семядолей и корней. У сорта Римский наоборот, высокая отрицательная корреляция (-0,99) между биомассой семядолей и каллуса, и положительная между биомассой семядолей и корней. У формы Южнодагестанский и сорта Римский между биомассой каллуса и корней отрицательная корреляция (-0,91) и (-0,40) соответственно. У формы Южно дагестанский между сухой биомассой семядолей и каллуса отмечена отрицательная, а между семядолями и корнями положительная корреляция. Всё это свидетельствует, что на накопление сырой и сухой биомассы экзогенное введение ИМК и БАП не оказывает существенного влияния. Возможно, это связано с эндогенным содержанием регуляторов роста.