Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Компьютерная морфометрия ретикулоцитов в норме и при анемических состояниях

Диссертация: Компьютерная морфометрия ретикулоцитов в норме и при анемических состояниях
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

За последнее время принципиально улучшилась техническая база для автоматизированных анализаторов изображения, основанная на принципах анализа клеточного изображения с помощью компьютерной морфометрии. Был создан ряд приборов, позволяющих измерять тонкую структуру клеток крови (Roche Image, SIRES, Autocyte и другие). Существуют и современные отечественные разработки: АСПЕК, МЕКОС, которые… Читать ещё >

Содержание

  • Список используемых сокращений
  • Глава 1. Обзор литературы
  • Глава 2. Материалы и методы
    • 2. 1. Материалы исследования
    • 2. 2. Методы исследования
      • 2. 2. 1. Взятие крови
      • 2. 2. 2. Лабораторные методы исследования периферической крови
      • 2. 2. 3. Анализ клеточного изображения
      • 2. 2. 4. Программные алгоритмы компьютерной классификации клеток
      • 2. 2. 5. Статистическая обработка
  • Глава 3. Собственные результаты
    • 3. 1. Определение ретикулоцитов в норме
    • 3. 2. Определение ретикулоцитов у доноров одной дозы крови
    • 3. 3. Исследование влияния препаратов железа на показатели гемоглобина, эритроцитов и ретикулоцитов у доноров
    • 3. 4. Влияние двойного эртгроцитафереза на ретикулоциты периферической крови доноров
    • 3. 5. Влияние острой массивной кровопсггери на показатели ретикулоцитов
      • 3. 6. 1. Исследование ретикулоцитов при хранении
      • 3. 6. 2. Исследование ретикулоцитов при замораживании
    • 3. 7. Исследование ретикулоцитов при анемиях
      • 3. 7. 1. Показатели ретикулоцитов при железодефицитной и В-12 дефицитной анемиях
      • 3. 7. 2. Исследование ретикулоцитов при хронической почечной недостаточности

Компьютерная морфометрия ретикулоцитов в норме и при анемических состояниях (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность исследования.

Исследование ретикулоцнтов периферической крови получило широкое распространение в гематологической практике. Оно используется в диагностике, классификации и мониторинге лечения анемий.

Основным методом исследования ретикулоцнтов является микроскопический, с подсчетом их относительного количества. Указанный метод трудоемок, недостаточно стандартизирован, отличается низкой точностью, субъективностью. Коэффициент вариации ручного метода составляет около 30%. Низкое содержание ретикулоцнтов в крови, большое нх разнообразие не позволяет в полной мере провести точную морфологическую оценку их параметров, что необходимо для оценки активности эрнтропоэза. Созданная классификация ретикулоцнтов не нашла своего практического применения, а количественная оценка используется лишь для дифференциальной диагностики состояний с выраженным повышением или понижением их числа.

В последнее время широкое распространение получили автоматизированные методы анализа ретнкулощггов, что снизило процент ошибки до 6%. Основными факторами повышения точности являются исследование большого числа эритроцитов и четкое улавливание незначительного количества РНК-содержащих структур в клетках. Современные гематологические анализаторы позволяют получить кроме классических (относительного и абсолютного количества ретнкулоцнтов) дополнительные показатели, характеризующие клеточный объем и степень зрелости ретикулоцнтов.

Эта методика не исключает возможность ложно положительного результата при хроническом лнмфолейкозе, других лимфопролнферативных заболеваниях и при наличии гигантских форм тромбоцитов. Как и при ручном методе, случаи с патологическими включениями в эритроцитах: тельца Хауэлла-Жолпи, Гейнца, включения гемоглобина Н, базофнльная пунктацня, тельца Папенгеймера, и включения при заболевании малярией — дшот значительное ложное увеличение числа ретикулоцитов. Таким образом, точность автоматических процедур подсчета ретикулоцитов ограничена большим количеством патологических состоянии, при которых надо использовать морфологическую идентификацию ретикулоцитов, что диктует необходимость разработки нового метода изучения ретикулоцитов.

За последнее время принципиально улучшилась техническая база для автоматизированных анализаторов изображения, основанная на принципах анализа клеточного изображения с помощью компьютерной морфометрии. Был создан ряд приборов, позволяющих измерять тонкую структуру клеток крови (Roche Image, SIRES, Autocyte и другие). Существуют и современные отечественные разработки: АСПЕК, МЕКОС, которые используются для подсчета и исследования эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов периферической крови. Однако не имеется в настоящее время опубликованных данных о возможности использования данной технологии для исследования ретикулоцитов.

Все вышеизложенное определяет актуальность проблемы н позволяет обозначить цель и задачи настоящего исследования.

Цель: ретнкулоциты периферической крови в норме, оценка их при кровопотере, воздействии хранения, замораживания, анемических состояниях с использованием компьютерной морфометрии.

Задачи нсследопання:

1. Определить референтные значения морфологических параметров ретикулоцитов в норме.

2. Классифицировать ретнкулоциты периферической крови с помощью компьютерной обработки изображения.

3. Изучить изменения количественного и качественного состава ретикулоцитов периферической крови доноров при проведении различных процедур забора крови.

4. Оценить влияние кровопотерн на динамические изменения количества и морфологической структуры ретикулоцитов.

5. Исследовать изменения количества ретикулоцитов при храпений в составе эритроцитарной массы.

6. Изучить влияние низких температур на количественные и качественные показатели ретикулоцитов при криоконсерв1фовапин крови.

7. Охарактеризовать рстнкулоцитарный состав периферической крови при различных видах анемий: железодефицитная, Bj2 дефицитная анемии, анемия при хронической почечной недостаточности.

Научная новизна работы:

Для исследования ретикулоцитов периферической крови применена методика компьютерной обработки изображения. Данная методика позволила определить новые характеристики ретикулоцитов в норме и показала изменения этих параметров при анемических состояниях различного генеза.

Теоретическая н практическая значимость работы.

В данной работе определены новые параметры ретикулоцитов и их изменения при различных патологических состояниях. Исследованы влияния различных объемов кровопотерн на активность эритрона. Показана возможность применения компьютерной морфометрии для определения количественных н качественных характеристик ретикулоцитов при изменении активности эритропоэза при различных анемиях, что в дальнейшем позволит выработать необходимые диагностические критерии для дифференциальной диагностики анемических состояний, мониторинге эффективности терапии. Данная методика может стать частью исследования гематологических больных.

Реализация результатов исследования:

1. Разработанная методика используется в лаборатории гемоцнтологии ГУ ГНЦ РАМН для проведения лабораторных и научных исследований.

2. Результаты работы опубликованы в 11 печатных работах.

3. По материалам проведенных исследований сделано 2 доклада, проводятся регулярные выступления на кафедре ФППО «Основы клинической трансфузиологни» при Московской медицинской академии им. И. М. Сеченова.

Положения выносимые на защиту:

1.. Для исследования ретикулоцитов применима методика компьютерной морфометрии.

2. Определен коэффициент вариации при количественном подсчете ретикулоцитов, показана его зависимость от количества просчитанных клеток.

3. Определены референтные значения таких параметров ретикулоцитов, как площадь клеток, площадь гранул ретикулоцитов.

4. Показана корреляция ретикулоцитов по размерам и содержанию гранул на плоскости мазка.

5. Создана морфологическая классификация ретикулоцитов с выделением 3 классов по размерам и 3 классов по количеству гранул на основе их морфометрическнх характеристик.

6. Исследованы динамические изменения количественного и качественного состава ретикулоцитов до и после процедуры забора крови, определена зависимость их от дозы потерянной крови. Показано влияние препаратов железа на эритропоэз доноров.

7. Описаны изменения в составе ретикулоцитов при хранении и воздействии низких температур.

8. Показаны изменения в составе и структуре ретикулоцитов при различных анемиях с использованием компьютерной морфометрии.

Апробация работы.

Материалы исследований докладывались на Симпозиуме «Национальные дни лабораторной медицины России» (Москва 2002,2003), на циклах повышения квалификации по специальности «Основы клинической трансфузиол о ги и» .

Структура и объем диссертации

.

Диссертация представлена на 111 страницах. Состоит из введения, 4 глав, выводов, списка литературы, включает в себя 28 таблиц, 26 рисунков.

ВЫВОДЫ.

1. Компьютерная обработка изображения может быть использована при исследовании количественных и качественных характеристик ретикулоцитов. Данная система более эффективна прн работе в интерактивном режиме.

2. Точность исследования количественного состава ретикулоцитов периферической крови зависит от числа просчитанных клеток. Коэффициент вариации при исследовании 2000 эритроцитов у здоровых людей равен 19,6%.

3. Определены референтные значения площади ретикулоцитов и площади содержащихся в них гранул. Показано, что при данной методике приготовления препаратов размеры ретикулоцнтов превышают размеры эритроцитов в среднем на 35,0%.

4. Ретнкулоцнты периферической крови в норме коррелируют между размерами и площадью гранул (р < 0,001). Ретнкулоцнты классифицированы по своим морфологическим характеристикам на макро-, нормои микроцитарные по размерам, а так же на молодые, переходные и зрелые формы по содержанию в них гранул. Определено нормальное их соотношение.

5. Изменения ретнкулоцитарного состава периферической крови зависят от объема кроводачи. При заборе одной дозы крови не наблюдается достоверных изменений количества ретикулоцнтов. При проведении двойного эритроцитафереза снижается площадь ретикулоцнтов (р < 0,01). В эксперименте прн острой кровопотере у кроликов в объеме 20%- 40% отмечается увеличение ретикулоцитов с первого дня наблюдения (р<0,001).

6. Прн хранении крови прн температуре +4° +6° С отмечается снижение количества ретикулоцитов в два раза в течение двух недель, снижение площади их гранул (р<0,05). Криоконсервирование при температуре -196° С не ведет к снижению количества ретикулоцитов и их площади, однако уменьшается площадь гранул (р < 0,001).

7. У больных железодефицитной и Bi2 дефицитной анемиями увеличены количество ретикулоцитов и площадь их гранул. При Bj2 дефицитной анемии наблюдается резкий сдвиг влево до 65,0% молодых форм, при железодефицитной анемии — до 26,6%. При хронической почечной недостаточности количество ретикулоцитов увеличено по сравнению с нормой, однако, нет достоверной разницы между количественными и качественными характеристиками ретикулоцитов в группах больных с первичной патологией почек и с поражением их при множественной миеломе на фоне приема рекомбинантного эритропоэтина.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

:

Для создания и усовершенствования алгоритма по распознаванию изображения ретикулоцитов нами проведена работа по оптимизации и стандартизации приготовления мазков крови.

Была осуществлена работа по подсчету ретикулоцитов здоровых людей с нормальными показателями красной крови. Определены коэффициенты вариации при подсчете ретикулоцитов относительно 1000 и 2000 эритроцитов периферической крови с использованием компьютерной морфометрин.

Средний коэффициент вариации (CV ср.) при подсчете на 1000 клеток составил 30,62%, на 2000 эритроцитов CV ср. составил 19,66%. Полученные результаты соответствуют литературным данным и показывают, что с увеличением количества просчитанных клеток, возрастает точность исследования. В дальнейшем количество ретикулоцнтов подсчитывалось относительно 2000 эритроцитов клеток.

Определены нормальные показатели ретикулоцнтов в «контрольной группе»: среднее количество 12,0%о ± 1,05%о, что укладываются в нормальные показатели (2−15%о.).

Было проведено измерение морфометрических показателей ретикулоцитов, определение референтных значений, и классификация ретикулоцитов в «контрольной» группе. Измерялась площадь клеток: А среднее значение 39,16 ± 0,70 мкм, площадь эритроцитов — 29,28 ± 0,33 мкм2. Данное исследование показало преобладание площади ретикулоцнтов над площадью эритроцитов, р < 0,001.

Распределение эритроцитов более равномерно и приближается к нормальному. Распределение ретикулоцитов имеет выраженную скошенность вправо, из-за большого количества крупных клеток.

Для разделения ретикулоцитов на формы в зависимости от площади, за основу был взят интервал М ± SD. По данным исследования видно, 1гго в норме в периферической крови преобладают ретикулоциты нормального размера и составляют 80%, микроциты 7,4%, макроциты 12,6%.

Проведено исследование ретикулоцитов по площади гранул. Измерялась площадь гранул той же выборки «контрольной» группы, среди которой присутствуют ретикулоциты, в широком диапазоне по площади гранул от 0,15 до 18,75 мкм, однако, основное количество представлено зрелыми формами (с малой площадью гранул).

Распределение ретикулоцитов по относительной площади гранул говорит о наличии в крови практически равного количества ретикулоцитов с различной «концентрацией» вещества гранул. Ретикулоциты по абсолютной площади гранул имеют выраженный максимум при низком содержании гранул, что свидетельствует о большом преобладании «зрелых» форм, однако имеет место значительной вариация ретикулоцитов с большой площадью гранул.

Ретикулоциты «контрольной» группы разделены па молодые формы, с абсолютной площадью гранул больше М + SD (5,9%), переходные формы М ± SD (79,3, %) и зрелые — меньше М — SD (14,8.

При исследовании корреляции полученных показателей с целью определения зависимости площади ретикулоцитов и площади их гранул получены данные, которые говорят о сильной связи размеров ретикулоцитов и площади их гранул. Вероятнее всего процессы уменьшения размеров ретикулоцитов при созревании и процессы уменьшения количества РНК в них идут параллельно, что доказывается высокой корреляцией (р<0,001) между площадью ретикулоцитов и абсолютной площадью гранул в них.

При исследования влияния однократной кроводачи на эритроиднын росток у доноров количественные показатели ретикулоцитов не отличались от нормы. При сравнении показателей площади клеток контрольной группы и площади клеток кадровых доноров до кроводачи выявлено выраженное снижение размеров ретикулоцитов, что может свидетельствовать о некотором дефиците железа у кадровых доноров.

Исследования влияния препаратов железа на динамику показателей красной крови после сдачи одной дозы крови дало следующие результаты: в группе, принимающей препараты железа обнаружен высоко достоверный подъем количества ретикулоцитов в первую неделю после кроводачи и тенденция к сохранению повышенного их количества в течение всего срока наблюдения, что привело к повышению потребления железа и, соответственно, подъему уровня ОЖСС. Через одну неделю после кроводачи (на фоне приема препаратов железа) отмечается достоверное увеличение размеров (площади) ретикулоцитов и площади гранул по сравнению с первоначальными у этой группы людей. Увеличение количества РНК (площади гранул) свидетельствует о повышении синтеза РНК в эрнтрокарноцитах, а соответственно об увеличении синтеза гемоглобина. На третьей неделе наблюдения сохранялось увеличение площади ретикулоцитов и площади гранул.

При изучении соотношения ретикулоцитов по размерам видно, что после приема железа количество микроцитарных форм сократилось с 32% до 12% в первую неделю, и в дальнейшем сохранялось низким (10%).

При сравнении соотношения площадей гранул у ретикулоцитов получены данные об увеличении клеток с большой площадью гранул, то есть молодых форм с 5,4% до 24% через неделю после ководачн н после приема препаратов железа. Через три недели после кроводачи количество незрелых ретикулоцитов вернулось к первоначальному (6,5 Полученные данные позволяют говорить о выраженном влиянии препаратов железа на кроветворение, которое проявляется в нормализации ретнкулоцитарной формулы у кадровых доноров.

При наблюдении за донорами после эритроцитафереза через один месяц после процедуры отмечается достоверное снижение площади ретикулоцитов в течение 2 недель. После двойного эритроцитафереза происходит уменьшение процента мнкроцитарных форм, а через месяц наблюдается рост мнкроцитарных форм до 40%.

Площадь гранул имела тенденцию к увеличению через 2 недели и 1 месяц после процедуры, что говорит о высвобождении более молодых форм ретикулоцитов. В течение всего месяца происходил постепенный «сдвиг влево», то есть появление большего количества молодых форм ретикулоцитов с 11,5% до 20%. Выявленные изменения в структуре ретикулоцитов говорят о выраженных изменениях ретикулоцнтопоэза в костном мозге доноров, особенно после забора двух доз эритроцитов.

Для исследования влияния потери больших объемов крови на ретнкулоцнтарный состав крови проведены исследования кроликов при проведении кровопускания в объеме 20% - 40% О ЦК. Из данного исследования видно, что при острой массивной кровопотере отмечается возрастание ретикулоцитов с первого дня наблюдения (р<0.001), что позволяет сделать заключение о сильном увеличении как выброса ретикулоцитов в периферический кровоток, так и об ускорении их образования в костном мозге.

При подсчете ретикулоцитов видно, что в течение двух недель i хранения эрнтроцитарной массы при положительных температурах количество ретикулоцитов уменьшается примерно в 2 раза, отмечается снижение площади гранул. Данные изменения можно связать с медленно текущим созреванием ретикулоцитов при относительно низких температурах.

Нами исследованы образцы крови, при ультранизких температурах хранения, до и после замораживания и отмывания. Из полученных данных установленно, что ретнкулоциты сохраняются в практически не измененном количестве, нет разницы между площадями клеток до и после замораживания, однако отмечается большое различие в площади гранул. В группе ретикулоцитов после разморозкн отмечается статистически достоверное уменьшение площади гранул, что можно связать как с частичным разрушением ретикулярной формации при замораживании.

Проведено изучение показателей ретикулоцитов у больных различными анемиями.

В группе больных железодефицитной анемией была выявлена гипохромная, микроцитарная анемия, снижение уровня сывороточного железа, увеличение количества ретикулоцитов до 24,5, достоверное увеличение площади гранул ретикулоцитов, то есть увеличение содержания более молодых форм, тенденция к уменьшению площади ретикулоцитов.

Все больные группы В12 дефицитной анемии имели гиперхромпую, макроцитарную анемию, уровень ретикулоцитов был выше нормы не так выражено, как при железодефиците, однако достоверно 18,9%о. У этих больных имело место увеличение площади ретикулоцитов и увеличение абсолютной площади гранул. При В]2 дефицитной анемии наблюдается резкий «сдвиг влево» до 65% молодых форм, при железодефицитной анемии — 26,6%.

При обеих формах анемий наблюдается возрастание макроцитарных форм ретикулоцитов до 33,5% и 16,7% соответственно, при железодефицитных анемиях, микроформ ретикулоцитов в периферической крови так же больше, чем при норме.

Полученные данные позволяют говорить о том, что изменения в ретикулоцитах периферической крови при обеих формах анемий соответствует изменениям в эритроцитах, увеличение общего количества и молодых форм ретикулоцитов происходит из-за повышенного выброса их го костного мозга в ответ на гипоксию, а так же отражает нарушения гемопоэза, которые более выражены при Bj2 дефицитной анемии.

Исследование ретикулоцитов при хронической почечной недостаточности показало, что нет статистической разницы между количественными и качественными характеристиками ретикулоцитов в обеих группах больных с и без поражения костного мозга, на фоне приема рекомбинантного эритропоэтина. Отмечается повышенное содержание ретикулоцитов в крови.

Таким образом морфологические особенности ретикулоцитов, выявленные с использованием морфомстрии окрашенных мазков, отражают даже незначительные изменения эритропоэза, и могут использоваться в дифференциальной диагностике различных изменений и нарушений кроветворения.

Метод компьютерной морфомстрии ретикулоцитов показал свою значимость. Данная методика позволила количественно оцениггь такие параметры ретикулоцитов, как площадь клетки и площадь гранул. Показано, что данные параметры имеют большое значение для оценки функционального состояния эритропоэза и отражают закономерности изменений при различных анемических состяниях. Новые морфологические показатели ретикулоцитов могут использоваться для более точного исследования патогенеза развития анемий.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Г. Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностической гистоцитопатологии. // М: РМАПО 1996. -256с.
  2. А.В., Арустамян Ю. С., Сарычева Т. Г., Новодержкина Ю. К., Карпухин С. В., Ашуров Г. Д. Принципы построения программно-аппаратных средств автоматического рабочего места врача-лаборанта. // Клин. лаб. диагн. — 1997. № 10. — с. 20−23.
  3. В.А. Оптимизация аппаратно-програмного обеспечения гематологических исследований. // Дисс. докт. мед. наук, Москва, 1999.
  4. JI.B., Логинов А. В. Значение автоматического анализа крови в клинической практике // Гематология и трансфузиология.- 1996, — Т.41, № 2.- С.3610.
  5. ИЛ., Гуревич ЕЛ., Мацко Д. Е., Михальченко А. И. Теория и практика в создании автоматизированной интеллектуальной системы распознавания гистологических препаратов. // Арх. патологии. -1993. № 4. — с. 40−43.
  6. Л.С., Пурло Н. В. Анемия у больных с терминальной стадией хронической почечной недостаточности на программном гемодиализе // Клиническая лабораторная диагностика.- 2002.- № 9.- С. 17.
  7. Н.В., Виноградов А. Г., Иванова И. А., Погорелов В. М., Сазонов В. В., Козинец Г. И. Сегментация изображений в системе автоматического анализа клеточного составапериферической крови. // Клиническая лабораторная диагностика, — 1999.-№ 10.- С. 25−26.
  8. В.В. Эффективность диагностических исследований.// М.: Медицина, 1998.- 256 с.
  9. И.А., Захарова А. И., Атауллаханов Ф, И, Вотчал М.С., Лорие Ю. Ю., Воробьев А. И. Определение условий компьютерной записи микроскопического изображения на примере кариоцнтов периферической крови. // Пробл. гемат. — 1998. -№ 3. с. 14 -20.
  10. П.А. Анемический синдром в клинической практике, — М., 2001.- 168 с.
  11. В. Гематолгический атлас. // Братислава. Изд. Словацкой академии наук. — 1961. — 185с.
  12. Гуревич К Л. Человеческий рекомбинантный эритропоэтин (эпокрин) в лечении анемии, — С.-П., 2001.- 80 с.
  13. В.В., Луговская С. А., Морозова В. Т., Почтарь М. Е. Лабораторная диагностика анемий.- М., 2001.- С. 10−16.
  14. Ю.О., Краснов А. Е. Информационные средства обработки и морфометрического анализа изображения клеток. // Сб. тр./РАН Ин-т пробл. упр. 1998. — № 7. — с.57−58.
  15. О.А., Сарычева Т. Г., Козинец Г. И. Определение содержания ретикулоцитов в периферической крови: клиническое значение и современные методические возможности // Гематология и трансфузиология.- 2000, — Т.45, № 2.- С.35−37.
  16. Идельсон Л. И, Дидковский Н. А, Ермильченко Г. В. Гемолитическая анемия.- М., 1975.
  17. И.А., Алексеев Г. А. Клиническая гематология.- М., 1955.
  18. И.А., Алексеев Г. А. Клиническая гематология.- М., 1970.-800 с.
  19. Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования.- М., 1975.- С.29−31.
  20. Клиническая гематология. / Под ред. Берчану Шт., пер. с румынск.- Бухарест: Мед. изд-во, 1985.
  21. С.М. Клинико-диагностическое значение показателей автоматизированного исследования ретнкулоцитов7/ Дисс. канд. мед. наук, Москва, 2004.
  22. Г. И., Котельников В. М., Гольдберг В. Е. Цитофотометрия гемопоэтических клеток. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1986. — с.224.
  23. Г. И., Котельников В. М., Погорелов В. М. Применение компьютеров в гематологических цитологических исследованиях. // Лабораторное дело. 1990. -с.21 -24.
  24. Г. И., Макаров В. А. Исследование системы крови в клинической практике.- М., 1997.- С. 60−71.
  25. Г. И., Погорелое В. М., Шмаров Д. А. и др. Клетки крови. Современная технология их анализа.- М.:Триада-фарм, 2002.-200с.
  26. Ф. В. Компьютерная морфометрия тромбоцитов периферической крови здоровых людей.// Дисс. канд. биол. наук, Москва, 2001.
  27. Ю.В., Ковригина Е. С., Байдун JI.B. и др. Использование эритроцитарных индексов и показателей обмена железа в дифференциальной диагностике мнкроцитарных анемий. // Гематология и трансфузиология.-2000.- Т.45, № 6.- С.46−48.
  28. Ю.В., Ковригина Е. С., Токарев Ю. Н. Оценка эритроцитарных параметров автоматического анализа крови для диагностики анемий // Гематология и трансфузиология.-1996.-Т.41,№ 5.- С.44−47.
  29. Г. Г., Козинец Г. И. Новые возможности оптической микроскопии при исследовании клеток системы крови. // Клин, лаб. диагн. 1997. -№ 10. — с. 14−16.
  30. С.А., Миронова И. И., Морозова В. Т., Почтарь М. Е. Гематологические анализаторы в диагностике железодефицитных анемий // Клиническая лабораторная диагностика.- 1996.-№ 6.- С.7−9.
  31. С.А., Миронова И. И., Почтарь М. Е. и др. Диагностика железодефицита с помощью современных гематологических анализаторов // Гематология и трансфуз и ол о гия1996.- Т.41, № 4- С.31−33.
  32. С.А., Морозова В. Т., Почтарь М.Е., Долгов
  33. В.В. Лабораторная гематология.- М.: Лаб-пресс, 2002.- 120 с.
  34. С.А., Почтарь М. Е. Современная оценка состояния эритрона и метаболизма железа // Клиническая лабораторная диагностика.- 2002.- № 9.- С. 16.
  35. В.В. (ред.) // Качество клинических лабораторных исследований. Новые горизонты и ориентиры. М., 2002.-304с.
  36. В.В. (ред.) Лабораторные методы исследования в клинике М.: Медицина, 1987.- С.118−119.
  37. В.Т. Гематологические исследования в диагностике заболеваний // Клиническая лабораторная диагностика. 1996.-№ 6.- С.3−7.
  38. Е.Н., Федоров Н. А., Гудим В. И. и др. Нормальное кроветворение и его регуляция.- М., 1976.- С.341 457.
  39. Э. А. Сравнительная оценка морфофункционалыюго состояния эритрона у здоровых лиц в процессе кратковременной и долговременной адаптации в условиях высокогорья Тянь-Шань.// Дисс. канд. мед. Наук, Бишкек, 2003.
  40. Г. И., Кишкун А. А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований.- М., 2000.- С.37−38.
  41. А.Ю., Козловская JI.B. Эритропоэтин: применение на ранней и диализной стадиях хронической почечной недостаточности // Consilium medicum. Нефрология.- 2000.-Т.З, № 7.- С.339−342.
  42. Е.И. Морфометрические исследования и системный анализ в диагностике предпатологических состояний системы крови. // Тез. симп. «Медицинские компьютерные системы», Ростов-на-Дону, 1988, с. 152.
  43. В.М., Медовый B.C., Хазем Г. М., Козинец Г. И. Анализ клеточного изображения. // Клиническая лабораторная диагностика.- 1995.- № 3.- С. 40−43.
  44. И.В., Соколова Н. С. Практическое пособие по медицинской статистике.- Л.: Медицина, 1975.
  45. М.Е. Клинико-диагностическое значение показателей крови, получаемых на гематологических анализаторах: Диссертация кацд. мед. наук.- М., 1996.- 114 с.
  46. М.Е., Зубрихина Т. Н., Луговская С. А., Долгов В. В. Использование современных гематологических анализаторов в клинико-диагностических лабораториях. // Клиническая лабораторная диагностика.- 1996.-№ 6.-С. 10−24.
  47. М.Е., Романова Л. А. Диагностическое значение счета ретикулоцитов // Лаборатория.- 1999.- № 1С. 10−11.
  48. А.М., Соколипский Б. З., Бетрозова М. В., Медовый B.C., Козинец Г.И. Анализ эритроцитов в системе «МЕКОС
  49. Ц». // Клиническая лабораторная диагностика.- 1997.- № 10.- С. 8−9.
  50. Руководство по гематологии // Под ред. А. И. Воробьева.-М.: Медицина, 1985.
  51. Руководство по общей и клинической трансфузиологии. // Под ред. Б. В. Петровского.- М.: Медицина, 1979.
  52. А.В., Козинец Г. И. Справочник пособие по клинической трансфузиологии. // М. «Триада — X». — 1998 г. — 45 с.
  53. Н.Г. Лабораторная диагностика нарушений обмена железа. // Клиническая лабораторная диагностика, — 1997.- № 4.-С.25−32.
  54. Abbott Diagnostics Division: Reticulocytes. Methods and Clinical Applications.-May 1996.
  55. Aving A.S., Kellermeyer R.W., Tarlov A., Schrier S., Carson P.E. Biochemical and genetic aspects of primaquine-sensitive hemolytic anemia//Annals of Internal Medicine.- 1958.- Vol.49.- P.240−248.
  56. Bain В., Cavill I. Hypochromic macrocytes- are they reticulocytes? / /Journal of Clinical Pathology.- 1993.- Vol.46.-P.963 964.
  57. Baldini M., Pannacclulli I. The maturation rate of reticulocytes // Blood.-1960.- Vol.15.- P.614.
  58. Bessis M. Cellules du sang normal et pathologique.- Masson, Paris, 1972.
  59. Bessman J.D., Gilmer P.R., Gardner F.H. Improved classification ofanemias by MCV and RDW //American Journal of Clinical Pathology.- 1983.- Vol.80.- P.322−326.
  60. Brecher G. New methylene blue as a reticulocyte stain // American Journal of Clinical Pathology.- 1949.- Vol.19.- P.895−896.
  61. Brecher G., Stohlman F. The macrocytic response to erythropoietin stimulation, //in «Erythropoiesis» (Eds: Jacobsson, L.O. & Doyle, M.), Grune and Stratton, Orlando.- 1962.- P.216.
  62. Brugnara C., Hipp M.J., Irving P.J., Lathrop H., Lee P.A., Minchello E.M., Winkelman J. Automated reticulocyte counting and measurement of reticulocyte cellular indices // American Journal of Clinical Pathology.- 1994.- Vol.102.- P.623−632.
  63. Brugnara C., Laufer M.R., Friedman A.J., Bridges K., Piatt 0. Reticulocyte hemoglobin content (CHr): early indicator of iron deficiency and response to therapy // Blood.- 1994.- Vol.83.-P.3100.
  64. Cavill I. The assessment of erythropoicsis //Eiythropoiesis.- 1992.-Vol.3.- P.90−92.
  65. Cavill I. The rejected reticulocyte // British Journal of Haematology.- 1993.- Vol.84.- P.563−565.
  66. Chasis J.A., Prenant M., Leung A., Mohandcs N. Membrane assembly and remodeling during reticulocyte maturation //Blood.-1989.-Vol.74.-P.l 112−1120.
  67. Corash L.M., Rheinschmidt M., Lieu S. Enumeration of reticulocytes using fluorescence-activated flow cytomerty. // Pathology and Immunopathology. Research.- 1988.- Vol.7.- P.381.
  68. Crosby C. Reticulocyte count // Archives of Internal Medicine.-1981.-Vol. 141.-P.1747−1748.
  69. Crosby W.H., Finch C.A., Haurani F.I., Stohlman F., Wasserman L. Modern metliods for quantitation of red blood cell production and destruction erythrokinetics // Blood.- 1961.- Vol.18.- P.225−235.
  70. Crouch J.Y., Kaplow L.S. Relationship of reticulocyte age to polychromasia, shift cells and shift reticulocytes // Archives of Pathology and Laboratory Medicine.- 1985.- Vol.109.- P.325−329.
  71. CSH. // ICSH guidelines for reticulocyte counting by microscopy on supravitally stained preparations.- 1992, — WHO/LBS/92.3.
  72. Dacie J.V., Lewis S.M. The reticulocyte count //Practical Haematology.- Churchill Livingstone, Edinburgh.- 1984.- P.58 061.
  73. Davis B.H., Bigelow N.C. Flow cytometric reticulocyte quantification using Thiazole Orange provides clinically useful reticulocyte maturity index // Archives of Pathology and Laboratory
  74. Medicine.- 1989.-Vol.l 13.- P.684−689.
  75. Davis B.H., Bigelow N.C. Clinical flow cytometric reticulocyte analysis // Pathobiology.- 1990.- Vol.58.- P.99−106.
  76. Davis B.H., Bigelow N.C. Automated reticulocyte analysis. Clinical practice and associated parameters // Hematology and Oncology Clinics of North America.- 1994.- Vol.8.- P.617−630.
  77. Davis B.H., Bigelov N.C. Reticulocyte analysis and reticulocyte maturity index // Methods in Cell Biology.- 1994.- Vol.42.- P.263−274.
  78. Davis B.H., DiCorato M., Bigelow N.C., Langweiler M.H. Proposal for standardization of flow cytometric reticulocyte maturity index (RMI) measurements//Cytometry.- 1993.- Vol.14.- P.318−326.
  79. Dustin P. Contribution a 1 etude histophysiologique et histochimique des globules rouges des vertebres // Archives Biologique.- Paris, 1944, — Vol.55.- P.285−392.
  80. Davies S., Fegan C., Kendall R., Beguin Y., Cavill I. Serum erytropoietin during autologous bone marrow transplantation: relationship to measures of erythroid activity // Clinical and Laboratory Haematology. 1995.-Vol.17.- P. 139−144.
  81. Davis B.H., Ornvold 1С, Bigelow N.C. Flow cytometric reticulocyte maturity index: A useful laboratory parameter of erythropoietic activity in anemia // Cytometry. 1995.- Vol.22.-P.35−39.
  82. Erslev A. Humoral regulation of red cell production // Blood. -1953.-Vol.8.-P.349−357.
  83. Eschbach J., Kelli M., Haley N., Abels R., Adamson J. Treatment of the anaemia of progressive renal failure with recombinant human erythropoietin //New England Journal of Medicine. 1989.-Vol.322.- P. 1488−1493.
  84. European best practice quidelines for the management of anaemia in patients with chronic renal failure /Nephrology, Dialisis, Transplantation. 1999.- Vol. 14, Suppl.5.- P. I-50.
  85. Ferguson D.J., Lees S., Gordon P.A. Evaluation of reticulocyte counts by flow cytometiy in a routine laboratory // American Journal of Hematology.- 1990.- Vol.33.- P. 13−17.
  86. Finch C.A. Some quantitative aspects of erythropoesis // Annals of the New York Academy of Sciences.- 1959.- Vol.77.- P.410−416.
  87. Finch C.A., Wolff J.A., Rath C.E., Fluharty R.G. Iron metabolism. Erythrocyte iron turnover // Journal of Laboratory and Clinical Medicine.- 1949.-Vol.34.-P. 1480−1490.
  88. Frazier J.L., Caskey H.J., Yojfe M., Seligman P.A. Studies of the transferrin receptor on both human reticulocytes and nucleated cells in culture //Journal of Clinical Investigation.- 1982.- Vol.69.-P.853−865.
  89. Gilmer P.R., Koepke J.A. The reticulocyte: An approach to definition //American Journal of Clinical Pathology.- 1976.-Vol.66.- P.262−267.
  90. Gordon A.S., Lobue J., Dornfest B.S., Cooper G.W. Reticulocyte and leukocyte release from isolated perfused rat legs and femurs. // In: Jacobson L.O. and Doyle (Eds), Erythropoiesis, P. 321. Published by Grune and Stratton.
  91. Griffin T.C., Squires J.C., Timmons C.F., Buchana G.R. Chronic human parvovirus B19-indueed erythroid hypoplasia as the initial manifestation of human immunodeficiency virus infection //Journal of Pediatrics.- 1991.- Vol.118.- P.899.
  92. Houwen B. Reticulocyte maturation //Blood Cells. 1992.- Vol. 16.- P. 167−186.
  93. Key J.A. Studies on erythrocytes, with special reference to reticulum, polychromatophilia and mitochondria. //Archives of Internal Medicine. 1921. -Vol.28.- P.511−549.
  94. Koepke J.F. Reticulocyte counting //Practical Laboratory Hematology.- Churchill Livingstone, Edinburgh.- 1991.- P.99−107.
  95. Kojima K., Niri M., Sctogushi K., Tsuda I., Tatsumi N. An automated optoelectronic reticulocyte counter //American Journal of Clinical Pathology.- 1989.-Vol.92.-P.57−61.
  96. Kosenov W. Uber den strukturwandel der basophilen substanz junger erythrozyten in fluoreszenzmikroskop //Acta Haematologica.- 1952.- Vol.7.- P.360−368.
  97. Kotisaari S., Romppanen J., Penttila I.M., Punnonen K. Response of blood cell and reticulocyte indices to peroral iron medication.// Clin. Chem. Lab. Med. 2001.- V 39. Special Supplement pp. Sl-S 448. — P. 279.
  98. Kurtzman G., Frickhofen N., Kimball J. Pure red cell aplasia of 10 years duration due to persistent parvovirus В19 infection and its cure with immunoglobulin therapy //New England Journal of Medicine.- 1989.-Vol.321.-P.519.
  99. Kurtzman G., Ozava K., Cohen B. Bone marrow failure due to chronic B19 parvovirus infection //New England Journal of Medicine.- 1987.-Vol.317.-P.287.
  100. Lakomek M., Schroter W., Maeyer G., Winkler H. On the diagnosis of erythrocyte enzyme defects in the presence of high reticulocyte counts // British Journal of Haematology.- 1989.- Vol.72.- P.445−451.
  101. Lee L.G., Chen C-H., Chiu L.A. Thiazole Orange: A new dye for reticulocyte analysis //Cytometry.- 1986.- Vol.7.- P.508−517.
  102. Lessin L.S., Bessis M. Morphology of the eiythron.- // Hematology /Williams, W.J., Beutler, E., Erslev, A.J., Rundles, R.W.- McGraw Hill, 1972.- P.62−93.
  103. Levis S.M., Garvey В J., Rovan R.M. et al Evaluation of Sysmex R1000 automated reticulocyte analyzer //Department of Health, NHS Procurement Directorate.- London, 1990.
  104. Lofsness K.G., Kohnke M.L., Geier N. A, Evaluation of automated reticulocyte counts and their reliability in the presence of Howell-Jolly bodies //American Journal of Clinical Pathology.- 1994.- Vol. 101.- P.85−90.
  105. Lohmann R.C., Crawford L.N., Wood D.E. Proficiency testing in reticulocyte counting //Clinical and aalaboratory Haematology.-1994.- Vol.16.- P.57−64.
  106. London I.M. Metabolism of the mammalian erythrocyte //Bulletin of the New York Academy of Medicine.-1960.- Vol.36.- P.79−96.
  107. Losek /., Hellmich Т., Hoffman G. Diagnostic value of anemia, red blood cell morphology, and reticulocyte count for sickle cell disease //Annals of Emergency Medicine 1992.- Vol.21.- P.915−918.
  108. Ludwig H., Fritz, E., Kotzmann H., Rocker P., Gisslinger H., В am as U. Erythropoietin treatment of anaemia associated with multiple myeloma. // New England Journal of Medicine.- 1989.-Vol.322.-P. 1693.
  109. Major A., Bauer C., Breymann C., Huch A, Huch R.I. Rherythropoietin stimulates immature reticulocyte release in man // British Journal of Haematology.- 1994.- Vol.87.- P.605−608.
  110. Makler M.T., Lee L.G., Recktenwald D. Thiazole orange. A new dye for Plasmodium species analysis //Cytometry.- 1987.- Vol.8.-P.568−570.
  111. Means R., Olsen N., Krantz S. et al. Treatment of the anaemia of rheumatoid arthritis with recombinant human erythropoietin: Clinical and in vitro studies //Arthritis and Rheumatism.- 1989.-Vol.32.- P.638−642.
  112. Metzger D.K., Charache S. Flow cytometric reticulocyte counting with thioflavin T in a clinical hematology laboratory. // Archives of Pathology and Laboratory Medicine.- 1987.- Vol.111.- P.540.
  113. Miale J.B. Laboratory Medicine Hematology //CV Mosby Co.-1977.- St Louis. Fifth Edition.- P.561−562.
  114. MinotG.R., CohnRJ., Murphy W.P., Lamon H.JI. Treatment of pernicious anemias with liver extract: Effects upon the production of immature and mature red cells //American Journal of Medical Science. 1928.-Vol.175.- P.599−621.
  115. NCCLS Method for reticulocyte counting- proposed standard // NCCLS Document HI6-P.- Villanova, Pennsylvania, 1985.
  116. NCCLS Reticulocyte counting by flow cytometry- proposed guideline // NCCLS Document H44-P Villanova, Pennsylvania, 1993.
  117. NKF-DOQI Work Group. NKF-DOQI clinical practice guidelines for the treatment of anemia of chronic renal failure //Am. J. Kidney Dis.- 1997.- Vol.30, Suppl. 3.- P. 192 240.
  118. Nobes P.R., Carter A.B. Reticulocyte counting using flow cytometry. // Journal of Clinical Pathology.- 1990- Vol.43.-P.675=678.
  119. Osgood E.E., Baker R.L., Wilhelm MM. Reticulocyte counts in healthy children // American Journal of Clinical Pathology.- 1934.-Vol.4.- P.292−296.
  120. Patel V.P., Ciechanover A., Piatt O., Lodish H.F. Mammalian reticulocyte lose adhesion to fibronectin during maturation to erythrocytes // Proceedings of the National Academy of Scyences USA.- 1985.- Vol.82.-P.440−459.
  121. Paterakis G.S., Lykopoulou L., Papassotirou J., Stamulakatou A., Kattamis C., Loukopoulos D. Flow-cytometric analysis of reticulocytes in normal cord blood //Acta Haematologia.- 1993.-Vol.90.- P. 182−185.
  122. Peebles D.A., Hochberg A., Clarke T.D. Analysis of manual reticulocyte counting //American Journal of Clinical Pathology.-1981.-Vol.76,-P.713−717.
  123. Paterakis G., Voskaidou E., Loutradim A., Rombosm J., Loukopoulos D. Reticulocyte counting in thalassemic and other conditions with the R-1000 Sysmex analyzer //Annals of Hematology.- 1994.- Vol.63.-P.218−222.
  124. Persons E.L. Studies on red blood cell diameter. III. The relativediameter of immature (reticulocytes), and adult red blood cells in health and anemia, especially in pernicious anemia //Journal of Clinical Investigation.- 1929.- Vol.7.-P.615−629.
  125. Robertson O.H. The effects of experimental plethora on blood production //Journal of Experimental Medicine.- 1917.- Vol26.-P.221- 238.
  126. Schimenti K.J., Lacerna K, Wamble A. et al. Reticulocyte quantification by flow cytometry, image analysis, and manual counting. // Cytometry.- 1992.- Vol.13.- P.853−862.
  127. Seip M. Reticulocyte studies: The liberation of red blood corpuscles from the bone marrow into the peripheral blood and the production of erythrocytes elucidated by reticulocyte investigations //Acta Medica Scandinavica.-1953.- P.282.
  128. Seligman P.A., Allen R.H., Kirchanski S.J., Natale P.J. Automated analysis of reticulocytes using fluorescence staining with both acridine orange and an immunofluorescence technique //American Journal of Hematology.- 1983.- Vol.14.- P.57−66.
  129. Sher G.D., Pinkerton P.H., All M.A.Q., Senn J.S. Myelodysplastic syndrome with prolonged reticulocyte survival mimicking hemolytic disease//American Journal of Clinical Pathology.- 1994.-Vol. 101.-P.149−153.
  130. Simpson C.F., Kling J.M. The mechanism of mitochondrial extrusion from phenylhydrazine-mduced reticulocytes in the circulating blood//Journal of Cell Biology.- 1968.- Vol.36.-P. 103.
  131. Subota V., Mandic-Radic S., Nicolajevic R., Lazarevic N. Reticulocyte cellular indices as an early// Clin. Chem. Lab. Med. -2001.- V 39. Special Supplement pp. SI- S 448. P. 270.
  132. Takubo Т., Kitano K., Ohio Y., Ikemoto Т., Liluchi Т., Inai S. The usefulness of the R-1000 automated reticulocyte counter in a clinical hospital laboratory //European Journal of Haematology.-1989, — Vol.43.-P.88−89.
  133. Tanke H.J., van Vianer. Changes in erytliropoiesis due to radiation or chemotherapy as studied by flow cytometric determination of peripheral blood reticulocytes // Histochemistry.- 1986.- Vol.84.- P.544−548.
  134. P., Humbert J., Mahassen P., Fournier В., Неппу J. Reticulocytes: Biological variations and reference limits // European Journal ofHaematology.- 1994.- Vol.53.-P.I 1−15.
  135. Tatsumi N., Tsuda I., Kojima K., Niri M., Setoguchi K. An automated reticulocyte counting method. Preliminary observations // Medical Laboratory Sciences- 1989.- Vol.46.-P.157−160.
  136. Tichelli A., Gratwohl A., Driessen A. et al. Evaluation of the Sysmex R-1000. An automated reticulocyte analyzer //American Journal of Clinical Pathology.- 1990.- Vol.93.- P.70−78.
  137. Tsuda L, Tatsumi N. Maturity of reticulocytes in various hematological disorders // European Journal of Haematology.1989.-Vol.43.- P.251−254.
  138. Valentine W.N. Hemolytic anemia and inborn errors of metabolism. -1979 // Blood.- Vol.14.- P.258−267.
  139. Vander J.B., Harris C.A., Ellis S.R. Reticulocyte counts by means of fluorescence microscopy // Journal of Laboratory and Clinical Medicine.- 1963.- Vol.62.- P.132.
  140. Watanabe K., Kawai Y., Takeuchi K., Shimizu N., Ikeda Y., Houwen B. Reticulocyte maturity as an indicator for estimating qualitative abnormality of eiythropoiesis //Journal of Clinical Pathology. 1994. — Vol.47.- P.736−739.
  141. Wells D., Diagneault-Creech C., Simrell C. Effect of iron status on reticulocyte mean channel fluorescence //American Journal of Clinical Pathology. 1992.- Vol.97.- P. 130−134.
  142. Wernli M., Tichelli A., von Planta M., Gratwohl A., Speck B. Flow cytometric monitoring of parasitaemia during treatment of severe malaria by exchange transfusion // European Journal of Haematology.- 1991.- Vol.46.- P.121−123.
  143. Wintrobe MM. Clinical Haematology //Published by Henry Kimpton.-1961.-P.92.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!