Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Изучение возможности использования компактина в качестве биопестицида против фитопатогенов и получение высокопродуктивных штаммов гриба Penicillium citrinum-продуцента компактина

Диссертация: Изучение возможности использования компактина в качестве биопестицида против фитопатогенов и получение высокопродуктивных штаммов гриба Penicillium citrinum-продуцента компактина
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Представленные в данной работе исследования показывают, что обработка клубней картофеля компактином — природным ингибитором биосинтеза стеринов, в концентрации выше 0,1% позволяет существенно замедлить степень развития фитофтороза. Компактин обладает фунгицидными свойствами по отношению к грибам St. nodorum, M. grisea и С. cucumerinum in vitro, а именно в концентрации 0,1% полностью угнетает… Читать ещё >

Содержание

  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Компактен — природный ингибитор биосинтеза холестерина
      • 1. 1. 1. Открытие первых представителей класса статинов — компактна и ловастатина
      • 1. 1. 2. Физико-химические свойства компактна
    • 1. 2. Биосинтез стеринов
    • 1. 3. Биосинтетическая активность культур грибов и способы ее повышения
      • 1. 3. 1. Фазы роста грибов
      • 1. 3. 2. Питание и культивирование грибов
    • 1. 4. Мутагенез — метод получения высокопродуктивных штаммов
      • 1. 4. 1. Получение мутантов
      • 1. 4. 2. Методы отбора мутантов с повышенным уровнем продукции
  • Глава 2. Материалы и методы
    • 2. 1. Материалы
    • 2. 2. Методы
  • РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
  • Глава 3. Изучение влияния компактина на фитопатогены
    • 3. 1. Влияние предпосадочной обработки клубней картофеля компактном на развитие фитофтороза
    • 3. 2. Изучение фунгицидных свойств компактна
    • 3. 3. Влияние компактна на прорастание спор гриба Stagonospora nodorum
    • 3. 4. Изучение действия компактина на устойчивость пшеницы к возбудителю септориоза (St. nodorum)
  • Изучение действия компактина на устойчивость пшеницы к
    • 15. ' 58 возбудителю ржавчины (Puccinia graminis)
      • 3. 6. Влияние компактина на устойчивость табака к вирусу табачной мозаики при искусственном заражении
      • 3. 7. Изучение действия компактина на устойчивость к грибу Alternaria longipes
      • 3. 8. Оценка действия компактина на устойчивость картофеля к Х-вирусу при искусственном заражении
  • Глава 4. Повышение активности гриба Penicillium citrinum — продуцента компактина методом последовательного индуцированного мутагенеза и оптимизация условий культивирования
    • 4. 1. Оптимизация ферментационной среды для мутанта
    • 4. 2. Оптимизация условий культивирования мутанта
    • 4. 3. Определение кривой выживаемости клеток мицелия гриба Р. citrinum в зависимости от дозы мутагена
    • 4. 4. Влияние концентраций спор гриба в посевном материале на биосинтез компактина штаммом
    • 4. 5. Сравнение продуктивности штаммов 18−12, 20−01 и 21−34 на исходной и оптимизированной средах
    • 4. 6. Оптимизация агаризованной среды
    • 4. 7. Сравнение методик экстракции с помощью этилацета и с использованием ацетона

Изучение возможности использования компактина в качестве биопестицида против фитопатогенов и получение высокопродуктивных штаммов гриба Penicillium citrinum-продуцента компактина (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Современное сельское хозяйство характеризуется высокой степенью использования пестицидов. На сегодняшний день экологические нарушения, вызванные применением химических средств защиты растений, настолько велики, что все более острым становится вопрос о снижении количества используемых синтетических пестицидов. В качестве альтернативы или дополнения к химическим препаратам выступают биологические методы борьбы с фитопатогенными организмами (Груздев и др., 1980; Лутова и др. 1990). Одним из направлений биологической защиты растений, является использование микроорганизмов или продуктов их жизнедеятельности в качестве биопестицидов.

Изучение роли растительных стеринов для насекомых и оомицетов открыло путь к получению новых препаратов для борьбы с патогенами и вредителями, основанных на изменении уровня биосинтеза стеринов.

Насекомые, нематоды и оомицеты неспособны к самостоятельному синтезу стеринов. Эти организмы извлекают стерины из тканей растения-хозяина (Инге-Вечтомов, 1997). Снижение содержания стеринов в растительных тканях приводит к повышению устойчивости растений к этим фитостеринзависимым организмам (Лутова и др., 1998).

Насекомые-фитофаги способны конвертировать растительные стерины в холестерин и другие стероиды, включая гормон линьки экдизон и экдистероиды. Отдельные реакции этих превращений высокоспецифичны для разных видов насекомых. Было показано, что снижение стеринов в пище оказывало негативное воздействие на насекомых, чье развитие зависит от фитостеринов (Ходжайова и др., 2000).

Нормальный рост и развитие оомицетов зависит от типа стеринов, так, наиболее эффективным индуктором споруляции у РИу (орЫИога является р-ситостерин. Было показано, что снижение содержания стеринов в растениях картофеля увеличивает устойчивость растений к Рк /и/еу/алу, уменьшение содержания стеринов у растений снижает их питательную ценность для оомицетов (Ходжайова и др., 2000).

Тесная зависимость жизнеспособных насекомых и оомицетов от содержания стеринов в растениях является для них «узким местом». Нарушив эту зависимость, по образцу, происходящему в природе, можно ограничить возможности насекомых к размножению, не стремясь к тотальному уничтожению вида.

Некоторые вторичные метаболиты микробного происхождения обладают способностью к подавлению биосинтеза стерина. Среди них есть соединения, которые относятся к классу статинов. В результате действия статинов блокируется связывание фермента 3-окси-З-метилглутарил-КоА-редуктазы (ОМГКоА-редуктазы), катализирующего превращение ОМГКоА в мевалоновую кислоту, которая является предшественником стеринов (Endo et al., 1976). Компактен — природный ингибитор биосинтеза стеринов. Продуцентом компактна является несовершенный гриб Penicillium citrinum (Thom).

Обработка клубней картофеля приводила к защитному эффекту против фитопаразитических нематод (Romanenko et al., 2002).

Перечисленные факты дают основания для начала исследований влияния компактина на фитопатогены и изучения возможности разработки на основе компактина новых средств защиты растений от болезней.

Актуальность выбранного направления исследований обусловлена необходимостью разработки новых биопестицидов и создания соответствующих новых технологий их производства. Известные до сих пор технологии производства компактина слишком дорогостоящие, поскольку они разработаны для производства фармакологических препаратов. Для производства же средств защиты растений необходимо разработать более простые и дешевые технологии. Одним из путей снижения себестоимости целевого продукта является увеличение продуктивности штаммов-продуцентов при сохранении общих производственных затрат. В этой связи было актуально повысить продуктивность штамма гриба P. citrinum путем генетических изменений и оптимизации процессов ферментации.

Цели и задачи исследований. Целью данной работы было изучение влияния компактна на различные фитопатогены. А так же была поставлена цель существенного повышения продуктивности штаммов гриба P. citrinum — продуцентов компактина и разработка оптимальной методики глубинного культивирования вновь полученных мутантов-суперпродуцентов.

Основные задачи:

1. Изучение защитных свойств компактна с целью оценки возможности использования его для защиты растений от фитопатогенов.

2. Получение новых высокопродуктивных штаммов гриба P. citrinum методом индуцированного мутагенеза.

3. Оптимизация условий культивирования полученных мутантных штаммов Р. citrinum на агаризованной питательной среде и в жидкой культуре.

Научная новизна исследований.

1. Впервые показаны защитные свойства компактина против грибных фитопатогенов.

2. Впервые показана способность компактна ингибировать у грибов биосинтез меланина.

3. Впервые показана антивирусная активность компактна в системах табак — вирус табачной мозаики (ВТМ), картофель — Х-вирус картофеля.

4. Впервые получен высокопродуктивный спорообразующий штамм гриба Penicillium citrinum, продуцирующий около 15 г/л компактна при глубинном культивировании в колбах.

5. Подобрана оптимальная питательная среда для глубинного культивирования нового высокопродуктивного мутанта.

Практическая значимость работы.

1. Полученные в ходе работы результаты могут быть использованы при создании фунгицидных препаратов на основе компактина для защиты растений против Stagonospora nodorum, Magnaporthe grisea, Cladosporium cucumerinum, Puccinia graminis и Alternaria longipes, а также против оомицета Phytophthora infestans. Показанные меланинингибирующие свойства компактна позволяют предположить что, полученные на основе компактина препараты будут обладать помимо контактного фунгицидного действия способностью подавлять патогенность грибов путем ингибирования меланиногенеза.

2. Впервые показанная антивирусная активность компактна открывает возможность разработки вирулицидов против фитовирусов.

3. Полученный высокопродуктивный спорулирующий штамм гриба Р. citrinum, оптимизация питательной среды и условий культивирования для этого штамма послужили основой для разработали полупромышленной технологии производства компактна.

Апробация работы и публикация результатов исследований.

Материалы диссертации были представлены: на II и III Московских международных конгрессах «Биотехнология: состояние и перспективы развития», 10−14 ноября 2003 г. и 14−18 марта 2005 г. соответственнона Третьей международной конференции из серии «Наука и бизнес», «Международное сотрудничество в биотехнологии: ожидания и реальность», 19−21 июня 2006 г в Пущино.

По материалам диссертации опубликовано 7 работ.

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной часта, включающей описание материалов, методов и результатов исследований, вьюодов,.

ВЫВОДЫ:

1. Впервые показаны фунгицидные свойства компактна по отношению к грибам Stagonospora nodorum, Magnaporthe grisea, Ciadosporium cucumerinum, Puccinia graminis и Alternaria longipes, выраженные в подавлении роста мицелия этих грибов и прорастания спор.

2. Впервые показаны меланинингибирующие свойства компактна по отношению к Magnaporthe grisea и Alternaria longipes.

3. При обработке клубней картофеля было показано защитное действие компактна против оомицета Phytophthora infestons.

4. Впервые выявлена антивирусная активность компактна против ВТМ и ХВК.

5. Впервые получен высокопродуктивный спорообразующий штамм гриба Penicillium citrinum, способный синтезировать 15 г/л компактна при глубинном культивировании.

6. Подобраны условия его культивирования в качалочных колбах, способствующие увеличению уровня биосинтеза компактна:

• повышена концентрация сахарозы в питательной среде с 200 до 250 г/л;

• повышена концентрация нитратного азота с 2 до 5 г/л;

• добавлен дрожжевой экстракт в концентрации 1 г/л;

• подобрана оптимальная концентрация спор в посевном материале (106/мл).

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Украинцева С. Н., Воинова Т. М. Оптимизация условий культивирования мутанта 18−12 гриба Penicillium citrinum — продуцента компактна. Сборник тезисов участников II Московского международного Конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития», ч. 1, Москва, 2003. С.272−273.

2. Ukraintseva S.N., Voinova Т.М., Dzhavakhiya V.G. Penicillium citrinum strain improvement for Compactin production by induced-mutagenesis and optimisation of obtained mutant cultivation conditions. G.E. Zaikov et al. (Ed.). Biotechnology Titles from Nova Science Publishers, Inc. Biotechnology and Medicine. New York, 2004. P.71−78.

3. Украинцева C.H., Воинова T.M., Джавахия В. Г. Получение новых высокопродуктивных мутантов гриба Penicillium citrinum — продуцентов компактна и оптимизация условий их культивирования". Сборник тезисов участников III Московского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития», ч.1, Москва, 2005. С. 83.

4. Ukraintseva S.N., Voinova Т.М., Dzhavakhiya V.G. Obtaining the highly productive mutants Penicillium citrinum producing compactin and optimization of fermentation process in shaken flasks. A.M. Egorov and Gennady Zaikov (Ed.). Biotechnology titles from Nova Science Publishers, Inc. Biotechnology in Biology and Medicine. New York, 2006. ISBN: 1−60 021−092−9. P.233−241.

5. Украинцева C.H., Воинова T.M., Джавахия В. Г. Повышение активности гриба Penicillium citrinum — продуцента компактна, методом индуцированного мутагенеза и оптимизация условий культивирования высокопродуктивных штаммов. Материалы 3-ей международной конференции «Наука и бизнес», Пущино. 19−21 июня 2006, с.72−76.

6. Украинцева С. Н., Воинова Т. М., Джавахия В. Г. Повьппение биосинтетической активности гриба Penicillium citrinum — продуцента компактина методом последовательного индуцированного мутагенеза и оптимизации условий культивирования. Прикладная биохимия и микробиология (в печати, будет опубликована в № 2,2008 г.).

7. Украинцева С. Н., Приданников М. В., Джавахия В. Г. Компактин — потенциальный биопестицид. Защита и карантин растений (в печати, будет опубликована в 12 номере 2007 года).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Представленные в данной работе исследования показывают, что обработка клубней картофеля компактином — природным ингибитором биосинтеза стеринов, в концентрации выше 0,1% позволяет существенно замедлить степень развития фитофтороза. Компактин обладает фунгицидными свойствами по отношению к грибам St. nodorum, M. grisea и С. cucumerinum in vitro, а именно в концентрации 0,1% полностью угнетает их рост. Впервые показаны меланинингибирующие свойства компактна для М. grisea и А. longipes. При инкубировании спор гриба St. nodorum в растворах компактна в концентрациях выше 0,01% наблюдалось полное ингибирование прорастания спор. Компактин в концентрации 0,01% обладал защитным эффектом при развитии септориоза и ржавчины у пшеницы, а в концентрации выше 0,1% - альтернариоза у табака.

Впервые показана антивирусная активность компактна в системах растение-хозяин: табак — вирус табачной мозаики, картофель — Х-вирус картофеля.

Данные факты являются достаточным обоснованием для продолжения изучения свойств компактна с целью создания на его основе препаратов против вирусов и фитопатогенов.

В результате ступенчатого мутагенеза с использованием УФ-облучений удалось получить мутанты гриба Penicillium citrinum, способные синтезировать компактин в повышенных концентрациях по сравнению с исходным аспорогенным штаммом. В результате оптимизации была подобрана среда с увеличенным содержанием источников азота и углерода, позволившая повысить уровень биосинтеза компактна. На оптимизированной среде впервые был выделен мутант 21−34 гриба P. citrinum, образующий споры, что позволило стандартизировать содержание посевного материала, и способный синтезировать 15 г/л компактна при глубинном культивировании в колбах. Таким образом, удалось повысить уровень биосинтеза компактна грибом P. citrinum с 8 до 15 г/л.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Аркадьева 3. А., Безбородов А. М., Бдохина И. Н. и др. Промышленная микробиология, 1989. 688 с.
  2. Д.М. //Consilium-Medicum. 2001. — 10.
  3. A.M. Биохимические основы микробного синтеза. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984. — 304 с.
  4. М.Е. Биотехнология микробиологического синтеза. Рига, 1980.
  5. М.Е. Введение в биотехнологию. М.: Пищевая промышленность, 1978.232 с.
  6. . Препаративная жидкостная хроматография//Пер. с англ. М.: Мир, 1990.-360 с.
  7. В.И. Биологически активные вещества микроскопическх грибов и их применение. К.: Наук. Думка, 1965. — 265 с.
  8. В.И. Основы общей микологии. К.: Выща шк. Головное изд-во, 1989. — 392 с.
  9. В.В., Кантере В. М. Оптимизация периодических процессов микробиологического синтеза. М.: Наука, 1985. — 292 с.
  10. Н.И., Давыдова М. А., Щербакова Л. А., Озерецковская О. Л., Фитостерины как фактор, предохраняющий возбудитель фитофтороза картофеля от действия фитоалексинов. //ДАН, т. 235, № 1,1977. С. 216−219.
  11. Н. И., Щербакова Л. А., Чаленко Г. И., Озерецковская О. Л., Метлицкий Л. В. ß--ситостерин фактор, необходимый для роста и развития возбудителя фитофтороза// Прикладная биохимия и микробиология. — 1979. — Т. XV. — Вып. 4. -С. 485−493.
  12. У.Э., Кристапсонс М. Ж., Былинкина Е. С. Культивирование микроорганизмов. М.: Пищевая промышленность, 1980. — 232 с.
  13. И.М. Технология ферментных препаратов. М.: Пищевая промышленность, 1975. — 392 с.
  14. Г. С., Зинченко В. А., Калинин В. А., Словцов Р. И. Химическая защита растений. 2-е изд., перераб. и доп., 1980 — с.428−437.
  15. Г. В. Генетика. Изд.2-е, перераб. и доп. М.: Колос, 1977. — с.196−233.
  16. П.Х., Назаренко В. А., Николенко С. А. Дислипопротеидемии: клиника, диагностика, лечение //Учебное пособие. Российский государственный универитет. — М., 2000.
  17. Ю.Т., Шнырева A.B., Сергеев А. Ю. Введение в генетику грибов: Учеб. Пособие для студ. высш. учеб. заведений / М.: Издательский центр «Академия», 2005.-304 с.
  18. А.Н., Фомичев Ю. К. Введение в биотехнологию: Курс лекций:/ Мн., БГУ, 2002.-104.
  19. Н.С., Баранова H.A., Крейер В. Г. Антибиотики и химиотерапия. 1999. -№ 5.-С.38−44.
  20. А. И., Арасимович В. В., Ярош Н. П., Перуанский Ю. В., Луковникова Г. А., Иконникова М. И. Методы биохимического исследования растений, 1987. 430 с.
  21. Н.И., Гусятинер М. М. Методы селекции и свойства штаммов микроорганизмов продуцентов аминокислот. Обзор. М., 1985.
  22. Инге-Вечмонтов С. Г. Метаболизм стеринов и защита растений. // Сороковский образовательный журнал. 1997. — № 11. — С. 16−21.
  23. В.М. Теоретические основы технологии микробиологических производств, 1990.-271 с.
  24. Г. И., Безбородое А. М., Введение в биотехнологию, 2002. 284 с.
  25. Г. К., Дунце М. Э. Сырье и питательные субстраты для промышленной биотехнологии. Рига: Зинатне, 1986. -156 с.
  26. Л.А., Ходжайова Л. Т. Молекулярно-генетические аспекты устойчивости высших растений к вредителям сельского хозяйства// Генетика. 1998. Т. 34. — № 6. С. 719−729.
  27. В. Е. Научные основы микробиологической технологии, 1985. 224 с.
  28. Л.В., Озерецковская О. Л., и др.// ДАН. Т. 227. — № 1, 1976.
  29. И.И., Захарова Т. И. Математические методы в фитопатологии, 1977. -С.18−27.
  30. М.С., Складнев А. А., Котов В. Б. Общая технология микробиологических производств. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. — 263 с.
  31. В.Ф. Сельскохозяйственная фитопатология. М.: Колос, 1974. 559 с.
  32. С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М., 1978.
  33. Т.А., Васюкова Н. И., Давыдова М. А. Влияние дефицита стеринов на спороношение Phytophthora infestons (Mont) de Вагу // Прикладная биохимия и микробиология. -1977. Т. 13. — Вып. 6. — с. 907−913.
  34. Г. В., Санина A.A., Супрун Л. М., Курахтанова Т. И., Гогаева Т. И., Мепаришвили С. У., Анциферова Л. В., Кузнецов Н. С., Игнатов А.Н., Кузьмичев
  35. A.A. Методы оценки устойчивости селекционного материала и сортов пшеницы к септориозу. М. -1989. — 44 С.
  36. РАСХН ГНУ ВНИИ картофельного хозяйства им А. Г. Лорха//Инстркуция по применению иммуноферментного диагностического набора для определения вирусов картофеля. Коренево, 2006.
  37. С. Е., Виноградова А. Д. Методы практической биохимии, 1978. 268 с.
  38. Г. К., Головлева Л. А. Использование микроорганизмов в биологическом синтезе. М., 1976.
  39. Ю.В. Статины новый класс препаратов для лечения гиперлипидемийУ/журнал Провизор. -1998. — июнь. — 09.
  40. Е.Л., Ициксон Л. Б., Брауде Е. В. Практическая Высокоэффективная Жидкостная хроматография, М. 1986.
  41. К.В., Тушишвили Л. Ш., Пасешниченко В. А. Содержание и состав стеринов в листьях цитрусовых растений и их связь с морозоустойчивостью.// Физиология растений. -1989. Т. 36. — Вып.6 — Стр.1192−1198.
  42. А. В. Ингибиторы ГМГ-КоА-редуктазы при вторичной профилактике атеросклероза: 30 лет спустя. // Consilium medicum. 2005. — N 11. — С. 896−903.
  43. A.B. Обоснование увеличения доз статинов в клинической практике. Терапевтический архив, 2001. № 4. — С. 76−80.
  44. Э. Биохимия стероидов. М.: Мир, 1972. -175 стр.
  45. Л.Т., Левашина Е. А., Усольцева М. Ю., Бондаренко Л. В., Лутова Л. А. Изменение содержания растительных стеринов как биологической борьбы с фитостерин-зависимыми организмами.//Генная инженерия и экология. 2000. -№ 1.-С. 124−128.
  46. О.П., Шевченко А. О. Статины ингибиторы ГМГ-КоА-редуктазы. М.: Реафарм, 2003.
  47. А.А. Основы микологии. М.: Изд-во колх.-совх. лит., 1933. — 260 с.
  48. Allard Н.А. The mosaic disease of tobacco // USDA Bull. -1914. P. 40.
  49. Abstract book of the 7th International Symposium on Drugs Affecting Lipid Metabolism. The Lorenzini Foundation, 1980. May 28−31.
  50. Auerbach C. Mutagenesis by ultraviolet and visible light II and III. //In: Auerbach C., editorV/Mutation research, Problems, results and perspective. London: Chapman and Hall, 1976.- P. 173−217.
  51. Bach Thomas J. Hydroxymethylglutaryl-CoA reductase, a key enzyme in phytosterol synthesis? //Lipids. -1986. Vol. 21. — № 1. — P. 82−88.
  52. Basson M.E., Thorsness M., Rine J. Saccharomyces cerevisiae contains two functional genes encoding 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase. //Proc Natl Acad Sci USA. 1986. — 83. — P. 5563−5567.
  53. Brown M.S., Goldstein J.L. A tribute to Akira Endo, discoverer of a «Penicillin» for cholesterol.//Athersclerosis. 2004. — 5(Suppl.). — P. 13−16.
  54. Brown A.G., Smale T.C., King R. et al. //J. Chem. Soc. Perkin I. -1976. P. 1165−1170.
  55. Brown D.E., Zainudeen M.A. Effect of inoculum size on the aeration pattern of batch cultures of a fungal microorganism.// Biotecnol. Bioeng. -1978. 20. P.1045−1061.
  56. Butler M.J., Day A.W., Henson J.M. and Money N.P. Pathogenic properties of fungal melanins. IIMycologia. 2001. — 93. — P. 1−8.
  57. Chakravarti R. and Sahai V. Optimization of compactin production in chemically defined production medium by Penicillium citrinum using statistical methods.//Process Biochemistry. 2002. — Vol. 38. — Issue 4. P. 481−486.
  58. Chappell J., Wolf F., Proulx J., Cuellar R., Saunders C. Is the reaction catalyzed by 3-hydroxy-3-methylgutaryl coenzyme A reductase a rate-limiting step for isoprenoid biosynthesis in plants? //Plant Physiol. -1995. 109. — P.1337−1343.
  59. Chung Kae-Jong. A new method for producing pravastatin precursor, ML-236B.// World Intellectual Property Organization: International Bureu- International Publication Number: WO 98/6 867- International Publication Date: 19 February 1998.
  60. Clark A.J. and Bloch Konard. The absence of sterol synthesis in insects. //Journal of Biological Chemistry.-1959.-Vol.234.-№ 10.-P. 2578−2582.
  61. Dhingra O.D., Sinclair J.B. Basic Plant Pathology Methods // CRC Press, Inc. Boca Raton, Florida 1986.
  62. Elliott C.G., Knight B.A.// Journal Sci. Food and Agriculture. -1969. P.406.
  63. Elliott C.G. Sterols and the production of oospores by Phytophthora cactorum. //Journal of General Microbiology. -1972. P. 321−327.
  64. Endo A United States Patent No.3,983,140- September, 28,1976.
  65. Endo A., Compactin (ML-236B) and related compounds as potential cholesterol-lowering agents that inhibit HMG-CoA reductase.// J. Med. Chem. 1985. — 28. — P. 1401−1425.
  66. Endo A. Monacolin K, a new hypoeholesterolemic agent that specifically inhibits 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase. //Journal of antibiotics. 1980. — V. 33.- No.3.-P. 334−336.
  67. Endo A. The discovery and development of HMG-CoA reductase inhibitors.// Atherosclerosis Supplements. 2004. — 5. — P. 67−80.
  68. Endo A. The discovery and development of HMG-CoA reductase inhibitors. IIJ. Lipid Res. -1992. 33. P. 1569 -1582.
  69. Endo A., Discovery and development of the strains, in: Statins The HMG-CoA Reductase Inhibitors in Perspective.// Martin Dunitz, London. 2000. — P. 35−47.
  70. Endo A., Kuroda M., Tanzawa K. Competitive inhibition of 3-hydroxy-3-methylglutaril coenzyme A reductase by ML-236A and ML-236B, fungal metabolites having hypocholesterolemic activity.//FEBS Lett. 1976.- 72. — P. 323−326.
  71. Endo A., Kuroda M., Tsujita Y. ML-236 A, ML-236B, and ML-236C, new inhibitors of cholesterogenesis produced by Penicillium citrinum. //J. Antibiot. (Japan). 1976. — P. 1346−1348.
  72. Endo A., Kuroda M., Terahara A., Tsujita Y., Tamura C. Physiologically active substances and fermentative process for the same.// United States Patent No. 4,049,495- September, 20, 1977.
  73. Endo A., Kuroda M. and Tsujita Y. ML -236B, ML -236C, new inhibitors of cholesterogenesis produced by Penicillium citrinum.// J. Antiiot. 1976. — 29. — P. 13 461 348.
  74. Goldstein J.L., Brown M.S. Regulation of the mevalonate pathway. //Nature. 1990. -341.-P.425−430.
  75. Gaw A., Packard C.J., Shepherd J. Statins: The HMG-CoA reductase inhibitors in perspective. 2004. — Second editon. — P. 262.
  76. Haskins R.H., Tulloch A.P. and Micetich R.G. Steroids and the stimulation of sexual reproduction of a species of Pythium. //Can. J. Microbiol. -1964. 10. — P. 187−195.
  77. Hata S., Takagishi H., Kouchi H. Variation in the content and composition of sreols in alfalfa seedings treated with compactin (ML-236B) and mevalonic acid. //Plant and Cell Physiol.- 1987.- 28.- № 4.-P. 709−714.
  78. Hendrix J.W. Influence of sterols on growth and reproduction of Pythium and Phytophthora spp. // Phytopathology. -1965. 55. — P. 790−797.
  79. Henson J.M., Butler M.J., Day A.W. The dark side of the mycelium: melanins of phytopathogenic fungi, Annu. Rev. Phytopathol., 1999,37:447−471.
  80. Hosobuchi M., Kurosawa K. and Yoshikawa H. Applicatioin of computer to monitoring and control of fermentation process: nicrobial conversion of ML-236B Na to pravastatin. // Biotechnology and Bioengineering. -1993. V. 42. — P. 815−820.
  81. Hosobuchi M, Ogawa К., Yoshikawa H. Morphology study in production of ML-236B, a precursor of pravastatin sodium, by Penicillium citrinum. II J. Ferment. Bioeng. 1993. — Vol.76.-P.470−475.
  82. Istvan Eva S. Structural mechanism for statin inhibition of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase. // American Heart Journal. December 2002. — Volume 144. -Issue 6. — Part 2. — P. S27-S32.
  83. Kaneko I., Hazama-Shimada Y., Endo A. Inhibitoiy effects on lipid metabolism in cultured cells of ML-236B, a potent inhibitor of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase.// Eur. J. Biochem. -1978. -87. P.313−321.
  84. Kuroda M., Tsujita Y., Tanzawa K., Kitano N., Endo A. Hypolipidemic effects in monkeys of ML-236B, a competitive inhibitor of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase. // Lipids. -1979. Vol.14. — P. 585−589.
  85. Manzoni M., Rollini N. Biosynthesis and biotechnological production of statins by filamentous fungi and application of these cholesterol-lowering drugs. // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. — 58. — 5. — P. 555−564.
  86. Merck and Co. (Rahway, NJ), The scientific search for an effective weapon against cholesterol.// Press Release. -1987. November.
  87. Metz B., Kossen N. W. F.: The growth of mold in the form of pellets. // Biotechnol. Bioeng. -1977. Vol. 19. — P. 781−799.
  88. Samuel G. Some experiments on inoculating methods with plant viruses, and on local lesions // Ann. Appl. Biol. 1931. — V. 18. — P. 494−507.
  89. Schlosser E., Gottlieb D. Microbiology, 1968. P.246.
  90. Serizawa N., Nakagawa K., Hamano K., Tsujita Y., Terehara A. and Kuwano H.//Journal of antibiotics. 1983. — V.36.- No.5.- P.604−607.
  91. Tisdale W.B., Wadkins R.F.//Phytopathology.-1931.-V.21.-P.641−660.
  92. Tsujita Y., Kuroda M., Tanzawa K., Kitano N., Endo A. Hypolipidemic effects in dogs of ML-236B, a competitive inhibitor of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase. // Atherosclerosis. 1979. — Vol.32. — P. 307−313.
  93. Wang Y., Chen Y., Chang W., Lin C., all of Hsinchu. Mutant strain of Penicillium citrinum and use thereof for preparation of compactin. // United States Patent No. 6,323,021 Bl- November 27,2001.
  94. Weete J.D. Sterols of the fungi: distribution and biosynthesis. // Phytochemistry, 1973. Vol.12.-P. 1843−1864.108. www.hplc.ru
  95. Yamamoto A., Endo A., Kitano Y. Et al., Jpn. //J. Med. -1978. 17. — P. 230−239.
  96. Yamamoto A., Sudo H., Endo A. Therapeutic effects of ML-236B in primary hypercholesterolemia. // Atherosclerosis. -1980. P. 259−266.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!