Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Влияние серотонина на свойства возбудителя чумы, индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток

Диссертация: Влияние серотонина на свойства возбудителя чумы, индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Исследования проведены в рамках плановых НИР: 006−3−01 «Разработка и усовершенствование унифицированных методов оценки безопасности вакцинирующих иммунобиологических препаратов против особо опасных инфекций» (№ госрегистрации 01.200.11 150) — 019−3−03 «Изучение взаимодействия чумного микроба с клетками крови в модельных системах in vitro» (№ госрегистрации 01.2.306 526) — НИР «Изучение роли… Читать ещё >

Содержание

  • СПИСОК ПРИНЯТЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • ГЛАВА 1. БИОГЕННЫЕ АМИНЫ (НЕЙРОГОРМОНЫ) И ИХ РОЛЬ В 17 МЕХАНИЗМЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРО- И ЭУКАРИОТ
    • 1. 1. Роль биогенных аминов в регуляции жизнедеятельности 17 прокариот
    • 1. 2. Биогенные амины в иммунопатогенезе инфекционных 29 болезней
    • 1. 3. Модулирующее действие биогенного амина серотонина на 35 процессы формирования адаптивного иммунитета
  • СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Материалы
    • 2. 2. Методы исследования 44 2.2.1. Микробиологические методы исследования
      • 2. 2. 1. 1. Культивирование микроорганизмов в присутствии 44 серотонина
      • 2. 2. 1. 2. Приготовление бактериальных взвесей и смешанных 45 культур
      • 2. 2. 1. 3. Морфометрия бактериальных клеток, колоний чумного 46 микроба
      • 2. 2. 1. 4. Электрофоретическое разделение цельно-клеточных лизатов 47 исследуемых культур в полиакриламидном геле (SDS — PAGE)
      • 2. 2. 1. 5. Определение содержания ДНК в микробных клетках методом проточной цитометрии
      • 2. 2. 1. 6. Проточно-цитофлуориметрический мониторинг экспрессии 49 антигенов Y. pestis, детектируемых коммерческим препаратом иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих чумных адсорбированных
      • 2. 2. 2. Иммуносерологические методы исследования (РНГА, 50 РТНГА, ТИФА, иммуноблотгинг)
      • 2. 2. 3. Иммунологические методы
      • 2. 2. 3. 1. Выделение иммунекомпетентных клеток из крови и органов 51 биомоделей
      • 2. 2. 3. 2. Выделение суммарной фракции лейкоцитов из крови 52 человека и биомодельных животных
      • 2. 2. 3. 3. Определение апоптотических и пролиферирующих 52 эукариотических клеток
      • 2. 2. 3. 4. Цитофлуориметрический мониторинг состояния хроматина 54 и лизосомального аппарата лейкоцитов крови, клеток перитонеального экссудата
      • 2. 2. 3. 5. Определение напряженности иммунитета
      • 2. 2. 4. Статистические методы

      ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ СЕРОТОНИНА НА СКОРОСТЬ РОСТА, ПЕРЕРАСПРЕДЕЛЕНИЕ ПО КЛЕТОЧНОМУ ЦИКЛУ (СОДЕРЖАНИЕ ДНК), МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЧУМНОГО МИКРОБА В УСЛОВИЯХ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА ПЛОТНЫХ И ЖИДКИХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ

      3.1. Влияние серотонина на динамику роста, морфометрические 57 показатели Y. pestis EY НИИЭГ и его изогенных производных с различным плазмидным составом на плотных и жидких питательных средах в условиях культивирования при 28 °C и 37 °С

      3.2. Проточно-цитофлуориметрический мониторинг относительного 67 содержания ДНК в клетках Y. pestis EV НИИЭГ и его изогенных производных с различным плазмидным составом в условиях культивирования при 37 °C на питательных средах в присутствии серотонина

      3.3. Изучение возможности применения серотонина для выделения 73 чумного микроба бактериологическим методом из исследуемого материала, контаминированного посторонней микрофлорой

      ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ СЕРОТОНИНА НА ЭКСПРЕССИЮ ПОВЕРХНОСТНЫХ АНТИГЕНОВ И ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ БЕЛКОВ Y. PESTIS С РАЗЛИЧНЫМ ПЛАЗМИДНЫМ СОСТАВОМ

      4.1. Изучение влияния серотонина на экспрессию поверхностных 79 антигенов (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена) клетками Y. pestis ЕV НИИЭГ и его изогенного производного Y. pestis КМ216 (pPst+) в процессе культивирования в жидкой питательной среде

      4.2. Изучение влияния культивирования на питательных средах с 84 серотонином на электрофоретический профиль белков Y. pestis

      ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ СЕРОТОНИНА НА РАЗВИТИЕ ИНДУЦИРОВАННОГО ИЕРСИНИЯМИ АПОПТОЗА И ПРОЛИФЕРАЦИЮ ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ КЛЕТОК IN VITRO

      5.1. Изучение in vitro модулирующего действия серотонина на 91 развитие индуцированного Y. pestis апоптоза и пролиферацию лейкоцитов крови биомодели (мыши BALB/c)

      5.2. Изучение в модельной системе in vitro влияния серотонина на 93 развитие индуцированного Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica апоптоза и пролиферацию лейкоцитов крови человека

      ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ IN VIVO ВЛИЯНИЯ СЕРОТОНИНА НА

      ПРОЦЕССЫ ПРОЛИФЕРАЦИИ И АПОПТОЗА, РЕАКТИВНОСТЬ КЛЕТОК ИММУ, НО ФАГОЦИТАРНОЙ СИСТЕМЫ БИОМОДЕЛЕЙ В УСЛОВИЯХ ВАКЦИНАЦИИ Y. PESTIS ЕV НИИЭГ, КАПСУЛЬНЫМ АНТИГЕНОМ ЧУМНОГО МИКРОБА

      6.1. Изучение in vivo влияния серотонина на процессы 104 пролиферации и апоптоза эукариотических клеток в условиях вакцинации Y. pestis EV НИИЭГ

      6.2. Влияние серотонина на состояние ядерного хроматина и 108 лизосомального аппарата иммунокомпетентных клеток биомоделей в условиях иммунизации Г. pestis EV НИИЭГ

      6.3. Изучение влияния серотонина на состояние ядерного 112 хроматина и лизосомального аппарата лейкоцитов крови, клеток перитонеального экссудата экспериментальных животных в условиях иммунизации капсульным антигеном чумного микроба

Влияние серотонина на свойства возбудителя чумы, индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ.

Существование на территории России и многих стран мира природных очагов чумы, а также угроза применения возбудителя чумы в качестве агента биотерроризма диктуют необходимость углубленных исследований иммунопатогенеза чумной инфекции с целью создания современных, надежных средств и методов её- диагностики, лечения и профилактики [Онищенко Г. Г. и др., 2004, 2006; Clarke R.A., 1999, Richard J.L., Grimes D.E., 2008].

Инфекция является одной из форм взаимодействия микрои макроорганизма с нарушением биологического баланса в сторону усиления влияния микроорганизмов, начальные этапы механизма развития которой состоят из внедрения возбудителя, его размножения и распространения за пределы первичного очага, инициации и реализации защитных реакций организма хозяина, таких как фагоцитоз, воспаление, апоптоз, формирование адаптивного иммунитета [Зигангирова Н.А., Гинцбург A. JL, 2004; Медуницын Н. В., 2004; Симбирцев А. С., 2005].

До настоящего времени исследование фундаментальных и прикладных аспектов нейроэндокринной регуляции различных функций животных и человека в процессе адаптации к меняющимся условиям жизнедеятельности макроорганизма, в том числе в условиях инфекционного и вакцинального процесса, было направлено на изучение их роли и значимости в обеспечении функционирования жизненно важных систем многоклеточного организма, включая систему защиты от патогенов (естественный и адаптивный иммунитет). Вопрос о том, что патогенные микроорганизмы могут непосредственно реагировать на нейроэндокринное окружение организма хозяина и использовать для ускорения своего развития продуцируемые макроорганизмом в ходе защитной реакции биологически активные вещества (биогенные амины — нейромедиаторы, нейрогормоны) ранее практически не рассматривался.

В последние годы интенсифицировались исследования по изучению триггерных молекулярных механизмов взаимодействия патогена с организмом хозяина, в том числе возможности использования микроорганизмами эндогенных биологически активных веществ макроорганизма для ускорения собственного развития на начальных этапах инфекционного процесса. Формируется новое междисциплинарное направление — микробная эндокринология, изучающее фундаментальные и прикладные аспекты нейроэндокринной регуляции взаимодействия прои эукариот [Олескин А.В. и др., 2000; Стадников А. А. и др., 2002; Lyte М., 2004; Voigt W. et al., 2006].

Установлено, что бактерии имеют фрагменты молекул, аналогичные связывающим сайтам некоторых естественных физиологически активных веществ организма хозяина, таких как инсулин, гонадотропин, кальмодулин. Белки Escherichia coli и Yersinia enterocolitica перекрестно реагируют с тиреотропином. Выявлен стимулирующий эффект стрессорных гормонов на рост патогенных штаммов Е. coli и синтез адгезина К99, шига-подобных токсинов I и II, показана зависимость транскрипции генов, кодирующих секрецию III типа и синтез флагелл у энтерогеморрагичсских и энтеротоксигенных Е. coli от эпинефрина (адреналина) й норэпинефрина (норадреналина), синтезируемых в клетках хозяина [Пинчук JI.M., 1992; Lyte М. et al., 1997; Burton C.L. et al., 2002; Visidou I. et al., 2004; O’Donnell P.M. et al., 2006].

В этой связи, большой интерес представляет серотонин (5-окситриптамин), который принадлежит к группе биогенных аминов: азотистых оснований, возникающих в организме при декарбоксилировании аминокислот и обладающих чрезвычайно сильной активностью, благодаря высокой способности их к конформационным изменениям, к соединению с макромолекулами, к переносу электронов и протонов [Белжеларская С.Н., Саттон Ф., 2003].

Серотонин является нейромедиатором, медиатором воспаления и аллергических реакций, обладает выраженным иммуномодулирующим действием, является одним из компонентов сосудисто-тромбоцитарного гемостаза [СидоркинаА.Н. и др., 2005; Щуковская Т. Н., 2008]. В организме серотонин присутствует во всех иммунокомпетентных тканях, ЦНС, селезенке, печени, почках. В тромбоцитах серотонин накапливается при их прохождении по сосудам желудочно-кишечного тракта, в энтерохромафинных. клетках которого синтезируется [Стручко Г. Ю., 1997; Симоненков А. П., Федоров В. Д., 2002; Hellstrand К., Hermodsson S" 1987; Sternberg Е.М. et al., 1987; Kvetnoy I.M., 2002].

В отечественной и зарубежной литературе имеются сведения о взаимодействии серотонина с аппаратом клеточного деления, способности серотонина комплексировать с ДНК прои эукариот, с нуклеозидами и нуклеотидами, ингибировать процессы перекисного окисления липидов в клеточных мембранах, непосредственно взаимодействуя с перекисными радикалами [Бурлакова Е.Б. и др., 1992; Helene С. et al., 1971].

Установлено, что серотонин ускоряет рост культур Е. coli, Rhodospirillum rubrum, Candida guilliermondii, Streptococcus faecalis, вызывая сокращение лаг-фазы, стимулирует формирование биопленки у Е. coli и плодовых тел у миксобактерий [Страховская М.Г. и др., 1991, 1993; Олескин А. В. и др., 1998(6)]. Комбинация антибиотиков с психотропными препаратами — селективными ингибиторами транспорта серотонина через ионный канал, приводит к появлению чувствительности у полиантибиотикорезистентпых штаммов [Munoz-Bellido J.L. et al., 2000].

Как известно, особенностью течения инфекционного процесса при чуме является расстройство гемостаза, проявляющееся в виде диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС-синдрома), важное значение в развитии которого имеет агрегация тромбоцитов, активным инициатором которой является серотонин, а также продуцируемый чумным микробом активатор плазминогена (Pla protease), синтез которого детерминируется плазмидой пестициногенности. Активатор плазминогена является видоспецифическим антигеном, имеющим диагностическую значимость, а также специфическим поверхностным рецептором клеток чумного микроба к фибриногену [Дятлов И.А., Филиппов А. Ф., 1990; Понукалина Е. В., 1990; Захаров А. В., 1991; Кутырев В. В., 1992; Perry R.D., Fetherston J.D., 1997].

Интегральным показателем, характеризующим изменения эукариотических клеток под воздействием инфекционного агента является соотношение количества клеток на разных стадиях клеточного цикла, включая стадию их запрограммированной гибели (апоптоз). Активация процессов апоптоза происходит под действием факторов вирулентности патогенных микроорганизмов и приводит к элиминации ключевых, обладающих защитными функциями, клеток организма хозяина, таких как лимфоциты, моноциты, нейтрофилы [Weinrauch I.,.

Zychlinsky A., 1999; DeLeo F.R., Hinnebusch B.J., 2005; Marketon M.M. et al., 2005; Parrino S. et al., 2007]. Механизмы индукции апоптоза представителями рода Yersinia находятся на стадии исследования [Fields К., Straley S., 1999; Weinrauch Y. et al., 2002; Zhang Y., Bliska J.D., 2003]. He изучено in vitro и in vivo влияние биогенных аминов, в том числе серотонина, на развитие индуцированного Y. pestis и другими представителями рода Yersinia (Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis) апоптоза эукариотических клеток.

Также отсутствуют сведения о возможном влиянии серотонина, присутствующего в месте проникновения чумного микроба в организм хозяина, на размножение клеток Y. pestis, перераспределение по клеточному циклу (относительное содержание ДНК), профиль синтезируемых им белков, экспрессию диагностически значимых поверхностных антигенов (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена), патогенные и иммуногенные свойства чумного микроба, способствующих поддержанию оптимальных условий развития инфекции.

На данный момент также отсутствуют какие-либо сведения о возможности применения серотонина в схеме лабораторной диагностики чумы для повышения эффективности выделения возбудителя чумы из исследуемого материала как контаминированном, так и не контаминированном сопутствующей микрофлорой.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ — изучить влияние серотонина на рост, электрофоретический профиль белков, экспрессию поверхностных антигенов чумного микроба, а также индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток.

ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Изучить влияние серотонина на скорость роста, перераспределение по клеточному циклу (относительное содержание ДНК), морфометрические характеристики Y. pestis EV НИИЭГ (pFra+, pCad+, pPst+) и его изогенных штаммов Y. pestis КМ218 (pFra, pCad", pPst"), Y. pestis KM216 (pFra", pCad", pPst+) в условиях культивирования на плотных и жидких питательных средах.

2. Оценить возможность применения серотонина для повышения эффективности выделения возбудителя чумы бактериологическим методом из исследуемого материала, контаминированного сопутствующей микрофлорой.

3. Изучить влияние ееротонина на экспрессию диагностически значимых поверхностных антигенов (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена) и электрофоретический профиль белков Г. pestis с различным плазмидным составом в условиях культивирования на питательных средах.

4. Провести сравнительный анализ влияния ееротонина на развитие индуцированного Y. pestis и другими представителями рода Yersinia (Y.pseudotuberculosis, Y. enterocolitica,) апоптоза лейкоцитов крови человека в модельной системе in vitro.

5. С применением проточной цитофлуориметрии изучить in vivo влияние ееротонина на процессы апоптоза и пролиферации иммунокомпетентных клеток, состояние ядерного хроматина и лизосомального аппарата лейкоцитов крови, перитонеальных макрофагов биомодели (мыши BALB/c, нелинейные белые мыши) в условиях иммунизации Y. pestis EV НИИЭГ, а также различными препаратами капсульного антигена чумного микроба Ф1.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

Впервые установлено, что серотонин стимулирует накопление биомассы Y. pestis EV НИИЭГ и бесплазмидного штамма Y. pestis КМ218 на ранних стадиях развития культур, индуцирует по данным проточной цитофлуориметрии увеличение числа клеток с интенсивной ДНК-флуоресценцией для Y. pestis EV НИИЭГ в 2 раза, для Y. pestis КМ218 -в 1,8 раза.

Получены новые сведения о влиянии ееротонина на выделение чумного микроба из исследуемого материала, контаминированного посторонней микрофлорой. Показана эффективность применения ееротонина на начальном этапе бактериологического исследования на чуму. С применением ееротонина разработан способ выделения Y. pestis бактериологическим методом из исследуемого материала, контаминированного сопутствующей микрофлорой, включая объекты внешней среды, позволяющий сократить до 24 ч сроки биологического накопления возбудителя чумы и увеличить число колониеобразующих единиц чумного микроба. Новизна исследований подтверждена патентом на изобретение «Способ выделения чумного микроба бактериологическим методом из исследуемого материала (варианты)» положительное решение на выдачу патента от 16 октября 2008 г. по заявке № 2 007 142 840/13(46 910), приоритет от 19.11.2007).

Показано влияние серотонина на экспрессию видоспецифических антигенов чумного микроба (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена), детектируемых с помощью коммерческих препаратов иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих чумных адсорбированных. Обнаружено увеличение процентного содержания клеток с повышенной интенсивностью свечения.

Впервые выявлен ингибирующий эффект серотонина на синтез чумным микробом полипептида с молекулярной массой 22 кДа, участвующего в формировании поверхностного заряда клетокипроявлении адгезивных свойств, в условиях культивирования на агаре Хоттингера рН 7,2 при 28 °C в течение 24 ч.

Впервые in vitro и in vivo с применением проточно-цитофлуориметрического метода цитологического анализа установлено непосредственное участие серотонина в механизмах модуляции индуцированного Y. pestis и капсульным антигеном чумного микроба (Ф1) апоптоза, изменений состояния ядерного хроматина и лизосомального аппарата лейкоцитов крови, перитонеальпых макрофагов биомодели. Серотонин в концентрации 10 -5 М в первые 6 ч замедляет in vitro развитие индуцированного Y. pestis апоптоза лейкоцитов крови интактных биомоделей, что создает благоприятные условия для роста и размножения чумного микроба в организме хозяина и связано с влиянием антигенов, синтезируемых при 37 °C, в первую очередь капсульного антигена (Ф1). В иммунном организме модулирующее действие серотонина проявляется лишь через 24 ч и имеет противоположную направленность.

Впервые получены новые данные о влиянии биогенного амина серотонина на развитие апоптоза лейкоцитов крови человека, индуцированного различными представителями рода Yersinia (Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica). Серотонин оказывает модулирующее действие на распределение лейкоцитов по клеточному циклу, изменяя соотношение в крови клеток, находящихся на стадиях апоптоза и пролиферации. Характер выявленных изменений зависит от вида иерсиний и их серовара.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ.

Результаты исследований были использованы при разработке методических рекомендаций «Организация работы и обеззараживание материала, содержащего возбудитель чумы при проведении исследований методом проточной цитофлуориметрии», которые одобрены Ученым советом РосНИПЧИ «Микроб» (протокол № 6 от 12.12.2008 г) и утверждены директором ФГУЗ РосНИПЧИ «Микроб».

Разработанный нами «Способ выделения чумного микроба бактериологическим методом из исследуемого материала (варианты)» (положительное решение на выдачу патента от 16 октября 2008 г. по заявке № 2 007 142 840/13(46 910), приоритет от 19.11.2007 г.) внедрен в работу специализированной лаборатории препаратов против чумы и др. ООИ ГИСК им. JI.A. Тарасевича (акт внедрения патента в НД утвержден директором ФГУН ГИСК им. JI.A. Тарасевича академиком Н. В. Медуницыным от 26.11.2008).

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Биогенный амин серотонин в концентрации 10″ 5 М оказывает стимулирующее влияние на рост чумного микроба на стандартно используемых для его культивирования жидких и плотных питательных средах [бульон и агар Хоттингера рН 7,2- агар Хотгингера рН 7,2, содержащий лизированную кровь (1%) и генцианвиолет (1:100 000−1:200 000)], индуцирует, по данным проточной цитофлуориметрии, увеличение числа клеток с интенсивной ДНК-флуоресценцией.

2. С применением серотонина разработан способ выделения Y. pestis бактериологическим методом из исследуемого материала, контаминированного сопутствующей микрофлорой, включая объекты внешней среды, который позволяет увеличить число КОЕ чумного микроба в 1,5−5,5 раза и значительно сократить (до 24 ч) сроки биологического накопления возбудителя чумы из нативного материала.

3. Выявлен ингибирующий эффект серотонина на синтез полипептида с молекулярной массой 22 кДа клетками Y. pestis EV НИИЭГ, Y. pestis КМ218 и Y. pestis КМ216 в условиях культивирования на агаре Хоттингера рН 7,2 при 28 °C в течение 24 ч.

4. В модельной системе in vitro серотонин в концентрации 10″ 5 М оказывает модулирующее действие на развитие апоптоза лейкоцитов крови человека, индуцированного различными представителями рода Yersinia (Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica). Характер выявленных изменений зависит от вида иерсиний и их серовара.

5. Установлено, что примирование серотонином биомоделей (мыши BALB/c, нелинейные белые мыши) до иммунизации Y. pestis EV НИИЭГ, различными препаратами капсульного антигена чумного микроба (Ф1) влияет на характер развития процессов апоптоза и пролиферации иммунокомпетентных клеток, состояние ядерного хроматина, лизосомального аппарата лейкоцитов крови, перитонеальных макрофагов, интенсивность и направленность которых зависят от вида иммунизирующего препарата.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Исследования проведены в рамках плановых НИР: 006−3-01 «Разработка и усовершенствование унифицированных методов оценки безопасности вакцинирующих иммунобиологических препаратов против особо опасных инфекций» (№ госрегистрации 01.200.11 150) — 019−3-03 «Изучение взаимодействия чумного микроба с клетками крови в модельных системах in vitro» (№ госрегистрации 01.2.306 526) — НИР «Изучение роли биомолекул возбудителей особо опасных инфекционных заболеваний (чумы и холеры) в контроле апоптоза (запрограммированной гибели) эукариотических клеток» (2004 г.), являвшейся составной частью научно-исследовательской работы «Изучение роли биомолекул возбудителей опасных инфекционных заболеваний в контроле апоптоза (запрограммированной гибели) эукариотических клеток» (ОФИ-6), выполнявшейся в рамках ФЦНТП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники» на 2002;2006 годы, Блок I «Ориентированные фундаментальные исследования», раздел «Технологии живых систем», подраздел «Защита от патогенов» (Договор № 105−3/04 от 05.11.04 г. к госконтракту № 01.035.11.1535 от 05.11.04 г.).

Материалы диссертационной работы были доложены и представлены на: Международных конференциях «Saratov Fall Meeting: Workshop on Optical Technologies in Biophysics & Medicine IY» (Саратов, 2002;2003) — Всероссийской научно-практической конференции «Медицинская микробиология XXI век» (28−30 сентября 2004 г., Саратов) — на IX съезде Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (26−27 апреля 2007 г., Москва) — на VIII Межгосударственной научно-практической конференции государств-участников СНГ «Международные медико-санитарные правила и реализация глобальной стратегии борьбы с инфекционными болезнями в государствах-участниках СНГ» (25−26 сентября 2007 г., Саратов) — IX Межгосударственной научно-практической конференции «Современные технологии в реализации глобальной стратегии борьбы с инфекционными болезнями на территории государств-участников Содружества независимых Государств» (30 сентября-2 октября 2008 г, Волгоград) — научно-практических конференциях РосНИПЧИ «Микроб» «Итоги и перспективы фундаментальных и прикладных исследований в институте «Микроб» (Саратов, 2003;2008).

ПУБЛИКАЦИИ.

По материалам диссертации опубликовано 15 работ, их них статей в рекомендованных ВАК изданиях — 4.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка использованной литературы, включающего 147 отечественных и 150 зарубежных источников. Объем диссертации составляет 159 страниц машинописного текста. Работа иллюстрирована 19 рисунками и 11 таблицами.

выводы.

1. Биогенный амин серотонин в концентрации 10″ 5 М оказывает стимулирующее влияние на рост чумного микроба на стандартно используемых для его культивирования жидких и плотных питательных средах (бульон и агар Хоттингера рН 7,2- агар Хоттингера рН 7,2 с лизированной кровью и генцианвиолетом), не оказывая при этом значимого влияния на тинкториальные, культурально-морфологические свойства и морфометрические показатели чумного микроба.

2. С применением серотонина разработан способ выделения чумного микроба бактериологическим методом из исследуемого материала, контаминированного сопутствующей микрофлорой, включая объекты внешней среды, который позволяет увеличить число колониеобразующих единиц (КОЕ) чумного микроба в 1,5−5,5 раза и значительно сократить (до 24 ч) сроки биологического накопления возбудителя чумы из нативного материала.

3. Биогенный амин серотонин в концентрации индуцирует по данным проточной цитофлуориметрии увеличение числа клеток с интенсивной ДНК-флуоресценцией, оказывает влияние на экспрессию видоспецифических антигенов чумного микроба (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена), детектируемых с помощью коммерческих препаратов иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих чумных адсорбированных, в сторону ее усиления.

4. Выявлен ингибирующий эффект серотонина на синтез полипептида с молекулярной массой 22 кДа клетками Y. pestis EV НИИЭГ (pFra+, рСасГ, pPst+) и его изогенных производных Y. pestis КМ218 (pFra", pCad", pPst"), Y. pestis KM216 (pFra", pCad", pPst+) в условиях культивирования на агаре Хоттингера рН 7.2 при 28 °C в течение 24 ч.

5. Серотонин в концентрации 10″ 5 М оказывает различной степени влияние на индуцируемый Yersinia spp. апоптоз лейкоцитов крови in vitro. Характер выявленных изменений зависит от вида иерсиний и их серовара. Серотонин ингибирует развитие раннего (через 6 ч) апоптоза лейкоцитов крови человека под действием близкородственных бактерий Y. pestis и Y. pseudotuberculosis I серовара,.

6. Установлено, что примирование серотонином биомоделей (мыши BALB/c, нелинейные белые мыши) до иммунизации Y. pestis EV НИИЭГ, различными препаратами капсульного антигена чумного микроба (Ф1) влияет на характер развития процессов апоптоза и пролиферации иммунокомпетентных клеток, состояние ядерного хроматина, лизосомального аппарата лейкоцитов крови, перитонеальных макрофагов, интенсивность и направленность которых зависят от вида иммунизирующего препарата.

7. Полученные новые сведения о влиянии ееротонина на рост Y. pestis, перераспределение по клеточному циклу (относительное содержание ДНК), электрофоретический профиль белков, экспрессию диагностически значимых поверхностных антигенов (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена), а также индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток организма хозяина свидетельствуют о реальной возможности использования возбудителем чумы биогенного амина ееротонина, являющегося компонентом микроокружения в месте входных ворот чумной инфекции, для создания условий, направленных на ускорение адаптации его к внутренней среде организма хозяина и способности противостоять системе антиинфекционной защиты макроорганизма.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Проблема взаимодействия возбудителей особо опасных инфекций с организмом хозяина, связанная с адаптацией, способностью бактериального агента противостоять защитным системам макроорганизма, реализацией патогенных свойств далека от своего окончательного решения и остается актуальной на настоящий момент.

В последние годы интенсифицировались исследования по изучению триггерных молекулярных механизмов взаимодействия патогена с организмом хозяина, в том числе возможности использования микроорганизмами эндогенных биологически активных веществ макроорганизма для ускорения собственного развития. Формируется новое междисциплинарное направление — микробная эндокринология, изучающее фундаментальные и прикладные аспекты нейроэндокринной регуляции взаимодействия прои эукариот [Олескин А.В. и др., 2000; Стадников А. А. и др., 2002; Lyte М., 2004; Voigt W. et al., 2006].

Установлено, что бактерии имеют фрагменты молекул, аналогичные связывающим сайтам некоторых естественных физиологически активных веществ хозяина. У E. coli, N. gonorrhoeae, Y. enterocolitica, Shigella, S. aureus обнаружены белки, имитирующие инсулин, гонадотропин, кальмодулин. Белки Е. coli и Y. enterocolitica перекрестно реагируют с тиреотропином [Пинчук Л.М., 1992]. Получены свидетельства наличия на клеточной поверхности прокариот рецепторных структур, связывающих биогенные амины — нейрогормоны [Freestone P.P.et al., 2007].

Исследованиями последних лет выявлен стимулирующий эффект норадреналина на рост патогенных штаммов E. coli и синтез адгезина К99, шига-подобных токсинов I и II, показана зависимость транскрипции генов, кодирующих секрецию III типа и синтез флагелл у энтерогеморрагических и энтеротоксигенных Е. coli от адреналина и норадреналина, синтезируемых в клетках хозяина [Burton C.L. et al., 2002; Visidou I. et al., 2004; O’Donnell P.M. et al., 2006]. Показано избирательное повышение адгезии патогенных Е. coli 0157: Н7 под действием норадреналина [Green В.Т. et al., 2004] и уровня экспрессии фактора вирулентности P. aeruginosa РА-1 [Alverdy J. et al., 2000]. Катехоламины, в частности норадреналин, способны влиять на процесс захвата Е. coli, К. pneumonia, Р. aeruginosa, E. cloacaeS. sonnei, S. aureus, B. bronchiseptica, B. pertussis ионов железа из трансферрина и лактоферрина [Freestone P.P.et al., 2002, 2003; Anderson M.T., Armstrong S.A., 2006; O’Donnell P.M. et al., 2006], на интенсивность процесса, образования биопленок бактериями [Lyte М. et al., 2003]: Обнаружено существование перекрестной связи между IwcS/А1−2 бактериальной> QS (кворум сенсинг) и адренергической (адреналин/норадреналин) системой организма хозяина [Sperandio V et al-, 2003; Clarke М. В et al., 2006].

Проведенный анализ отечественной и зарубежной литературы показал, что исследования, связанные с изучением роли биогенных аминов организма хозяина в регуляции жизнедеятельности прокариот, ориентированы преимущественно на стрессорные гормоны, такие как. норадреналинадреналин, дофаминчто обусловлено первоочередностью применения в качестве объекта исследования энтеропатогенных бактерий и особенностью иннервации желудочно-кишечного тракта, являющегося входными воротами для кишечных инфекций.

Внастоящее времяимеются лишь единичные сообщения о возможности использования микроорганизмами в своей жизнедеятельности и для обеспечения ускоренного развития других, не менее важных биологически активных веществ, продуцируемых организмомхозяинатаких как биогенный амин-нейромедиатор серотонин, выполняющий у живых организмов многообразные функции и являющийся эволюционно консервативным агентом;

Серотонин (5-окситриптамин) принадлежит к группе биогенных аминов: азотистых оснований, возникающих в организме при декарбоксилировании аминокислот и обладающих чрезвычайно сильной активностью, благодаря высокой способности их к конформационным изменениям, к соединению с макромолекулами, к переносу электронов и протонов [Белжеларская С.Н., Саттон Ф., 2003].

Биогенныйамин серотонин является нейромедиатором, медиатором воспаления и аллергических реакций, обладает выраженным иммуномодулирующим действием, является одним из компонентов сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, способен комплексировать с ДНК прои эукариот, с нуклеозидами и нуклеотидами, ингибировать процессы перекисного окисления липидов в клеточных мембранах, непосредственно взаимодействуя с перекисными радикалами [Ноздрачев А.Д., Пушкарев Ю. П., 1980; Бурлакова Е. Б. и др., 1992; Щуковская Т. Н. и др., 1999; 2008; Helene С. et al., 1971].

Известно, что серотонин ускоряет рост культур Е. coli, Rsp. rubrum, С. guilliermondii, S. faecalis, вызывая сокращение лаг-фазы, стимулирует формирование биопленки у Е. coli и плодовых тел у миксобактерий [Страховская М.Г., Иванова Э. В., Фрайкин Г. Я., 1993; Олескин А. В. и др., 1998].

На данный момент отсутствуют сведения о потенциальном влиянии серотонина, высвобождаемого тромбоцитами и клетками нейроэндокринного микроокружения в месте проникновения чумного микроба в организм хозяина, на размножение клеток Y. pestis, перераспределение по клеточному циклу (относительное содержание ДНК), культурально-морфологические характеристики чумного микроба, профиль синтезируемых им белков, экспрессию диагностически значимых поверхностных антигенов (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена). Отсутствует какая-либо информация о возможности применения серотонина в схеме лабораторной диагностики чумы для повышения эффективности выделения возбудителя чумы из исследуемого материала, как контаминированного, так и не контаминированного сопутствующей микрофлорой.

Интегральным показателем, характеризующим изменения эукариотических клеток под воздействием инфекционного агента является соотношение количества клеток на разных стадиях клеточного цикла, включая стадию их запрограммированной гибели (апоптоз). Активация процессов апоптоза происходит под действием факторов вирулентности патогенных микроорганизмов и приводит к элиминации ключевых, обладающих защитными функциями, клеток организма хозяина, таких как лимфоциты, моноциты, нейтрофилы [Weinrauch I., Zychlinsky А., 1999; DeLeo F.R., Hinnebusch B.J., 2005; Marketon М.М. et al., 2005; Parrino S. et al., 2007]. Механизмы индукции апоптоза представителями рода Yersinia находятся на стадии исследования [Fields К., Straley S., 1999; Weinrauch Y. et al., 2002; Zhang Y., Bliska J.D., 2003]. He изучен механизм модулирующего действия биогенных аминов, в том числе серотонина, на развитие апоптоза под влиянием патогенных иерсиний, а также пролиферацию иммунокомпетентных клеток в условиях иммунобиологической перестройки, вакцинированного против чумы макроорганизма.

В этой связи целью настоящего исследования явилось изучение влияния серотонина на рост, электрофоретический профиль белков, экспрессию поверхностных антигенов чумного микроба, а также индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток.

Нами проведено исследование влияния серотонина на динамику роста, морфометрические показатели Y. pestis EV НИИЭГ и его изогенных производных с различным плазмидным составом на плотных и жидких питательных средах в условиях культивирования при 28 °C и 37 °C.

Добавление серотонина в различных концентрациях в жидкую среду культивирования (бульон Хоттингера рН 7,2) оказывало непосредственное влияние на количественные показатели интенсивности роста чумного микроба. Выявлена зависимость роста Y. pestis EV (pFra+, pCad+, pPst+) при 28 °C от концентрации добавленного в среду культивирования серотонина. Наличие экзогенного с i л серотонина в жидкой среде культивирования в концентрации 10″ М, 10″ М, 10″ М более чем в 2 раза увеличивало количество микробных клеток на начальном этапе.

О П fL выращивания. Низкие концентрации серотонина (10″ М, 10″ М, 10″ М) в аналогичных условиях не обладали стимулирующим действием и оказывали противоположный эффект на рост чумного микроба.

Для дальнейших исследований была выбрана концентрация серотонина 10″ 5 М, обладающая стимулирующим действием на рост чумного микроба и соответствующая физиологическим концентрациям серотонина, освобождающимся при разрушении и агрегации тромбоцитов в очаге воспаления, что соответствует обычно 10″ 6 — 10″ 5 М [Tamir Н. et al., 1983; Gershon M.D., Tamir Н., 1984].

Нами было установлено, что выращивание Y. pestis EV в бульоне Хоттингера рН 7,2 в присутствии 10″ 5 М серотонина как при 28 °C, так и при 37 °C обеспечивало более интенсивное по сравнению с контролем накопление клеточной биомассы Y pestis EV в течение 23−24 ч. В более поздние сроки наблюдения (28 ч, 47 ч, 51 ч) ростостимулирующий эффект серотонина проявлялся только в условиях инкубирования посевов при 37 °C.

При культивировании штамма Y. pestis EV (pFra+, pCad+, pPst+) с полным набором плазмид и изогенного бесплазмидного штамма Y. pestis КМ218 (pFra", pCad", pPst") в бульоне Хоттингера рН 7,2 при температуре 28 °C наличие экзогенного серотонина в концентрации 10″ 5 М приводило к увеличению количества микробных клеток на начальном этапе выращивания для обоих штаммов, что свидетельствовало о независимости стимулирующего действия серотонина от плазмидного состава клеток чумного микроба.

В ходе проведенных нами исследований установлено, что биогенный амин серотонин в концентрации 10'5 М оказывает стимулирующее действие на рост чумного микроба в условиях культивирования на плотных питательных средах, применяемых при стандартном бактериологическом методе исследования на чуму (агар Хоттингера рН 7,2, агар Хотгингера рН 7,2 с лизированной кровыо и генцианвиолетом).

Обработка серотонином как непосредственно самого исследуемого материала перед посевом (бактериальной взвеси), так и готовых агаровых пластин приводила к достоверному увеличению числа колониеобразующих единиц (КОЕ), не оказывая при этом значимого влияния на тинкгориальные, культурально-морфологические свойства и морфометрические показатели чумного микроба.

Аналогичные результаты получены нами при изучении влияния серотонина на рост чумного микроба в смешанной культуре. Ростостимулирующий эффект серотонина проявлялся одинаково как при нанесении раствора серотонина на поверхность агара, так и при внесении его в смешанную взвесь клеток У. pestis EV, S. aureus, E. coli за 30 мин до посева на плотную питательную среду. Серотонин (10″ 5М) оказывал также стимулирующее действие и на рост Е. coli, что согласуется с данными А. В. Олескина с соавторами (1998), однако сам эффект выражен намного слабее по сравнению с его действием на чумной микроб (уровень стимуляции роста по сравнению с контролем — 25% у Е. coli, против — 120% у У. pestis число КОЕ в контроле принято за 100%).

При исследовании контаминированного сопутствующей микрофлорой материала, в первую очередь объектов внешней среды и, особенно, при малом содержании в нем чумного микроба, наблюдается, как правило, поздняя визуализация колоний У. pestis (через 48−96 ч).

На примере искусственно инфицированной У. pestis природной почвы, нами установлено, что обработка серотонином перед посевом либо исследуемого материала, либо агаровых пластин позволяет значительно сократить (до 24 ч) сроки биологического накопления возбудителя чумы и увеличить в 3—5 раз число колониеобразующих единиц чумного микроба. С применением серотонина нами разработан способ выделения чумного микроба бактериологическим методом из исследуемого материала (положительное решение о выдаче патента на изобретение от 16 декабря 2008 г. по заявке № 2 007 142 840, приоритет от 19.11.2007), который не требует больших материальных затрат и дорогостоящего оборудования, легко воспроизводим и может быть реализован как в стационарных, так и полевых условиях.

По данным Н. В. Бреневой с соавторами (2007) адаптация Y. pestis к длительному персистированию в окружающей среде выражается в образовании некультивируемых форм (НФ). В эксперименте для реверсии НФ чумного микроба в вегетативную форму ими был использован метод, основанный на добавлении в бульон Хоттингера и казеиново-дрожжевой агар 10% фетальной сыворотки, которая также является обязательным стимулирующим пролиферацию компонентом среды для культивирования эукариотических клеток. Зарубежными исследователями установлено, что 10% фетальная сыворотка, добавляемая в среду для культивирования клеток, содержит 2,4><10″ 6 М серотонина, способного к проявлению своих модулирующих свойств, а его селективное удаление приводит к их ингибированию [Sternberg Е.М. et al., 1986]. В этой связи разработанный нами способ имеет перспективу применения для выделения некультивируемых форм Y. pestis.

В настоящее время установлено, что серотонин способен образовывать комплексы с ДНК бактериальных клеток за счет связывания индольного кольца с основаниями ДНК [Helene С. et al., 1971], что, по-видимому, может также оказывать влияние и на процессы, связанные с изменением относительного содержания ДНК.

Нами обнаружено, что обработка взвеси клеток Y. pestis EV серотонином в конечной концентрации 10″ 5 М в течение 30 мин при комнатной температуре приводит к достоверному двукратному увеличению доли клеток с повышенным содержанием ДНК, регистрируемой методом проточной цитометрии. Ранее А. В. Олескиным с соавторами (1998) было отмечено, что ростостимулирующий эффект серотонина на Е. coli, Rsp. rubrum не зависел от того, добавляли ли серотонин однократно в момент посева культуры или вносили многократно. По-видимому, биогенный амин серотонин действует на определенный «пусковой механизм», инициируемый на ранней стадии развития культуры.

Проведенный нами впервые проточно-цитофлуориметрический мониторинг относительного содержания ДНК в клетках Y. pestis EV НИИЭГ и его изогенных производных с различным, плазмидным составом в условиях культивирования при 37 °C на питательных средах в присутствии серотонина также показал наличие активационного воздействия серотонина на генетический аппарат клеток чумного микроба.

С применением проточно-цитофлуориметрического анализа нами установлена возможность влияния серотонина на экспрессию видоспецифических антигенов чумного микроба (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена), детектируемых с помощью коммерческих препаратов иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих чумных адсорбированных, в сторону ее усиления. Обнаружено увеличение процентного содержания клеток с повышенной интенсивностью свечения., i.

Нами впервые выявлен ингибирующий эффект серотонина на синтез чумным микробом, независимо от плазмидного состава, полипептида с молекулярной массой 22 кДа в условиях культивирования на агаре Хоттингера рН 7,2, агаре Хоттингера рН 7,2 с лизированной кровью при 28 °C в течение 24 ч.

Согласно исследованиям С. П. Задновой (1998), выделенный из клеток, штамма Y. pestis EV белок с молекулярной массой 22 кДа принимает участие в формировании поверхностного заряда клеток, проявлении адгезивных свойств и рассматривается как дополнительный фактор, обеспечивающий контакт патогена с клетками макроорганизма. Утрата полипептида 22 кДа клетками Y. pestis EV ведет к снижению захвата и поглощения их макрофагами, обусловливает картину незавершенного фагоцитоза. Выявленный нами ингибирующий эффект серотонина на синтез полипептида" с молекулярной массой 22 кДа имеет, по-видимому, немаловажное значение для адаптации и реализации патогенного потенциала чумного микроба на начальных этапах инфекционного процесса.

Не исключено также, что данный эффект может быть реализован в условиях биопленки Y. pestis в блохах, так как клетки чумного микроба, выделенные из биопленки, обладают повышенной резистентностью к фагоцитозу полиморфноядерными лейкоцитами крови человека именно на стадии захвата, а внеклеточный матрикс, образующий оболочку биопленки Y. pestis, включает форменные элементы поглощенной блохой крови, в состав которых входят тромбоциты, депонирующие серотонин. Вследствие разрушения и агрегации тромбоцитов происходит высвобождение серотонина, способного к реализации своего модулирующего действия. В пользу высказанного предположения свидетельствует также факт отсутствия продукции чумным микробом при нахождении в блохе таких антифагоцитарных факторов, как капсульный антиген Ф1 и секретируемые белки Yop [Jarret С.О. et al., 2004].

Нами также, впервые in vitro и in vivo с применением проточно-цитофлуориметрического метода цитологического анализа установлено непосредственное участие серотонина в механизмах модуляции апоптоза и пролиферации иммунокомпетентных клеток, изменений состояния ядерного хроматина и лизосомального аппарата лейкоцитов крови, перитонеальных клеток в динамике формирования иммунного ответа биомодельных животных в условиях иммунизации вакцинным штаммом Y. pestis EV НИИЭГ и капсульным антигеном чумного микроба (Ф1), а также индуцированного in vitro Y. pestis апоптоза лейкоцитов крови.

Серотонин в концентрации 10″ 5 М в первые 6 ч замедляет in vitro развитие индуцированного Y. pestis апоптоза лейкоцитов крови интактных биомоделей, что создает благоприятные условия для роста и размножения чумного микроба в организме хозяина и связано с влиянием антигенов, синтезируемых при 37 °C, в первую очередь капсульного антигена (Ф1). В иммунном организме модулирующее действие серотонина проявляется лишь через 24 ч и имеет противоположную направленность.

Примирование серотонином биомодельных животных за 30 мин до их иммунизации Y. pestis EV вызывает достоверное повышение пролиферативной активности лейкоцитов крови и спленоцитов на ранней стадии вакцинального процесса (1-е сутки). Следует отметить, что в центральном органе иммунной системы тимусе, доля пролиферирующих тимоцитов под воздействием серотонина снижалась на 7-е сутки иммуногенеза на фоне повышенного количества гиподиплоидных клеток (< 2С ДНК). По-видимому, под влиянием серотонина происходит повышение интенсивности отрицательной клональной селекции Т-клеток в ответ на иммунизацию Y. pestis EV, что согласуется с данными Л. С. Елисеевой (1984) о выраженном модулирующем действии серотонина на Т-клеточное звено иммунитета и изменение соотношения Ти В^лимфоцитов в сторону увеличения последних.

Нами впервые с применением проточной цитофлуориметрии в модельной системе in vitro получены новые данные о влиянии биогенного амина серотонина на развитие апоптоза лейкоцитов крови человека, индуцированного различными представителями рода Yersinia (Y.pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica).

Установлено, что серотонин замедляет in vitro развитие раннего (через 6 ч) и стимулирует проявление позднего (через 24 ч) апоптоза лейкоцитов крови человека в ответ на клетки вакцинного штамма Y. pestis EV НИИЭГ, выращенные при 28 °C. Серотонин в 2 раза снижал интенсивность раннего апоптоза лейкоцитов крови человека в ответ на клетки Y. pseudotuberculosis I серовара независимо от температуры их выращивания, и не оказывал достоверного воздействия на развитие раннего и позднего апоптоза, индуцированного Y. pseudotuberculosis IV серовара. Зарегистрировано более чем в 2 раза увеличение под влиянием серотонина интенсивности развития позднего апоптоза лейкоцитов крови человека, индуцированного клетками штамма Y. enterocolitica 383 09 серовара, лишенного плазмиды кальцийзависимости.

Экспрессируемые иерсиниями белки Yop, синтез которых детерминируется плазмидой кальцийзависимости (YopP у Y. enterocolitica и его анаолог YopJ у Y. pestis и Y. pseudotuberculosis), участвуют в управлении процессами апоптоза эукариотической клетки. Эти белки транспортируются в цитоплазму клетки хозяина при участии системы секреции III типа, где связывают и ингибируюг 1КК/?-каталитическую субъединицу 1КК/?-киназного комплекса, блокируя тем самым сигнальный путь, ответственный за координацию активации ядерного фактора транскрипции NF-кВ и играющий центральную роль в регуляции различных клеточных процессов, таких как воспаление, иммунный ответ, дифференциация, пролиферация и апоптоз [Zhang Y., 2003]. Индукция апоптоза моноцитов, макрофагов консервативными компонентами иерсиний (ЛПС, липопротеины) осуществляется через ТоП-подобные рецепторы (TLR), соответственно через TLR-4 и TLR-2 [Ruckdeschel К., 2004]. У людей при моделировании эндотоксинового шока (внутривенное введение референс препарата эндотоксина добровольцам) выявлено в цельной крови шестикратное усиление экспрессии TLR-4 на моноцитах через 6 ч после стимуляции ЛПС на фоне моноцитопении, в то время как значительное увеличение экспрессии TLR-4 на гранулоцитах регистрировалось только через 24 ч [Wittbole X., 2005]. Продуцируемые моноцитами цитокины (ИЛ-1, ГМ-КСФ), а также ИЛ-8, образуемый гранулоцитами в первые часы после стимуляции ЛПС, запуск синтеза которых осуществляется через TLR-4, обладают антиапоптозным действием и обеспечивают тем самым сохранение жизнеспособности гранулярных лейкоцитов на раннем этапе (4−6 ч) после контакта их с бактериальными патогенами [Sabroe I., 2002]. По-видимому, этим объясняется наблюдаемое как в нашей работе, так и в исследованиях других авторов [Шмелькова Т.П., 2007] развитие позднего апоптоза лейкоцитов крови человека под действием У. pestis и У. pseudotuberculosis I серовара, относящихся к одной эволюционной линии и вызывающих заболевания, часто сопровождающиеся острым течением инфекции [Гаева А.В., 2002]. Физиологические концентрации серотонина, освобождающиеся при разрушении и агрегации тромбоцитов в очаге воспаления, обычно это 10″ 8−10″ 5 М [Gershon M.D., 1984], могут быть достаточны для оказания модулирующего действия на развитие апоптоза эукариотических клеток, запускаемого патогенными иерсиниями. Как показали результаты нашего исследования, серотонин в концентрации 10″ 5 М оказывает в условиях in vitro различной степени влияние на апоптоз лейкоцитов, индуцируемый в крови человека представителями рода Yersinia spp. (7. pestis, Y. pseudotubercidosis, Y. enterocolitica). Характер выявленных изменений зависит от вида иерсиний и их серовара.

Механизм модулирующего действия биогенного амина серотонина на развитие апоптоза под влиянием патогенных иерсиний может быть связан, с одной стороны, с изменением экспрессии поверхностных антигенов под влиянием серотонина, что было показано нами ранее на примере чумного микроба, а с другой — с интенсивностью выработки цитокинов лейкоцитами, изменением экспрессии молекул, участвующих в связывании лигандов TLR (таких как CD 14) и опосредующих эффекторные функции клеток (молекул адгезии, рецепторов хемокинов, костимуляторных молекул) [Хорева М.В., 2006]. Полученные новые сведения имеют важное значение для понимания патогенеза вызываемых Yersinia spp. инфекций и могут быть использованы при разработке новых подходов в их комплексной терапии.

Таким образом, полученные в результате проведенных исследований новые сведения о влиянии серотонина на рост Y. pestis, перераспределение по клеточному циклу (относительное содержание ДНК), электрофоретический профиль белков, экспрессию диагностически значимых поверхностных антигенов (капсульного антигена чумного микроба Ф1, активатора плазминогена), а также индуцированный апоптоз и пролиферацию иммунокомпетентных клеток организма хозяина, свидетельствуют о реальной возможности использования возбудителем чумы биогенного амина серотонина, являющего компонентом микроокружения в месте входных ворот чумной инфекции, для создания условий, направленных на ускорение адаптации его к внутренней среде организма хозяина и способности противостоять системе антиинфекционной защиты макроорганизма.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.В. Взаимозависимость функционирования иммунной и нервной систем // Успехи соврем, биологии. 1991. — Т. 111. -№ 6. — С. 840 — 844.
  2. О.М. Фармакологическая регуляция функции адренорецепторов / М.: Медицина, 1988. 256 с.
  3. О. А. Показатели обмена медиаторов в процессе развития противочумного иммунитета / Автореф. дис.. канд. мед. наук. Саратов, 1982. — 19 с.
  4. Адо А.Д. О нервной регуляции функций иммунокомпетентной системы // Взаимодействие нервной и иммунной систем: Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума. Оренбург — Ленинград — Ростов-на-Дону. — 1990 г. — С. 59.
  5. Р.И., Кочина И. С. Наличие Р-адренорецепторов, функционально ассоциированных с аденилатциклазой, в мембране предшественников антителообразующих клеток // Иммунология. 1985. — № 3. -С. 13−16.
  6. С.Н., Шалаева Г. В., Вовбас Е. И. Влияние эмоционально-болевого стресса на содержание биогенных аминов в лимфоцитах тимуса, селезенки и лимфоузлов // Стресс и иммунитет: Тез. докл. Всес. конф. «Стресс и иммунитет». Ростов-на-Дону, 1989.-С. 105.
  7. И.П., Воробьев А. А. Статистические методы в микробиологических исследованиях / Л.: Медгиз, 1962. 180 с.
  8. И.В., Кравченко Т. Б., Титарева Г. М., Иванов С. А. Взаимодействие рН 6 антигена Yersinia pestis с различными типами эукариотических клеток // Пробл. особо опасных инфекций. 2007. — Вып.2 (94). — С. 40 — 42.
  9. Н.Д. Иммунопатология и иммунорегуляция (при инфекциях, инвазиях и аллергиях) / М.: Медицина, 1986. 256 с.
  10. О.С., Зайцев С. В. Роль мембранных липидов в регуляции функционирования рецепторов нейромедиаторов // Биохимия. 1993. — Т. 58. -№ 11.-С. 1685−1708.
  11. С.Н., Сатгон Ф. Роль серотониновой системы в реакции различных клеток на стрессорные сигналы // Молекулярная биология. 2003. -Т. 37. — № 3. — С. 452 — 457.
  12. Е.В. Клинико-лабораторный мониторинг за развитием повреждающего воздействия Staphylococcus aureus на лизосомальный и генетический аппараты лейкоцитов крови человека / Автореф. дис.. канд. мед. наук. Саратов, 2004. — 23 с.
  13. Н.В., Марамович А. С., Климов В. Т. Клоиальная структура популяций Yersinia pestis в экспериментальных почвенных экосистемах // Журн. микробиол. 2007. — № 1- С.12−16.
  14. С.Е., Васильева Н. Н., Казбеков Э. Н. и др. Комплексы с переносом заряда между рибофлавином и производными триптофана // Молекулярная биология. 1979. — Т. 4. — С.571 — 579.
  15. С.А., Исупов И. В. Апуд-система кишечника животных при холерной инфекции, интоксикации и вакцинальном процессе / Ин-т «Микроб». -Саратов, 2000. 68 с. — Деп. в ВИНИТИ 09.11.2000. № 2825.
  16. Г. А. Низкомолекулярные регуляторы зародышевого развития Текст. / М.: Наука, 1987. 230 с.
  17. Е.Б. Влияние липидов мембран на ферментативную активность // Липиды. Структура, биосинтез, превращения и функции. М.: Наука. — 1977. -С. 16−27.
  18. Е.Б., Губарева А. Е., Архипова Г. В., Рогинский В. А. Модуляция перекисного окисления липидов биогенными аминами в модельных системах // Вопр. мед. химии. 1992. — № 2. — С. 17 — 20.
  19. А.А., Сединина Н. С. Состояние нейромедиаторной системы у участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС // Клиническая лабораторная диагностика. — 2005. — № 3. С. 17−18.
  20. В.Н. Об участии биологически активных веществ в патогенезе дизентерии // Сов. медицина. 1972. — Т. 35. — № 5. — С. 30 — 35.
  21. Г. И. Роль взаимодействия Yersinia pestis с клетками системы мононуклеарных фагоцитов в реализации вакцинного и инфекционного процессов / Автореф. дис.. док. мед. наук. Саратов, 1990. — 40 с.
  22. Г. И. Роль макрофагов в иммуногенезе чумы // Журн. микробиол. -1990. -№ 12.-С. 98- 104.
  23. И.Л., Кассиль Г. Н. Гистамин в биохимии и физиологии / М.: Наука, 1981.-278 с.
  24. А.В., Фоменко A.M., Зозуля А. А. Серотониновые рецепторы лимфоцитов: радиорецепторное исследование // Бюл. экспер. биол. и мед. 1982. -№ 7. — С. 52−53.
  25. Н.А. Изучение экспрессии белков внешней мембраны, кодируемых плазмидой кальцийзависимости Yersinia pestis / Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 1992. — 21 с.
  26. Л.И. Изучение роли биогенных аминов при вакцинации животных различными вариантами вакцины АКДС // Материалы Всесоюзн. конф., посвящ. 125-летию со дня рожд. И. И. Мечникова. М., 1972. — С. 29 — 30.
  27. А.В., Видяева Н. А., Проценко О. А., Кутырев В. В. Особенности штаммов Yersinia pseudotuberculosis, выделенных в различных природных очагах // Пробл. особо опасных инфекций. 2002. — Вып.1 (83). — С. 5 — 14.
  28. Е.Н., Горская Т. Г., Капля С. А. и др. Роль эндогенных веществ в создании повышенной радиорезистенции // Радиобиология. 1980. — Т. 20, № 2. -С. 266−268.
  29. Е.Н., Граевская Е. Э., Кудряшов Ю. Б. Мастоциты и радиорезистентность // Успехи современной биологии. 1994. — Т.114. — С. 475 -481.
  30. Д.С., Сергеева В. Е., Зеленова И. Г. Нейромедиаторы лимфоидных органов (Функциональная морфология) / Л.: Наука, 1982. 129 с.
  31. Н.А., Алекса Т. Ф. Использование цитофлуоресцентных методов для идентификации лимфоцитов и макрофагов, оценки их функционального состояния // Иммунология. 1984. -№ 1. — С.10 — 15.
  32. Н.М., Давтян Т. К., Пак С.Г. Индуцированный липополисахаридами апоптоз гранулоцитов периферической крови больных, перенесших сальмонеллезную инфекцию // Клиническая лабораторная диагностика. 2006. — № 8. — С. 25 — 28.
  33. М.В., Фиш Н.Г. Белковые токсины микробов / М.: Медицина, 1985. -224 с.
  34. Девойно J1.B., Ильюченок Р. Ю. Моноаминергические системы в регуляции иммунных реакций (серотонин, дофамин) / Новосибирск: Наука, 1983. 234 с.
  35. Л.В., Морозова Н. Б. Участие клеток-супрессоров в угнетающем действии серотонина на иммуногенез // Журн. микробиол. 1979. — № 5. — С. 60 -63.
  36. Э.Г., Павловская Я. В., Киселев О. И. и др. Структурно-функциональный анализ биологической активности производных акридина // Вестник Российской АМН. 2004. — № 12. — С. 29 — 33.
  37. С.В., Мишанькин М. Б., Мишанькин Б. Н. и др. Пирацетам в профилактике интоксикации, вызванной чумным микробом // Пробл. особо опасных инфекций. 2004. — Вып. 1 (87). — С.55 — 58.
  38. С.В., Мишанькин М. Б., Мишанькин Б. Н., Водопьянов А. С. Изучение проницаемости гематоэнцефалического барьера при чумной инфекции методом полимеразной цепной реакции // Пробл. особо опасных инфекций. -2006. Вып. 1(91). — С. 62 — 64.
  39. И.И., Бухарин О. В. Нейтрофилы и гомеостаз / Екатеринбург, 2001.- 284 с.
  40. И.В. Чума / М.: Медицина, 1998. 176 с.
  41. A.M., Захарова О. Ю., Фомина Т. И., Гольдберг Е. Д. Адренергические механизмы в формировании адаптационного ответа различных тканей // Бюл. экспер. биол. и мед. 1992. — № 3. — С. 278 — 280.
  42. И.А., Филиппов А. Ф. Взаимодействие чумного микроба с фибриногеном // Микробиология, биохимия и специфическая профилактика карантинных инфекций. 1990. — С. 9 -16.
  43. JI.C. Участие серотонинергической системы и надпочечников в регуляции динамики и соотношения Т- и В-розеткообразующих клеток в иммуногенезе // Иммунология. 1984. — № 4. — С.43 — 46.
  44. JI.C. Биологический эффект связывания серотонина с иммуноцитами // Иммунология. 1988. — № 5. — С. 42 — 46.
  45. Г. В., Тараненко Т. М., Наумов А. В. и др. Изучение протективной активности различных по химическому составу препаратов капсульного антигена чумного микроба // Микробиол., биохим. и специф. профил. карантин, инф.- 1990.-С. 84−89.
  46. Г. Б., Манухов И.В. Quorum sensing, или как бактерии разговаривают друг с другом // Молекулярная биология. 2001. — Т. 35. — С. 268 -277.
  47. С.П. Влияние полипептида с молекулярной массой 22 kD на свойства клеточной поверхности штаммов возбудителей чумы / Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 1998. — 20 с.
  48. С.П., Лозовский Ю. В. Механизмы секреции грамотрицательных бактерий // Пробл. особо опасных инфекций. 2005. — Вып. 2 (90). — С. 11 — 16.
  49. А.В. Влияние живой чумной вакцины и некоторых ее антигенов на систему гемостаза в эксперименте / Автореф. дис.. канд. мед. наук. Саратов, 1991.-20 с.
  50. Н.А., Гинцбург А. Л. Роль апоптоза в регуляции инфекционного процесса // Журн. микробиол. 2004. — № 6. — С. 106 — 113.
  51. И.В., Булгакова Е. Г., Видяева Н. А., Кутырев В. В. Изучение роста Psn" и Hms" -мутантов чумного микроба на средах с различными хелаторами ионов железа // Пробл. особо опасных инфекций. 1999. — Вып. 79. — С. 162 — 168.
  52. Т.С., Романова Ю. М., Гинцбург А. Л. Системы коммуникации у бактерий и их роль в патогенности // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2006. — № 3. — С. 22 — 29.
  53. Кац П. Д. Динамика гистамина и серотонина крови при экспериментальной дизентерийной интоксикации у кроликов // Азерб. мед. журнал. 1965. — № 9. -С. 27−31.
  54. А.Г., Райцис А. Б. Флюориметрический метод определения активности гистаминазы в сыворотке крови // Лаб. дело. 1973. — № 4. — С. 231 -233.
  55. И.В., Цыган В. Н. Апоптоз в онкоурологии / Санкт-Петербург: «Наука». 2007. — 239 с.
  56. Г. И., Погорелов В. М., Шмаров Д. А. и др. Клетки крови, современные технологии их анализа / М.: «Триада-фарм», 2002. 535 с.
  57. В.А., Матросова В. Ю., Орловская И. А., Акименко З. А. Роль гистаминовых рецепторов в реализации эффекта Р-цепи гемоглобина, ингибирующей пролиферацию ранних гемопоэтических предшественников // Иммунология. 1998. — № 2. — С. 34 — 36.
  58. Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза (МУ 3.3.2.2124−06) / М.: Минздрав России, 2006. 25с.
  59. Е.А. Нарушения нейрогуморальной регуляции функций иммунной системы // Вестник АМН СССР. 1990. — № П. — С. 36 — 42.
  60. Е.А. Механизмы резистентности организма при различных видах стресса// Патофизиология органов и систем. Типовые патологические процессы. -М., 1996.-С. 212−213.
  61. Е.А., Бычков Е. Р. Моноамины в структурах гипоталамуса в первые часы после иммунизации // Вестник РАМН. 1992. — № 7. — С. 25 — 28.
  62. Е.А., Казакова Т. Б., Носов М. А. Экспрессия c-fos мРНК и c-Fos-подобных белков в клетках гипоталамических структур при введении антигена // Аллергология и иммунология. 2000. — Т. 1. — № 1. — С. 37 — 44.
  63. Т.А., Дальвадянц С. М., Метлин В. Н. Изменение баланса гистамина в органах белых крыс в динамике при интоксикации, вызванной экзо- иэндотоксинами возбудителя чумы // Пробл. особо опасных инфекций. Саратов, 1972.-№−2.-С. 115−117.
  64. A. JI. Микрофлуориметрическое исследование в потоке гетерогенных популяций Y. pestis и клеток иммунной системы инфицированных чумой лабораторных животных / Автореф. дис.. док. биол. наук. Саратов, 1997.-57 с.
  65. Кравцов A. JL, Костылева Н. И. Результаты цитометрии ДНК бактерий Yersinia pestis в процессе роста на среде, не содержащей и содержащей стрептомицин // Пробл. особо опасных инфекций. Саратов, 1994. — Вып. 5(75). -С. 97- 106.
  66. В.И., Черкасова Т. Н. Серотонин кроветворной и иммунокомпетентной тканей различных видов млекопитающих // Бюл. экспер. биол. и мед. 1974. — Т.78. — № 8. — С. 71 — 76.
  67. М.Д., Бакшеев Н. С. Биохимические основы механизма действия серотонина / Киев: «Наукова думка», 1974. 296 с.
  68. В.В. Генетический анализ факторов вирулентности возбудителя чумы / Дис.. док. мед. наук. Саратов, 1992. — 332 с.
  69. Д.Н., Алехин Е. К. Стимуляторы иммунитета / М.: Медицина, 1985. -256 с.
  70. Ю.И. Требования к качеству лабораторных грызунов и условия их содержания // Руководство по вакцинному и сывороточному делу. М.: Медицина, 1978. — С. 24 — 36.
  71. Лимфоциты. Методы: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Клауса. М.: Мир, 1990. -395 с.
  72. Медицинские лабораторные технологии / Под ред. А. И. Карпищева СПб.: Интермедика, 2002. — Т. 1. — 408 с.
  73. Н.В. Вакцинология / Москва, 2004. 446 с.
  74. Монцевичюте Эрингене Е. В. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе // Патол. физиол. и эксперимен. терапия. — 1964. — № 4. — С. 71−78.
  75. Н.Б. Влияние серотонина на антигенеспецифические судрессоры тимуса // Бюл. эспер. биол. и мед. 1990. — № 7. — С.68 — 70.
  76. Г. И., Короленко Т. А. Рецепторный и жидкофазный эндоцитоз // Успехи современной биологии. 1992. — Т. 112. — № 2. — С. 252 — 264.
  77. Ш. Н. Характерисика иммунокомпетентных клеток крови и тканей при различных формах дизентерии // Иммунология. 1982. — № 3. — С. 51 — 55.
  78. JI.C. Иммуноморфологический анализ вакцинальных и инфекционных процессов при холере и чуме в эксперименте / Автореф. дис.. док. мед. наук. Саратов, 1995. — 37 с.
  79. А.В., Ледванов М. Ю., Дроздов И. Г. Иммунология чумы / Саратов, 1992. -172 с.
  80. М.Ф., Литвина М. М., Варфоломеева М. И. и др. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунология. -№ 2. 1999. — С. 20 — 23.
  81. Д.К., Новикова В. И. Клеточные методы иммунодиагностики / Минск: «Беларусь», 1979. 222 с.
  82. А.Д., Пушкарев Ю. П. Характеристика медиаторных превращений / Л.: «Наука», 1980. 230 с.
  83. А.В., Ботвинко И. В., Кировская Т.А Микробная эндокринология и биополитика // Вестник Моск. ун-та. Сер. Биология. 1998(a). — № 4. — С. 3 — 10.
  84. А.В., Ботвинко И. В., Цавкелова Е. А. Колониальная организация и межклеточная коммуникация у микроорганизмов // Микробиология. 2000. -Т.69. — № 3. — С. 309−327.
  85. А.В., Кировская Т. А., Ботвинко И. В., Лысак Л. В. Действие серотонина (5-окситриптамина) на рост и дифференциацию микроорганизмов // Микробиология. 1998(6). — Т.67. — № 3. — С. 305 — 312.
  86. Г. Г. Об эпидемиологической обстановке по особо опасным, природно-очаговым и другим инфекциям на территории Южного федерального округа // Журн. микробиол. 2004. — № 3. — С. 23−30.
  87. Г. Г., Кутырев В. В., Кривуля С. Д. и др. Стратегия борьбы с инфекционными болезнями и санитарная охрана территорий в современных условиях // Пробл. особо опасных инфекций. 2006. — Вып. 2(92). — С.5 — 9.
  88. Организация и проведение эпидемиологического надзора в природных очагах чумы на территории Российской Федерации (МУ 3.5.5.1034−01) / М., 2002.- 103 с.
  89. Г. М., Поляк А. И. Субпопуляционный анализ влияния альфа-адреноблокаторов на первичный иммунный ответ // Взаимодействие нервной и иммунной систем: Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума. Оренбург -Ленинград — Ростов-на-Дону. — 1990 г. — С. 76.
  90. Л.М. Молекулярная мимикрия как фактор патогенности микроорганизмов // Успехи современной биологии. 1992. — Т.112, № 2. — С. 225 -237.
  91. Е.В. Механизмы нарушений коагуляционного гемостаза при чумной интоксикации / Автореф. дис.. канд. мед. наук Саратов, 1990. — 21 с.
  92. З.А., Завенягина Т. Н. Влияние серотонина (5-окситриптамина) и 5-окситриптофана на летальность животных при экспериментальной пневмококковой инфекции и брюшнотифозной интоксикации // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1962. -№ 6. — С. 27 — 32.
  93. З.А., Романовская М. Г. Изменение содержания гистамина в крови и органах крыс при экспериментальной пневмококковой инфекции // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1968. — Т. 65. — № 4. — С. 43 — 45.
  94. Н.В., Слудский А. А., Удовиков А. И. и др. Роль биопленок Yersinia pestis в механизме энзоотии чумы // Журн. микробиол. 2008. — № 4. — С. 118 — 120.
  95. Н.К., Кудрявцева Н. Н., Лубсанова С. Д. Генетический контроль тканевого содержания серотонина у мышей // Генетика. 1978. — Т.14. — № 10. -С.1804 -1808.
  96. Порядок и методы контроля иммунологической безопасности вакцин. Общие методические принципы. РД 42−28−10−90. М., 1989. — 49 с.
  97. М.П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами // Иммунология. 2002. — № 4. — С. 237 — 243.
  98. Правила проведения работ и использования экспериментальных животных / «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы сиспользованием экспериментальных животных»: Приказ МЗ СССР № 755 от 12.08.77.
  99. А.А. Строение генома бактерий: единство или многообразие? // Генетика. 1995.-Т. 31.-№−6.-С. 741 -742.
  100. И.Т., Кветной И. М., Осадчук М. А. АПУД-система (общепатологические и онкологические аспекты) / Обнинск, 1993. С. 30 — 35.
  101. . А., Вершеня М. И. Гистамин крови при пищевых токсикоинфекциях и инфекционном гепатите // Сов. Медицина. 1970. — № 6. -С. 130- 133.
  102. А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология / М.: Мир, 2000. 592 с.
  103. Руководство по профилактике чумы / Под ред. А. В. Наумова, J1.B. Самойловой. Саратов, 1992. — 278 с.
  104. JI.B. Пролиферация и популяционный состав иммунокомпетентных клеток в динамике вакцинального и инфекционного процессов при чуме / Автореф. дис.. канд. мед. наук Саратов, 1990. — 20 с.
  105. JI.B., Медуницын Н. В., Анисимова Т. И., Кутырев В. В. Производство и внедрение новых препаратов для диагностики и профилактики особо опасных заболеваний // Пробл. особо опасных инфекций. 2002. — Вып. 84.-С. 133- 144.
  106. В.М., Пивень Н. Н., Гришкина Т. А. Условия культивирования как лимитирующие факторы в развитии патогенных бактерий // Пробл. особо опасных инфекций. 2005. — Вып. 86. — С. 68 — 79.
  107. Санитарные правила «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)» СП 1.3.1285−03 // Бюллетень нормативных и методических документов Госсанэпиднадзора. 2003. — Вып. З (13). — № 9. — С. 62−144.
  108. Санитарные правила «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами» СП 1.2.731−99. Изд. официальное. — М.: Минздрав России, 1999. — 107 с.
  109. JI.H., Тараненко Т. М., Веренков М. С., Наумов А. В. Получение капсульного антигена методом одноэтапной гелевой фильтрации // Вопр. профилакт. природно-очаговых инф. Саратов, 1983. — С. 37 — 41.
  110. А.Н., Сидоркин В. Г., Преснякова М. В. Биохимические основы системы гемостаза и диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови / Н. Новгород: ННИИТО, 2005. 112 с.
  111. А.С. Толл-белки: специфические рецепторы неспецифического иммунитета // Иммунология. 2005. — № 6. — С. 368 — 376.
  112. А.П., Федоров В. Д. Серотонин и его рецепторы в генезе стресса и адаптации // Вестник Российской АМН 2002. — № 8. — С. 9 — 13.
  113. Г. Б. 8-й Международный симпозиум по иерсиниям (4−8 сентября 2002 г., Турку, Финляндия) // Пробл. особо опасных инфекций. 2002. — Вып. 84.-С. 203−208.
  114. Специфическая индикация патогенных биологических агентов: практическое руководство / Под ред. Г. Г. Онищенко. М.:ЗАО «МП Гигиена», 2006. — 288 с.
  115. А.А., Ковбык Л. В., Карташова О. Л. Фундаментальные и прикладные аспекты нейроэндокринной регуляции взаимодействий про- и эукариот // Вестник Российской АМН. 2002. — № 3. — С. 48−51.
  116. М.Г., Беленикина Н. С., Фрайкин Г. Я. Активация роста дрожжей под действием ультрафиолетового света области 280 380 нм // Микробиология. — 1991. — Т.60. — № 2. — С. 292 — 297.
  117. М.Г., Иванова Э. В., Фрайкин Г. Я. Стимулирующее влияние серотонина на рост дрожжей Candida guilliermondii и бактерий Streptococcus faecalis II Микробиология. 1993. — Т.62. — № 1. — С. 46 — 49.
  118. Г. Ю. Участие тучных клеток в ранней фазе иммунного ответа тимуса на введение растворимого антигена // Иммунология. 1997. — № 6. — С. 55 -56.
  119. Г. Ю., Меркулова Л. М., Сергеева В. Е., Стоменская И. С. Реакция биоаминсодержащих структур тимуса крыс на экспериментальное удаление селезенки // Иммунология. 2000. — № 2. — С. 13 — 17.
  120. К.В. Иммунные механизмы системной деятельности организма: факты и гипотезы // Иммунология. 2003. — Т. 24. — № 6. — С.372 -381.
  121. Н.Б., Густафссон М.К. С. Нейротрансмиттеры у гельминтов (биогенные амины, оксид азота) / М: Наука, 2003. 179 с.
  122. М.М., Проценко О. А., Фурсов В. В. и др. Информативность люминесцентно-серологического метода диагностики возбудителя чумы // Генетика и микробиология природно-очаговых инфекций. Саратов, 1984. — С. 27 — 32.
  123. В.А., ' Донцов В.И. Действие серотонина на пролиферацию субпопуляций лимфоцитов селезенки мышей в ходе иммунного ответа // Иммунология. 1984. — № 5. — С. 43 — 45.
  124. Т.М., Архипова Л. В. Внутриклеточная активность нейромедиаторов // Успехи современной биологии. 1992. — Т. 112. — № 2. — С.265 — 272.
  125. В.А. Теоретико-экспериментальные аспекты изучения белковых и углеводсодержащих антигенов возбудителей чумы и холеры с использованием поли- и моноклональных антител / Автореф. дис.. док. мед. наук Саратов, 2004.-41 с.
  126. Г. Я., Страховская М. Г., Беленикина Н. С., Рубин А. Б. Способ выращивания дрожжей. А.с. 1 544 796 СССР // Бюл. изобретений. 1990. — № 7. -С. 154.
  127. X. Иммунологические методы / М.: Медицина, 1987. 472 с.
  128. Е.П. Нейрогуморальные механизмы регуляции иммунологических процессов / М.: Медицина, 1974. 264 с.
  129. Хорева М.В., I-Совальчук JI.B., Варивода А. С. и др. Опосредованные через То11-подобные рецепторы выработка цитокинов и экспрессия поверхностных маркеров лейкоцитами крови человека // Аллергология и иммунология. 2006. -№−2(7).-С. 199−206.
  130. Е.А., Ботвинко И. В., Кудрин B.C., Олескин А. В. Детекция нейромедиаторных аминов у микроорганизмов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии // Докл. Росс. Акад. Наук. 2000. — Т. 372. — № 6. -С.840 — 842.
  131. Е.А., Климова С. Ю., Чердынцева Т. А., Нетрусов А. И. Гормоны и гормоноподобные соединения микроорганизмов // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. — Т. 42. — № 3. — С. 261 — 268.
  132. Т.Д. Роль токсинов в патогенезе чумы / Автореф. дис.. док. мед. наук. Москва, 1994. — 48 с.
  133. Л.И. Гистамин в патогенезе пищевых токсикоинфекций // Врачебное дело. 1974. -№ 9. — С. 147 — 150.
  134. .З. Изменение обмена медиаторов в тканях желудочно-кишечного тракта и некоторые пути их фармакологической коррекции при экспериментальной дизентерийной интоксикации / Автореф. дис.. канд. мед. наук. Саратов, 1977. — 22 с.
  135. Т.П., Кравцов А. Л., Щуковская Т. Н. и др. Влияние биологических свойств чумного микроба на развитие апоптоза лейкоцитов крови человека в системе in vitro II Пробл. особо опасных инфекций. 2007. — Вып. 1(93).-С. 85−89.
  136. Т.Н. Показатели медиаторного обмена в процессе формирования иммунитета к холере / Автореф. дис.. канд. мед. наук. Саратов, 1978. — 19 с.
  137. Т.Н. Регуляция нейромедиаторами формирования специфической резистентности к особо опасным инфекциям // Аллергология и иммунология. — 2000.-Т. 1.-№−2.-С. 110−111.
  138. Т.Н. Регуляция нейромедиаторами формирования специфической резистентности к холере // Материалы совещания специалистов
  139. Роспотребнадзора и проблемной комиссии Координационного научного совета по санитарно-эпидемиологической охране территории РФ «Холера и патогенные для человека вибрионы». Ростов-на-Дону, 2008. — № 21. — С. 108 — 110.
  140. Т.Н., Горькова А. В. Роль биогенных аминов в противохолерном вакцинальном процессе // Рос. Н.И. противочумн. ин-т «Микроб». Саратов, 1992. — 10 с. — Деп. в ВИНИТИ 03.08.92.- № 2534-В.92.
  141. Т.Н., Санин А. В., Назарова JI.C. и др. Механизмы нейроиммуномодуляции формирования специфической резистентности к чуме и холере // Иммунология и специфическая профилактика ООИ: Материалы Российской научной конф. Саратов, 1993. — С. 84 — 85.
  142. Abrams W.R., Diamond L.W., Kane А.В. A flow cytometric assay of neutrophil degranulation // J. Histochemistry and Cytochemistry. 1983. — V. 31, N 6. — P. 737 -744.
  143. Allman R., Manchee R., Lloyd D. Flow cytometric analysis of heterogenous bacterial populations // In Flow Cytometry in Microbiology D. Lloyd (ed.), Springer-Verlag, London. 1993. — P. 27 — 47.
  144. Alverdy J., Holbrook C., Rocha F. et al. Gut-derived sepsis occurs when the right pathogen with the right host: evidence for in vivo virulence expression in Pseudomonas aeruginosa // Ann Surg. 2000. — V. 232. — P. 480 — 489.
  145. Anderson M.T., Armstrong S.K. The Bordetella Bfe system: growth and transcriptional response to siderophores, catechols, and neuroendocrine catecholamines // J. Bacteriol. 2006. — V. 188. — P. 5731 — 5740.
  146. Baker E.E., Sommer H.L., Foster L.B. et al. Studies on immunization against plague. I. The isolation and characterization of the soluble antigen of the Pasteurella pestis II J. Immunol. 1952. — V. 47. — P. 131 — 145.
  147. Barlogie В., Spidzer G., Hart G.S. et al. DNA histogram analysis of human hemopoetic cells // Blood. 1976. — V.48, N2. — P. 245 — 257.
  148. Bashaw J., Norris S., Weeks S. et al. Development of in vitro correlate assay of immunity to infection with Yersinia pestis II Clinical and vaccine immunology. -2007. V. 14, N 5. — P. 605 — 616.
  149. Begier E.M., Asiki G., Anywaine Z. et al. Pneumonic plague cluster, Uganda, 2004 // Emerging Infectious Diseases. 2006. — V. 12, N3. — P. 460 — 467.
  150. Belay Т., Sonnenfeld G. Differential effects of catecholamines on in vitro growth of pathogenic bacteria // Life Sci. 2002. — V. 71. — P. 447 — 456.
  151. Benedict C.R., Mathew В., Rex K.A. et al. Correlation of plasma serotonin changes with platelet aggregation in an in vivo dog model of spontaneous occlusive coronary thrombus formation // Circ. Res. 1986. — V. 58. — P. 58 — 67.
  152. Betten A., Dahlgren C., Hermodsson S., Hellstrand K. Serotonin protects NK cells against oxidatively induced functional ingibition and apoptosis // J. Leukocyte Biology. 2001. — V. 70. — P.65 — 72.
  153. Betten A., Dahlgren C., Mellqvist U.-H. et al. Oxygen radical-induced natural killer cell dysfunction: role of myeloperoxidase and regulation by serotonin // J. Leukocyte Biology. 2004. — V. 75. — P. 1111 — 1115.
  154. Beye E., Steen H.B. Flow cytometry of bacteria: a promising tool in experimental and clinical microbiology // J. Gen. Microbiol. 1983. — V.129, N 4. — P. 971 — 978.
  155. Bliznakov E.G. Serotonin and its precursors as modulators of the immunological responsiveness in mice // J. Med. 1980. — V. 11(2−3). — P. 81 — 105.
  156. Borovikova L.V. Vagus nerve stimulation attenuates the systemic inflammatory response to endotoxin // Nature. 2000. — V. 405. — P. 458 — 462.
  157. Bride M.D., Aroskar V.A., Datta N.K. Release of activite substances by cholera toxin // Indian J. Med. Res. 1970. — V. 58. — P. 548 — 550.
  158. Burton C.L., Chhabra S.R., Swift S. et al. The growth response of Escherichia coli to neurotransmitters and releted catecholamine drugs requires a functional enterobactin biosynthesis and uptake system // Infect. Immun. 2002. — V. 70. -P.5913 — 5923.
  159. Butts C.L., Sternberg E.M. Neuroendocrine factors alter host defense by modulating immune function // Cell Immunol. 2008. — V. 252(1 — 2). — P. 7 — 15.
  160. Chen C., Brown D.R., Xie Y. et al. Catecholamines modulate Escherichia coli 0157: H7 adherence to murine cecal mucosa // Chock. 2003. — V.20, N 2. — P. 183 -188.
  161. Chromy B.A., Choi M.W., Murphy G.A. et al. Proteomic characterization of Yersinia pestis virulence // J. Bacteriol. 2005. — V. 187, N 23. — P. 8172 — 8180.
  162. Clarke M.B., Hughes D.T., Zhu C. et al. The QseC sensor kinase: a bacterial adrenergic receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006. — V. 103. — P. 10 420 -10 425.
  163. Clarke R.A. Finding the right balance against bioterrorism // Emerging Infectious Diseases. 1999. — V.5, N 4. — P.497.
  164. Cohen J. M. Caspases: the executioners of apoptosis // Biochem J. 1997. — V. 326.-P. 1 — 16.
  165. Cornelis G.R., Boland A., Boyd A.P. et al. The virulence plasmid of Yersinia, an antihost genome // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. — V.62. — P. 1315 — 1352.
  166. DeLeo F.R., Hinnebusch B.J. A plague upon the phagocytes // Nature Medicine. -2005. V. l 1, N 9. — P. 927−928.
  167. Ehlers S., Bulfone-Paus S. Shaping adaptive immunity against pathogens: the contribution of innate immune responses // Noved Vaccination Strategies. Ed. By Stefan H.E. Kaufmann. — WILEY — VCH Verlag GmbH& Co. KgaA, Weinheim. -2004. -P.19 — 50.
  168. Emau P., Giri S.N., Bruss M.L. Comparative effects of smooth and rough Pasteurella hemolytica lipopolysaccharides on arachidonic acid, eicosanoids, serotonin, and histamine in calves // Circ Scock. 1986. — V.20, N 3. — P. 239 — 253.
  169. Fallah H.A., Maillard J.L., Voisin G.A. Regulatory mast cells. I. Suppressive action of their products on an in vitro primaty immune reaction I I Ann. Immunol. — 1975. — V. 126.-P. 669−673.
  170. Feng B. S., He S. H., Zheng P. Y. et al. Mast cells play a crucial role in Staphylococcus aureus peptidoglycan-induced diarrhea // Am J. Pathol. 2007. — V. 171 (2).-P. 537−547.
  171. Fields K., Straley S. LcrV of Yersinia pestis enters infected eukariotic cells by a virulence plasmid-independed mechanism // Infect. Immun. 1999. — V. 67, N 9. — P. 4801 -4813.
  172. Forslund O., Wong L.M.S., Lee P.F.P. et al. The response of murine macrophages to infection with Yersinia pestis as revealed by DNA microarray analysis // 8 th Intern. Symposium on Yersinia, September 4−8, 2002, Turku, Finland, 2002. P. 97 — 98.
  173. Freestone P.P., Haigh R.D., Lyte M. Specificity of catecholamine — induced growth in Escherichia coli 0157: HL, Salmonella enterica and Yersinia enterocolitica И FEMS Microbiol. Lett. 2003. — V. 222, N 1. — P. 39 — 43.
  174. Freestone P.P., Haigh R.D., Williams P.H., Lyte M. Involment of enterobactin in norepinephrine-mediated iron supply from transferring to enterohaemorragic Escherichia coli// FEMS Microbiol. Lett. 2007(b). — V. 262, N 2. — P. 221 — 228.
  175. Freestone P.P., Lyte M., Neal C.P. et al. The mammalian neuroendocrine hormone norepinephrine supplies iron for bacterial growth in the presence of transferring or lactoferrin // J. Bacteriol. 2000. — V. 182. — P. 6091 — 6098.
  176. Freestone PP, Sandrini SM, Haigh RD, Lyte M. Microbial endocrinology: how stress influences susceptibility to infection // Trends Microbiol. 2008. — V. 16(2). -P. 55−64.
  177. Freestone P.P., Williams P.H., Maggs A.F. et al. Growt stimulation of intenstinal commensal Escherichia coli by catecholamines: a possible contributory factor in trauma-induced sepsis // Shock. 2002. — V. 18. — P. 465 — 470.
  178. Genaro A.M., Borda E. Alloimmunisation-induced changes in P-adrenoreceptor expression and cAMP on В lymphocytes // Immunopharmacology. 1990. — V. 18, N l.-P. 63−70.
  179. Gershon M.D., Tamir H. Serotonectin and family of proteins that bind serotonin // Biochem. Pharmacol.- 1984.- V. 33.-P. 3115−3119.
  180. Green B.T., Lyte M., Chen C. et al. Adrenergic modulation of Escherichia coli 0157: H7 to the porcine colonic mucosa // J. Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 2004. — V. 287. — P. 1238 — 1246.
  181. Greenberg E.P., Winans S., Fugua C. Quorum sensing by bacteria // Ann. Rev. Microbiol. 1996. — V. 50. P. 727 — 751.
  182. Halper J.P., Mann J.J., Weksler M.E. et al. Beta adrenergic recepters and cyclic AMP levels in intact human lymphocytes: effects of age and gender // Life Sci. -1984. V. 35, N 8. — P. 855 — 863.
  183. Helene C., Dimicoli J.L., Brun F. Binding of tryptamine and 5-hydroxytryptamine (serotonin) to nucleic acids. Fluorescence and proton magnetic resonance studies // Biochemistry. 1971. — V.10, N 20. — P. 3802 — 3809.
  184. Hellstrand К., Czerkinsky С., Ricksten A. et al. Role of serotonin in the regulation of interferon-gamma production by human natural killer cells // J. Interferon Res. -1992.-V. 13.-P. 33−38.
  185. Hellstrand K., Hermodsson S. Role of serotonin in the regulation of human natural killer cell cytotoxicity //J. Immunol. 1987. -V. 139, N 3. — P. 869 — 875.
  186. Hellstrand K., Hermodsson S. Enhancement of human natural killer cell cytotoxicity by serotonin: role of non-T/CD16+ NK cells, accessory monocytes, and 5-HT1A receptors // Cell. Immunol. 1990. — V. 127. — P. 199 — 214.
  187. Hellstrand K., Kylefjord H., Asea A., Hermodsson S. Regulation of the natural killer cell response to interferon-a by biogenic amines // J. Interferon Res. 1992. -V.12.-P. 199−206.
  188. Heron D.S., Shinitzky M., Hershkowitz M. et al. Lipid fluidity markedly modulates the binding of serotonin to mouse brain membranes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. — V. 77. — P. 7463 — 7467.
  189. Hills Т., Brockie P.J., Maticq A.V. Dopamine and glutamate control area-restricted search behavior in Caenorhabditis elegans II J. Neuroscience. 2004. — V. 24, N5-P. 1217−1225.
  190. Hirafuji M., Minami M., Endo T. et al. Intracellular regulatory mechanisms of 5-HT release from enterochromaffin cells in intestinal mucosa // Biogenic amines. -2000.-V. 16, N l.-P. 29−52.
  191. Hoffman R.A., Hansen W.P. Immunofluorescent analysis of blood cells by flow cytometry // Int. J. Immunopharmac. 1981. — V. 3, N 3. — P. 249- 254.
  192. Horwitz H.R., Chalfie M., Trent C. et al. Serotonin and octopamine in the nematode Caenorhabditis elegans II Science. 1982. — V. 216. — P. 1012 — 1014.
  193. Hori Y., Nichei Y., Kurokawa Y. et al. Accelerated clearance of Escherichia coli in experimental peritonitis of histamine-deflcient mice // J. Immunol. 2002. — V. 169(4).-P. 1978−1983.
  194. Hsu S.C., Johansson K.R., Donahne M.J. The bacterial flora of the intestine of Ascaris suum and 5-hydroxytryptamine production // J. Parasitol. 1986. — V.72. -P.545 — 549.
  195. Iken К., Cheng S., Fargin A. et al. Serotonin upregulates mitogen-stimulated В lymphocyte proliferation through 5-HTIA receptors // Cell. Immunol. 1995. — V. 163.-P. 1−9.
  196. Jarrett C.O., Deak E., Isherwood K.E. et al. Transmission of Yersinia pestis from an infectious biofilm in the flea vector // J. Infect. Dis. 2004. — V. 190, N 4. — P.783 -792.
  197. Jeffrey J.J., Ehlich L.S., Roswit W.T. Serotonin: an inducer of collagenase in myometrial smooth muscle cells // J. Cell Physiol. 1991. — V.146, N 3. — P.399 -406.
  198. Khan M.M., Keaney K.M., Melmon K.L. Histamineregulates the generation of human cytolytic T lymphocytes // Cell. Immunol. 1989. — V. 121, N 1. — P. 60 — 73.
  199. Kell D.B., Ryder H.M., Kaprelyants A.S., Westerhoff H.V. Quentifying heterogeneity: flow cytometry of bacterial cultures // Antonie van Leeuwenhoek. -1991.-V. 60.-P.145- 158.
  200. Kinney K.S., Austin C.E., Morton D.S., Sonnenfeld G. Catecholamine enhancement of Aeromonas hydrophila growth // Microbial Pathogenesis. — 1999. — V. 25.-P. 85−91.
  201. Kinney K.S., Austin C.E., Morton D.S., Sonnenfeld G. Norepinephrine as a growth stimulating factor in bacteria mechanistic studies // Life Sci. — 2000. — V. 67. -P. 3075−3085.
  202. Kravtsov A.L., Grebenyukova T.P., Bobyleva E.V. et al. Flow cytofluorometric assay of human whole blood leukocyte degradation in response to Yersinia pestis and Staphylococcus aureus II Proc. SPIE. 2001. — V.4241. — P.260 — 267.
  203. Kukkonen M., Korhonen Т.К. The omptin family of enterobacterial surface proteases/adhesions: from housekeeping in Escherichia coli to systemic spread of Yersinia pestis И Int. J. Med. Microbiol. 2004. — V. 294, N 1. — P. 7−14.
  204. Kvetnoy I.M. Neuroimmunoendocrinology: Where Is the Field for Study? // NEL. 2002. — V.23, N.2. — P. 119 — 120.
  205. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins During the Assembly of the Head of Bacteriophage T4 // Nature. 1970. — V. 227, N 15. — P. 680 — 685.
  206. Lang К., Drell T.L., Niggemann В. et al. Neurotransmitters regulate the migration and cytotoxicity in natural killer cells // Immunol. Lett. 2003. — V. 90. — P. 165 — 172.
  207. Lebaron P., Joux F. Flow cytometric analysis of the cellular DNA content of Salmonella typhimurium and Alteromonas haloplanktis during starvation and recovery in seawater // Appl. Environ. Microbiology. 1994. — V. 60, N 12. — P. 4345 — 4350.
  208. Lett-Brown M.A., Kalman V., Klimpel G.R. Histamine production by alloantigen-activated mouse bone marrow cells // Cell. Immunology. 1984. — V. 87, N 1. — P. 53 -64.
  209. Leurs R., Beusenberg F.D., Bast A. et al. Identification of (32-adrenoreceptors on guinea pig alveolar macrophages using (-)-3- I. iodocyanopindol // Inflammation. -1990. V. 14, N 4. — P. 421 — 426.
  210. Liepins A., LeFever A., Truitt R.L. Serotonin modulated Ca4^ dependent K+ channels in alloimmune effector cell lytic function // Immunopharmacol. and lmmunotoxicol. 1989. — V. l 1, N 2−3. — P. 165 — 178.
  211. Lyte M. The role of microbial endocrinology in infectious disease // J. Endocrinol. 1993.-V.137.-P.343 -345.
  212. Lyte M. Microbial endocrinology and infectious disease in the 21 st century // Trends Microbiol. 2004. — V. 12(1). — P. 14−20.
  213. Lyte M., Auralanandam В., Frank C.D. Production of Shiga-liketoxins by Escherichia coli 0157: H7 can be influenced by the neuroendocrine hormone norepinephrine // J. Lab. Clin. Med. 1996(a). — V. 128. — P. 392 — 398.
  214. Lyte M., Erickson A. K., Arulanandam B. et al. Norepinephrine-induced expression of the K99 pilus adhesion of enterotoxigenic Escherichia coli II Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. — V. 232. — P. 682 — 686.
  215. Lyte M., Frank C.D., Green B.T. Production of an autoinducer of growth by norepinephrine cyltured Escherichia coli 0157: H7 // FEMS Microbiol. Lett. -1996©.-V. 139.-P. 155 159.
  216. Lyte M., Freestone PP., Neal CP. et al. Stimulation of Staphylococcus epidermidis growth and biofilm formation by catecholamine inotropes // Lancet. 2003. — V. 361. -P. 130- 135.
  217. Magerl M., Lammel V., Siebenhaar F. et al. Non-pathogenic commensal Escherichia coli bacteria can inhibit degranulation of mast cells Text. // Exp. Dermatol. 2008. — V. 17(5). — P. 427 — 435.
  218. Mandell A.J., Knapp S. Regulation of serotonin biosynthesis in brain: role of the high affinity uptake of tryptophan into serotonergic neurons // Fed. Proc. 1977. -V.36, N 8. — P.2142 — 2148.
  219. Marketon M.M., DePaolo R.W., DeBord K.L., Schneewid O. Plague bacteria tavget immune cells dutiry infection // Science. 2005. — V.309. — P. 1739 — 1741.
  220. McCutcheon M.J., Miller R.G. Fluorescence intensity resolution in flow systems Text. // J. Histochemistry and Cytochemistry. 1979. — V.27, N1. — P.246 — 249.
  221. Mekoi Y.A., Bender E.M., Zapata-Sirrent R. et al. The effect of histamine receptor antagonists on specific suppression of experimental contact sensitivity // J. Allerg. And Clin. Immunol. 1985. — V. 76, N 1. — P. 90 — 96.
  222. Melamed M.R., Adams L.R., Traganos F. et al. Acridine orange metachromasia for characterization of leukocytes in leukemia, limphoma, and other neoplasms // Cancer. 1972. — V. 29. — P. 1361 — 1368.
  223. Miller M., Bassler B. Quorum sensing in bacteria // Annu. Rev. Microbiol. 2001. -V. 55.-P. 165- 199.
  224. Minkowski M., Lebel В., Arnold A., Dy M. Interleukine 3 induces histamine synthesis in the human hemopoietic system // Exp. Hemathol. 1990. — V. 18, N 11. -P. 1158- 1163.
  225. Morale M.C., Earinella Z., Marhetti R. Central nervous system (CNS) modulation of immune system development: role of the thymic beta2-adrenergic receptor // Pharmacol. Res. 1990. — V. 27, N 1. — P. 47 — 48.
  226. Morken J.J., Warren K.U., Rodriguez J.L., Lyte M. Epinephrine as a mediator of pulmonary neutrophil sequestration // Shock. 2002. — V. 18, N 1. — P. 46 — 50.
  227. Motomura Y., Ghia J.E., Wang H. et al. Enterochromaffin cell and 5-hydroxytryptamine responses to the same infectious agent differ in Thl and Th2 dominant environments // Gut. 2008. — V. 57(4). — P. 475 — 81.
  228. Munoz J.J., Arai H., Cole R.L. Mouse-protecting and histamine-sensitizing activities of pertussigen and fimbrial hemagglutinin from Bordetella pertussis II Infect. Immun. 1981. — V. 32, N 1. — P. 243 — 250.
  229. Munoz-Bellido J.L., Munoz-Griado S., Garcia-Rodriguez J.A. Antimicrobial activity of psychotropic drugs: selective serotonin reuptake inhibitors // Int. J. Antimicrob. Agents. 2000. — V. 14, N 3. — P. 177 — 180.
  230. Nicholson A.C., Unger E.R., Mangalathu R. et al. Exploration of neuroendocrine and immune gene expression in peripheral blood mononuclear cells // Brain Res. -2004. V. 129 (1 — 2). — P. 193 — 197.
  231. Oberbeck R. Adrenergic modulation of syrvival and cellular immune functions during polimicrobial sepsis // J. Neuroimmunomodulation. 2004. — V. 11. — P. 214 — 223.
  232. Oh C., Okamoto H., Nakano K. Regulation of lymphocyte blastogenesis by histamine produced in system per se // Agr. And Biol. Chem. 1989. — V. 53, N 2. -P. 377−382.
  233. Okamoto H., Nakano K. Regulation of interleukin-l syntesis by histamine produced by mouse peritoneal macrophages per se // J. Immunology. 1990. — V. 69, N l.-P. 162- 165.
  234. Olsson M., Rundguist I., Brunk U. Flow cytofluorometry of lysosomal acridine orange uptake by living cultured cells // Acta pathol., microbial., immunol. Scand. -1987.-V. 95, N4.-P. 159- 165.
  235. Paegelow J., Lange P. Pharmacological studies on lymphocytes. 2. Effects of indole derivates and their antagonists on the lymphocyte migration // Agents Actions.- 1984. V. 15.-P. 361 -365.
  236. Panse M.V., Dutta N.K. Release of histamine by cholera toxin // Arch. Inter. Pharmacodyn. 1963. — V. 145. — P. 479 — 488.
  237. Parrino S., Hotchkiss R.S., Bray M. Preventation of immune cell apoptosis as potential thevapentic strategy for sovere infections // Emerging Infections Diseases. -2007. V. 13, N2.-P.191 — 198.
  238. Permin H., Skov P. S., Norn S. et al. Text. // Platelet 3H-serotonin releasing immune complexes induced by Pseudomonas aeruginosa in cystic fibrosis // Allergy.- 1982. V. 37(2). — P. 93 — 100.
  239. Perry R.D., Fetherston J.D. Yersinia pestis — Ethiologic agent of plague // Clinical Microbiology Reviews. -1997. V. 10 (1). — P. 35−66.
  240. Phillips A.P., Martin K.L. Direct and indirect immunofluorescence analysis of bacterial populations by flow cytometry // J. Immunol. Meth. 1987. — V.101, N 2. -P. 219−228.
  241. Pujol J., Buguet A., Froment J et al. The central metabolism of serotonin in the cat during insomnia: a neurophysiological and biochemical study after administration of the raphe system // Brain Res. 1971. — V. 29. — P. 195 — 212.
  242. Reichenbach H. Myxobacteria: A most peculiar group of social prokaryotes Text. // Myxobacteria: development and cell interaction / Ed. Rosenberg E., Berlin, N.Y., Heidelberg, Tokyo: Springer-Verlag. 1984. — P. 1−51.
  243. Richard J.L., Grimes D.E. Bioterrorism: class A agents and their potential presentations in immunocompromised patients // Clin. J. Oncol. Nurs. 2008. — V. 12(2).-P. 295−302.
  244. Rocklin R.E., Greineder D., Littman B.H., Melmon K.L. Modulation of cellular immune function in vitro by histamine receptor-bearning lymphocytes: Mechanism of action // Cell. Immunology. 1978. — V. 37, N 1. — P. 162 — 173.
  245. Rocklin R.E., Beard J., Gupta S. et al. Characterization of the human blood lymphocytes that produce a histamine induced suppression factor // Cell. Immunology. 1980.-V. 51.-P. 226−230.
  246. Sabroe I., Jones E.C., Usher L.R. et al. Toll-like receptor (TLR)2 and TLR4 in human peripheral blood granulocytes: a critical role for monocytes in leukocyte lipopolysaccharide responses // J. Immunol. 2002. — V. 168. — P. 4701 — 4710.
  247. Sanyal S., Wintle R.F., Kindt K.S. et al. Dopamine modulates the plasticity of mechanosensory responses in Caenorhabditis elegans //Embo J. 2004. — V. 23. — P. 473 -482.
  248. Savageau M.A. Regulation of differentiated cell specific functions // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. — 1982. -V. 80, N 5 -P.1411 — 1415.
  249. Sebbane F., Jarrett C.O., Gardner D. et al. Role of the Yersinia pestis plasminogen activator in the incidence of distinct septicemic and bubonic forms of flea-borne plague // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006. — V. 103, N 14. — P. 5526 — 5530.
  250. Sidibe S., Saal F., Rhodes-Feuillette A. et al. Effects of serotonin and melanin on in vitro HIV-1 infection // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 1996. — V.10 (1). — P.19 -24.
  251. Skarstad K., Bernander R., Wold S. et al. Cell cycle analysis of microorganisms // Flow cytometry applications in cell culture / Eds M. Al-Rubeai and A.N. Emery. -Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1996. P. 241 — 255.
  252. Slauson D.O., Walker C., Kristensen F., deWeck A.L. Mechanisms of serotonin-induced lymphocyte proliferation ingibition // Cell. Immunology. 1984. — V. 84. — P. 240−252.
  253. Smart L.M., Kay A.B. Histamine receptors on human peripheral blood leucocytes // Clin. exp. Immunol. 1981. — V. 44. — P. 581 — 586.
  254. Soliven В., Nelson D J. Beta-adrenergic modulation of K+ current in human T lymphocytes // J. Membrane Biol. 1990. — V. 117, N 3. — P. 261 — 274.
  255. Sperandio V., Torres A.G., Jarvis B. et al. Bacteria-host communication: the language of hormones // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. — V.100. — P.8951 -8956.
  256. Steen H.B., Boye E. Escherichia coli growth studied by dual-parameter flow cytophotometry//J. Bacteriol. 1981. — V.145.-P.1091−1094.
  257. Steen H.B., Boye E., Starsted K. et al. Applications of flow cytometry on bacteria: cell cycle kinetics, drug effects and antibody binding // Cytometry. 1982. — V. 2, N 4.-P. 249−256.
  258. Sternberg E.M., Trial J., Parker C.W. Effect of serotonin on murine macrophages: upression of la expression by serotonin and its reversal by 5-HT2 serotonergic receptor antagonists // J. Immunol. 1986. — V. 137, N 1. — P.276 — 282.
  259. Sternberg E.M., Wedner H.J., Leung M.K., Parker C.W. Effect of serotonin (5-HT) and other monoamines on murine macrophages: modulation of interferon-y induced phagocytosis//J. Immunol. 1987.-V.138,N 12.-P. 4360−4365.
  260. Styer K.L., Hopkins G.W., Batra S.S. Yersinia pestis kills Caenorhabditis elegans by biofilm independent process that involves novel virulence factors // EMBO Report. 2005. — V. 6, N 10. — P. 992 — 997.
  261. Tamir H., Kupsky W.J., Huang Y.L., Gershon M.D. Serotonin-binding glycoprotein of rat platelets // J. Cell. Sci. 1983. — V. 62. — P. 439 — 443.
  262. Telford W., King L., Fraker P. Rapid quantitation of apoptosis in pure and heterogeneous cell populations using flow cytometry // J. Immunol. Meth. 1994. — V. 172.-P. 1 — 16.
  263. Tits L.J.H., Michel M.C., Grosse-Wilde H. et al. Catecholamines increase lymphocyte p2adrenergic receptors via a (32"adrenergic, spleen dependent process // American J. Physiol. 1990. — V. 258, N 1. — P. 191 — 192.
  264. Toninello A., Salvi M., Pietrangeli P., Mondovi B. Biogenic amines and apoptosis // Amino Acids. 2004. — V. 26, N 4. — P. 339 — 343.
  265. Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylemide gels to nitrocellulose sheets: Procedure and some application // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. — V. 76. — P. 4350 — 4354.
  266. Vago Т., Norbiato G., Baldi G. Respiratory-burst stimulants desensitize p2-adrenoreceptors on human polymorphonuclear leukocytes // Int. J. Tissue React. -1990.-V. 12, N 1. -P. 53 -58.
  267. Voigt W., Fruth A., Tschape H. et al. Enterobacterial autoinducer of growth enhances shiga toxin production by enterohemorrhagic Escherichia coli II J. Clinical Microbiology. 2006. — V.44, N 6. — P. 2247 — 2249.
  268. Walters M., Sperandio V. Quorum sensing in Escherichia coli and Salmonella II J. Med. Microbiol.-2006.-V. 296.-P. 125−131.
  269. Webster J.I., Tonelli L., Sternberg E.M. Neuroendocrine regulation of immunity //Annu. Rev. Microbiol. 2002. — V. 20. — P. 125 — 163.
  270. Weinrauch Y ., Zychlinsky A. The induction of apoptosis by bacterial pathogens //Annu. Rev. Microbiol. 1999. — V.53. — P. 155 — 187.
  271. Weinrauch Y., Drujan D., Shapiro S.D. et al. Neutrophil elastase targets virulence factors of enterobacteria // Nature. 2002. — V.417. — P. 91 — 94.
  272. Wojtecka-Lukasic E., Maslinski S. Histamine, 5-hydroxytryptamine and compound 48/80 activate PMN-leucocyte collagenase of the rat // Agents Actions. -1984.-V. 14, N3.-P. 451 -453.
  273. Zhang Y., Bliska J.B. Role of Toll- like receptor signaling in the apoptosis response of macrophages to Yersinia infection 11 Infect. Immun. 2003. — V. 71(3). -P. 1513−1519.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!