Природная очаговость, эпидемиология, лабораторная диагностика туляремии в Краснодарском крае

Актуальность проблемы.

Туляремия в недавнем прошлом являлась одним из самых распространенных природно-очаговых заболеваний на территории России, что определяло внимание исследователей к этой опасной инфекции. Однако и в настоящее время заболевания туляремией в Российской Федерации регистрируются ежегодно, а в отдельные годы проявления инфекции принимают характер эпидемических вспышек вследствие активизации её природных очагов [Ефременко В.И., Грижебовский Г. М., 1997; Мещерякова И. С., 2003]. В последние годы заболеваемость туляремией носила в основном спорадический характер, за исключением вспышки в августе-сентябре 1999 г. в Кизлярском и Тарумовском районах Республики Дагестан, когда заболели 64 человека [Онищенко Г. Г., 2001; Ти-хенко Н.И. с соавт. 2001].

Природные очаги туляремии на Северном Кавказе по своим ландшафтно-географическим и другим особенностям характеризуются широким разнообразием, и границы их до настоящего времени могут быть очерчены лишь ориентировочно. Особенности ландшафтно-географичсских условий обусловливают существование различных биоценозов, обеспечивающих циркуляцию возбудителя туляремии в природе и формирование нескольких типов природных очагов этой инфекции.

Т.В. Устин-Петрова [1963] выделила на территории Краснодарского края два ландшафтных типа природных очагов: равнинно-степной и предгорно-ручьевой. При этом к равнинно-степному типу были отнесены два территориально разобщенных очага, а именно: Западный (Приазовский) и Восточный (Прикубапский). В дальнейшем И. А. Калашников [1991], В. М. Костюковский [2001] и другие в своих работах также придерживались этой типологической классификации.

В настоящее время обширная территория (80−90%) Краснодарского края, ранее считавшаяся энзоотичной по туляремии, распахана под посевы сельскохозяйственных культур и заселена одними и теми же видами мелких млекопитающих и кровососущих насекомых. Результаты преобразующей деятельности человека привели не только к изменению биоценотической структуры очагов на территории Краснодарского края, но и к снижению их эпизоотического и эпидемического потенциала. Однако природные очаги туляремии продолжают активно функционировать и представляют постоянную эпидемическую опасность.

В связи с этим, первостепенное значение приобретают вопросы разработки научно-обоснованной тактики эпизоотологического надзора и совершенствование лабораторных методов исследования полевого материала на туляремию. Особую роль приобретают методы молекулярно-генетического анализа, результаты которого могут быть использованы в целях дифференциации циркулирующих на разных территориях штаммов туляремийного микроба. Представляется необходимым дальнейшее изучение влияния антропогенной воздействия на пространственно-биоценотическую и функциональную структуру природных очагов туляремии в Краснодарском крае с целью получения объективной информации об их современном состоянии и планирования профилактических мероприятий.

Цель и задачи исследования

.

Цель работы — изучение особенностей ландшафтно-географической и биоценотической структуры природных очагов туляремии на территории Краснодарского края, их эпизоотической и эпидемической активности.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

— изучить характер изменений пространственной и биоценотической структуры природных очагов туляремии на территории Краснодарского края в зависимости от антропогенного воздействия в период с 1971 г. по 2004 г.;

— охарактеризовать динамику эпизоотического процесса в разных частях нозоареала туляремии в последние десятилетия;

— изучить пространственно-временные особенности заболеваемости людей туляремией в Краснодарском крае;

— осуществить эпидемиологическое районирование территории Краснодарского края по степени риска заражения туляремией;

— провести генетическое типирование штаммов туляремийного микроба;

— усовершенствовать методы лабораторного исследования полевого материала на туляремию.

Научная новизна работы.

Получены новые данные о ландшафтно-географической и биоценотиче-ской структуре природных очагов туляремии в Краснодарском крае. Установлено, что природный очаг туляремии степного типа располагается в двух ланд-шафтно-географических районах — равнинно-степном и предгорном. По биоце-нотическим признакам он является полигостальным и поливекторным. Роль основных носителей выполняют обыкновенная полевка, домовая и лесная мыши. Из переносчиков наиболее распространенными видами являются I. ricinus и D. margmatus, обитающие во всех ландшафтах.

Впервые установлено, что Западный Приазовский и Восточный Прику-банский природные очаги туляремии степного типа на территории Краснодарского края стали в настоящее время относительно автономными друг от друга.

Интенсивное антропогенное воздействие на очаг туляремии степного типа в течение последних 30 лет привело к снижению его эпизоотической активности. Эпизоотические и эпидемические проявления в очаге с 1971 г. по 2004 г. были зарегистрированы на территории десяти районов в юго-восточной части Краснодарского края и трех районов на западе.

На основании анализа эпидемических и эпизоотических проявлений туляремии за последние 30 лет впервые проведено эпидемиологическое районирование территории Краснодарского края по степени риска заражения туляремией и выявлены наиболее опасные в эпидемиологическом отношении районы.

Административные территории края разделены на две группы: районы повышенного и низкого риска заражения туляремией.

Впервые проведено генетическое типирование методом MLVA штаммов туляремийного микроба, выделенных в Краснодарском и Ставропольском краях на территории очага туляремии степного типа, и выявлено девять генотипи-ческих вариантов возбудителя.

Показано, что на территории природных очагов туляремии Краснодарского края среди основных носителей имеет место циркуляция штаммов возбудителей бактериальных природио-очаговых инфекций: лептоспироза, кишечного иерсиниоза, листериоза, а также сальмонеллезов и эризипелоида.

Установлено, что разработанная нами в соавторстве с М. П. Маевским селективная питательная среда может быть применена при эпизоотологическом обследовании территории для выделения чистой культуры туляремийного микроба и позволяет культивировать единичные микробные клетки Francisella tillaren sis.

Показана эффективность применения твердофазных иммунных сорбентов при исследовании воды природных водоемов на наличие возбудителя туляремии.

Научно-практическая значимость результатов исследования.

Полученные в результате проведенных исследований данные, позволили оцепить характер и последствия антропогенного воздействия на природные комплексы в Краснодарском крае, обусловившие изменение интенсивности эпизоотического процесса в природных очагах туляремии, что явилось основанием для оптимизации проведения эпизоотологического надзора по туляремии, осуществления эпидемиологического мониторинга и планирования профилактических мероприятий. Предложена дифференциация территории Краснодарского края по степени риска заражения туляремией, выявлены административные районы, наиболее опасные в эпидемиологическом отношении.

Показана практическая ценность УШП-анализа при изучении генетического полиморфизма Еш1агепьчя для выявления особенностей биоценотической структуры природных очагов туляремии и эволюционных взаимоотношений штаммов возбудителя, циркулирующих на отдельных участках очаговости.

Предложены методы подготовки проб воды с применением твердофазных иммуносорбентов при проведении бактериологического и ПЦР анализа воды открытых водоемов на туляремию.

Показана эффективность применения питательной среды Маевского при исследовании полевого материала на туляремию. Среда проста в приготовлении, не требует стерилизации автоклавированием и добавки дополнительных компонентов при исследовании полевого материала.

На основании полученных данных разработаны методические рекомендации «Применение угольно-иммунных сорбентов для выделения туляремий-ного микроба из воды», одобренные Ученым Советом, утвержденные директором Ставропольского научно-исследовательского противочумного института 30.01.03 г. (протокол № 1) — методические рекомендации «Применение поли-меразной цепной реакции и магнитных иммунных сорбентов для выявления туляремийного микроба в воде открытых водоемов», одобренные Ученым Советом, утвержденные директором Ставропольского научно-исследовательского противочумного института 26.06.03 г., (протокол № 6) — составлен «Атлас природного очага туляремии на Северном Кавказе», одобренный Ученым Советом, утвержденный директором Ставропольского научно-исследовательского противочумного института 28.01.05 г. (протокол № 1).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. В результате антропогенного воздействия природный очаг туляремии степного типа в современных условиях является наиболее активным на территории Краснодарского края. Он располагается в двух ландшафтно-географичес-ких районах — равнинно-степном и предгорном.

2. Анализ территориальной приуроченности официально зарегистрированных случаев туляремии среди людей и эпизоотических проявлений инфекции позволяет выделить на территории Краснодарского края районы высокого и низкого риска заражения, а также не энзоотичную по туляремии территорию.

3. В природном очаге туляремии степного типа на территории Краснодарского и Ставропольского краев циркулирует девять генотипов туляремий-пого микроба.

4. Методы лабораторной диагностики с применением угольных и магнитных иммунных сорбентов обеспечивают преимущества (по времени и чувствительности) при детекции возбудителя туляремии в воде природных водоемов по сравнению с традиционными приёмами лабораторной техники.

5. Использование питательной среды Маевского эффективно при исследовании полевого материала на туляремию.

Апробация работы и публикации результатов исследования.

Изложенные в работе материалы были представлены и обсуждены на научно-производственных Советах Новороссийской противочумной станции (1997 — 2002 г. г.), Региональном совещании по профилактике карантинных и особо опасных инфекций, рабочем совещании ЦГСЭН по вопросам санитарной охраны территории Кавказа (Ставрополь, 1998 г.), юбилейной научно-практической конференции «Эпидемиологическая безопасность на Кавказе. Итоги и перспективы» (Ставрополь, 2002), Межгосударственной научнопрактической конференции «Современные технологии в диагностике особо опасных инфекционных болезней» (Саратов, 2003).

Основные материалы диссертационной работы изложены в 17 научных публикациях.

Структура и объём работы.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка использованной литературы, включающего 172 работы отечественных и 11 зарубежных авторов. Работа изложена на 136 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 рисунками и 10 таблицами.

выводы.

1. Получены новые данные о ландшафтно-географической и биоценоти-ческой структуре природных очагов туляремии в Краснодарском крае. Установлено, что природный очаг туляремии степного типа располагается в двух ландшафтно-географических районах — равнинно-степном и предгорном. По биоценотическим признакам он является полигостальным и поливекторным. Роль основных носителей выполняют обыкновенная полевка, домовая и лесная мыши. Из переносчиков наиболее распространенными видами являются 1. ricinus и D. marginatus.

2. Впервые показано, что в современных условиях Западный Приазовский и Восточный Прикубанский природные очаги туляремии степного типа на территории Краснодарского края стали относительно автономными друг от друга.

3. Интенсивное антропогенное воздействие на очаг туляремии степного типа в течение последних 30 лет привело к снижению его эпизоотической активности. Эпизоотические и эпидемические проявления в очаге в 1973;2004 гг. были зарегистрированы на территории 10 районов в юго-восточной части Краснодарского края и 4 районах на западе.

4. На основании анализа эпидемических и эпизоотических проявлений туляремии за последние 30 лет впервые проведено эпидемиологическое районирование территории Краснодарского края по степени риска заражения и выявлены наиболее опасные в эпидемиологическом отношении районы. Административные территории края разделены на две группы: районы повышенного и низкого риска заражения туляремией.

5. Выявлено девять yNTR генотипов F. tularensis, циркулирующих на территории Краснодарского и Ставропольского краев. Анализ их распространения показал, что для Западного Приазовского очага были характерны два из них. Штаммы, выделенные па территории Восточного Прикубанского очага в.

1989 г., имели УШИ генотип, идентичный со штаммами, выделенными в Ставропольском степном очаге в этом же году и ранее в 1986 г.

6. Установлено, что на территории природных очагов туляремии Краснодарского края среди основных носителей имеет место циркуляция возбудителей бактериальных природно-очаговых инфекций: лептоспироза, кишечного иерси-ниоза, листериоза, а также сальмонеллезов и эризипелоида.

7. Показано, что разработанная нами в соавторстве с М. П. Маевским селективная питательная среда может быть применена при эпизоотологическом обследовании территории для выделения чистой культуры туляремийного микроба и позволяет культивировать единичные микробные клетки Р. пйагетм. Среда проста в приготовлении, не требует стерилизации автоклавированием и добавки дополнительных компонентов при исследовании полевого материала.

8. Применение угольно-иммунного сорбента позволяет достоверно увеличить вероятность выделения возбудителя туляремии в пробах исследуемой воды при его низкой концентрации. Сочетанное применение магнитных иммунных сорбентов и ПЦР может использоваться как ускоренный предварительный метод обнаружения туляремийного микроба в воде открытых водоемов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Итоги многолетних исследований эпизоотической активности, пространственной и биоцснотической структуры природных очагов туляремии на территории Краснодарского края позволяют констатировать, что очаг степного типа в течение всего периода наблюдений с 1971 г. и по настоящее время находится в активном состоянии. Однако интенсивная сельскохозяйственная деятельность человека на территории очага в последние десятилетия прошлого века привела к снижению его эпизоотической активности и изменению характера течения эпизоотий, которые регистрируются на ограниченных его участках. Эпизоотические и эпидемические проявления в степном очаге с 1971 г. по 2004 г. были отмечены в десяти административных районах в юго-восточной части Краснодарского края и четырех районах на западе. Известно, что активное антропогенное преобразование природных комплексов создает предпосылки для уменьшения эпизоотического потенциала степного очага туляремии, но не приводит к полному его оздоровлению, возбудитель туляремии продолжает циркулировать в биотопах, прилегающих к сельскохозяйственным угодьям, не подвергшихся вспашке [Пилипенко В.Г. с соавт., 1959; Пили-пенко В.Г., Щекина Т. А., 1978], чем обусловливается стойкость и длительность существования ареала инфекции.

В противоположность этому, антропогенное воздействие на очаги туляремии, расположенные в предгорном и лиманно-плавневом районах Краснодарского края, привело к снижению их эпизоотического потенциала или трансформации в другой ландшафтно-эпидемиологический тип. Так, в лиманно-плавневом районе тростниковые плавни подверглись значительному осушению вплоть до приазовских лиманов. В результате такого фундаментального воздействия водяная полевка, которая ранее являлась здесь одним из основных носителей, лишилась естественных мест обитания. В предгорных районах на пологих склонах широколиственные леса в течение многих лет подвергались активной вырубке в целях подготовки площади для пастбищ и сенокосов. В настоящее время это привело к остепнению и аридизации этих ландшафтов. Малые реки и ручьи пересыхают, поэтому и здесь водяная полевка становится редким видом и утратила свое эпизоотологическое значение, а роль основного носителя перешла к обыкновенной полевке.

По данным Е. В. Стрихановой с соавт. [1961, 1968], активные участки природных очагов туляремии за период с 1943 г. по 1960 г. регистрировались в лиманно-плавневых ландшафтах на западе края и предгорно-ручьевых на юго-востоке. Согласно нашим исследованиям, с 1973 г. эпизотии туляремии периодически регистрируются только в равнинно-степных и предгорных ландшафтах,.

В настоящее время энзоотичные по туляремии территории, ранее отнесенные к трем ландшафтным типам, распаханы на 80 — 90% под посевы сельскохозяйственных культур и заселены одними и теми же видами грызунов, оставшиеся нетронутыми естественные ландшафты энзоотичной территории изолированы друг от друга ежегодно перепахиваемыми полями. Современное состояние природного очага туляремии степного типа характеризуется тем, что он является основным для большей части территории Краснодарского края и располагается в двух ландшафтно-географических районах — равнинно-степном и предгорном. Этот ландшафтный тип природного очага занимает степную часть Кубано-Приазовской низменности (Западный Приазовский очаг), Азово-Кубанскую равнину и степную часть Прикубанской наклонной равнины между средним течением р. Кубань на севере и подножьем Большого Кавказского хребта на юге (Восточный Прикубанский очаг).

Результаты проведенного нами многолетнего изучения пространственной и биоцепотической структуры, эпизоотологических особенностей Западного Приазовского и Восточного Прикубанского природных очагов туляремии на территории Краснодарского края свидетельствуют о том, что они стали в настоящее время относительно автономными друг от друга. Эпизоотический контакт между носителями инфекции в этих очагах носит, по всей видимости, очень редкий характер в связи с изоляцией их территорий, произошедшей в результате антропогенного воздействия (распашкой значительных площадей и активным сельскохозяйственным оборотом земель). Этот вывод подтвержден результатами проведённого нами генотипирования штаммов туляремийного микроба, который является специфическим и главным компонентом в биоценозе этих природных очагов. Молекулярно — генетический анализ 35 штаммов F. lularensis показал, что для Западного Приазовского очага были характерны два VNTR генотипа, которые ранее не обнаруживались в степном очаге Центрального Предкавказья, что соответствует представлениям об относительной автономности Западного Приазовского очага [Устин-Петрова Н.Ф., 1963; Тарасов М. П., 1991; Антонов A.B.с соавт., 2001]. Вместе с тем штаммы, выделенные на территории Восточного Прикубанского очага в 1989 г., имели VNTR генотип, идентичный со штаммами, выделенными в Ставропольском степном очаге в этом же году и ранее — в 1986 г.

Природный очаг туляремии степного типа, охватывающий территорию Краснодарского края, по биоценотическим признакам относится к полигос-тальным и поливекторным. Роль основного носителя выполняют мелкие мышевидные грызуны: обыкновенная полевка, домовая и лесная мыши. Циркуляцию возбудителя туляремии осуществляют переносчики, среди которых наиболее распространенными видами являются D. marginalus и I. ricinus, обитающие во всех ландшафтах.

Результаты природообразующей деятельности сказались не только на изменении структуры очагов на территории Краснодарского края, но и привели к снижению их эпизоотического потенциала (эпизоотии регистрируются значительно реже и не носят непрерывного характера). На территории Восточного Прикубанского очага туляремии наблюдались три волны активизации эпизоотического процесса: в 1973;1974, 1978;1979, 1988;1989 г. г. Эпизоотии туляремии протекали на фоне высокой численности фоновых видов мелких млекопитающих, превышающей в эти годы 25% попадания. С 1998 г. и по настоящее время (после длительного «межэпизоотического» периода с 1960 г.) эпизоотическая активность регистрируется в Западном Приазовском очаге, которая также проявилась на фоне высокой численности фоновых видов мелких млекопитающих в осенне-зимний период, составившей в эти годы 28,5−51,7% .

Эпизоотическая активность в Восточном Прикубанском очаге проявлялась на территории 10 административных районов, индекс эпизоотичности которых здесь колебался от 0,03 до 0,09 за 30-летний период наблюдений. В Западном Приазовском очаге за этот же период эпизоотии была зарегистрированы в четырех административных районах. Индекс эпизоотичности для этих районов составил соответственно от 0,03 до 0,15.

За период с 1989 г. по 2004 г. в крае было выявлено 20 больных туляремией. В природных очагах инфекции были выделены 123 штамма туляремий-ного микроба. Случаи заболеваний регистрировались в семи календарных годах: в 1988, 1989, 1998, 2000, 2002, 2003 и 2004 г. г. Возбудитель инфекции выделяли при эпизоотологическом обследовании в 13 календарных годах (1973, 1974, 1978, 1979, 1988, 1989,1990, 1998, 1999, 2000, 2002, 2003 и 2004 гг.). Заболеваемость людей туляремией наблюдалась в шести районах и двух городах, из них 10 случаев в Крымском районе, по два случая в Успенском, Новопокров-ском и Анапском и по одному случаю в Кореновском, Белоглинском районах и городах Новороссийск и Тихорецк.

В соответствии с данными о частоте регистрации эпизоотических проявлений инфекции и случаях заболеваний людей в природных очагах туляремии за период с 1973 г. по 2004 г., административные территории края можно условно разделить на две группы: районы повышенного и низкого риска заражения. Предложенная нами дифференциация территории края на группы районов по степени их эпидемиологической значимости имеет практическое значение для планирования объёмов и обоснования эффективной тактики проведения эпизоотологического мониторинга в природном очаге, осуществления профилактических мероприятий, в том числе специфической профилактики среди населения. При этом необходимо отметить, что регулярное эпизоотологическое обследование и изучение особенностей проявления эпизоотической активности позволит в дальнейшем корректировать принадлежность территории природной очаговости туляремии к конкретным типам ландшафта в динамике их антропогенной и природно-климатической трансформации.

Проблема существования так называемых «сочетанных» природных очагов и «смешанных» инфекций, привлекает в настоящее время все большее внимание исследователей [Коренберг Э.И., 2000]. О характере возможного взаимодействия всего комплекса микроорганизмов и их резервуаров на разных уровнях биологической организации почти ничего не известно. В конечном счете, распространение определенного возбудителя, как и любого биологического вида, зависит от наличия необходимых биотических и абиотических условий, которые формируются под влиянием зональных, интразональных и экстразональных факторов [Коренберг Э.И., 1983].

Таким образом, вероятность, характер и последствия взаимного влияния совместно существующих природно-очаговых инфекций требуют специального исследования. В связи с этим нами была изучена инфицированность грызунов, отловленных в природном очаге туляремии, патогенными для человека бактериями.

На территории Краснодарского края в границах ареала туляремии существуют природные очаги других инфекций как бактериальной, так вирусной природы. От мелких млекопитающих, основных носителей туляремии в природных очагах Краснодарского края, были выделены возбудители сальмонел-леза, листериоза, лептоспироза, кишечного иерсиниоза, эризипелоида. Полученные нами результаты выявили циркуляцию на одной и той же территории края нескольких возбудителей инфекций с природной очаговостью, что может усложнять дифференциальную диагностику случаев заболеваний и проведение противоэпидемических мероприятий. В условиях роста интенсивности контакта людей с природой не исключается обострение эпидемиологической обстановки, но другим, кроме туляремии, инфекциям в сочетанных природных очагах упомянутых болезней, что следует учитывать при проведении медицинского наблюдения за населением.

В условиях снизившейся эпизоотической активности очагов туляремии и постоянно существующей в то же время угрозы заражения людей другими природноочаговыми инфекциями актуальным представляется дальнейшее совершенствование лабораторной диагностики полевого материала. Одним из актуальных направлений является усовершенствование методов лабораторной диагностики туляремии, повышение их чувствительности и сокращение длительности анализа в целях получения своевременной информации об активности эпизоотических факторов и инфицированности возбудителем объектов внешней среды, в первую очередь — воды.

Предложенные нами усовершенствования методов лабораторной диагностики туляремии основаны на многолетнем опыте работы с полевым материалом. В связи с необходимостью исследования материала, загрязненного посторонней микрофлорой, и проб из объектов внешней среды актуальной является разработка и испытание селективных питательных сред для культивирования туляремийного микроба, а также методов его концентрирования на твердофазных сорбентах.

При нашем участии [Маевский М.П.с соавт., 1994] сконструирована селективная питательная среда, удобная для работы в полевых условиях, поскольку она может быть приготовлена из сухого порошка, не нуждается в стерилизации автоклавированием, коррекции рН, фильтрации, добавлении естественных животных субстратов и других манипуляциях. Питательную основу этой среды составляет ферментативный гидролизат рыбы с добавлением дрожжевого экстракта, цистеин, глюкоза, растворимый крахмал, фиолетовый кристаллический, антибиотики, и другие ингредиенты. Среда является чувствительной, обеспечивая рост единичных клеток туляремийного микроба по.

Ill стандарту мутности ОСО 42−28−85−86П, и селективной (содержащиеся в ней антибиотики подавляют рост посторонней микрофлоры при исследовании загрязненного материала).

В практике эпизоотологического обследования на туляремию эта селективная питательная среда применялась нами как для прямого посева полевого материала, так и для исследования органов биопробных животных. Нами была показана принципиальная возможность выделения чистой культуры туляре-мийного микроба в течение 2−3 суток при исследовании иксодовых клещей и материала от грызунов прямым бактериологическим посевом в ходе эпизоотологического обследования в Отрадненском районе Краснодарского края в 1990 г. и в Крымском районе в 2000 г.

Применение твердофазных иммуносорбентов значительно расширяет возможности и результативность мониторинга за обсемененностью туляре-мийным микробом объектов внешней среды за счет увеличения объема исследуемых проб, селективной концентрации искомого микроорганизма, очистки проб от загрязняющих компонентов.

Нами разработан метод применения угольно-иммунных сорбентов при исследовании воды из внешних водоемов на туляремию. Применение угольно-иммунного сорбента позволяет достоверно увеличить вероятность выделения туляремийного микроба в пробах исследуемой воды при его низкой концентрации. Применение подготовки проб воды из открытых водоемов методом селективной концентрации микроба туляремии на УИС при бактериологическом исследовании проводятся нами с 2002 года. Всего с использованием угольно-иммуных сорбентов было исследовано 350 проб воды из шести районов Краснодарского края, в результате чего методом биопробы было изолировано тринадцать штаммов F. tnlarensis.

Нами также изучена возможность применения магнитных иммунных сорбентов в экспрессном методе обнаружения возбудителя туляремии в комбинации с ПЦР. Как показали результаты экспериментальных исследований, чувствительность метода МИС+ПЦР при исследовании воды из внешнего водоема составляет 103 мк/мл.

Применение магноммуносорбентов позволяет упростить этап концентрирования туляремийного микроба в минимальном объеме пробы путем его селективной сорбции на магнитном носителе и очистки от ингибирующих примесей без применения метода центрифугирования, а также ускорить выделение ДНК из сорбированных микробных клеток. Предлагаемый метод может быть использован как метод ускоренного обнаружения возбудителя туляремии при расследовании вспышек заболевания водного характера.