Изучение вертикального переноса генов от биозащищенных растений к их диким сородичам и традиционно возделываемым сортам
В этой связи актуальность наших исследований определяется необходимостью инструментального контроля ГМ-растений и получаемых на их основе продуктов и кормов для животноводства. Основным методом для быстрого и эффективного мониторинга ГМ-растений в настоящее время является ПЦР (полимеразная цепная реакция). Однако используемые в нашей стране методики ПЦР-детекции не достаточно эффективны и требуют… Читать ещё >
Содержание
- Глава 1
- 1. 2.
- 1. 6. 1.
- Глава 2. 2.1. 2.2.
- Обзор литературы
- Трансгенные культуры: распространение и использование в сельскохозяйственном производстве Вертикальный перенос генов
- Факторы, определяющие степень риска переноса генов
- Перенос генов к другим возделываемым сортам растений
- Биобезопасность трансгенного картофеля
- Биобезопасность трансгенной кукурузы
- Биобезопасность трансгенной сои
- Методические подходы к определению наличия трансгенов в пищевых продуктах и кормах
- Методы оценки содержания генетическимодифицированных источников
- Методы на основе полимеразной цепной реакции
ПЦР-идентификация трансгенов Неспецифическая ПЦР-детекция генетически-модифицированных источников Другие методы детекции модифицированных источников Апробация методов ГМ-детекции Материалы и методы исследований Объект исследования
Использованные материалы и оборудование Химические реактивы генетическиф 2.2.2 Оборудование
2.3 Использованные методы
2.3.1 Выделение ДНК из различных тканей растения
2.3.2 Амплификация геномной ДНК
2.3.3 Электрофорез ДНК в агарозном геле
2.3.4 Фотодокументирование продуктов амплификации
Глава 3. Результаты и обсуждение
3.1 ПЦР-детекция трансгенных растений
3.2 ПЦР-идентификация трансгенных растений
3.3 Влияние различных веществ на специфичность и
(или) выход ПЦР-реакции
3.4 Полуколичественная оценка генетическимодифицированных источников (ГМИ)
3.5 Оценка риска вертикального переноса генов от ГМкартофеля
3.6 Оценка риска вертикального переноса генов от ГМкукурузы
Выводы
- 1. 2.
Изучение вертикального переноса генов от биозащищенных растений к их диким сородичам и традиционно возделываемым сортам (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность работы. Успехи современной биотехнологии привели к созданию генно-модифицированных (ГМ) растений и их широкому внедрению в практику сельскохозяйственного производства.
Перспективным направлением в биологической защите растений является использование генно-модифицированных биозащищенных от вредителей сортов, а также сортов, устойчивых к гербицидам. Это особенно важно, если учесть, что многие вредители сельскохозяйственных культур приобрели резистентность к большинству химических инсектицидов, следствием чего является увеличение объемов их внесения, загрязнение окружающей среды и в итоге потери урожая.
Значительный вред урожаю также наносит конкуренция со стороны сорных растений. В данной ситуации имеет большое значение использование раундап-защищенных сортов сои и кукурузы, так как Раундап широко применяемый гербицид, известный своей очень высокой эффективностью и имеющий высокие показатели безопасности. Широкое использование ГМ-растений в сельскохозяйственном производстве ставит на повестку дня вопросы их биобезопасности.
Одним из аспектов биобезопасности ГМ-культур является оценка вертикального переноса генов от ГМ-растений к культурным сортам и диким сородичам. Потенциальная опасность здесь заключается в том, что новые привнесенные признаки устойчивости дадут дополнительные преимущества диким видам растений, и будут способствовать их быстрому распространению.
В этой связи актуальность наших исследований определяется необходимостью инструментального контроля ГМ-растений и получаемых на их основе продуктов и кормов для животноводства. Основным методом для быстрого и эффективного мониторинга ГМ-растений в настоящее время является ПЦР (полимеразная цепная реакция). Однако используемые в нашей стране методики ПЦР-детекции не достаточно эффективны и требуют доработки. До сих пор не разработаны рекомендации по безопасному выращиванию ГМ-культур, и, в частности, не исследованы вопросы переноса генов от трансгенных растений другим представителям биоценоза.
Цель и задачи исследований. Цель настоящей работы — оценить риск вертикального переноса генов от трансгенных биозащищенных растений кукурузы и картофеля к культурным сортам и диким сородичам. Для достижения поставленной цели в задачи исследований входило:
— модифицировать методику выделения препаратов ДНК из семян растений, для их анализа методом полимеразной цепной реакции (ПНР);
— модифицировать методы ПЦР-детекции и идентификации трансгенных растенийразработать методы полуколичественной оценки генетически-модифицированных источников (ГМИ);
— разработать методику оценки риска вертикального переноса трансгенов на примере ГМ-кукурузы, устойчивой к гербициду Раундап, и ГМ-картофеля, устойчивого к колорадскому жуку;
— определить степень риска и разработать меры по предотвращению вертикального переноса генов от раундап-защищенной кукурузы и ЕИ—защищенного картофеля к культурным сортам и диким сородичам.
Научная новизна. В настоящей работе: представлена модифицированная методика выделения ДНК по Дорохову и Клоке (1997) применительно к семенам растений, пригодная для проведения ПЦР;
— повышена эффективность методов детекции и идентификации трансгенных растений посредством оптимизации условий проведения ПЦР-реакции и подбора специфичных праймеров, а также использованием в реакции дополнительных положительных контролей;
— разработана методика полуколичественной оценки генетическимодифицированных источников на основе амплификации участка целевого гена;
— оценен риск и разработаны меры по предотвращению вертикального переноса генов от генно-модифицированных биозащищенных растений к диким сородичам и другим культурным сортам.
Научно-практическая ценность работы. Результаты опытов по вертикальному переносу генов от генно-модифицированных биозащищенных растений к культурным сортам и диким сородичам позволяют оценить риски интродукции трансгенных растений в окружающую среду, определить особенности их выращивания, а также защиты от вредителей и сорняков. Внедрение в сельскохозяйственное производство генно-модифицированных биозащищенных от колорадского жука сортов картофеля и Раундап-защищенных сортов сои и кукурузы будет способствовать сокращению использования химических средств защиты, что приведет к уменьшению потерь урожая и к улучшению состояния окружающей среды. Для целей более эффективного мониторинга ГМ-растений и продукции на их основе рекомендуется использовать модифицированные методы ПЦР-детекции, а также разработанные методы полуколичественной оценки ГМИ.
Основные положения, выносимые на защиту:
ПЦР-детекцию необходимо проводить с дополнительным положительным контролем, для сои — амплификация участков генов актина (350 п.н.) и лектина (318 п.н.), для кукурузы — генов актина (350 п.н.) и зеина-19 (387 п.н.) и для картофеля — пататина (216 п.н.), что позволяет проверить качество (чистоту) препарата выделенной ДНК, а также проверить другие химические компоненты ПЦР-реакции во избежание ложно отрицательных результатов;
— разработанный нами метод полуколичественной оценки ГМИ позволяет проводить не только детекцию трансгенов в зерне и семенах, но и определять их количественное содержание без использования дорогостоящего оборудования;
— риск вертикального переноса генов от трансгенного картофеля можно считать минимальным, изоляция трансгенного картофеля от других сортов не требуется. Риск вертикального переноса генов от ГМ-кукурузы к культурным сортам существует. Поля с трансгенными сортами кукурузы должны быть удалены не менее чем на 200 м от полей с традиционными сортами. При этом рекомендуется использовать защитные мероприятия, а частности, путем создания барьеров на пути движения пыльцы.
Апробация работы. Результаты работы докладывались на Всероссийской научно-технической конференции «Биотехнология 2003» (Сочи 22−26 сентября 2003), на Всероссийском конгрессе «Здоровое питание населения России» (Москва 12−14 ноября 2003), на 2-м Московском международном Конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 10−14 ноября 2003), на 5-й региональной научно-практической конференции молодых ученых «Научная обеспечение агропромышленного комплекса» (Краснодар, 1819 декабря 2003 г.), на II региональной научно-практической конференции молодых ученых и студентов Краснодарского края «Медицина и здравоохранение». — Анапа, 21−23 апреля 2004, на III ВОГиС) Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития (Москва 6−12 июня 2004), на международной научно-практической конференции «Биологическая защита растений — основа стабилизации агроэкосистем» (Краснодар, 29 сентября — 1 октября 2004 г), на 7-й региональной научно-практической конференции молодых ученых «Научное обеспечение агропромышленного комплекса». -Краснодар, 8−9 декабря 2005 г.
Декларация личного участия автора. Диссертация содержит фактический материал, полученный лично автором в течение 2002;2005 гг. Полевые опыты по вертикальному переносу генов кукурузы и определению видового состава насекомых проводились совместно с лабораторией гербологии ГНУ ВНИИБЗР РАСХН. Личный вклад автора в получение результатов исследований составляет 80%.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 128 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, методики проведения исследований, результатов исследования, выводов, практических рекомендаций, приложений. Содержит 8 таблиц и 30 рисунков. Список использованной литературы включает 171 источник, в том числе 157 на иностранном языке. Диссертация является самостоятельным завершенным научным трудом.
ВЫВОДЫ.
1. Модифицированный метод выделения ДНК по Дорохову и Клоке (1997) позволяет получить пригодные для проведения ПЦР препараты ДНК из семян сои, кукурузы и картофеля;
2. Во избежание ложно отрицательных результатов ПЦР-детекцию проводят с дополнительным положительным контролем, для сои — амплификация участков генов актина (350 п.н.) и лектина (318 п.н.), для кукурузы геновактина (350 п.н.) и зеина-19 (387 п.н.) и для картофеля — пататина (216 п.н.), что позволяет проверить качество (чистоту) препарата выделенной ДНК, а также проверить другие химические компоненты ПЦР-реакции;
3. ПЦР-идентификацию при концентрациях ГМ-компонента в образце ниже 0,5% проводят при добавлении в реакцию хлорида аммония в конечной концентрации 15мкМ, что приводит к увеличению выхода ПЦР-реакции, отсутствию неспецифических полос при гель-электрофорезе и повышению чувствительности данного метода;
4. Разработан метод полуколичественной оценки ГМ-компонента, основанный на амплификации участка целевого гена СР4 ЕР8Р8 с использованием пары праймеров: Ю101 и ЯШМ, фланкирующих участок целевого гена размером 356 п.н.;
5. У растений кукурузы линии ЫК 603 (Монсанто, США) гены желтозерности и устойчивости к Раундапу не сцеплены между собой, так как зависимость между количеством ксений и удаленностью участка-реципиента от донора не совпадает с зависимостью между количеством растений, выращенных из желтых семян и устойчивых к гербициду, и удаленностью участка-реципиента от донора;
6. Риск вертикального переноса генов от В^картофеля к его диким сородичам и культурным сортам минимален, так как ботанические семена образовывались только на диких формах картофеля, и ПЦР-анализ не выявил наличия трансгенной вставки в данных образцах. Вследствие того, что картофель является в основном самоопылителем, а в качестве посадочного материала используют клубни, изоляции полей с трансгенным картофелем не требуется;
7. Риск вертикального переноса генов от Ш1-кукурузы к ее культурным сортам существует. Факт переноса генетической конструкции на расстояние до 200 м подтвержден результатами проведения ПЦР-реакции и обработки гербицидом Раундап. Поля с трансгенными сортами кукурузы должны быть удалены не менее чем на 200 м от полей с культурными сортами, а также необходимо создание барьеров на пути движения пыльцы. В России дикие сородичи кукурузы не встречаются, поэтому риск вертикального переноса генов от ЯЯ-кукурузы к ее диким видам маловероятен.
Практические рекомендации.
В целях быстрого и эффективного мониторинга ГМ-растений на полях и получаемых на их основе продуктов и кормов использовать модифицированный нами метод выделения ДНК по Дорохову и Клоке (1997) из различных растительных тканей, а также предлагаемые нами методы детекции и идентификации трансгенной вставки.
ПЦР необходимо проводить с использованием двух положительных и двух отрицательных контролей.
При предварительном определении количества ГМИ в образцах использовать предложенный нами метод полуколичественной оценки.
Поля с трансгенными сортами кукурузы должны быть удалены не менее чем на 200 м от полей с культурными сортами, а также необходимо создание барьеров на пути движения пыльцы. Изоляции полей с трансгенным картофелем не требуется.
Список литературы
- Ала, А .Я. Использование спонтанного опыления у сои при межвидовой гибридизации Текст. / А. Я. Ала // Доклады ВАСХНИЛ. -1988. -Т.6. -С. 10−12.
- Дорохов, Д.Б. Быстрая и экономичная технология RAPD-анализа растительных геномов Текст. / Д. Б. Дорохов, Э. Клоке // Генетика. -1997. -Т. 33. -№ 4. -С.443−450.
- Медико-биологическая оценка пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных источников: методические указания
- Минздрава Российской Федерации (МУК2.3.2.970−00) Текст. -М: Минздрав России, 2000. -С. 94.
- Российская газета Текст. / Учредитель Правительство Российской Федерации. -Краснодар, 30 января 2002 год: отп. ОАО изд. Советская Кубань. -№ 18 (2886).
- Ahmad, Q.N. Inversion bridges and meiotic behavior in species hybrids of soybeans Текст. / Q.N. Ahmad, E.J. Britten, D.E. Byth // J Hered. -1977. -V.68. -P. 360−364.
- Allmann, M. Polymerase chain reaction (PCR): a possible alternative to immunochemical methods ensuring Safety and quality of food Текст. / M. Allmann, U. Candrian, C. Hofelein, J. Luthy // Z.Lebensm.Unters.Forsch.-1 993 196.-P.248−251.
- Anon. The Regulatory Directive Dir94-ll: The biology of Zea mays L. (Corn/Maize) Текст. / Anon // Plant Biotechnology Office, Plant Health and Production Division, Canadian Food Inspection Agency. -1994.
- Arias, D.M. Gene Flow between cultivated and wild sunflower Текст. / D. M. Arias, L. H. Rieseberg // Theor. Appl. Genet. 1994. — V. 89. — P. 655−660.
- Arnold, M.L. Natural hybridization and evolution Текст. / M. L. Arnold. -N. Y.: Oxford University Press. -1997.
- Bateman, A. J. Contamination in seed crops — I. Insect pollination Текст. / A. J. Bateman II J. Genet. -1947. -48. -P. 257−275.
- Bateman, A.J. Contamination of seed crops — II. Wind pollination / A. J. Bateman Текст. II Heredity. 1947. -1. -P. 235−246.
- Blake, N.K. Polymerase chain reaction used for monitoring multiple gene integration in Agrobacterim-mediated transformation Текст. / N.K. Blake, R.L. Ditterline, R.G. Stout // Crop Science.-1991. -№ 31. -P. 1686−1688.
- Bonnett, O.T. Development of the corn kernel Текст. / О. Т. Bonnett // In: Growth and development of the corn plant. American Seed Trade Association. -1947. -P. 32−36.
- Burdon, J.J. Diseases and plant population biology Текст. / J. J. Burdon. -New York: Cambridge University Press, 1987.
- Carpenter, J. E. Agricultural biotechnology: Updated benefit estimates Текст. / J. E. Carpenter, L. P. Gianessi // National Center for Food and Agricultural Policy. -2001. http://www.ncfap.org/pub/biotech/updatedbenefits.pdf.
- Carpenter, J. E. Comparing Roundup Ready and conventional soybean yields: 1999 Текст. / J. E. Carpenter- National Center for Food and Agricultural Policy, Washington, D.C. 2001. www.ncfap.org.
- Coble, H.D. Weed control investigations in corn, cotton, crop rotations, soybean, small grain Текст. / H. D. Coble, L. S. Warren // Annu Rep Dept Crop Sci NCSU. -1997. -28. -P.103−113
- Comparison of the ABI 7700 system (TagMan) and competitive PCR for quantitation of IS6110 DNA in sputum during treatment of tuberculesis Текст. //J.Clin.Microbiol. -1998. -№ 36. -P.1964−1968.
- Conway, G. Crop Biotechnology: Benefits, Risks and Ownership Текст. / G. Conway // The Rockefeller Foundation. 8−30−2000. http://www.Rockfound.Org/News/306 2000Cropbiotech.Html#Intro: 1 -7.
- Cote, M.J. Identification of genetically modified potato (Solanum tuberosum) cultivars using event specific polymerase chain reaction Текст. / M.J. Cote, A.J. Meldrum, P. Raymond, C. Dollard // J Agric Food Chem. -2005 Aug 24. -№ 53(17). -P. 6691−6696.
- Crawley, M. J. Transgenic crops in natural habitats Текст. / M. J. Crawley, S. L. Brown, R. S. Hails, D. D. Kohn, M. Rees // Nature. -2001. -№ 409. -P. 682−683.
- Culpepper, A.S. Weed management in glufosinate- and glyphosate-resistant soybean (Glycine max) Текст. / A. S. Culpepper, A. C. York, R. B. Batts, K. M. Jennings // Weed Technol. -2000. -14.-P.77−88.
- Daniell, H. Containment of herbicide resistance through genetic engineering of the chloroplast genome Текст. / H. Daniell, R. Datta, S. Varma // Nat. Biotechnol. 1998. — V. 16. — P. 345−348.
- Dunwell IIJ Experiment Bot. 2000. -51. -P.487−496.
- Ellstrand, N.C. Gene flow and introgression from domesticated plants into their wild relatives Текст. / N. С. Ellstrand, H. C. Prentice, J. F. Hancock // Ann. Rev. Ecol. Syst. 1999. — V. 30. — P. 539−563.
- Ellstrand, N.C. Gene Flow by pollen: implications for plant conservationgenetics Текст. / N. С. Ellstrand // Oikos. 1992. — V. 63. — P. 77−86.
- Ellstrand, N.C. Hybridization as an avenue for the escape of engineered genes Текст. / N. С. Ellstrand, С. A. Hoffman // Bioscience. 1990. — V. 40. — P. 438−442.
- Ellstrand, N. С. Pollen as a vehicle for the escape of engineered genes? Текст. / N. С. Ellstrand // Trends in Ecology and Evolution. 1988. — № 3.ф P. 30−32.
- Ellstrand, N.C. Population genetic consequences of small population size: Implications for plant conservation / N. C. Ellstrand, D. R. Elam // Annu. Rev.• Ecol. Syst. 1993. — V. 24. — P. 217−242.
- Elmore, R.W. Glyphosate-resistant soybean cultivar yields compared with sister lines Текст. / R. W. Elmore, F. W. Roeth, L. A. Nelson, C. A. Shapiro, R. N. Klein, S. Z. Knezevic, A. Martin II Agron J.-2001.-V. 93.-P.408−412
- Erickson, E.H. Soybean pollination and honey production—A research progress report Текст. / E. H. Erickson II Am Bee J. -1984. -124. -P. 775−779.
- European Commission Official Journal L 006 Текст.- 13−14 (2000).
- Fagan, L. Performance assessment under field conditions of a rapid IMMUNOLOGICAL TEST FOR TRANSGENIC SOYBEANS Текст. / L. Fagan, B. Schoel, A. N Haegert e.a. // Int.J.of Food Science and Technology.-2001.-№ 36. -P.357−367.
- Fredshaven, J.R. Growth behavior and competitive ability of transgenic crops Текст. / J. R. Fredshaven, G. S. Poulsen // Field Crops Res. 1996. -54. -P. 11−18.
- Frutos, R. Managing insect resistance to plants producing Bacillus thuringiensis toxins Текст. / R. Frutos, C. Rang, M. Royer // Crit Rev Biotechnol.- 1999.-V.19.-P.227−276.
- Gasser, C. S. Genetically engineered plants for crop improvement Текст. / С. S. Gasser, N.H. Fraley // Science. 1989. — V. 244. — P. 1293−1299.
- Goodman, M.M. Maize Zea mays (Gramineae — Maydeae) Текст. / M. M. Goodman // In: immonds, N. W. (Ed.). Evolution of crop plants. -Longman, London.-1976. -P. 128−136.
- Gould, F.W. Grass systematics Текст. /F. W. Gould // McGraw Hill. -New York.-1968.-P. 381−382.
- Grant, V. Plant speciation Текст. / V. Grant. -N. Y.: Columbia University Press, 1981.• 60 Gray, A. J. Environmental risks of herbicide-tolerant oilseed rape Текст. / A.
- J. Gray, A. F. Raybould // DETR Research Report.-London. -1999. -№ 15.
- Gray, P. J. The transfer of traits to wild relatives Текст. / P. J. Gray // BCPC Symp. Proc. Predicting field performance in crop protection. 2000. -No. 74. -P. 165−174.
- Gressel, J. Tandem constructs: preventing the rise of superweeds Текст. / J.
- Gressel // Trends Biotechnol. 1999. — V. 17. — P. 361−366.
- Gresswel, J. E. Predicted pollen dispersal by honey-bees and three species of bumble bee foraging on oilseed rape: A comparison of three models Текст. / J. E. Gresswel, A. P. Bassom, S. A. Bell [et. all.] // Funct. Ecol. 1995. — V. 9. — P. 829−842.
- Guretzky, J.A. Evidence for natural biological control: insects decreasesurvival and growth of native thistle Текст. / J. A. Guretzky, S. M. Louda // Ecol. Appl. 1997. — V. 7. — P. 1330−1340.
- Hancock, J. The opportunity for escape of engineered genes from trans genie crops Текст. / J. Hancock, R. Grumet, S. Hokanson. // Hortsci. -1996. -31. -P. 1080−1085.
- Handel, S.N. Pollination ecology, plant population structure, and gene flow Ф Текст. / S. N. Handel // Pollination biology (L. Real ed.): Academic Press,
- Orlando, FL.- 1983.-P. 163−211.
- Harding, K. Risk assessment of the release of genetically modified plants % Текст. / К. Harding, P. S. Harris- A review. MAFF. -1994.
- Hassan-Hauser, C. Detection of the starch modifying gbss-antisense construct in transgenic potatoes Текст. / С. Hassan-Hauser, W. Mayer, H. Hortner // Z.Lebensm.Unters.Forsch. -1998. -№ 206. -P.83−87.
- Hemmer, W. Foods derived from genetically modified organisms and defection methods Текст. / W. Hemmer // BATS.-1997.
- Hernandez, M. Interlaboratory transfer of a PCR multiplex method for simultaneous detection of four genetically modified maize lines: Btll, MQN810, T25, and GA21 Текст. / M. Hernandez, D. Rodriguez-Lazaro, D.
- Hokanson, S.C. Effect of border rows and trap/donor ratios on pollenmediated gene movement Текст. / S. C. Hokanson, R. Grumet, J. F. Hancock // Ecol. Appl.- 1997.-V. 7.-P. 1075−1081.
- Holt, J. Prevalence and management of herbicide-resistant weeds Текст. / J. Holt // Scientific Methods Workshop: Ecological and Agronomic Consequences of Gene Flow from Transgenic Crops to Wild Relatives
- Ф (Meeting Proceedings, The Ohio State University, March 5, 6. 2002). — P.47.51.
- Hood, M.J. Interspecific hybridization studies between cultivated soybean,• Glycine max and a perennial wild relative Текст. / M. J. Hood, F. L. Allen // G. falcata. Proc Am Soc Agron. -1980. -P. 58.
- Hupfer, C. Detection of genetic modification in heat treated products of Bt-maize by polymerase chain reaction Текст. / С. Hupfer, H. Hotzel, K. Sachse, K.H. Engel // Z.Lebensm.Unters.Forsch. -1998. -№ 206. -P.203−207.
- Johnson, W.G. Efficacy and economics of weed management in glyphosate-resistant corn (Zea mays) Текст. / W. G. Johnson, P. R. Bradley, S. E. Hart, M. L. Buesinger, R. E. Massey // Weed Technol. -2000. -V.14. -P. 57−65.
- Johnston, S.A. The significance of genie balance to endosperm development in interspecific crosses Текст. / S. A. Johnston, Т. P. M. den Nijs., S. J. Peloquin, R. E. Hanneman, Jr. // Theoretical and Applied Genetics. 1980. -V. 57.-P. 5−9.
- Jones, M.D. Effect of tree barriers on outcrossing in corn. Oklahoma
- Agricultural Experimental Station Текст. / M. D. Jones, J. S. Brooks // Technical Bulletin.-952. No T-45.
- Jones, M.D. Effectiveness of distance and border rows in preventing outcrossing in corn Текст. / M. D. Jones, J. S. Brooks- Oklahoma Agricultural Experimental Station, Technical Bulletin. -1950. -No. T-38.
- Kapteijns, A.J. Risk assessment of genetically modified crops. Potential of Ф four arable crops to hybribize with the wild flora Текст. / A. J. Kapteijns //
- Euphytica. -1993. -66. -P. 145−149.
- Kapusta, G. Yield response of soybeans (Glycine max) to injury from t postemergence broadleaf herbicides Текст. / G. Kapusta, L. A. Jackson, D. S.
- Mason// WeedSci.- 1986.-34.-P.304−307.
- Kareiva, P. Can we use experiments and models in predicting the invasiveness of genetically engineered organisms? Текст. / P. Kareiva, I. M. Parker, M. Pascual II Ecology. -1996. -№ 77. -P. 1670−1675.
- Kleppe, K. Studies on polynucleotides. Repair replication, of short synthetic DNAs as catalysed by DNA polymerase Текст. / К. Kleppe, E. Ohtsuku, R. Kleppe [et.all.] //J.Mol.Biol.-1971.-V.56.-P.341−361.
- Klinger, Т. Engineered genes in wild populations: fitness of weed-crop hybrids of Raphanus sativus Текст. / Т. Klinger, N. С. Ellstrand // Ecological Application. -1994. -V. 4.-P.117−120.
- Kovarova, M. New specificity and yield enhancer of polymerase chain reaction Текст. / M. Kovarova, P. Draber // Nucleic Acids Research. -2000.
- Vol. 28.-No. 13.-P. 134−138.
- Kuvshinov, V. Molecular control of transgene escape from genetically modified plants Текст. / V. Kuvshinov, K. Koivu, A. Kanerva, E. Pehu // Plant science. 2001. — V. 160. — P. 517−522.
- Kwon, S. H. Studies on the diversity of seed weight in the Korean soybean land races and wild soybean Текст. / S. H. Kwon, К. H. Im, J. R. Kim. //ф Korean J Breed. -1972. -4. -P. 70−74.
- Ladizinsky, G. Wild crosses in soybeans: Prospects and limitations Текст. / G. Ladizinsky, C. A. Newell, T. Hymowitz // Euphytica. -1979. -28. -P. 421 423.
- Langevin, S.A. The incidence and effects of hybridization between cultivated rice and its related weed red rice (Oryza sativa L.) Текст. / S.A. Langevin, K. Clay, J. Grace // Evolution. 1990. — V. 44. — P. 1000−1008.
- Lee, D. Evaluating genetic containment strategies for transgenic plants Текст. / D. Lee, E. Natesan // Trends Biotechnol.-2006.-V. 24(3).-P. 109−114.
- Lefol, E. Predicting hybridization between transgenic oilseed rape and wild• mustard Текст. / E. Lefol, V. Danielou, H. Darmency // Field Crops• Research.-1996.-V45.-P. 153−161.
- Lopez-Perez, G.C. Dynamics of pesticides in potato crops Текст. / G.C. Lopez-Perez, M. Arias-Estevez, E. Lopez-Periago, B. Soto-Gonzalez, B. Cancho-Grande, J. Simal-Gandara // J Agrie Food Chem.-2006.-V.54(5).-P. 1797−1803.
- Losey, J.E. Transgenic pollen harms monarch larvae Текст. / J. E. Losey, L. S. Rayor, M. E. Carter // Nature. 1999. -399. -P. 214.
- Marshall, M.W. Weed community shifts associated with continuous glyphosate applications in corn and soybean rotation Текст. / M. W. Marshall, K. Al-Khatib, L. Maddux // Proc Western Soc Weed Sci.-2000.- 53.-P.22−25.
- Messean, A. Impact du development des plantes transgeniques dans les systemes de culture: rapport final Текст. / A. Messean // Dossier. -B: Impact des plantes transgeniques-1999.-No. 96/15.
- Meyer, R. Detection of genetically engineering plants the FLAVR SAVR tomato as an example Текст. / R. Meyer // Z.Lebensm.Unters.Forsch.-1995.-№ 201.-P.583−586 (German).
- Meyer, R. Polimerase chain reaction (PCR) in the quality and safety assurance * of food: detection of soya in processed meat products Текст. / R. Meyer, F.
- Chardonnens, P. Hubner, J. Luthy // Z.Lebensm.Unters.Forsch.-1996.-203.-P.339−344.
- Meyer, R. Tierartbestimmung und Soyanachweis in erhitzten Fleischprodukten mittels der Polymerase Kettenreaktion Текст. / R. Meyer, U. Candrian, J. Luthy // Mitt. Gebiete Lebensm.Hyg. -№ 199 384. -P. 112−121.
- Mikkelsen, T.R. The risk of crop transgene spread Текст. / T. R. Mikkelsen, B. Andersen, R. B. Jorgensen // Nature. 1996. — V. 380. — P. 31.
- Mooney, S. Environmental concerns and risks of genetically modified crops: Economic contributions to the debate Текст. / S. Mooney, К. К. Klein // Canadian JAgric Econ. -2000. -47. -P.437−444.
- Moschini, G. «Roundup Ready Soybeans and Welfare Effects in the Soybean Complex» Текст. / Moschini, G., H. Lapan and A. Sobolevsky // Agribusiness.-2000. -Vol. 16. -no.l. -P. 33−55.
- Moyes, C. L. Gene flow from oilseed rape to Sinapis arvensis: variation at the population level Текст. / С. L. Moyes, J. Lilley, C. Casais, P. J. Dale // British Crop Protection Council. BCPC Symposium Proceedings. -1999. -№ 72. -P. 143−148.
- Murray, M.G. Rapid isolation of high-molecular-weight plant DNA Текст. / M.G. Murray, W.F. Thompson // Nucl. Acids Res. -1980. -№ 8. -P. 4321−4325.
- NAS (National Academy of Sciences). Genetically Modified Pest-Protected Plants: Science and Regulation Текст. -Washington, D.C.: Nat.Acad.Press.-2000.-V.1.
- National Research Council. Genetically modified pest-protected plants: Science and regulation Текст. -Washington. DC: National Academy Press.2000.-V. 1-P. 81−93.
- Owen, M.D.K. Current use of transgenic herbicide-resistant soybean and corn in the USA Текст. / M. D. К. Owen // CropProtection.- 2000.-19.-P.765−771.
- Owen, M.D.K. World maize/soybean and herbicide resistance Текст. / M. D. К. Owen // In S. В. Powles and D. L. Shaner (eds.). Herbicide Resistance and World Grains. -CRC Press, Boca Raton, Florida. -2001. -P. 101−163.щ
- Owen, M.D. Herbicide-resistant crops and weed resistance to herbicides Текст. / M.D. Owen, I.A. Zelaya // Pest Manag Sci. -2005 Mar. -№ 61(3). -P. 301−311.
- Palmer R.G. Genetics and Cytology of Chromosome Inversions in Soybean Germplasm Текст. / R.G. Palmer, H. Sun, L.M. Zhao // Crop Sci. -2000. -V.40. -P.683−687.
- Paterniani, E. Effective maize pollen dispersal in the field Текст. / E. Paterniani, A. C. Stort II Euphytic. 1974. -№ 23. -P. 129−134.
- Peakall, R. A new technique for monitoring pollen flow in orchids Текст. / R. Peakall //Oecologia (Berl.) 1989. -V. 79. — P. 361−365.
- Perry, L. Early maize agriculture and interzonal interaction in southern Peru Текст. / L. Perry, D.H. Sandweiss, D.R. Piperno, K. Rademaker, M.A. Malpass A. Umire, P. de la Vera // Nature.-2006.-V.440.-P.76−79.
- Pietsch, К. Screeningverfahren zur Identifizierung «gentechnish veranderter» pflanzlicher Lebensmittel Текст. / К. Pietsch, H.U. Waiblinger, P. Brodman, A. Wurz // Dtsch.Lebensm.Rundsch. -1997. -№ 93. -P.35−38.
- Plaisted, R. L. Potato Текст. / R. L Plaisted // In: W. R Fehr, H. H Hadley- Hybridisation of crop plants. American Society of Agronomy, Madison .-1980. -P. 483−494.
- Pleasants, J.M. Pollen deposition on milkweed leaves under natural conditions Текст. / J. M. Pleasants, R. L. Hellmich, L. C. Lewis // Presentation at the Monarch Butterfly Research Symposium. -Chicago, 1999.
- Raybould, A.F. Genetically modified crops and hybridization with wild relatives: a UK perspective Текст. / A. F. Raybould, A. J. Gray // Journal of Applied Ecology. -1993. -№ 30. -P. 199−219.
- Raynor, G.S. Dispersion and deposition of corn pollen from experimental sources Текст. / G. S. Raynor, E. C. Ogden, J. V. Hayes // Agron. J. 1972. -V. 64.-P. 420−427.
- Rieseberg, L.H. Introgression and its consequences in plants. Hybrid zones and the evolutionary process (Harrison R. ed.) Текст. / L. H. Rieseberg, J. Wende. -London: Oxford University Press. 1993. -P. 70−102
- Saiki, R.H. Enzymatic amplification of beta-globulin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of Sickle cell anemia Текст. / R.H. Saiki, S. Scharf, F. Faloona [et.all.] // Science. -1985. -V.230. -P.1350−1354.
- Salamov, A.B. About isolation in corn Текст. / A. B. Salamov // (Russian translation by Michael Afanasiev in 1949). -Sel. I. Sem. -1940. P. 3.
- SAP. Bt-Plant-pesticides risk and benefit assessments Текст. // Report No 2000−07.-March 12.-2001.
- SAP. Gene Flow. Outcrossing questions Текст. // Report № 2000−07. March 12. -2001. http://www.epa.gov.
- Schreiber, G.A. Foods produced by means genetic engineering, 2nd Status report Текст. / G.A. Schreiber, K.W. Bogl // Federal Institute for Health protection of consumers and veterinary medicine. -Berlin, 1997- BgVV Hefte 1.
- Scientific Methods Workshop: Ecological and Agronomic Consequences of Gene Flow from Transgenic Crops to Wild Relatives Текст. -Meeting Proceedings, The Ohio State University, March 5, 6. 2002.
- Scott, S. E. Transgene risk is low Текст. / S. E. Scott, M. J. Wilkinson // Nature. -1998. -№ 393. -P. 320.
- Sears, M.K. Impact of Bt corn pollen on monarch butterfly populations Текст. / M. К. Sears, D. Stanley-Horn // In: C. Fairbairn, G. Scoles, A.
- McHughen (Eds.) Proceedings of the 6th International Symposium on The
- Biosafety of Genetically Modified Organisms. -Canada: University Entension Press, 2000.
- Seiler, G.J. Utilization of wild sunflower species for the improvement of cultivated sunflower Текст. / G. J. Seiler // Field Crops Res. 1992. — V. 30. -P. 195−230.
- Shirai, N. Safety assessment of genetically engineered food: detection and monitoring of glyphosate-tolerant soybean Текст. / N. Shirai, K. Momma, S. Ozawa [et.all.] // Biosci Biotechnol. Biochem. -1998. -№ 62(7). -P.l461−1464.
- Singh, R.J. Intersubgeneric hybridization of soybeans with a wild perennial species, Glycine clandestina Wendl Текст. / R.J. Singh, K.P. Kollipara, T. Hymowitz// Theor. Appl. Genet. -1987. -V.74. -P. 391−396.
- Singh, R.J. The genomic relationship between Glycine max (L.) Merr. And G. soja Sieb.and Zucc. as revealed by pachytene chromosome analysis Текст. / R.J. Singh, T. Hymowitz // Theor. Appl. Genet. -1988. -V.76. -P. 705−711.
- Skvortzow, В. V. The soybean—wild and cultivated in Eastern Asia Текст. / В. V. Skvortzow // Proc Manchurian Res Soc. -Publ Ser A. Natural History Sect. -1972. -No. 22. -P. 1−8.
- Sluyter, A. Early maize (Zea mays L.) cultivation in Mexico: dating sedimentary pollen records and its implications Текст. / A. Sluyter, G. Dominguez // Proc Natl Acad Sci U S A.-2006.-V. 103(4).-P. 1147−1151.
- Snow, A. A. Fitness costs associated with transgenic glufosinate tolerance introgressed from Brassica napus ssp oleifera (oilseed rape) into weedy Brassica rapa Текст. / A. A. Snow, R. Jorgensen // In: Gene Flow and
- Agriculture: Relevance for Transgenic Crops. -1999. -Lutman, P. (ed). BCPC
- Symposium Proceedings No. 72.
- Snow, A.A. Fecundity, phenology and seed dormancy of Fi wild-crop hybrids in sunflower (Helianthus annuus, Asteraceae) Текст. / A. A. Snow, P. Moran-Palma, L. H. Rieseberg, A. Wszelaki // Am. J. Bot. 1998. — V. 85. — P. 794 801.
- Steward, C.N. Increased fitness of transgenic insecticidal rapeseed under insect selection pressuse Текст. / С. N. Steward, J. N. All, P. L. Raymer, Ramachadrans // Mol. Ecol. 1997. — V. 6. — P. 773−779.
- Stewart, C.N. Chloroplast transgenic plants are not a gene flow panacea Текст. / С. N. Stewart, С. S. Prakesh // Nat. Biotechnol. — 1998. — V. 16. — P. 401.
- Studer, E. Quantitative competitive PCR for the detection of genetically modified soybean and maize Текст. / E. Studer, C. Rhuner, J. Ltithy, P. Hubner// Z.Lebensm.Unters.Forsch. -1998. -№ 207. -P.207−213.
- Taylor, B. Isolation of plant DNA and RNA Текст. / Taylor В., Powell A. // BRL Focus 4(3). 1982. -P.4−6.
- U.S.Department of Agricultural. Implications of Testing and Segregating Nonbiotech Crops for Grain Grades and Standarts Текст. / Economic Research Service, Economic Issues in Agric. Biotechnology // AIB-762.
- USDA / APHIS. Petition 94−257−01 for determination of nonregulated status for Colorado potato beetle-resistant potato lines ВТ 6, ВТ 10, ВТ 12, ВТ 16,
- ВТ 17, ВТ 18, ВТ 23 Текст. Environmental Assessment and Finding of No Significant Impact (March 2, 1995).
- Weatherwax, P. Structure and development of reproductive organs Текст. / P. Weatherwax // In: Sprague, G. F. (ed.), Corn and corn improvement. -New York: Academic Press, 1955. -Chap. III. P. 89−121.
- Weil, J.H. Are genetically modified plants useful and safe? Текст. / J.H. Weil // IUBMB Life. -2005. -Apr-May. -57(4−5). -P. 311−314.
- White, T.J. The future of PCR technology: diversification of technologies and applications Текст. / T.J. White // Trends in Biotech.-1996.-14.-P.478−483.
- Wilkes, H.G. Hybridisation of maize and teosinte, in Mexico and Guatemala and the improvement of maize Текст. / H. G. Wilkes // Economic Botany. -1977.-31.-P. 254−293.
- Wilkinson, M. J. A direct regional scale estimate of transgene movement from GM oilseed rape to its wild progenitors Текст. / M. J. Wilkinson, J. Davenport., Y. M. Charters [et. all.] // Molecular Ecology. -2000. -№ 9. -P. 983−991.
- Wozniak, C.A. Gene Flow assessment for Plant-Incorporated Protectants by the biopesticide and pollution prevention division, U. S. EPA Текст. / С. A. Wozniak // Gene Flow Workshop, The Ohio State University, March 5, 6, 2002.-P. 146−161.