Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Количественная характеристика иммуноглобулинов в биологических жидкостях крупного рогатого скота методами иммунохимического анализа

Диссертация: Количественная характеристика иммуноглобулинов в биологических жидкостях крупного рогатого скота методами иммунохимического анализа
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В лаборатории иммунологии ВИЭВ были получены моноклональные антитела к иммуноглобулинам этих изотипов, которые и использованы в нашей работе для изучения иммуноглобулинового профиля биологических жидкостей (сыворотка крови, молозиво, молоко, носовые секреты, слезная жидкость) крупного рогатого скота (коров и телят). При этом основное внимание было направлено на создание тест-системы на основе… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ВВЕДЕНИ Е
  • 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 2. 1. Иммунная система крупного рогатого скота: структурная и функциональная характеристика
    • 2. 2. Иммуноглобулины крупного рогатого скота
    • 2. 3. Изотипы иммуноглобулинов: функциональные свойства
    • 2. 4. Пассивная передача иммунитета
    • 2. 5. Количественные методы определения иммуноглобулинов
      • 2. 5. 1. Методы, основанные на реакции преципитации
      • 2. 5. 2. Методы, основанные на использовании меченых антител или антигенов
    • 2. 6. Количественная характеристика иммуноглобулинов крупного рогатого скота
  • СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 3. 1. Иммунологические реагенты
    • 3. 2. Испытуемые пробы биологического материала
    • 3. 3. Реакция двойной иммунодиффузии по Оухтерлони (РДП)
    • 3. 4. Метод радиальной иммунодиффузии по Манчини (РИД)
    • 3. 5. Методы иммуноферментного анализа
    • 3. 6. Электрофорез в ПААГ-ДСН
    • 3. 7. Иммуноблоттинг
    • 3. 8. Синтез иммунопероксидазных конъюгатов
    • 3. 9. Статистическая обработка результатов
  • 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 4. 1. Разработка «сэндвич"-ИФА на основе моноклональных антител для количественного определенияА крупного рогатого скота
      • 4. 1. 1. Иммунологические реагенты, предназначенные для использования в «сэндвич"-ИФА
      • 4. 1. 2. Иммунохимическая характеристика моноклональных антител к
  • §-А крупного рогатого скота
    • 4. 1. 3. Разработка «сэндвич"-ИФА на основе моноклональных антител к
  • §-А крупного рогатого скота
    • 4. 2. Разработка РИД на основе моноклональных антител для количественного определенияА крупного рогатого скота
    • 4. 3. Сравнительная оценка эффективности «сэндвич"-ИФА и РИД по определению уровняА в биологических жидкостях крупного рогатого ско
    • 4. 4. Количественная характеристика иммуноглобулинов в-, М- и А-изотипов в биологических жидкостях коров
    • 4. 5. Возрастная динамика иммуноглобулинов у телят

Количественная характеристика иммуноглобулинов в биологических жидкостях крупного рогатого скота методами иммунохимического анализа (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

Всестороннее исследование иммуноглобулинов, одного из важнейших факторов иммунитета, представляет пристальный интерес для иммунологов и клиницистов. Он связан с тем, что особенностями свойств отдельных изотипов иммуноглобулинов объясняется характер взаимодействия антител с антигеном и способ элиминации последнего, а также характер патофизиологических реакций организма в случае иммунологического конфликта (Д.В.Стефани, 1975). Клинические и биологические аспекты исследования иммуноглобулинов животных многообразны, их определение имеет крайне важное значение для оценки иммунного статуса организма, диагностики иммунодефицитных состояний. Важнейшим условием для развертывания широкого фронта работ по количественному определению уровня иммуноглобулинов в биологических жидкостях организма является создание простых, доступных и информативных лабораторных методов исследования. Определение уровня иммуноглобулинов в различных биологических жидкостях организма животных проводится многими исследователями в течение ряда лет (Р.В.Боровик, 1978; П. А. Емельяненко, 1982; В.М. Чеки-шев, 1984; Ю. Н. Федоров, 1985; А. Б. Маркунас, 1988; Р. Х. Кармолиев, 1988; Ю. К. Пешкус, 1991; М. Д. Смердова, 2000; P. Porter, 1971; K. Bourne, 1971; J.P. Mach, J.J.Pahud, 1971; J.R.Duncan et al., 1972; J. Butler, 1974, 1983; M.R. Williams et al., 1975, 1990; D. Levieux, A. Olliver, 1999). Однако до настоящего времени существуют расхождения в полученных данных различными авторами. Эти различия в количественной характеристике обусловлены отсутствием стандартных методик получения биологических жидкостей для исследования и тем, что для иммунологического анализа биологических жидкостей различные авторы используют разные по чувствительности и специфичности методы: турбодиметрический, радиальную иммунодиффузию и иммуноферментный анализ. В последние годы периферическая кровь остается основной биологической жидкостью для иммунологического исследования, иммуноглобулиновый состав ряда секретов остается мало изученным, нет единого мнения о месте синтеза иммуноглобулинов, выявляемых в них. Изучение секреторных иммуноглобулинов представляет не только теоретический интерес, но чрезвычайно актуально и для клиницистов, поскольку, как показывают наблюдения последних лет, состояние секреторной иммунной системы в значительной мере определяет частоту и характер течения заболеваний респираторного и желудочно-кишечного тракта. Поэтому изучение системы местного иммунитета является весьма актуальным и стоит в ряду проблем теоретической и клинической иммунологии наиболее интенсивно разрабатываемых в последнее время. Однако, к настоящему времени среди не до конца решенных, остаются такие вопросы, как становление секреторной иммунной системы в онтогенезе, наличие иммунной памяти местного иммунитета, особенности иммунобиологических свойств секреторногоА, а также иммуноглобулиновый профиль различных секретов организма крупного рогатого скота. Сдерживающим фактором в проведении исследований в этих направлениях является отсутствие коммерческих сывороток против секреторногоА и соответствующих тест-систем для выявления иммуноглобулинов этого изотипа во внешних секретах организма крупного рогатого скота. Поэтому вопросы, связанные с разработкой и совершенствованием методов иммуноанализа на основе полии моноклональных антител, также как и с их использованием для изучения функционирования иммунной системы крупного рогатого скота, являются весьма актуальными и представляют значительный интерес как в научном, так и в практическом аспектах.

Цель исследования состояла в разработке тест-систем на основе методов иммунохимического анализа (РИД и ИФА) и изучении иммуноглобу-линового профиля различных биологических жидкостей крупного рогатого скота для определения информативности показателей уровня иммуноглобулинов при оценке иммунного статуса.

Задачи исследования:

1. Методами физико-химического и иммунохимического анализа охарактеризовать моноклональные антитела к крупного рогатого скота.

2. Разработать чувствительную и специфичную тест-систему на основе ИФА с использованием моноклональных антител («сэндвич"-вариант) для выявления и количественной оценки иммуноглобулинов А-изотипа в различных биологических жидкостях крупного рогатого скота (молозиво, молоко, носовой секрет, слезная жидкость). Оптимизировать условия проведения и учета результатов ИФА.

3. Определить показатели нормальных значений иммуноглобулинов для таких биологических жидкостей крупного рогатого скота, как сыворотка крови, молозиво, молоко, слезная жидкость и носовые секреты.

4. Провести сравнительное изучение диагностической ценности имму-нохимических методов исследования (РИД и ИФА) при оценке иммунного статуса коров после отела и полученных от них телят после рождения.

5. Изучить возрастную динамику становления местного иммунитета у телят в раннем постнатальном онтогенезе.

Научная новизна и теоретическое значение исследования. Дана физико-химическая и иммунохимическая характеристика моноклональных антител к 1цА крупного рогатого скота и на их основе разработаны специфичные методы: «сэндвич"-вариант твердофазного ИФА и РИД для выявления иммуноглобулинов А-изотипа в биологических жидкостях крупного рогатого скота. Определены значения иммуноглобулинов в-, Ми А-изотипов в сыворотке крови, носовом секрете, слезной жидкости, молозиве и молоке коров, а также в сыворотке крови, слезной жидкости и носовом секрете у телят. Установлено, что высокая чувствительность метода ИФА позволяет количественно определять уровень 1§-А в пробах с низким его содержанием. Впервые проведены сравнительные исследования по изучению иммунного статуса коров после отела и полученных от них телят после рождения, установлена положительная корреляция результатов, полученных с помощью РИД и ИФА. Получены новые данные и подтверждены некоторые закономерности о становлении секреторной иммунной системы у телят в раннем постнатальном онтогенезе.

Практическая значимость. Показана высокая информативность и целесообразность использования иммуноглобулинового анализа биологических жидкостей для оценки иммунного статуса животных, состояния системного и местного иммунитета. Определены границы нормальных значений иммуноглобулинов в секретах крупного рогатого скота с помощью им-муноферментного анализа. Разработан «сэндвич"-вариант ИФА и РИД на основе моноклональных антител для количественного определения уровня иммуноглобулинов А-изотипа в биологических жидкостях крупного рогатого скота. Количественное определение уровня б^А в молозиве, молоке, носовых и слезных секретах является основой оценки напряженности иммунитета слизистых и колострального иммунитета у телят. Полученные результаты составляют методическую основу дальнейших исследований по изучению механизмов и закономерностей формирования иммунитета у крупного рогатого скота.

Результаты исследований вошли в методические рекомендации: «Количественное определение иммуноглобулинов в биологических жидкостях иммуноферментным методом», утвержденные Ученым советом ВИЭВ (Москва, 2001 г.) и «Оценка естественной резистентности сельскохозяйственных животных», рассмотренные и утвержденные в установленном порядке Сибирским отделением РАСХН (Новосибирск, 2003).

Основные положения, выносимые на защиту. Полученные экспериментальные данные позволяют вынести на защиту следующие основные положения:

— результаты экспериментальных исследований по иммунохимической характеристике моноклональных антител к 1§-А крупного рогатого скота и разработка на их основе «сэндвич"-ИФА и РИД для определения уровня иммуноглобулинов А-изотипа в биологических жидкостях крупного рогатого скота;

— результаты сравнительных исследований по изучению количественной характеристики и динамики содержания иммуноглобулинов отдельных изотипов в биологических жидкостях у коров после отела (сыворотка крови, молозиво, молоко, носовые секреты, слезная жидкость) и у телят после рождения (сыворотка крови, носовые секреты, слезная жидкость).

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Всероссийских научно-практических конференциях (Щелково, 2000; Омск, 2004), Ученом совете ВИЭВ (2002), межлабораторном совещании сотрудников ВИЭВ (2005).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 109 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка цитированной литературы. Материалы диссертации иллюстрированы 12 таблицами и 4 рисунками.

Список литературы

включает 205 источников (64 отечественных и 141 зарубежных).

6.ВЫВОДЫ.

1. С помощью комплекса физико-химических и иммунохимических методов дана характеристика моноклональных антител к иммуноглобулинам А-изотипа крупного рогатого скота, определена их специфичность и перекрестная реактивность.

2. С помощью охарактеризованной панели моноклональных антител проведено эпитопное картированиеА крупного рогатого скота, дан анализ нативной молекулыА и ее структурных компонентов (легких и тяжелых цепей). Определена пара МкА, направленных к топографически удаленным эпитопамА, обеспечивающая эффективное связывание молекулы иммуноглобулина данного изотипа в иммунохимических методах исследования.

3. Разработана высокочувствительная тест-система на основе «сэндвич" — варианта ИФА с использованием моноклональных антител для количественного определения иммуноглобулинов А-изотипа в биологических жидкостях крупного рогатого скота (сыворотка крови, молозиво, молоко, носовые секреты и слезная жидкость). Чувствительность метода составила 0,1 мкг/мл.

4. Оптимизированы условия постановки метода радиальной иммуно-диффузии с использованием моноклональных антител для количественного определения 1§-А в биологических жидкостях крупного рогатого скота. При этом чувствительность метода составила 0,1- 0,2 мг/мл.

5. Проведена сравнительная оценка и установлена положительная корреляция (г= 0,79 — 0,95, Р < 0,05 в различных секретах коров и телят) результатов количественного определения уровня иммуноглобулинов с помощью РИД и ИФА. Показано, что метод ИФА позволяет выявлять и количественно определять уровень иммуноглобулинов А-изотипа в биологических жидкостях с низким его содержанием (молоко, носовой секрет, слезная жидкость).

6. С использованием разработанных методов определен иммуноглобу-линовый профиль биологических жидкостей коров после отела и в различные сроки после лактации. Получены новые данные по количественной характеристикеМ, ^А в сыворотке крови, молозиве, молоке, носовых секретах и слезной жидкости. Показано, что основным иммуноглобулином в сыворотке крови и молозиве коров является (82,1% и 89,9%), а в носовых секретах и слезной жидкости —А (70,5% и 74,5% соответственно).

7. Изучена динамика иммуноглобулинов отдельных изотипов в сыворотке крови, носовых секретах и слезной жидкости у телят с момента рождения до 2-месячного возраста. Максимальный уровень иммуноглобулинов всех изотипов (1§ 0- 21,5±3,4- 1§-М- 2,65±0,22- 1§-А- 0,8±0,2 мг/мл) установлен в суточном возрасте и связан с приемом молозива. При этом основным изотопом в сыворотке крови телят является составляющий 80,6 — 85,7%, а в носовом секрете и слезной жидкости —А, 42,5 — 67% и 47,4 — 80,7% соответственно. С возрастом происходит постепенное снижение иммуноглобулинов и минимальные значения их установлены в 10−40-дневном возрасте. В последующие возрастные периоды отмечено постепенное повышение иммуноглобулинов всех изотипов, что связано с началом их собственного синтеза в организме новорожденных.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Для проведения фундаментальных и прикладных исследований по оценке иммунного статуса крупного рогатого скота разработаны методы количественной характеристики уровняА в биологических жидкостях организма животных (ИФА, РИД).

Результаты исследований вошли в методические рекомендации: «Количественное определение иммуноглобулинов в биологических жидкостях иммуноферментным методом», утвержденные Ученым советом ВИЭВ (Москва, 2001 г.) и «Оценка естественной резистентности сельскохозяйственных животных», рассмотренные и утвержденные в установленном порядке Сибирским отделением РАСХН (Новосибирск, 2003).

5.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В последние годы пристальный интерес исследователей и практических специалистов направлен на всестороннее исследование иммуноглобулиноводного из важнейших факторов иммунитета. Определение уровня иммуноглобулинов остается важным и надежным критерием оценки В-системы иммунитета, главным методом диагностики всех форм иммунодефицитов, связанных с биосинтезом антител (Р.В.Петров и др., 1997). Клинические и биологические аспекты исследования иммуноглобулинов различных популяций животных чрезвычайно многообразны. Изучение уровня иммуноглобулинов отдельных классов у животных различных видов и различных возрастных групп, начиная с рождения, имеет важное значение для понимания процесса становления иммунологического статуса организма в постнатальный период.

Одним из важных показателей при исследовании иммуноглобулинов является определение их концентраций в сыворотке крови и других биологических жидкостях организма. Изучение уровня иммуноглобулинов в различных биологических жидкостях крупного рогатого скота проводится многими исследователями в течение ряда лет. Однако до настоящего времени существуют расхождения в полученных данных различными авторами. Эти отличия могут быть обусловлены отсутствием стандартных методов получения биологических жидкостей для исследования и тем, что для иммунологического анализа биологических жидкостей в различных лабораториях используют различные по чувствительности и специфичности методы исследования. До настоящего времени периферическая кровь остается основной биологической жидкостью для иммунологического исследования, иммуноглобулиновый состав ряда экстраваскулярных секретов (носового секрета, слезной жидкости, молозива, молока) остается мало изученным, нет единого мнения о месте синтеза иммуноглобулинов, выявляемых в различных биологических жидкостях организма. Получение таких данных носит фундаментальный характер.

В отечественных и зарубежных работах приводятся данные по количественной характеристике иммуноглобулинов, полученные в основном методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Этот метод позволяет определять уровень иммуноглобулинов в пределах его чувствительности. Низкий уровень иммуноглобулинов в секретах организма требует использования более чувствительного метода, которым является иммуноферментный метод. В основе этих методов лежит использование моноспецифических антисывороток к отдельным классам иммуноглобулинов. Несмотря на то, что отечественными исследователями (П.А.Емельяненко и др., 1973; Р. В. Боровик, 1978; В. И. Шоршнев и др., 1978; Г. И. Филиппова, 1983; В. М. Чекишев, 1984; Ю. Н. Федоров и др., 1988; А. Б. Моркунас, 1988; Ю. К. Пешкус, 1991) были получены моноспецифические антисыворотки к отдельным классам иммуноглобулинов крупного рогатого скота, коммерческое их производство не было налажено. Наибольшие трудности представляло получение моноспецифических антисывороток к иммуноглобулинам Ми А-изотипов, обладающих преципитирующей активностью.

В лаборатории иммунологии ВИЭВ были получены моноклональные антитела к иммуноглобулинам этих изотипов, которые и использованы в нашей работе для изучения иммуноглобулинового профиля биологических жидкостей (сыворотка крови, молозиво, молоко, носовые секреты, слезная жидкость) крупного рогатого скота (коров и телят). При этом основное внимание было направлено на создание тест-системы на основе «сэндвич"-варианта ИФА для количественного определения мономера и димера 1§-А в сыворотке крови, молозиве, молоке, носовых секретах и слезной жидкости у коров после отела и в различные сроки лактации, а также возрастное становление этого изотипа иммуноглобулинов у телят с момента рождения до 2-месячного возраста. Необходимость разработки этой системы обусловлена тем, что концентрация иммуноглобулинов во внешних секретах в большинстве случаев находится за пределами чувствительности метода радиальной иммунодиффузии, поэтому не представляется возможным определить уровень иммуноглобулинов, особенно А-изотипа, в таких секретах как молоко, слезная жидкость и носовые секреты, а также содержание иммуноглобулинов отдельных изотипов в спинно-мозговой жидкости. А эти данные во многом носят не только фундаментальный характер, но и имеют важное диагностическое значение.

Поскольку иммуноглобулины А-изотипа присутствуют в биологических жидкостях в мономерной и димерной формах, необходимо было провести эпитопное картирование моноклональных антител с помощью имму-ноблоттинга и конкурентного варианта ИФА. Для определения их активности, специфичности и перекрестной активности были оптимизированы условия прямого и непрямого варианта ИФА. В качестве стандартного препарата при количественном определении иммуноглобулинов А-изотипа был использован иммунохимически чистый 1§-А, анализ его нативной молекулы и структурных компонентов тяжелых и легких цепей был проведен методом электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (ПА-АГ-ДСН).

Синтез иммунопероксидазных конъюгатов на основе моноклональных антител был осуществлен по классическому варианту (Р.КЛЧакапе, А. Кауао1, 1974). Полученные результаты по определению эпитопной специфичности моноклональных антител методами ИФА и иммуноблоттинга позволили нам разработать «сэндвич"-вариант ИФА для выявления и количественного определения 1§-А в биологических жидкостях крупного рогатого скота, что является принципиально важным при изучении иммуноглобулинового профиля таких биологических жидкостей, как носовые секреты, слезная жидкость, молоко. В процессе разработки указанного варианта ИФА были определены сочетания пар моноклональных антител, продуцируемых различными клонами, для выявленияА. При этом одно из них использовано в качестве им-мобилизирующего компонента, а второе — для выявления иммуноглобулинов, связанных с первичными антителами. Кроме того, оптимизировали условия сенсибилизации микропанелей соответствующими моноклональными антителами, подбирали оптимальные режимы постановки реакции, определяли чувствительность и специфичность метода. Было установлено, что наибольшей эффективностью при выявленииА обладали сочетания МкА, направленные к топографически удаленным эпитопам. Чувствительность разработанной тест-системы составила ОД мкг/мл, что позволило количественно определить уровеньА в биологических жидкостях с низким его содержанием, причем специфичность была абсолютной. Учитывая, что испытанные моноклональные антитела не обладали преципитирующей активностью, нами были получены олигоклональные реагенты путем смешивания различных МкА, которые позволяли выявлять 1§-А в РИД. Чувствительность метода составила 0,1−0,2 мг/мл, т. е. значительно ниже чем ИФА, что ограничивает возможности РИД при определении содержания иммуноглобулинов в секретах.

Сравнительная оценка эффективности «сэндвич"-ИФА и РИД по определению уровня 1§-А в биологических жидкостях крупного рогатого скота показала высокую положительную корреляционную связь между результатами, полученными с помощью этих методов. При этом количественный анализ содержания 1§ А/8^А в различных биологических жидкостях у коров в различные сроки после отела и у телят после рождения до 2-месячного возраста методами «сэндвич"-ИФА и РИД показал прямую возрастную зависимость увеличения содержания иммуноглобулинов данного изотипа в носовых и слезных секретах у телят и обратную — в сыворотке крови. У коров в процессе лактации установлено снижение уровня б^А в секрете молочной железы, что согласуется с результатами исследований по количественной оценке уровня иммуноглобулинов в молозиве и молоке коров (Б.Ьеу1еих, А. ОШег, 1999).

Что касается количественной характеристики других изотипов иммуноглобулинов в биологических жидкостях коров и телят, то следует отметить, что у коров сразу после отела в сыворотке крови установлен наиболее низкий уровень иммуноглобулинов. Наоборот, в молозиве в это период отмечен максимальный уровень иммуноглобулинов всех изотипов. Низкий уровень иммуноглобулинов, и особенно, 10 в сыворотке крови коров связан с тем, что в период формирования молозива этот изотип иммуноглобулинов (^01) селективно переходит из сыворотки крови в молозиво (РЛ.№уЬу, I. Воигпе, 1977) и представляет в нем доминирующий изотип. Считается, что только незначительное количество синтезируется в молочной железе, основным же источником его является сыворотка крови. Другие изотипы иммуноглобулинов: 1§-М и б^А, выявляемые в молозиве, синтезируются плазматическими клетками преимущественно в молочной железе (ЦЕ.ВиНег е1 а1., 1972; 1.Е.ВиЙег, 1981), при этом не исключается транспорт димераА и 1§-М из сыворотки крови не только в молозиво, но и в другие секреты организма (К.В.Рес1ег8еп, 1973; .Ц^есЫсЫ, А. АМегшск1,1980). В сыворотке крови у коров 1§-А является наименьшим компонентом иммуноглобулинов, но преобладает в носовых и слезных секретах. У новорожденных телят после приема молозива доминирующим в сыворотке крови является с возрастом происходит постепенное снижение всех изотипов иммуноглобулинов, достигая минимальных значений в 20−40-дневном возрасте, что связано с их катаболизмом. С этого периода происходит заметное повышение иммуноглобулинов всех изотипов, что связано с их синтезом в организме.

Локальная продукция иммуноглобулинов А-изотипа у телят начинается на второй неделе жизни. Следует подчеркнуть особую роль б^А в формировании устойчивости организма к патогенам, поражающим слизистые оболочки респираторного и желудочно-кишечного тракта. Именно эти иммунологи-чески активные белки во взаимодействии с другими защитными механизмами составляют первую линию обороны организма перед внедрением возбудителей инфекции. Несмотря на то, что длительное время происхождение иммуноглобулинов в секретах организма оставалось предметом дискуссии, и в настоящее время не все вопросы, связанные с природой и биологическими свойствами секреторных иммуноглобулинов, решены. Все еще имеются противоречия в оценке происхождения иммуноглобулинов в таких секретах, как слюна, желчь, кишечное содержимое. Отсутствие стандартизированных тест-систем по определению уровня иммуноглобулинов в секретах сдерживает исследования по оценке состояния местного иммунитета при инфекционных заболеваниях, связанных с поражением респираторного, желудочно-кишечного и мочеполового тракта. Имея в виду большое значение секреторных антител в механизмах формирования местного иммунитета, разработка высоко чувствительных и специфичных тест-систем на основе ИФА с использованием моноклональных антител открывает широкие перспективы для фундаментальных и прикладных исследований в области местного иммунитета, или иммунитета слизистых оболочек.

Наши исследования не претендуют на исчерпывающее решение этой проблемы. Тем не менее, нам удалось разработать «сэндвич"-ИФА для выявления и количественного определения уровня б^А и провести исследования по количественной оценке уровня иммуноглобулинов этого изотипа в таких биологических жидкостях, как молоко, носовые и слезные секреты. Высокая чувствительность метода позволила количественно определить содержание иммуноглобулинов в пробах с низким их содержанием, что не удавалось выполнить с помощью метода РИД, принятого сегодня основным методом количественного определения уровня иммуноглобулинов.

Показать весь текст

Список литературы

  1. А.И. Анатомия домашних животных. // М.: «Колос», 1975, -592 с.
  2. О.В., Каулен Д. Р. Современные взгляды на пути развития иммунологии. // Вест. АМН СССР, 1979, N1, стр. 21−34.
  3. БернетФ Клеточная иммунология. //М.: «Мир», 1971, 573 с.
  4. Р.В. Специфические свойства и функции иммуноглобулинов при некоторых вирусных и хламидийных инфекциях.//Автореф. дисс.докт.вет.наук.-М., 1978,-30 с.
  5. Ю.И., Сапин М. Р., Этиген JI.E. и др. Функциональная анатомия лимфатического узла. // Новосибирск: «Наука», 1992, — 257 с.
  6. И.Л., Худ Л.Е., Вуд У. В. Введение в иммунологию. // М."Медицина", 1983, -160 с.
  7. O.A. Поли- и моноклональные антитела в анализе гуморального иммунного ответа, структуры и функциональных свойств иммуноглобулинов животных.// Дисс.докт. биол. наук, 1998, М.-280 с.
  8. Г. В., Виха И. В. Применение иммуноферментного метода для установления изменений в конформации иммуноглобулина М. // Иммунология, 1987, N2, стр.84−85.
  9. М.А. Определение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных телят.// Ветеринария, 1975, N4, стр. 100−102.
  10. В.Г. Иммунология.// Учебник. М.: «РИЦ МДК», 2000, -487 с.
  11. О.В. Иммуноглобулиновые профили биологических жидкостей организма в норме и при патологии // Автореф. дисс.канд. биол. наук, С.-Петербург, 2002, 22 с.
  12. У.Д. Ветеринарная иммунология. // М."Колос", 1974, — 312 с.
  13. А.Н., Фомина В. Д. Физиология иммунной системы. // Лекция. М.: Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехнолог, им. К. И. Скрябина, 1995, -25 с.
  14. B.C. Возрастные изменения структуры и клеточного состава вилочковой железы свиней. // Тезисы докладов, М.: Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехнолог, им. К. И. Скрябина, 1999, стр. 182−183.
  15. .Б., Гаврилова Е. М., А.М.Егоров и др. Количественное определение иммуноглобулина А в сыворотке крови человека методом иммуноферментного анализа. // Вопросы медицинской химии, 1979, N5, стр. 702 707.
  16. A.M., Осипов А. П., Дзантиев Б. Б., Гаврилова Е. М. Теория и практика иммуноферментного анализа. // М.: Высшая школа, 1991, -288 с.
  17. К.А., Князева O.A. Использование моноклональных антител к иммуноглобулинам человека в реакциях иммунопреципитаци. // Иммунология, 1994, N3,стр.5 8.
  18. П.А. Факторы естественной резистентности крупного рогатого скота в перинатальный период.//Автореф. дисс.докт. вет. наук.-М., 1982,-33 с.
  19. П.А., Грызлова О. Н., Кузьмина Н. М. Приготовление очищенных препаратов иммуноглобулинов крупного рогатого скота.// Доклады ВАСХНИЛ, 1973,№, стр.35−37.
  20. П.А. Иммунологическая реактивность. // Лекция, Приморский с.-х. институт, Уссурийск, 1995, -14 с.
  21. К.А., Тухтаев K.P. Органы иммунной системы (структурные и функциональные аспекты). // Ташкент: «Фан», 1987, -184 с.
  22. П. Е. Иммунитет и инфекция. // М.: «Время», 2002, -352 с.
  23. С.А., Симбирцев A.C., Воробьев A.A. Эндогенные иммуно-модуляторы. // Сб.: Гиппократ, 1992, -256 с.
  24. H.A. Основы морфологии иммунной системы. // М., 1982, -285 с.
  25. Л.И., Силина Т. С. Реакция периферических лимфоидных органов и крови здоровых коров на антигенное раздражение. // Морфологи Украины сельскому хозяйству, методические рекомендации, Киев, 1996, стр.59−60.
  26. Л.Н., Золотарева В. И., Лукьянова В. Возрастные изменения некоторых органов иммунной системы крупного рогатого скота серой украинской породы. // Морфологи Украины сельскому хозяйству, методические рекомендации, Киев, 1996, стр. 57−58.
  27. Д.А., Кошяк В. В. Парентеральное пищеварение и природа антител. // Персиановский, 1998, -203 с.
  28. В.М. Электрофоретические исследования белков крови животных.//Наука, Алма-Ата, 1969,-233 с.
  29. Э.Г. Количественные методы иммуноэлектрофореза // Лабораторное дело, 1972, N7, стр.398−404.
  30. Я.З. Становление иммунологической системы крупного рогатого скота (различного генотипа) в онтогенезе. // М.: Сб. науч. тр., ч. 1, «Использование высокоценных племенных с/х животных», 1998, стр. 79−90.
  31. А.И. Морфология иммунной системы. // Сб. научн. тр.: «Современные проблемы биотехнологии и биологии продуктивных животных», 1999, т. 38, стр. 246−254.
  32. Р.П. Иммунная система крупного рогатого скота. // Доклады МОИП 1983, «Общая биология», М.: «Наука», 1985, стр. 74−78.
  33. O.E., Попова И. А., Козлов В. К., Карелин М. И. Современные тенденции иммунотерапии злокачественных опухолей. // Санкт-Петербург, 2001,-85 с.
  34. А. Б. Количественная характеристика иммуноглобулинов классов G (Glи G2), М и, А сыворотки крови здорового и больного лимфолейкозом крупного рогатого скота. // Дисс.канд. биол. наук, Москва, 1988,-146 с.
  35. В.Д., Труфакин В. А. Органы тимолимфатической системы. // Новосибирск, 1980, -30 с.
  36. В.И., Сидорович И. Г. Коммуникативная и регуляторная функции клеток лимфатических узлов в иммуногенезе. // Успехи соврем, биологии, 1990, стр. 219−230
  37. Р.В. Иммунология. // М.: Медицина, 1982, -368 с.
  38. Р.В. Иммунология и иммуногенетика. // М.: «Медицина», 1976, -336 с.
  39. Р.В. Иммунология.//М., Медицина, 1987,-415 с.
  40. Ю.К. Иммунохимическая и функциональная характеристикаиммуноглобулинов крупного рогатого скота при лейкозе. //Дисс.докторабиол.наук в виде научного доклада, Москва, 1991, -47 с.
  41. Дж., Чейн Б. М. Наглядная иммунология. // М.: Гэотар Медицина, 2002, -95 с.
  42. С.А. Определение секреторного компонента иммуноглобулинов в молозиве и молоке коров.// Автореф. дисс.канд. вет. наук, Омск, 1992,-14 с.
  43. А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. // М.: «Мир», 2000, — 592 с.
  44. М.Р. Иммунные структуры пищеварительной системы. // М.: «Медицина», 1987, -224 с.
  45. М.Р. Принципы организации и закономерности строения органов иммунной системы человека. // Арх. анатомии, 1987, т.92, № 2, стр. 5−16.
  46. М.Р., Этиген JI.E. Иммунная система человека. // М.: «Медицина», 1996, -304 с.
  47. С.Б. Постнатальный органогенез иммунной системы птиц и млекопитающих (эволюционно-морфологическое исследование). // Автореф. дисс.докт.биол.наук, Иваново, 2000, -27 с.
  48. С.Б., Фомина Н. М. Возрастная морфология органов иммунной системы у крупного рогатого скота. //Вопросы интенсиф. произв. с/х продуктов, М.: УДН, 1989, стр. 105−106.
  49. С.Б., Хрусталева И. В. Основные закономерности строения и развития органов иммунной системы птиц и млекопитающих. // Тезисы докладов, М.: Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехнологии им. К. И. Скрябина, 1999, стр.180−182.
  50. Е.В. Природа и возможные механизмы образования антиген зависимых неспецифических иммуноглобулинов. // Успехи совр. биол., 1977, т.84, Вып. З (б), стр. 410−428.
  51. В.М. Структурная организация лимфатических узлов, селезенки и концентрация В-лимфоцитов в крови помесного крупного рогатого скота в постнатальном онтогенезе. // Ж.: Сельскохозяйственная биология, 1998, № 6, стр.81−85.
  52. М.Д. Иммунобиологический статус черно-пестрого скота Восточной Сибири и влияние на него различных аутоэкологических факторов. //Дисс.докт. биол. наук: Омск, 2000, -590 с.
  53. Д.В. Иммуноглобулины человека. Клинико-прикладные ас-пекты.//Автореф. дисс. докт. биол. наук, 1975, М.,-23 с.
  54. Ю.Н., Кадыров С. О., Ездакова И. Ю. и др. Технология получения моноспецифических антисывороток к иммуноглобулинам животных.// Труды ВИЭВ, 1988, т.66,стр. 41−46.
  55. Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят.// Ветеринария, 1996, N11, стр.1−4.
  56. Ю.Н., Верховский О. А. Иммунодефициты домашних животных. // Москва, 1996, -95 с.
  57. Ю.Н., Верховский О. А., Слугин И. В. Основы иммунологии и иммунопатологии собак. // Москва, 2000, -248 с.
  58. Г. И. Выделение отдельных классов иммуноглобулинов сыворотки крови крупного рогатого скота и использование их в иммунохи-мических исследованиях. // Автореф. дисс .канд. биол. наук. М., 1983,-16 с.
  59. X. Иммунологические методы.//Мир, М., 1979,-518 с.
  60. X. Иммунологические методы.//Мир, М., 1987, стр.162−166.
  61. P.M., Пинегин Б. В. Иммунная система желудочно-кишечного тракта: особенности строения и функционирования в норме и при патологии. // Ж.: Иммунология, 1997, № 5, стр. 4−7.
  62. P.M., Г.А.Игнатьева, И.Г.Сидорович. Иммунология.// М., Медицина, 2000.-430 с.
  63. В.М. Иммунологические аспекты резистентности телят. // Дисс. докторавет. наук, Новосибирск, 1983,-383 с.
  64. В.И., Муравьев В. К., Онуфриев В. П. Выделение иммуноглобулинов и получение моноспецифических сывороток.// Ветеринария, 1978, N1, стр.44−47.
  65. Adam Е., Nazs I., Lengyel A. et al. Determination of different antigenic sites on the adenovirus hexon using monoclonal antibodies. //Arch.Virol., 1987,93,261−271.
  66. Adams R., Garry F.B., Aldridge B.M. et al. Hematologic values in newborn beef calves.//Amer.J.Vet.Res., 1992, 53, 6, 944−950.
  67. Aitken R., Hosseini R., MacDuff R. Structure and diversification of the bovine immunoglobulin repertoire. // Vet. Immunol. Immunopathol., 1999, 72, 2129.
  68. Alonso E. Quantitative immunoelectrophoresis of serum proteins.// Clin. Chim. Acta, 1964,10,114−122.
  69. Avrameas S., Guilbert B. Enzyme-immunoassay for the measurement of antigens using peroxidase conjugates.// Biochimie, 1972,54,837−842.
  70. Axelsen N.H., Bock E. Identification and quantitation of antigen and antibodies by means of quantitative immunoelectrophoresis. A survey method.// J. Immunol. Meth., 1972,1,2,109−121.
  71. Baker D. G., Gershwin L. J. Seasonal patterns of total and Ostertagia-spe-cific IgE in grazing cattle. I I Vet. Parasitol., 1992, 44, 211−221.
  72. Behm E., Friemel H., Hofmann R., Dorfling. Methoden zur quantitativen immunchemishen bestimmung von Plasaproteinen. // Z.Med. Labortechnik, 1971, 12,177−189.
  73. Belknap E. B., Baker J. S., Patterson J. S., Walker R. D., Haines D. M., Clark E. G. The role of passive immunity in bovine respiratory syncytial virus- infected calves. // J. Infect. Dis., 1991, 163,470−476.
  74. Berzofsky J.A., Berkover I.J. Immunogenicity and antigen structure.// In: Fundamental Immunology. Ed. by W.E.Paul.-Raven Press, New York, 1993, 235−282.
  75. Bourne K. Immunoglobulins.// Annual Review of Medicine, 1971, 20, 270 P
  76. Boyden A., Bolton E., Gemeroy D. Precipitin testing with special reference to the photoelectric measurement of turbidity.//J.Immunol., 1947, 57, 795−798.
  77. Brambell F. W. R. The passive immunity of the young mammal. // Biol. Rev., 1958,33,488-
  78. Brandon M. R., Lascelles A. K. Relative efficiency of absorbtion of IgGl, IgG2, IgA and IgM in the newborn calf. // Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci., 1971, 49, 629−633.
  79. Brandzaeg P., Fjellanger I., Gjeruldsen S. T. Human secretory immunoglobulins. Salivary secretions from individuals with normal or low levels of serum immunoglobulins. // Scand. J. Haematol. Suppl., 1970, 12, 3−83.
  80. Bruderer U., Deusinger M., Schurch U., Lang A.B. Analyses of affinity distributions within polyclonal populations of antigen-specific antibod-ies.//J.Immunol.Meth., 1992,151,164.
  81. Buffone G.J. Immunonephelometric and turbidimetric measurements of specific plasma proteins.//In:Mannual Clin.Immunol., 1980,23−28.
  82. Burdash N., Ponzio A., Papadopoulos V., Loadholt C.B.Methods for immunoglobulin quantitation compared.//Clin.Chem., 1981,27,345−347.
  83. Butler J.E., Maxwell C.F., Pierce M.B. et al. Studies on the relative synthesis and distribution of IgA and IgGl in various tissues and body fluids of the cow.//J.Immunol., 1972,109,3 8−46.
  84. Butler J.E. Immunoglobulins of mammary secretions.// In: B.L.Larson and V.Smith. Lactation, a comprehensive treatise, 1974, Academic press, New York, 217−255.
  85. Butler J. E. Biochemistry and biology of ruminant immunoglobulins. // Prog. Vet. Microbiol. Immun., 1986, 2, 1−53.
  86. Butler J. E. Immunoglobulin gene organization and the mechanism of repertoire development.// Scand. J. Immunol., 1997, 45, 455−462.
  87. Butler J. E. Immunologic aspects of breast feeding, antiinfectious activity of breast milk. // Sem. Perinatol., 1979, 3, 255−270.
  88. Corley L. D., Staley T. E., Bush L. G., Jones E. W. Influence of colostrum on transepitelial movement of Escherichia coli 055. // J. Dairy Sci., 1977, 60, 1416−1421.
  89. Eddie D. S., Schulkind M. L., Robbins J. B. The isolation and biologic activities of purified secretory IgA and IgG anti-Salmonella typhimurium «O» antibodies from rabbit intestinal fluid and colostrum. // J. Immunol., 1971, 106, 181 190.
  90. Engvall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), Quantitative assay for immunoglobulin G.//Immunochem., 1971,8,871−874.
  91. Erhard M.H., Amon P., Younan M. et al. Absorption and synthesis of immunoglobulins G in newborn calves .//Reproduction in Domestic Animals, 1999, 34, 3−4,173−175.
  92. Etzel L.R., Strohbehn R.E., McVicker J.K. Development of an automated turbidimetric immunoassay for quantification of bovine serum immunoglobulin G. //Am.J.Vet.Res., 1997, 58, 11,1201−1205.
  93. Fahey J.L., McKelvey E.M. Quantitative determinations of serum immunoglobulins in antibody-agar plates.//J.Immunol., 1965, 94,84−90.
  94. Fisher S.V., McEwan A.D. Simple laboratory tests for gamma globulin in calf sera.//Vet.Record, 1968,80,290.
  95. Gay C.C. Escherichia coli and neonatal disease of calves.// Bact. Rev., 1965,28, 75−101.
  96. Goldman A. S., Garza C., Nichols B. L., Goldblum R. M. Immunologic factors of human milk during the first year of lactation. // J. Pediatr., 1982, 100, 563−567.
  97. Goldsby R.A., Srikumaran S., Arulaanandam B. et al. The application of hybridoma technology to the study of bovine immunoglobulins.// Vet. Immunol. Immunopathol., 1987, 17, 25−35.
  98. Goldswaard J., Verdouw-Chamalaun C.V.M., Noordzij A. Quantitation of immunoglobulins in ovine sera and secretions by laser nephelometry. Comparison with radial immunodiffusion technique. // Vet. Immunol. Immunopathol., 1980,1,163−177.
  99. Graham D.A., Mawhinney K.A., Adair B.M., Merza M. Testing of bovine sera by ELISA for IgG, IgM and IgA rheumatoid factors.//Vet. Immunol. Immunopathol., 1998, 61, 2−4, 239−250.
  100. Haaijman J.J., Coolen J., Deen C. et al. Monoclonal antibodies directed against human immunoglobulins: preparation and evalution procedures.//In: Reviews in Immunoassay Technology, Ed.S.B.Pal.-The Macmillan Press LTD, 1988,59−93.
  101. Heidelberger M. The molecular composition of specific immune precipitates from rabbit sera.// J.Amer.Chem.Soc., 1968, 60,242−244.
  102. Henning D., Nielsen K. Cross-reactivity of monoclonal antibodies to bovine immunoglobulins of other species.// Vet.Immunol. Immunopath., 1992, 34, 235 243.
  103. Honkanen-Buzalski T., Sandholm M. Association of bovine secretory immunoglobulins with milk fat globule membranes. // Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis., 1981, 4, 329−342.
  104. Hood L., Gray W. R., Sanders G., Dreyer W. J. Light chain evolution. // Cold Spring Harbor SympQuant. Biol., 1967, 32, 133−145.
  105. Husband A. J., Lascelles A. K. Antibody responses to neonatal immunization of calves // Res. Vet. Sci., 1975, 18, 201−207.
  106. Ivancsics, Kovaacs A.Z. The composition of the colostrums of some beef cattle breeds according to post-partum stage.//Archiv-fur-Tieerzucht, 1999, 42, 1, 17−32.
  107. Jensen P.T.Quantitative studies on immunoglobulins, albumin and total protein in serum from young normal calves. //Nord.Vet.Med., 1978, 30, 145−154.
  108. Jensen P.T., Christensen K. Genetic analysis of the serum level of IgG2 and total protein in Red Danish cattle. //J.Animal Science, 1975, 40, 145−154.
  109. Johnston N. E., Estrella R. A., Oxender W. D. Resistance of neonatal calves given colostrum diet to oral challenge with a septicemia-producing Escherichia coli. II Am. J. Vet. Res., 1977, 38, 1323−1326.
  110. Kristensen F., Antczak D. F. Advances in veterinary immunology 1982. // Developments in Animal and Veterinary Sciences, 12, Elsevier Scientific Publishing Company, Amsterdam Oxford — New York, 1983, 43−133.
  111. Kruse V. Absorption of immunoglobulin from colostrum in newborn calves.//Animal Prod., 1970,12,627−63 8.
  112. Kunkel H.G., Tiselius A. Electrophoresis of Proteins on Filter Paper.// J.Gen.Physiol., 1951,35,1,89−118.
  113. Kunkel H.G. Estimation of alterations of serum gamma globulin by a tur-bidimetric technique.// Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 1947,66, 217−224.
  114. Kyhse-Andersen J. Electroblotting of multiple gels: a simple apparatus without buffer tank for rapid transfer of proteins from polyacrylamide to nitrocellulose. //J.Biophys.Biochem.Meth., 1984,10,203−209.
  115. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.// Nature, 1970, 227, 680−685.
  116. Landverk T. The follicle-associated epithelium of the ileal Peyer’s patch in ruminant is distinguished by its shedding of 50 nm particles. // Immunol. Cell Biol., 1987, 65,251−261-
  117. Lascelles A. K. Immunoglobulin secretion into ruminant colostrum. // In Lactogenesis, University of Pennsylvania Press, 1969, Philadelphia, PA, USA,. 131−136.
  118. Lascelles A. K., Beh K. J., Mukkur T. K., Watson D. J. The mucosal immune system with particular reference to ruminant animals. // In The Ruminant Immune System in Health and Disease, Cambridge University Press, Cambridge, UK, 1986,429−457.
  119. Lascelles A. K., Lee C. S. Lactation: A Comprehensive Treatise. // Academic Press, New York, USA, 1978, 115−177.
  120. Laurell C.B. Quantitative estimation of proteins by electrophoresis in agarose gel containing antibodies.//Analyt.Biochem, 1966,15,45−52.
  121. Laver W.G., Air G.M., Webster R.G., Smitt-Gill S.J.Epitopes on protein antigens: Misconceptions and realities.//Cell, 1990,61,553−556.
  122. Leone C.A.Turbidimetric assay methods: Application of antigen-antibody reactions.//Methods in Immunol.Immunochem., 1968, vol. III, 86−94.
  123. Letesson J.J., Lostrie-Trussart N., Depelchin A. Production d’anticorps monoclonaux specifiques d’isotypes d’immunoglobulines bovines. // Ann. Med. Vet., 1985, 129,131−137.
  124. Levieux D., Oilier A. Bovine immunoglobulin G, beta-lactoglobulin, alpha-lactalbumin and serum albumin in colostrums and milk during the early post par-tum period. // J. Dairy Res., 1999,66,3,421−430.
  125. Libby R.L. The photonreflectometer an instrument for the measurement of turbid systems.// J.Immunol., 1938,34,71−73.
  126. Liberg P. The formal gel reaction in cattle. // Acta Vet.Scand., 1973, 14, 5, 712−722.
  127. Logan E. F., Stenhouse A., Ormrod D. J., Penhale W. J. The role of colostral immunoglobulins in intestinal immunity to enteric colibacillosis in the calf. // Res. Vet. Sci., 1974, 17,280−301.
  128. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. // J.Biol.Chem., 1951, 193, 265−275.
  129. Luckins A.G. Studies on bovine trypanosomiasis. Serum immunoglobulin levels in Zebu cattle exposed to natural infection in East Africa.// British Vet.J., 1972,128,523−528.
  130. Mach J. P., Pahud J. J. Secretory IgA, a major immunoglobulin in most bovine external secretions. // J. Immunol., 1971, 106,2, 552−563.
  131. Manchini G., Carbonara A.O., Heremans I.P. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion.//Immunochemistry, 1965, 2,3,235 254.
  132. Manning L. S., Parmely M. J. Cellular determines of mammary cell-mediated immunity in the rat. The migration of radioisotopically labelled T lymphocytes. // J. Immunol., 1980, 125, 2508−2514.
  133. McBeath D.G., Penhale W.J., Logan E.F. An examination of influence of husbandry on the plasma immunoglobulin level of the newborn calf, using a rapid refractometer test for assessing immunoglobulin content.// Vet. Record, 1971,88,266−270.
  134. McEwan A.D., Fisher E.W., Selman I.E., Penchale W.J. A turbidity test for the estimation of immunoglobulin levels in neonatal calf serum.// Clin. Chim. Acta, 1970,27,155−163.
  135. McGuirk S.M. Colostrum: quality and quantity .//Cattle-Practice, 1998, 6, 1, 63- 66.
  136. McGuirk S.M. Colostrum: quality and quantity.//Irish Vet.J., 1999, 52, 4, 205−209.
  137. Merrill D., Hartley T.F., Claman H.N. Electroimmunodiffusion: A simple, rapid method for quantitation of immunoglobulins in dilute biological fluids.// J. Lab.Clin.Med., 1967,69,151−159.
  138. Moriarty K.M. Continuing education in immunology. In: The structure and function of immunoglobulins. // NewZeland Veterinary J., 1984, 32, 5, 61−64.
  139. Morrison W .1., Baldwin C. L., MacHugh N. D., Teale A. J., Goddeeris B. M., Ellis J. Phenotypic and functional characterization of bovine lymphocytes. // In Progress in Veterinary Microbiology and Immunology, Switzerland, Basel, 1988, 134−164.
  140. Naessens J. Surfase immunoglobulin on B lymphocytes from cattle and sheep.// Int.Immunol., 1997, 9, 349−354.
  141. Naessens J., Williams D.J.L. Characterization and measurement of CD5+ B cells in normal and Trypanosoma congolense-infected cattle.// Eur. J. Immunol., 1992, 22, 1713−1718.
  142. Naessens J., Hopkins J. Summary of third ruminant leukocyte workshop findings. // Vet. Immunol. Immunopathol., 1993, 39, 25−47.
  143. Naessens J., Newson J., Williams D. J. L., Lutje V. Identification of isotypes and allotypes of bovine immunoglobulin M with monoclonal antibodies. // Immunology, 1988,63,569−574.
  144. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labelled antibody: a new method of conjugation. //J.Histochem.Cytochem., 1974,22,1084−1091.
  145. Nansen P. Metabolism of bovine immunoglobulin-G.//Thesis Roy.Vet. and Agricultural Univ. Munksgaard, Copenhagen, 1970.
  146. Newby T.J., Bourne FJ. The nature of the local immune system of the bovine intestine.//Immunology, 1976,118,461−465.
  147. Newby T.J., Bourne F.J. The nature of the local immune system of the bovine mammary gland.//J.Immunol., 1977,118,461−465.
  148. Nielsen K., Sheppard J., Holmes W., Tizard I. Experimental bovine trypanosomiasis. Changes in serum immunoglobulins, complement and complement components in infected animals.//Immunology, 1978,35,817−826.
  149. Norcross N.L. Secretion and composition of colostrum and milk.//J.Am.Vet.Med.Ass., 1982,10,1057−1060.
  150. Norman L.M., Hohenboken W.D., Kelley K.W. Genetic differences in concentration of immunoglobulins G1 and M in serum of neonatal calves. // J. Animal Sci., 1981,53,1456−1472.
  151. Ouchterlony O. Gel-diffusion techniques. //In: Immunochemie, 15. Colloquium Ges.Physiol. Chem., Springer, Berlin, Heidelberg, New York, 1965, 13- 35.
  152. Pahud J. J., Mach J. P. Identification of secretory IgA, free secretory piece and serum IgA in the ovine and caprine species. // Immunochemistry, 1970, 7, 679−686.
  153. Parsons K. R., Bland A. P., Hall G. A. Follicle associated epithelium of the gut associated lymphoid tissue of cattle. // Vet. Pathol., 1991, 28, 22−29.
  154. Pastoret P.P., Griebel P., Bazin H., Govaerts A. Handbook of Vertebrate Immunology .//Academic Press, 1998, -661 p.
  155. Patterson A.S. Simple laboratory test for gamma-globulins in calf sera.//V et. Record, 1967,80,260−261.
  156. Pedersen K.B. Infectious keratoconjunctivites in cattle.// Thesis, 1973, School of Vet.Med., Copenhagen, Denmark.
  157. Pfeiffer N.E., McGuire T.C. A sodium sujfate-precipitation test for assessment of colostral immunoglobulin transfer to calves. // J.Amer.Vet.Med.Ass., 1977,170, 8, 809−811.
  158. Pfeiffer N.E., McGuire T.C., Bendel R.B., Weikel J.M. Quantitation of bovine immunoglobulins: zinc sulfate turbidity, serum electrophoresis and refracto-meter readings.//Amer.J.Vet.Res., 1977,38, 5, 693−698.
  159. Porro M., Viti S., Antoni G. Ultrasensitive silver-stain method for the detection of proteins in polyacrylamide gels and immunoprecipitates on agarose gels. // Anal.Biochem., 1982,127,316−321.
  160. Porter P. Transfer of immunoglobulins IgG, IgA and IgM to lacteal secretions in the parturient sow and their absorption by the neonate piglet. // Biochim. Biophys. Acta, 1969, 181, 381−392-
  161. Porter P. Immunoglobulin IgA in bovine mammary secretion and serum of the neonatal calf.// Biochim.Biophys.Acta, 1971, 236, 664−667.
  162. Quigley J.D., Martin K.R., Dowlen H.H. et al. Immunoglobulin concentration, specific gravity, and nitrogen fractions of colostrum from jersey cattle.// J. Dairy Sci., 1994, 77,1, 264−269.
  163. Quigley J.D., Drewry J.J. Nutrient and immunity transfer from cow to calf pre- and postcalving.//J.Dairy Sci., 1998, 81,10, 2779−2790.
  164. Quiroz R., Bouda J., Medina C.M. et al. Impact of the administration and quality of colostrums on the levels of serum immunoglobulins in calves.// Veterinaria-Mexico, 1998,29,2,161−166.
  165. Radostits O.M. Clinical management of neonatal diarrhea in calves with special reference to pathogenesis and diagnosis. // J.Am. Vet. Med. Ass., 1965, 147, 12,1367−1376.
  166. Reid J., Martinez A. A modified refractometer method as a practical aid to the epidemiological investigation of disease in the neonatal ruminant. // Vet. Record, 1975,96,8,177−179.
  167. Reynolds H. Y., Johnson J. S. Quantitation of canine immunoglobulins. // J. Immunol., 1970, 105, 698−703.
  168. Ritchie R.F. A simple, direct and sensitive technique for measurement of specific proteins in dilute solutions.// J.Lab.Clin.Med., 1967,70,512−517.
  169. Rouse B. T., Ingram D. G. The total protein and immunoglobulin profile of equine colostrum and milk. //Immunology, 1970, 19, 901−907.
  170. Saif L. J., Redman D. R., Smith K. L., Theil K. W. Passive immunity to bovine rotavirus in newborn calves fed colostrum supplement from immunized or non-immunized cow. // Infect. Immun., 1983,41,1118−1131.
  171. Sandholm M. A preliminary report of a rapid method for the demonstration of abnormal gammaglobulin levels in bovine whole blood.// Res. Vet. Sci., 1974, 1, 32−35.
  172. Scicchitano R., Husband A. J., Cripps A. W. Immunoglobulin-containing cells and the origin of immunoglobulins in the respiratory tract of sheep. // Immunology, 1984, 52, 529−537.
  173. Schults R. D. Comments of the immune response of the fetus and neonate. // Cornell. Vet., 1973, 63, 4, 507−535.
  174. Schults R. D., Dunne H. W., Heist C. E. Ontogeny of the bovine immune response. // Infect. Immun., 1973, 7, 681−691.
  175. Sheldrake R. F., Husband A. J., Watson D. L., Cripps A. W. Selective transport of serum-derived IgA into mucosal secretions. // J. Immunol., 1984, 132, -3681. P
  176. Sheldrake R.F., Husband A J. Intestinal uptake of intact maternal lymphocytes by neonatal rats and lambs.//Res.Vet.Sci., 1985,39, 10−15.
  177. Simpson-Morgan M. W., Smeaton T. C. The transfer of antibodies by neonates and adults. //Adv. Vet. Sci. Comp. Med., 1972, 16, 344−386.
  178. Smithies O. An improved procedure for starch gel electrophoresis further variations in the serum proteins in normal individuals.// Biochem. J., 1959, 71, 585.
  179. Sricumaran S., Goldsby R.A., Guidry J. Production and characterization of monoclonal antibodies to bovine IgG2. // In: The Ruminant Immune System (J.Butler, K. Nielsen, J.R.Duncan, eds.), 1981, Plenum Press, N.Y.792.
  180. Sternberg J.C. A rate nephelometer for measuring specific proteins by im-munoprecipitin reactions.// Clin.Chem., 1977,23,1456−1464.
  181. Stone S.S., Gitler M. The validity of the sodium sulphite test for detecting immunoglobulins in calf sera.//Br.Vet.J., 1969,125,68−73.
  182. Stott G.H., D.B.Marx, B.E.Menefee, G.T.Nightengale. Rate of absorp-tion.//J.Dairy Sci., 1979,62,1766−1773.
  183. Stott G.H., Fleenor W.A., Kleese W.C. Colostral immunoglobulin concentration in two fractions of first milking postpartum and five additional milkings.// J. Dairy Sci., 1981,6,459−465.
  184. Symons D. B. A., Clarcson C. A., Beal D. Structure of bovine immunoglobulin constant region heavy chain gamma 1 and gamma 2 genes. // Mol. Immunol., 1989,26,841−850.
  185. Tanaka A., Ishiguro N., Shinagawa M. Sequence and diversity of bovine T-cell receptor b-chain genes. // Immunogenetics, 1990, 32, 263−271.
  186. Taylor B. C., Dellinger J. D., Cullor J. S., Stott J. L. Bovine milk lymphocytes display the phenotype of memory T cells and are predominantly CD8+. // Cell Immunol., 1994, 156, 245−253.
  187. Tokuyama Y., Tokuyama H. Purification and identification of TGF-beta 2-related growth factor from bovine colostrum. // J. Dairy Res., 1993, 60, 99−109.
  188. Toombs R.E., Grotelueschen D.M., Glock R.D. et al. Postnatal calf losses in beef herds: causes and epidemiological characteristics.// Large Animal Practice, 1998, 19, 4, 16−23.
  189. Tyler J.W., B.J.Steevens, D.E.Hostetler et al. Colostral immunoglobulin concentration in Holstein and Guernsey cows.// Am.J.Vet.Res., 1999,60,9,1136−1139.
  190. Tyler J.W., Parish S.M., Besser T.E. et al. Detection of low serum immunoglobulin concentrations in clinically ill calves.// J.Vet.Inter. Med., 1999, 13,1,40−43.
  191. Watkins J.B., Atkins B., Holborrow E.J. Quantitative estimation of protein by electroimmunodiffusion on cellogel acetate membranes. // J.Clin.Pathol., 1971, 24, 665−667.
  192. Watson D. L., Brandon M. R., Lascells A. K. Concentrations of immunoglobulin in mammary secretions of ruminants during involution with particular reference to selective transfer of IgGl. // Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci., 1972, 50, 535−539.
  193. Wesselink R., Stafford K.J., Mellor D.J. et al. Colostrum intake by dairy calves.//New-Zeland Vet.J., 1999,47, 1, 31−34.
  194. Williams M.R., Spooner R.L., Thomas L.H. Quantitative studies on bovine immunoglobulins.// Vet.Res., 1975,96,81 -84.
  195. Williams D. J. L., Newson J., Naessens J. Quantitation of bovine immunoglobulin isotypes and allotypes using monoclonal antibodies. // Vet. Immunol. Immunopathol., 1990, 24, 3,267−283-
  196. Williams M.R., Maxwell D.A.G., Spooner R.L. Quantitative studies on bovine immunoglobulins, normal plasma levels of IgG2, IgGl, IgM and IgA.// Res. Vet. Sci., 1975,18,314−321.
  197. Worku M., Paap M. J., Marquadt W. W. Modulation of Fc receptors for IgG on bovine polymophonuclear neutrophils by interferon-y through de novo RNA transcription and protein synthesis. // Am. J. Vet. Res., 1994, 55, 234−238.
  198. Yalow R.S., Berson S, A. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man.//J.Clin.Invest., 1960,39, 1157−1175.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!