Влияние ацизола на гемодинамические и почечные проявления экспериментальной свинцовой интоксикации

Актуальность исследования. Среди токсических элементов загрязняющих окружающую среду всё более пристальное внимание привлекают тяжёлые металлы, первостепенным из которых является свинец, по данным ВОЗ отнесённый к группе токсических металлов Т класса опасности, являющийся как вредным производственным, так и неблагоприятным экологическим фактором [19- 55]. Свинец отличается высокой токсичностью, способностью поражать жизненно важные органы и системы организма. Из литературных данных известно, что отмечается рост частоты заболеваний сердечнососудистой и мочёвыделительной систем у населения, проживающего в экологически неблагополучных районах [9- 25- 30- 31- 34- 37- 99]. Актуальным на сегодняшний день является создание и разработка эффективных средств профилактики и коррекции токсического действия свинца на организм в условиях хронической интоксикации.

Используемые с этой целью детоксиканты, способные выводить тяжелые металлы из организма (тиоловые соединения — унптиол, сукцимер, тиосульфат натрия, различные комплексопы — пентацин, динатриевая соль этилендпаминтетрауксусной кислоты, дефероксамин, а-пеницилламин и др.) могут вызывать наряду с терапевтическим действием различные побочные эффекты: расстройства желудочно-кишечного тракта, аллергические реакции, лейкопению и др. [93].

В современной токсикологии внимание исследователей направлено главным образом на поиск эффективных лекарственных препаратов, приближённых по своему механизму действия к природным соединениям. Для этих целей наиболее перспективны металлокомплексы ряда жизненно важных элементов на основе азольных лигандов, играющих главную роль в разнообразных ферментативных процессах и связывании микроэлементов в живых организмах. Данные соединения, обладая широким спектром направленного действия, способствуют стабилизации гомеостаза, малотоксичны, легко дозируемы, а самое важное — высокоэффективны. В результате многочисленных исследований, учёными Иркутского института химии СО РАН был синтезирован высокоактивный фармакологический препарат на основе металлокомплексов солей цинка с 1-винилимидазоломацизол [44]. Ацизол — оригинальный отечественный препарат, не имеющий аналогов за рубежом по структуре и механизму действия, являющийся высокоэффективным антидотом против острого отравления смертельными дозами моноокиси углерода, а также эффективным антигипоксантом при кислородной недостаточности. Ацизол изменяет сродство гемоглобина к газам крови, повышая при этом переносимость высоких концентраций карбоксигемоглобина. Кроме того, содержащийся в ацизоле цинк, устраняя его дефицит в организме, нормализует метаболические процессы, оказывая положительное влияние на работу цинк-зависимых ферментных систем. Благодаря наличию антигипоксантного и антиоксидантного действия, ацизол обладает мембранопротекторным свойством [10].

В связи с этим, целью настоящего исследования было экспериментальное изучение влияния ацизол, а на патофизиологические проявления нефрои кардиотоксического воздействия ацетата свинца при разных способах его введения (внутрижелудочпого, подкожного) в организм крыс.

Задачи исследования. Для осуществления поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Изучить влияния подкожного и внутрижелудочного введения ацетата свинца на водовыделительную функцию почек, баланс катионов в крови и их почечную обработку в условиях спонтанного и водного диуреза у крыс линии Вистар.

2. Изучить влияния подкожного и внутрижелудочного введения ацетата свинца на функции сердечно-сосудистой системы и её реактивность к антагонистам симпатоадреналовой и ренин-ангиотензиновой систем у крыс линии Вистар.

3. В контрольных опытах изучить влияние ацизола па водовыделительную функцию почек, баланс катионов в крови и их почечную обработку в условиях спонтанного и водного диуреза у крыс линии Вистар. Изучить влияние ацизола на функции сердечно-сосудистой системы и её реактивность к антагонистам симпатоадреналовой и ренин-ангиотензиновой систем у крыс линии Вистар.

4. Изучить влияние профилактического применения ацизола на водовыделительную функцию почек, баланс катионов в крови и их почечную обработку в условиях спонтанного и водного диуреза у крыс линии Вистар с моделью экспериментальной хронической свинцовой интоксикации.

5. Изучить влияние профилактического применения ацизола на функциональное состояние сердечно-сосудистой системы, её реактивность к антагонистам симпатоадреналовой и репин-ангиотензииовой систем у крыс линии Вистар с моделью экспериментальной хронической свинцовой интоксикации.

6. Исследовать влияние ацизола на процессы перекисного окисления липидов и гистологические изменения в тканях, вызванные ацетатом свинца.

Научная новизна. Изучение профилактической эффективности ацизола в условиях хронической свинцовой интоксикации проводится впервые. Выявлено нормализующее влияние ацизола на изменения показателей системной гемодинамики при хронической интоксикации ацетатом свинца. Установлено профилактическое влияние ацизола на изменения электроли го-и водовыделительной функции почек при хронической интоксикации ацетатом свинца. Впервые показано, что введение ацизола в условиях хронической свинцовой интоксикации значительно уменьшает степень протеинурии и экскрецию мочевины, способствует восстановлению осмолярности мочи. Впервые показано, что профилактическое применение ацизола при хронической свинцовой интоксикации уменьшает выраженность патогистологических изменений в тканях внутренних органов (почки, сердце). Новизна работы подтверждена получением двух патентов на изобретение: «Способ моделирования хронической токсической нефропатнп» № 2 358 327 от 06.03.2008; «Способ профилактики токсического действия свинца у экспериментальных животных при хроническом отравлении № 2 358 328 от 06.03.2008» и двух положительных решений: «Способ моделирования хронической токсической артериальной гипертонии и кардиопатии» заявка № 2 008 114 661/14 (16 207) от 14.04.2008, положительное решение № 01−213−2008 от 27.03.09- «Способ профилактики хронической токсической артериальной гипертонии и кардиопатии у экспериментальных животных» заявка № 2 008 114 743/13 (16 301) от 14.04.2008, положительное решение № 01.213.2009 от 3.04.09.

Научно-практическая значимость работы. Экспериментальные исследования и полученные результаты наглядно демонстрируют токсические эффекты хронической свинцовой интоксикации и относятся к области фундаментальных знаний, так как расширяют представления о действии избытка свипца в организме. Выявленные эффекты ацизола демонстрируют закономерности влияния детоксиканта с выраженной антигипоксической активностью на функциональное состояние сердечнососудистой системы, электролито-водовыделительную функцию почек и токсические эффекты избытка свинца при хронической интоксикации. Материалы исследования могут найти дальнейшее применение при разработке способов практического применения ацизола и его клинической апробации для профилактики действия избыточных концентраций свинца на организм.

Новые данные о влиянии ацизола на функциональное состояние сердечно-сосудистой системы и почек в условиях хронической интоксикации ацетатом свинца могут быть использованы в преподавании физиологических основ детоксикации, при исследовании механизмов действия свинца на другие органы и системы организма, при разработке способов профилактики и коррекции токсических эффектов избыточного поступления в организм других металлов.

Материалы диссертации внедрены в учебный процесс и научные исследования на кафедрах нормальной физиологии, патологической физиологии и курсе профпатологии ГОУ ВПО СОГМА Росздрава.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Профилактическое введение ацизола существенно ослабляет изменения водои электролитовыделительной функции почек при хронической интоксикации ацетатом свинца, значительно уменьшает степень протеинурии и способствует восстановлению осмолярности мочи.

2. Профилактическое применение ацизола способствует нормализации показателей системной гемодинамики у экспериментальных животных в условиях хронической свинцовой интоксикации, снижая активность ренин-ангиотензиновой системы и адренореактивность сердечно-сосудистой системы.

3. Применение ацизола уменьшает выраженность процессов перекисного окисления липидов и патогистологических изменений внутренних органов (почки, сердце) в условиях хронической свинцовой интоксикации.

Апробация диссертационной работы Основные положения работы доложены и обсуждались на VII конференции молодых ученых СОГМА и ИБМИ ВНЦ РАН (Владикавказ, 2008 г.) — на 10-й юбилейной научной сессии, посвященной 70-летию СОГМА (Владикавказ, 2009 г.).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 4 — в журналах, рекомендованных ВАК Минобразования России.

Структура диссертации.

Диссертация изложена на 238 страницах, иллюстрирована — 37 рисунками и 58 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, восьми глав, содержащих результаты собственных исследований, заключения, общих выводов, списка.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ:

1. Подкожное или внутрижелудочное ежедневное введение интактным крысам ацизола в дозе 30 мг/кг массы тела в течение 16 дней вызывает нерезкие изменения процессов мочеобразования, экскреции катионов с мочой и их содержания в плазме крови.

2. При хронической свинцовой интоксикации, вызванной внутрижелудочным и подкожным введением ацетата свинца в дозе 40 мг/кг массы животного в течение 16 дней, происходит увеличение объема спонтанного и водного диуреза, экскреции натрия, калия и кальция, более выраженные при подкожном введении ацетата свинца. Протеинурия при хронической свинцовой интоксикации носит ярко выраженный характер, особенно при подкожном введении ацетата свинца.

3. Профилактическое применение ацизола приводит к снижению выраженности изменений водовыделительной и электролитовыделительной функции почек крыс при хроническом воздействии ацетата свинца. Применение ацизола уменьшает выраженность протеинурии при хроническом введении ацетата свинца.

4. Подкожное введение ацизола интактным экспериментальным животным в дозе 30 мг/кг массы тела каждый день в течение 16 дней не приводит к изменению показателей системной гемодинамики. Внутрижелудочное введение ацизола экспериментальным животным в той же дозе приводит к незначительному повышению среднего артериального давления. Применение ацизола вызывает нерезкие сдвиги ар адренореактивности сердечно-сосудистой системы и реактивности ренин-ангиотензиновой системы.

5. При хронической свинцовой интоксикации, вызванной внутрижелудочным и подкожным введением ацетата свинца, происходит повышение среднего артериального давления вследствие выраженного увеличения удельного периферического сосудистого сопротивления. При этом возрастает как агадренореактивность сердечно-сосудистой системы, так и реактивность ренин-ангиотензиновой системы. Профилактическое применение ацизола приводит к снижению выраженности изменений показателей системной гемодинамики при хроническом воздействии ацетата свинца.

6. Внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца экспериментальным животным приводит к повышению концентрации в эритроцитах малонового диальдегида. Одновременно с этим отмечается снижение активности каталазы в плазме крови. Профилактическое введение ацизола в условиях хронической свинцовой интоксикации снижает выраженность нарушений процессов перекисного окисления липидов, повышая активность ферментов антиокислительной защиты организма. Изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца приводит к значительным морфологическим изменениям внутренних органов (почки и сердца) у экспериментальных животных. Профилактическое применение ацизола способствует снижению выраженности структурно-функциональных изменений тканей почек и сердца в условиях хронической свинцовой интоксикации.

заключение

.

Глобальное загрязнение окружающей среды свинцом в последнее время носит угрожающий характер. Многочисленные экспериментальные исследования, проведенные для установления патофизиологических механизмов токсического влияния свинца на организм, установили наличие взаимосвязи между ростом патологии мочевыделительной и сердечнососудистой систем и концентрацией свинца в крови [9- 25- 102].

В этой связи следует считать актуальным поиск эффективных средств профилактики токсического действия свинца при его хроническом поступлении в организм. Антиоксидантные, мембранопротекторные, антигипоксические и антитоксические свойства ацизола (бпс (1-винилимидазол-1Ч)цинка диацетат), послужили основанием для изучения его возможной профилактической активности при хронической свинцовой интоксикации.

Целью настоящего исследования было изучение профилактического влияния ацизола на изменения водои электролитовыделительной функции почек, показатели системной гемодинамики и изменения её реактивности у крыс при хронической интоксикации ацетатом свинца.

Опыты проводились на крысах самцах линии Вистар. Хроническую свинцовую интоксикацию вызывали путем ежедневного введения ацетата свинца (внутрижелудочного и подкожного) в дозе 40 мг/кг веса животного в течение 16 дней. Раствор ацизола в дозе 30 мг/кг вводили парентерально экспериментальным животным ежедневно в течение 16 дней и интрагастрально каждый день на протяжении 16 дней. Через 16 дней проводили изучение водои электролитовыделительной функции почек в условиях шестичасового спонтанного и трехчасового водного диуреза (5% водная нагрузка), а также в опытах на наркотизированных животных изучали изменения гемодинамических показателей.

Исследования функционального состояния почек у животных получавших внутрижелудочное введении ацетата свинца в дозе 40 мг/кг выявило достоверное увеличение объема 6-ти часового спонтанного диуреза относительно фона, несмотря на снижение скорости клубочковой фильтрации. Увеличение объёма спонтанного диуреза в данной группе животных было обусловлено снижением канальцевой реабсорбции воды по сравнению с показателями интактной группы животных. Водовыделительная функция почек у крыс с подкожным введением ацетата свинца в дозе 40 мг/кг характеризовалась более выраженными изменениями, чем у животных получавших внутрижелудочное введение ксенобиотика в той же дозе. Результаты исследования показали, что у животных получавших подкожное введение ацетата свинца, несмотря на существенное снижение скорости клубочковой фильтрации, происходило повышение объёма 6-часового спонтанного диуреза относительно фоновых значений и показателей животных внутрижелудочно получавших ацетат свинца. Полиурическая реакция в данной группе животных была обусловлена наличием ярко выраженных нарушений канальцевой реабсорбции воды по сравнению как с показателями интактной группы, так и со значениями животных получавших внутрижелудочное введение ацетата свинца.

При изучении электролитовыделительной функции почек крыс внутрижелудочно и подкожно получавших ацетат свинца в условиях спонтанного диуреза выявилось увеличение экскреции натрия в обеих группах экспериментальных животных относительно интактных значений, что было следствием снижения канальцевой реабсорбции катиона, несмотря на снижение фильтрационного заряда натрия. Изменения процессов почечной обработки натрия при подкожном введении ацетата свинца носили более выраженный характер, чем у животных с внутрижелудочным введением ксенобиотика.

Хроническая свинцовая интоксикация сопровождалась значительным увеличением экскреции калия у животных, как с внутрижелудочным, так и с подкожным введением ацетата свинца относительно фоновых значений, что было обусловлено увеличением фильтрационного заряда калия.

Внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца в дозе 40 мг/кг приводило к снижению канальцевой реабсорбции кальция, что способствовало увеличению экскреции катиона, несмотря на снижение фильтрационного заряда кальция по сравнению с показателя интактной группы животных.

Необходимо отметить, что нарушения ионовыделительной функции почек экспериментальных животных в условиях хронической свинцовой интоксикации имели более ярко выраженный характер при подкожном введении ацетата свинца.

Внутрижелудочное введение ацетата свинца в дозе 40 мг/кг способствовало увеличению экскреции белка с мочой относительно фоновых значений. Протеинурия в группе животных подкожно получавших ацетат свинца в той же дозе была выше показателей как интактной группы животных, так и животных получавших внутрижелудочное введение ацетата свинца.

Хроническая интоксикация при внутрижелудочном и подкожном путях введения ацетата свинца сопровождалась увеличением экскреции мочевины по сравнению с показателями интактной группы животных.

Осмолярность мочи на фоне хронического отравления ацетатом свинца значительно снижается, что в условиях повышения объёма спонтанного диуреза и возросшей экскреции электролитов позволяет считать ослабленной способность почек к концентрированию мочи, причём при подкожном введении ацетата свинца, изменения концентрирующей функции почек имели более выраженный характер.

Исследование функционального состояния почек на фоне 5% водной нагрузки выявило увеличение объёма суммарного трёхчасового диуреза у животных, как с внутрижелудочным, так и с подкожным введением ацетата свинца в дозе 40 мг/кг относительно показателей интактной группы животных. Процент выведения водной нагрузки при внутрижелудочном и подкожном введении ацетата свинца также повышался относительно значений интактной группы животных. Почасовые изменения водного диуреза характеризовались увеличением объёма мочи на 1 и 3 часе, вследствие достоверного снижения канальцевой реабсорбции воды, несмотря на снижение скорости клубочковой фильтрации относительно фоновых значений. Указанные изменения способствовали увеличению объёма суммарного трёхчасового диуреза в группах животных получавших внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца относительно значений интактного контроля, несмотря на то, что на 2 часе эксперимента в обеих группах животных получавших внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца происходило уменьшение объёма диуреза относительно интактных значений, вследствие значительного угнетения скорости клубочковой фильтрации.

Суммарная трехчасовая экскреция натрия на фоне 5% водной нагрузки значительно повышалась при введении ацетата свинца относительно интактных значений, однако при подкожном введении ксенобиотика выявленные нарушения носили более выраженный характер, чем при внутрижелудочном введении ацетата свинца, т. е. отмечалась ярко выраженная зависимость от способа введения тяжёлого металла. Увеличение суммарной экскреции натрия, как при внутрижелудочном, так и при подкожном введении ацетата свинца относительно значений интактного контроля было следствием повышения экскреции данного катиона на 1, 2 и 3 часах водного диуреза, что было обусловлено выраженными изменениями канальцевой реабсорбции натрия на протяжении всего эксперимента.

Изменения почечной обработки калия на фоне введения 5% водной нагрузки в группах животных получавших внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца в дозе 40 мг/кг характеризовались достоверным повышением суммарной трехчасовой экскрецией катиона относительно интактного контроля, вследствие повышения фильтрационного заряда калия на 1 и 3 часе эксперимента, тогда как на 2 часе водного диуреза показатели почечной обработки калия в группах животных получавших внутрижелудочное и подкожное введение ацетат свинца достоверно не отличались от интактного контроля.

Суммарная трехчасовая экскреция кальция после введения 5% водной нагрузки в двух группах животных получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца значительно повышалась относительно фоновых значений, что было обусловлено выраженным угнетением канальцевой реабсорбции катиона на протяжении всего эксперимента, несмотря на одновременное снижение фильтрационного заряда кальция относительно интактных животных.

Осмолярность мочи на фоне введения 5% водной нагрузки на первом часе эксперимента у животных получавших внутрижелудочное введение ацетата свинца характеризовалось достоверным снижением по сравнению с показателями интактного контроля. На 2 и 3 часе эксперимента осмолярность мочи у животных получавших внутрижелудочное введение ацетата свинца достоверно не отличалась от показателей интактной группы животных. У животных получавших подкожное введение ацетата свинца показатели осмолярности мочи на фоне введения 5% водной нагрузки характеризовались достоверным снижением на 1 и 3 часах исследования относительно фоновых значений и показателей группы животных получавших внутрижелудочное введение ацетата свинца. Осмолярность мочи на 2 часе эксперимента в группе животных подкожно получавших ацетат свинца достоверно не отличалась от фоновых значений.

Проведенный анализ и сравнение результатов, полученных при внутрижелудочном и подкожном введении ацетата свинца в дозе 40 мг/кг веса животного показали, что изменения водои электролитовыделительной функции почек экспериментальных животных имеют одинаковую направленность, но более выражены при подкожном введении тяжелого металла.

Результаты изучения влияния хронической свинцовой интоксикации на функцию почек у экспериментальных животных не противоречили литературным данным. Полиурия и увеличение экскреции электролитов с мочой в условиях свинцовой интоксикации были обусловлены нарушением процессов канальцевой реабсорбции воды, вследствие развития выраженных изменений в проксимальных канальцах при свинцовой интоксикации [99- 150]. Нарушение процессов мочеобразования при свинцовой интоксикации, связано со снижением почечного плазмотока, что в свою очередь приводит к снижению скорости клубочковой фильтрации [72- 190−251].

Непосредственно перед началом анализа полученных данных в процессе изучения влияния ацизола на функции почек у крыс с хронической интоксикацией ацетатом свинца, необходимо отметить некоторые особенности, выявленные нами при проведении контрольных исследований у животных с изолированным виутрижелудочным и подкожным введением ацизола в дозе 30 мг/кг. Анализ результатов 16-ти дневного внутрижелудочного введения ацизола в дозе 30 мг/кг массы тела показал, что в условиях 6-ти часового спонтанного диуреза у экспериментальных животных происходило достоверное снижение скорости клубочковой фильтрации относительно интактного контроля, тогда как канальцевая реабсорбция воды и объём диуреза достоверно не отличались от фоновых значений. Подкожное ведение ацизола в той же дозе приводило к увеличению объёма 6-ти часового спонтанного диуреза, вследствие снижения канальцевой реабсорбции воды относительно показателей интактной группы животных.

Электролитовыделительная функция почек крыс характеризовалась снижением экскреции натрия в условиях внутрижелудочного введения ацизола вследствие достоверного снижения фильтрационного заряда катиона относительно фоновых значений. Экскреция калия, кальция и белка в условиях внутрижелудочного введения ацизола достоверно не отличалась от показателей интактного контроля. Подкожное ведение ацизола экспериментальным животным не приводило к достоверным изменениям экскреции белка и почечной обработки натрия, калия и кальция относительно интактных значений.

При внутрижелудочном и подкожном введении ацизола происходило достоверное снижение экскреции мочевины, относительно фоновых значений. Внутрижелудочное введение ацизола способствовало достоверному повышению осмолярности мочи в условиях 6-ти часового спонтанного диуреза, тогда как подкожное введении ацизола не приводило к достоверному изменению осмолярности мочи относительно значений интактной группы животных.

Исследование функционального состояния почек на фоне 5% водной нагрузки в условиях внутрижелудочного и подкожного введения ацизола не выявило достоверных изменений показателей водовыделительной функции почек экспериментальных животных.

Почечная обработка натрия в группе животных внутрижелудочно получавших ацизол на фоне 5% водной нагрузки характеризовалась снижением суммарной трёхчасовой экскреции натрия относительно интактных значений, вследствие снижения экскреции катиона на 1 и 2 часе эксперимента, что было обусловлено повышением канальцевой реабсорбции натрия относительно значений интактной группы животных.

Подкожное введение ацизола не приводило к достоверным изменениям почечной обработки натрия в условиях введениях 5% водной нагрузки.

Внутрижелудочное и подкожное введение ацизола не приводило к достоверному изменению суммарной трехчасовой экскреции калия на фоне 5% водной нагрузки.

Суммарная трехчасовая экскреция кальция после введения 5% водной нагрузки в группе животных внутрижелудочно получавших ацизол достоверно не отличалась от показателей интактной группы животных. При подкожном введении ацизола происходило достоверное повышение суммарной трёхчасовой экскреции кальция относительно фоновых значений, что было обусловлено повышением экскреции кальция на 3 часе эксперимента, вследствие снижения канальцевой реабсорбции катиона относительно показателей интактной группы животных.

Почасовое определение осмолярность мочи на фоне введения 5% водной нагрузки у животных внутрижелудочно и подкожно получавших ацизол не выявило достоверных изменений относительно показателей фоновых значений.

Увеличение объёма спонтанного диуреза у животных профилактршески получавших ацизол на фоне, как внутрижелудочного, так и подкожного введения ацетата свинца было обусловлено снижением канальцевой реабсорбции воды относительно фоновых значений, однако уровень канальцевой реабсорбции был достоверно выше, чем у животных получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца, что в свою очередь способствовало уменьшению степени полиурии. Скорость клубочковой фильтрации в двух группах животных получавших профилактическое введение ацизола на фоне изолированного внутрижелудочного и подкожного введения ацетата свинца, достоверно снижалась относительно фона, однако была выше показателен животных получавших только внутрижелудочно и подкожно ацетат свинца, т. е. профилактическое ведение ацизола способствовало некоторому восстановлению скорости клубочковой фильтрации в условиях хронической свинцовой интоксикации.

Проведенные экспериментальные исследования наглядно показали, что профилактическое применение ацизола в двух группах опытных животных в условиях хронической свинцовой интоксикации существенно влияло на показатели почечной обработки натрия, калия и кальция.

Уровень экскреция натрия в условиях как внутрижелудочного, так и подкожного введения ацетата свинца на фоне парентерального и интрагастрального введения ацизола соответственно, увеличивался относительно фоновых значений, однако оставался достоверно ниже, чем у животных, получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца, вследствие меньшей выраженности изменений канальцевой реабсорбции катиона.

Профилактическое введение ацизола двум группам животных получавших внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца способствовало снижению степени выраженности изменений экскреции калия с мочой относительно значений экспериментальных животных, получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца.

Профилактическое применение ацизола в двух группах животных, как при подкожном, так и при внутрижелудочном путях его введения в условиях интрагастрального и парентерального введения ацетата свинца снижало степень выраженности изменений экскреции калия с мочой относительно животных, получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца, вследствие меньшей выраженности изменений канальцевой реабсорбции катиона.

Таким образом, применение ацизола способствует профилактике нарушений электролитовыделительной функции почек крыс в условиях хронической свинцовой интоксикации.

Профилактическое применение ацизола в условиях внутрижелудочного и подкожного введения ацетата свинца достоверно снижало степень выраженности протеинурии относительно значений животных, получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца.

Уровень экскреции мочевины в двух группах животных профилактически получавших ацизол на фоне как внутрижелудочного, так и подкожного введения ацетата свинца был достоверно выше фоновых значений, однако оставался достоверно ниже, чем у животных, получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца.

Осмолярность мочи в обеих группах животных профилактически получавших ацизол на фоне как внутрижелудочного, так и подкожного введения ацетата свинца была достоверно выше значений животных, получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца, однако оставалась ниже фонового контроля.

Функциональное состояние почек экспериментальных животных профилактически получавших ацизол в условиях внутрижелудочного и подкожного введения ацетата свинца на фоне введения 5% водной нагрузки характеризовалось повышением, как суммарного трехчасового диуреза, так и увеличением процента выведения водной нагрузки относительно фона, в основном за счет увеличения объема диуреза на 1 часе исследования. Однако следует указать, что профилактическое применение ацизола в двух группах животных, получавших ацетат свинца, способствовало снижению процента выведения водной нагрузки и объема трехчасового диуреза относительно опытных групп животных с изолированным внутрижелудочным и подкожным введением ацетата свинца, вследствие менее выраженного изменения канальцевой реабсорбции воды на первом и втором часе. Данные наблюдения могут свидетельствовать о наличии у ацизола способности уменьшать выраженность изменений водовыделительной функции почек в условиях хронической свинцовой интоксикации.

Изменения экскреции натрия в условиях гипергидратации, вызванной введением водной нагрузки у животных, профилактически получавших ацизол на фоне внутрижелудочного и подкожного введения ацетата свинца, характеризовались увеличением суммарной трехчасовой экскрецией катиона относительно фоновых значений, вследствие увеличения экскреции на 1 и 3 часе эксперимента. Профилактическое введение ацизола двум группам животных получавших внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца способствовало снижению степени натриуреза относительно показателей животных получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца.

Профилактическое введение ацизола на фоне интоксикации ацетатом свинца снижало степень выраженности нарушений экскреции калия с мочой относительно опыта с изолированным введением ацетата свинца, что характеризовалось снижением суммарной трехчасовой экскреции катиона, вследствие снижения фильтрационного заряда калия.

Применение ацизола как при внутрижелудочном, так и при подкожном введении ацетата свинца способствовало снижению суммарной трехчасовой экскреции кальция, относительно значений опытных групп животных получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца, вследствие повышения канальцевой реабсорбции кальция и увеличению его фильтрационного заряда.

У экспериментальных животных получавших изолированное внутрижелудочное введение ацетата свинца происходило повышение среднего артериального давления (САД), относительно фоновых значений, что было обусловлено увеличением, прежде всего удельного периферического сосудистого сопротивления (УПСС), тогда как сердечный индекс (СИ) уменьшался, вследствие снижения ударного индекса (УИ) и уменьшения частоты сердечных сокращений (ЧСС) относительно фона. Таким образом, системная гемодинамика приобретала признаки артериальной гипертензии гипокинетического типа. В группе животных получавших подкожно только лишь ацетат свинца происходило повышение САД относительно фоновых значений. Гипокинетический тип системной гемодинамики у экспериментальных животных получавших изолированно подкожно ацетат свинца был обусловлен увеличением УПСС и одновременным уменьшением СИ, вследствие снижения УИ, тогда как ЧСС была выше фоновых значений. Необходимо отметить, что изменения показателей системной гемодинамики были более выражены при внутрижелудочном введении ацетата свинца.

У животных внутрижелудочно получавших ацетата свинца введение ар адреноблокатора доксазозина в условиях острого эксперимента приводило к выраженному и более продолжительному снижению САД и УПСС, относительно интактных значений, одновременно с этим отмечался менее значимый прирост СИ, чем у интактных животных, вследствие уменьшения ЧСС на протяжении всего эксперимента. Более выраженное уменьшение УПСС в группе животных внутрижелудочно получавших ацетат свинца, после внутривенного введения каптоприла приводило к более значимому снижению САД, чем у интактных животных, на протяжении всего эксперимента.

Внутривенное введение доксазозина и каптоприла экспериментальным животным, получавшим изолированное подкожное введение ацетата свинца, приводило к более значимому снижению САД на поздних этапах острого эксперимента.

Результаты, полученные при введении доксазозина и каптоприла интактным животным и крысам с хронической свинцовой интоксикацией, позволяют полагать, что хроническая свинцовая интоксикация, как при внутрижелудочном, так и при подкожном введении ксенобиотика приводит к активации ренин-ангиотензиновой системы и повышению ар адренореактивности. Сравнение полученных результатов в группах животных получавших изолированное введение ацетата свинца выявило, что активность ренин-ангиотензиновой системы и агадренореактивность в условиях подкожного введения ацетата свинца менее выражена, чем при внутрижелудочном введении токсиканта.

Непосредственно перед началом анализа полученных результатов в процессе изучения влияния ацизола на основные показатели системной гемодинамики у крыс с хронической свинцовой интоксикацией, необходимо отметить некоторые особенности, выявленные нами при проведении контрольных исследований у животных с изолированным внутрижелудочным и подкожным введением ацизола в дозе 30 мг/кг.

Внутрижелудочное введение ацизола экспериментальным животным не приводило к достоверным изменениям показателей системной гемодинамики, относительно значений интактной группы животных. При подкожном введении ацизола экспериментальным животным происходило повышение САД по сравнению со значениями интактной группы животных, тогда как остальные показатели системной гемодинамики достоверно не отличались от показателей интактной группы животных.

В условиях острого эксперимента внутривенное введение аг адреноблокатора опытной группе животных, получавших изолированное подкожное введение ацизола, приводило к снижению САД и УПСС на протяжении всего опыты, однако, степень снижения в данной группе животных была менее значима, чем у интактной группы животных. Данное наблюдение позволяет считать сниженной ai-адренореактивность сердечнососудистой системы в условиях подкожного введения ацизола. Внутривенное введение каптоприла экспериментальным животным, подкожно получавшим ацизол, приводило к снижению САД и УПСС, однако выраженность реакций снижения данных показателей была значительно меньшей, чем у животных интактного контроля.

Повышение ai-адренореактивности сердечно-сосудистой системы у экспериментальных животных, получавших изолированное внутрижелудочное введение ацизола, было документировано большей выраженностью реакций снижения САД и УПСС на поздних этапах исследования после введения оц-адреноблокатора. В группе животных внутрижелудочно получавших ацизол более значимое снижение САД и УПСС на поздних этапах исследования, спустя 20 — 40 — 60 минут после введения каптоприла животным, относительно фоновых значений, позволяет считать повышенной активность ренин-ангиотензиновой системы.

Подкожное введение ацизола в условиях внутрижелудочного введения ацетата свинца полностью нивелировало изменения САД, СИ, УИ и ЧСС, тогда как УПСС было достоверно выше показателей интактного контроля. Таким образом, данное наблюдение свидетельствует о наличии у ацизола способности профилактического влияния на кардиоваскулярные эффекты хронической свинцовой интоксикации.

САД в группе животных внутрижелудочно получавших ацизол в условиях подкожного введения ацетата свинца было выше значений интактной группы животных, вследствие увеличения УПСС. Необходимо отметить, что САД в группе животных, профилактически получавших ацизол, в условиях подкожного введения ацетата свинца не отличалось от показателей животных, получавших изолированное подкожное введение ацетата свинца.

Определение агадренореактивности сердечно-сосудистой системы экспериментальных животных с помощью внутривенного введения доксазозина выявило повышение агадренореактивности у экспериментальных животных, получавших подкожное введение ацизола на фоне внутрижелудочного введения ацетата свинца, что было документировано более значимым снижением САД и УПСС относительно интактных значений и показателей группы животных, получавших изолированное внутрижелудочное введение ацетата свинца. Подкожное введение ацизола в условиях внутрижелудочного введения ацетата свинца способствовало снижению реактивности ренин-ангиотензиновой системы, что проявлялось в менее значимом снижении САД и УПСС относительно интактных значений и показателей животных, получавших изолированное внутрижелудочное введение ацетата свинца.

Более значимая степень снижения САД и УПСС после внутривенного введения доксазозина в группе животных, внутрижелудочно получавших ацизол на фоне подкожного введения ацетата свинца, относительно интактных значений позволяет считать повышенной агадренореактивность сердечно-сосудистой системы животных. Проведенное сравнение полученных результатов позволило сделать вывод, что возрастание сц-адренореактивности сердечно-сосудистой системы животных, внутрижелудочно получавших ацизол на фоне подкожного введения ацетата свинца, было менее выражено, чем у животных, получавших изолированное подкожное введение ацетата свинца.

Повышение реактивности реннн-ангиотензиновой системы в группе животных внутрижелудочно получавших ацизол на фоне подкожного введения ацетата свинца было документировано более значимым снижение САД на поздних этапах эксперимента (30,60 и 90 минуты) после внутривенного введения каптоприла, относительно интактных значений.

Изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца двум группам экспериментальных животным приводило к активации процессов липопероксидации, что выражалось в повышении концентрации в эритроцитах малонового диальдегида (МДА). Непосредственно с этим определялось снижение активности каталазы в плазме крови, тогда как активность супероксиддисмутазы (СОД) в эритроцитах, у экспериментальных животных получавших изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацетата свинца достоверно не отличается от показателей интактной группы животных. При сравнении полученных результатов было выявлено, что при подкожном введении ацетата свинца изменения функционального состояния процессов перекисного окисления липидов и антиокислительной защиты клеток имели более выраженный характер, чем при внутрижелудочном введении токсиканта.

Результаты изучения влияния хронической свинцовой интоксикации на функциональное состояние процессов перекисного окисления липидов и антиокислительной защиты клеток у экспериментальных животных не противоречили литературным данным.

Изолированное внутрижелудочное и подкожное введение ацизола, двум группам экспериментальных животных подтвердило наличие у ацизола ярко выраженного антиоксидантного действия, что характеризовалось повышением активности ферментов антиокислительной защиты организма и снижением концентрации МДА в эритроцитах у экспериментальных животных. Следует отметить, что при подкожном введении ацизола его антиоксидантные эффекты имели более выраженный характер.

У экспериментальных животных подкожно получавших ацизол на фоне внутрижелудочного введения ацетата свинца происходило увеличение концентрации МДА в эритроцитах, относительно значений интактной группы животных, однако концентрация МДА в эритроцитах была ниже показателей животных получавших изолированное внутрижелудочное введение ацетата свинца. У животных подкожно получавших ацизол на фоне внутрижелудочного введения ацетата свинца происходило снижение активности каталазы в плазме крови относительно фоновых значений, однако активность каталазы у них была выше, чем у животных, получавших изолированное внутрижелудочное введение ацетата свинца. Одновременно с этим отмечалось повышение активности СОД относительно фоновых значений.

У животных внутрижелудочно получавших ацизол на фоне подкожного введения ацетата свинца отмечалось снижение активности каталазы в плазме крови при одновременном повышении концентрации МДА относительно фоновых значений, но концентрация МДА в эритроцитах у животных получавших внутрижелудочно ацизол на фоне подкожного введения ацетата свинца была достоверно меньше, чем у крыс получавших изолированное подкожпое введение ксенобиотика. Активность СОД в эритроцитах достоверно не отличалась от интактных значений. Однако следует указать, что активность каталазы в группе животных профилактически получавших ацизол была выше, чем у животных получавших изолированное введение ацетата свинца.

Таким образом, профилактическое применение ацизола в условиях хронической свинцовой интоксикации является эффективным способом коррекции токсического действия ксенобиотика. Обладая выраженным антиоксидантным действием ацизол на фоне хронического отравления свинцом, способствует снижению активности процессов перекисного окисления липидов с одновременным повышением активности ферментов антиокислительной защиты организма.

Гистологическое исследование органов (почки и сердца) крыс на фоне хронической свинцовой интоксикации выявило отчетливую взаимосвязь между способом введения ацетата свинца и выраженностью морфологических изменений. Профилактическое введение ацизола при подкожном и внутрижелудочном введении ацетата свинца в дозе 40 мг/кг способствовало значительному уменьшению выраженности альтеративных, некротических и некробиотических изменений в исследуемых органах. Определялась положительная реакция (гиперплазия лимфо-гистиоцитарных элементов) иммунокомпетентной ткани на повреждение органоспецифических и стромально-сосудистых структур.

Эффект профилактического применения ацизола наиболее ярко отмечался при внутрижелудочном введении ацетата свинца, но, что важно и необходимо отметить, влияние ацизола было также эффективным и при подкожном введении ксенобиотика. Проведенные экспериментальные исследования дают основание для следующих схем основных патогенетических звеньев свинцовой интоксикации и механизмов ее профилактики с помощью ацизола (рис. 8.1. рис. 8.2.). Профилактическое действие ацизола в условиях хронической свинцовой интоксикации обусловлено его способностью в процессе совместного поступления со свинцом в организм, изменять кинетические параметры металла, что в свою очередь приводить к усиленной экскреции свинца через почки и желудочно-кишечный тракт. Эти процессы приводят к снижению концентрации металла в крови и уменьшению накопления в почках и сердце, снижению его фильтрации в клубочках нефронов, уменьшению реабсорбции и захвата эпителиоцитами канальцев и, в конечном итоге, ослаблению повреждающего эффекта свинца на почки и сердце.

Рис 8.1. Влияние внутрижелудочного (в/ж) и подкожного введения ацизола на нефротоксическое действие свинца в организме при подкожном (п/к) и внутрижелудочном (в/ж) введении ацетата свинца.

— динамика, выявленная в эксперименте под влиянием Ацизолачто происходит, судя по литературным данным- |F работе). то, и] - то, что установлено в.

Рис 8.2. Влияние внутрижелудочного (в/ж) и подкожного введения ацизола на сердечно-сосудистые эффекты подкожного (п/к) и внутрижелудочного (в/ж) введения ацетата свинца.

— динамика, выявленная в эксперименте под влиянием Ацизола, |Jl-. f — то, что происходит, судя по литературным данным-, j, — то, ню установлено в работе).