Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Регуляция активности транскрипционных факторов семейства REL в эмбриональных фибробластах крысы, трансформированных парой комплементирующих онкогенов EIA+cHA-RAS

Диссертация: Регуляция активности транскрипционных факторов семейства REL в эмбриональных фибробластах крысы, трансформированных парой комплементирующих онкогенов EIA+cHA-RAS
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Стремительный прогресс в изучении молекулярных механизмов канцерогенеза в последние десятилетия связан с открытием большой группы генов, которые были объединены под общим названием протоонкогенов. Было показано, что в нормальных клетках они участвуют в регуляции клеточной пролиферации на всех уровнях передачи митогенных сигналов: от рецепторов и сигнальных белков сигнальных каскадов… Читать ещё >

Содержание

  • Глава 1. Введение
    • 1. 1. Актуальность проблемы
    • 1. 2. Цель и задачи исследования
    • 1. 3. Научная новизна полученных результатов
    • 1. 4. Теоретическое и практическое значение работы
    • 1. 5. Апробация работы
  • Глава 2. Обзор литературы
    • 2. 1. Общая характеристика фенотипа трансформированных клеток
    • 2. 2. Онкобелки раннего района аденовирусов человека
    • 2. 3. Молекулярные механизмы иммортализующего и трансформирующего действия онкопродуктов раннего района в клетках грызунов. 1O
    • 2. 4. Особенности комплементации El, А с онкогенами cHa-ras и Е1В
    • 2. 5. Функции Ras белка в проведении сигнала и трансформации клеток
    • 2. 6. Пути передачи сигнала с клеточной поверхности в ядро
    • 2. 7. Свободные радикалы и их роль в передаче сигнала
    • 2. 8. Регуляция активности протеин киназных каскадов дефосфорилированием
    • 2. 9. Организация транскрипционного комплекса NF-кВ и его внутриклеточная локализация
    • 2. 10. Регуляция активности транскрипционного комплекса NF-KB
    • 2. 11. Сигнальные каскады, вовлеченные в активацию NF-КВ
  • Глава 3. Материал и методы
    • 3. 1. Клеточные линии
    • 3. 2. Плазмиды и перенос генов
    • 3. 3. Ядерные экстракты
    • 3. 4. Анализ ДНК-связывающей активности ЫБ-кВ в ядерных экстрактах
    • 3. 5. Антитела
    • 3. 6. Электрофорез и иммуноблоттинг
    • 3. 7. Иммунофлуоресценция
    • 3. 8. Иммунопреципитация
    • 3. 9. Регуляция активности протеинкиназы
    • 3. 10. Способность факторов роста сыворотки стимулировать пролиферацию
  • Глава 4. Результаты
    • 4. 1. Ядерная аккумуляция КР-кВЛЫА в Е1 А+сНа-гаБ трансформантах
    • 4. 2. ДНК-связывающая и трансактивирующая активность №"-кВ в нормальных и Е1 А+сНа-гаэ трансформированных клетках
    • 4. 3. Е1А белки физически взаимодействуют с трансактивирующей субъединицей р65/Яе1А транскрипционного комплекса КБ-кВ
    • 4. 4. УчастиеКаБ-индуцированных сигнальных каскадов в регуляции активности ИР-кВ.I
    • 4. 5. Особенности регуляции сигнальных каскадов в клетках Е1А+сНа-газ
    • 4. 6. Особенности регуляции клеточной пролиферации нормальных фибробластов и трансформантов Е1 А+сНа-гаБ
  • Глава 5. Обсуждение результатов
  • Выводы

Регуляция активности транскрипционных факторов семейства REL в эмбриональных фибробластах крысы, трансформированных парой комплементирующих онкогенов EIA+cHA-RAS (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

1.1 Актуальность проблемы.

Стремительный прогресс в изучении молекулярных механизмов канцерогенеза в последние десятилетия связан с открытием большой группы генов, которые были объединены под общим названием протоонкогенов. Было показано, что в нормальных клетках они участвуют в регуляции клеточной пролиферации на всех уровнях передачи митогенных сигналов: от рецепторов и сигнальных белков сигнальных каскадов (протеинкиназы sarc, raf, mos, erb-B) до ядерных транскрипционных факторов (rei, fos, jun). Мутации в протонкогенах превращают их в онкогены, что, как правило, нарушает строгую регуляцию передачи митогенных сигналов. Именно это свойство лежит в основе автономной пролиферации опухолевых клеток.

Открытие метода переноса генов в клетки эукариот позволило получить ряд новых данных о молекулярных механизмах канцерогенеза и идентифицировать клеточные мишени, поражение которых необходимо для трансформации клеток. В частности, было показано, что введение ядерного онкогена El, А аденовируса 5 типа нарушает строгий контроль за прохождением клеток по циклу путем инактивации продуктов генов — опухолевых супрессоров (Weinberg, 1991) и изменения активности ряда транскрипционных факторов (АР-1, NF-kB, ATF-2,), регулирующих продвижение клетки по клеточному циклу (Hagmeyer, 1993). Для полной клеточной трансформации необходимо введение комплементирующего онкогена, например Ras (Ruley, 1983). Один из наиболее часто мутирующих в человеческих опухолях генов — протоонкоген cHa-ras активирует МАР-киназные каскады, имитируя действие ростовых факторов (Campbell, 1998). Единичные аминокислотные замены в 12, 13 и 61 положениях приводят к появлению постоянно активированных форм Ras белков. Экспрессия такой формы Ras ведет к конститутивной активации митогенных каскадов независимо от экзогенных ростовых факторов, что, по-видимому, лежит в основе неконтролируемой пролиферации опухолевых клеток. Конечной целью сигнальных путей являются транскрипционные факторы, участвующие в регуляции клеточной пролиферации, такие как: c-Jun, Elk-1, р53, ATF-2 и др. (Garrington and Johnson, 1999). Поэтому изучение активности различных МАР-киназных каскадов в связи с поведением транскрипционных факторов может пролить свет на молекулярные механизмы канцерогенеза.

Недавно появились данные, демонстрирующие участие протоонкогенов семейства Rei, кодирующих транскрипционный фактор NF-кВ, в регуляции клеточной пролиферации, апоптоза, а также в неопластической трансформации клеток in vitro и in vivo (Sonenshein, 1997; Gilmore et al, 1996). Например, транслокация и амплификация генов, кодирующих Rel/NF-кВ и их ингибиторов 1кВ, наблюдается в 20−25% случаев лимфоидных опухолей человека. Также было обнаружено, что активация NF-кВ является необходимым условием клеточной трансформации мышиных эмбриональных фибробластов NIH3T3 онкогеном cHa-Ras (Baltimore, 1997). В связи с этим, детальное исследование закономерностей регуляции транскрипционных факторов семейства Rei в нормальных и трансформированных клетках представляется весьма актуальным для понимания молекулярных механизмов, лежащих в основе превращения нормальных клеток в опухолевые.

ВЫВОДЫ.

1. Трансформация первичных клеток эмбриональных фибробластов крысы комплементирующими онкогенами Е1А+сНа-газ вызывает значительные изменения в регуляции транскрипционного комплекса МмсВ:

2. Трансактивирующая субъединица транскрипционного фактора кВ р65/Яе1А постоянно локализована в ядре трансформированных клеток, в отличие от нормальных клеток КЕБ, где внутриклеточная локализация регулируется ростовыми факторами сыворотки.

3. Ядерная локализация р65/Яе1А является следствием нарушения системы негативного контроля активности М^-кВ ингибиторными белками 1кВ-а.

4. ДНК-связывающая активность ЫР-кВ в трансформантах конститутивно высока и не регулируется ростовыми факторами и форболовым эфиром. Тем не менее, комплекс №" -кВ сохраняет способность к регуляции транс-активирующей активности при стимуляции сывороткой.

5. Установлено, что ядерные онкобелки Е1А находятся в физической ассоциации с субъединицей КБ-кВкомплекса р65/Яе1А, что, возможно, определяет его постоянную ядерную локализацию и высокий трансактивирующий потенциал.

Показать весь текст

Список литературы

  1. М.В., Дариева З.А, Поспелова Т. В. Особенности регуляции клеточной пролиферации эмбриональных фибробластов крысы, трансформированных El A+cHa-ras. Вопросы онкологии.1991, т.37 (3): 303−310
  2. З.А., В.А.Поспелов,
  3. Т.В.Поспелова. 1999. Транскрипционный фактор NF-kB конститутивно активирован и локализован в ядре клеток-трансформантов El A+cHa-ras. Цитология, т. 41: 622−627.
  4. В.А., Т.В. Поспелова, А. К. Савельев. 1996. Транскрипционный фактор p91/Statl конститутивно активирован и локализуется в ядре эмбриональных фибробластов крысы, трансформированных онкогенами El A+cHa-ras. Доклады Академии наук, т. 348: 261−264.
  5. Т.В., А.Н. Кукушкин, A.B. Медведев, А.К. Савельев, В.А. Поспелов. 1996. Активность и состав транскрипционного фактора АР-1 в эмбриональных клетках крысы, трансформированных онкогенами ElA+cHa-ras. Молек. Биология, т. 30: 662−672.
  6. Поспелова Т.В., A.JI. Евдонин, Н. Д. Медведева, В. А. Поспелов. 1998. Транскипционные факторы Statl и Stat3 локализованы в разных компартментах эмбриональных фибробластов крысы, трансформированных онкогенами ElA+cHa-ras. Цитология, т. 40: 1074−1079.
  7. Схоль-Энгбертс А.Д., Соколова E.H., Дариева З. А., Попов Ю. Г., Поспелова Т. В., Гуревич B.C. Регуляция активности протеинкиназы С в нормальных, иммортализованных и трансформированных фибробластах крысы. Цитология. 1992, т.34 (5): 110−118
  8. , М., М. Baggish, D. Seifer, S. Cassell, M. Thompson. 1988. Cytoreduction of ovarian cancer with the Cavitron ultrasonic surgical aspirator. Obstet Gynecol 72: 140−143
  9. , G. 1993. Proteins with transcription regulatory properties encoded by human adenoviruses. Trends Microbiol. 163:163−170.
  10. Alessi, D.R., Y. Saito, D.G. Campbell, P. Cohen, G. Sithanandam, U. Rapp, A. Ashworth, C.J. Marshall, S. Cowely.1994. Identification of the sites in MAP kinase kinase-1 phosphorylated by p74raf-l. EMBO J. 13: 1610−1619.
  11. , G. 1994. Sex, stress, and integrity: the importance of MAP kinases in yeast. Curr. Opin. Genet.
  12. Bagchi, S., P. Raychaudhuri, and J. R. Nevins. 1990. Adenovirus E1A proteins can dissociate heteromeric complexes involving E2 °F transcription factor: a novel mechanism for El A trans-activation. Cell. 62:659−669.
  13. Baldwin, A., J. Azizkhan, D. Jensen, A. Beg, and L. Coodly. 1991. Induction of NF-kappa B DNA-binding activity during the GO-to-Gl transition in mouse fibroblasts. Mol. Cell. Biol. 11:4943−4951.
  14. Bannister, A., T. Oehler, D. Wilhelm, P. Angel, and T. Kouzarides. 1995. Stimulation of c-Jun activity by CBP: c-Jun residues Ser67/73 are required for CBP induced stimulation in vivo and CBP binding in vitro. Oncogene. 11:2509−2514.
  15. Bauerle, P.A., and T.Henkel. 1994. Function and activation of NF-kB in the immune system. Annu. Rev. Immunol. 12:141−179.
  16. Bayley, S., and J. Mymryk. 1994. Adenovirus E1A proteins and transformation (review). Int. J. One. 5:425−444.
  17. Beg, A.A., and A.S. Baldwin. 1993. The IkB proteins: multifunctional regulators of Rel/NF-kB transcription factors. Genes Dev. 7:2064−2070.
  18. Bender, K., M. Gottlicher, S. Whiteside, H. J. Rahmsdorf and P. Herrlich. 1998. Sequential DNA damage-independent and -dependent activation of NF-kappaB by UV. EMBO J. 17:5170−5181.
  19. Beraud, C., W.J. Henzel, and P.A. Baeuerle. 1999. Involvement of regulatory and catalytic subunits of phosphoinositide 3-kinase in NF-kappaB activation. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 96:429−434.
  20. Berkenstam, A., M. Del Mar Vivanco Ruiz, D. Barettino, M. Horikoshi, and H.G. Stunnenberg. 1992. Cooperativity in transactivation between retinoic acid receptor and TFIID requires an activity analogous to El A. Cell. 69:401−412.
  21. Boguski, M.S., and F. MacCormick. 1993. Proteins regulating Ras and its relatives. Nature 366:643- 654.
  22. Bourne, H.R., D.A. Sanders, and F. MacCormick. The GTPase superfamily: a conserved switch for diverse cell functions. 1990. Nature. 349:117−126.
  23. Boyd, J.M., S. Malstrom, T. Subramanian, L. Venkatesh, U. Schaeper, B. Elangovan, C. Eipper, and G. Chinnadurai. 1994. Adenovirus
  24. E1B 19kDa and bcI-2 proteins interact with a common set of cellular roteins. Cell 79:341−351.
  25. Bulavin, D., N. Tararova, N. Aksenov, V. Pospelov, T. Pospelova.1998. Apoptotic cell death in rat embryo fibroblasts transformed by elA+cHa-ras oncogenes after gamma irradiation. Tsitologiia 40:10 171 024.
  26. Bulavin, D., N. Tararova, N. Aksenov, V. Pospelov, T. Pospelova.1999. Deregulation of p53/p21/WAF pathway contribute to polyploidy and apoptosis of ElA+cHa-ras transformed cells after gammairradiation. Oncogene 18:5611−5619
  27. Campbel, S.L., R. Khosravi-Far, K. L. Rossman, G.J. Clark, C.J. Der. 1998. Increasing complexity of Ras signaling. Oncogene. 17: 13 951 413.
  28. Chen, E., and C.-C. Li.1998. Association of Cdk2/cyclin E and NF-kB complexes at Gl/S phase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 249:728 734.
  29. Chen, Y.R., C.F. Meyer, and T.-H. Tan. 1996. Persistent activation of c-Jun N-terminal kinase 1 (JNK1) in gamma radiation-induced apoptosis. J. Biol. Chem. 271:631−634.
  30. Chen, Z., L. Parent, and T. Maniatis. 1996. Site-specific phosphorylation of IkB-a by a novel ubiquitin-dependent kinase activity. Cell. 84: 853−863.
  31. Chin, L., A. Tam, J. Pomerantz, M. Wong, J. Holash, N. Bardeesy, Q. Shen, R. O’Hagan, J. Pantginis, H. Zhou, J. W. Horner, C. Cordon
  32. Cardo, G. D. Yancopoulos, R. A. DePinho. 1999. Essential role for oncogenic Ras in tumour maintenance. Nature. 400:6743−6772.
  33. Clark, G.J., J.K. Westwick, and CJ. Der. 1997. pl20 GAP modulates Ras activation of Jun kinases and transformation. J. Biol. Chem. 272:1677−1681.
  34. Clark, G.J., L.A. Quilliam, M.M. Hisaka, and C.J. Der. 1993. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 90:4887−4891.
  35. Cobrinik, D., P. Whyte, D. S. Peeper, T. Jacks, and R.A. Weinberg. 1993. Cell cycle specific association of E2 °F with the 130 ElA-binding protein. Genes Dev. 7:2392−2404.
  36. Cowley, S., H. Paterson, P. Kemp, and C.J. Marshall. 1994. Activation of MAP kinase kinase is necessary and sufficient for PC 12 differentiation and for transformation of NIH 3T3 cells. Cell 77:841 852.
  37. Crews, C.M., A. Alessandrini, and R. Erikson. 1992. Erks: their fifteen minutes has arrived. Cell Growth and Diff. 3:135−142.
  38. Daub, H., F.U. Weiss, C. Wallasch, A. Ullrich. 1996. Role of transactivation of the EGF receptor in signalling by G-protein-coupled receptors. Nature. 379:557−560.
  39. Debbas, M., and E. White. 1993. Wild-type p53 mediates apoptosis by el A which is inhibited by E1B. Genes Dev. 7:546−554.
  40. Delhase, M., M. Hayakawa, Y. Chen, M. Karin. 1999. Positive and negative regulation of IkappaB kinase activity through IKKbeta subunit phosphorylation. Science. 284:309−313.
  41. Deng, J., W. Xia, and M.-C. Hung. 1998. Adenovirus 5 ElA-mediated tumor suppression associated with ElA-mediated apoptosis. Oncogene. 17:2167−2175.
  42. Derijard, B., M. Hibi, I-H. Wu, T. Barrett, B. Su, T. Deng, M. Karin, and R.J. Davis. 1994. JNK1: a protein kinase stimulated by UV light and Ha-Ras that binds and phosphorylates the c-Jun activation domain. Cell. 76:1025−1037.
  43. N. 1998. Cell signalling: an overview. Oncogene. 17:1329−1330.
  44. Dickson, B., F. Sprenger, D. Morrison, E. Hafen. 1992. Raf functions downstream of Rasl in the Sevenless signal transduction pathway. Nature. 360: 600−603.
  45. DiDonato, J.A., M. Hayakawa, D.M. Rothwarf, E. Zandi, and M. Karin. 1997. A cytokine-responsive IkappaB kinase that activates the transcription factor NF-kappaB. Nature.388:548−554.
  46. Dignam J.D., Lebowitz R.M., Roeder R.G. Accurate transcription initiation by RNA polymerase II in a soluble extract from isolated mammalian nuclei. 1983. Nucleic Acids Res. 11:1475−1489
  47. Egan, S.E., and R.A. Weinberg. 1993. The pathway to signal achievement news. Nature. 365:781−783.
  48. Evan, G.I., A. N. Wyllie, C.S. Gilbert, T.D. Littlewood, H. Land, M. Brooks, C. M. Walters, L.Z. Penn, and Hancock D.C. 1992. Induction of apoptosis in fibroblasts by c-myc protein. Cell. 69:119−128.
  49. Farrow, S.N., J. White, I. Martinou, T. Raven, K.-T. Pun, C. Grinham, J. Martinou, and R. Brown. 1995. Cloning of a bcl-2 homologue by interaction with adenovirus E1B 19K. Nature. 374:731−733.
  50. Feig, L.A., G.M. Cooper. 1988. Inhibition of NIH 3T3 cell proliferation by a mutant ras protein with preferential affinity for GDP. Mol Cell Biol 8:3235−3243
  51. Feinman, R., J. Koury, M. Thames, B. Barlogie, J. Epstein, D. Siegel. 1999. Role of NF-kappaB in the rescue of multiple myeloma cells from glucocorticoid-induced apoptosis by bcl-2. Blood 93: 3044−3052
  52. Finco, T., J. Westwick, J.L. Norris, A. Beg, C.J. Der, and A.S. Baldwin. 1997. Oncogenic Ha-Ras-induced signalling activates NF-kB transcriptional activity, which is required for cellular transformation. J. Biol. Chem. 272: 24 113−24 116.
  53. Frost, J.A., H. Steen, P. Shapiro, T. Lewis, N. Ahn, P.E. Shaw, and M.H. Cobb. 1997. Cross-cascade activation of ERKs and ternary complex factors by Rho family proteins. EMBO J. 16:6426−6438.
  54. Garrington T.P., Johnson G.L. Organization and regulation of mitogen-activated protein kinase signaling pathways. 1999. Curr. Opin. Cell Biol. 11:211−218
  55. Gauthier-Rouviere, C., A. Fernandez, N. J. Lamb. 1990. Ras-induced c-fos expression and proliferation in living fibroblsts involves C-kinase activation and the serum response element pathway. EMBO J. 9:171 180.
  56. Gilmore, T.D., Koedood M., K.A. Piffat, and D.W. White. 1996. Rel/Nf-kB/IkB proteins and cancer. Oncogene 13:1367−1378.
  57. Giri, D.K., B.B. Aggarwal. 1998. Constitutive activation of NF-kappaB causes resistance to apoptosis in human cutaneous T cell lymphoma HuT-78 cells. Autocrine role of tumor necrosis factor and reactive oxygen intermediates. J Biol Chem 273:14 008−14 014
  58. Granger-Schnarr, M., E. Bentisiglio, M. Schnarr, and P. Sassone-Corsi. 1992. Transformation and transactivation suppressor activity of the c-Jun leucine zipper fused to a bacterial repressor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4236−4239.
  59. Gupta, S., D. Campbell, B. Derijard, and R.J. Davis. 1995. Transcription factor ATF-2 regulation by the JNK signal transduction pathway. Science. 267:389−393.
  60. Han, J., J.D. Lee, L. Beebs, and R.J. Ulvetich. 1994. A MAP kinase targeted by endotoxin and hyperosmolarity in mammalian cells. Science. 265:808−811.
  61. Harlow, E., P. Whyte, B. R. Franza, and C. Schley. 1986. Association of adenovirus early-region 1A proteins with cellular polypeptides. Mol.Cell.Biol. 6:1579−1589.
  62. Hausladen, A., C. Privalle, T. Keng, J. DeAngelo, and J.S. Stamler.1996. Nitrosative stress- activation of the transcription factor OxyR. Cell 86:719−729.
  63. Herber, B., M. Truss, M. Beato, and R. Muller. 1994. Inducible regulatory elements in the human cyclin D1 promoter. Oncogene 9:1295- 1304.
  64. Hibi, M., A. Lin, T. Smeal, A. Minden, and M. Karin. 1993. Identification of an oncoprotein and UV-responsive protein kinase that binds and potentiates the c-Jun activation domain. Genes Dev. 7:2135−2141.
  65. Hill, C.S., R. Marais, S. John, J. Wynne, S. Dalton, and R. Treisman. 1993. Functional analysis of a growth factor-responsive transcription factor complex. Cell. 73:395−406.
  66. Hinds, P.W., S. Mittnacht, V. Dulic, A. Arnold, S.I. Reed, and R.A. Weinberg. 1992. Regulation of retinoblastoma protein functions by ectopic expression of human cyclins. Cell 70:993−1006.
  67. Hinds, P.W., S.F. Dowdy, E.N. Eaton, A. Arnold, and R.A. Weinberg. 1994. Function of a human cyclin gene as an oncogene. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:709−713.
  68. Hirsch, D.D., and P.J. Storck. 1997. Mitogen-activated protein kinase phosphatases inactivate stress-activated protein kinase pathways in vivo. J. Biol. Chem. 272:4568−4575.
  69. Hoeffer, W. K., R. Kovelman, and Roeder. 1988. Activation of transcription factor 3C by the adenovirus El A protein. Cell. 53:907 920.
  70. , J.T. 1993. Antisense rescue defines specialized and generalized functional domains for c-Fos protein. Mol. Cell. Biol. 13:3821−3830.
  71. Ho we, J. A., and S.T. Bayley. 1992. Effects of Ad 5 El A mutant viruses on the cell cycle in relation to the binding of cellular proteins including the retinoblastoma protein and cyclin A. Virology 186:15−24.
  72. Howe, J.A., J.S. Mymiyk, C. Egan, P.E. Branton, and S.T. Bayley. 1990. Retinoblastoma growth suppressor and a 300-kDz protein appear to regulate cellular DNA synthesis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:5883−5887.
  73. Janknecht, R., and T. Hunter. 1997. Activation of SAP-la transcription factor by the c-Jun N-terminal kinase (JNK) mitogen-activated protein kinase. J. Biol. Chem. 272:4219−4224.
  74. Janknecht, R., and T. Hunter. 1997. Convergence of MAP kinase pathways on the ternary complex factor SAP-la. EMBO J. 16:16 201 627.
  75. Janknecht, R., M. A. Cahill and A. Nordheim. 1995. Signal integration at the c-fos promoter. Carcinogenesis. 16:443−450.
  76. Jimenez, B., M. Arends, P. Esteve, R. Perona, R. Sanches, S. Ramon, A. Wyllie, J.C. Lacal. 1995. Induction of apoptosis in NIH3T3 cells after serum deprivation by overexpression of rho-p21, a GTPase protein of the ras superfamily. Oncogene. 10:811−816.
  77. , M. 1995. The regulation of AP-1 activity by mitogen-activated protein kinases. J. Biol. Chem. 270:16 483−16 486.
  78. , M. 1999. How NF-kB is activated: the role of the IkB kinase (IKK) complex. Oncogene. 18:6867−6874.
  79. Keblusek, P., J.C. Dorsman, A. Tenissen, A.J. Van der Eb, and A. Zantema. 1999. The adenoviral El A oncoproteins interfere with the growth-inhibiting effect of the cdk-inhibitor p21 Cipl/Wafl. J. General Virol. 80:381−390.
  80. Kerkhoff, E., and U. R. Rapp. 1998. High-intensity Raf signals convert mitotic cell cycling into cellular growth. Cancer Res. 58:1636−1640.
  81. Keyse, S.M. Protein phosphatases and the regulation of MAP kinase activity. 1998. Semin. Cell Dev. Biol. 9:143−152.
  82. Khosravi-Far, R., P.A. Solski, G.J. Clark, M.S. Kinch, and C.J. Der.1995. Activation of Racl, RhoA, and mitogen-activated protein kinases is required for Ras transformation. Mol. Cell. Biol. 15:6443−6453.
  83. Krappmann, D., F. Emmerich, U. Kordes, E. Scharschmidt, B. Dorken, and C.Scheidereit. 1999. Molecular mechanisms of constitutive NF-kappaB/Rel activation in Hodgkin/Reed-Sternberg cells.Oncogene. 18:943−953.
  84. Kyriakis, J.M., A. Haimovitz-Friedman, Z. Fuks, and R.N. Kolesnick.1996. Requirement for ceramide-initiated SAPK/JNK signalling in stress-induced apoptosis. Nature. 380:75−79.
  85. Kyriakis, J.M., P. Banrjee, C. Nikolakaki, T. Dai, E. A. Rubie, M.F. Ahmad, J. Ayruch, and J. R. Woodgett. 1994. The stress-activated protein-kinase subfamily of c-Jun kinases. Nature. 369:156−160.
  86. Lacal J.C., Moscat J., Aaronson S.A. novel source of 1,2-diacylglycerol elevated in cells transformed by Ha-ras oncogene. 19 987. Nature. 330:269−272
  87. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophageT4. 1970. Nature. 227: 680−685
  88. Lander, H.M., A.T. Jacovina, R.J. Davis, and J.M. Tauras.1996. Differential activation of MAP kinases by nitric oxyde-related species. J. Biol. Chem. 271:19 705−19 709.
  89. Lander, H.M., J.S. Ogiste, K.K. Teng, and A. Novogrodsky. 1995. p21Ras as a common signalling target of reactive free radicals and cellular redox stress. J. Biol. Chem. 270:21 195−21 198.
  90. Lau, L.F., and Nathans D. 1985. Identification of a set of genes expressed during the Go/Gl transition of cultured mouse cells. EMBO J., 4:3145−3151.
  91. Lee, J.C., and P.R. Young. 1996. Role of CBP/p38/RK stress response kinase in LPS and cytokine signalling mechanisms. J. Leukoc. Biol. 59:152−157.
  92. Leevers, S.J., H.F. Paterson, CJ. Marshall. 1994. Requirement for Ras in Raf activation is overcome by targeting Raf to the plazma membrane. Nature. 369: 411−414.
  93. Lin, H.J., V. Eviner, G.C. Prendergast, E. White. 1995. Activated H-ras rescues ElA-induced apoptosisand cooperates with El A to overcome p53-dependent growth arrest. Mol. Cell Biol. 15:4536−4544.
  94. Ling, L., Z. Cao, D.V. Goeddel. 1998. NF-kB-inducing kinase activates IKKa by phosphorylation of Ser 176. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 3792−3797.
  95. Lo, Y.Y., and T.F. Cruz. 1995. Involvement of reactive oxygen species in cytokine and growth factor induction of c-fos expression in chondrocytes. J. Biol. Chem. 270:11 727−11 730.
  96. Lundblad, J.R., R.P. Kwok, M. E. Laurance, M.L. Harter, and R. H. Goodman. 1995. Adenoviral ElA-associated protein p300 as a functional homologue of the transcriptional co-activator CBP. Nature (London) 374: 85−88.
  97. Mansour, S.J., W.T. Matten, A.S. Hermann, J.M. Candia, S. Rong, K. Fukasawa, G.F. Vande Woude, N.G.Ahn. 1994. Transformation of mammalian cells by constitutively active MAP kinase kinase. Science.265: 966−970.
  98. Marais R., J. Wynne, R. Treisman. 1993. The SRF accessory protein Elk-1 contains a growth factor-regulated transcriptional activation domain. Cell. 73: 381−393.
  99. Mayo, M. W., C.-Y. Wang, P. Cogswell, K. S. Rogers-Graham, S. Lowe, C. J. Der, A. S. Baldwin. 1997. Requirement of NF-kB activation to supress p53-independent apoptosis induced by oncogenic Ras. Science 278:1812−1815.
  100. Meijer, I., J.M. Boot, G. Mahibir, A. Zantema, and A.J. Van der Eb. 1992. Reduced binding activity of transcription factor NF-kB accounts for MHC class 1 repression in adenovirus type 12 El-transformed cells. Cell. Immunol. 145:56−65.
  101. Mercurio, F., H. Zhu, B.W. Murray, A. Shevchenko, B. L. Bennet, J. Li, D.B. Young, M. Barbosa, M. Mann, A. Manning and A. Rao. 1997. IKK-1 and IKK-2: cytokine-activated IkappaB kinases essential for NF-kappaB activation. Science 278:860−866.
  102. Meyer, M., R. Schreck, and P.A. Baeuerle. 1993. H202 and antioxidants have opposite effects on activation of NF-kB and AP-1 in intact cells: AP-1 as secondary antioxidant-responsive factor. EMBO J. 12: 2005−2011.
  103. Miller, M.J., L. Rioux, G.V. Prendergast, S. Cannon, M.A. White, and Meinkoth J.L. 1998. Differential effects of protein kinase A on Ras effector proteins. Mol. Cell Biol. 18:3718−3726.
  104. Miyamoto S., Chiao P.J., Verma I.M. Enchanced IkBa degradation is responsible for the constitutive NF-kB activity in murine B-cell lines. 1994. Mol. Cell. Biol. 14:3276−3282
  105. Moodie, S.A., B.M. Willumsen, M.J. Weber, A. Wolfman. 1993. Complexes of Ras. GTP with Raf-1 and mitogen-activated protein kinase kinase. Science. 260:1658−1661.
  106. , E. 1988. A region of SV40 large antigen can substitute for a transforming domain of the adenovirus El A products. Nature 334:168 170.
  107. , E., 1994. Cell growth control mechanisms reflected through protein interactions with the adenovirus El A gene products.Semin.Virol. 5:327−340.
  108. Morrison, D.K., R.E. Cutler. 1997. The complexity of Raf-1 regulation. Curr Opin Cell Biol 9:174−9
  109. Mulcahy, L. S., M. R. Smith and D. W. Stacey. 1985. Requirement for ras proto-oncogene function during serum-stimulated growth of NIH3T3 cells. Nature. 313:241−24.
  110. Mymryk, J.S., K. Shire, and S.T. Bayley. 1994. Induction of apoptosis by adenovirus 5 El A in rat cells requires a proliferation block. Oncogene. 9: 1187−1193.
  111. Nakajima, T., M. Yageta, K. Shiotsu, K. Morita, M. Suzuki, Y. Tomooka, K. Oda. 1998. Suppression of adenovirus ElA-induced apoptosis by mutated p53 is overcome by coexpression with Id proteins. Proc Natl Acad Sci U S A 95: 10 590−10 595
  112. Nakano, H., M. Shindo, S. Sakon, S. Nishinaka, M. Mishara, H. Yagita, K. Okumura. Differential regulation of IkB kinase a and b bytwo upstream kinases and mitogen-activated protein kinase/ERK kinase-kinase 1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:3537−3542.
  113. Nebreda. 1994. A novel kinase cascade triggered by stress and heat shock that stimulates MAPKAP kinase-2 and phosphorylation of the small heat shock proteins. Cell. 78:1027−1037.
  114. Norris J.L. and A.S. Baldwin. Oncogenic Ras enhances NF-kB transcriptional activity through Raf-dependent and Raf-independent mitogen-activated protein kinase signaling pathways. 1999. J. Biol. Chem. 274: 13 841−13 846
  115. Oldham, S.M., G.J. Clark, L.M. Gangarosa, R.G. Coffey, and C.J. Der. 1996. Activation of the Raf-l/MAP kinase cascade is not sufficient for Ras transformation of RIE-1 epithelial cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:6924−6928.
  116. Ozes, O.N., L.D. Mayo, J. A. Gustin, S.R. Pfeffer, L.M. Pfeffer, and D.B. Donner. 1999. NF-kappaB activation by tumour necrosis factor requires the Akt serine-threonine kinase. Nature. 401:82−85.
  117. Perkins, N.D., L.K. Felzien, J.C. Betts, K. Leung, D.H. Beach, and G.J. Nabel. 1997. Regulation of NF-kappaB by cyclin dependent kinases associated with the p300 coactivator. Science. 275:523−527.
  118. Perone, M., S. Windeatt, M. Castro. Intracellular trafficking of prohormones and proneuropeptides: cell type-specific sorting and targeting.1. Exp Physiol 82: 609−628
  119. Pines, J., and T. Hunter. 1990. Human cyclin A is the E1A-associated protein p60 and behaves differently from cyclin B. Nature (London) 346:760−763.
  120. Qiu, R.-G., Chen J., D. Kirn, F. McCormick, and M. Symons. 1995. An essential role for Rac in Ras transformation.Nature.374:457−459.
  121. , M.C. 1992. Social controls on cell survival and cell death. Nature. 356: 397−400.
  122. Rao, L., M. Debbas, P. Sabbatini, D. Hockenberry,, S. Korsmeyer, and E. White. 1992. The adenovirus El A proteins induce apoptosis, which is inhibited by E1B 19-kDa and bcl-2 proteins. Proc. Nacl. Acad. Sci. USA 89:7742−7746.
  123. Raychaudhuri, P., S. Bagchi, and J. R. Nevins. 1989. DNA-binding activity of the adenovirus-induced E4 °F transcription factor is regulated by phosphorylation. Genes Dev. 3:620−627.
  124. , J.C. 1998. Bcl-2 family proteins. Oncogene. 17:3225−3236.
  125. Regnier, C.H., H.Y. Song, X. Gao, D.V. Goeddel, Z. Cao, and M. Rothe. 1997. Identification and characterization of an IkappaB kinase. Cell. 90:373−383.
  126. Reuther, J., G. Reuther, D. Cortez, A. Pendergast, A.S. Baldwin. 1998. A requirement for NF-kappaB activation in Bcr-Abl-mediated transformation. Genes Dev 12: 968−981
  127. Riabowol, K. T., R. J. Bosatka, E. B. Ziff, N. Lamb, and J. R. Feramisco. 1988. Microinjection of Fos specific antibodies blocks DNA synthesis in fibroblast cells. Mol. Cell. Biol. 8:1670−1677.
  128. Romashkova, J.A. and S. S. Makarov. 1999. NF-kappaB is a target of AKT in anti-apoptotic PDGF signalling. Nature. 401:86−90.
  129. Rozengurt E., Rodriguez-Pena M., Smith K. Phorbol esters, phospholipase C, and growth factors rapidly stimulate the phosphorylation of a Mr 80.000 protein in intact quiescent 3T3 cells. 1983. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80:7244−7344
  130. , H.E. 1983. Adenovirus early region 1A enables viral and cellular transforming genes to transform primary cells in culture. Nature. 304:602−606.
  131. , H.E. 1983. Adenovirus early region 1A enables viral and cellular transforming genes to transform primary cells in culture. Nature. 304: 602−606.
  132. Russell, M., F. Lange-Carter, G.L. Johnson. 1995. Direct interaction between Ras and the kinase domain of mitogen-activated protein kinase kinase kinase (MEKK1). J Biol Chem. 270: 11 757−1160.
  133. Sabbatini, P., S.-K. Chiou, L. Rao, and E. White. 1995. Modulation of p53-mediated transcriptional repression and apoptosis by the adenovirus EIB 19K protein. Mol. Cell. Biol. 15:1060−1070.
  134. Sanchez, I., R. T. Hughes, J. Mayer, K. Yee, J.R. Woodgett, J. Avruch, J.M. Kyriakis, and L.I. Zon. 1994. Role of SAPK/ERK kinase-1 in the stress-activating pathway regulating transcription factor c-Jun. Nature. 372:794−798.
  135. Schmitz, M., A. Indorf, F. Limbourg, H. Stadtler, E. Traenckner, P.A. Baeuerle. 1996. The dual effect of adenovirus type 5 E1A 13S protein on NF-kappaB activation is antagonized by E1B 19K. Mol Cell Biol 16: 4052−4063
  136. Schmitz, M., M.S. Silva, and P. Baeuerle. 1995. Transctivation domain 2 (TA2) of p65 NF-kB. J. Biol. Chem. 270:15 576−15 584.
  137. Schulze-Osthoff, K., D. Ferrari, K. Riehemann, and S. Wesselborg. 1997. Regulation of NF-kB activation by MAP kinase cascades. Immunobiol. 198:35−49.
  138. Schwartz, M.A., and V. Baron. 1999. Interactions between mitogenic stimuli, or, a thousand and one connections. Curr. Opinion Cell Biol. 11:197−202.
  139. See, R.H., and Y. Shi. 1998. Adenovirus E1B 19 000-molecular-weight protein activates c-Jun N-terminal kinase and c-Jun-mediated transcription. Mol. Cell Biol. 18:4012−4022.
  140. Sen, R., D. Baltimore. 1986. Inducibility of kappa immunoglobulin enhancer-binding protein NF-kappa B by a posttranslational mechanism. Cell 1986 47: 921−928
  141. Shaw, P. E., H. Schroter, and A. Nordheim. 1989. The ability of a ternary complex to form over the serum response element correlates with serum inducibility of the human c-fos promoter. Cell. 56:563−572.
  142. Sheppard, K. A., D. W. Rose, Z. K. Haque, R. Kurokawa, E. Mclnerney, S. Westin, D. Thanos, M. G. Rosenfeld, C. K. Glass, T. Collins. 1999. Transcriptional activation by NF-kappaB requires multiple coactivators. Mol. Cell Biol. 19:6367−6378.
  143. , C. J. 1993. Mammalian G1 cyclins. Cell. 73:1059−1065.
  144. , C. J. 1996. Cancer and cell cycle. Science. 274:1672−1677.
  145. Sherwin, S.A., U.R. Rapp, R.E. Benveniste, A. Sen, G.J. Todaro, 1987. Rescue of endogenous 30S retroviral sequences from mouse cells by baboon type C virus. J. Virol. 26: 257−64.
  146. Shikama, N., I. Izuno, M. Oguchi, K. Gomi, S. Sone, K. Takei, S. Sasaki, T. Wako, N. Itou, K. Ishii. 1997. Clinical stage IE primarylymphoma of the nasal cavity: radiation therapy and chemotherapy. Radiology 1997 204: 467−470
  147. Shurman, L., R. Sen, Y. Bergman. 1989. Adenovirus E1A products activate the Ig k-chain enhancer in fibroblasts. A possible involvement of the NF-kB binding site. J Immunol 143: 3806−3812
  148. Singh, R.A., A. Sodhi. Expression and activation of RAS and mitogen-activated protein kinases in macrophages treated in vitro with cisplatin: regulation by kinases, phosphatases and Ca2+/calmodulin. Immunol Cell Biol. 77:356−363
  149. Singh, R.P., P. Dhawan, C. Golden, G.S. Kapoor, and K. Mehta. 1999. One-way cross-talk between p38MAPK and p42/44 MAPK. J. Biol. Chem. 274:19 593−19 600.
  150. G.E. 1997. Rel/NF-kB transcription factors and the control of apoptosis. Semin. Cancer Biol. 8:113−119.
  151. Sprenger, F., M. Trosclair, D.K. Morrison. 1993. Biochemical analysis of torso and D-raf during Drosophila embryogenesis: implications for terminal signal transduction. Mol Cell Biol 13:11 631 172
  152. Stokoe, D., S.G. Macdonald, K. Cadwallader, M. Symons, J.F.Hancock. 1994. Activation of Raf as a result of recruitment to the plasma membrane. Science. 266(5192): 1792−1793.
  153. Sumitomo, M., M. Tachibana, Nakashima J., M. Murai, A. Miyajima, F. Kimura, M. Hayakawa, H. Nakamura. 1999. An essential role fornuclear factor kappa B in preventing TNF-alpha-induced cell death in prostate cancer cells. J Urol 161: 674−679
  154. Sundaresan, M., Z-X. Yu, V. Ferrans, K. Irani, and T. Finkel. 1995. Requirement for generation of H202 for platelet-derived growth factor signal transduction. Scince. 270:296−299.
  155. Thompson, T.A., K. Kim, M. N. Gould. 1998. Harvey ras results in a higher frequency of mammaiy carcinomas than Kirsten ras after direct retroviral transfer into the rat mammary gland. Cancer Res. 58:22 50 975 104.
  156. , R. 1994. Ternary complex factors: growth factor regulated transcriptional activators. Curr. Opin. Genet. Dev. 4:96−694 701.
  157. Treisman, R., R. Marais, and J. Wynne. 1992. Spatial flexibility in ternary complexes between SRF and its accessory proteins. EMBO J. 11:4631−4640.
  158. Wang, D., A.S. Baldwin. 1998. Activation of NF-kB -dependent transcription factor by tumor-necrosis factor-alpha is mediated through phosphorylation of RelA/p65 on serine 529. J. Biol. Chem. 273: 2 941 129 416.
  159. Wang, W., J. Abbruzzese, D. Evans, L. Larry, K. Cleary, P. Chiao. 1999. The nuclear factor-kappa B RelA transcription factor is constitutively activated in human pancreatic adenocarcinoma cells. Clin/ Cancer Res. 5: 119−127.
  160. Weinberg R.A. Tumor suppressor genes. 1991. Science. 254: 11 381 146
  161. , R.A. 1995. The retinoblastoma protein and cell cycle control. Cell. 81:323−330.
  162. Whitmarsh, A.J., S-H. Yang, M. Su, A. D. Sharrocks, and R.J. Davis. 1997. Role of p38 and JNK mitogen-activated protein kinases in the activation of ternary complex factors. Mol. Cell. Biol. 17:23 602 371.
  163. Whyte, P., N.M. Williamson, and E. Harlow. 1989. Cellular targetsfor transformation by the adenovirus El A proteins. Cell 56:67−75.
  164. Williams, N.G., T. Roberts, P. Li. 1992. Both p21ras and pp60v-src are required, but neither alone is sufficient, to activate the Raf-1 kinase. Proc Natl Acad Sci U S A 89: 2922−2926
  165. Woronicz, J.D., X. Gao, Z. Cao, M. Rothe, and D.V.Goeddel. 1997. IkappaB kinase-beta: NF-kappaB activation and complex formation with IkappaB kinase-alpha and NIK. Science. 278:866−869.
  166. Yang, J., E. Chang, A.M. Cherry, C.D. Bangs, Y. Oei, A. Bodnar, A. Bronstein, C.P. Chiu, G.S. Herron. 1999. Human endothelial cell life extension by telomerase expression. J. Biol. Chem. 274:26 141−26 148.
  167. Yang, S-H., A. J. Whitmarsh, R. J. Davis, and A. D. Sharrocks. 1998. Differential targeting of MAP kinases to the ETS-domain transcription factor Elk-1. EMBO J. 17:1740−1749.
  168. Zerler, B., R.J. Roberts, M.B. Mathews, and E. Moran. 1987. Different functional domains of the adenovirus El A gene are involved in regulation of host cell cycle products. Mol. Cell Biol. 7:821−829.
  169. Zhong H, Voll RE, Ghosh S.1998. Phosphorylation of NF-kappa B p65 by PKA stimulates transcriptional activity by promoting a novel bivalent interaction with the coactivator CBP/p300. Mol. Cell Biol. 1:661−671.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!