Регуляция биосинтеза ацетилхолинэстеразы микросом ацетилхолином и циклическими нуклеотидами

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Содержание

I. Введение
II. Обзор литературы
1. Общие свойства холинэстераз
2. Макромолекулярные и изоферментные формы АХЭ
3. Функциональные центры АХЭ
4. Механизм ферментативного катализа АХЭ
5. Биосинтез АХЭ
6. Медиаторная регуляция биосинтеза белков в нервных 18 клетках
1. Взаимосвязь процессов функциональной активности и синте за РНК и белков
2. Влияние медиаторов на синтез РНК и белков в бесклеточных (модельных) системах
III. Материалы и методы,
1. Модельная бесклеточная система биосинтеза АХЭ
1. Система из мозга
2. Система из печени
3. Диализуемые цитоплазматические факторы
2. Модельная система с исходно ингибированной АХЭ микросом и цитозоля
3. Влияние эзерина (in vivo) на активность АХЭ микросом печени
4. Определение активности АХЭ
5. Количественное определение белка
6. Выделение цитоплазматического фактора, взаимодействующего с АХ в биосинтезе АХЭ
7. Статистическая обработка экспериментальных данных
8. Реактивы
1. У. Результаты и их обсуждение
1. Влияние ацетилхолина и пуромицина на активность АХЭ микросом мозга в бесклеточной системе
2. Эффект АХ на фоне ингибиторов синтеза РНК и белков и в безъядерной системе
3. Действие цАМФ на активность АХЭ микросом
4. Действие цГМФ на активность АХЭ микросом
5. Эффекты АХ в бесклеточной системе с необратимо ингибированной АХЭ
6. Цитоплазматические факторы, участвующие совместно с АХ и циклическими нуклеотидами в регуляции биосинтеза АХЭ
1. Фактор, взаимодействующий с АХ
2. Фактор, взаимодействующий с цАМФ
3. Фактор, взаимодействующий с цГ’МФ
7. Выделение цитоплазматического фактора, взаимодействующего с АХ в биосинтезе АХЭ
8. Сравнение действия АХ на биосинтез АХЭ микросом мозга и печени
9. Влияние эзерина in vivo на уровень АХЭ микросом печени

Регуляция биосинтеза ацетилхолинэстеразы микросом ацетилхолином и циклическими нуклеотидами (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

В 10-х — 20-х гг академик Л. А. Орбели обосновал концепцию трофической функции нервной системы. Плодотворность этой концепции стала наиболее очевидной после обнаружения в 50-х — 60-х гг Сазерлендом и последователями метаболических посредников гормонов и нейромедиаторов — циклических нуклеоти-дов. Последние, активируя протеинкиназы, осуществляют регуляцию метаболических процессов. Таким образом, цАМФ и цГМФ, как вторичные мессендаеры, являются одним из наиболее важных звеньев межклеточного и межтканевого взаимодействия и взаимосвязи клетки с внешней средой.

Исходя из концепции Л. А. Орбели, в 50-х — 60-х гг предпринимались попытки выяснить возможность участия нейромедиаторов в регуляции биосинтеза нуклеиновых кислот и белков. Результаты этого периода исследований позволили сделать вывод о существовании такого влияния, однако интерес к этой проблеме после открытия вторичных мессенджеров резко упал. Представлялось очевидным, что регуляторное влияние нейромедиаторов на метаболические процессы клетки опосредуется цАМФ и цГМФ и изменением соотношения в клетке однои двухвалентных ионов при проведении нервного импульса.

В конце 70-х — начале 80-х гг Н. Р. Елаевым была показана возможность прямого, неопосредованного циклическими нуклео-тидами, влияния ацетилхолина и норадреналина на процессы транскрипции и на экспрессию гена $а, К-АТФазы. Таким образом, концепция трофической функции нервной системы приобретает новый аспект, а именно: внутриклеточное гормоноподобное действие нейромедиаторов. Однако, возникает вопрос, насколько универсальным является это действие медиаторов, то есть ограничивается ли оно только генами №а, К-АТФазы или распространяется и на другие гены. В связи с этим целью настоящей работы явилось исследование влияния ацетилхолина на биосинтез другого фермента — ацетилхолинэстеразы. Выбор данного фермента продиктован, во-первьгх, его важной функциональной ролью в нервной системе и, во-вторых, чрезвычайно малым объёмом сведений о его биосинтезе по сравнению с изученностью молекулярных механизмов каталитического акта.

Изучение биосинтеза ацетилхолинэстеразы представляется также важным в прикладном аспекте: токсикологическом и фармакологическом, — поскольку значительное количество инсектицидов и фармакологических препаратов является ингибиторами хо-линэстераз. Исследование регуляции биосинтеза ацетилхолинэстеразы позволит обеспечить новые возможности для рациональной терапии интоксикации веществами, относящимися к классу необратимых ингибиторов холинэстераз.

Задачи настоящей работы включали: I) изучение возможности биосинтеза ацетилхолинэстеразы в бесклеточной модельной системе- 2) исследование влияния на этот синтез ацетилхолина и циклических нуклеотидов и 3) анализ ядерно-цитоплазматиче-ских взаимоотношений в регуляторных актах ацетилхолина и циклических нуклеотидов.

Согласно полученным результатам на защиту выносятся следующие положения: I) в модельной системе, содержащей изолированные ядра и микросомно-цитоплазматическую фракцию из мозга и печени, имеет место спонтанный синтез ацетилхолинэстеразы- 2) синтез фермента существенно ускоряется ацетилхолином, особенно на фоне исходно необратимо ингибированного фермента- 3) эффект ацетилхолина не опосредуется циклическими нуклеоти-дамипоследние оказывают принципиально иное влияние на биосинтез фермента- 4) в цитоплазме нервных клеток обнаружен диализуемый фактор, взаимодействующий с ацетилхолином в ре-гуляторных актах экспрессии генов ацетилхолинэстеразы на ядерном уровнепостулируется существование подобных факторов для циклических нуклеотидов.

Учитывая, что исследование ацетилхолинэстеразы продолжается более 50 лет и библиография по этой теме чрезвычайно обширна, в настоящей работе в целях краткости изложения рассматриваются по преимуществу литературные данные последнего периода.

П. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

В 1926 г Леви и Навратил (Loewi a. Navratii, 1926) обнаружили в сердце лягушки фермент, обладающий способностью быстро инактивировать ацетилхолин путем расщепления его на холин и уксусную кислоту. Б 1932 г. Стедман и сотрудники (stedman et al, 1932) открыли аналогичный фермент в сыворотке крови лошади и назвали его «холинэстераза» .

Основная функция холинэстераз состоит в гидролитическом разрушении эфиров холина. В «Номенклатуру ферментов» (1979) внесены две холинэстеразы: ацетилгидролаза ацетилхолина (НФ 3.1Д.7) и ацилгидролаза ацилхолинов (НФ 3.1.1.8) или соответственно ацетилхолинэстераза и бутирилхолинэстераза.

АХЭ локализована преимущественно в синаптических образованиях и плазматических мембранах клеток и её роль состоит в инактивации АХ. По мнению Кёлле (Koeiie, 1954) основную функциональную нагрузку несет поверхностно локализованный фермент, тогда как внутриклеточный представляет резерв и служит для пополнения запасов наружного. Предполагается также, что и внутриклеточная АХЭ выполняет определенную физиологическую функцию, регулируя уровень АХ в клетке и его накопление в синаптических везикулах.

В мышечных клетках куриного эмбриона примерно одна треть АХЭ локализована на плазматической мембране, большая же часть фермента находится внутри клеток (Rotundo a. Fambroygh, 1980). АХЭ синтезируется внутри мышечных клеток и переносится к плазматической мембране в течение 2−3 час, где накапливается со скоростью 2 — 3% (от исходного уровня) в час. Время полужизни АХЭ плазматической мембраны мышечных клеток составляет около 50 час. Прирост АХЭ в культуре клеток за один час составляет около 20 $ от общего связанного с клетками количества фермента, причем большая часть АХЭ секретируется в среду инкубации. Только небольшая часть новосинтезированной АХЭ удерживается на плазматической мембране. Перенос молекул АХЭ из клеток в среду происходит практически без задержи на плазматической мембране. Приведенные примеры свидетельствуют о существовании динамической системы биосинтеза и распределения фермента. Очевидно, функции АХЭ гораздо шире, чем предполагалось ранеене имеет пока адекватного объяснения значимость освобождаемого во внеклеточное пространство фермента. Не вполне понятным также остается факт преимущественной локализации АХЭ в плазматической и эндоплазматической мембранах нервных клеток, а не в холинергических синапсах (Brzin et al, 1979).

У1. ВЫВОДЫ.

1. В бесклеточной системе, содержащей ядра и микросом-но-цитоплазматическую фракцию клеток мозга и печени, имеет место спонтанный прирост активности ацетилхолинэстеразы микро-сом (10 $ за 60 мин инкубации).

2. Ацетилхолин (Ю-7 — Ю-3 М) ускоряет прирост активности фермента с максимумом при концентрации -10- 10 М (на 20 — 30 $). Наиболее четко активирующее действие ацетил-холина (на 140 — 260 $) выявляется в модельной системе с исходно необратимо ингибировэнным ферментом.

3. Активирующий эффект ацетилхолина снимается ингибиторами транскрипции и трансляции (актиномицин Д, пуромицин, рибонуклеаза) или при изъятии из системы ядер.

4. В безъядерной модельной системе ацетилхолин вызывает угнетение активности ацетилхолинэстеразы микросом и этот эффект снимается ингибиторами синтеза белков.

5. В цитоплазме нервных клеток обнаружен фактор, участвующий совместно с ацетилхолином в регуляции экспрессии гена ацетилхолинэстеразы на ядерном уровне.

6. цАМФ в бесклеточной системе вызывает угнетение активности ацетилхолинэстеразы микросом, снимаемое ингибиторами синтеза белков. В безъядерной модельной системе цАМФ активирует фермент? и этот эффект снимается ингибиторами синтеза белков.

7. цГМФ в полной и безъядерной модельных системах вызывает угнетение активности ацетилхолинэстеразы, снимаемое ингибиторами синтеза белков.

8. Постулируется существование в цитоплазме нервных клеток факторов, взаимодействующих с цАШ и цГМФ в регуляции экспрессии гена ацетилхолинэстеразы на ядерном уровне.

9. Предлагается система регуляции биосинтеза ацетилхо-линэстеразы ацетилхолином и циклическими нуклеотидами, в основе которой лежит эффекторное действие ацетилхолина на экспрессию генов на ядерном уровне, а его отрицательное эффекторное действие на трансляцию и все эффекты циклических нук-леотидов рассматриваются как корректирующие звенья.

У.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Более низкая активность АХЭ в микросомах, преинкубиро-ванных с пуромицином и рибонуклеазой, по сравнению с контрольными свидетельствует о спонтанном синтезе фермента в использованной нами модельной системе. Новосинтезированный за I час фермент обусловливает 10^-ный прирост холинэстеразной активности микросом. Таким образом, потенциально полное обновление фермента в мембранах в результате спонтанного синтеза может осуществиться за 10 час. В связи с этим следует отметить, что период полужизни АХЭ в модельной системе составляет 10 час (Soreg et а1, 1982). В полной бесклеточной системе АХ ускоряет прирост активности фермента в 3 раза. Поскольку действие АХ полностью снимается ингибиторами синтеза РНК и белков (актиномицин Д, пуромицин и рибонуклеаза), то его необходимо интерпретировать в том смысле, что АХ является эффектором биосинтеза АХЭ. Снятие активирующего действия АХ актиномицином Д, а также при изъятии из системы ядер, свидетельствуют о локализации этого эффекта в ядрах. Он может состоять либо в активации АХ синтеза РНК на ДНК генов АХЭ, либо в ускорении посттранскрипционного процессинга этой РНК. Наиболее показательными являются эксперименты с модельной системой, содержащей обработанные ДФФ микросомы и цитозоль. В этом случае относительный прирост активности АХЭ составляет 140 — 260 $. Тот факт, что в этой системе на фоне рибонук-леазы не только не проявляется эффект АХ, но и активность фермента много ниже контрольной, однозначно свидетельствует о спонтанном синтезе АХЭ в модельной системе и ускорении этого синтеза ацетилхолином.

В безъядерной модельной системе АХ снижает активность АХЭ микросом и этот эффект снимается пуромицином и рибонуклеазой. Последнее позволяет заключить об участии АХ в регу- ! ляции сборки белковых единиц АХЭ в цитоплазме в качестве ингибитора. Следовательно, ацетилхолиновый контроль биосинтеза АХЭ можно представить как систему регуляции с обратными связями: активация на ядерном уровне и ингибирование — на цито-плазматическом. Поскольку в полной модельной системе проявляется активирующее действие АХ, то первое влияние нужно считать основным, а второе — корректирующим, поддерживающим количество фермента в мембранах на каком-то определенном уровне.

Проведенный анализ влияния циклических нуклеотидов в той же модельной системе дает основание полагать, что регуля-торное действие АХ на биосинтез АХЭ в микросомах не опосредуется ни цГМФ, ни цАМФ. Циклические нуклеотиды участвуют в регуляции биосинтеза АХЭ иным способом. цАМФ подавляет экс-црессию генов АХЭ на ядерном уровне и активирует на цитоплаз-матическом. Следовательно, регуляторное влияние цАМФ на биосинтез АХЭ микросом представляет так же, как и в случае АХ, систему с обратными связями. Ингибиторное действие цАМФ в полной модельной системе свидетельствует о том, что первое влияние является основным, а второе корректирующим. цГМФ оказывает ингибиторное действие как на ядерном, так и на цито-плазматическом уровне.

В настоящей работе показано, что в цитоплазме нервных клеток присутствуют низкомолекулярные факторы, участвующие совместно с АХ, цАМФ и цГМФ в регуляции биосинтеза АХЭ на ядерном уровне. В цитоплазме АХ, цАМФ и цГМФ регулируют биосинтез АХЭ без участия указанных факторов. Регуляторный фактор к АХ удалось выделить. Изучение его химической природы составляет предмет дальнейшей работы.

Если попытаться экстраполировать результаты, полученные' в модельной системе, на цельную клетку, то можно представить систему регуляции биосинтеза АХЭ микросом нервных клеток АХ, цАМФ и цГМФ следующим образом:

1). АХ (+ цитоплазматический фактор) — активатор транскрипции (или посттранскрипционного процессинга);

2). АХ — ингибитор трансляции;

3). цАМФ (+ цитоплазматический фактор) — ингибитор транскрипции (или посттранскрипционного процессинга);

4). цАМФ — активатор трансляции;

5). цГМФ (+ цитоплазматический фактор) — ингибитор транскрипции (или посттранскрипционного процессинга);

6). вЩФ — ингибитор трансляции.

В основу же всей системы регуляции биосинтеза АХЭ в нервных клетках должно быть положено влияние АХ (в комплексе с цито-плазматическим фактором) на ядерный уровень экспрессии генов АХЭ, так как только АХ является активатором на этом уровне. Все другие влияния нужно рассматривать, очевидно, как корректирующие звенья, не позволяющие уровню фермента в клетке выйти за определенные функционально обусловленные рамки. На рис. 6 сделана попытка схематизировать систему регуляции биосинтеза АХЭ нервных клеток АХ и циклическими нуклеотидами.

Регуляторное влияние на экспрессию гена АХЭ может оказывать как внутриклеточный АХ, содержание которого изменяется в зависимости от функционального состояния, так и, возможно, поступающий в клетки из синапсов. В этом отношении в настоящее время известно, что нейроны в принципе способны к активному (против градиента концентрации) транспорту ацетилхолина (БсйшЬег-Ы! а. ЗипсЗллгаИ, 1968; Ро1ак, 1969; НеНЬгопп, 1970).

Рис. 7. Схема регуляции биосинтеза ацетилхолинэетеразы (АХЭ) в нервных клетках ацетилхолином (IX), циклическими АМФ (цАМФ) и ГМФ (ц^МФ).

I — перикарий нейронаП — ядроШ — рибосомыЦФ — ци-топлазматический факторКА — катехолашны- (+) — активация- (-) — угнетение. цГМФ образуется в результате взаимодействия АХ с холиноре-цепторами, а цАМФ образуется при освобождении катехоламинов, которое может индуцироваться в результате возбуждения ацетил-холином вставочных тормозных катехоламинергических нейронов.

Обнаруженный Н. Г. Алексидзе и М. В. Балавадзе (1977) факт активирующего действия цАШ на биосинтез АХЭ in vivo нужно рассматривать как одно из звеньев предлагаемой нами системы регуляции биосинтеза фермента.

Оптимальные концентрации АХ, индуцирующие биосинтез, а с микросомальной АХЭ в модельной системе, — 10 — 10 М. Содержание АХ в мозге составляет около 3 мкг/г сырого веса (Hanin et al, 1970; Sethy et al, 1973), или 2-Ю" 5 M. Известно, что 10 — 20% АХ нервной ткани приходится на долю так называемого «свободного АХ» (De Robertis, 1967; Chakrin, а Whittaker, 1969), локализованного преимущественно внутри нервных клеток. Следовательно, ориентировочная внутриклеточная концентрация АХ — 3*10″ ~6 М, что соответствует оптимальным концентрациям АХ, индуцирующим биосинтез микросомальной АХЭ в бесклеточной системе.

АХ оказывает совершенно аналогичное действие на биосинтез АХЭ микросом мозга и печени. В мозге холинергическая медиация представлена достаточно широко (см. Karczmar, 1969), а в печени — лишь в слабой степени, и АХ содержится в ней лишь в следовых количествах (см. А. Д. Ноздрачев, 1981; Whittaker 1963). Учитывая тот факт, что АХ оказывает влияние на биосинтез АХЭ в бесклеточной системе из печени в концентрациях —7 5.

10 -ЮМ, можно предположить, что содержащийся в крови АХ служит регулятором уровня АХЭ в мембранах клеток печени. Подтверждением настоящего предположения служит факт активирующего действия эзерина in vivo на активность АХЭ микросом печени.

Содержащийся в крови АХ есть результат его синалтиче-ской утечки при проведении нервных импульсов в холинергиче-СКИХ синапсах (см. Collier a. Mitchell, 1966; Bartolini et ai, 1972). Б свете представленных фактов можно полагать, что поступающий в кровь АХ выполняет гуморальную функцию в тканях, в которых не представлена или слабо представлена хо-линергическая медиация.

Обнаруженное действие АХ на процессы регуляции активности генов АХЭ, независимое от циклических нуклеотидов, позволяет рассматривать его как внутриклеточное гормональное, что предполагалось ранее применительно к регуляции биосинтеза М, К-АТФазы и суммарных ядерных РНК (Н.Р.Елаев, 19 806- 1981). Цитоплазматический фактор, взаимодействующий с АХ, правомерно рассматривать в качестве внутриклеточного рецептора.

Результаты настоящей работы, с нашей точки зрения, вносят новый вклад в концепцию Л. А. Орбели, а именно: обнаружение внутриклеточного гормонального действия АХ.

Показать весь текст

Список литературы

Бродский В.Я. Трофика клетки. М.: Наука, с. 355, 1966.
Васильев В.Ю., Гуляев H.A., Северин Е. С. Циклический адено-зинмонофосфат биологическая роль и механизм действия. -Журн.Всесоюзн.хим.общ. им. Д. И. Менделеева, т.20, № 3, с. 306 — 322, 1975.
Глебов Р.Н., Поздняков О. М. Стимулирующий эффект ацетилхо-лина на включение in vitro 2-^С-оротовой кислоты в синап-тосомы мозга крысы. Биохимия, т.34, й 3, с. 524 — 526, 1969.
Голиков С.Н., Розенгарт В. И. Холинэстеразы и антихолинэсте-разные вещества. Л.: Медицина, с. 382, 1964.
Демин H.H., Нечаева Г. А., Рубимая Н. Л. Некоторые взаимоотношения между эффектами ацетилхолина и катехоламинов на обмен РНК в нервной ткани. Вопр.мед.химии, т.17, Jfe 3, с. 254 — 260, 1971.
Демин H.H. 0 немедиаторных биохимических эффектах ацетилхолина в нервной ткани. В кн.: Материалы У Всесоюзн.конф. по нейрохимии. — Тбилиси, с. 365 — 381, 1970.
Долго-Сабуров В.Б., Подосиновикова Н. П., Матвеев В. И. К вопросу о холинергической регуляции процессов транскрипции в печени. Бюлл.эксп.йиол. и мед., т.88, Jfe 9, с. 294 -297, 1979.
Дядюша Г. П. Сравнительное исследование ацетилхолинэстеразы в солюбилизированном и связанном с сарколеммой состояниях. Биохимия, т.41, № 4, с. 692 — 698, 1976.
Елаев Н.Р. Зависимость синтеза РНК и белка в мозге от состояния холино- и адренорецепторов. Докл. АН СССР, т.216, ШЗ, с. 452 — 454, 1974.
Елаев Н.Р., Семенов Е. В. Изменение активности мембранных АТФаз мозга при воздействии холино- и адреномиметических веществ. Биохимия, т.39, № 3, с. 636 — 640, 1974.
Елаев Н.Р. О характере синаптической рефляции синтеза белков в нервных клетках. Докл. АН СССР, т.222, гё 6, с. 1477 — 1479, 1975.
Елаев Н.Р. №а, К-АТФаза мембран нервных клеток при воздействии эзерина. В кн.: Фармакология — здравоохранение. Тез. 1У Всесоюзн. съезд фармакол. — Л., с. 70 — 71, 1976.
Елаев Н.Р. Корреляция №а, К-АТФазной активности и синтеза белков в мембранах нервных клеток при воздействии ацетил-холина. Цитология, т.20, гё 8, с. 970 — 972, 1978а.
Елаев Н.Р. Синтез РНК в изолированных ядрах нервных клеток при воздействии ацетилхолина. Цитология, т.20, 10, с. 1173 — 1178, 19 786.
Елаев Н.Р. Циклические нуклеотиды и медиаторы как регуляторы экспрессии генов нервных клеток. В кн.: Материалы I Всесоюзн. семинара «Циклические нуклеотиды в метаболизме нервной ткани». — Изд. АН СССР, Пущино, с. 8 — 9, 1980а.
Елаев Н.Р. Активация^а, К-АТФазы микросом нервных клеток ацетилхолином в модельной системе. Биохимия, т.45, № 10, с. 1749 — 1754, 19 806.
Елаев Н.Р. Норадреналин как регулятор синтеза РНК и №а, К-АТФа-зы в нервных клетках. Проблемы эндокринологии, т.27, № I, с. 58 — 62, 1981.
Елаев Н.Р. Медиаторная регуляция синтеза РНК и белков в нервных клетках. Успехи физиол. наук (в печати).
Ноздрачев А.Д. Анатомическая структура вегетативной нервной системы. В кн.: Физиология вегетативной нервной системы. — Л.: Наука, с. 5 — 34, 1981.
Номенклатура ферментов. 1979. М.ВИНИТИ.
Палладия А .В., Велик Я. В., Полякова Н. М. Белки головного мозга и их обмен. Киев: Наукова Думка, с. 316, 1972.
Розенгарт В.И., Маслова M.Ii. Влияние судорог на скорость внедрения радиометионина в белки мозга и печени. Докл. АН СССР, т.109, А" 6, с. 1176 — 1179, 1956.
Ройтруб Б.А., Зима В. Л., Олешко H.H., Оксамитный В. Н. Алло-стерические сдвиги в ацетилхолинэстеразе, наблюдаемые при её взаимодействии с физиологически активными веществами. -Молек. генет. и биофизика, Киев, № 5, с. II 17, 1980.
Соколовский В.В. Влияние антихолинэстеразных веществ на содержание рибонуклеиновой кислоты в нервной клетке. Цитология, т.1, 3 4, с. 431 — 435.
УрбахВ.Ю. Биометрические методы. -М.: Наука, с. 415, 1964.
Фрейдлин Т.С., Балашова Е. К., Розенгарт В. И., Шерстобитов O.E. Влияние условий среды на аллостерические свойства ацетил-холинэстеразы. Биохимия, т.42, № 9, с. 1626 — 1630, 1977.
Яковлев В.А. Кинетика ферментативного катализа. М.: Наука, 1965.
Allemand P., Bon S., Massoulie J., Vigny M. The quaternary structure of chicken acetylcholinesterase and butyrylcho -linesterase- effect of collagenase and trypsin. J. Neu -rochem., v.36, H 3, p. 86o 4 867, 1981.
Altman J. Differences in the utilization of tritiated leuci -ne by single neurons in normal and exercised rats: an au -toradiographic investigation with microdensitometry. -Mature., v.199, N 4895, p. 777 780, 1963.
Arnbrus P. S., Ambrus L. C., Effect of adrenalectomy on the syn -thesis of cholinesterases. J. Med., v.6, N 5/6, p. 317 -321, 1976.
Barfai T. Cyclic nucleotides in the central nervous system. -In: Curr. Top. Cell. Regul., v. 16, p. 225 269, 1980.
Bartolini A., Weisenthal L.M., Domino E.F. Effect of photic stimulation on acetylcholine release from cat cerebral cortex. Neuropharmacology, v.11, N 1, p. 113 — 122, 1972.
Berman H.A., Becktel W., Taylor P. Spectroscopic studies on acetylcholinesterase: influence of peripheral-site occupa -tion on active center conformation. Biochemistry, v.20, N 16, p.4803 — 4810, 1981.
Bon S., Massoulie J. Collagen-tailed and hydrophobic compo -nents of acetylcholinesterase in Torpedo marmorata elec -trie organ. Proc. Hat. Acad. Sci. USA, v.77, H 8, p. 4464 — 4468, 1980.
Bradley P.B. Synaptic transmission in the central nervous system and its relevance for drug actions. Int. Rev. Heurobiol., v.11, p. 1 — 56, 1968.
Brattgard S.O. The impotance of adequate stimulation for the chemical composition of retinal ganglion cells during early post-natal development. Acta Radiol. Suppl., v. y6, p. 1 — 80, 1952.
Brzin M., Kiauta T., Klinar B., Sketelj J. Aktivnost in loVkalizacija holinesteraze v holinergicnih sinapsah. -Zdravstv. vestn., v.48, N 2, p. 47 49, 1979.
Campbell M.K., Mahler H.R., Moore W.J., Tewari S. Protein synthesis systems from rat brain. Biochemistry, v. 5, H 4, p. 1174 — 1181, 1966.
Chakrin L.M., Whittaker V.P. The subcellular distribution of jii-Me-%. acetylcholine sinthesized by brain in vivo. -Biochem. J., v.113, p.97 107, 1969.
Changeux J.P., Responses of acetylcholinesterase from Torpe -do marmorata to salts and curarizing drugs. Mol. Phar -macol., v.2, N 5, p. 369 — 392, 1966.
Chai M.S.L., Reavill C.A., Vidal C.J., Piummer D.T. Molecular forms of acetylcholinesterase present in the white and grey matter of pig brain. Neurochem. Int., v.3, p. 311 -321, 1981.
Clement-Cormier J.C., Parrish R.G., Petzold G.L., Kebabian J.W., Greengard P. Caracterization of a dopaminesensiti -ve adenylate cyclase in the rat caudate nucleus. J. Neu-rochem., v.25, N 2, p. 143 — 149, 1975.
Collier B., Mitchell J. i1. The central release of acetylcho -line during stimulation of the visual pathway. J. Physiol., v.184, N 1, p. 239 — 254, 1966.
Costa E., Guidotti A. The role of 3'-5'-cyclic adenosine monophosphate in the regulation of adrenal medullary func -tion. In: New. Concepts in Neurotransmitter Regulation (Ed. A. I. Mandel). — N.Y., p. 135 — 152, 1973.
Costa E., De-Man Ch., Trans-synaptic regulation of ribonuc -leic acid biosynthesis in rat adrenal medulla. Mol. Pharmacol., v.12, N 3, p. 514 — 518, 1976.
Courand J.Y., Koenig H.L., Di Giamberardino 1. Acetylcholinesterase molecular forms in chick ciliary ganglion: pre -and postsynaptic distribution derived from denervation, axotomy and double section. J. Neurochem., v.34, p.1209 — 1218, 1980.
Curtis D.R., Crawford J.M. Central synaptic transmission-microelectrophoretic studies. Ann.Rev.Pharmacol., v.9, p. 209 — 240, 1969.
De Robertis E. Ultrastructure and cytochemistry of the sy -naptic region. Science, v.156, N 3777, p. 907 — 914, 1967.- 91 ~
De Robertis E. Molecular biology of synaptic receptors. -Science, v.171, N 3975, p. 963 969, 1971.
De Lores Arnaiz G.R., Alberici de Canal M., De Robertis E. Turnover of proteins in subcellular fractions of rat ce -rebral cortex. Brain Res., v.31, N 1, p.179 — 184, 1971.
Ellraan A.L., Courtney K.D., Andres V., Peatherstone R.M. A New and Rapid Colorimetric Detevmination of Acetylcholin esterase Activity. Biochem. Pharmacol., v.7, N 2, p.88 — 95, 1961.
Engberg J., Marshall K.C. Mechanism of noradrenaline hyper-polarization in spinal cord motoneurons of the cat. -Acta. Physiol. Scand., v.83, N 1, p.142 144, 1971.
Ficher C.A., Morell P. Turnover of proteins in myelin and myelin-like material of mous brain. Brain Res, v.74, N 1, p.51 — 65, 1974.
Folbergrova J. The effect of potassium and some other fac35tors upon the incorparation of S^ methionine into pro -teins of brain cortex slices. — Physiol, bohemoslov., v.10, N 2, p.130 — 138, 1961.
Polin 0., Ciocalteu V. On tyrosine and tryptophane determi -nations in proteins. J.Biol.Chem., v.73, N 2, p. 627 -632, 1927.
Frederickson R.C.A., Iordan J.M., Phillis Y.W. The action of noradrenaline on cortical neurons: effects of pH. -Brain Res, v.35, N 2, p.556 568, 1971.
Froede H.C., Wilson J.B. Acetylcholinesterase the acyl -enzyme intermediate. — Neurochem. Int., v.2, N 2, p.193 -197, 1980.
Glow P.H., Opit L.Y., Charnock J.S. Elevated sodium plus po-, tassium activated adenosinetriphosphatase in rats after chronic diisopropylfluorophosphate poisoning. Arch.int. Pharmacodyn., v.198, H 1, p.22 — 28, 1972.
Goldberg M.A. Inhibition of synaptosomal protein synthesis by neurotransmitter substances. Brain Res., v.39, N 1, p. 171 — 179, 1972.
Greene L.A., Rukenstein A. Regulation of acetylcholinestera se activity by nerve growth factor. Role of transcription and dissociation from effects on proliferation and neu -rite outgrowth. J.Biol.Chem., v.256, Ш 12, p. 6363 -6367, 1981.
Grossland J., Slater P. The effect of some drugs on thefree" and «bound» acetylcholine content of rat brain. -Brit. J.Pharmacol., v.33, N 1, p. 42 47, 1968.
Hanbauer I., Lovenberg W., Guidotti A., Costa E. Role of cholinergic and glucocorticosteroid receptors in the tyrosine hydroxylase induction elicited by reserpine in superior cervical ganglion. Brain Res., v.96, И 1, p. 197 — 200, 1975.
Hanbauer I., Costa E. Induction of tyrosine hydroxylase in the superior cervical ganglia of rats: opposite influence of muscarinic and nicotinic receptor agonists. Neuro -pharmacology, v.15, N 2, p. 85 — 90, 1976.
Hanin I., Massarelli R., Costa E. Environmental and techni -cal preconditions influencing choline and acetylcholine concentration in rat brain. In: Drugs and cholinergic mechanisms in the CNS. — Stockholm, p.33 — 54, 1970.
Heilbronn E. Chemically induced changes in the acetylcholine uptake and storoge capacity of brain tissue. In:
Drugs and cholinergic mechanisms in the CMS. Stockholm, p. 245 — 264, 1970.
Hemminki K. Effects of adbed substances on R1A and protein synthesis in immature neurons. J.Neurochem., v.20, N 2, p. 373 — 378, 1973.
Hollunger E.G., Niklasson B.H. The isolation of endogenous modulators of the affinity of acetylcholinesterase to cholinergic ligands. Acta physiol. scand., v.111 N 3, p. 335 — 341, 1981.
Hyden H. Quantitative assay of compounds in isolated, fresh nerve cells and glial cells from control and stimulated animals. Nature, v.184, N 4684, p. 433 — 435, 1959.
Hyden H., Pigon A. A cytophysiological study of the functi -onal relationship between oligodendroglial се11з and nerve cells of deiters nucleus. J.Neurochem., v.6, N 1, p. 57 — 72, 1960.
Karczmar A.G. Is the central cholinergic nervous system overexploited. Fed. Proc., v.28, Ж 1, p. 147 — 157, 1969.
Kellett I.C., Hite C.W. Cholinergic anionic receptors I Ste-ric requirements for quaternary ammonium inhibitors of acetylcholinesterase. J.Pharm. Sci., v.54, N 6, p.883 — 887, 1965.
Kitz R. I, Molecular pharmacology of acetylcholinesterase.1.: Modern Pharmacol. (Ed. Feather-Stone R.M.). H.Y., p. 333 374, 1973.
Koelle G.B. The histochemical localisation of cholinestera-ses in the central nervous system of the rat. J.Comp. Physiol., v.100, N 2, p.211 — 235, 1954.
Koelle G.B., Koelle W.A., Smyrl E.C. Effects of inactiva -tion of butyrylcholinesterase om steadystate and regenerating levels of ganglionic acetylcholinesterase. J. Neurochem., v.28, N 2, p.313 — 320, 1977.
Kohl H.H., Sellinger O.Z. Protein synthesis in neuronal pe-rikarya isolated from cerebral cortex of the immature rat. J.Neurochem., v.19, N 3, p.699 — 711, 1972.
Mahler H.R. Protein turnover and synthesis: relation to sy -naptic function. Advances in Biochem. Psychopharmacol.
Eds. E. Costa a. P. Greengard) N.Y.: Raven Press., v.1, p.49 70, 1969.
Mikalsen A., Andersen R.A., Barstad I.A.B., Lilleheil G. Recovery of activity and molecular forms of cholineste -rase in different animal species following irreversible cholinesterase inhibition. Comp. Biochem. and Physiol. v.71, M 1″ P*2? — 35, 1982.
Niday E., Wang C.S., Alaupovic P. Kinetic evidence for the allosteric substrate inhibition of human erythrocyte ace tylcholinesterase. Biochim. biophys. acta., v.612, N 1, p. 67 — 72.1. V V
Pantelic D., Maksimovic M. Induced and spontaneous regene -ration of acetylcholinesterase activities in rats after inhibition by organophosphorus compounds. Biochem.Soc. Trans, v.9, N 2, p. 197, 1981.
Pfister G., Wenk H., Danner H. Acetylcholinesterase chal-tige Neurone im Gehirn der Ratte nach DPP — intoxikati -on. — Acta Histochem., v.69, N 2, p. 176 — 186, 1981.
Piha R.S., Cuenod M., Waelsch H. Metabolism of histones of brain and liver. J. Biol.Chem., v.241, N 10, p. 2397 -2404, 1966.
Polak R.L. The influence of drugs on the uptake of acetyl -choline by of rat cerebral cortex. Brit. J.Pharmacol., v.36, p.144 — 155, 1969.
Rakonczay Z., Mallol I., Schenk H., Vincendon G., Zanet -ta I.P. Purification and properties of the membrane -bound acetylcholinesterase from adult rat brain. Bio -chim. biophys. acta, v.657, N 1, p.243 — 256, 1981.
Ramirez G., Escudero E., Villafruela M.I., Barat A., Gomez-'
Barriocanal I., Rodriguez-Borrajo C., Molecular forms of acetylcholinesterase in the developing chick retina. -Neurosci. Lett., v.24, N 7, p. 340, 1981.
Rieger P., Paivre-Bauman A., Benda P., Vigny M. Molecular forms of acetylcholinesterase: the ir de novo synthesis in mous neuroblastoma cells. J.Neurochem., v.27, N 5, p. 1059 — 1063, 1976.
Rotundo R.L., Pambrough D.M. Synthesis, transport and fate of acetylcholinesterase in cultured chick embryo muscle cells. Cell, v.22, N 2, Part 2, p. 583 — 594, 1980.
Rubin L.L., Schuetzer S.M., Weill C.L., Pischbach G.D. Re -gulation of acetylcholinesterase appearance at neuromuscular junctions in vitro. Nature, v.283, N 5744, p. 264 — 267, 1980.
Scarsella G., Settimi L., Traina M.E. Confronto tra acetyl-cholinesterasi eritrocitaria umana e di ratto. Boll. Soc. ital.biol.sper., v.56, N 19, p. 1957 — 1961, 1980.
Schuberth I., Sundwall A. Differences in the subcellular localization of choline, acetylcholine and atropine ta -ken up by mouse brain slices in vitro. Acta physiol. Scand., v.72, N 1, p. 65−71, 1968.
Schultz I., Daly I.W. Adenosine 3-L, 5'- monophosphate in gui nea pig cerebral cortical slices: effects of and B-adrenergic agents, histamine, serotonin and adenosine. -J.Ueurochem., v.21, IT 3, p. 573 — 579, 1973.'
Sethy V.H., Roth R.H., Kuhar M.I., Van Woert M.H. Choline and acetylcholine: regional distribution and effect of degeneration of cholinergic nerve terminals in the rat hippocampus. Neuropharmacology, v.12, N 9, p. 819 823, 1973.
Shimizu H., Tanaka S., Suzuki T., Matsukado I. The res -ponse of human cerebrum adenyl cyclase to biogenic amines. J.Neurochem., v.18, N 6, p. 1157 — 1161.
Shuster 1., Hannam R.V. The indirect inhibition of protein synthesis in vivo by chlorpromarine. J. Biol. Chem., v.239, N 10, p. 3401 — 3406, 1964.
Singh U.B., Talwar G.P. Effect of the flicker freuquency of light and other factors on the synthesis of proteins in the occipital cortex of monkey. J. Heurochem, v.14, N 6, p. 675 — 680, 1967.
Soreg H., Pawari R., Silman I. Biosynthesis and secretion of catalytically active acetylcholinesterase in Xenopus oocytes microinjested with mRNA rat brain and from Torpedo electric organ. Proc. Natl. Acad. Sci USA, v.79, N 3, p.830 — 834, 1982.
Stedman E., Easson L.H. Choline-esterase. An enzyme present in the blood-serum of the horse. J.Biochem., v.26, p. 2056 — 2066, 1932.
Taylor P.B., Rieger F., Shelanski M.L., Greene L.A. Cellu -lar localization of the multiple molecular forms of acetylcholinesterase in cultured neuronal cells. J. Biol. Chem., v.256, N 8, p. 3827 — 3830, 1981.
Torda C. Effect of convulsion inducing agents on the ace -tylcholine content and on the electrical activity of the brain. Amer. J.Physiol., v.173, N 1, p.179 — 183, 1953.
Vidal G.I., Ghai M.S.V., Plummer D.T. The effect of solubilization on the properties and molecular forms of rat brain acetylcholinesterase. Neurochem. Int., v.3,
H 3 4) p. 229 — 238, 1981.
Von Hungen K., Mahler H.R., Moore W.I. Turnover of protein and ribonucleic acid in synaptic subcellular fractions from rat brain. J.Biol.Chem., v.243, N 7, p. 1415 -1423, 1968.
Viratelle O.M., Bernhard S.A. Major component of acetylcho linesterase in Torpedo electroplax is not basal laming associated. Biochemistry, v.19, N 22, P. 4999 — 5007, 1980.
Webb I.G., Berv K.R., Kopin L.I. Induction of dophamine-J3-hydroxylase in superior cervical ganglia in organ cul -ture. Neurpharmacology, v.14, N 9, p. 643 — 648, 1975.
Wenthold R., Mahler H., Woor W. The half-life of acetylcholinesterase in mature rat brain. J. Neurochem, v.22, N 6, p. 941 — 945, 1974.
Whittaker V.P. Identification of acetylcholine and related esters of biological origin. Ini: Handbuch der experi -mentellen Pharmakologie. (Ed. G.B.Koelle) Berlin, Springer verlag, Bd.15, p. 1 — 39, 1963.
Widmer T., Di Francesco K., Brodbeck U. Effects of amphi -philes on structure and activity of human erythrocyte membrane acetylcholinesterase. Eur. J.Biochem., v.102, N 1, p. 59 — 64, 1979.
Wilson I.B., Quan C., Acetylcholinesterase studies on molecular complementariness. Arch. Biochem. Biophis., v.73, N 1, p. 131 — 143, 1958.
Wilson I.B., Harrison. Turnover number of acetylcholineste -rase. J.Biol.Chem., v.236, N 8, p.2292 — 2295, 1961.
Выражаю искреннюю признательность научному руково -дителю Николаю Родионовичу Елаеву и коллективу кафедры биохимии ПТУ за представленную возможность творческой работы и постоянную помощь при её выполнении.

Заполнить форму текущей работой