Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Proteus, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения

Диссертация: Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Proteus, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Представители данного рода широко распространены в природе, их выделяют из воды, почвы, фекалий животных и человека. Некоторые штаммы входят в состав нормальной микрофлоры кишечника (Lamikanra, Fayinka, Olusanya, 1989; Золотухин, 2002). В то же время представители этого рода являются возбудителями внутрибольничных инфекций, энтеритов у детей и взрослых людей, способны вызывать воспалительные… Читать ещё >

Содержание

  • СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
  • I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Характеристика бактерий рода Proteus
    • 1. 2. Резервуар и распространение инфекции
    • 1. 3. Патогенность протеев
    • 1. 4. Идентификация бактерий рода Proteus
    • 1. 5. Устойчивость
    • 1. 6. Бактериофаги и их применение в лабораторной практике
      • 1. 6. 1. Фагоидентификация бактерий и фаготипирование
      • 1. 6. 2. Развитие фаговых корпускул в клетке хозяина
      • 1. 6. 3. Реакция нарастания титра фага (РНФ)
  • II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Материалы и методы
    • 2. 2. Результаты собственных исследований
      • 2. 2. 1. Выделение бактерий рода Proteus из патологического материала и объектов окружающей среды
      • 2. 2. 2. Изучение спектра литического действия коммерческого коли-протейного бактериофага
      • 2. 2. 3. Поиск бактериофагов Proteus и селекция клонов фагов
      • 2. 2. 4. Изучение биологических свойств фагов бактерий рода Proteus
      • 2. 2. 5. Характеристика выделенных фагов бактерий рода Proteus, выбранных для конструирования диагностического препарата
    • 2. 3. Разработка технологических параметров изготовления биопрепарата для фагодиагностики бактерий рода Proteus
    • 2. 4. Разработка метода выделения и ускоренной идентификации бактерий рода Proteus с использованием фагов
    • 2. 5. Разработка оптимальных условий постановки РНФ
      • 2. 5. 1. Определение количественного показателя РНФ, имеющего диагностическое значение
      • 2. 5. 2. Установление оптимального времени, обеспечивающего наиболее полноценное взаимодействие фага с бактериями
      • 2. 5. 3. Использование РНФ для обнаружения бактерий рода Proteus в объектах ветеринарного надзора
        • 2. 5. 3. 1. Исследование водопроводной воды, контаминированной бактериями рода Proteus, с помощью РНФ
        • 2. 5. 3. 2. Исследование комбикорма, контаминированного бактериями рода Proteus, с помощью РНФ
        • 2. 5. 3. 3. Исследование проб фекалий, контаминированных бактериями рода Proteus, с помощью РНФ
        • 2. 5. 3. 4. Исследование мяса, контаминированного бактериями рода Proteus, с помощью РНФ
        • 2. 5. 3. 5. Результаты исследований фекалий от больных диареей поросят с помощью РНФ
    • 2. 6. Изучение эффективности поливалентного фагового биопрепарат

Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Proteus, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность работы.

В последние годы, благодаря работам отечественных и зарубежных исследователей, расширилось представление о роли энтеробактерий рода Proteus в патологии животных и человека (Papapetropoulou, Pagonopoulou, Kouskouni, 1997; Золотухин, 2004; 2005).

Представители данного рода широко распространены в природе, их выделяют из воды, почвы, фекалий животных и человека. Некоторые штаммы входят в состав нормальной микрофлоры кишечника (Lamikanra, Fayinka, Olusanya, 1989; Золотухин, 2002). В то же время представители этого рода являются возбудителями внутрибольничных инфекций, энтеритов у детей и взрослых людей, способны вызывать воспалительные процессы мочевыводящих путей, быть причиной послеоперационных и ожоговых осложнений, сепсиса, дисбактериоза, токсикоинфекций и других заболеваний (Бутакова, Илинская, Юрова, 1991; Ба-кулов, Смирнов, Васильев, 2003; Зыкин, 2003; Заркуа, Мечурчлишвили, Гаду а, 2005; Чанишвили с соавт., 2005; Золотухин, Каврук, Васильев, 2005).

Также имеется множество экспериментальных данных о патогенности названных микроорганизмов для животных. Протеи выделяются при маститах, эндометритах, раневых инфекциях и других воспалительных процессах у различных видов животных. Особое внимание заслуживают работы по изучению этиологической роли протея в возникновении желудочно-кишечных заболеваний новорожденных животных (Каврук, Бритова, Гиряева, 1983; Каврук, 1986; 1994; Парайко, Парайко, 1990; Мищенко с соавт., 1999; Золотухин, 2004, Золотухин, Каврук, Васильев, 2005).

В настоящее время лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых протеем, основана на выделении чистой культуры микроорганизмов и их идентификации по общепринятым тестам. Этот метод трудоемок и требует затрат времени, питательных сред и реактивов. Поэтому перед исследователями стоит задача изыскания более простого и доступного для лабораторий любого уровня метода индикации и идентификации названных микроорганизмов.

В ветеринарной практике для ускоренного обнаружения некоторых родов микроорганизмов в патологическом материале и объектах внешней среды предложены индикаторные бактериофаги с использованием реакции нарастания титра фага РНФ (Гольдфарб, 1961; Капырина, Бакулов, 1972; Ганюшкин, 1988; Русалеев, 1990; Кольпикова, Бакулов, Котляров, 1990; 1992; Натидзе с соавт., 2005). Методы индикации и идентификации микроорганизмов с помощью бактериофагов специфичны, не требуют больших затрат времени, материалов и общедоступны.

Цель исследования.

Разработка технологических параметров по индикации и идентификации бактерий рода Proteus с помощью специфических бактериофагов.

Задачи исследования:

1. Изучить распространение бактерий рода Proteus в хозяйствах, неблагополучных по желудочно-кишечным заболеваниям молодняка сельскохозяйст-веных животных.

2. Выделить и селекционировать бактериофаги, активные в отношении бактерий рода Proteus.

3. Изучить основные биологические свойства (морфологию негативных колоний, литическую активность и ее спектр, специфичность, температурную устойчивость, устойчивость к хлороформу, морфологию фаговых корпускул, изменение литической активности при хранении) выделенных бактериофагов.

4. Подобрать оптимальный набор выделенных фагов и сконструировать на их основе новый биопрепарат-диагностикум.

5. Разработать технологические параметры изготовления биопрепарата для фагодиагностики бактерий рода Proteus.

6. Разработать схему ускоренной индикации бактерий рода Proteus в объектах ветеринарного надзора с помощью РНФ и использованием созданного биопрепарата.

7. Разработать схему идентификации протеев с помощью бактериофагов.

Научная новизна.

Получены новые штаммы бактериофагов, активные в отношении штаммов бактерий рода Proteus, выделенных из объектов ветеринарного надзора. Изучены основные биологические свойства выделенных фагов.

Впервые разработаны биотехнологические параметры фагоиндикации и фагоидентификации бактерий рода Proteus в объектах ветеринарного надзора. Доказана эффективность использования селекционированных бактериофагов с диагностической целью.

Практическая значимость.

Выделены и селекционированы специфичные бактериофаги, которые используются для изготовления диагностических препаратов. Разработаны технологические параметры по получению диагностического биопрепарата из выделенных фагов и схемы фагодиагностики.

Для конструирования биопрепарата были отобраны два фага, которые депонированы в государственной коллекции Всероссийского государственного центра качества и стандартизации лекарственных препаратов для животных и кормов ФГУ «ВГНКИ» (Справка о депонировании штамма бактериофага П-16 УГСХА от 21.02.2006 № 263−3/19- Справка о депонировании штамма бактериофага П-261 УГСХА от 21.02.2006 № 263−4/19) для получения патентов.

Разработана «Временная инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии индикаторных протейных бактериофагов П-16 УГСХА, П-261 УГСХА», одобренная Ученым Советом Ульяновской ГСХА и утвержденная ректором академии 17.01.2006.

Для врачей-бактериологов предложены «Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Proteus в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов», утвержденные Отделением ветеринарной медицины Российской академии сельскохозяйственных наук (РАСХН) (26.06.2006).

Результаты изучения биологических свойств бактериофагов П-16 УГСХА и П-261 УГСХА и индикации бактерий рода Proteus в объектах ветеринарного надзора методом РНФ подтверждена актом производственных испытаний (от 10.01.2006), актами комиссионных испытаний в Ульяновской Государственной сельскохозяйственной академии (от 30.01.2006), актами комиссионных испытаний в Всероссийском государственном центре качества и стандартизации лекарственных препаратов для животных и кормов (ВГНКИ) (от 17.02.2006).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Усовершенствована схема выделения бактериофагов применительно к протеям, изучены биологические свойства выделенных и селекционированных фагов.

2. Сконструирован биопрепарат-диагностикум из селекционированных фагов и разработаны технологические параметры его изготовления для фагоди-агностики бактерий рот Proteus.

3. Разработаны схемы ускоренной индикации бактерий Proteus в объектах ветеринарного надзора с помощью РНФ и идентификации протеев с использованием созданного биопрепарата.

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на научно-практических конференциях: Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Региональные проблемы народного хозяйства» (Ульяновск, 2004), Научнопрактической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов «Аграрная наука — развитию агропромышленного комплекса» (Ульяновск, 2004), Всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие АПК: региональный опыт, проблемы, перспективы» (Ульяновск, 2005), Международной научно-практической конференции «Молодежь и наука XXI» (Ульяновск, 2006), Международной научной конференции «Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для людей и животных» (Ульяновск, 2006).

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия» в рамках научно — исследовательской темы кафедры «Разработка и усовершенствование методов диагностики, лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных» при творческом сотрудничестве с сотрудниками Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (ВНИИВСГиЭ).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 работ.

Структура и объем диссертации

.

Диссертация включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, заключение, выводы, практические предложения, список литературных источников, 197 источников, в том числе 150 отечественных, и приложения. Работа изложена на 166 страницах и иллюстрирована 36 таблицами, 9 рисунками.

выводы.

1. При исследовании 64 проб патологического материала и объектов ветеринарного надзора из 10 хозяйств Ульяновской и Самарской областей в 7 хозяйствах, что составило 70%, было выделено 12 культур бактерий рода Proteus.

2. Выделено из объектов внешней среды 22 изолята фагов, активных по отношению к бактериям рода Proteus и изучены их биологические свойства.

3. Отобрано два штамма фагов П-261 УГСХА и П-16 УГСХА, которые имели титр 10″ по Аппельману и 1,8×109 — 2,0×109 по Грациа, обладали выраженной специфичностью к штаммам бактерий рода Proteus, не лизировали представителей родов Escherichia, Enterobacter, Citrobcicter, Morganella, Salmonella, Klebsiella, Staphylococus, Streptococcus, Pseudomonas, Bacillus, Yersinia,.

7 8 сохраняли литическую активность в пределах 10 — 10 в течении 12 месяцев при хранении в условиях 2−4 °С и были термостабильными.

4. Установлено, что фаг П-16 УГСХА был устойчив к действию 10% раствора хлороформа в течение 30 минут, а фаг П-261 УГСХА был чувствителен к данному реагенту.

5. Определено, что по морфологическим параметрам бактериофаги П-16 УГСХА и П-261 УГСХА могут быть отнесены к семейству Podoviridae согласно Международной номенклатуре вирусов, а по классификации А. С. Тихоненко (1968) — ко II морфологической группе: «Фаги с аналогами отростка».

6. Разработаны биотехнологические параметры изготовления и контроля специфического диагностического биопрепарата с высокой литической активностью, состоящий из двух штаммов фагов П-261 УГСХА и П-16 УГСХА.

7. Разработана схема идентификации протеев с помощью сконструированного фагового препарата, позволяющая идентифицировать бактерии рода Proteus за 48 часов.

8. Разработана схема ускоренной индикации бактерий рода Proteus с помощью РНФ в объектах ветеринарного надзора с использованием набора фагов, которая позволяет обнаружить их за 18 часов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. Предложены для конструирования биопрепарата-диагностикума 2 штамма фагов П-261 УГСХА и П-16 УГСХА, активные по отношению к представителям бактерий рода Proteus, обладающие строгой специфичностью, широким спектром литической активности.

2. Индикацию и идентификацию бактерий рода Proteus предлагаем проводить с помощью набора диагностических фагов, согласно «Методические рекомендациям по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Proteus в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов».

3. Изготовление и контроль диагностического набора бактериофагов необходимо проводить согласно «Временной инструкции по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Proteus П-261 УГСХА и П-16 УГСХА».

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Важное место среди условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих различные заболевания у животных и человека, занимают энтеробактерии рода Proteus. Борьба с любыми инфекционными заболеваниями зависит от своевременной диагностики, поэтому усовершенствование методов лабораторной диагностики заболеваний, вызываемых этими микроорганизмами, уделяется большое внимание. Современные методы диагностики, которые могут быть использованы для индикации и идентификации микроорганизмов дорогостоящи и недоступны большинству районных бактериологических лабораторий. Поэтому изысканию простых и доступных методов для лабораторий любого уровня является актуальной проблемой.

В связи с этим наша работа была посвящена изысканию вирулентных специфических бактериофагов, активных в отношении бактерий рода Proteus, выделенных от животных.

Как указывают В. Д. Тимаков и Д. М. Гольдфарб (1962), идентификация возбудителей инфекционных заболеваний при помощи бактериофагов является очень тонким методом, превосходящим по чувствительности все иммунологические реакции. Поэтому основной задачей проведенных исследований являлось выделение и изучение бактериофагов с типоспецифическими свойствами в отношении бактерий рода Proteus для индикации и идентификации указанных бактерий. Выделение бактериофагов проводилось из объектов ветеринарного надзора.

При проведении бактериологических исследований 64 проб объектов ветеринарного надзора 10 хозяйств Ульяновской и Самарской областей нами было выделено 12 культур бактерий рода Proteus из проб, взятых в 7 хозяйствах, что составило 70%. Этот показатель свидетельствует о широком распространении бактерий рода Proteus в объктах ветеринарного надзора на территории Ульяновской и Самарской областей.

В результате нами было выделено и селекционировано 22 изолята протейных бактериофагов. Они были изучены по основным биологическим свойст-вамсвойствам, которые имеют таксономическое значение: 1) морфологии негативных колоний- 2) специфичности действия- 3) литической активности- 4) спектру литической активности- 5) температурной устойчивости- 6) чувствительности к хлороформу, 6) морфологии фаговых корпускул, 7) изменению литической активности фагов при хранении.

Выделенные бактериофаги различались по морфологии образуемых на индикаторных штаммах негативных колоний, поэтому разделены нами на пять типов. Была изучена литическая активность селекционированных бактериофагов по методам Аппельмана и Грациа (Гольдфарб, 1961), которая составила: по методу Аппельмана 10″ 5−10″ 8, по Грациа от 2,1×106 до 2,0×109 фаговых корпускул в 1 мл. Был изучен совместный спектр литического действия двух активных бактериофагов: процент лизиса составил 95,0%. Нужно отметить, что бактериофагов, лизирующих только один штамм, обнаружено не было.

Выделенные фаги исследовали на специфичность: они проявили себя не активными в отношении гетерологичных бактерий.

Воздействие температуры в диапазоне 60−73 °С не понижало литическую активность селекционированных бактериофагов, инактивация наступала при температуре 88 °C. Так как изучаемые фаги были термостабильными, метод прогревания в исследованиях мы использовали для инактивации микрофлоры с целью освобождения от них фаголизата. Фаги проявили неодинаковую устойчивость к хлороформу: П-16 УГСХА был устойчив, а П-261 был не устойчив к воздействию реагента.

Результаты проведенных исследований соответствуют литературным данным (Хейс, 1965, Ревенко, 1978, Золотухин, 1994) о более высокой устойчивости бактериофагов по сравнению с бактериями к воздействию факторов внешней среды.

После проведения электронной микроскопии было определено, что по морфологическим параметрам бактериофаги П-16 УГСХА и П-261 УГСХА могут быть отнесены к семейству Podoviridae согласно Международной номенклатуре вирусов, а по классификации А. С. Тихоненко (1968) — ко II морфологической группе: «Фаги с аналогами отростка».

Хотя некоторые литературные данные (Пульчеровская, 2004; Коритняк, 2005; Пожарникова, 2006) о стороении фаговых вирионов энтеробактерий свидетельствуют о том, что они, в основном, относятся к семейству Myoviridcie (Murphy, 1995), по классификации А. С. Тихоненко (1968) — к V морфологической группе: «Фаги с отростком сложного строения, чехол которого способен к сокращению».

Селекционированные протейные бактериофаги при хранении в условиях.

0 7.

2−4 С в течение 12 месяцев незначительно снижали литическую активность (10 — 109) и поэтому могут входить в состав биопрепарата для фагодиагностики.

Проведенные исследования позволили сконструировать диагностический препарат на основе фагов П-261 УГСХА и П-16 УГСХА и разработать технологических параметры для изготовления лабораторных серий препарата. Сконструированный диагностический препарат рекомендуем использовать в РНФ для индикации бактерий рода Proteus. При этом сокращаются сроки исследования с меньшим расходом сред и реактивов, чем при использовании бактериологического метода.

О высокой чувствительности РНФ для индикации возбудителей во внешней среде сообщают многие исследователи (Земцова, 1965; Золотухин, Каврук, Васильев, 2005). Нами изучена возможность использования индикаторных бактериофагов П-16 УГСХА и П-261 УГСХА для идентификации бактерий рода Proteus.

Существующие методы идентификации бактерий рода Proteus основаны на определении биохимических свойств выделенных культур (Покровский, По-здеев, 1999). Нами предложена схема ускоренной их идентификации с помощью индикаторных бактериофагов П-16 УГСХА и П-261 УГСХА. Лизис культуры на поверхности питательнога агара служит основанием для отнесения исследуемого штамма к роду Proteus. Для ускоренной индикации протеев в объектах ветеринарного надзора нами разработаны оптимальные условия постановки РНФ.

В первую очередь для постановки РНФ определяли концентрации протейных бактериофагов, имеющих диагностическое значение. По данным В. Д. Тимакова и Д. М. Гольдфарба (1962) известно, что при обнаружении бактерий в РНФ считается отрицательным, если увеличение количества фага в опытной пробе по сравнению с контрольной составляет до 3 раз. Увеличение количества фага от 3 до 5 учитывается как слабо положительная реакция, от 5 до 10 разположительная.

Для определения количества фага, имеющего диагностическое значение при обнаружении бактерий рода Proteus, нами проведены эксперименты на МПБ контаминированном культурами P. vulgaris 3 и P. vulgaris 261 в концентрации от 101 до 105 м.к./мл.

Выбранный критерий гарантировал достоверность результатов, поскольку он позволял исключить технические погрешности при титровании, при которых возможно выявление невысокой степени увеличения количества фага. Достоверность РНФ подтверждали выделением бактерий рода Proteus бактериологическим методом исследования.

Определив количество фага, имеющее диагностическое значение при обнаружении бактерий рода Proteus в исследуемом тест-объекте, мы приступили к разработке режимов постановки РНФ. Для решения указанной задачи необходимо было провести эксперименты на тест-объекте по выявлению наиболее эффективного временного показателя взаимодействия фага и индикаторной культуры при сохранении остальных параметров (температурный режим, концентрация бактериальной культуры и фаговых корпускул в 1 мл) постановки РНФ. Оптимальное время экспозиции выбирали из шести следующих параметров:

— в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 5 часов при температуре 37 °C, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37 °C;

— в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 16 часов при температуре 37 иС, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37 °C;

— в предварительном подращивании исследуемого материала в течение 24 часов при температуре 37 °C, после добавления фагов смесь выдерживали в течение 5 часов при температуре 37 °C;

— в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 10 часов при температуре 37 °C;

— в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 16 часов при температуре 37 °C;

— в увеличении времени контакта исследуемого материала с фагом до 24 часов при температуре 37 °C.

В результате этих исследований было установлено, что при подращивании исследуемого материала в течение 24 часов чувствительность не повышалась по сравнению с чувствительностью РНФ при подращивании материала в течение 16 часов и позволяла обнаруживать протеи 10″ м.к./мл. При подращивании исследуемого материала в течение 5 часов при температуре 37 °C, нам удалось обнаруживать данные бактерии в концентрации 102 м.к./мл. При этом режиме подращивания чувствительность РНФ не снижается, но сокращается время исследования до 18 часов. Поэтому, это время подращивания мы считаем оптимальным.

В результате исследований установлено, что при увеличении контакта исследуемого субстрата с фагом в течение 10 часов при температуре 37 °C заметное нарастание количества фагов бактерии рода Proteus не наблюдается при концентрации гомологичных бактерий не менее 102 м.к./мл. Удлинение сроков инкубации (16−24 часа) также не дают возможности получить увеличение количества фага.

Исходя из этого, можно предположить, что значение инкубации в течение 5 часов при температуре 37 °C сводится к тому, что за это время бактерии, находящиеся в исследуемом субстрате в очень малых количествах, размножаются. В результате этого между добавленным индикаторным фагом и бактериями устанавливаются такие количественные соотношения, при которых вероятность встреч между ними повышается, и бактерии инфицируются фагом. Отсюда вытекает, что исход реакции зависит не только от свойств индикаторного фага, но и от биологических особенностей данного возбудителя, обнаруживаемого с помощью РНФ.

Таким образом, из числа испытанных режимов наиболее быстрым и чувствительным является подращивание исследуемого материала с фагом в течение 5 часов при температуре 37 °C. Учет результатов в этом случае проводят через 16 часов. Бактерии рода Proteus удается обнаружить в количестве 10 м.к./г.

Таким образом, сопоставление результатов бактериологического исследования и РНФ позволили подтвердить специфичность РНФ и высокую чувствительность, которые согласуются с работами многих авторов.

В.Д. Тимаковым, Д. М. Гольдфарбом (1956), Д. М. Гольдфарбом, В. Н. Кузнецовой (1961), Ф. И. Ершовым (1959) была доказана возможность применение РНФ для обнаружения дизентерийных бактерий в испражнениях людей. РНФ позволяла определять в искусственно зараженных испражнениях людей дизентерийные бактерии в концентрации 150 000 м.к./г фекалий. Проведенное параллельно бактериологическое исследование давало отрицательные результаты.

В.Я. Ганюшкин (1967), сообщает об исследовании фекалий от 6 поросят, зараженных внутривенно сальмонеллами, что положительная РНФ была через 26 дней у 100%.

Сведений о применении РНФ для обнаружения бактерий рода Proteus в объектах внешней среды мы не встречали. Поэтому необходимо было изучить возможность использования РНФ для обнаружения данных микроорганизмов в объектах ветеринарного ндзора. Для этого мы провели исследования по выяснению возможности использования РНФ для обнаружения бактерий рода.

Proteus в патологическом материале, объектах внешней среды и пищевом сырье. Прежде всего, мы провели опыты с фекалиями, содержащую постороннюю микрофлору, контаминировали различным количеством бактерий рода Proteusот 101 до 105 м.к./г. На основании полученных данных при исследовании фекалий, РНФ оказалась эффективнее бактериологического метода исследования. С помощью РНФ выявляли бактерии Proteus в фекалиях в концентрации 10″ м.к./г за 18 часов. На обнаружение бактерий рода Proteus в фекалиях бактериологическим методом требовалась более высокая концентрация протеев, исчисляемая 104 м.к./г и выше. Время же исследования увеличивалось до 96 часов. При исследовании мяса, содержащего постороннюю микрофлору в количестве от 101 до 105 м.к./мл, нами было обнаружено явное преимущество РНФ перед бактериологическим методом исследования. С помощью РНФ менее чем за 24 часа з исследования можно обнаружить протеев в мясе в количестве 10 м.к./г.

В результате проведенных исследований были выполнены все поставленные задачи, предложен диагностический препарат, состоящий из 2 фагов: П-261 УГСХА и П-16 УГСХА, разработаны технологические параметры для изготовления лабораторной серии бактериофагов. Доказана возможность применения РНФ с целью обнаружения бактерий рода Proteus в объектах ветеринарного надзора, позволяющая сократить время исследования, уменьшить расход питательных сред и лабораторной посуды, увеличить эффективность обнаружения бактерий рода Proteus.

Показать весь текст

Список литературы

  1. М.А. Сравнительное изучение реакции нарастания титра фага и бактериологического метода при диагностике брюшного тифа у больных и реконвалесцентов // ЖМЭИ. 1960. — № 1. — С. 23−27.
  2. В.В. О понятии «Серологический тип бактериофагов»// В кн.: XIII Всесоюзный съезд гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов. Т.2. Л., 1959. — С. 537−540.
  3. В.В. О применении бактериофагов в диагностике сальмонелле-зов // ЖЭМИ. 1954. — № 7. — С. 93−96.
  4. М. Бактериофаги. М., 1961. — С. 26−121.
  5. Л.И. Бактериофаги, активные по отношению к энтеропато-генным кишечным палочкам // Вопросы микробиологической диагностики и бактериофагии. М., 1962. — С. 184−194.
  6. Л.И., Гуторова В. Д., Ключарева Г. Г. Современное состояние проблемы теории бактериофага и его практическое применение // Тезисы докладов юбилейной научной сессии Ленинградского сан.- гиг. мед. ун-та.-Л., 1958.-С.34.
  7. P.P. Изменение наследственности бактерий путем фаговой конверсии // В кн. Микробиология. Т.З. (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР). М., 1974. — С. 191−233.
  8. Аль-Санори Тарек Мохаммад Микробные ассоциации при трихомонад-ных уретритах // Мшробюл. ж. 1996. — № 2. — С.64−69.
  9. А.Ф., Гортинская В. В., Кузнецова А. П., Логинова Л. Л., Смирнова Е. А. Применение реакции нарастания титра фага в очагах брюшного тифа // Тр. Горьковского гос. мед. ин-та им. С. М. Кирова. Горький, 1964. -T.XYIII. — С. 10−12.
  10. A.M.- Клюшин Н.М.- Розова JI.B. Протей и его чувствительность к антибиотикам у больных хроническим остеомиелитом // Соврем. пробл. мед. и биол. Курган, 1997. — С.213−214.
  11. В.Г., Ахметов 3.3., Ясенский А. В. Применение реакции нарастания титра фага для диагностики хронической дизентерии // Здравоохранение Таджикистана. 1961. — № 2. — С. 5−11.
  12. И.И., Степанов Б. А. Фаготипирование патогенных стафилококков, выделенных из молока коров // Ветеринария. 1966. — № 3. -С. 27.
  13. И.П., Васильев Н. И., Амбросов В. А. Быстрые методы обработки и планирование эксперимента. М.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1974. -76 с.
  14. В.В. Биологическая характеристика умеренных бактериофагов Е. coli 0124: В17 // Проблемы бактериофагии и биологии кишечных бактерий: Сб. кафедры микробиологии 1 Лен. Мед. ин-та им. акад. И. П. Павлова,-Л, 1973.-С.53.
  15. В.А. Тесты патогенности и фаготипы стафилококков, выделенных при мастите коров: Автореф. дис.. канд. биол. наук. М., 1970. -19с.
  16. И.А., Смирнов A.M., Васильев Д. А. Токсикоинфекции и токсикозы. Вопросы профилактики. Ульяновск, 2003. — С.26−28.
  17. B.C., Неломинская Т. Д. Двуслойная питательная среда дляидентификации энтеробактерий: А.с. 1 631 090, МКИ С 12 Q 1/ 04, С 12 1/20: Автореф. дис.. канд. биол. наук. -М., 1991. -20с.
  18. Г. А. Индикация дизентерийных бактерий на поверхности методом реакции нарастания титра фага // Военно-мед. журн. — 1961. —4.-С. 39−42.
  19. Н. Статистические методы в биологии. М.:Изд-во иностр. лит., 1962.- 135с.
  20. Ю.Б., Комарова В. П., Ефременкова О. В. Выбор антибактериальной терапии при лечении инфекций у лиц пожилого возраста П Антибиотики и химиотерапия. 1998. — № 10. — С. 19−23.
  21. И.Л., Соколова К. Я., Левалова Г. Ф. Новое в классификации энтеробактерий // ЖМЭИ. 1992. — № 1. — С.49−52.
  22. С.В., Каврук Л. С. Эпизоотология, эпидемиология, средства диагностики, терапии и специфической профилактики инфекционных болезней, общих для человека и животных // Матер. Всесоюзн. конф. -Львов, 1988. С.343−344.
  23. Л.Ю., Илинская Б. В., Юрова В. А. Эпидемиология госпитальной инфекции в травматологическом стационаре // Тез. докл. 6 Всерос. съезда микробиологов, эпидемиологов и паразитологов. М., 1991. -Т.1.-С.161−162.
  24. З.И. Некоторые свойства чумных фагов // Тр. Армянской противочумной станции. М., 1964. -№ 3. — С. 171−175.
  25. Т.С. О диагностическом значении реакции нарастания титра фага при дизентерии //ЖМЭИ. 1971. -№ 1.-С. 136−138.
  26. Р. Генетика бактериофага // В кн.: Онтогенез вирусов. -М., 1956.-С. 141.
  27. А.А. Применение метода реакции нарастания титра фага при эпидемиологическом и санитарном обследовании // Кишечные инфекции: Тез.докл. на межинстит.конф. -М., 1961. С. 127−128.
  28. З.Г., Ишкильдан Б. И. Морфологические свойства и адгезивность бактерий рода Proteus IIЖМЭИ 1989. — № 6. — С.83−86.
  29. И.М. Биологические свойства бактериофагов Serratia marcences //ЖМЭИ. 1992. -№ 6. — С. 10−12.
  30. И.М. Лизогения. Минск, 1970. — С.68−89.
  31. И.М. Общая характеристика бактериофагов // Основы бактериофагии. Минск, 1973. — С.5. — 24.
  32. В.Я. Бактериофаги Salmonella choleraesuis, сравнительная характеристика и практическое применение: Автореф. дис.. докт. вет. наук. М., 1984. — С.13−34.
  33. В .Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии. Ульяновск. — 1988. — С.45.
  34. В.Я. Обследование свиней на носительство сальмонелл и фагопрофилактика // Вопросы ветеринарной микробиологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы. Ульяновск, 1990. — С.20−28.
  35. В.Я. Реакция нарастания титра фага при диагностике паратифа поросят//Ветеринария. 1967. -№ 3. — С. 69−71.
  36. Д.М. Бактериофагия. М.: Медгиз, 1961. — С. 6−184.
  37. Д.М., Кузнецова В. Н. Опыт применения реакции нарастания титра фага для диагностики дизентерии // ЖМЭИ. 1957. — № 8. — С.90.94.
  38. Д.М., Островская З. С. Индикация брюшнотифозной палочки в воде с помощью реакции нарастания титра фага // ЖМЭИ. 1957. -№ 5. — С.17.
  39. Р.В. Фаготипирование паратифозных В бактерий и действие на них бактериофагов: Автореф. дис.. докт. вет. наук. М., 1954. — С.24−27.
  40. Л.Д. Фаготипирование бреславской палочки // ЖМЭИ. 1958. -№ 12.-С. 53−55.
  41. Г. П., Назарметова Н. Р., Хусаинова Н. Ш. Микрофлора ожоговой раны и ее чувствительность к антибиотикам // Кратк. тез. докл. 1 съезда мол. ученых у медиков и врачей Узбекистана. Андижан, 1991. -С.160.
  42. Т.А., Зарицкий A.M. Фаготипирование S.typhimurium, выделенных в Киеве в 1966—1970 гг. // В кн.: Кишечные инфекции. Киев, 1972.-С.41.
  43. Ю.А. Реакция нарастания титра фага и ее применение для диагностики брюшного тифа и выявление бактерионосителей // Тез. докл. ин-та эпидемиол. и гигиены. Душанбе, 1960. — С. 12.
  44. И.В., Мосолова О. Н., Денисенко Л. К. Методика быстрого обнаружения чумного микроба при помощи бактериофага. Иркутск, 1957. — С.44−51.
  45. Ф.И. Индикация дизентерийных бактерий с помощью РНФ// В кн.: Изменчивость микроорганизмов и иммунитет. М ., 1959. — С. 188.
  46. Грузия. Тбилиси, 2005. — С.22.
  47. Т.Ч. Бактериофаги Yersinia enterocolitica: Автореф. дис.. канд. биол. наук. Минск, 1985. — 20с.
  48. Э.В., Ризаева А. А., Чарыева JI.K., Капитонова Ю. А., Бердыева М. Б. Частота и этиологическая структура внутрибольничных бактериальных кишечных инфекций в детском инфекционном стацинаре // ЖМЭИ. 1992. — № 5−6. — С.72.
  49. С.Н. Бактериофаги M.morganii и их применение при желудочно-кишечных заболеваниях поросят // Автореф. дис.. канд. вет. наук. М, 1994.-20с.
  50. С.Н. Малоизученные энтеробактерии и их роль в патологии животных. Ульяновск, 2004. — С.29−37.
  51. С.Н., Васильев Д. А. Курс лекций по санитарной микробиологии. Ульяновск, 2002. — С.29−147.
  52. С.Н., Каврук JI.C., Васильев Д. А. Смешанная кишечная инфекция телят и поросят, вызываемая патогенными энтеробактериями. -Ульяновск, 2005. С.20−25.
  53. Л.Ф. Лабораторная диагностика пневмоний // Ветеринария Поволжья. 2003. — № 2. — С. 19−21.
  54. Н. Частота выделения бактерий из мочи и мокроты в госпитале Керицу и чувствительность выделенных штаммов к антибиоткам // Ика-гаку кэнса. Jap. J. Med. Technol. 1991. — № 9. — С. 81 -84.
  55. А.Ю., Петрова З. С., Голубева Е. Е., Четверкина Р. С. Приме-не-ние РНФ для индикации дизентерийных бактерий флекснера в организме зараженных кроликов // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1958. — № 6. -С. 78.
  56. Каврук J1.C. Роль Morganella morganii в этиологии инфекционной диареи молодняка// Ветеринария. 1986. -№ 3. — С.56−58.
  57. Каврук J1.C. Тесты, критерии и методы ускоренной санитарно-бактериологической оценки репродуктивных помещениий животноводческих ферм и пути оптимизации в них микробиоциноза: Автореф. дисс.. докт. вет. наук. -М., 1994. С.24−26.
  58. П.И. Значение РНФ при распознавании сальмонеллеза // ЖМЭИ. 1963. — № 6. — С. 35.
  59. П.И. Клиническая оценка РНФ как метода лабораторной диагностики острой дизентерии // ЖМЭИ. 1963. — № 4. — С. 29.
  60. Н.А., Бакулов И. А. Идентификация возбудителя листериоза с помощью бактериофага // Симпозиум «Профилактика и меры борьбы с лептоспирозом и листериозом с/х животных». Новочеркасск, 1972. -С. 76−78.
  61. Т.К. Применение брюшнотифозного фага Vi-I в РНФ // ЖМЭИ. 1963.-№ 3,-С. 126−127.
  62. Кац-Чернохвостова Л. Я. Проблема фаготипирования брюшнотифозных и паратифозных микробов и ее эпидемиологическое значение // ЖМЭИ. 1947. -№ 8.-С. 312−315.
  63. Т.И., Стасилевич З. К., Джикидзе Э. К., Крылова Р. И. Условно-патогенные энтеробактерии у здоровых и больных острыми кишечными инфекциями обезьян // Bait. J. Lab. Anim. Sci. 1998. — № 3. — С. 177 -182.
  64. В.А. Идентификация сальмонеллёзных культур с помощью 0-бактериофага // Тез. докл. конф. Таллин, научн.- иссл. ин-та эпидемиол., микробиол. и гигиены. Таллин, 1960. — С.5.
  65. В.П., Пархоменко JI.B. Особенности инициального звена при поражении кишок условно-патогенными бактериями Proteus mirabilis II Микробиологический журнал. 1991. — № 6. — С.78−82.
  66. О.А. Применение метода РНФ для контроля качества дезинфекции в очагах кишечных инфекций // ЖМЭИ. 1961. — № 2. — С. 3640.
  67. Т.И., Бакулов И. А., Котляров В. М. Перспективы практического применения листериозных бактериофагов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Материалы научной конференции ВНИИВиМ. Покров, 1992. — Ч. 11. — С.211−212.
  68. Т.И., Бакулов И. А., Котляров В. М. Фаготипирование листе-рий // Ветеринария. 1990. — № 6. — С.31−32.
  69. Коритняк Б.М.. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Yersinia enterocolitica и их применение в диагностике // Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 2005. — 20с.
  70. Г. В. РНФ при индикации дизентерийных бактерий в воде в сопоставлении с бактериологическим методом // Материалы 16 межоб-ластн.научн.-практ.конф.лабор.работников в Зап. Сибири в г. Томске. -1960.-С. 20−21.
  71. Г. А., Гицевич М. А., Бояршинова К. П. Применение реакции нарастания титра фага для исследования объектов внешней среды // ЖМЭИ. -1961.-№ 7.-С. 124.
  72. А.С. Вирусы против микробов М., 1962. — С.23−29.
  73. М.Д. Перспективы и возможности метода фаготапирования бактерий // Материалы юбилейного симпозиума, посвящен. 50-летию Тбилисского НИИВС. Тбилиси, 1974. — С. 276−280.
  74. М.Д. Применение бактериофагов для типирования бактерий //
  75. В кн.: Гольдфарб Д. М. Бактериофагия. М., 1961. — С. 220.
  76. М.Д. Схема фаготипирования нетоксигенных дифтерийных бактерий типа gravis IIЖМЭИ. 1970. — № 12. — С. 16−22.
  77. М.Д. Фаготипы бактерий. М., 1963. — С.76.
  78. В.И., Сененко В. И., Бахарева Л. П. Этиологическая структура острых кишечных инфекций, вызванных условно-патогенными микро-ортанизмами (Иркутск, 1984−1988 гг.) // Лаб. дело. 1991. — № 4. — С.62−63.
  79. В.Н., Хазанов М. И., Ремова Т. Н. Применение реакции нарастания титра фага для индикации дизентерийных бактерий в условиях внешней среды // ЖМЭИ. 1960. — № 6. — С. 59.
  80. В.И. Опыт применения РНФ в эпидемиологической практике // ЖМЭИ. 1963. — № 12. — С. 29.
  81. В.И. РНФ как ранний метод индикации дизентерии в детских учреждениях // Тр. науч. конф. аспирантов и ординаторов I Моск. мед. ин-та. М. Д 964. — С. 105−107.
  82. Н.Л., Ермилова В. П. О диапазоне и специфичности действия чумных фагов 1701, 1710 и их мутантов // В кн.: Проблемы особо опасных инфекций.-М., 1974,-С. 38−41.
  83. Л.А., Закопаева Е. С. Клинико микробиологический мониторинг за новорожденными детьми группы риска по кишечным инфекциям // Госпит. инфекции и лекарств, устойчивость микроорганизмов/ ЦНИИ эпидемиол. — М., 1992. — С.68−71.
  84. Н.В. Метод диагностики паратифа свиней при помощи бактериофага // Ветеринария. 1948. — № 7.- - С. 32.
  85. С., Дарнелл Д. Общая вирусология М., «Мир», 1970. — С.36−47.
  86. Н.Д., Розина-Япкина Ц.С. РНФ при диагностике дизентерии// ЖМЭИ.- 1963.-№ 1.-С. 113−115.
  87. С.М. РНФ в диагностике брюшного тифа // Тез. докл. на меж-инстит. конф. по проблеме «Кишечные инфекции». М., 1961. — С. 146 147.
  88. Мац Л. И. Вопросы санитарной бактериологии и вирусологии. М.: Медицина, 1965. — С.44−59.
  89. Г., Велев X., Петков Р. Некоторые аспекты роли бактериу-рий при хроническом пиелонефрите // Военн. мед. 1991. — № 1. — С.29−32.
  90. Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции животных, утвержденные Департаментом ветеринарии Министерства селького хозяйства и Продовольствия РФ. -М., 1999.-19с.
  91. Е.Н. Определение зараженности предметов бытовой обстановки дизентерийными микробами с помощью реакции нарастания титра бактериофага // ЖМЭИ. 1958. — № 12. — С. 34.
  92. В.А. Некоторые аспекты патогенеза диареи новорожденных телят // Ветеринария. 1999. — № 9. — С.20−23.
  93. С.Т. Энтеротоксигенность условно-патогенных энтеробак-терий при острых кишечных заболеваниях у детей // ЖМЭИ. 1983. -№ 6. — С.53−55.
  94. Н.И. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Escherichia coli 0157 и их применение в диагностике: Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 2004. — 20с.
  95. И.С. Особенности этиологии острых кишечных заболеваний (ОКИ) у детей в г. Душамбе // Актуал. пробл. химиотерапии бак-териал инфекций: Тез. докл. Всес. конф., 22−24 окт. 1991. М., 1991. -Ч.З.-С. 450−451.
  96. Н.М. Фаготипирование Styphimurium, выделенных на различных территориях СССР // ЖМЭИ. 1970. -№ 1. — С. 53.
  97. С.Н. Фаготипирование стафилококков, выделенных от больных гнойными инфекциями // Материалы 10 научн. Сесс. Алма-Атин. гос. мед: ин-та. Алма-Ата, 1978. — С. 55−57.
  98. С.А., Коростелева М. А., Кострицкий Н. Г. Опыт применения РНФ в лабораторной диагностике кишечных инфекций // Кишечные инфекции, главным образом, дизентерия: Материалы итоговой научно-практической конф. Киев, 1962. — С. 20−21.
  99. Определитель бактерий Берджи // Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса. М.- Мир, 1997. — Том 1. — С.221−222.
  100. З.С. Диагностика брюшного тифа у больных с помощью РНФ // Аннотация научной работы АМН СССР. 1956. — С. 57−59.
  101. З.С., Папкова Б. Н. Ускоренный метод диагностики брюшного тифа Vi-фага // ЖМЭИ. 1951. — № 2. — С. 37−40.
  102. Н.Н., Гольдфарб Д. М. К использованию метода нарастания титра фага для выявления бруцелл во внешней среде // ЖМЭИ. -1961,-№ 5.-С. 145.
  103. Павлова И. П. Изучение морфологии и биологических свойств фагов
  104. Вас. anthracis и Вас. cereus // ЖМЭИ. 1971. — № 7. — С. 147.
  105. Е.Т., Парайко И. Н. Серологические варианты и группы протея у поросят при желудочно-кишечных болезнях // Биопрепараты, методы их стандартиз. и контроля: Всерос. гос. науч.- контр, ин-т вет. препаратов. М., 1990. — С. 157−160.
  106. Ф.Н. Изучение специфичности и чувствительности РНТФ при индикации дизентерийных бактерий в воде// ЖМЭИ. 1962. -№ 1. — С.29−31.
  107. В.И. Энтеробактерии. М.: Медицина, 1985. — С.400−404.
  108. В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология. М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. — С.401−404.
  109. .Я. Изучение реакции нарастания титра фага в условиях практической лаборатории // ЖМЭИ. 1960. — № 6. — С. 135.
  110. Е.Н. Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Enterobacter, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения: Авто-реф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 2006. — С.4−19.
  111. М.З. Использование бруцеллезного фага для дифференциации бруцелл // ЖМЭИ. 1968. — № 2. — С. 119−124.
  112. Л.П. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Citrobacter и их применение в диагностике: Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 2004. 21с.
  113. И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. Киев: Урожай, 1978. — С. 41−88.
  114. И.П. К диагностике рожи свиней // Ветеринария. 1970. -№ 6.-С. 13.
  115. И.А., Нефедова Н. В., Митасева Л. Ф., Татарников И. В., Глаз-кова И.В. Микробиология мяса, обработанного высоким гидростатическим давлением // Мяс. индустрия. 1996. — № 4. — С. 13−15.
  116. JT.B., Аранович A.M., Клюшин Н. М. Протеус-инфекция у больных хроническим остеомиелитом // Гений ортопедии. 1997. — № 2. — С.73−74.
  117. .К., Казакова С. Ф. Применение метода нарастания титра фага для исследования объектов внешней среды // ЖМЭИ. 1959. -№ 6.-С. 110−112.
  118. В.М. Фагочувствительность консервированных культур Bacillus anthracis 11 Ветеринария. 1990. — № 9. — C.39.
  119. B.C. Фагочувствительность аэробных спорообразующих бактерий // Ветеринария. 1990. — № 8. — С.29−30.
  120. Ф.Е. Новый метод бактерюлопчно д1агностики за допо-могою бактерюфага // Мкробюл. журн. АН УССР. 1936. — № 1. — С. 85−112.
  121. Е.П., Герасименко Л. М., Копейка А. А. Питательная среда Proteus PPM для одноэтапного выделения и идентификации бактерий Proteus, Providencia, Morganella 11 Клин. лаб. диагност. — 1992. -№ 9−10. — С.59−61.
  122. М.А., Скородумов Д. И., Федотов В. Б. Определитель зоо-патогенных микроорганизмов. М.: Колос, 1995. — С. 197−199.
  123. Н.В. Сравнительное изучение РНФ для выявления носительства дизентерийных бактерий: Автореф. дис.. канд. мед. наук. Симферополь, 1964. — С.6−20.
  124. В.Д., Гольдфарб Д. М. Об условиях взаимодействия фага и бактериальной клетки // Вестник АМН СССР. 1958. — № 2. — С. 37.
  125. В.Д., Гольдфарб Д. М. Реакция нарастания титра фага (РНФ)-М, 1962.-С. 65−71.
  126. В.Д., Гольдфарб Д. М. Экспериментальное обоснование нового принципа обнаружения дизентерийных и брюшнотифозных бактерий с помощью фага // ЖМЭИ. 1956. — № 10. — С. 3−7.
  127. А.С. Ультраструктура вирусов бактерий. М.: Наука, 1968.-С. 89.
  128. В.Ю. Статистический анализ в биологических исследованиях. М.: Медицина, 1975. — 259с.
  129. В.И., Руссу Г. И., Семенюк С. С., Кристиан Д. А., Сербушка Л. И., Урсаки Л. П. Острые кишечные инфекции у детей, вызванные ус-ловно-патогеными энтеробактериями // Актуал. вопр. клин и теор. мед. Кишин. гос. мед. ин- т. Кишинев, 1991. — С.94−97.
  130. У. Генетика бактерий и бактериофагов. М.: «Мир», 1965. -С.288−294.
  131. С.Б., Ариэль Б. М. Пневмонии у детей с трисономией // 7 Нац. конгр. по болезням органов дыхания. М., 1997. — С.294.
  132. К.И. Применение специфического фактериофага для диагностики паратифозного аборта кобыл // Ветеринария. 1941. — № 6.1. С. 4−6.
  133. Т.Г. К механизму образования фагоустойчивых форм микроорганизмов // В кн.: Вопросы молекулярной генетики микроорганизмов. -М., 1968. С. 225.
  134. Л.Г., Чанишвили Т. Г. Типирование S.typhimurium при помощи селекционированных фагов // ЖМЭИ. 1974. — № 3. — С. 7278.
  135. И.В. Изучение РНФ как метода индикации бактерий дизентерии во внешней среде // Тез. докл. и выступл. на 5 Всес. научн. конф. по санитарн. микробиол. М., 1962. — С. 89−93.
  136. И.Г. Сравнительное изучение биологических свойств чувствительности и устойчивости к антибиотикам Proteus II ЖМЭИ. -1986. -№ 10. С.18−20.
  137. М.К. Некоторые свойства листериозного бактериофага //
  138. ЖМЭИ. 1962. — № 1. — С. 99−102.
  139. Энтеробактерии // Под ред. Голубевой И. В., Килессо В. А., Киселевой Б. С. с соавт.-М.Д 985. С. 57−87.
  140. Adeniyi К.О., Ocholi R.A., Enurah L.U., Chima J.C., Ekhonu M.C. Notes on causes of nortality at the tos Zoo, Nigeria from 1977−1987 // Himalayan J. Environ and Zool. 1991. — № 1. — P. 1−4.
  141. Avril I.L., Mesnard R., Roche G., Pouedras P. Place et sensibilite aux antibiotiques des Enterobacteriaceae Responsables d’infections urinaires // Sem. hop. Paris. 1993.-№ 4.-P. 81−86 .
  142. Canderton L., Chawla J.C., Wimpenny J., Winters C., Stickler D.J. A scannino electron microscope study of biofilm on bladder cathefers // Sth Eur. Condr. Clin. Microbiol, and Infect. Diseases. Olso, Sept. 9−11. Olso, 1991.-P. 170.
  143. Coetzee J.N. Bacteriocinony in strains of. Providencia and Proteus mor-ganii // Nature. 1967. — V.213. — P. 614−616.
  144. Delia S., Fiumara M.A., Lagana P., Iannuzzi L., Lo Schiavo A., Minniti A., Panebianco A. Ricerca di Yersinia enterocolitica in carni fresche ed insaccate // Ann. ig.: Med prev comunita. 1989. — № 6. — P.1459−1464.
  145. Deutrich Ven V., Pioch Gudrun. Infektionsrisiko fur Mensch und Tier durch langjahrig gelagerte Rindergulle // Monatsh. Veterinarmed. 1991. -№ 18.-P. 651−655.
  146. Edwards P.R., Ewing W.H. Identification of Enterobacterjaceae. Burgess publ. Co. Minneapolis, 1972. — P. 223−227.
  147. Engler Howard D" Troy Kevin, Bottone Edward J. Bacteremia and subcutaneous abscess caused by Proteus penneri in a neutropenic host // J. Clin. Microbiol. 1990. — № 7. — P. 1645−1646.
  148. Gomez A., Baguero F., Nombela C. El genero Proteus Aspectos pato-genicos у epidemiolodicos // Enferm. in fece. у microbiol. Clin. 1991. -№ 8.-P. 498−505.
  149. Guibert Jacgueline. I infection urinaire sur sonde a demeure // Tempo med.- 1991.-№ 433.-P. 29−30.
  150. Hoffmann Nannette, Jenkins Robert, Putney Karen. Nosocomial infection rates during a one-year period in a nursing home care unit of a Veterans administration hospital // Amer. J. Infec. Contr. 1990. — № 2. — P.55−63.
  151. Hussain Naqvi Zafar, Ansari Fasihuddin Ahmed, Khatoon Hajra. Multiple anitbiotic resistance amond gram negative bacteria isolated from fresh water fish Labeo rohita // Pakistan J. Zool. 1990. — № 2. — P. 141−147.
  152. Ishii Yukilco, Suzuki Yumiko, Ishihara Rika, Nakazawa Arisa, Deguchi Koichi. Антимикробная активность цефетамета против бактерий, выделенных из инфицированного мочевого тракта // Jap. J. Antibiot. 1996. -№ 12.-P. 25−36
  153. Kauffmann F. On the classificacion and njmenclature of family Entero-bacteriaceae // Intern. Bull. bact. Nomencl. a. Taxonom. 1959. — V.9. — P. 1−8.
  154. Kauffmann F. On the claccificion and nomenclature of family Entero-bacteriaceae // Internat. Bull. bact.Nomencl. a. Taxonom. 1963. — V.13. -P.187−193.
  155. Katzheson H. Sutton M.D. Rapid phage plague count method for the detection of bacteria as applied to the demonsration of internalug borne bacterial infections of seed // J. Bact. 1951. — № 1. — P. 689.
  156. Ketti I. A study of Escherichia coli from farm animals during // Acta. Microbiol. Acad. Sci. Hung. 1981. — V.28.-P. 393−398.
  157. Lamikanra A., Fayinka Susan Т., Olusanya O.O. Transfer of lomw level trimethoprim resistance jn faecal isolates obtained from apparently healthy Nigerian students // FEMS Microbiol. Lett. 1989. — № 3. — P. 275−278.
  158. Lautrop H. Genus X. Proteus hauser, 1885 // Bergey, s manual of deter-minantive bacteriology. 8 Ed. Baltimore, 1974. — P. 327−330.
  159. Levintal C., Fisher A. Structural developmet of a bacteriae virus // Bio-chim. Biophys. Acta. 1952. — № 4. — V.9. — P. 419.
  160. Lindberg R.B., Latta R.L. Phage tuping of Ps. aeruginosa chinical and epidemiologi considerations // J. Infect. Diseases. 1974. — № 5. — V.130. -P. 32−34.
  161. Lukomski Stawomir, Muller Bodo, Schmidt Gunter. Extracellular haemolysin of proteus penneri coded by chromosomal hly genes is sjmjlar to the a-haemolysin of Escherichia coli // Zbl. Bateriol. 1990. — № 2. — C. 150−155.
  162. Marti Masias J., Conesa M.D., Cervantes M. Infecciones urinarias en adultos de edad avanzada // Rev. esp. geriatr у gerontol. 1992. — № 3. — C. 160−163.
  163. Mazyrova J., Vinter P. Ucin nost vybranych antibiotik na mikroorgan-ismy kontaminujici ejakulaty kancu // Vet. med. 1991. — № 4. — P. 213−223.
  164. McHenry Martin C., Rehm Susan J., Krajewski Leonard P., Duchesneau Paul M., Levin Howard S., Steinmuller Donald R. Vertebral osteomyelitis and aortic lesions: case report and review // Rev. Infec. Diseases. 1991. -№ 6. -P. 1184−1194.
  165. Mercier P., Rideaud Patricia. Bacteriologie du sperme frais de larin: Etude preliminaire // Prod. anim. 1990. — № 3. — P. 215−221.
  166. Murphy F.A., Fauguet C.M., Bishop D.H.L., Ghabrial S.A., Jarvis A.M., Martelli G.P., Mayo M.A., Summers M.D. Virus Taxonomi. Classification and Nomenclature of Viruses. Wien: Springer Verlag, 1995. — 586 p.
  167. Navarro Ferran, Fuentes Irene, Izquierdo Conchita, Sanchez Ferrari, Prats Guillermo. Evaluacion del medio cromogenico CPS ID2{R} (bioMerieux) en urinocultivos // Enferm. infecc. у microbiol. Clin. 1996. -№ 4.-P. 215−216.
  168. Old D.C., Adegbola R.A. Hemagglutinins and Fibrial of Morganella, Proteus andProvidencia // J. Med. Macrobiol. 1982. — № 4. — V.15. — P. 551−564.
  169. Panda P.C., Sharma D.P. Bacterial contamination and spoilage of duck eggs // Haryana Agr. Univ. J. Res. 1996. — P. 83−86.
  170. Papapetropoulou M., Pagonopoulou 0., Kouskouni E. Prevalence and sensitivity to antibiotics of Enterobacteriaceae isolated from urinary cultures in some microbiology laboratories of a city in West Greece // Pathol. Biol.1997.-№ 9.-P. 716 720.
  171. Quentin R., Pierre F., Dubois M., Soutoul J.H., Goudeau A. Frequent isolation of capnophilic bacteria in aspirate from Bartholin s gland abscesse and cysts // Eur. J. Clin. Microbiol, and Infec. Diseoses. 1990. — № 23. — P. 138−141.
  172. Ramos C., Cruz M., Frada M. Estudio sobre la comunidad bacteriana en albanal domestico у su tratamiento mediante lechos biologicos Volun hidraul. 1991. — № 85. — P. 28−31.
  173. Sechter I.O. Metodika de cercetare a prezentei bacilului tifis in materufacale ajutorole bacterofagului // V. Academje RPSH Filialr Vasi Studii si cercetari Stintifie. Ann. 1962. — № 3−4. — V.4. — P. 99.
  174. Sekaninova G. Proticine typing of proteus mirabilis strains in patients with chronic urinary tract infections // Scr. med. № 5−6. — 1995. — P. 187 194.
  175. Ugochukwu E.I., Anukam K.U. Isolation of enterobacteria from diar-rhoeic West African dwarf goats // Microbios. 1988. — № 224−225. — P. 155−160.
  176. Ugochukw E.I., Agwu C.O. Aerobic bacteria from nasal discharge of goats suffering from clinical PPR: isolation and identification // Microbios. -1991. -№ 263. P. 81−85.
  177. Urbanova E., Manova K., Pacova Z. Bacteria of the tribe proteeae occurrence in raw materials and food, and resistance to antibiotics // Vet. med. -2000,-№ 6.-P. 171−176.
  178. Watts J.R., Wright P.J., Whithear K.C. Uterine, cervical and vaginal microflora of the normal bitch throughout the reproductive cycle // J. Small Anim. Pract. 1996. — № 2. — P. 54−60.
  179. Wawrzyniak Wawrzynies, Grawiski Edward. An attempt diadnosis etiology an pathogenesis of ulcer and necrptic foci of some baltic fishes // Asta ichthyol. et. pise. 1991. — № 1. — P. 43−58.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!