Индикация загрязнения почвы стойкими органическими загрязнителями по функциональной реакции микробного сообщества
Значительная роль в формировании «здоровья почвы» принадлежит микробному сообществу, которое выполняет основную работу по поддержанию биосферных процессов (Виноградский, 1952; Звягинцев, 1987; Заварзин, 2003; Кожевин, 2006). Оно является основным компонентом почвенной биоты и выполняют многообразные функции в круговороте веществ, включая самоочищение от ксенобиотиков и природных поллютантов… Читать ещё >
Содержание
- 1. ВВЕДЕНИЕ
- 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 2. 1. Роль микроорганизмов в функциях почвы
- 2. 2. Основные концепции строения комплекса почвенных микроорганизмов
- 2. 3. Микробные индикаторы экологического состояния почвы
- 2. 4. Стойкие органические загрязнители
- 2. 4. 1. Поли циклические ароматические углеводороды
- 2. 4. 2. Полихлорированные бифенилы
- 5. 1. Применение метода мультиреспирометрического тестирования для функционального описания сообществ почвенных микроорганизмов в градиенте загрязнения СОЗ
- 5. 2. Влияние интродукции изолированного бактериального комплекса на нтенсивность самоочищение почвы от ПАУ
- 5. 2. 1. Биоремедиация дерново-подзолистой почвы, загрязненной креозотом, с помощью адаптированного БК
- 5. 2. 2. Применение микробных биосурфактантов для интенсификации биоремедиационного потенциала адаптированного БК
- 5. 3. Искусственные нейронные сети для мониторинга загрязнения почвы СОЗ
Индикация загрязнения почвы стойкими органическими загрязнителями по функциональной реакции микробного сообщества (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность проблемы. Реализация обществом концепции устойчивого развития — это обеспечение его здоровья, благополучия, продовольственной и экологической безопасности. Концепция предполагает необходимость гармонизации взаимоотношений человека с природой, поддержание здоровья среды и почвы — главного и незаменимого компонента агросферы и земной биосферы. Антропогенная деградация почвенного покрова может привести его в состояние, непригодное для получения биопродукции.
Значительная роль в формировании «здоровья почвы» принадлежит микробному сообществу, которое выполняет основную работу по поддержанию биосферных процессов (Виноградский, 1952; Звягинцев, 1987; Заварзин, 2003; Кожевин, 2006). Оно является основным компонентом почвенной биоты и выполняют многообразные функции в круговороте веществ, включая самоочищение от ксенобиотиков и природных поллютантов. Микробное сообществоважнейший объект агроэкологического мониторинга и объективный экологический индикатор состояния почвенного биоценоза, в том числе отклика на его загрязнение различными поллютантами (Умаров, 1986; Гузев, Левин, 1991; Круглов, 1991; Марфенина, 1994; Добровольская, 2002; Терехова, 2006).
В настоящее время многие почвы загрязнены стойкими органическими загрязнителями (СОЗ). Это органические соединения природного или антропогенного происхождения, которые трудно подвергаются фотолитическому, химическому или биологическому разложению. СОЗ — особо опасные токсиканты (канцерогены, мутагены, разрушители эндокринной системы). Ликвидация опасности, вызванной загрязнением почвы полициклическими ароматическими углеводородами (ПАУ) и полихлорированными бифенилами (ПХБ) является важной и актуальной экологической проблемой современности, обеспечивающей безопасность жизни настоящего и будущих поколений.
В числе фактологических и функциональных критериев состояния почвенного микробного комплекса антропогенно загрязненных почв традиционно используются: микробная биомасса, базальное дыхание, микробный метаболический коэффициент (Полянская, 1996; Ананьева 2003; Горленко, Кожевин, 2005; Благодатский и др., 2008). В последние годы разрабатываются новые подходы, основанные на оценке функционального разнообразия микробных сообществ почвы, индуцированной загрязнителем толерантности (PICT-эффект — pollution induced community tolerance). Данные о применении указанных показателей для оценки экологического состояния почвы, загрязненной { двумя специфическими группами СОЗ — ПАУ и ПХБ, в литературе отсутствуют.
Научная новизна. Для эколого-токсикологической оценки микробных сообществ почвы, загрязненной СОЗ, разработана и применена мультиреспирометрическая тест-система. С использованием разработанной тест-системы установлен PICT-эффект для микробных сообществ почв, загрязненных ПАУ и ПХБ, созданы и обучены искусственные трехслойные нейронные сети для индикации и прогнозирования загрязнения ПАУ и ПХБ в исследованных дерново-подзолистой почвах.
Практическая значимость. На устройство для выполнения метода мультиреспирометрического тестирования (МРТ) получен патент на полезную модель (RU 74 479 U1). Показана эффективность применения тест-системы для MPT и оценки экологического состояния почвы, загрязненной СОЗ. На биосурфактантобразующие штаммы-деструкторы Pseudomonas alcaligenes MEV, Pseudomonas putida BS получены патенты на изобретение RU № 2 228 952, RU 2 292 391. Штаммы-деструкторы депонированы во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИГенетика. Результаты исследований используются в курсе преподавания экологии почвенных микроорганизмов на кафедре биологии почв.
Установлено, что выделенный из загрязненной ПАУ почвы адаптированный бактериальный комплекс (БК) может быть использован для микробной ремедиации как самостоятельно, так и в сочетании с микробными биосурфактантами. Полученные результаты могут быть использованы в интересах агроэкологического мониторинга для экспресс—оценки состояния «почвенного здоровья», при бонитировке почв сельскохозяйственных, селитебных и рекреационных территорий.
Апробация работы. Результаты исследований были представлены на международном симпозиуме «Биохимические взаимодействия микроорганизмов и растений с техногенными загрязнителями окружающей среды» (Саратов, 2003) — IX конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам «Ломоносов» (Москва, 2004), 3-м и 4-м Московских международных конгрессах «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2005, 2007) — 1-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные достижения в почвоведении, экологии, сельском хозяйстве на пути к инновациям" — (Москва, 2008), 10th International conference ConSoil 2008, Italy (Milan, 2008), на заседаниях и научных семинарах кафедры биологии почв факультета почвоведения МГУ.
Выражаю искреннюю благодарность за помощь и постоянную поддержку в работе над диссертацией д.б.н. П. А. Кожевину, а также проф. Д. Г. Звягинцеву, сотрудникам, аспирантам и студентам кафедры биологии почв МГУ им. М. В. Ломоносова.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
7. ВЫВОДЫ.
1. Разработана мультиреспирометрическая тест-система, предназначенная для оценки функционального состояния микробного комплекса почвы и экотоксикологической характеристики степени загрязнения ПАУ и ПХБ дерново-подзолистой почвы.
2. Доказана эффективность метода мультиреспирометрического тестирования (МРТ) для решения задач индикации и мониторинга загрязнения почвы ПАУ и ПХБ, а также определения показателей «почвенного здоровья» (микробной биомассы, базального дыхания, микробного метаболического коэффициента, соотношения Смик/Сорг., функционального разнообразия по Шеннону).
3. Метод МРТ обеспечивает достоверную регистрация PICT-эффекта, что позволяет ранжировать степень загрязнения почвы по значениям эффективных концентраций (ЭК50) загрязняющих вешеств.
4. Показана эффективность применения адаптированного бактериального комплекса (БК) отдельно и совместно с микробными биосурфактантами для биоремедиации загрязненной ПАУ дерново-подзолистой почвы в условиях почвенных микрокосмов. В процессе биоремедиации снижение концентрации ПАУ сопровождалось уменьшением токсичности и фитотоксичности почвы.
5. Создана и обучена искусственная трёхслойная нейронная сеть, которая позволяет прогнозировать содержание ПАУ (сумма 16 ПАУ) в дерново-подзолистой почве в диапазоне 0−2500 мг/кг с точностью 82%. Для мониторинга почвы, загрязненной ПХБ, создана и обучена нейронная сеть, эффективно работающая в диапазоне концентраций О — 500 мг/кг с точностью 68%.
6. Продемонстрирована принципиальная возможность применения концепции PICT для мониторинга, экотоксикологического анализа и оценки эффективности биоремедиации почвы, загрязненной СОЗ.
6.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
.
Почве принадлежит ведущая роль в формировании и функционировании биосферы. Загрязнение окружающей среды ПАУ и ПХБ приводит к дестабилизации природных и агроэкосистем, ведет к нарушению экологических функций и деградации почв. В качестве оценочных критериев состояния природной среды нами выбрана реакция микробного сообщества почвы. Микробные сообщества достаточно чувствительны к антропогенному вмешательству и поэтому вполне могут быть достаточно объективными индикаторами состояния качества почвы.
Разработанным нами МРТ методом оценивали качество «почвенного здоровья» техногенно загрязненной подзолистой и дерново-подзолистой почвы на территории двух районов Подмосковья. Опытные участки содержали стойкие органические загрязнители (СОЗ) — ПАУ (67ч-3248 мг/кг) и ПХБ (32н-500 мг/кг). МРТ методом определяли микробное дыхание почвы и связанные с ним показатели — микробную биомассу, микробный метаболический коэффициент, индексы функционального разнообразия, индуцированную толерантность микробного сообщества и другие параметры.
Установлено, что в качестве критериев оценки здоровья почвы, наряду с традиционными показателями состояния ее микробного сообщества, целесообразно использовать индекс разнообразия Шеннона и показатель индуцированной толерантности в отношении поллютанта (PICT-эффект). Эти экологические индикаторы объективно свидетельствуют о действии СОЗ на функциональное микробное разнообразие почвы и об активности микроорганизмов-деструкторов органических поллютантов. Предложенные критерии могут найти применение в системе агроэкологического мониторинга, разработки оценочных шкал экотоксичности, при бонитировке почв агроугодий, селитебных и рекреационных территорий, а также при выделении микроорганизмов-деструкторов СОЗ с целью получения на их основе микробных препаратов для биоремедиации загрязненных почв.
Список литературы
- АгапкинаГ.И., ЧиковП.А., Шелепчиков А. А., Бродский Е. С., Фешин Д. Б., Буханько Н. Г., Балашова СП. Полициклические ароматические углеводороды в почвах Москвы // Вести. Моск. ун-та. Сер. 17: Почвоведение. 2007. № 3. С. 38−47.
- Ананьева Н.Д., Благодатская Е. В., Орлинский Д. Б., Мякшина Т. Н. Методические аспекты определения скорости субстрат-индуцированного дыхания почвенных микроорганизмов // Почвоведение. 1993. № 11. С. 72−77.
- Ананьева Н.Д., Благодатская Е. В., Демкина Т. С. Пространственное и временное варьирование микробного метаболического коэффициента в почвах//Почвоведение. 2002. N 10. С. 1233−1241.
- Ананьева Н.Д. Микробиологические аспекты самоочищения и устойчивости почв / Н.Д. Ананьева- Отв. ред. Д. Г. Звягинцев. — М.: Наука, 2003.-323 с.
- Ананьева Н. Д., Сусьян Е. А., Чернова О. В., Чернов И. Ю., Макарова О. Л. Соотношение грибов и бактерий в биомассе разных типов почв, определяемое селективным ингибированием// Микробиология. 2006. № 6. С. 807−813
- Аристовская Т.В. О роли микроорганизмов в подзолообразовании // Микробиология подзолистых почв, М.-Л.: «Наука», 1965. 186 с.
- Афанасьев М.И., Вулых Н. К., Загрязина А. Н. Фоновое содержание хлорорганических пестицидов и полихлорированных пестицидов природных средах (по мировым данным) // Мониторинг фонового загрязнения природных сред. Л.: Гидрометеоиздат, 1982. Вып. 5. С.31−59.
- Благодатская Е.В., Ананьева Н. Д., Мякшина Т. Н. Ха рактеристика состояния микробного сообщества почв по величине метаболического коэффициента//Почвоведение. 1995. № 2. С. 205−210.
- Благодатская Е.В., Богомолова И. Н., Благодатский С. А. Изменение экологической стратегии микробного сообщества почвы, инициированное внесением глюкозы//Почвоведение. 2001. № 5. С. 600−608
- Благодатский С.А., Богомолова И. Н., Благодатская Е. В. Микробная биомасса и кинетика роста микроорганизмов в черноземах при различном сельскохозяйственном использовании // Микробиология. 2008. том 77. № 1. С. 99−106.
- Боровиков В. П. Нейронные сети. STATISTICA Neural Networks: Методология и технологии современного анализа данных М.: «Горячая линия-Телеком», 2008.- 392 с.
- Былинктна В.Н. Микроорганизмы, минерализующие гумусовые вещества почв. // В кн.: В кн.: Труды ВНИИ с.х. микробиологии за 1941−1945 гг, вып. 1.М., 1949с. 59−69.
- Васильева Г. К., Стрижакова Е. Р. Биоремедиация почв и седиментов, загрязненных полихлорированными бифенилами // Микробиология. 2007. т. 76, № 6, С. 725−741.
- Виноградский С.Н. Микробиология почвы.// М.: Изд-во АН СССР, 1952.-792 с.
- Воробьева JI. А. Теория и практика химического анализа почв // Москва: ГЕОС, 2006. 400 с.
- Галиулин Р. В., Галиулина Р. А. Эколого-геохимическая оценка «отпечатков» стойких хлорорганических пестицидов в системе почва-поверхностная вода// Агрохимия. 2008. № 1. С. 52−56.
- Геннадиев А.Н., Шуру бор Е.И., Козин И. С. Биогенные и техногенные полициклические ароматические углеводороды в почвах охраняемых территорий дельты Волги. // Биологические науки. 1992. № 1.С. 133−143.
- Геннадиев А.Н., Пиковский Ю. М., Флоровская В. Н., Алексеева Т. А., Козин И. С., Оглоблина А. И., Раменская М. Е., Теплицкая Т. А., Шурубор Е. И. Геохимия полициклических ароматических углеводородов в горных породах и почвах., М.: Изд-во МГУ, 1996. -196 с.
- Геннадиев А.Н., Козин И. С., Пиковский Ю. М. Педохимия полициклических ароматических углеводородов // Почвоведение. 1997.№ 3. С. 290−300.
- Глазовская М.А. Проблемы и методы оценки эколого-геохимической устойчивости почв и почвенного покрова к техногенным воздействиям//Почвоведение. 1999. № I.e. 114−124.
- Голлербах М.М., Штина Э. А. Почвенные водоросли. // Л.: «Наука», 1969. -288с.
- Горленко М.В., Кожевин П. А. Дифференциация почвенных микробных сообществ с помощью мультисубстратного тестирования // Микробиология. 1994. том 63. № 2. с. 289−293.
- Горленко М.В., Кожевин П. А. Мультисубстратное тестирование природных микробных сообществ Москва: МАКС Пресс, 2005. — 88 с
- Гузев B.C., Левин С. В. Перспективы эколого-микробиологической экспертизы состояния почв при антропогенных воздействиях // Почвоведение. 1991. № 1. С. 134−139.
- Добровольская Т.Г. Структура бактериальных сообществ почв. М.: ИКЦ «Академкнига», 2002. — 282 с.
- Добровольский Г. В., Никитин Е. Д. Функции почв в биосфере и экосистемах. М.: Наука, 1990. 251 с.
- Добровольский Г. В., Никитин Е. Д. Сохранение почв как незаменимого компонента биосферы: Функционально-экологический подход. М.: Наука, 2000. 185 с.
- Заварзин Г. А. К понятию микрофлоры рассеяния в круговороте углерода // Журнал общей биологии. 1970. т.31. № 4. С. 386−393.
- Заварзин Г. А. Экстенсивная микробиология // Известия AIT СССР, серия биологическая. 1976. № 1. С. 121−134.
- Заварзин Г. А., Колотилова Н. А. Введение в природоведческую микробиологию: Учебное пособие. — М.: Книжный дом «Университет», 2001. — 256 с.
- Заварзин Г. А. Лекции по природоведческой микробиологии / Г. А. Заварзин- Отв.ред. Н.Н.Колотилова- Ин-т микробиологии. М.: Наука, 2003. — 348 с.
- Заварзин Г. А. Лекции по природоведческой микробиологии. -М. :Наука, 2004.-348с.
- Заварзин Г. А., Кудеяров В. Н. Почва как главный источник углекислоты и резервуар органического углерода на территории России // Вестник Российской Академии Наук. 2006. Т. 76. №. 1. С. 14−29.
- Звягинцев Д.Г. Некоторые концепции строения и функционирования комплекса почвенных, микроорганизмов // Вестн. МГУ. Сер. 17: Почвоведение. 1978. № 4. С. 48−56.
- Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы. М.: Изд-во МГУ, 1987.-. 256 с.
- Звягинцев Д.Г., Асеева И. В., Бабьева И. П., Мирчинк Т. Г. Методы > почвенной микробиологии и биохимии. М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1980.-224 с.
- Звягинцев Д.Г., Бабьева И. П., Зенова Г. М. Биология почвы: учебник // М.: Изд-во МГУ, 2005. 445 с.
- Какарека С. В., Кухарчик Т. И. Источники выделения полихлорированных бифенилов в окружающую среду на территории Белоруссии // Природные ресурсы. 2003. № 3. С. 55−61.
- Какарека С. В., Кухарчик Т. И., Курман П. В. Полихлорированные бифенилы в почвах и выбросах в атмосферу // Докл. НАН Белоруссии. 2003. Т. 47. № 6. С. 91−93.
- Квасников Е.И., Нестеренко О. А. Молочнокислые бактерии и их использование в народном хозяйстве. М.: «Наука», 1975. — 384 с.
- Клар Э. Полициклические ароматические углеводороды. М.: Химия, 1971. т. 1.-225 с.
- Ковда В. А. Патология почв и охрана биосферы планеты // Пространственно-временная организация и функционирование почв. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1990. — С. 8−43.
- Кожевин П.А. Микробные популяции в природе М.: Изд-во Моск. ун-та, 1989. — 175 с.
- Кожевин П. А. Динамика микробных популяций в почве // Вестн. Моск. ун-та. Сер. Почвоведение. 1992. № 2. 39−56.
- Кожевин П.А., Корчмару С. С. На пути к теории применения микробных удобрений. //Вестн.Моск.Ун-та. Сер17, Почвоведение. 1995. № 2. С. 52−61.
- Кожевин П.А., 2000. Популяционная экология почвенных микроорганизмов. Автореф. дис.. докт. биол. наук. // М., 2000. 55с.
- Кожевин П.А. Биотический компонент качества почвы и проблема устойчивости // Вестник Московского университета. Серия 17: Почвоведение. 2001. № 4. с. 45−47.
- Кожевин П.А. Экологи почвенных микроорганизмов // Экология микроорганизмов (учебник для вузов под ред. А.И.Нетрусова) М.: Изд-во Academia, 2004. — 272 с.
- Кожевин П.А., Горленко М. В., Мультисубстратное тестирование природных микробных сообществ: Учебное пособие.- М.: МАКС Пресс, 2005. 88 с.
- Кожевин П.А. О задачах почвенной биотехнологии. Вестник МГУ, Серия 17, почвоведение. 2006.№ 4. С. 45−49.
- Коноплев А. В. Оценка загрязнения окружающей природной среды полихлорированными бифенилами (ПХБ) и связанного с ним риска для населения (на примере г. Серпухова). 2001. www. tech-db.ru/ istc/db/projects.nsf/webr
- Красильников Н.А., 1958. Микроорганизмы почвы и высшие растения // М.: Наука. 464 с.
- Круглов Ю.В. Микрофлора почвы и пестициды. М.: Агропромиздат, 1991.-129 с.
- Кудеяров В.Н. Вклад почвы в баланс С02 атмосферы на территории России // Докл. Рос. АН.. 2000. Т.375. N 2. С.275−277.
- Кухарчик Т.И. Полихлорированные бифенилы в Беларуси. Минск: Минсктиппроект, 2006. 264 с.
- Кухарчик Т. И., Какарека С. В., Хомич, В. С. КурманП. В., Воропай Е. Н. Полихлорированные бифенилы в почвах Белоруссии: источники, уровни загрязнения, проблемы изучения // Почвоведение. 2007. № 5. С. 532−540.
- Лазарев Н.М. Экологическая микробиология и изучение почвенного плодородия. // В кн.: Труды ВНИИ с.х. микробиологии за 1941−1945 гг, вып. 1. М., 1949, с.5−22.
- Майстренко В.Н., Хамитов Р. З., Будников Г. К. Эколого-аналитический мониторинг супертоксикантов. М.: Химия, 1996. 319 с.
- Майстренко В.Н., Круглов Э. А., Амирова З. К., Хамитов Р. З. Полихлорированные диоксины и дибензофураны в окружающей среде и пищевых продуктах Республики Башкортостан // Диоксины. Супертоксиканты XXI века. № 3. М.: ВИНИТИ, 1998. С. 102−113.
- Марченко С.А., Кожевин П. А., Соколов М. С. Функциональная реакция микробного сообщества почвы как индикатор загрязнения стойкими органическими загрязнителями // Агро XXI. 2008. № 7−9. С. 24−27.
- Марфенина О.Е. Микологический мониторинг почв: возможности иперспективы // Почвоведение. 1994. № 1. С. 75−80.
- Мегарран Э. Экологическое разнообразие и его измерению — М.: Мир, 1992. -181 с.
- Методика определения токсичности вод, водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов по изменению уровня флуоресценции хлорофилла и численности клеток водорослей. Федеральный реестр (ФР) Ф.Р. 1.39.2001.284 // Москва ««Акварос», 2001 45 с.
- Митюшова Н.М. О микрофлоре навоза, минерализующей гумусовые вещества почвы // Уч.зап. ЛГУ, сер. биол. наук, 1950, вып.23, с. 82−85.
- Мишустин Е.Н. Ассоциации почвенных микроорганизмов // М.: Наука, 1975. 108 с.
- Мишустин Е.Н., Перцовская М. И., Горбов В. А. Санитарная микробиология почвы // М.: Наука, 1979. 304 с.
- Никитин Д.И., Васильева Л. В., Лохмачева Р. А. // Новые и редкие форсы почвенных микроорганизмов // М.: Наука, 1966. 71 с.
- Никитин Д.И., Макарьева Е. Д. // Применение электронной микроскопии для количественнолго учета микроорганизмов в суспензиях почв //Почвоведение. 1970. № 10, с. 51−56.
- Никитин Д.И., Никитина Э. С. Процессы самоочищения окружающей среды и паразиты бактерий (род Bdellovibrio) // М.: Наука, 1978. 205 с.
- Николюк В.Ф., Гецлер Ю. Г. Почвенные простейшие СССР. // Ташкент: ФАН, 1972.-312с.
- Новогрудский Д.М. Почвенная микробиология // Алма-Ата: Изд-во АН КазССР, 1956.- 402с.
- Одинцова Е.Н. Микробиологические методы определения витаминов,— М.: Изд-во АН СССР, 1959. 400 с.
- Одум Ю. Экология // М.: Мир, 1986. Т.2. 328 с.
- Паников Н.С. Кинетика роста микроорганизмов: общие ономерности и экологические приложения. М.: Наука, 1992. 311 с.
- Перечень ПДК и ОДК химических веществ в почве № 6229−91. М., 1991.
- Полянская JI.M., Головченко А. В., Звягинцев Д. Г. Микробная биомасса в почвах//Доклады АН. 1995. Т. 344. № 6. С. 846−848.
- Полянская JI.M. Микробная сукцессия в почве: Автореф. дис.. д-ра биол. наук. М., 1996. 96 с.
- Попова А. Ю., Бобовникова Ц. И., Плескачевская Г. А., Шаланда А. В., Танаева JL Г. Ранжирование территории города Серпухова по степени загрязнения почвы хлорированными бифенилами // Гигиена и санитария. 2000. № 4. С. 38−45.
- Ревич Б.А. Последствия воздействия стойких органических-загрязнеий на здоровье населения.- М., 2000. 48с.
- Ровинский Ф.Я., Теплицкая Т. А., Алексеева Т. А. Фоновый мониторинг полициклических ароматических углеводородов. JL: Гидрометеоиздат, 1988. 224 с.
- Рубенчик Л.И. Микроорганизмы биологические индикаторы. -Киев: Наукова думка, 1972. — 164 с.
- Рыбкина Д.О., Плотникова Е. Г., Дорофеева Л. В., Мироненко Ю. Л., Демаков В. А. Новый аэробный грамположительный микроорганизм с уникальными свойствами деструкции орто- и пара-хлорированных бифенилов//Микробиология. 2003. Т. 72. С. 759−765.
- Теппер З.Е., Шильникова В. К., Переверзева Г. И. Практикум по микробиологии. 2004., Москва: Дрофа. — 256 с.
- Терехова В.А. Микромицеты в экологической оценке водных иназемных экосистем. — М.: Наука, 2007.- 215 с.
- Умаров М.М. Ассоциативная азотфиксация. М.: Изд-во МГУ, 1986. -132 с.
- Фомин Г. С. Почва. Контроль качества и экологической безопасности по международным стандартам. Справочник // Москва, 2001. — 300 с.
- Хазиев Ф.Х. Почвенные ферменты. М.: Знание, 1972. 32 с.
- Хайкин С. Нейронные сети. Полный курс. М.: Изд-во «Вильяме», 2006.- 1104 с.
- Хакимов Ф. И., Деева Н. Ф., Ильина А. А. Загрязнение полихлорированными бифенилами почв города Серпухова // Почвоведение. 2003. № 4. С. 493−498.
- Холодный Н.Г. Как наблюдать жизнь микроорганизмов почвы // В кн.: Среди природы и в лаборатории, вып. I. М., 1949, с. 101 121.
- Штина Э.А., Голлербах М. М. Экология почвенных водорослей. // М: -Наука, 1976.- 143с.
- Adam G., Duncan Н. Development of a sensitive and rapid method for the measurement of total microbial activity using fluorescein diacetate (FDA) in a range of soils // Soil biology & biochemistry. 2001. Vol. 33. P. 943 951.
- Alarcon-Gutuerres, E., Floch, C., Ruaudel, F. and Criquet, S. Non-enzymatic hydrolysis of fluorescein diacetate (FDA) in a Mediterraneanoak (Quercus ilex L.) litter // European Journal of Soil Science. 2007. Vol. 59, N2. P. 139- 146.
- Alef, K. Soil respiration // Methods in Applied Soil Microbiology and Biochemistry / Alef, K. and Nannipieri, P. (eds.). Academic Press, 1995. P. 214−218.
- Alexander M. Biodegradation and bioremediation. 2nd edition. CA, USA: Academic Press, 1999. 453 p.
- Allison, S., D., Hanson, C., A., Treseder, К., K. Nitrogen fertilization reduces diversity and alters community structure of active fungi in boreal ecosystems // Soil Biology and Biochemistry. 2007.Vol. 39. N 8. P. 18 781 887.
- Ananyeva N., Susyan E., Chernova O., Chernov I., Makarova O. The ratio of fungi and bacteria in the biomass of different types of soil determined by selective inhibition // Microbiology. 2006. № 6. P. 702−707.
- Ananyeva N.D., Susyan E.A., Chernova O.V., Wirth S. Microbial respiration activities of soil from different climatic regions of European Russia // Soil Biology and Biochemistry. 2008. № 2. P. 147−157.
- Ananyeva, N., D., Susyan, E., A., Chernova, О., V., Wirth, S. Microbial respiration activities of soils from different climatic regions of European Russia // European Journal of Soil Biology. 2008. Vol. 44. N 2. P. 147 157.
- Anderson, J.P.E, Domsch, KH. A physiological method for the quantitative measurement of microbial biomass in soils // Soil Biology & Biochemistry. 1978. Vol. 10. N 3. P. 215−221.
- Anderson, M., Michelsen, A., Jensen, M., Kj0ller, A. Tropical savannah woodland: effects of experimental fire on soil microorganisms and soil emissions of carbon dioxide // Soil Biology and Biochemistry. 2004. Vol.36. N5. P. 849−858.
- Avarre', J., de Lajudie, P. and Bena, G. Hybridization of genomic DNA to microarrays: A challenge for the analysis of environmental samples // Journal of Microbiological Methods. 2007. Vol. 69. N 2. P. 242−248.
- Baath, E., Anderson, T.-H. Comparison of soil fungal/bacterial ratios in a pH gradient using physiological and PLFA-based techniques. Soil Biology and Biochemistry. 2003. Vol. 35, N 3. P. 955−963.
- Bailey, V.L., Smith, J.L., Bolton Jr., H. 2002. Fungal-to-bacterial ratios in soils investigated for enhanced С sequestration // Soil Biology and Biochemistry. 2002. Vol. 34. N 7. P. 997−1007.
- Barajas-Aceves, M. Comparison of different microbial biomass and activity measurement methods in metal-contaminated soils // Bioresource Technology. 2005. Vol. 96. N 12. P. 1405−1414.
- Bardgett, R. D. and McAlister, E. The measurement of soil fungal: bacterial biomass ratios as an indicator of ecosystem self-regulationin temperate meadow grasslands // Biology and Fertility of Soils. 1999. Vol. 29. N3. P. 282−290.
- Biological degradation and bioremediation of toxic chemicals /Edited by G. Rasul Chaudhry/. Dioscorides Press, 1994, Portland, Oregon. — 515 p.
- Blagodatsky S.A., Heinemeyer O., Richter J. Estimating the active and total soil microbial biomass by kinetic respiration analysis//Biol. Fertil. Soils. 2000. Vol. 32, N 1. P. 73−81.
- Bloem J, Breure AM. Microbial indicators // Bioindicators & biomonitors. Principles, assessment, concepts / Breure AM, Markert B, Zechmeister HG (eds). Elsevier, Amsterdam, 2003. P. 259−282.
- Bloem, J., Bolhius P., R. Thimidin and Leucine incorporation to assess bacterial growth rate // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 142−149.
- Bollmann, A. Nitrification in soil // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality /Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 136−141.
- Bolter, M.- Bloem, J.- Meiners, K.- Moller, R. Enumeration and biovolume determination of microbial cells // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 93 113.
- Borja J., Taleon DM., Auresenia J., Gallardo S. Poly-chlorinated biphenyls and their biodegradation // Process Biochemistry. 2005. V. 40. N 5. P. 1999−2013.
- Broos K., Macdonald L.M., Warne M. St. J., Heemsbergen D.A., Barnes M.B., Bell M., McLaughlin M.J. Limitations of soil microbial biomasscarbon as an indicator of soil pollution in the field // Soil Biology & Biochemistry. 2007. № 10. P. 2693−2695.
- Campbell, J., I., A., Albrechstein M., Sorensen, J. Large Pseudomonas phages isolated from barley rhozisphere. FEMS // Microbiology Ecology. 1995. Vol. 18. N. P. 63−74.
- Campbell, C., D., Crayston, S., J., Hirst, D. Use the rhizosphere sole carbon resources utilization to discriminate soil microbial communities// Journal of Microbial methods. 1997. V. 30. N 1. p. 33−41.
- Canali, S., Benedetti, A. Soil nitrogen Mineralization // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 127−135.
- Cerniglia C.E. Biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbons // Biodegradation, 1992, N 3, P. 351−368.
- Cerniglia C.E., Sutherland J.B., Crow S.A. Fungal metabolism of aromatic hydrocarbons. // In: Microbial degradation of natural products., Winkelmann G. (ed), Weinheim, Germany: VCH Verlagsgeselschift, 1992. P. 226−232.
- Chang, S., Т., Lee, H., Joo., Gu, M., B. Sensors and Actuators В: Chemical//Biosensors and Bioelectronics. 2004. Vol. 97. N2−3. P. 272 276.
- Chew, I., Obbard, J., P., Stanforth R., R. Microbial cellulosedecomposition in soils from a rifle range contaminated with heavy metals // Environmental Pollution. 2001.Vol. 111. N 3. P. 367−375.
- Costa, A., L., Paixao, S., M., Ca? ador, I., and Carolino, M. CLPP and EEA profiles of microbial communities in salt marsh sediments // Journal of Soils and Sediments. 2007. Vol. 7, N 6. P. 418−425.
- Demoling L. A., Baath E. The use of leucine incorporation to determine the toxicity of phenols to bacterial communities extracted from soil // Applied Soil Ecology. 2008. № 1. P. 34−41.
- Diaz-Ravina M. and Baath E. Development of Metal Tolerance in Soil Bacterial Communities Exposed to Experimentally Increased Metal Levels // Applied and Environmental Microbiology. 1996. Vol. 62. N 8. P. 29 702 977.
- Dilly, 0. Estimating soil microbial activity // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 114−116.
- Doran J.W., Sarrantonio M., Liebig M., 1996. Soil health and sustainability. In: Sparks, D.L. (Ed.), Advances in Agronomy, Vol. 56, Academic Press, San Diego, CA, USA, pp. 1−54.
- Dronen, A. K., Torsvik, V., Goksoyr, J., and Top, E. M. Effect of mercury addition on plasmid incidence and gene mobilizing capacity in bulk soil. FEMS Microbiology Ecology. 1998. Vol. 27. N. P. 381−394.
- Eickhorst, Т. and Tippkotter, R. Improved detection of soil microorganisms using fluorescence in situ hybridization (FISH) and catalyzed reporter deposition (CARD-FISH) // Soil Biology and Biochemistry. 2008. Vol. 40. N 7. P. 1883−1891.
- Fliessbach, A. and Widmer, F. Estimating soil microbial biomass // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 73−76.
- Gaspar, M.L., Cabello M. N., Pollero R., Aon, M. A. Fluorescein Diacetate Hydrolysis as a Measure of Fungal Biomass in Soil // Current Microbiology. 2001. Vol. 42. P. 123−131.
- Glimm, E., Heuer, H., Engelen, В., Smalla, K., Backhaus, H. Statistical comparisons of community catabolic profiles // Journal of Microbiological Methods. 1997. Vol. 30. N. P. 71−80.
- Gong P., Siciliano S.D., Srivastava S., Greer C. W., Sunahara G. I. Assessment of Pollution-Induced Microbial Community Tolerance to
- Heavy Metals in Soil Using Ammonia-Oxidizing Bacteria and Biolog Assay //Human and Ecological Risk Assessment. 2002. № 5. P. 10 671 081.
- Gu, M., B., Chang, S., T. Soil biosensor for the detection of PAH toxicity using an immobilized recombinant bacterium and a biosurfactant // Biosensors and Bioelectronics. 2001. Vol.16. N 9−12. P. 667−674.
- Handbook for the 1979 convention on long-range transboundary air pollution and its protocols. UNITED NATIONS, New York and Geneva, 2004.-355 p.
- Hoper, H. Substrate induced respiration // Microbiological Methods for
- Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 84−92.
- Ikeda, S., ML., D., Kazuo, N., R., Watanabe, N., Y. Microbial community analyses using a simple, rapid detection method for DNA fingerprints with a fluorescence scanner // Journal of Bioscience and Bioengineering. 2004. Vol. 98. N6. P. 500−503.
- ISO (International Organization for Standardization), 1997. Soil quality: Determination of Soil Microbial Biomass. Part 1: Substrate Induced Respiration Method. ISO 14 240−1.
- Jenkinson, D. S., Brookes, P. C., Powlson, D. S. Measuring soil microbial biomass // Soil Biology and Biochemistry. 2004. Vol. 36, N 1, P. 5−7.
- Jenkinson, D.S., Powlson, D.S. The effects of biocidal treatments on metabolism in soil. A method for measuring soil biomass // Soil Biology & Biochemistry. 1976. Vol. 8. N 3. P. 209−213.
- Jones K.C. Contaminant trends in soils and crops // Environmental. Pollution., 1991, v. 69, 311−325.
- Jones, C.M., Thies, J.E. Soil microbial community analysis using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis of the bacterial ribosomal internal transcribed spacer regions // Journal of Microbiological Methods, 2007.Vol. 69, N 2, P. 256−267.
- Kandeler, E., Tscherko, D., and Spiegel, H. Long-term monitoring of microbial biomass, N mineralisation and enzyme activities of a Chernozem under different tillage management. Biology and Fertility of Soils. 1999. Vol. 28. N 4. P. 343−351.
- Karl en D.L., Ditzler C.A., Andrews S.S. Soil quality: why and how? // Geoderma.2003. № 114. P. 145−156.
- Kennedy, N., Clipson, N. Fingerprinting the fungal community //
- Mycologist. 2003. Vol. 17. N 4. P. 158−164.
- Kipopoulou A.M., Manoli E., Samara C. Bioconcentration of polycyclic aromatic hydrocarbons in vegetables in an industrial area. // Environ. Pollut., 1999, v. 106, N 1. P. 369−380.
- Kurakov, A.V., Zvyagintsev, D.G., Umarov, M.M., Zdenek, F., Evaluation of an international based approach to assess soil quality by biological methods: Russian experiences // Proc. 16th World Congress Soil Sci., Montpellier, France. 1998. P. 1−7.
- Ladd, J. N., Amato, M., van Veen, H. A. Soil microbial biomass: its assay and role in turnover of organic matter С and N // Soil Biology and Biochemistry. 2004.Vol. 36. N 9. P. 1369−1372.
- Langer U., Bohme L., Bohme F. Classification of soil microorganisms based on growth properties: a critical view of some commonly used terms. Journal of Plant Nutrition and Soil Science // 2004. Vol.167. N 3. P. 267 -269.
- Liao, J.D., Boutton, T.W. Soil microbial biomass response to woody plant invasion of grassland // Soil Biology and Biochemistry, 2008. Vol. 40, N 5, P. 1207−1216.
- Liu, В., Jia, G., Chen, J., Wang G, G. A Review of Methods for Studying Microbial Diversity in Soils // Pedosphere. 2006. Vol. 16. N 1. P. 18−24.
- Mackova M., Barriault D., Francova K., Sylvestre M., Moder M., Vrchotova В., Lovecka P., Najmanova J., Demnerova K., Novakova M., Rezek J., Macek T. Phytoremediation of polychlorinated biphenyls //
- Phytoremediation and rhizoremediation / Eds. Mackova M. et al. Springer, 2006. P. 143−167.
- Mamilov A. Sh., Byzov B. A., Zvyagintsev D. G., Dilly О. M. Predation on fungal and bacterial biomass in a soddy-podzolic soil amended with starch, wheat straw and alfalfa meal. Applied Soil Ecology. 2001. Vol. 16, N. P. 131−139.
- Mille-Lindblom, C., von Wachenfeldt, E,. Tranvik LJ. Ergosterol as a measure of living fungal biomass: persistence in environmental samples after fungal death Journal of Microbiological methods. 2004. Vol. 59, N 2. P. 253−262.
- Mungai, N., W., Motavalli, P., P., Kremer R., J. and Nelson,
- K., A. Spatial variation of soil enzyme activities and microbial functional diversity in temperate alley cropping systems // Biology and Fertility of Soils. 2005. Vol. 42. N2. P. 129−136.
- Murage, E. W., Voroney, P. R. Modification of the original chloroform• • 13fumigation extraction technique to allow measurement of S С of soil microbial biomass carbon // Soil Biology and Biochemistry. 2007. Vol. 39. N7. P. 1724−1729.
- Murphy В., Brown J. Environmental Forensics Aspects of PAHs from Wood Treatment with Creosote Compounds // Environmental Forensics. 2005. Vol. 6. N2. P. 151−159.
- Nachimuthu, G., King, K., Kristiansen, P., Lockwood, P., Guppy, C. Comparison of methods for measuring soil microbial activity using cotton strips and a respirometer //Journal of Microbiological Methods. 2007.1. Vol. 69. № 2. P. 322−329.
- Nakatsu, С., H. Soil Microbial Community Analysis Using Denaturing Gradient Gel Electrophoresis // Soil Science Society of America Journal. 2007. Vol. 71. N2. P. 562- 571.
- Nielsen, M., N., Winding, A. Microorganisms as indicators of soil health. NERI Technical Report No. 388 Ministry of the Environment. 2002. National Environmental Research Institute. 84 P.
- Niklinska M., Chodak M., Laskowski R. Pollution-induced community tolerance of microorganisms from forest soil organic layers polluted with Zn or Cu // Applied Soil Ecology. 2006. № 3. P. 265−272.
- Nusslein, K., Tiedje, J.M. Soil bacterial community shift correlated with change from forest to pasture vegetation in a tropical soil. Applied and Environmental Microbiology. 1999. Vol. 65, P. 3622−3626.
- Ohtsubo Y., Kudo Т., Tsuda M., Nagata Y. Strategies for bioremediation of polychlorinated biphenyls // Applied Microbiol. Biotechnol. 2004. V. 65. N3. P. 250−258.
- Pell, M., Stenstrum, J. and Grandhall, U. Soil respiration // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 117−126.
- Pieper D.H. Aerobic degradation of polychlorinated biphenyls // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2005. V. 67. N 2. P. 170 191.
- Poindexter, L.S. Olygotrophy. Fast and famine existence // Advances in Microbial Ecology. 1981. Vol. 5, N l.P. 63−89.
- Prosser J.I. Molecular and functional diversity in soil micro-organisms // Plant and Soil. 2002. Vol 244, N 1−2. P. 9−17.
- Ramdahl T. Chemical and biological characterization of emissions from small stoves burning wood and coal. // Chemosphere, 1982, v. 11, P. 601
- Ramsey, P., W., Rillig, M., C., Feris, K., P., Holben, W., E. and Gannon, J., E. Choice of methods for soil microbial community analysis: PLFA maximizes power compared to CLPP and PCR-based approaches // Pedobiologia. 2006. Vol. 80. N 3- P. 275−280.
- Ross, D.J. Soil microbial biomass estimated by the fumigation-incubation procedure: Seasonal fluctuations and influence of soil moisture content // Soil Biology and Biochemistry. 1987. Vol. 19. N 4. P. 397−404.
- Rousk, J., Demoling, L., A., Bahr, A., Baath, E. Examining the fungal and bacterial niche overlap using selective inhibitors in soil // FEMS Microbiol Ecol. 2008. Vol. 63. N 3. P. 350−358.
- S., J., Campbell, C., D. and Artz, R., R., E. Assessing CLPPs using MicroResp™ A comparison with Biolog and multi-SIR // Journal of Soils and Sediments. 2007. Vol. 7, N 6. P. 406−410.
- Schmitt H., Haapakangas H., van Beelen P. Effects of antibiotics on soil microorganisms: time and nutrients influence pollution-induced community tolerance // Soil Biology and Biochemistry. 2005. N 10. P. 1882−1892.
- Schniirer, J., Rosswall, T. Fluorescein Diacetate Hydrolysis as a Measure of Total Microbial Activity in Soil and Litter //Applied and Environmental Microbiology. 1982. Vol. 43. N 6. P. 1256−1261.
- Sehy, U., Schloter, M., Bothe, H. and Munch, J.C. N20 emission and denitrification from soil // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins, D. and Benedetti, A., Eds. CAB International, 2005. P. 150−157.
- Shaw, L., J. and Bums R.G. Enzyme activity profiles and soil quality // Microbiological Methods for Assessing Soil Quality / Bloem, J., Hopkins,
- D. and Benedetti, A., (Eds.). CAB International, 2005. P. 158−182.
- Smalla K.A., Wachtendorf U., Heuer H., Liu W.-T., Forney L. Analysis of Biolog GN substrate utilization patterns by microbial communities. Applied and Environmental Microbiology, 1998. 64. N 4. P. 1220−1225.
- Small, J, Call, D., R., Brockman, F., J., Straub, T., M., Chandler, D., P. Direct detection of 16S rRNA in soil extracts by using oligonucleotide microarrays // Applied and Environmental Microbiology. 2001. Vol.67. N 10. P. 4708−4716.
- Song, D., Katayama, A. Monitoring microbial community in a subsurface soil contaminated with hydrocarbons by quinone profile. 2005. Chemosphere, Vol. 59. N 3. P. 305−314.
- Stark, C., Condron, L., M., Stewart, A., Di, PI., J. and O’Callaghan, M. Influence of organic and mineral amendments on microbial soil properties and processes // Applied Soil Ecology. 2007. Vol. 35. N 1. P. 79−93.
- Stenberg, B. Monitoring soil quality of arable land: Microbiological indicators 11 Acta Agriculturae Scandinavia. 1999. Vol.49. N 1. P. 1−24.
- Stenstrom, J., Stenberg, В., Johansson, M. Kinetics of substrate induced respiration (SIR): theory // Biology and Fertility of Soil. 1998. Vol 27, P. 35−39.
- Stringfellow W.T., Aitken M.D. Comparative physiology of phenanthrene degradation by two dissimilar pseudomonads from a creosote-contaminated soil. // Canadian Journal of Microbiology. 1994.1. Vol. 40, N2. P. 432−438.
- Suess M.J. The environmental load and cycle polycyclic aromatic hydrocarbons. // Science of the Total Environment, 1976, v. 6, N 1. P. 239−250.
- Tiedje, J.M., Asuming-Brempong, S., Nusslein, K., Marsh, T.L., Flynn, S.J. Opening the black box of soil microbial diversity // Applied Soil Ecology. 1999. Vol. 13. N. P. 109- 122.
- Torsvik, V., 0vreas, L. Microbial diversity and function in soil: from genes to ecosystems // Current Opinion in Microbiology. 2002. Vol 5. N 3. P. 240−245.
- Torsvik, V., Ovreas, L. Microbial diversity and function in soil: from genes to ecosystems // Current Opinion in Microbiology. 2002. Vol 5. N 3. P. 240−245.
- Travis E. R., Bruce N. C., Rosser S. J. Short term exposure to elevated trinitrotoluene concentrations induced structural and functional changes in the soil bacterial community // Environmental Pollution. 2008. № 2. P. 432−439.
- Tscherko, D., Rustemeier, J., Richter, A., Wanek, W., Kandeler, E. Functional diversity of the soil microflora in primary succession across two glacier forelands in the Central Alps // European Journal of Soil Science. 2003.Vol. 54. N 4. P. 685−696.
- Vance, E.D., Brookes, P.C., Jenkinson, D.S. An extraction method formeasuring soil microbial biomass-C // Soil Biology & Biochemistry. 1987. Vol. 19. N6. P. 703−707.
- Wagner, M., Horn, M, Daims, H. Fluorescence in situ hybridisation for the identification and characterisation of prokaryotes // Current Opinion in Microbiology. 2003. Vol. 6. N 3. P. 302−309.
- Wakeham S.G., Schaffner C., Giger W. Polycyclic aromatic hydrocarbons in recent lake sediments: I. Compounds having anthropogenic origins. // Geochim. Et Cosmochim. Acta. 1980. Vol. 44. N 3.P. 403−413.
- Wania F., Mackay D. Tracking the distribution of persistent organic pollutants // Environment Science and Technology. 1996. V. 30. № 9. P. 390−396.
- Wellington E., MH., Berry, A. and Krsek, M. Resolving functional diversity in relation to microbial community structure in soil exploiting genomics and stable isotope probing // Current Opinion in Microbiology. 2003. Vol.6. N. P. 295−301.
- Winding, A. and Hendriksen, N., B. Comparison of CLPP and enzyme activity assay for functional characterization of bacterial soil communities // Journal of Soils and Sediments. 2007. Vol. 7, N 6. P. 411−417.
- Wu, J., Joergensen, R.G., Pommerening, В., Chaussod, R. and Brookes, P.C. Measurement of soil microbial biomass С by fumigation-extraction -an automated procedure // Soil Biology and Biochemistry. 1990. Vol. 22. N8, P. 1167−1169.
- Zelles, L. Fatty acid patterns of phospholipids and lipopolysaccharides in the characterization of microbial communities in soil: A review. // Biology and Fertility of Soils. 1999. 29. N2. P. 111−129.
- Zhao, Y., Li, W., Zhou, Zh., Wang, L., Pan, Y., Zhao L. Dynamics of microbial community structure and cellulolytic activity in agricultural soil amended with two biofertilizers // European Journal of Soil Biology. 2005. Vol. 41, N1−2, P. 21−29.