Сравнительное изучение дозовых зависимостей частоты нестабильных хромосомных обменов при облучении лимфоцитов человека in vivo и in vitro

Актуальность проблемы. Ускорившееся с конца 40-х годов загрязнение человеком среды обитания, вызванное бурным ростом промышленности, испытанием ядерного оружия и использованием ядерной энергии, обусловило необходимость разработки биологических тестов, позволяющих оценивать генотоксичность различных факторов химической и физической природы, в первую очередь — ионизирующего излучения. Известно, что степень клинического проявления последствий облучения зависит от уровня поглощённой дозы, характера облучения и времени экспозиции. В тех случаях, когда эти параметры известны, можно с большой степенью вероятности прогнозировать ранние и отдалённые реакции организма на облучение. Однако в случаях неконтролируемого облучения при аварийных ситуациях, когда данные физической дозиметрии неполны или отсутствуют, для оценки поглощённой организмом дозы используются биологические маркеры радиационного воздействия. Другой областью применения биологических маркеров действия ИИ является оценка индивидуальной радиочувствительности при терапевтическом облучении онкологических пациентов. Она необходима для прогнозирования как общей клинической реакции организма на облучение, так и эффективности самой радиотерапии. Межиндивидуальная вариабельность в радиочувствительности людей усиливает значимость биологических критериев оценки радиационного воздействия, поскольку в клиническом отношении важнее установить реакцию конкретного человека на облучение, чем достоверно рассчитать поглощённую им физическую дозу. Поэтому биологическая дозиметрия часто оказывается предпочтительнее физической.

Среди существующих в настоящее время многочисленных способов биодозиметрии наиболее точным и информативным является метод классического анализа аберраций хромосом (АХ) в метафазах культивируемых лимфоцитов крови человека (Севанькаев и Деденков, 1990). Первыми этот метод использовали Bender and Gooh (1962) для исследования индуцируемых радиацией АХ уже через два года после разработки Moorhead et al. (1960) способа культивирования лимфоцитов периферической крови путём стимуляции их к делению фитогемагглютинином (ФГА). В 1966 году те же авторы впервые применили этот метод для оценки доз у трёх человек, пострадавших от воздействия смешанного у-нейтронного излучения в дозах — по данным физической дозиметрии — 12, 22,5 и 47 рад. Метод получил широкое распространение и признание во всём мире и был рекомендован Всемирной Организацией по Атомной Энергии (IAEA, 1986) в качестве официального метода биологической дозиметрии и Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в качестве тест-системы для оценки мутагенности различных факторов окружающей среды, особенно антропогенного происхождения. По выражению Littlefield et al. (1991) он стал «признанным лидером» среди множества развивающихся методов биомаркерной индикации радиационного воздействия.

Преимущества этого метода определяет уникальное сочетание ряда особенностей экспериментального материала, а именно лимфоцитов периферической крови человека. Это: простота получения клеток и сравнительно несложная техника их культивированиявысокая концентрация лимфоцитов, способных к бласттрансформации (106/мл) и, в связи с этим, возможность использования микроколичеств кровиестественная синхронизация лимфоцитов периферической крови в стадии Go клеточного цикланизкий спонтанный уровень АХ в лимфоцитах периферической крови у контрольных донорових высокая радиочувствительность по сравнению с клетками большинства других тканей. Возможность оценки действия радиации непосредственно на клетки человека снимает необходимость экстраполяции данных, полученных на животных.

Кроме того, ценным качеством цитогенетического метода является существование специфичных для радиационного воздействия хромосомных перестроек, именуемых нестабильными хромосомными обменами, а именно, дицентриков и кольцевых хромосом. Для этих обменных хромосомных аберраций характерен низкий спонтанный уровень, что позволяет достоверно улавливать изменения частоты дицентриков и центромерных колец при относительно невысоких дозах, и хорошо изучена дозовая зависимость их частоты при облучении лимфоцитов in vitro разными видами ионизирующих излучений.

Существует достаточно много работ, в которых по уровню АХ осуществляется восстановление как индивидуальных, так и коллективных доз в случаях неконтролируемого облучения людей. Процедура реконструкции поглощённой человеком дозы сводится к следующему. В ранние сроки после облучения частота индуцированных НХО оценивается путём прямого цитогенетического анализа, а в отдалённые сроки — по остаточной частоте дицентриков с использованием различных математических моделей, учитывающих продолжительность жизни лимфоцитов и скорость их элиминации. Измеренная или рассчитанная частота НХО затем сопоставляется с калибровочной кривой, полученной при облучении крови разными дозами in vitro. В случае однократного лучевого воздействия на человека использование in vitro калибровочных кривых, полученных также в режиме однократных облучений лимфоцитов, представляется вполне оправданным. Однако, при фракционированном / пролонгированном характере лучевого воздействия, имевшем место при радиационных авариях (Чернобыль, Маяк), испытаниях ядерного оружия (Семипалатинск), при профессиональном и терапевтическом облучении использование таких калибровочных кривых может приводить к искажённым оценкам поглощённых доз. В этом случае более корректным было бы использование калибровочных кривых, полученных в аналогичном (фракционированном) режиме облучения клеток крови. Однако, из-за ограниченной жизнеспособности лимфоцитов в культуре, получение таких кривых на лимфоцитах в экспериментах in vitro методически трудновыполнимо.

Обоснованием для использования in vitro-калибровочных кривых в целях реконструкции поглощённых человеком доз служат результаты экспериментов на животных, в подавляющем большинстве которых было показано, что при однократном остром облучении лимфоцитов in vitro и in vivo частоты НХО не различаются. Аналогичные работы по изучению дозовых зависимостей радиационных маркеров при разных условиях облучения лимфоцитов человека единичны, их результаты разноречивы и, как правило, статистически малообеспечены.

Поэтому представляется важным и актуальным сравнение частот НХО, индуцируемых радиацией в лимфоцитах человека, при облучении их в условиях in vitro и in vivo. Это можно осуществить на онкологических пациентах, в схему лучевого лечения которых включено тотальное фракционированное облучение в малых дозах, осуществляемое до начала локального облучения в больших дозах.

Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение дозовой зависимости частоты нестабильных хромосомных обменов в лимфоцитах периферической крови при тотальном облучении человека в малых дозах и сравнение её с зависимостью доза-эффект при облучении лимфоцитов in vitro.

Данная цель предопределила постановку следующих задач:

1. Изучить характер индивидуальных зависимостей от дозы частоты дицентриков и центромерных колец в лимфоцитах периферической крови при общем фракционированном облучении онкологических пациентов в диапазоне от 0 до 57,5 сГр.

2. Изучить характер индивидуальных зависимостей от дозы частоты дицентриков и центромерных колец в лимфоцитах при однократном облучении крови тех же пациентов in vitro в том же дозовом интервале.

3. На основании индивидуальных данных построить суммарные модели дозовой зависимости частоты нестабильных хромосомных обменов при облучении лимфоцитов in vitro и in vivo.

4. Сравнить эффективность образования дицентриков и центромерных колец при фракционированном облучении лимфоцитов in vivo и остром in vitro.

Научная новизна и практическая значимость работы. Впервые в рамках одного исследования, у одних и тех же людей изучены нестабильные хромосомные обмены, индуцируемые малыми дозами ИИ при фракционированном облучении лимфоцитов in vivo и остром in vitro. Охарактеризована межиндивидуальная вариабельность в радиочувствительности лимфоцитов при разных условиях облучения. Впервые установленная в работе большая эффективность острого облучения лимфоцитов in vitro в сравнении с фракционированным in vivo свидетельствует о возможности занижения поглощённых человеком доз при их оценке с использованием in vitro калибровочных кривых. Полученная в ходе работы калибровочная кривая доза-эффект для фракционированного облучения лимфоцитов in vivo может быть рекомендована для использования при восстановлении поглощённых доз в случаях неконтролируемого облучения человека.

Положения, выносимые на защиту.

1. Дозовые зависимости частоты нестабильных хромосомных обменов в диапазоне от 0 до 60 сГр при облучении лимфоцитов как in vitro, так и in vivo удовлетворительно описываются линейными моделями.

2. Эффективность однократного облучения лимфоцитов in vitro по частоте клеток с дицентриками и центромерными кольцами достоверно превышает эффективность фракционированного облучения in vivo.

3. Межиндивидуальные различия в радиочувствительности разных доноров более выражены при фракционированном облучении лимфоцитов in vivo, чем при остром in vitro.

4. Полученная при общем облучении человека калибровочная кривая дозовой зависимости нестабильных хромосомных обменов может быть использована для восстановления поглощённых доз в случаях неконтролируемого фракционированного облучения.

Апробация работы. Предварительная защита диссертации состоялась на заседании проблемной комиссии отдела клинической радиобиологии ЦНИРРИ МЗ РФ. Основные положения диссертации доложены на 28-ой ежегодной конференции Европейского Общества мутагенов окружающей среды (Зальцбург, 1998), на Международной конференции по биодозиметрии и 5-ом Международном симпозиуме по ЭПР дозиметрии (Обнинск, 1998), на 29-ой ежегодной конференции Европейского Общества мутагенов окружающей среды и 16-ой ежегодной конференции Скандинавского Общества мутагенов окружающей среды (Вильнюс, 1999), на конференции «Новые технологии в медицинской радиологии» (Санкт-Петербург, 2001), на IV съезде по радиационным исследованиям (Москва, 2001).

Публикации. Основные положения диссертации отражены в 17 публикациях: 6 статьях и 11 тезисах докладов.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения и литературного обзора, методической части, результатов исследования и обсуждения, выводов, приложения и списка цитированной литературы. Диссертация изложена на 186 страницах машинописного текста, в число которых входит 41 таблицу, 19 рисунков и 13 таблиц «Приложения». Список цитированной литературы включает 153 источника.

1. Ахматуллина Н. Б., Рыскулова СТ., Искандарова Т. А. и Чередниченко О. Г. К механизмам формирования адаптивного эффекта in vitro и in vivo. Тезисы Международной конференции «Проблемы радиационной генетики на рубеже веков». М. 2000. 74.

2. Бочков Н. П. Хромосомы человека и облучение. «Атомиздат». 168 с.

3. Бочков Н. П. Метод учёта хромосомных аберраций как биологический индикатор влияния факторов внешней среды. 1974. М. 32 с.

4. Бурлакова Е. Б. с соавт. Особенности биологического действия малых доз облучения. Радиационная биология. Радиоэкология. 1996. Т.Зб. ВЫП.4.-С.610−631.

5. Виленчик М. М. Нестабильность ДНК и отдалённые последствия 1971. М.: воздействия излучений. 1987. М. 192 с.

6. Возилова А. В. Отдалённые цитогенетические эффекты хронического облучения населения Южного Урала. Автореферат на соискание учёной степени кандидата биологических наук. Москва. 1997. 24 с.

7. Воробцова И. Е., Михельсон В. М., Воробьёва М. В., Плескач Н. М., Богомазова А. Н., Прокофьева В. В. и Пюккенен А. Ю. Результаты цитогенетического обследования ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, проведённого в разные годы. Радиационная Радиоэкология. 1994. Т.34. Вып.6. 798−804. биология.

8. Воробцова И. Е., Воробьёва М. В., Богомазова А. Н., Пюккенен А. Ю. и Архангельская Т. Б. Цитогенетическое обследование детей СанктПетербургского региона, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС. Частота нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови. Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. Т.35. Вып.5. 630−635.

9. Гераськин А. Критический анализ современных концепций и подходов к оценке биологического действия малых доз ионизирующего излучения. Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. Т.35. Вып.5. 798 804.

10. Гераськин А. Закономерности формирования цитогенетических эффектов малых доз ионизирующего излучения. Автореферат на соискание учёной степени доктора биологических наук. Обнинск. 1998. 5 0 с.

11. Гераськин СЛ. и Севанькаев А. В. Универсальный характер закономерностей индукции цитогенетических повреждений низкодозовым облучением и проблема оценки генетического риска. Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. Т.39. № 1. 35−40.

12. Гончарова Р. И. Отдаленные последствия Чернобыльской катастрофы: оценка через двенадцать лет. Экология. Геология. Водопользование. 1999. Т.1. Вып.7. 4−15.

13. Горбунова И. Н., Иванов К. Ю., Нагиба В. Н., Никанорова Е. А., Профе О. С., Хаймович Т. И, Акаева Э. А., Елисова Т. В., Иофа Э. Л., Нилова И. Н., Костина Л. Н., Рубанович А. В., Шевченко В. А., Богомазова А. Н., Вилкина Г. А., Новицкая Н. Н., Хазинс Е. Д. и Снигирёва Г. П. Калибровочные кривые «доза-эффект» для хромосомных аберраций лимфоцитов периферической крови, облучённых у-излучением Со. Тезисы Международной конференции «Проблемы радиационной генетики на рубеже веков». М. 2000а. 257.

14. Горбунова И. Н., Иванов К. Ю., Нагиба В. Н., Никанорова Е. А., Профе О. С., Хаймович Т. И, Акаева Э. А., Елисова Т. В., Иофа Э. Л., Нилова И. Н., Костина Л. Н., Рубанович А. В., Шевченко В. А., Богомазова А. Н., Вилкина.

15. Жербин Е. А. и Чухловин А. Б. Радиационная гематология. М.: «Медицина». 1989. 176 с.

16. Жестянников В. Д. Репарация ДЬЖ и её биологическое значение. 1979. Л.: «Наука». 1979. 288 с.

17. Жижина Г. П. Связь структурных характеристик ДНК эукариот и её чувствительности к действию малых доз ионизирующей радиации. Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. Т.39. № 1. 10−20.

18. Заичкина СИ., Клоков Д. Ю., Розанова О. М. и др. Зависимость величины цитогенетического адаптивного ответа в клетках костного мозга крыс от дозы хронического у-облучения in vivo. Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. Т.39. № 4. С373−383.

19. Ильичёв СВ., Кочетков О. А., Крючков В. П., Мазурик В. К., Носовский А. В., Павлов Д. А., Снисар И. Б. и Цовьянов А. Г. Ретроспективная дозиметрия участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС. Под редакцией В. П. Крючкова и А. В. Носовского. 1.

20. Киев: «Седа-стиль». 256 с.

21. Колюбаева СН., Прокопчук Б. И., Ракецкая В. В., Мясникова Л. В., Комар В. Е. Сравнительное исследование микроядерного теста и хромосомных.

22. Комар В. Е. Современное состояние проблемы биологической индукции лучевых поражений. Радиобиология. 1992. Т.32. Вып.1. 84−97.

23. Мазник Н. А. и Винников В. А. Динамика цитогенетических эффектов в лимфоцитах периферической крови у участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС. Цитология и генетика. 1997. Т. 31. Н. 6. 41 47.

24. Мельнов СБ., Корытько С, Винник Л. М. и Исайкина Я. И. Динамическое изучение частоты хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови ликвидаторов 1986;1987 гг. Сборник материалов IV международной конференции «Чернобыльская катастрофа: прогноз, профилактика, лечение и медико-психологическая реабилитация пострадавших.» Минск. 1995. 259.

25. Мельнов СБ. Биологическая дозиметрия: теоретические и практические аспекты. 2000. Минск. 226 с.

26. Неронова Е. Г. Цитогенетические показатели нестабильности генома у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС в отдаленном периоде. Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Санкт-Петербург. 1997.

27. Никольский А. В. и Котеров А. Н. Радиоадаптивный ответ клеток млекопитающих. Медицинская радиология и радиационная безопасность. 1999. Т.44. № 6. 5−19.

28. Пилинская М. А., Шеметун A.M., Дыбский С., Редько Д. В. и Знаевская И. А. Цитогенетический мониторинг лиц, пострадавших от аварии на Чернобыльской АЭС. Цитология и генетика. 1994. Т. 28. № 3. 18−24.

30. Пяткин Е. К., Нугис В. Ю., Чирков А. А. Оценка поглощенной дозы по результатам цитогенетических исследований культур лимфоцитов у пострадавших при аварии на Чернобыльской АЭС. Медицинская радиология. 1989. Т.34. -№ 6. 52−57.

31. Рождественский Л. М. Концепция биологического действия ионизирующей радиации низкого уровня (Анализ проблемы в аспектах пороговости эффектов и радиочувствительности/радиореактивности.

32. Рокицкий П. Ф. Биологическая статистика. 1.

33. Минск: «Вышэйшая школа». 328 с.

34. Рябченко Н. И., Антошина М. М., Насонова В. А. и Фесенко Э. В. Радиационная Биология. Радиоэкология, 1996. Т.36. № 6. 825−833.

35. Севанькаев А. В. и Насонов А. П. Калибровочные дозовые кривые хромосомных аберраций лимфоцитов человека. Медицинская радиология. 1978. Т.23. -№б. 26−33.

36. Севанькаев А. В. и Деденков А. Н. Актуальные проблемы современной радиобиологии в свете оценки и прогнозирования последствий анализа на Чернобыльской АЭС Радиобиология. 1990. Т.ЗО. Вьш.5. 579 584.

37. Севанькаев А. В. Радиочувствительность хромосом лимфоцитов человека в митотическом цикле. 1987. М. «Энергоатомиздат». 160 с.

38. Севанькаев А. В., Потетня О. И., Жлоба А. А., Моисеенко В. В., Потетня В. И., Анкина М. А., Голуб Е. В., Епифанова Н. И., Завитаева Т. А., Козлов В. М., Михайлова Г. Ф., Поздышкина О. В. и Пятенко B.C. Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживаюших в загрязнённых радионуклидами районах Калужской области. Радиационная биология. Радиоэкология. 1995а. Т.35. Вьш.5. 581 587.

39. Снигирёва Г. П., Новицкая Н. Н., Хазинс Е. Д. и Вилкина Г. А. Отдалённые цитогенетические эффекты у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС. Тезисы Международной конференции «Проблемы радиационной генетики на рубеже веков». М. 2000. 331.

40. Спитковский Д. М. Концепция действия малых доз ионизирующих излучений на клетки и её возможные приложения к трактовке медикобиологических последствий. Радиобиология. 1992. Т.32. Вып.З. 382−400.

41. Спитковский Д. М. О некоторых новых биофизических и биологических аспектах механизмов при воздействии малых и близких к ним доз.

42. Талызина и Спитковский Радиобиология. 1991. Т.31. Вып.4. 606−611.

43. Тимофеев-Ресовский Н.В., Иванов В. И., Корогодин В. И. Применение принципа попадания в радиобиологии. 1968. М. Атомиздат. 228 с.

44. Урбах В. Ю. Математическая статистика для биологов и медиков. М.: «Издательство Академии Наук СССР». 1963. 324 с.

45. Хандогина Е. К., Зверева СВ., Агейкин В. А., Марченко Л. Ф., Мутовин Г. Р., Снигирёва Г. П., Ленская Р. В., Буянкин В. М., Шахтарин В. В. и Акифьев А. П. Цитогенетическое обследование различных групп детей, проживающих в районах Брянской области, загрязнённых в результате Чернобыльской аварии. Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. -Т.35. ВЫП.5.-С. 618−625.

46. Шевченко В. А., Семов А. В., Акаева Е. А., Елисова Т. Н., Иофа Э. Л., Нилова И. Н., Стефан Г., Ромм X. И Буркарт В. Цитогенетические эффекты у лиц, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской АЭС. Радиационная Биология. Радиоэкология. 1995а. Т.35. Вып.5. 646 654.

47. Шевченко В. А., Снигирёва Г. П., Сусков И. И., Акаева Э. А., Елисова Т. Н., Иофа Э. Л., Нилова И. Н., Костина Л. Н., Новицкая Н. Н., Сидорова В. Ф. и Хазинс Б. Д. Цитогенетические эффекты у населения Алтайского края,.

48. Эйдус Л. Х. О проблеме экстраполяции дозовой зависимости цитогенетических повреждений от больших доз к малым. Радиационная Биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. № 1. 177−180.

49. Agresti А. А Survey of Exact Inference for Contegency Tables. Statistical Science.- 1992.-V.7.—P.131−153.

50. Anderson D., Jenkinson P. C, Dewdney R.S., Francis A.J., Goldbert P. and Butterworth K. R, Chromosome aberrations, mutagen-induced blastogenesis and prolipherative index in peripheral lymphocytes from 106 control individuals of the U.K. population. Mutation Research. 1988. V.204. P.407−420.

51. Anderson H.C. The spontaneous frequency of chromosomal aberrations and sister-chromatid exchanges in cultured peripheral lymphocytes of a single blood donor sampled more than 200 times. Mutation Research. 1993. V.286. P281−292.

52. Antonie J.L., Gerber G.B., Leonard A., Richard F. And Wambersie A. Chromosome aberration in patients treated with telecobalt therapy for mammary carcinoma. Radiation Research. 1981. V.86. P. 171−177. 56. Awa A.A., Sofuni Т., Honda Т., Itoh M., Neriishi S. and Otake M. Relationship between the radiation dose and chromosome aberrations in atomic.

53. Bajerska A. and Liniecki J. The influence of X-ray dose and time of its delivery in vitro on the yield of chromosomal aberrations in the peripheral blood lymphocytes. International Journal Radiation Biology. 1969. V.16. № 5. -P.467−481.

54. Bajerska A. and Liniecki J. The yield of chromosomal aberrations in rabbit lymphocytes after irradiation in vitro and in vivo. Mutation Research. 1975. -V.27.-P.271−284.

55. Barjaktarovic N. and Savage J.R.K. R.B.E. for d (42Mev)*Be neutrons based on chromosome-type aberrations induced in human lymphocytes and scored in cell at first division. International Journal Radiation Biology. 1980. V.37. p.667.

56. Barquinero J.F., Barrios L., Caballin M.R., Miro R., Ribas M., Subias A. and Egozcue J. Establishment and validation of a dose-effect curve for 7-rays by cytogenetic analysis. Mutation Research. 1995a. V.326. P.65−69.

57. Barquinero J.F., Barrios L., Caballin M.R., Miro R., Ribas M., Subias A. and Egozcue J. Occupational exposure to radiation induces an adaptive response in human lymphocytes. International Journal Radiation Biology. 1995b. V.67.-№ 2.-P.187−191.

58. Bauchinger М., Schmid Е. and Dresp J. Calculation of dose-rate dependence of the dicentric yield after Co y-irradiation of human lymphocytes. International Joumal Radiation Biology. 1979. V.35. -p.229−233.

59. Bauchinger M., Schmid E., Braselmarm H. and Kulka U. Chromosome aberrations in peripheral lymphocytes from occupants of houses with elevated indoor radon concentrations. Mutation Research. 1994. V.310, P.135 142.

60. Bauchinger M. Cytogenetic researches after accidental radiation exposure. Stem Cells.-1995.-V.13.-Suppl.l.-P.182−190.

61. Bender M.A. Chromosome aberrations in irradiated human subjects. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1964. V. 114. p.249−251.

62. Bender M.A. and Brewen J.G. Factors influencing chromosome aberration yields in the human peripheral leukocyte system. Mutation Research. 1969. -V.8.-P.383−399.

63. Bender M.A. and Gooch P.C. Types and rates of X-ray-induced chromosome aberrations in human blood irradiated in vitro. Proc. Nat. Acad. Sci. (U.S.A.) -1962.-V.48.-P.522−532.

64. Bender M.A. and Gooch P.C. Somatic chromosome aberrations induced by human whole-dose irradiation: The «Recuplex» Critically Accident. Radiation Research. 1966. V.29. P.568−582.

65. Bender M.A., Awa A.A., Brooks A.L., Evans H.J., Groer P.G., Littlefield L.G., Pereira C Preston R.J. and Wachholz B.W. Currents status of cytogenetic.

66. Bender M.A., Preston R.J., Leonard R.C., Pyatt B.E., Gooh P.C. and Shelby M.D. Chromosomal aberrations and sister-chromatid exchange frequencies in peripheral blood lymphocytes of a large human population sample. Mutation Research. 1988b. V.204. P.421−433.

67. Bender M.A., Preston R.J., Leonard R.C., Pyatt B.E. and Gooh P.C. Chromosomal aberrations and sister-chromatid exchange frequencies in peripheral blood lymphocytes of a large human population sample. IL Extension of age range. Mutation Research. 1989. V.212. P. 149−154.

68. Bender M.A., Preston R.J., Leonard R.C., Pyatt B.E. and Gooh P.C. On the distributions of spontaneous chromosomal aberrations in human peripheral blood lymphocytes in culture. Mutation Research. 1990. V.244. P.215 220.

69. Blackwell N., Stevenson A.C. and Wiemik G. Chromosomal findings in patients treated with small doses of iodine;

70. Mutation Research. 1974. V.25. p.397−402.

71. Brewen J.G. and Gengozian N. Radiation-induced human chromosome aberrations. II. Human in vitro irradiation compared to in vitro and in vivo irradiation of marmoset leukocytes. Mutation Research. 1971. V.13. № 4.-P.383−391.

72. Brewen J.G. and Luippold H.E. Radiation-induced human chromosome aberrations: in vitro dose rate studies. Mutation Research. 1971. V. 12. p.305−314.

73. Brewen J.G., Preston R.J. and Littlefield L.G. Radiation-induced human chromosome aberration yields following an accidental whole-body exposure to Co Y-rays. Radiation Research. 1972. V.49. P.647−656.

74. Brown J.K. and McNeill J.R. Biological dosymetry in an industrial radiography accident.//Health Phys. 1971. V.21. P.519−522.

75. Buckton K.E., Brovra W.M.C., Smith P. G, Lymphocyte survival in Men treated with X-rays for ancylosing spondylitis. Nature. 1967. V.214.№ 87.-P.470−473.

76. Buckton K.E., Langlands A.O., Smith P.G., Woodcock G.E. and Looby P.C. Further studies on chromosome aberration production after whole-body irradiation in man. International Journal Radiation Biology. 1971. V. 19. № 4.-p.369−378.

77. Carbonell E., Peris F., Xamena N., Creus A. and Marcos R. Chromosomal aberration analysis in 85 control individuals. Mutation Research. 1996. V.370. P.29−37.

78. Catcheside D.G., Lea D.E. and Thoday J.M. The production of chromosome structural changes in Tradescantia microspores in relation to dosage, intensity and temperature. Journal of Genetics. 1946. V.47- P.137−149.

79. Chung H.W., Ryu E.K., Kim Y.J. and Ha S.W. Chromosome aberrations in workers of nuclear-power plants. Mutation Research. 1996. V.350. P.307−314.

80. Clemenger J.F. and Scott D. In vitro and in vivo sensitivity of cultured blood lymphocytes to radiation induction of chromosome aberrations. Nature (London) New Biology. 1 9 7 1 V.234. p. 154.

81. Clemenger J.F.P. and Scott D. A comparison of chromosome aberration yields in rabbit blood lymphocytes irradiated in vitro and in vivo. International Journal Radiation Biology. 1973. -V.24. № 5. P.487−496.

82. Cloos J., Braakhuis J.M., Steen I., Copper M.P., Vries N.D., Nauta J.J.P. and Snow G.B. Increased mutagen sensitivity in head-and-neck squamous-cell carcinoma patients, particularly those with multiple primary tumors. International Joumal of Cancer. 1994. V.56. P.816−819.

83. Dolphin G.W. A review of in vitro dose-effect relationship. In: Mutageninduced chromosome damage in man. Eds. Evans M. and Lloyd D. 1988. p.1−8.

84. Dunst J., Gebracht E. und Neubauer S. Kann man extrem erhohte Strahlensensitivitat von Patienten durch In-vitro-Testung von Lymphozyten erkennen? Strahlentherapie und Onkologie. 1995. -V. 171. № 10. P.581 586.

85. Edwards A.A., Lloyd D.C. and Prosser J.S. The induction of chromosome aberrations in human lymphocytes by accelerated charged particles. Radiation Protection Dosimeter. 1985. V. 13. № 1. P.205−209.

86. Edwards A.A. The use of chromosomal aberrations in human lymphocytes for biological dosimetry. Radiation Research. 1997. -V.

88. Ermakov I., Ranniko S. et al Calculation of the estimated collective effective dose equivalent (Se) due to x-Ray diagnostic examination-estimate of the Se in Finland. Health Physics. 1987. V.35. № 1. P.31−36.

89. Ermakov I. and Cherviakov A. Representation of the Dose Field of Co-60 Therapy Units by Empirical Formulae. In: Clinical dosimetry. STL-25. 1.

91. Ermakov I., Cherviakov A. et al. Computing patient doses of X-ray examination using a patient sizeand sexadjustable phantom. British Journal Radiology. 1997. V.70. P.708−718.

92. Ewans H.J., Buckton K.E., Hamilton G.E. and Carothers A. Radiation-induced chromosome aberrations in nuclear-dockyard workers. Nature (London). 1979.-V.277.-P.531−534. 94. Hsu Т. е., Cherry L.M. and Samaan N.A. Differential mutagen susceptibility in cultured lymphocytes of normal individuals and cancer patients. Cancer Genetics and Cytogenetics. 1985. V. 17. P.307−313.

93. Galloway S.M., Berry P.K., Nichols W.W., Wolman S.R., Soper K.A., Stolley P.D. and Archer P. Chromosome aberrations in individuals occupationally exposed to ethylene oxide, and in a large control population. Mutation Research. 1986. V.170. p.55−74.

94. Ganguly B.B. Cell division, chromosomal damage and micronucleus formation in peripheral lymphocytes of healthy donors: related to donors age. Mutation Research. 1993. V 2 9 5 P 135−148.

95. Gundy S. and Varga L.P. Chromosomal aberrations in healthy persons. Mutation Research. 1983. V. 120. P. 187−191.

96. Holdsworth D., Tawn E.J. and Lawson A.W. Young people in Seascale cytogenetic survey. Journal Radiology Protection. 1990. V.IO. № 1. P. 155−156.

97. Ivanov В., Praskova L., Mileva M., Bulanova M. and Georgieva I. Spontaneous chromosomal aberration level in human peripheral lymphocytes. Mutation Research. 1978. V.52. p.421 -426.

98. International Atomic Energy Agency (IAEA). Biological dosimetry: blood Chromosomal aberration analysis for the dose assessment. Technical Report Series № 260. 1.

100. Jong G., Van Sittert N.J. and Natarajan A.T. Cytogenetic monitoring of industrial populations potentially exposed to genotoxic chemicals and of control populations. Mutation Research. 1988. V.204. p.451−464.

101. Kandar M.Z. and Bahari LB. Radiation-induced chromosomal aberrations among TENORM workers: amangand ilmenite-processing-workers of Malaysia. Mutation Research. 1995. V.351. p.157−161.

102. Kasuba V. Sentija K., Garaj-Vrhovac V. and Fucic A. Chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from control individuals. Mutation Research. 1995. V.346. P. 187−193.

103. Koksal G., Pala F.S. and Dalci D.O. In vitro dose-response curve for chromosome aberrations induced in human lymphocytes by Co y-radiation. Mutation Research. 1995. V.329. P.57−61.

104. Kucerova M., Anderson A.J.B., Buckton K.E. and Evans H.J. X-ray-induced chromosome aberrations in human peripheral blood leucocytes: the low levels of exposure in vitro. International Journal Radiation Biology. 1972. V.21. № 4.-P.389−396.

105. Langlands A.O., Smith P.G., Buckton K.E., Woodcock G.E. and McLelland J. Chromosome damage induced by radiation. Nature (London). 1968. V.218.-P.133−1135.

106. Lazutka J.R., Lekevicius R., Dedonyte V., Maciuleviciute-Gervers L., Mierauskiene J., Rudaitiene S. and Slapsyte G. Chromosomal aberrations and sister-chromatid exchanges in Lithuanian populations: effects of occupational and environmental exposures. Mutation Research. 1999. V.445. P.225 239.

107. Leonard A., Decat G., Leonard E.D. and Mortelmans J. The chromosomal radiosensitivity of lymphocytes from the chimpanzee (Pan troglodytes). II Mutation Research. 1977. V.45. p.69.

108. Leonard A., Deknudt Gh., Leonard E.D. and Decat G. Chromosome aberrations in employees from fossil-fueled and nuclear-power plants. Mutation Research. 1984. V.138. P.205−212.

109. Leonard A, Baltus L., Leonard E.D., Gerber G.B., Richard F. and Wambersie A. Dose-effect relationship for in vivo and in vitro induction of dicentric aberrations in blood lymphocytes of children. Radiation Research. 1995. V.141.-P.95−98.

110. Littlefield L.G., Kleinerman R.A., Sayer A.M. et al. Chromosome aberrations in lymphocytes biomonitors of radiations exposure. New Horizons in Biological Dosimetry. 1991. Wiley-Liss. P.3 87−397.

111. Lloyd D.C., Purrott R. J, Dolphin G.W., Bolton D., Edwards A.A. and С о ф M.J. The relationship between chromosome aberrations and low LET radiation dose to human lymphocytes. International Journal Radiation Biology. 1975. -V.28.-№l.-P.75−90.

112. Lloyd D.C., Purrot R.J. and Reader E.J. The incidence of unstable chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from unirradiated and.

113. Lloyd D. C, Edwards A.A. and Prosser J.S. Chromosome aberrations induced in human lymphocytes by in vitro acute X and у radiation. Radiation Protection Dosimetry. 1986. V.15. № 2. P.83−88.

114. Lloyd D. C, Edwards A.A., Leonard A., Deknudt Gh., Natarajan A., Obe G., Palitti F., Tanzarella С and Tawn E.J. Frequencies of chromosomal aberrations induced in human lymphocytes by low doses X-rays. International Journal Radiation Biology. 1988. -V.

116. Lloyd D. C, Edwards A.A., Leonard A., et al. Chromosomal aberrations in human lymphocytes induced in vivo by very low doses of X-rays. International Journal Radiation Biology. 1992. -V.61. J23. -P.335−343.

117. Lloyd D. C and Sevankaev A.V. Biological dosimetry for persons irradiated by the Chemobyl accident. Experimental collaboration project №.

118. Luxembourg: Office for Official Publications of the European Communities. 1996.

119. Maznik N.A., Vinnikov V.A., Lloyd D.C. and Edwards A.A. Chromosomal dosimetry for some groups of evacuees from Prypiat and Ukrainian liquidators at Chemobyl, Radiation Protection Dosimetry. 1997. V.74 № 1. P.5−11.

120. Mikhalevich L.S. Monitoring of Cytogenetic Damages in Peripheral Lymphocytes of Children Living in Radiocontaminated Areas of Belarus. Research Activities about the Radiological Consequences of the Chemobyl NPS.

122. Moorhead P. S., Nowell P. C, Mellman W.J., et al. Chromosome preparations of leukocytes cultured from human peripheral blood. Experimental Cell Research.- I960.-V.20.-P.613−616. 122, Muramatsu S. and Maruyama T. Chromosome aberrations in human lymphocytes after irradiation with NIRS-Cyclotron fast neutrons in vitro. Nippon Acta Radiology. 1977. V.37. p.995−997. 123-Natarajan A.T., Balajee A.S., Boei J.J.W.A. et al. International Journal Radiation Biology. 1994. V.66. 5. P.615−623.

123. Norman A., Ottoman R.E., Sasaki M.S. and Veomett A.B. The frequency of dicentrics in human leukocytes irradiated in vivo and in vitro. Radiology. 1964.-V.83.-P.108−110.

124. Norman A. and Sasaki M.S. Chromosome aberrations in human lymphocytes. International Journal Radiation Biology. 1966. V.U. P.321−328.

125. Perry P. and Wolf S. New Giemsa method for differential staining of sister chromatids. //Nature. 1974. V.251. P.156−158.

126. Peterson E. PIRLS: Poisson Iteratively Reweighted Least Squares Computer Program for Additive, Multiplicative, Power and Non-linear Models. 1997. http:/www.stat.ucla.edu/joumals/jss/v02/i05.

127. Pohl-Ruling J.O., Haas A., Brogger G., Obe G., Lettner H., Daschil F., Atzmuller C, Lloyd D., Kubiak R. and Natarajan A.T. The effect on.

128. Preston, R.L., Breven, J.G. and Jones, K.P. Radiation-induced chromosome aberrations in Chinese hamster leukocytes. A comparison of in vivo and in vitro exposures. International Journal of Radiation Biology. 1972. V.21. P.397−400.

129. Ramalho A.T., Costa M.L.P. and Oliveira S. Conventional radiationbiological dosimetry using frequencies of unstable chromosome aberrations. Mutation Research. 1998. V.404. P.97−100. 131. Roy L., Sorokine-Durm I. and Voisin P. Comparison between fluorescence in situ hybridization and conventional cytogenetic dicentric scoring: a first-step validation for the use of FISH in biological dosimetry. International Journal Radiation Biology. 1996. V.70. № 6. P.665−669.

130. Sasaki M.S., Ottoman R.E. and Norman A. Radiation-induced chromosome aberrations in man. Radiology. 1963. V.81. P.652−656.

131. Sasaki M.S. and Miyata H. Biological dosimetry in atomic bomb survivors. Nature. 1968. V. 220.-№ 173.-P.l 189−1193.

132. Schneider G.J., Chone B. And Blonnigne T. Chromosomal aberrations in a radiation accident. Radiation Research. 1969. V.40. P.613−617.

133. Schmid E. and Bauchinger M. Comparison of the chromosome damage and its dose response after medical whole-body exposure to Co gamma rays and.

134. Schmid E., Bauchinger M. and Hug O. Chromosome aberrationen menschlicher Lymphocyten nach Rontgenbestrahlung in vitro. Mutation Research.- 1972.-V.16.-P.307−317.

135. Schmid E., Bauchinger M. and Mergenthaler W. Analysis of the time relationship for the induction of X-ray induced primary breaks in the formation of dicentric chromosomes. International Journal Radiation Biology. 1976. V.30.-P.339−346.

136. Scott D. and Decat G. Relation between cell cycle and yield of aberration observed in irradiated human lymphocytes. Nature. 1979. V.21. № 570. P.756−758.

137. Servomaa A., Ermakov I. et al. A topographically and anatomically unified phantom model for organ dose determination in radiation hygiene. STUKA87. 1.

139. Sevankaev A.V., Lloyd D.C., Potetnya O.I. et al. Chromosomal aberrations in lymphocytes of residents of areas contaminated by radioactive discharges from the Chernobyl accident. Radiation Protection Dosimetry. 1995. V.58. -№ 4.-P.247−254.

140. Shadley J.D. Chromosomal adaptive response in human lymphocytes. Radiation Research Society. 1994. V. 138. P.9−12.

141. Shevchenko V.A., Snigiryova G.P. and Rubanovich A.V. Estimation of Absorbed Doses on the Basis of Cytogenetic Methods. Research Activities about the Radiological Consequences of the Chernobyl NFS Accident and Social Activities to Assist the Sufferers by the Accident. Eds. by T. Imanaka. 1988.-Kyoto.-P.216−222.

142. Silberstein E.B., Ewing C.J., Bahr G.K. and Kereiakes J.G. The human lymphocyte as a radiobiological dosimeter after total body irradiation. Radiation Research. 1974. V.59. P.658−664.

143. Stephan G. and Oestreicher U. An increased fi-equency of structural chromosome aberrations in person present in the vicinity of Chernobyl during and after reactor accident. Is this effect caused by Radiation exposure? Mutation Res. 1989. V.223. P.7−12.

144. Stephan G. and Oestreicher U. Chromosome investigation of individuals living in areas of Southern Germany contaminated by fallout from the Chernobyl reactor accident. Mutation. Res. 1993. V.319. P.189−196.

145. Thierens H., Vral A., De Ridder L., Touil N., Kirsch-Volders M., Lambert V. and Laurent C. Inter-laboratory comparison of cytogenetic endpoints for the biomonitoring of radiological workers. International Journal Radiation Biology. 1999. V.75. № 1. P.23−34.

146. Tonomura A., Kishi K. and Saito F. Radiation-induced Chromosome Damage in Man. Eds. by T. Ishihara and M.S. Sasaki. 1.

148. Venkatachalam P., Solomon F.D.P., Mohankumar M.N., Prabhu B.K., Gajendiran N., Kathiresan A. and Jeevanram R.K. Higher frequency of dicentrics and micronuclei in peripheral blood lymphocytes of cancer patients. Mutation Research. 1999a. V.425. p. 1−8.

149. Venkatachalam P., Solomon F.P.D., Prabhu B.K., Mohankumar M.N., Gajendiran N. and Jeevanram R. K, Estimation of dose in cancer patients treated with fractionated radiotherapy using translocation, dicentrics and micronuclei frequency in peripheral blood lymphocytes. Mutation Research. 1999b. V.429.-P.1−12.

150. Vulpis N., 8сафа G. and Tognacci L. Chromosome aberrations as a dosimetric technique for fission neutrons over the dose-range 0,2−50 Rad. International Journal Radiation Biology. 1978. V.33. p.301−306.

151. Wang Z., Boice J.D., Wei L., Beebe G.W., Zha Y., Kaplan M.M., Tao Z., Maxon III H.R., Zhang S., Schneider A.B., Tan В., Wesseler T.A., Chen D., Ershow A.G., Kleinerman R.A., Littlefield L.G. and Preston D. Thyroid nodularity and chromosome aberrations among women in areas of high background radiation in China. Journal National Cancer Institute. 1990. V.82.-Ko6.

152. West C M Invited review: Intrinsic radiosensitivity as a predictor of patient response to radiotherapy. The British Journal of Radiology. 1995. V.68. P.827−837.

153. Ziemba-Zoltowska В., Bocian E., Rosiek O. and Sablinski J. Chromosome aberrations induced by low doses X-rays in human lymphocytes in vitro. International Journal Radiation Biology. 1980. V.37. № 2. P.231−236.