Количественное определение. 
Характеристика производных антрацена

Все методы количественного определения антраценпроизводных в сырье основаны на отделении свободных агликонов после кислотного гидролиза. Агликоны экстрагируют в органический растворитель и определяют различными методами.

1. Фотоэлектроколориметрический метод.

Основан способности окрашенных фенолятов поглощать свет при длине волны 530−540 нм. Предложен в 1957 г. Аутергоффом (Германия), модифицирован А. С. Романовой и А. И.. Баньковским (НПО «ВИЛАР», 1965). Аутергофф предложил гидролиз и экстракцию агликонов объединить в одну стадию кипячением навески сырья с ледяной уксусной кислотой и с последующей экстракцией диэтиловым эфиром.

Стадии определения суммы производных антрацена:

• 1- гидролиз антраценпроизводных и экстракция агликонов из сырья;
• 2- получение окрашенных солей

Эфирное извлечение обрабатывают в делительной воронке отдельными порциями щелочно-аммиачного раствора (5% раствор NаОН, содержащий 2% раствора аммиака). Антраценпроизводные в виде окрашенных фенолятов переходят в водную фазу (обрабатывают до тех пор, пока последняя порция щелочно-аммиачного не будет оставаться бесцветной).

3- окисление восстановленных форм антраценпроизводных Для перевода всех форм антраценпроизводных в окисленные, часть щелочно-аммиачного раствора фенолятов нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Восстановленные формы окисляются кислородом воздуха и вступают в реакцию со щелочно-аммиачным раствором, окраска становится интенсивнее (сырье крушины и ревеня). В сырье марены красильной окисление восстановленных форм проводят пергидролем.

4 — измерение оптической плотности окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра (ФЭК) при длине волны 530−540 нм (зеленый фильтр).

Содержание антраценпроизводных в сырье (%) рассчитывают по калибровочному графику, построенному по кобальта хлориду (СоС1₂ в пересчете на истизин (хризацин).

Фотоэлектроколориметрический метод рекомендован ГФ-ХI для определения содержания (%)антраценпроизводных в сырье крушины, ревеня, марены красильной. В корневищах и корнях марены красильной по ФС регламентируется определение связанных производных антрацена.

Количественное содержание связанных производных антрацена определяют вычитанием количества свободных производных антрацена (агликонов) из суммы производных антрацена.

При определение свободных производных антрацена отсутствует стадия гидролиза антрагликозидов. Агликоны извлекают из сырья эфиром, получают окрашенные феноляты, окисляют восстановленные формы пергидролем, определяют оптическую плотность окрашенных фенолятов по калибровочному графику, построенному покобальта хлориду, рассчитывают содержание свободных производных антрацена в сырье марены красильной.

Методика определения. [2].

• 1) 0,05 г измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 7,5 мл ледяной уксусной кислоты и смесь нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин.
• 2) В охлажденную колбу добавляют через холодильник 30 мл эфира и кипятят на водяной бане 15 мин. Затем извлечение охлаждают, фильтруют через вату в делительную воронку вместимостью 300 мл и вату промывают 20 мл эфира .
• 3) Вату переносят обратно в колбу, прибавляют 30 мл эфира и кипятят 10 мин. Охлажденное эфирное извлечение фильтруют через вату в ту же делительную воронку. Колбу дважды ополаскивают эфиром по 10 мл через ту же вату.
• 4) К объединенным извлечениям осторожно, по стенкам прибавляют 100мл щелочно-аммиачного раствора и осторожно взбалтывают 5−7 мин, охлаждая воронку под струей холодной воды.
• 5) Прозрачный красный нижний слой сливают в мерную колбу вместимостью 250 мл, а эфирный слой обрабатывают порциями по 20 мл щелочно-аммиачного раствора до прекращения окрашивания жидкости, сливают окрашенные растворы в ту же мерную колбу и доводят объем раствора в колбе щелочно-аммиачным раствором до метки.
• 6) 25 мл полученного раствора помещают в колбу и нагревают 15 мин на кипящей водяной бане с обратным холодильником. После охлаждения измеряют оптическую плотность раствора на ФЭК при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, в качестве раствора сравнения использовать щелочно-аммиачный раствор.

Формула расчета антраценпроизводных:

2. Спектрофотометрический метод.

Этим методом определяют содержание антраценпроизводных в листьях сенны.

Основные стадии метода:

• — экстракцию сеннозидов проводят водой при нагревании;
• — водное извлечение очищают от смолистых веществ;
• — окисление восстановленных форм проводят с помощью FeCl₃
• — гидролиз гликозидов антрахинонов проводят 50%-ным раствором серной кислоты;
• — оптическую плотность окрашенных растворов измеряют с помощью спектрофотометра при длине волны 523 нм;
• — содержание суммы производных антрацена в пересчете на хризофанол вычисляют по калибровочному графику, построенному покобальта хлориду.