Метаболический фонд свободных аминокислот у беременных и его особенности при мутациях гена фенилаланингидроксилазы
Таким образом, аминокислотный спектр сыворотки крови беременных женщин, гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ, отличается от спектра облигатных гетерозигот как по количественному содержанию ряда нейтральных и гидрофобных аминокислот, так и по характеру их корреляционных взаимосвязей. Подобные изменения аминокислотного спектра могут зависеть от следующих причин: во-первых, во время… Читать ещё >
Содержание
- СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
- Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 1. 1. Современная классификация аминокислот
- 1. 2. Химические свойства аминокислот
- 1. 3. Биосинтез заменимых аминокислот
- 1. 4. Метаболизм аминокислот в организме человека
- 1. 5. Содержание аминокислот в плазме крови здорового человека
- 1. 6. Изменения аминокислотного спектра крови при беременности
- 1. 7. Наследственное нарушение обмена фенилаланина
- 1. 8. Выявление гетерозиготного носительства фенижетонурии
- 1. 9. Особенности обмена фенилаланина, у беременных женщин
- Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- 2. 1. Характеристика изучаемых выборок и программ исследования
- 2. 2. Генеалогический метод
- 2. 3. Метод анкетирования
- 2. 4. Флюорометрический метод исследования
- 2. 5. Метод ионообменной хроматографии
- 2. 6. Методы статистической обработки
- 2. 6. 1. Дискриминантный анализ
- 2. 6. 2. Кластерный анализ
- 3. 1. Особенности аминокислотного спектра сыворотки крови у небеременных женщин
- 3. 2. Обсуждение
- 4. 1. Изучение аминокислотного спектра сыворотки крови у гомозиготных и гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы
- 4. 2. Обсуждение
- 5. 1. Уровень содержания фенилаланина в крови на различных сроках беременности
- 5. 2. Обсуждение
- 6. 1. Сравнительный анализ количественного содержания свободных аминокислот сыворотки крови у женщин в разных триместрах беременности
- 6. 2. Многомерный анализ количественной представительности свободных аминокислот в разных триместрах беременности
- 6. 3. Обсуждение
Глава 7. Сравнительный анализ количественной представительности свободных аминокислот у беременных женщин с различным содержанием фенилаланина в крови и гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы.
7.1. Изучение вариабельности количественных показателей аминокислотного спектра у беременных женщин с различным содержанием фенилаланина в крови.,.
7.2. Основные закономерности взаимного варьирования количественного содержания свободных аминокислот у беременных женщин с различным уровнем фенилаланина в крови.
7.3. Аминокислотный спектр сыворотки крови у гетерозиготных носителей фенилкетонурии во время беременности: количественная представительность и характеристика взаимосвязей.
7.4. Обсуждение.
Метаболический фонд свободных аминокислот у беременных и его особенности при мутациях гена фенилаланингидроксилазы (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Метаболический фонд свободных аминокислот является важным показателем обменных процессов. Формируясь за счет поступления из эк-зои эндогенных источников, участвуя в анаи катаболических процессах, он характеризуется относительным постоянством во взрослом организме.
Возникновение и течение беременности вызывает ферментативные и гормональные сдвиги, ведет к изменению всех видов метаболизма, и прежде всего белкового и аминокислотного обменов. Каждое стойкое изменение в метаболическом фонде свободных аминокислот в организме матери отражается на интенсивности процессов синтеза тканевых белков плода, поэтому изучение особенностей обмена свободных аминокислот крови при беременности представляет научно-теоретический и практический интерес [ 112, 113].
Как правило, стойкие и глубокие нарушения метаболических процессов возникают при носительстве беременными женщинами мутантных генов, вызывающих наследственные нарушения обмена. При этом, они проявляются не только у гомозигот, но и у гетерозиготных носителей.
Одним из таких распространенных наследственных аутосомно-рецессивных дефектов обмена аминокислот является фенилкетонурия (ФКУ), которая встречается в России с частотой 1: 8−10 ООО человек. В ее основе лежит генетически детерминированное нарушение реакции гидро-ксилирования фенилаланина (ФЕН) в тирозин (ТИР). Эта реакция осуществляется фенилаланингидроксилазной системой печени (ФАГ — системой), основным ферментом которой является фенилаланин — 4 — гидрокси-лаза (ФАГ). Ген, кодирующий фермент, располагается в длинном плече 12 хромосомы [35]. Все дефекты развития при фенижетонурии обусловлены высокими концентрациями аминокислоты фенилаланин и продуктами ее метаболизма.
В современной научной литературе накоплен большой фактический материал о неблагоприятном влиянии высоких концентраций фени-лаланина в крови матери (гомозиготы по гену ФАГ) на плод при материнской фенижетонурии [4, 68, 69, 85]. Около 1/3 детей, рожденных этими женщинами, страдают олигофренией, сочетающейся с различными аномалиями, не связанными с нарушениями обмена. У них наблюдаются многочисленные дефекты развития: до 12% детей страдают врожденными пороками сердечно-сосудистой системы, до 40% - внутриутробной задержкой роста, до 73% - микроцефалией [4, 68, 69, 78, 85].
Есть все основания полагать, что гетерозиготное носительство му-тантных генов беременными женщинами может рассматриваться как проявление «материнского эффекта», оказывающего влияние на развитие плода. Имеются сообщения о поражении центральной нервной системы и нарушении процессов внутриутробного развития у детей, не имеющих му-тантных генов фенилаланингидроксилазной системы, но рожденных гетерозиготными по этим генам матерями (Kutter С., 1979).
Декомпенсация скрытого дефекта обмена фенилаланина у матери в первом триместре беременности может приводить к повышению его уровня в сыворотке крови выше 10 мг%. Предполагается, что именно эта временная гиперфенилаланинемия может быть причиной нарушения развития плода [4, 69].
В доступной научной литературе отсутствуют данные, касающиеся изменений количественного содержания метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности, полученных с использованием новейших методов биохимического анализа. Не получили должного освещения вопросы комплексной оценки метаболического фонда свободных аминокислот у гетерозиготных носителей гена ФАГ во время беременности. Это, а также научная и медико-социальная значимость проблемы необходимость проведения настоящего исследования. определили.
Цель исследования.
Изучить количественное содержание метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности и оценить связь его вариабельности с уровнем фенилаланина.
Задачи исследования.
1. Изучить количественное содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у небеременных женщин в норме и оценить особенности их взаимной вариабельности.
2. Оценить влияние гетерозиготного носительства по генам фенила-ланингидроксилазной системы на состояние метаболического фонда свободных аминокислот.
3. Изучить вариабельность содержания фенилаланина в организме женщин на различных сроках беременности в рамках пилотной программы скрининга.
4. Оценить количественное содержание свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности в зависимости от уровня фенилаланина.
5. Выявить влияние беременности на изменение метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы.
Научная новизна работы.
Впервые, с использованием методов ионообменной хроматографии и многомерного анализа изучено количественное содержание свободных аминокислот сыворотки крови и их взаимное варьирование у небеременных и беременных (на различных сроках) женщин.
В рамках пилотной программы скрининга впервые получены количественные характеристики содержания фенилаланина в крови женщин на различных сроках беременности.
Установлены изменения в состоянии метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови, вызванные развивающейся беременностью, в первом и во втором триместрах.
Доказано влияние гетерозиготного носительства (по гену фенила-ланингидроксилазы) во время беременности на состояние метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови.
Практическая значимость.
Впервые с использованием метода ионообменной хроматографии получены новые данные о количественном содержании свободных аминокислот сыворотки крови у небеременных женщин и на разных сроках физиологической беременности, которые могут рассматриваться в качестве новых нормативов количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови.
Уровень содержания фенилаланина в сыворотке крови во время беременности (1,2 мг% и выше) может рассматриваться как один из критериев отбора женщин в группу «потенциальных гетерозигот» по мутациям гена ФАГ при проведении массовых скринингов беременных.
Сведения о вариабельности аминокислотного спектра сыворотки крови больных фенилкетонурией, женщин гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы во время беременности могут быть использованы в работе медико-генетических консультаций, акушерскогинекологических служб при осуществлении контроля за течением беременности и состоянием метаболических процессов у беременных.
На основе полученных результатов возможна разработка научно-методических рекомендаций при изучении курсов биохимии, медицинской, клинической и биохимической генетики, акушерства и гинекологии в высшей школе.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Состояние физиологической беременности вызывает у женщин изменения количественного содержания метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови, проявляющиеся в снижении концентраций валина, лейцина, лизина, глицина в первом триместре беременностифенилаланина, гистидина, цистеина во втором триместре.
2. У женщин, облигатных гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы (родивших больных ФКУ), в результате нарушения реакции гидроксилирования фенилаланина, имеет место изменение метаболического фонда свободных аминокислот, связанное с увеличением количественного содержания кислых (глутаминовая, аспарагиновая) и нейтральных (треонин, глицин) аминокислот в сыворотке крови.
3. Концентрация фенилаланина в крови беременных женщин, превышающая 1,2 мг%, может рассматриваться как основание для отбора беременных женщин в группу «потенциальных гетерозигот» по мутантному гену фенилаланингидроксилазы.
4. Возникновение и течение беременности у женщин, гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы, оказывает влияние на состояние метаболического фонда свободных аминокислот. При этом имеет место снижение количественного содержания треонина, глицина, аланина и изолейцина в сыворотке крови.
Апробация работы и публикации.
Материалы диссертационной работы представлялись на конференциях молодых ученых КГМУ (Курск, 1998, 1999) и научных конференциях И преподавательского состава КГПУ (Курск, 1998 и 1999 гг.), Республиканской конференции студентов и молодых ученых медицинских вузов России (Самара, 1999), межкафедральных заседаниях сотрудников КГПУ и КГМУ (Курск, 1999). По материалам диссертации опубликовано 9 работ.
Объем и структура диссертации.
ВЫВОДЫ.
1. Количественный состав аминокислотного спектра сыворотки крови у женщин представлен в большей степени гидрофобными и нейтральными аминокислотами. Среди гидрофобных аминокислот высокое содержание было характерно для аланина (2,56 ± 0,3 мг%), нейтральных — треонина (2,47 ± 0,42 мг%), основных — лизина (2,08 ± 0,26 мг%) и аргинина (1,93 ± 0,23 мг%).
2. Физиологическая беременность ведет к изменениям метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови: в первом триместре беременности наблюдается снижение количественного содержания валина (0,92 ± 0,12 мг%), лейцина (0,70 ± 0,14 мг%), лизина (1,03 ± 0,20 мг%), глицина (0,66 ± 0,12 мг%) — во втором — фенилаланина (0,6 ± 0, 04 мг%), гистидина (1,65 ± 0,18 мг%) и цистеина (0,87 ± 0,09 мг%).
3. Облигатное гетерозиготное носительство мутации гена фенилала-нингидроксилазы (матери, родившие детей, больных фенилкетонурией), в сравнении с женщинами, имеющими неизмененный ген, ведет к нарушениям фонда свободных аминокислот, проявляющимся в увеличении количественного содержания глутаминовой (1,34 ± 0,47 мг%) и аспарагиновой кислот (0,47 ± 0,04 мг%), треонина (4,59 ± 0,44 мг%), глицина (2,04 ± 0,19 мг%). При этом, увеличение количественного содержания глутаминовой кислоты и треонина ведет к изменениям корреляционных взаимосвязей между ними.
4. Содержание фенилаланина у облигатных гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы (матерей, родивших детей, больных фенилкетонурией) и у беременных гетерозигот в среднем составило 1,25 ± 0,12 мг% и 1,21 ± 0,24 мг% (соответственно). Полученные концентрации могут рассматриваться как нижние границы основания для отбора беременных.
142 женщин в группы «потенциальных гетерозигот» по мутантному гену фенилаланингидроксилазы.
5. При гетерозиготном носительстве мутантного гена фенилаланингидроксилазы во время беременности (по сравнению с беременными, несущими нормальный ген) имеет место увеличение количественной представительности аланина (2,56 ± 0,18 мг%), валина (1,77 ±0,16 мг%), метионина (0,68 ±0,16 мг%), тирозина (0,91 ± 0,16 мг%), фенилаланина (1,21 ±0,24 мг%), и снижение содержания треонина (1,81 ± 0,19 мг%) в сыворотке крови.
6. Развитие беременности у гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы, влечет за собой изменения метаболического фонда свободных аминокислот, проявляющиеся в снижении содержания треонина (1,81 ±0,19 мг%), глицина (0,81 ± 0,07 мг%), аланина и изолейцина (0,43 ± 0,04 мг%) в сыворотке крови по сравнению с соответствующими показателями у небеременных гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
.
Весьма важным показателем обмена бежов является уровень свободных аминокислот в крови и тканях, так называемый метаболический фонд организма. Этот запас аминокислот образуется в результате усвоения пищевых бежов, в процессе распада и обновления протеинов органов и тканей [113]. Свободные аминокислоты играют значительную роль в деятельности живого организма. Они являются материалом для синтеза белка и ряда биологически активных веществ. Некоторые из них выполняют самостоятельные функции в метаболизме: включаются в энергетический обмен, участвуют в реакциях связывания и освобождения аммиака, поддерживают определенное состояние клеточных мембран и регулируют ионное равновесие нервной ткани [96].
При ряде наследственных заболеваний обмена аминокислот происходят глубокие нарушения в ходе анаи катаболических процессов, количественное содержание отдельных аминокислот в метаболическом фонде организма существенно изменяется. ФениЖетонурия — наиболее часто встречающееся аутосомно-рецессивное заболевание, обусловленное наследственным дефектом фенилаланингидроксилазы, приводящее при отсутствии своевременной терапии к тяжелой умственной неполноценности, составляя около 1% контингента всех умственно отсталых больных [35, 69]. Обнаруживается у одного из 10 ООО новорожденных. Все аномалии развития при фенижетонурии обусловлены высокими концентрациями фенилаланина и накоплением его метаболитов в тканях и биологических жидкостях.
В течение беременности у гетерозиготных носителей фенижетонурии может происходить декомпенсация скрытого дефекта, которая вызывает стойкое повышение концентрации аминокислоты в крови [4, 17, 37]. Следовательно, изучение особенностей метаболизма свободных аминокислот сыворотки крови у женщин во время беременности представляет теоретический и практический интерес, так как каждое функциональное изменение в белковом обмене матери отражается на ходе эмбриогенеза. Условия созревания плода, биохимические превращения в развивающемся организме в значительной степени определяют его состояние в последующие периоды жизни.
В современной научной литературе накоплен большой фактический материал, свидетельствующий о патогенном влиянии гиперфенилаланине-мии матери на развивающийся плод. Об этом свидетельствуют данные, полученные Блюминой М. Г. (1972), Koch R. и соавтр. (1986), Fish и соавтр. (1993), Hyanek J. и соавтр. (1996) при изучении случаев материнской фе-нилкетонурии. Несмотря на довольно широкое изучение проблемы, в научной литературе не получили должного освещения вопросы, связанные с изучением вариабельности содержания фенилаланина у женщин на различных сроках беременности и ее взаимосвязи с другими показателями аминокислотного спектраотражающие количественное содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у щгерозиготных носителей фе-нижетонурии во время беременности, а так же возможные пути выявления носительства мутантного гена с использованием современных биохимических методов.
Изложенные факты определили цель настоящей работы: изучить количественное содержание метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности и оценить связь его вариабельности с уровнем фенилаланина в крови.
В процессе исследования решались следующие задачи:
1. Изучалось количественное содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у небеременных женщин и оценивались особенности их взаимной вариабельности.
2. Оценивалось влияние гетерозиготного носительства по генам фе-нилаланингидроксилазной системы на состояние метаболического фонда свободных аминокислот.
3. Изучалась вариабельность содержания фенилаланина в организме женщин на различных сроках беременности в рамках пилотной программы скрининга.
4. Оценивалось количественное содержание свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности в зависимости от уровня фенилаланина.
5. Выявлялось влияние беременности на изменение метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы.
Материалом исследования послужили образцы цельной крови 4739 беременных женщин, прошедших через пилотную программу скрининга.
Аминокислотный спектр сыворотки крови изучался у 72 беременных с уровнем ФЕН в крови, равным или ниже 1,1 мг%- 70 беременных женщин с уровнем фенилаланина в крови, равным более 1,2 мг%- 23 небеременных женщин, в возрасте от 16 до 42 лет- 19 гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы во время беременности- 10 девушек, больных ФКУ, и их матерей. Всего по комплексной программе обследовано 204 человека.
Методы, использованные в настоящей работе, были адекватны поставленным задачам. В исследовании применялись биохимические методы: флюорометрическое определение уровня фенилаланина в цельной крови с использованием прибора «Р1иегоБсош И» (Финляндия), автоматическое определение аминокислотного спектра сыворотки крови методом ионообменной колоночной хроматографии на автоматическом анализаторе «АттосИготИ» (Венгрия) — генеалогический метод и метод анкетирования. Математическая обработка материала наряду с общепринятыми методами, включала применение методов многомерной статистики: кластерного и дискриминантного анализа.
Первоначальной задачей настоящей работы являлось изучение количественного содержания свободных аминокислот сыворотки крови у небеременных женщин и оценка их корреляционных взаимосвязей с использованием современных методов биохимического и математического анализа. Были обследованы 23 женщины (доноры) в возрасте от 19 до 37 лет. Качественный состав аминокислотного спектра сыворотки крови у всех женщин изучаемой выборки характеризовался выявлением на хромато-граммах 16 свободных аминокислот (разрешающая возможность прибора).
Соотношение заменимых и незаменимых аминокислот в сыворотке крови небеременных женщин существенно различалось между собой и составляло 38% для заменимых и 62% для незаменимых аминокислот. Было установлено, что представительность гидрофобных и нейтральных аминокислот составляет в совокупности 71% от всех изучаемых аминокислот. Низким содержанием в сыворотке крови характеризовались кислые аминокислоты — аспарагиновая и глутаминовая (4%).
В результате проведенного сравнительного анализа показателей количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови, определенных методом ионообменной хроматографии, и данных распределительной хроматографии на бумаге, полученных в 70-х годах отечественными исследователями [59, 111, 113], выявлены различия в содержании треонина, глутаминовой кислоты, аланина, лизина и аргинина. Полученные закономерности носили достоверный характер. Выявленные различия в результатах исследований могут быть связаны с более эффективным и современным методом выделения и количественного определения аминокислот, точной математической обработкой экспериментальных данных, примененными в нашей работе.
Многомерный анализ позволил определить и оценить степень и характер корреляционных взаимосвязей между количественным содержанием свободных аминокислот в сыворотке крови у небеременных женщин.
Максимальный уровень сопряженности отмечен между количественным содержанием изолейцина и метионина в сыворотке крови. ИЛЕ и МЕТ являются незаменимыми аминокислотами и поступают в организм человека с пищей. В результате их расщепления может образовываться ас-партат и другие промежуточные продукты, используемые в цикле лимонной кислоты для синтеза сукцинил-8-СоА и ацетилБ-СоА [81]. Высокая степень корреляционных взаимосвязей, отмечена между ФЕН и ТИР, СЕР и ТРЕ, и обусловлена их структурно-функциональными особенностями, участием в метаболизме белков и необходимостью постоянного обновления аминокислотного фонда организма человека за счет образования заменимых аминокислот из незаменимых, поступающих с пищей.
Фенилаланин является незаменимой аминокислотой, но его высокий уровень в тканях и плазме крови оказывает неблагоприятное воздействие на организм человека. Нами оценивались количественные показатели аминокислотного спектра сыворотки крови у десяти девушек, больных фенилкетонурией (пробандов), и их матерей, которые являются облигат-ными гетерозиготными носителями мутации гена фенилаланингидрокси-лазы. Уровень фенилаланина в крови пробандов характеризовался высокими значениями и варьировал в широких пределах, что обусловлено степенью тяжести заболевания и характером его клинического проявления. Выявленные закономерности согласуются с литературными данными [19, 22, 69].
Количественное содержание ФЕН в сыворотке крови больных ФКУ (8,04 мг%) почти в семь раз превысило идентичный показатель у матерей (1,25 мг%). Установлено, что высокое содержание фенилаланина у больных фенижетонурией связано с низкой концентрацией нейтральной аминокислоты — треонина.
При анализе стандартных статистик выявлено достоверное увеличение количественного содержания кислых (глутаминовой кислоты в два раза) и нейтральных аминокислот в группе облигатных гетерозиготных носителей по мутации гена ФАГ, в сравнении с контрольной выборкой женщин. Вероятно, что в результате увеличения количественного содержания фенилаланина и тирозина в организме гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ, обусловленного нарушением процесса гидроксилирования ФЕН в ТИР, может происходить повышение количественного содержания глутаминовой кислоты. Повышение концентрации треонина может вызывать повышение уровня глицина в сыворотке крови.
Проведенный многомерный анализ показал, что в группе гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ отмечена сопряженность содержания глутаминовой кислоты и треонина в сыворотке крови. Таким образом, увеличение количественного содержания глутаминовой кислоты и треонина у облигатных гетерозигот по мутации гена ФАГ, обусловливает нарушение корреляционных взаимосвязей между этими аминокислотами и изменение метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови. Вероятно, что у гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ из-за нарушения одного звена обмена, происходит его декомпенсация за счет образования ацетил-СоА для цикла лимонной кислоты (через пируват) из глицина, треонина, аспарагиновой и глутаминрвой кислот.
Уровень фенилаланина в сыворотке крови матерей пробандов составил 1,25 ± 0,12 мг% и был принят как основание для отбора женщин в отдельную группу «потенциальных гетерозигот» при проведении скрининга на гетерозиготное носительство фенилкетонурии. Концентрацию ФЕН, равную или ниже 1,1 мг%, использовали как норму содержания ФЕН в крови.
С 01.01.1997 г. по 01.01.1998 г. в рамках пилотной программы скрининга на базе МГК ОКБ № 1 г. Курска проводилось изучение количественного содержания фенилаланина в крови женщин на различных сроках беременности. Уровень аминокислоты определялся у всех беременных женщин г. Курска, ставших на учет в женскую консультацию, в каждом триместре. Концентрацию ФЕН в цельной крови женщин определяли натощак (более 12 часов после еды). По программе скрининга было обследовано 4739 беременных женщин в возрасте от 14 до 48 лет.
Концентрация фенилаланина в крови беременных женщин варьировала в пределах от 0,1 до 3,7 мг%: максимальная наблюдалась в третьем триместре (0,65 ± 0,01 мг%), а минимальная — во втором триместре беременности (0,61 ± 0,01 мг%). Достоверное снижение концентрации ФЕН отмечено во втором триместре беременности по сравнению с первым.
Уровень фенилаланина в крови, равный или превышающий 1,2 мг% наблюдался у 2,3% всех беременных, проходивших через скрининг.
В результате проведенного скрининга из числа беременных женщин, проходивших через скрининг, были сформированы две группы в зависимости от уровня фенилаланина в цельной крови:
1) Первую группу сформировали из 89 беременных женщин, у которых концентрация фенилаланина в крови превышала или составляла 1,2 мг%, как минимум при двух измерениях. По результатам молекулярно-генетической диагностики у 19 женщин из этой группы было выявлено гетерозиготное носительство мутации R408W 12 экзона гена ФАГ.
2) Вторая группа представляла выборку из 73 беременных женщин, у которых уровень фенилаланина не превышал 1,1 мг% в каждом триместре беременности. В результате ДНК-диагностики у одной женщины из этой группы было выявлено гетерозиготное носительство мутации R408W 12 экзона гена ФАГ.
Для решения задач исследования проведен сравнительный анализ количественного содержания свободных аминокислот у беременных второй группы и небеременных женщин (доноров). Установлено, что количественное содержание ряда свободных аминокислот в сыворотке крови беременных женщин по сравнению с их уровнем у небеременных снижается: в первом триместре беременности отмечено снижение концентраций глицина, валина, лейцина и лизинаво втором — уменьшение фенилаланина, гистидина, цистеина и увеличение метионина по сравнению с первым. Наблюдаемые различия достоверны. Основной причиной выявленной вариабельности количественных показателей аминокислот в сыворотке крови женщин при беременности, по сравнению с небеременными, может являться увеличение интенсивности аминокислотного метаболизма в организме матери вследствие процессов гистои органогенеза.
Количественные показатели аминокислотного спектра сыворотки крови беременных женщин, полученные нами, согласуются с литературными данными других исследователей [59, 87, 113], полученными методом хроматографии на бумаге. Данные, полученные в результате нашего исследования с применением ионообменной колоночной хроматографии, можно рекомендовать в качестве корректных стандартных показателей аминокислотного спектра сыворотки крови у небеременных женщин и во время беременности.
Для изучения взаимосвязи содержания свободных аминокислот от уровня ФЕН в крови был проведен сравнительный анализ между первой и второй группами. В результате было выявлено увеличение количественной представительности нейтральных и гидрофобных аминокислот в сыворотке крови у женщин с уровнем ФЕН в крови, равным или превышающим 1,2 мг%, по сравнению со второй группой беременных (ФЕН ниже или равен 1,1 мг%).
Во втором триместре беременности нами отмечено уменьшение уровня гистидина (почти в два раза) у беременных женщин с содержанием фенилаланина в крови, равным или более 1,2 мг%, по сравнению со второй группой (0,97 ± ОД 6 мг% и 1,65 ± 0,18 мг%, соответственно). Известно, что токсическое действие фенилаланина и недоокисленных продуктов его метаболизма может вызывать дефицит ряда основных аминокислот [24].
Аминокислотный спектр сыворотки крови у беременных женщин двух рассматриваемых выборок отличался не только по количественному содержанию отдельных аминокислот, но и по характеру их взаимного варьирования. Вероятно, более высокие концентрации глутаминовой кислоты, аланина, валина, метионина, лейцина, тирозина и фенилаланина влияют на степень и характер варьирования всех количественных показателей аминокислотного спектра у беременных женщин первой группы по сравнению со второй.
В рамках проводимого исследования проведено изучение количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ во время беременности. Полученные данные позволяют утверждать, что гетерозиготное носительство мутации гена фенилаланингидроксилазы проявляется у женщин во время беременности повышением количественной представительности фенилаланина в крови, которая, однако, не превышает установленных норм. У беременных женщин, гетерозиготных по мутации гена ФАГ, средний уровень ФЕН в сыворотке крови составил 1,21 ± 0,24 мг%.
Закономерности варьирования содержания фенилаланина у беременных гетерозигот по гену ФАГ, выявленные нами в результате настоящего исследования, согласуются с ранее полученными данными других авторов, но характеризуются более низкими значениями [22, 23]. Полученные значения содержания фенилаланина в крови могут быть использованы в качестве нормативных показателей при проведении массового обследования беременных женщин на гетерозиготное носительство фенил-кетонурии. Концентрацию ФЕН в крови, равную или выше 1,2 мг%, можно рассматривать как показание для включения беременной женщины в группу «потенциальных гетерозигот» для дальнейшего проведения моле-кулярно-генетической диагностики.
Сравнительный анализ аминокислотного спектра сыворотки крови у гетерозиготных носителей ФКУ во время беременности, в отличие от второй группы (беременные с уровнем ФЕН в крови, равным или ниже 1,1 мг%), выявил снижение концентрации треонина и увеличение — аланина, валина, метионина, фенилаланина и тирозина. Следовательно, у гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы во время беременности, как и у больных фенилкетонурией (глава 4), наблюдается повышенный уровень фенилаланина в сыворотке крови и низкая концентрация нейтральной аминокислоты — треонина.
Проведен сравнительный анализ стандартных статистик количественного содержания свободных аминокислот у женщин, гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы во время беременности и матерей, родивших детей больных ФКУ. Отмечено снижение уровня треонина, глицина, аланина и изолейцина в сыворотке крови у беременных гетерозигот по сравнению с облигатными гетерозиготами.
При этом, анализ дендрограммы матрицы множественных корреляций количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови беременных гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ выявил сопряженность концентраций треонина и метионина, глицина и серина, аланина, валина, лейцина и изолейцина. Треонин является предшественником глицина, серина, значит, уменьшение количественного содержания треонина в сыворотке крови может обусловливать и снижение концентрации глицина. Изолейцин, лейцин, аланин участвуют в синтезе ацетил-СоА. Кроме того, изолейцин, валин и метионин являются предшественниками сукцинил — Со А, используемого в цикле лимонной кислоты [79, 80].
Таким образом, аминокислотный спектр сыворотки крови беременных женщин, гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ, отличается от спектра облигатных гетерозигот как по количественному содержанию ряда нейтральных и гидрофобных аминокислот, так и по характеру их корреляционных взаимосвязей. Подобные изменения аминокислотного спектра могут зависеть от следующих причин: во-первых, во время физиологической беременности происходит снижение концентраций свободных аминокислот в сыворотке крови (глава 3) — во-вторых, у облигатных гетерозигот, выносивших и родивших гомозигот (детей, больных ФКУ) декомпенсация скрытого генетического дефекта происходила во время беременности и, вероятно, высокие концентрации ФЕН в крови развивавшегося плода вызвали деформацию всего метаболизма аминокислот и в организме матери.
У гетерозиготных носителей фенилкетонурии в двух рассматриваемых выборках нарушение обмена фенилаланина сопряжено с вариабельностью количественного содержания нейтральных (треонин, глицин) и гидрофобных (аланин, изолейцин) аминокислот. Учитывая, что многие авторы в своих классификациях [25, 132] относят аланин, валин, лейцин и изолейцин к нейтральным аминокислотам, можно говорить только о взаимозависимости нейтральных и ароматических аминокислот при фенилкетонурии и ее гетерозиготном носительстве.
Таким образом, результаты проведенного биохимического исследования показали, что применение современных методов исследования (флюорометрии и ионообменной хроматографии), позволяет значительно уменьшать процент ошибки при определении, фенилаланина в крови и получать более точные значения количественного содержания аминокислоты в крови. Установленные количественные показатели аминокислотного обмена можно рекомендовать в качестве корректных стандартных для проведения массового обследования беременных женщин на содержание фенилаланина в крови с целью выявления гетерозиготного носительства, пренатальной диагностики ФКУ и внедрения их в практику медико-генетического консультирования.
Список литературы
- Абросимова Н. А., Барашнев Ю. И., Сиванова Л. А., Некрасова И. И. Модификация метода микробиологического определения аминокислот в крови и моче// Лаб. дело 1974.- № 4.- С. 232−235.
- Азизян А.Л. Изменение обмена аминокислот при некоторых наследственных заболеваниях у детей с синдромом слабоумия. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук.-М., 1971.- 24 с.
- Анисимов A.A. Основы биохимии.- М.: Высшая школа, 1986.1. С. 299.
- Анненков Г. А. Генетическая гетерогенность фенижетонурии// Вопр. мед. химии, — 1982.- Т. 28, № 3.- С. 62−70.
- Аненнков Г. А., Сафронов Е. Е., Розовский И. С., Бахарев В. А. О возможности пренатальной диагностики фенилкетонурии// Акушерство и гинекология. -1981. № 11. — С. 25−27.
- Афанасьева Ю.И., Юрина H.A. Гистология.- М.: Медицина, 1989.-671 с.
- Бадалян Л.О. Детская неврология.-М.: Медицина, 1975.-С. 260.
- Байков А.Д., Ситниченко Е. И. Метод выявления гетерозиготного носительства при фенижетонурии// Лаб. дело. -1973. № 5. — С. 293−295.
- Баранов B.C. Молекулярная диагностика генных болезней в России: состояние и перспективы// Вестник РАМН.- 1993, № 9.- С. 2731.
- Барановская С.С. Молекулярно-генетический анализ фенилкетонурии в г. Санкт-Петербурге. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. биол. наук. М., 1996. — 25 с.
- И. Барановская С. С. Шевцов С.П., Максимова С. П. и соавтр. Спектр мутационных повреждений гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией г. Санкт-Петербурга// Докл. АН. 1995.-Т. 340.-№ 5.-С. 709−712.
- Барашнев Ю.И., Вельтищев Ю. Е. Наследственные болезни обмена веществ у детей. М.: Медицина, 1978. — 318 с.
- Березов Т.Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия.-М.: Медицина, 1990.-С. 28−37, 332−368.
- Бибилейшвили 3. Материалы к клинико-биохимической характеристике беременности, родов и послеродового периода. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук. Тбилиси, 1966.- 25 с.
- Биохимические исследования патологических процессов: сборник статей.- Рига: Зинатне, 1983.- С. 92−97.
- Биохимия наследственности./ Пер. с япон. Мышкиной С.И.- под. ред. Ларского Э. Г. М.: Медицина, 1979.
- Блюмина М.Г. Роль гетерозиготных женщин по гену фенилке-тонурии в происхождении спонтанных абортов и нарушениях внутриутробного развития плода.// Генетика. -1972. Т.8. — № 3 — С. 132−138.
- Блюмина М.Г. Спонтанные аборты у женщин-носительниц гена ФКУ// Акушерство и гинекология. 1972. — № 5. — С. 52−55.
- Блюмина М.Г. Фенотипический полиморфизм фенилкетонурии (психические и биохимические расстройства) и его возможные причины. Автореф. дис. на соискание уч. степ. док. мед. наук. М., 1973. — 53 с.
- Блюмина М.Г. Акушерские проблемы фенилкетонурии // Акушерство и гинекология. 1976. — № 12. — С. 54−56.
- Блюмина М.Г. Уровень фенилаланина в сыворотке крови у ге-терозигот по гену фенилкетонурии в условиях усиленного белкового катаболизма// Генетика. -1981. -Т.Н. № 5. — С.910−914.
- Блюмина М.Г., Ситниченко Е. И., Байков А. Д. К вопросу о генетической гетерогенности фенилкетонурии// Генетика. 1974. — Т. 10. -Вып. 6.-С. 147−155.
- Блюмина М.Г., Ситниченко Е. И. Концентрация фенилаланина в сыворотке крови больных фенижетонурией при различной тяжести заболевания// Генетика, — 1971.- Т. 7, № 4, — С. 143−148.
- Болезни нервной системы (руководство для врачей), том II.- М.: Медицина, 1995, — С. 275−276.
- Бохински Р. Современные воззрения в биохимии: Пер. с англ. -М.: Мир 1987.-529 с.
- Бочков Н.П., Захаров А. Ф., Иванов В. И. Медицинская генетика (руководство для врачей) // АМН СССР. М.: Медицина, 1984.- С. 186−189.
- Бочков Н.П. Клиническая генетика: Учебник. М.: Медицина, 1997.-288 с.
- Вельтищев Ю.Е., Ермолаев М. В., Ананенко A.A., Князев Ю. А. Обмен веществ у детей. М.: Медицина, 1983. — 463 с.
- Видершайн Г. Я. Некоторые проблемы и перспективы в изучении наследственных энзимопатий// Вопр. мед. химии.- 1982. № 3.- С. 22
- Викторова Т.В., Мурзабаева С. Ш., Карунас A.C. и соавтр. Мо-лекулярно-генетический анализ фенилкетонурии в Башкирии // Генетика. -1997. Т. 33, № 7. — С. 992−995.
- Второва В.Г., Савченко Т. Н., Мартыш Н. С., Кузнецова JI.B. Особенности бежового и аминокислотного спектра крови матери и плода при сахарном диабете// Педиатрия.-1980.- № 8.- С. 12−15.
- Высоцкий В.Г., Власова Т. В., Ушаков A.C., Шишкина С. К. Свободные аминокислоты плазмы крови при алиментарной белковой недостаточности у человека//Вопр. питания.- 1974,-№ 2.-С. 16−20.
- Глезерман Т. Б., Калмыкова Л. Г. Неврологическое и нейро-психологическое изучение гетерозигот по фенилкетонурии// Труды МНИИ психиатрии МЗ РСФСР.- 1975, — Т. 72.- С. 252−261.
- Григорьева Н.К. Фенотипические проявления фенилкетонурии у гомо- и гетерозиготных носителей// Генетика человека и патология: Материалы второй итоговой конференции мед. генетиков/ под. ред. В.П. Пузы-рева. Томск: Изд-во Том. Ун-та., 1992.- 246 с.
- Григорьева Н.К. Проявления гена фенилкетонурии у гетерозиготных носителей. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук.- М
- Дерябин В.Е. Многомерная биометрия для антропологов. М.: Изд-во Московского университета, 1983.-227 с.
- Диагностика гетерозиготного (скрытого) носительства гена фенилкетонурии в медико-генетических консультациях (методические рекомендации).- М: МЗ СССР, 1976. -28 с.
- Дьячкова А.Д., Лебедев Б. В. Некоторые показатели обмена фе-нилаланина и тирозина при фенижетонурии у детей// Вопросы охраны материнства и детства. 1969. -Т. 14. — № 7. — С. 29−32.
- Дьячкова А.Я., Лебедев Б. В. Нарушение обмена фенилаланина при фенилкетонурии// Журнал невропатологии и психиатрии имени С. С. Корсакова 1969. — Т. 69. — Вып 10. — С. 1588−1591.
- Дьячкова Л.Я., Лебедев Б. В. К вопросу об определении гетерозиготного носительства по гену фенилкетонурии// Педиатрия. 1969. — № 8. — С. 50−53.
- Дубинин Н.П. Общая генетика. М.: Наука, 1970.- С. 205−206.
- Дэвини Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды, белки: Пер. с англ.- М.: Мир, 1976, — С. 173−186.
- Дюга Г., Пенни К. Биоорганическая химия: Пер. с англ.-М.: Мир, 1983.-С. 26−103.
- Дюран Б., Оделя П. Кластерный анализ. М.: Статистика, 1977.38 с.
- Егорова А.И., Аксенова Н. М. Динамика содержания свободных аминокислот в сыворотке крови новорожденных детей с гемолитической болезнью// Вопр. охр. мат. и дет.- 1972, — № 1.- С. 87−88.
- Зайцева H.A. Формирование метаболического фонда свободных аминокислот тканей человека в раннем онтогенезе. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. биол. наук. Донецк, 1972.- 25 с.
- Западнкж В.И., Купраш Л. П., Заика М. У., Безверхая И. С. Аминокислоты в медицине. Киев: Здоров’я, 1982.- 200 с.
- Иващенко Т.Э., Белова Е. Г., Баранов B.C. Простой надежный метод детекции мутации R408W 12-го экзона гена фенилаланингидрокси-лазы в молекулярной диагностике фенилкетонурии// Генетика.-1993.-Т. 29. -№ 5. С. 862−865.
- Иверла К. Факторный анализ. Пер. с нем. М.: Статистика, 1980.- 398 с.
- Исмаилова С.А., Арипджанов К. А., Ниязов Э. Л. Аминокислотный спектр крови при переношенной беременности и нефропатии// Акуш. и гин.- 1973.- № 6.- С. 68−69.
- Калинина Л.В., Гусев Е. И. Наследственные болезни метаболизма и факоматозы. М.: Медицина, 1981.-248с.
- Козаренко Т.Д., Зуев С. Н., Муляр Н. Ф. Ионообменная хроматография аминокислот (теоретические основы и практика).- Новосибирск: Наука. Сибирское отделение, 1981. 159 с.
- Кон P.M., Рот К. С. Ранняя диагностика болезней обмена веществ. М.: Медицина, 1986.- С. 332−337.
- Корабелыцикова Н.И. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови и экскреции их с мочой у здоровых женщин при нормально протекающей беременности// Акушерство и гинекология. 1970. -№ 5.-С. 58−61.
- Корабелыцикова Н.И. К вопросу о расстройствах обмена аминокислот сыворотки крови у беременных женщин с ревматическими пороками сердца// Вопр. ревматизма.-1970.-№ 4.- С. 43−48.
- Корабелыцикова Н.И. Ревматизм, его течение и лечение у беременных женщин в свете изучения некоторых показателей обмена. Авто-реф. дис. на соискан. уч. степ. док. мед. наук.- М., 1972.- 35 с.
- Королева И.А. Обмен аминокислот при фенилпировиноградной олигофрении и болезни Дауна. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук. -М., 1968. 15 с.
- Краснопольская К.Д. Генетические основы и методы биохимической диагностики наследственных болезней обмена веществ. Автореф. дис. на соискан. уч. степ. док. биол. наук.- М., 1985.- 53 с.
- Краснопольская К.Д., Вестинецкая Л. И., Лебедев Б. В. Тест Гат-ри для определения фенилаланина в крови//Лаб. дело. 1971.- № 11.-С. 687−689.
- Куприянова Е.М., Степанов A.A. Аминокислотный и белковый состав сыворотки крови при воспалении половых органов// Акуш. и гин.-1974,-№ 2.-С. 64−65.
- Кучеренко Н.Е. Биохимия: учебное пособие.- Киев: Выща школа, 1988. -434 с.
- Лакин Г. Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. — 352 с.
- Лабораторные методы исследования в клинике: справочник под ред. проф. В. В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987, — С. 224.
- Лаптев А.В., Честков В. В. Динамика свойств фенилаланингид-роксилазы печени в эмбриогенезе человека// Онтогенез. 1990. — Т.21. -№ 2.-С. 138−144.
- Лебедев Б.В. Фенилкетонурия у детей. Автореф. дис. на соискание уч. степ. док. мед. наук. М., 1970.- 47 с.
- Лебедев Б.В., Блюмина М. Г. Фенилкетонурия у детей. М.: Медицина, 1972. -152 с.
- Левин Ф.Б. Экспресс-метод определения содержания фенилала-нина в крови// Вопр. мед. химии.-1970. Т. 16, № 3.- С. 326−329.
- Лекции по медицинской генетике/ Под ред. Л. А. Прокофьевой -Бельговской, В. П. Эфроимсона. М.: Медицина, 1974.- С. 57−64.
- Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т. Т.1. Пер. с англ. М.: Мир, 1985.-368 с.
- Лильин Е.Т., Богомазов Е. А., Гофман-Кадошников П.Б. Генетика для врачей. М.: Медицина, 1990. -254 с.
- Лифанова В.М. Белки и некоторые свободные аминокислоты сыворотки крови при нормально протекающей беременности и при позднем токсикозе беременных. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. Омск, 1966.- 13 с.
- Макаров И.О. Функциональное состояние системы мать -плацента плод при гестозе. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. док. мед. наук.-М., 1988.-48с.
- Максимов Г. К., Спицин А. Н. Статистическое моделирование многомерных систем в медицине. М.: Медицина, 1981. -144 с.
- Мандель И.Д. Кластерный анализ. М.: Финансы и статистика, 1986.-176 с.
- Маринчева Г. С., Гаврилов В. И. Умственная отсталость при наследственных болезнях. М.: Медицина, 1988. — С. 147−151.
- Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. Т. 1. Пер. с англ. М.: Мир, 1993. — 415 с.
- Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. Т. 2. Пер. с англ. М.: Мир, 1993. — 384 с.
- Мецлер Д. Биохимия: химические реакции в живой клетке. В 3-х томах. Пер. с англ. Под ред. Браунштейна А. Е., Гинодмана Л. М., Северина Е.С.- М.: Мир. 1980. -Т.З. — 488 с.
- Мурзабаева С.Ш. Фенилкетонурия в республике Башкоркостан (клинико-эпидемиологическое и молекулярно-генетическое изучение). Ав-тореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук.- Пермь, 1997.- 20 с.
- Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов/ Пер. с чеш. В. В. Язвикова. М.: Медицина, 1985. — 430 с.
- Мухамеджанов Э.К. Влияние различной обеспеченности организма белком и незаменимыми аминокислотами на пул свободных аминокислот крови и тканей// Вопр. питания.-1988.-№ 2.- С. 27−32.
- Наследственные болезни при беременности: Пер. с англ./ Под ред. Д. Д. Шульмана, Д. Л. Симпсона М.: Медицина, 1985.- 512 с.
- Наследственная патология человека: В 2-х томах. Под. общ. ред. Ю. Е. Вельтищева, Н. П. Бочкова., Т. 1.- М. 1992. 276 с.
- Нарзыкулова С.А. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови беременных с болезнью Боткина// Акуш. и гин.-1972. № 7. -С. 65−67.
- Нарзыкулова С.А. Свободные аминокислоты в сыворотке крови и в моче здоровых женщин в динамике беременности.// Мед. журн. Узбекистана 1972. № 6. — С. 43−45.
- Одай Д. Молекулярные основы фенотипической вариабельности при фенилкетонурии у детей. Автореф. на соискан. уч. степ. канд. биол. наук. М., 1994. — с. 23.
- Основные направления борьбы с наследственными и врожденными болезнями человека., М. ВНИИМИ, В. 3.- 66 с.
- Патологическая анатомия генома человека./ Пузырев В. П., Степанов В. А. Новосибирск: Наука, Сибирское отделение РАН, 1997. -224 с.
- Погорелова Т.Н. Содержание свободных аминокислот в плаценте, крови пуповины и венозной крови рожениц при недонашивании беременности// Вопр. мед. химии.- 1970.- Т. 16, № 4, — С. 339 342.
- Погорелова Т.Н. Некоторые ферменты аминокислотного обмена плаценты и плодных оболочек при неосложненной беременности// Акуш. и гин.-1971. № 8, — С. 36−39.
- Погорелова Т.Н. Распределение аминокислот в отделах головного мозга в норме и при кислородном отравлении. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1966.- 15 с.
- Покровский A.A., Сомин В. И., Екимовский А. П. О соотношении между содержанием свободных аминокислот в тканях и плазме крови при бежовой недостаточности в эксперименте// Вопр. питания.-1974.-№ 1.- С. 8−15.
- Профилактика наследственных болезней (Сб. трудов). Москва: Высшая школа. 1987. -151 с.
- Рахимбаева P.M. Обмен свободных аминокислот между матерью и плодом при родах// Мед. жур. Узбекистана.-1971.- № 7.-С. 56−57.
- Сафронова Е.Е., Аненнков Г. А. Модификация метода Эйлинг для определения активности фенилаланингидроксилазы// Лаб, дело.-1982,-№ 5.- С. 40−43.
- Сафронова Е.Е., Рыбакова H.A., Аненнков Г. А. Применение модифицированного метода Эйлинг для выявления гомо- и гетерозигот по гену фенилкетонурии// Вопросы медицинской химии. 1982. — № 3. -С. 70−73.
- Семенов Н.В. Биохимические компоненты и константы жидких сред и тканей человека.-М.: Медицина, 1971.- 151 с.
- Ситниченко Е.И. Биохимический полиморфизм фенилкетонурии. Автореф. на соискан. уч. степ. канд. биол. наук. М., 1974.-27 с.
- Ситниченко Е.И., Блюмина М. Г. Упрощенный метод определения концентрации фенилаланина в сыворотке крови// Лаб. дело.- 1972.-№ 7,-С. 441−442.
- Скачков М.М. Актуальность фенилаланингидроксилазы и обмен фенилаланина при фенилкетонурии и экзогенных поражениях печени: Автореф. на соискан. уч. степ. канд. мед. наук. М., 1975. — 30 с.
- Сорокина Т.Т., Григорьева Н. К. Проявление гена ФКУ у гетерозиготных носителей: Тез. докл.// Всесоюзный симпозиум: Актуальные вопрос профилактики наследственных болезней. М., 1986. С. 150.
- Сорокина Т.Т., Григорьева Н. К. Ранние проявления фенилкетонурии у детей. Тез. докл.// Всесоюзный симпозиум: Актуальные вопрос профилактики наследственных болезней. Москва, 1986.- С. 117.
- Страйер Л. Биохимия: В 3-х т. Пер. с англ.- М.: Мир, 1985.-Т. 2.-312 с.
- Страйер Л. Биохимия: В 3-х т. Пер. с англ.- М.: Мир, 1985.-Т. 3.-400 с.
- Тутова И.М. О содержании свободных аминокислот в крови женщин при нормальной беременности// Акушерство и гинекология. -1970 -№ 5. С. 59−61.
- Тютина Е.М. Содержание свободных аминокислот в крови женщин при нормальной беременности// Акуш. и гин.- 1968. N 7. — С. 2629.
- Тютина Е.М. Содержание свободных аминокислот в крови и моче женщин при нормальной и осложненной поздним токсикозом беременности. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. Л., 1969.- 19 с.
- Тютина Е.М., Тютин Л. А. Клиническое значение определения свободных аминокислот в крови и моче женщин, страдающих токсикозами второй половины беременности// Акушерство и гинекология. 1970. — № 5. -С. 62−65.
- Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях. М.: Медицина, 1975. 295 с.
- Усачева Н.Т., Лебедев Б. В. К характеристике эндогенного аминокислотного имбаланса при ФКУ// Педиатрия. 1969. — № 8. — С. 48−50.
- Фадеева М.А., Дещекина М. Ф. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови и экскрекция их с мочой у детей при внутричерепной родовой травме// Вопр. охр. мат. идет. -1970. -Т. 15, № 12.-С. 55.
- Хазан М.А., Цивин B.C., Канчук Л. А. Модификация разделения аминокислот в аминокислотном анализаторе// Лаб. дело. 1982. -№ 3. -С. 54.
- Хашен Р., Шейх Д. Очерки по патологической биохимии. М.: Медицина, 1981 .-С. 60−61.
- Хеншен А., Хупе К.-П., Лотшпайх Ф., Вельтер В. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии. Пер. с англ. М.: Мир, 1988.-687 с.
- Хмелевский Ю.В., Усатенко O.K. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии. К.: Здоров’я. — 1984. — 120 с.
- Хош Г. М., Будыка Л. А. Аминокислотный состав крови у здоровых доношенных новорожденных// Вопр. охр. мат. и дет.-1970.- № 12-С. 54−55.
- Хош Г. М., Будыка Л. А. Аминокислоты цельной крови у новорожденных с внутричерепной родовой травмой// Вопр. охр. мат. и дет.-1972,-Т. 17, № 3.-С. 90
- Хош Г. М., Будыка Л. А. Свободные аминокислоты цельной крови у здоровых доношенных, недоношенных и переношенных новорожденных// Вопр. охр. мат. и дет.-1971, — Т. 16, № 8.- С. 30−32.
- Цветкова И. В. Пренатальная диагностика наследственных дефектов обмена// Итоги науки и техники. Генетика человека. -1991.- Т. 9.-С. 5−53.
- Честков В.В., Ковалев Л. И., Шишкин С. С. и соавтр. Олигоме-ризация фенилаланингидроксилазы при ее активации фенилаланином// Вопросы медицинской химии. -1985. -Т.31. -Вып. 4. С. 60−65.
- Честков В. В. Шишкин С.С. Генетическая гетерогенность и подходы к пренатальной диагностики фенилкетонурии// Вопросы медицинской химии. 1986. — Т. 32. — Вып. 4. — С. 7−12.
- Чистик Ф.Д., Жильцова И. В., Веропотвелян П. Н. и соавтр. Опыт организации региональной профилактики фенилкетонурии// 2-й Все-союзн. съезд мед. генетиков. Алма-Ата, 4−6 дек., 1990, Тез. докл.- М., 1990.-С. 480.
- Шишкин С.С., Калинин В. Н. Медицинские аспекты биохимической и молекулярной генетики. Москва.: Высшая школа — 1992. -216 с.
- Юргелявичюс В. Массовые выявления фенижетонурии и диагностика гетерозиготного носительства в Литовской ССР. Тез. докл.// Всесоюзный симпозиум: Актуальные вопрос профилактики наследственных болезней. Москва, 1986. — С. 137.
- Юргелявичюс В.В. Организация и результаты раннего выявления фенижетонурии в Литовской ССР и проблемы биохимического определения гетерозигот. Тез. докл.// Вопросы профилактики наследственных болезней у детей. Вильнюс, 1987.- С. 119−129.
- Якубке Х-Д., Ешкайт X. Аминокислоты. Пептиды. Белки. Пер. с нем. М.: Мир, 1985.- 456 с.
- Ялвисте Х.И. Содержание аминокислот сыворотки крови и мочи при позднем токсикозе беременных// Труды по медицине Тартуского Гос. Унив.- 1973. -№ 27, вып. 303, — С. 56−66.
- Annenkov G.A. Phenylketonuria and hyperphenylalaninemia: clinico-genetic classification of 14 forms.// Zh. Nevropatol. Psikhiatr. 1984. -Vol. 84. — № 3. — P. 351−356.
- Antonozzi I., Carducci C., Vestri L. Plasma amino acid values and pancreatic beta-cell function in phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Dis. -1987, — Vol.10.-№ 1,-P. 66−72.
- Benevenga N.J., Steele R.D. Adverse effects of excessive consumption of amino acids.// Annu. Rev. Nutr.- 1984.- № 4.- P. 157−181.
- Clemens P. C., Burmester J. G., Prankel B.H. and et. al. Phenylalanine and other amino acids in phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Disease. -1993.- Vol. 16, № 16,-P. 1045−1046.
- Clemens P.C., Burmester J.G., Wiegand G. and et.al. Phenylalanine, other large neutral amino acids and RNA catabolites as markers for proteinbiosynthesis in phenylketonuria letter, comment.// Metabolism.-1993.~ Vol. 42.-№ 4.- P. 518−521.
- Di Leila A.G., Marvit J., Brayton K., Woo S.L. An amino-acid substitution involved in phenylketonuria is in linkage disequilibrium with DNA haplotype 2// Nature. 1987. — Vol. 327. — № 6120. — P. 333−336.
- Domer K., Schulze S. Refrense values for plasma amino acids in the course of pregnancy.// Z. Geburtshilfe. Perinatol.- 1993.- Vol.197.- № 3.- P. 141−143.
- Duczynska N., Cabalska B., Nowaczewska I. and et.al. Evaluation of amino acids in plasma and amniotic fluid of women from genetic risk groups.// Probl. Med. Wieku. Rozwoj. 1990, — № 16. — P. 103−115.
- Eisensmith R.C.- Martinez D.R.- Kuzmin A.I. and et.al. Molecular basis of phenylketonuria and a correlation between genotype and phenotype in a heterogeneous southeastern US population.// Pediatrics. 1996. — Vol.97. — № 4. -P.512−516.
- Evans S.J.- Wynne-Williams T.C.- Russell C.A. and et.al. Hyperphenylalaninaemia in parentally fed newborn babies (letter).// Lancet.1986. Vol. 2.- № 8520. — P. 1404−1405.
- Farquhar D.L., Simpson G.K., Steven F. and et.al. Pre-conceptual dietary management for maternal phenylketonuria// Acta. Paediatr. Scand.1987. Vol. 76. — № 2. — P. 279−283.
- Freehauf C.L.- Lezotte D.- Goodman S. L- Mc Cabe E.R. Carrier screening for phenylketonuria: comparison of two discriminant analysis procedures.// Am. J. Hum. Genet. 1984. -Vol. 36. — № 6. — P. 1180−1189.
- Frits A., Hommes G., Editer B. Techniques in diagnostic human biochemical genetics. 1994.
- Furesz T.C., Moe A.J., Smith C.H. Two cationic amino acid transport systems in human placental basal plasma membranes.// Am. J. Physiol.-' 1991.- Vol. 281.- № 8.- P. 246−252.
- Gardiner R.M. Transport of amino acids across the blood-brain barrier: implications for treatment of maternal phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Dis. 1990. — Vol. 13. — № 4. — P. 627−633.
- Guldberg Per., Guttler Flemming. PCR- in the diagnosis of phenylketonuria// Ann. Med. 1992. — Vol. 24. — № 3. — P. 187−190.
- Guttler F., Lou H. Dietary problems of phenylketonuria: effect on CNS transmitters and their possible role in behaviour and neuropsychological function.// J.Inherit.Metab.Dis. -1986. -9 Supple 2. P. 169−177.
- Guttler F.- Woo S.L. Molecular genetics of PCU.// J.Inherit.Met ab.Dis. 1986. — 9 Supple. 1. — P. 58−68.
- Guttler F., Ledley F.D., Lidsky A.S. DiLella A.G. and et.al. Correlation between polymorphic DNA haplotypes at phenylalanine hydroxylase locus and clinical phenotypes of phenylketonuria // J.Pediatr. -1987. -Vol. 110.-№ 1.-P. 68−71.
- Hanley W.B., Clarke J.T., Schoonheyt W. Maternal phenylketonuria (PKU) a review// Clin.Biochem. — 1987.- Vol. 20. — № 3. -P. 149−156.
- Heard G.S.- Secor-McVoy J.R.- Wolf B. A screening method for biotinidase deficiency in newborns.// Clin.Chem. 1984. — Vol. 30. — № 1. -P. 125−127.
- Hilton M. A., Sharpe J. N., Hicks L.G., Andrews B.F. A simple method for detection of heterozygous carriers of the gene for classic PNA.// J. Pediatr. 1986. — Vol. 10, № 4. — P. 601−604.
- Hjelm M., Seakins J., Antoshechkin A. Indications of changed amino acid homeostasis in untreated and treated PKU.// Acta. Pediatr. Suppl.-1994.- № 407.-P. 57−59.
- Hoskins J.A., Holliday S.B., Greenway A.M. The metabolism of cinnamic acid by healthy and phenylketonuric adults: a kinetic study// Biomed. Mass. Spectrom.- 1984. Vol.11.- № 6.- P. 296−300.
- Hyanek J., Bendl J., Zeman J. and et.al. Maternal hyperphenylala-ninemia in a population of healthy Czech women: 18 year’s experience with mas screening, diet therapy and metabolic monitoring// Cas. Lek. Cesk. 1996. -Vol. 135,-№ 2.-P. 50−53.
- Iordan M.K., Brunner R.L., Yunt M.M., Berry H.K. Preliminary support for the oral administration of valine, isoleucine and leucine for phenylketonuria.// Dev. Med. Child. Neurol. -1985. Vol. 27. — № 1, — P. 33−39.
- Karl P.I., Tkaczevski H., Fisher S.E. Characteristics of histidine uptake by human placental microvillous membrane vesicles.// Pediatr. Res. -1989.- Vol. 25. -№ 1. P. 19−26.
- Kaufman S. Enzymology of the phenylalanine-hydroxylating system// Enzyme. -1987. Vol. 38. — № 1 — 4. — P. 286−295.
- Koch R., Friedman E.G., Wenz E. and et.al. Maternal phenylketonuria.// J.Inherit.Metab.Dis. -1986. -9 Supple 2. P. 159−168.
- Kremenski I., Borisov I., Barov D, Katsulov A. The plasma amino acid profile of women with a normal pregnancy and in preeclampsia.// Akush. Ginekol. Sofia.- 1990, — Vol. 29, — № 6.- P. 5−9.
- Kudo Y., Boyd C.A. Transport of amino acids by the human placenta: predicted effects thereon of maternal hyperphenylalaninaemia.// J. Inherit. Metab. Dis.-1990. Vol. 13. — № 4.- P. 617−626.
- Kudo Y., Boyd C.A. Human placental L-tyrosine transport: a comparison of brush-border and basal membrane vesicles.// J. Physiol. Lond. 1990. -№ 426.- P. 381−395.
- Kwok S.C.M, Ledley F.D., DiLella A.G. and et.al. Nucleotide sequence of a full-length complementary DNA clone and amino acid sequence of Human Phenylalanine Hydroxylase// Biochemistry, 1985. № 24. — P. 556−561.
- Lehmann W.D. Progress in the identification of the heterozygoute in phenylketonuria// J. Pediatr. -1989, — Vol. 114. -№ 6. P. 915−923.
- Lellis W.A., Speer V.C. Aromatic amino acid requirement of the lactating sow.// J. Anim. Sci. 1985. — Vol. 61.- № 6. — P. 1448−1453.
- Levy H. L. Maternal phenylketonuria. Review with emphasis on pathogenesis// Enzyme. 1987. — V. 38.- № 1 — 4. — P. 312−320.
- Levy H.L., Lobbregt D., Sanaricq C., Snyderman S.E. Comparison of phenylketonuric and nonphenylketonuric sibs from untreated pregnancies in a mother with phenylketonuria// Amer. J. Med. Genet. 1992. — V. 44. — № 4,-P. 439−472.
- Levy H.L.- Lobbregt D.- Barnes P.D.- Poussaint T.Y. Maternal phenylketonuria: magnetic resonanse imaging of the brain in offspring.// J. Pediatr 1996. Vol. 128.- № 6, — P. 770−775.
- Lewis S.A., Lyon I.C., Elliott R.B. Outcome of pregnancy in the rat with mild hyperphenylalaninaemia: implications for the management of «human maternal PKU». // J. Inherit. Metab. Dis. 1985. — Vol. 8.- № 3.-P. 113−117.
- Lidsky A.S.- Robson K.J.- Thirumalachary C. and et.al.
- The PKU locus in man is on chromosome 12.// Am. J. Hum. Genet. 1984.- Vol. 36. -№ 3. -P. 527−533.
- Loo Y.H., Hyde K.R., Lin F.H., Wisniewski H.M. Celebral biochemical abnormalities in experimental maternal phenylketonuria: gangliosides and sialoglycoproteins.// Life Sci.- 1985. Vol.37. — № 22. — P. 2099−2109.
- Lou H.C., Lykkelund C., Gerdes A.M. and et.al. Increased vigilance and dopamine synthesis by large doses of tyrosine or phenylalanine restriction in phenylketonuria.// Acta. Paediatr. Scand. 1987. — Vol. 76. -№ 4. — P. 560−565.
- Mac Mahon R.A., Erampton R.J., Yardley R.W. Effect on the fetus of infusing a commercial amino acid preparation into a pregnant sheep.// Biol. Neonate. -1990.- Vol.57. № 3 — 4. — P. 231−237.
- Mary A., Hilton Ph.D., Lee G. and et.al. A simple method for detection of hetrozygous carries of the gene for classic phenylketonuria.// The Journ. of Pediatrics. 1986. — Vol. 109. — № 4. — P. 601−604.
- Matalon R., Michals K. Phenylketonuria: screening, treatment and maternal PKU.// Clin. Biochem. 1991. — Vol. 24. — № 4. — P. 337−342.
- Morris N.H., Burston D., Ramsay B. Free amino acid concentrations in normal and abnormal third trimester placental villi.// Eur. J. Clin. Invest.- 1995.-№ 10.-P. 796−798.
- Naylor E. W" Ennis D., Davidson A.G. and et.al. Guanosine triphosphate cyclohydrolase I deficiency: early diagnosis by routine urine pteridine screening// Pediatrics. 1987. -Vol. 79. — №.3. — P. 374 — 378.
- Niwa T. Mass spectrometry in disorders of organic acid metabolism.// Clin. Chim. Acta. 1995, — № 9 -10. — P. 241−242- 293−384.
- Okano Y.- Chow I.Z.- Isshiki G. and et.al. Effects of phenylalanine loading on protein synthesis in the fetal heart and brain of rat: an experimental approach to maternal phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Dis. -1986,-Vol.9.-№ 1.-P. 15−24.
- Okano Y.- Isshiki G. Newborn mass screening and molecular genetics of phenylketonuria in east Asia.// Southeast. Asia. J. Trop. Med. Public. Health. -1995. -Vol. 26 Suppl 1. P. 123−129.
- Ponzone A., Guardamagna O., Spada M. and et.al. Hyperphenylalaninemia and pterin metabolism in serum and erythrocytes.// Clin. Chim. Acta. 1993. — Vol. 216.- № 1 — 2. — P. 63−71.
- Pueschel S.M., Boylan J.M., Jackson B.T. and et.al. Fetomaternal placental transfer mechanisms of aromatic amino acids in Macaca mulatta.// J. Reprod. Med. 1985. — Vol. 30, — № 11. — P. 879−883.
- Rey F.- Munnich A., Lyonnet S.- Rey J. Classification and heterogeneity of hyperphenylalaninemias linked to a phenylalanine hydroxylase deficiency// Arch. Fr. Pediatr. 1987. — Vol. 44. — Supp 11.- P. 639 642.
- Rouse B., Lockhart L., Matalon R. and et.al. Maternal phenylketonuria pregnancy outcome: a formations// J. Inherit. Metab. Disease.-1990. Vol. 13. — № 3. — P. 289−291.
- Rudy J.L., Rutledge J.C., Lewis S.L. Phenylalanine and tyrosine in serum and eluates from dried blood spots as determined by reversed-phase liquid chromatography.// Clin. Chem. 1987. — Vol. 33, — № 7.- P. 1152 — 1154.
- Saraiva J.M., Seakins J.W.T., Smith I. Plasma phenylalanine and tyrosine levels revisited in heterozygotes for hyperphenylalaninemia// J. Inherit. Metab. Disease. 1993. — Vol.16. — № 1. — P. 105−109.
- Schroter J.- Schott K.J.- Purtill M.A.- Neuhoff V. Lysosomal protein degradation in experimental hyperphenylalaninaemia.// J. Inherit. Metab. Dis. 1986. — Vol. 9. — № 3. -P. 273 — 282.
- Smith I., Howells D.W., Hyland K. Pteridines and mono-amines: relevance to neurological damage.// Postgrad. Med. J. 1986. — Vol. 62, — № 724.-P. 113−123.
- Speer A., Bollman R., Michel A. and et.al. Prenatal diagnosis of classical phenylketonuria by linked restriction fragment length polymorphism analysis// Prenat. Diagn. 1986. — Vol. 6. — № 6. — P. 447 — 450.
- Speer V.C., Kile D.L., Trew J.C. Estimation of the isoleucine and aromatic amino acid requirements of pregnant swine.// J. Anim. Sci.- 1990. -Vol. 68. № 8.- P. 2394 — 2399.
- Stegink L.D., Wolf-Novak L.C., Filer L.J. and et.al. Aspartame-sweetened beverage: effect on plasma amino acid concentrations in normal adults and adults heterozygous for phenylketonuria.// J. Nutr.- 1987.- Vol. 117.-№ 11.-P. 1989- 1995.
- Svensson E., Iselins L., Hagenfeldt L. Severity of mutation in the phenylalaninehydroxylase gene influence phenylalanine metabolism in phenylketonuria and hyperphenylalaninemia heterozygotes//J/ Inherit. Metab. Dis.-1994. Vol. 17. — № 2 — P. 215- 222.
- Teerlink T., P. A. M. Van Leeuwen, Huudijk A. Plasma amino acids determinated by liquid chromatography within 17 minutes.// Clin. Chem. -1994.- Vol. 40.- № 2. P. 245 — 249.
- Trefz F.K., Burgard P., Konig T. and et.al. Genotype-phenotype correlations in phenylketonuria.// Clin. Chim. Acta.-1993.- Vol.217.- № 1. P. 15−21.
- Tushman M., Fisch R.O., Ramnaraine M.L., Krivit W. Acidic metabolites of phenylalanine in plasma of phenylketonurics.// Biochem. Med.-1985. Vol.34.- № 2.- P. 203 — 206.
- Van-Winkle L.J., Mann D.F., Campione A.L., Parrington B.H. Transport of benzenoid amino acids by system T and four broad scope systems in preimplantation mouse conceptuses.//Biochim. Biophys. Acta.- 1990. Vol. 1027, — № 3.-P. 268−277.
- Vina J.R., Puertes I.R., Rodriguez A. and et.al. Effect of fasting on amino acid metabolism by lactating mammary gland: studies in women and rats.// J. Nutr. 1987.- Vol. 117, — № 3.- P .533 — 538.
- Vogel F. Clinical consequences of heterozygosity for autosomal-recessive diseases// Clin.Genet. 1984. -Vol. 25. — № 5.- P. 381−415.
- Vorhees C.V., Berry H.K. Branched chain amino acids improve complex maze learning in rat offspring prentally exposed to hyperphenylalaninemia: implications for maternal phenylketonuria.// Pediatr. Res. 1989.- Vol. 25, — № 6.-P. 568 — 572.164
- Walter J.H., Tyfield L.A., Holton J.B., Johnson C. Biochemical control, genetic analysis and magnetic resonance imaging in patients with phenylketonuria.// Eur. J. Pediatr. -1993.- Vol. 152. -№ 10, — P. 822 827.
- Wengler S.L., Vieira P.W., Breck J.M., Steele M.W. Relative reliability of three different discriminant analysis methods for detecting PKU gene carriers// Clin.Genet. -1986. Vol. 30. — № 1. — P. 38 — 40.
- Wyse A.T., Sarkis J.J., Cunha-Filho J.S. and et. al. Effect of phenylalanine and its metabolites on ATP diphosphohydrolase activity in synapto-somes from rat celebral cortex.// Neurochem. Res. -1994.- Vol. 19.- № 9.-P. 1175−1180.