Влияние клеток трофобласта на пролиферацию и апоптоз Т-лимфоцитов

Внутриутробное развитие плода при беременности возможно лишь при условии взаимной толерантности, иммунных систем матери и плодаМеханизмы, защищающие плод от атаки со стороны иммунной системы матери, а ткани матери — от агрессии иммуноцитов плода, в настоящее время являются объектом пристального изучения. Благодаря работам последних лет доказана центральная роль клеток трофобласта плаценты в предотвращении иммунологического конфликта при беременности, определены основные пути воздействия барьерных клеток плаценты на состав и свойства контактирующих с ними клеток иммунной системы, изучены изменения состава лимфоидных клеток матки. Однако, несмотря на. значительные успехи, иммунологии репродукции, многие важные: аспекты защитной функции плаценты остаются неисследованными. В первую очередь, до сих пор нет ясности в масштабах реализации отдельных защитных механизмов и их значимости в успехе развития беременности. Кроме того, известно, что клетки трофобласта не представляют собойгомогенную, популяцию. Этиклетки существенно различаются по своей морфологии, функции, расположению на границе раздела матери и плода и, наконец, по условиям контактах клетками иммунной системы. Роль представителей отдельных типов клеток трофобласта плаценты в предотвращении нежелательных иммунных реакций и спектр реализуемых ими защитных функций также остаются недостаточно изученными. И, наконец, действие клеток плаценты на иммунную систему плода до сих пор остается практически неисследованным. Данная работа посвящена изучению влияния клеток плацентарного барьера: на основные параметры, определяющие размер пула лимфоцитов, — пролиферацию и апоптоз Т-клеток. Особое внимание уделялось, изучению ролиразных типов клеток трофобласта в регуляции функциональной активности Т-лимфоцитов и сравнению действия трофобласта на Т-лимфоциты новорожденных и беременных.

Актуальность проблемы.

Актуальность работы обусловлена широкой распространенностью и тяжелыми клиническими последствиями таких патологий беременности, как преэклампсия, задержка роста плода, невынашивание беременности и привычные выкидыши. По современным представлениям важную или основную роль в патогенезе этих патологических состояний, играет иммунологический конфликт на границе раздела организмов матери и плода. Поэтому исследование иммунологических механизмов, обеспечивающих нормальное развитие беременности, приобретает особую социальную значимость в нашей стране в условиях низкой рождаемости.

Цель исследования.

Исследовать действие клеток плаценты человека на функциональные свойства Т-лимфоцитов пуповинной крови новорожденных и периферической крови беременных женщин.

Задачи исследования.

1. Получить культуры клеток хориона плаценты человека, охарактеризовать их клеточный состав.

2. Оценить способность клеток плаценты вызывать активацию Т-лимфоцитов по экспрессии мембранных молекул — маркеров активации.

3- Оценить влияние клеток трофобласта на пролиферацию Т-лимфоцитов новорожденных и взрослых при различных условиях их активации.

4. Исследовать влияние клеток плаценты на апоптоз активированных и покоящихся Т-лимфоцитов пуповинной крови новорожденных и венозной крови взрослых доноров в условиях культуры клеток.

5. Определить роль межклеточных контактов и растворимых продуктов клеток трофобласта в процессе регуляции функции Т-лимфоцитов клетками плаценты.

Научная новизна.

Нами было проведено сравнительное исследование действия клеток трофобласта на пролиферацию, и апоптоз Т-лимфоцитов новорожденных и беременных женщин. Впервые обнаружена зависимость апоптогенного действия трофобласта от срока внутриутробного развития, а также от типа клеток трофобласта. Установлено, что синцитиотрофобласт. является мощным индуктором апоптоза Т-лимфоцитов, тогда как клетки ЦТ способны индуцировать лишь небольшое усиление апоптоза Т-клеток. В ходе исследований был установлен сложный характер влияния клеток ЦТ на пролиферативный ответ Т-лимфоцитов — кратковременное усиление пролиферации сменяется ее подавлением. Показано, что совместное культивирование клеток трофобласта и МНПК приводит к экспрессии Т-лимфоцитами таких маркеров активации, как НЬА-БК и СБ7Г. Однако при этом не происходит усиления экспрессии классического активационного маркера — молекулы 01)25.

Практическая значимость.

Работа носит исследовательский характер и направлена на получение новых знаний о механизмах, обусловливающих иммунологическую толерантность матери и плода при нормально протекающей беременности. Данная область еще недостаточно изучена и требует дополнительных исследований. Получение новых данных о защитных механизмах, реализуемых плацентой, необходимо как для понимания процессов, протекающих при нормальной беременности, так и для разработки методов оценки и лечения патологий беременности.

Выводы.

1. Получены культуры клеток цитотрофобласта плаценты и культуры клеток цитотрофобласта, обогащенные синцитиальными фрагментами.

2. Клетки цитотрофобласта плаценты при действии на Т-лимфоциты беременных и новорожденных в условиях культуры клеток вызывают усиление экспрессии маркеров активации НЕА-ОЯ и СВ71, не влияя на уровень экспрессии СБ25.

3. Клетки цитотрофобласта плаценты сложным образом влияют на пролиферацию активированных Т-лимфоцитов: кратковременное индуцированное трофобластом усиление пролиферации сменяется подавлением размножения клеток.

4. Растворимые продукты цитотрофобласта, в т. ч. гормоны плаценты, воспроизводят эффект индуцированного трофобластом подавления пролиферации активированных Т-лимфоцитов.

5. Культуры трофобласта, обогащенные фрагментами синцитиотро фоб ласта, и среда из этих культур индуцируют мощное усиление апоптоза лимфоцитов беременных, рожениц и новорожденных.

6. Клетки цитотрофобласта поздней плаценты индуцируют умеренное усиление апоптоза лимфоцитовклетки цитотрофобласта ранней плаценты практически не влияют на апоптоз лимфоцитовсреда из культур раннего и позднего цитотрофобласта не влияет на апоптоз лимфоцитов.