Роль коррекционной репарации ДНК (MMR) в механизме гено-и цитотоксического действия метилнитрозомочевины в опухолевых клетках человека

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В то же время в многочисленных исследованиях показано, что в 30% случаев заболевания спорадическим РТК в клетках опухолей также наблюдается МСН генома. Однако, в отличие от семейной формы заболевания, здесь МСН чаще всего ассоциирована не с мутациями в генах системы MMR, а с гиперметилированием промоторов этих генов. Сюда же можно отнести и многочисленную группу заболеваний, формирующих так… Читать ещё >

Содержание

Обзор литературы по теме
- 2. 1. МЕХАНИЗМЫ ЭКСЦИЗИОННОЙ РЕПАРАЦИИ ДНК В КЛЕТКЕ
  - 2. 1. 1. Дорепликативная эксцизионная репарация
  - 2. 1. 2. Пострепликативная эксцизионная репарация
- 2. 2. 06-MeG ИНДУКТОР MMR И АПОПТОЗА
- 2. 3. РАК ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА: ДЕФИЦИТ MMR, ОЦЕНКА РИСКА РАЗВИТИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ Собственные исследования
- 3. 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  - 3. 1. 1. Клетки
  - 3. 1. 2. Воздействия
  - 3. 1. 3. Оценка жизнеспособности клеток с использованием МТТ-теста
  - 3. 1. 4. Определение жизнеспособности по апоптотическому индексу
  - 3. 1. 5. Определение количества двунитевых разрывов методом ДНК-комет
  - 3. 1. 6. Определение мутаций в генах MLH1 и MSH2 в клетках Colo320HSR
- 3. 2. РЕЗУЛЬТАТЫ
  - 3. 2. 1. Влияние МНМ на клетки HeLa и НСТ
  - 3. 2. 2. Гено- и цитотоксический эффекты МНМ на клетках Colo320HSR
  - 3. 2. 3. Мутации в генах MLH1 и MSH2 в клетках Colo320HSR
- 3. 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
Выводы

Роль коррекционной репарации ДНК (MMR) в механизме гено-и цитотоксического действия метилнитрозомочевины в опухолевых клетках человека (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность проблемы.

Рак толстого кишечника (РТК) является одной из самых распространенных онкопатологий в развитых странах. В России эта форма рака занимает 3-место после рака легкого и желудка. За период 1992;1995 г. зарегистрировано 40 000 случаев заболевания. Смертность составила более 75%. Статистика заболевания по Европе за 1992;1995: в 130 000 случаях заболевания смертельные исходы наблюдались в 75% [Александров, 2003]. В США в 2002 году было зарегистрировано 142 000 случаев заболевания РТК. Кумулятивный риск заболевания РТК на протяжении жизни индивида составляет 5−6% [Grady, 2003]. 3−5% всех случаев заболеваний приходится на наследственную (семейную) форму, которая характеризуется высоким риском заболевания (до 90% в течение жизни). Во всех случаях наследственной формы РТК в опухолевых клетках обнаруживаются свидетельства дефицита пострепликативной корректирующей репарации ДНК (MMR, mismatch repair).

Из всех известных на сегодня заболеваний, связанных с генетическими дефектами и предрасположенностью к раку, только в двух прослеживается однозначно связь с дефектами в механизмах репарации ДНК. Это наследственный неполипозный рак толстого кишечника (НРТК, синдром Линча) и пигментная ксеродерма [Jiricny, 1994; Friedberg et al., 1995; Bootsma et al., 1998]. В случае НРТК дефекты MMR проявляются в виде мутаций в генах системы MMR и/или в виде микросателлитной нестабильности (МСН). Поэтому мутации генов системы MMR и микросателлитная нестабильность генома в опухолевых клетках стали распространенными маркерами заболевания НРТК [Vasen et al., 1999].

В то же время в многочисленных исследованиях показано, что в 30% случаев заболевания спорадическим РТК в клетках опухолей также наблюдается МСН генома [Штам и др., 2004; Boland et al., 1998]. Однако, в отличие от семейной формы заболевания, здесь МСН чаще всего ассоциирована не с мутациями в генах системы MMR, а с гиперметилированием промоторов этих генов [Veigl et al., 1998]. Сюда же можно отнести и многочисленную группу заболеваний, формирующих так называемый «спектр РТК» [Vasen et al., 1999]. Таким образом, для довольно большой группы заболеваний РТК такой показатель как мутации генов MMR не может быть исчерпывающим маркером заболевания. Мы полагаем, что в большей степени этому требованию соответствует такой показатель как функциональная активность MMR. Кроме того, разработка более-менее универсальных маркеров заболевания позволило бы выделить группы риска, прогнозировать возникновение заболевания и предупреждать его.

Как следствие дефицита MMR, в опухолевых клетках формируется мутаторный фенотип и устойчивость к цитотоксическому действию алкилирующих/метилирующих агентов [Aquilina et al., 2000]. Главным цитотоксическим повреждением при химическом метилировании ДНК является Ометилгуанин (06-MeG) [Kaina et al., 1993]. Две особенности отличают 06-MeG от других алкилированных оснований: в клетках млекопитающих он может быть репарирован только прямым деметилированием при участии метилгуанин-ДНК-метилтрансферазы (MGMT) [Kaina et al., 1990]- не будучи репарированным, это повреждение не блокирует репликацию и сохраняется в пострепликативный период [Kaina et al., 1997]. В этом случае образуется некорректная пара Oo-MeG: Т, которая является субстратом для механизма коррекционной репарации.

ДНК (MMR). 06-MeG сильно напоминает аденин, и потому полимераза в процессе синтеза вставляет комплементарный ему тимин, формируя неправильную пару 06-MeG: Т. В ответ инициируется MMR, начинающая процесс эксцизионного удаления тимина в дочерней цепочке ДНК. Создается тупиковая для MMR ситуация, когда в матрице присутствует неудаляемый дефект, а полимераза не может подобрать ему комплементарную пару, всякий раз в процессе ресинтеза воспроизводя пару 06-MeG: Т. Если клетка, содержащая в геноме такую пару, вступит в следующий цикл репликации, то неизбежной будет транзиция G: С—"A: Т (последовательно: G: С + Alk -" 06-MeG: С +. I цикл репликации-" 06-MeG: Т + II цикл репликации —> А: Т). Показано, что в опухолевых клетках эпителия ТК (дефицитных по MMR) частота таких транзиций соответствует 1 на 8 06-MeG для гена hprt [Rasouli-Nia et al., 1994], но может быть и выше в случае, например, онкогена K-ras [Esteller et al., 2000; Jackson et al., 1999]. Однако вступлению во второй цикл репликации препятствует активная система MMR, которая возобновляет процесс эксцизии и последующего ресинтеза. Разрешается эта коллизия радикально: длительное существование обширной бреши в дочерней цепи ДНК делает неизбежным формирование двунитевого разрыва под действием внутриклеточных эндонуклеаз. Его появление запускает механизм апоптоза. Таким образом, эффективная система MMR инициирует программу гибели полноценных по репарации клеток, содержащих 06-MeG. Дефицитные по MMR опухолевые клетки при РТК сохраняют жизнеспособность. При этом они приобретают новые мутации за счет G: С -> А: Т транзиций, что, с одной стороны, увеличивает вероятность их трансформации, а с другой — расширяет селективные возможности опухолевых клеток и позволяет им адаптироваться к генотоксическим воздействиям. Этот механизм может частично объяснять их пониженную способность к апоптозу в ответ на действие алкилирующих агентов [Bedi et al., 1995]. Таким образом, в основе механизма цитотоксического действия 06-MeG лежат вторичные разрывы ДНК, которые формируются в ходе функционирования системы MMR [Kaina, 2003].

Как видно, активная система MMR трансформирует первичное повреждение 06-MeG в двунитевой разрыв ДНК. Эти вторичные разрывы, возникающие в пострепликативный период (спустя >1 цикла репликации), могут быть показателем функциональной активности MMR в клетке и маркером в оценке риска возникновения РТК у человека. Экспериментальная проверка этого предположения составляет содержание данной диссертации.

Цель и основные задачи исследования.

Цель настоящего исследования состоит в проверке на опухолевых клетках человека предположения о том, что количество вторичных двунитевых разрывов ДНК (ДР) в ответ на действие монофункционального метилирующего агента может отражать эффективность функционирования системы MMR в клетке.

В соответствии с целью исследования были поставлены следующие задачи:

1. Отобрать три линии клеток опухолей человека, которые генетически отличаются по активности коррекционной репарации ДНК.

2. Оценить чувствительность этих клеток к действию монофункционального метилирующего агента метилнитрозомочевины (МНМ) по показателю цитотоксичности.

3. Исследовать частоту гибели этих клеток по механизму апоптоза, индуцированного метилнитрозомочевиной.

4. Исследовать количество и динамику образования вторичных двунитевых разрывов в клетках под влиянием МНМ.

5. Исследовать первичную структуру генов MLH1 и MSH2 в линии опухолевых клеток Colo320HSR с неохарактеризованной системой коррекционной репарации с целью выявления мутаций в этих генах, приводящих к возникновению рака толстого кишечника.

6. Сопоставить эти показатели между собой и прокоррелировать их с предполагаемой активностью MMR.

Научная новизна.

1. В работе предложен механизм реализации генотоксического действия монофункционального метилирующего агента метилнитрозомочевины в цитотоксический эффект через вторичные двунитевые разрывы ДНК, возникающие в результате функционирования пострепликативной MMR.

Ч Таким образом, три показателя: количество вторичных МНМиндуцированных разрывов ДНК, цитотоксический эффект МНМ (частота отсроченного апоптоза) и эффективность MMR — представлены взаимосвязанными в одном механизме.

2. На основании этого предлагается простая процедура оценки функциональной эффективности пострепликативной репарации, MMR. Процедура апробирована на трех линиях опухолевых клеток человека, различающихся генетически по эффективности MMR. Впервые эффективность MMR этих клеток выражена количественно в виде числа вторичных двунитевых разрывов ДНК, возникающих в ответ на действие метилнитрозомочевины.

3. Впервые проведено исследование первичной структуры генов MLH1 и MSH2 системы MMR клеток рака сигмовидной кишки человека Colo320HSR. Обнаружена мутация-трансверсия в 520 кодоне 10-го экзона гена MSH2. Показано, что по эффективности MMR, выраженной в количестве вторичных разрывов ДНК, эта линия клеток занимает промежуточное положение между линиями HeLa и НСТ116, занимающих крайние позиции MMR-профицитных и MMR-дефицитных клеток. 4. Результаты проведенного исследования являются основанием для разработки простой системы тестирования MMR с целью прогноза эффективности химиотерапии, а также для оценки риска возникновения рака (используя соматические клетки человека — лимфоциты здоровых доноров и онкологических больных).

Научно-практическая значимость работы.

Результаты данного исследования могут иметь фундаментальное и прикладное значение.

1. Они позволяют понять механизм реализации генотоксического сигнала алкилирующих агентов в цитотоксический эффект.

2. Оценить роль вторичных разрывов в цитотоксическом эффекте алкилирующих агентов и разработать на этой основе модельные системы для определения эффективности новых лекарственных препаратов и прогноза их использования в терапии опухолей с дефектной системой MMR.

3. Эффективный механизм MMR является фактором, противостоящим генотоксическому прессингу алкилирующих агентов эндогенного происхождения и в окружающей среде. С другой стороны, эффективная MMR является предпосылкой успешного применения противоопухолевых лекарств, включая алкилирующие соединения (поскольку дефицит MMR сочетается с устойчивостью клеток ко многим химиотерапевтическим препаратам). Результаты данного исследования помогут разработать простую систему тестирования MMR с целью прогноза эффективности химиотерапии, а также для оценки риска возникновения рака.

Положения и результаты, выносимые на защиту.

1. Один из путей реализации цитотоксического эффекта метилнитрозомочевины в клетках включает в себя: образование 06-MeG — Iй цикл репликации — формирование неканонической пары (06-MeG: Т) — активизацию MMR, повторяющиеся циклы эксцизия-ресинтез в функционирующей MMR (абортивная MMR) -формирование обширной долго живущей однонитевой бреши в ДНК — трансформация бреши в ДР — инициация сигнального пути апоптоза.

2. Цепочка в полной мере реализуется только в делящихся клетках с функционирующей системой MMR (в данной работе — в клетках HeLa).

3. Клетки, дефицитные по MMR (в данной работе — клетки HCT 116), проявляют устойчивость к МНМ (по показателям клеточной гибели) и не обнаруживают предшествующих апоптозу двунитевых разрывов в ДНК.

4. Клетки аденокарциномы сигмовидной кишки Colo320HSR содержат нейтральную мутацию в 520 кодоне 10 экзона гена MSH2. По количеству МНМ-индуцированных вторичных разрывов клетки Colo320HSR занимают промежуточное положение между MMR-профицитными клетками HeLa и дефицитными клетками HCT 116. В клетках линии Colo320HSR наблюдается пониженная способность МНМ-индуцированных ДР вызывать апоптоз.

5. Предлагаемая процедура определения количества вторичных ДР в ответ на действие МНМ может стать основой для оценки функциональной эффективности MMR в опухолевых и соматических клетках.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТЕМЕ.

ВЫВОДЫ.

1. Показано, что цитотоксический эффект МНМ на клетках HeLa проявлялся на 3 сутки после действия агента.

2. Раньше этого срока (за 24 часа) в клетках обнаружены двунитевые разрывы в ДНК.

3. MMR-дефицитные клетки НСТ116 устойчивы к МНМ: в них не возникают двунитевые разрывы, и отсутствует апоптоз в течение 72 час после действия МНМ.

4. Обе линии клеток проявляли высокую чувствительность к генотоксическому действию этопозида, классическому индуктору нерепарируемых двунитевых разрывов в ДНК. Этопозид индуцирует в клетках двунитевые разрывы (через 6 -12 час) и последующий апоптоз (через 24 час).

5. По уровню МНМ-индуцированной генои цитотоксичности клетки Colo320HSR занимают промежуточное положение между MMR-профицитными клетками HeLa и MMR-дефицитными НСТ116. Вместе с тем, по частоте апоптоза клетки Colo320HSR остаются толерантными к возникшим в их ДНК двунитевым разрывам.

6. Впервые в клетках Colo320HSR обнаружена нейтральная мутация в гене MSH2 (трансверсия GGA->GGG в 520 кодоне 10 экзона).

7. Впервые на трех линиях опухолевых клеток показана прямая корреляция между количеством вторичных двунитевых разрывов, возникших в пострепликативный период, и эффективностью системы MMR.

Показать весь текст

Список литературы

Тронов В. А., Константинов Е. М., Крамаренко И. И. Роль эксцизионных механизмов репарации ДНК в индукции апоптоза // Биохимия.-2002.-Т. 67.-С. 882−889.
Штам Т.А., Вострюхина O.A., Гуляев В. В., и др. Генетические повреждения в ходе прогрессии наследственного неполипозного рака толстой кишки // ДАН.-2004.-Т. 395.-С. 126−131.
Aarnio M., Sankila R., Pukkala E., et al. Cancer risk in mutation carriers of DNA mismatch repair genes // Int. J. Cancer.-1999.-Vol. 81.-P. 214 218.
Aebi S., Kurdi-Haidar B., Gordon R., et al. Loss of DNA mismatch repair in acquired resistance to cisplatin // Cancer Res.-1996.-Vol. 56.-P. 30 873 090.
Allen D.J., Makhov A., Grilley M., et al. MutS mediates heteroduplex loop formation by a translocation mechanism // EMBO J.-1997.-Vol. 16.-p. 4467−4476.
Barnes C.J., Wahl A.F., Shen B., et al. Mechanism of Tracking and Cleavage of Adduct-damaged DNA Substrates by the Mammalian 5/- to 3/ -Exonuclease/Endonuclease RAD2 Homologue lor Flap Endonuclease 1 // J. Biol. Chem.-1996.-Vol. 271.-P. 29 624−29 631.
Barras F., Marinus M.G. The great GATC: DNA methylation in E. coli // Trends Genet.-1989.-Vol. 5.-P. 139−143.
Bedi A., Pasricha P.J., Akhtar A.J., et al. Inhibition of apoptosis during development of colorectal cancer // Cancer Res.-1995.-Vol. 55.-P. 18 111 816.
Bellacosa A. Functional interactions and signaling properties of mammalian DNA mismatch repair proteins // Cell Death and Differentiation.-2001.-Vol. 8.-P. 1076−1092.
Bellacosa A., Cicchillitti L., Schepis F., et al. MED1, a novel human methyl-CpG-binding endonuclease, interacts with DNA mismatch repair protein MLH1 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1999.-Vol. 96.-P. 39 693 974.
Beneke R., Geisen C., Zevnik B., et al. DNA excision repair and DNA damage-induced apoptosis are linked to Poly (ADP-ribosyl)ation but have different requirements for p53 // Mol. Cell Biol.-2000.-Vol. 20.-P. 66 956 703.
Beranek D.T. Distribution of methyl and ethyl adducts following alkilation with monofunctional alkylating agents // Mutat. Res.-1990.-Vol. 231.-P. 11−30.
Bignami M., O’Driscoll M., Aquilina G., Karran P. Unmasking a killer: DNA 06-methylguanine and the cytotoxicity of methylating agents // Mutat. Res.-2000.-Vol. 462.-P. 71−82.
Bocker T., Ruschoff J., Fishel R. Molecular diagnostics of cancer predisposition: hereditary non-polyposis colorectal carcinoma and mismatch repair defects // Biochim. Biophys. Acta.-1999.-Vol. 1423.-P. 110.
Borner M.M., Joncourt F., Hotz M.A. Similarity of apoptosis induction by 2-chlorodeoxyadenosine and cisplatin in human mononuclear blood cells //Br. J. Cancer.-1997.-Vol. 76.-P. 1448−1454.
Chou K.-M., Cheng Y.-C. An nucleolytic activity of human apurinic/apyrimidinic endonuclease on 3 ' mispaired DNA // Nature.-2002.-Vol. 415.-P. 655−659.
Claij N., Te Riele H. Methylation tolerance in mismatch repair proficient cells with low MSH2 protein level // Oncogene.-2002.-Vol. 21.-P. 28 732 879.
Croitoru M.E., Cleary S.P., Di Nicola N., et al. Association between biallelic and monoallelic germline MYH gene mutations and colorectal cancer risk//J. Natl. Cancer Inst.-2004.-Vol. 96.-P. 1631−1634.
Drummond J.T., Li G.M., Longley M.J., Modrich P. Isolation of an hMSH2-pl60 heterodimer that restores DNA mismatch repair to tumor cells // Science.-1995.-Vol. 268.-P. 1909−1912.
Fichtinger-Schepman A.M., van der Veer J.L., Den Hartog J.H., et al. Adducts of the antitumor drug cis-diamminedichloroplatinum (II) with DNA: formation, identification, and quantitation // Biochemistry.-1985.-Vol. 24.-P. 707−713.
Genschel J., Littman S.J., Drummond J.T., Modrich P. Isolation of MutSbeta from human cells and comparison of the mismatch repair specificities of MutSbeta and MutSalpha // J. Biol. Chem.-1998.-Vol. 273.-P. 19 895−19 901.
Goodman M.F., Cai H., Bloom L.B., Eritja R. Nucleotide insertion and primer extension at abasic template sites in different sequence contexts // Ann. N. Y. Acad. Sci.-1994.-Vol. 726.-P. 132−142.
Grady W.M. Genetic testing for high-risk colon cancer patients // Gastroenterology.-2003.-Vol. 124.-P. 1574−1594.
Grombacher T., Kaina B. Isolation and analysis of inducibility of the rat N-methylpurine-DNA glycosylase promoter // DNA Cell Biol.-1996.-Vol. 15.-P. 581−588.
Holley W.R., Chatterjee A. Clusters of DNA induced by ionizing radiation: formation of short DNA fragments. I. Theoretical modeling // Radiat.Res.-1996.-Vol. 145.-P. 188−199.
Hollstein M., Rice K., Greenblatt M.S., et al. Database of p53 gene somatic mutations in human tumors and cell-lines // Nucl. Acids Res.-1994.-Vol. 22.-P. 3551−3555.
Hotchkiss J.H. A review of current literature on N-nitroso compounds in foods // Adv. Food Res.-1987.-Vol. 3l.-P. 53−115.
Jiricny J. Colon cancer and DNA repair: have mismatches met theirmatch?//Trends Genet.-1994.-Vol. 10.-P. 164−168.
Jiricny J., Hughes M., Corman N., Rudkin B.B. A human 200-kDa proteinbinds selectively to DNA fragments containing G. T mismatches // Proc.
Natl. Acad. Sci. USA.-1988.-Vol. 85.-P. 8860−8864.
Kaina B., Lohrer H., Karin M., Herrlich P. Overexpressed humanmetallothionein IIA gene protects Chinese hamster ovary cells from killingby alkylating agents // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1990.-Vol. 87.-P.2710−2714.
Karpukhin A.V., Pospekhova N.I., Lubchenko L.N., et al. Frequencies of single-nucleotide polymorphisms and mutations in the BRCA1 gene in patients with hereditary breast or ovarian cancer // Dokl. Biol. Sci.-2002.-Vol. 383.-P. 144−146.
Karran P., Hampson R. Genomic instability and tolerance to alkylating agents // Cancer Surv.-1996.-Vol. 28.-P. 69−85.
Kolodner R.D., Hall N.R., Lipford J., et al. Structure of the human MSH2 locus and analysis of two Muir-Torre kindreds for msh2 mutations // Genomics.-1994.-Vol. 24.-P. 516−526.
Margison G.P., Povey A.C., Kaina B., Santibanez Koref M.F. Variability and regulation of 06-alkylguanine-DNA alkyltransferase // Carcinogenesis.-2003.-Vol. 24.-P. 625−635.
Masramon L., Ribas M., Cifuentes P., et al. Cytogenetic characterization of two colon cell lines by using conventional G-banding, comparative genomic hybridization, and whole chromosome painting // Cancer Genet. Cytogenet.-2000.-Vol. 121.-P. 17−21.
McGlynn A.P., Wasson G.R., O’Reilly S., et al. Detection of replicated integrity in small colonic biopsies using the BrdUrd comet assay // Br. J. Cancer.-2003.-Vol. 88.-P. 895−901.
Mehta R.G. Experimental basis for the prevention of breast cancer // Eur. J. Cancer.-2000.-Vol. 36.-P. 1275−1282.
Meikrantz W., Bergom M.A., Memisoglu A., Samson L. 06-alkylguanine DNA lesions trigger apoptosis // Carcinogenesis.- 1998.-Vol. 19.-P. 369 372.
Nicolaides N.C., Papadoloulos N., Liu B., et al. Mutations of two PMS homologues in hereditary nonpolyposis colon cancer // Nature.-1994,-Vol. 371.-P. 75−80.
Ochs K., Kaina B. Apoptosis induced by DNA damage 06-methylguanine is BCL-2 and caspase-9/3 regulated and Fas/caspase-8 independent // Cancer Res.-2000.-Vol. 60.-P. 5815−5824.
Ostling O., Johanson K.J. Bleomycin, in contrast to gamma irradiation, induces extreme variation of DNA strand breakage from cell to cell // Int. J. Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med.-1987.-Vol. 52.-P. 683−691.
Palombo F., Gallinari P., Iaccarino I., et al. GTBP, a 160-kilodalton protein essential for mismatch-binding activity in human cells // Science.-1995.-Vol. 268.-P. 1912−1914.
Parker A.R., O’Meally R.N., Oliver D.H., et al. 8-Hydroxyguanosine Repair Is Defective in Some Microsatellite Stable Colorectal Cancer Cells //Cancer Res.-2002.-Vol. 62.-P. 7230−7233.
Parsons R., Li G.M., Longley M.J., et al. Hypermutability and mismatch repair deficiency in RER+ tumor cells // Cell.-1993.-Vol. 75.-P. 12 271 236.
Parsons R., Li G.M., Longley M.J., et al. Mismatch repair deficiency in phenotypically normal human cells // Science.-1995.-Vol. 268.-P. 738 740.
Partlin M.M., Homer E., Robinson H., et al. Interactions of the DNA mismatch repair proteins MLH1 and MSH2 with c-MYC and MAX // Oncogene.-2003.-Vol. 22.-P. 819−825.
Pegg A.E., Dolan M.E., Moschel R.C. Structure, function, and inhibition of 06-alkylguanine-DNA alkyltransferase // Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol.-1995.-Vol. 51.-P. 167−223.
Peltomaki P. DNA mismatch repair and cancer // Mutat. Res.-2001.-Vol. 488.-P. 77−85.
Povey A.C., Hall C.N., Badawi A.F., et al. Elevated levels of the pro-carcinogenic adduct, 0(6)-methylguanine, in normal DNA from the cancer prone regions of the large bowel // Gut.-2000.-Vol. 47.-P. 362−365.
Povey A.C., Badawi A.F., Cooper D.P., et al. DNA alkylation and repair in the large bowel: animal and human studies // J. Nutr.-2002.-Vol. 132.-P. 3518S-3521S.
Preuss I., Eberhagen I., Haas S., et al. 06-methylguanine-DNA methyltransferase activity in breast and brain tumors // Int. J. Cancer.-1995.-Vol.61.-P. 321−326.
Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual // Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, NY.-1989.
Savio M., Stivala L.A., Bianchi L., et al. Involvement of the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in DNA repair induced by alkylating agents and oxidative damage in human fibroblasts // Carcinogenesis.-1998.-Vol. 19.-P. 591−596.
Schreiber V., Huntin D., Trucco C., et al. A dominant-negative mutant of human poly (ADP-ribose) polymerase affects cell recovery, apoptosis, and sister chromatid exchange following DNA damage // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1995.-Vol. 92.-P. 4753−4757.
Seeberg E., Eide L., Bjoras M. The base excision repair pathway // Trends Biochem. Sci.-1995.-Vol. 20.-P. 391−397.
Seigneur M., Bidnenko V., Ehrlich S.D., Michel B. RuvAB acts at arrestedreplication forks // Cell.-1998.-Vol. 95.-P. 419−430.
Shivji K.K., Kenny M.K., Wood R.D. Proliferating cell nuclear antigen isrequired for DNA excision repair// Cell.-1992.-Vol. 69.-P. 367−374.
Sia E.A., Kokoska R.J., Dominska M., et al. Microsatellite instability inyeast: dependence on repeat unit size and DNA mismatch repair genes //
Mol. Cell Biol.-1997.-Vol. 17.-P. 2851−2858.
Singh N.P., McCoy M.T., Tice R.R., Schneider E.L. A simple technique for quantitation of low levels of DNA damage in individual cells // Exp. Cell Res.-1988.-Vol. 175.-P. 184−191.
Thykjaer T., Christensen M., Clark A.B., et al. Functional analysis of the mismatch repair system in bladder cancer // Br. J. Cancer.-2001.-Vol. 85.-P. 568−575.
Vasen H.F.A., Meklin J.-P., Meera Khan P., et al. The International Collaborative Group on hereditary non-polyposis colorectal cancer // Dis. Colon Rectum.-1991.-Vol. 34.-P. 424−425.
Wildenberg J., Meselson M. Mismatch repair in heteroduplex DNA // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1975.-Vol. 72.-P. 2202−2206.
Yang J., Liu X., Bhalla K., et al. Prevention of apoptosis by Bcl-2: release of cytochrome C from mitochondria blocked // Science.-1997.-Vol. 275.-P. 1129−1132.
Yu Z., Chen J., Ford B.N., et al. Human DNA repair systems: an overview // Environ Mol. Mutagen.-1999.-Vol. 33.-P. 3−20.
Zhou Z.-Q., Manguino D., Kewitt K., et al. Spontaneous hepatocellular carcinoma is reduced in transgenic mice overexpressing human 06-methylguanine-DNA-methyltransferase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2001.-Vol. 98.-P. 12 566−12 571.

Заполнить форму текущей работой