Диагностика. 
Лихорадка Эбола. 
Современная ситуация, профилактика, лечение

Ведущим информационным пунктом является тщательно собранный эпидемиологичсекий анамнез (проживание в эндемичном регионе, пребывание в нем или прибытие из региона, где регистрируются случаи ГЛ Эбола; контакт с лихорадящим больным на эндемичной территории, контакт с животными в странах Африки).

Клинические данные (острое начало, быстрое развитие симптомов заболевания, наличие в клинике лихорадки, тяжелой интоксикации, геморрагического синдрома, признаков поражения многих органов и систем — печень, почки, легкие, миокард и другие).

Общий анализ крови не является специфичным методом исследования, который бы мог подтвердить или опровергнуть диагноз лихорадки Эбола. Тем не менее, данное исследование предоставляет достаточно большое количество данных, на основании которых можно судить об общем состоянии больного.

При лихорадке Эбола в общем анализе крови обнаруживаются следующие отклонения:

• · низкое число тромбоцитов;
• · низкое число лимфоцитов;
• · низкое число лейкоцитов.

Кроме того, при значительных кровопотерях может быть увеличен гематокрит — индекс, указывающий на соотношение жидкой составляющей крови к клеточным элементам.

В биохимическом анализе крови возможны следующие изменения:

• · Увеличение уровня АЛТ и АСТ. АЛТ (аланинаминотрансфераза) и АСТ (аспартатаминотрансфераза) являются ферментами, которые выделяются в большом количестве в кровь при поражении печени, и которые могут указать на масштабы повреждения данного органа.
• · Увеличение концентрации билирубина. При поражении печени нарушается метаболизм билирубина — пигмента, который образуется при распаде гемоглобина. Повышенная концентрация билирубина в крови является причиной развития желтухи.
• · Увеличение концентрации азота и креатинина в крови. В процессе распада белков во время метаболизма образуются азотистые основания, которые являются токсичными для организма, и которые в норме выводятся почками. Происходящий при лихорадке Эбола отказ почек является причиной нарушения процессов нормального выведения азотистых оснований и их накопления в организме.
• · Метаболический ацидоз. Метаболический ацидоз, то есть повышение кислотности крови (снижение pH) возникает по причине нарушения процессов клеточного дыхания (с избыточным образованием молочной кислоты) и из-за нарушения функции почек.

Выделение и исследование вируса Окончательный диагноз лихорадки Эбола основывается на выделении и идентификации вируса на культурах тканей или при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции) с обратной транскрипцией. Однако данные исследование сопряжены с высоким риском инфицирования, а кроме того, они требуют особых условий. На сегодняшний день выделение и исследование вируса осуществляется всего в нескольких лабораториях в мире.

Серологические анализы С помощью серологического исследования определяется тип и концентрация специфичных антител, которые вырабатываются иммунными клетками инфицированного человека.

Антитела представляют собой белки особой конфигурации, которые синтезируются в иммунных клетках, и которые способны специфично связываться с патогенными агентами, инактивируя их и делая их более заметными для фагоцитов (иммунные клетки, способные поглощать вирусы и бактерии). Синтез антител проходит через две последовательные фазы — изначально синтезируются белки типа IgM, ответственные за краткосрочный, экстренный иммунитет, максимальная концентрация которых приходится на конец первой — начало второй недели заболевания. Через полторы — две недели данные белки сменяются антителами класса IgG, ответственные за долгосрочный иммунитет. В условиях молниеносной эволюции лихорадки Эбола, при которой иммунные клетки значительно ингибируются, иммунный ответ далеко не всегда является достаточным.

Для диагностики лихорадки Эбола используют следующие методы выявления антител:

• · Непрямой иммунофлюоресцентный анализ. Метод непрямой иммунофлюоресценции позволяет выявлять антитела в сыворотке человека путем проведения реакции между сывороткой и известным антигеном (частицы вируса). После данной реакции в систему вводятся специальные меченые иммуноглобулины, которые присоединяются к антителам, если они вступили в реакцию с антигеном. После смывания непрореагировавших частиц проводится микроскопия в специальном микроскопе, который позволяет фиксировать свечение меченых частиц. Данный метод связан с довольно высоким процентом ложноположительных результатов.
• · Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA). Иммуноферментный анализ позволяет не только выявлять специфические антитела, но и определять их тип. В основе метода лежат несколько последовательных стадий. Изначально, на специальной пластине производят фиксацию антитела. К получившейся системе добавляют антигены, меченые ферментом. Через некоторое время пластину промывают для удаления не вступивших в реакцию частиц, а затем добавляют в нее специфичный для фермента субстрат и вещество, способное изменять цвет при изменении среды. Если антитела вступили в реакцию с антигенами, то они остались в системе и, соответственно, прикрепленный к ним фермент расщепит субстрат и вызовет изменение среды с изменением цвета раствора. По интенсивности окраски можно судить о концентрации антител (титр антител). Данный метод диагностики является крайне специфичным и чувствительным.
• · Реакция связывания комплемента. Система комплемента представляет собой особую систему, ответственную за разрушение патогенных клеток. Реакция связывания комплемента основывается на том факте, что комплемент присоединяется к комплексу антиген-антитело. Связанный комплемент не способен вступить в реакцию с гемолитической сывороткой, которая добавляется во второй фазе анализа и, соответственно, не способен вызвать разрушение эритроцитов в системе. Благодаря этому становится возможным визуализация реакции и выявление специфичных антител.
• · Реакция непрямой гемагглютинации. Суть реакции непрямой гемагглютинации состоит в том, что при взаимодействии антител с антигенами, прикрепленными к поверхности эритроцитов, формируется устойчивый комплекс, который «склеивает» эритроциты между собой. В результате при положительной реакции эритроциты выпадают в осадок.

Необходимо отметить, что из-за высокого риска инфицирования, все анализы должны осуществляться в специальных лабораториях в условиях тщательного соблюдения противоэпидемиологических мероприятий.

Гистологическое исследование тканей Гистологическое исследование тканей предполагает изучение микроструктуры тканей под световым или электронным микроскопом с целью выявления специфичных изменений. Данный метод предполагает забор фрагментов тканей у живого или умершего человека с целью постановки или подтверждения диагноза. Проводится данная процедура с соблюдением правил асептики и антисептики, а также с максимальной осторожностью и с применением всех необходимых противоинфекционных мероприятий.

При лихорадке Эбола отмечаются следующие гистологические изменения:

• · очаги некроза в печени;
• · эозинофильные частицы в печени;
• · минимальное воспаление в тканях печени;
• · очаги некроза в селезенке;
• · некроз лимфатических узлов;
• · очаги некроза в почках;
• · очаги некроза в половых органах.

Данные изменения не являются специфичными только лишь для лихорадки Эбола, однако в сочетании с клинической картиной, эпидемиологическими данными и результатами других анализов позволяют подтвердить диагноз.

При наличии необходимого оборудования может быть проведен иммуногистохимический тест, который позволяет выявлять вирусные частице во фрагменте кожи или другой ткани. Фиксированный в формалине фрагмент тканей не представляет эпидемиологической угрозы и поэтому может быть свободно отправлен в подходящую лабораторию.

Электронная микроскопия, позволяющая напрямую визуализировать вирус, не может быть использована в эпидемиологических очагах, по причине того, что необходимое для этого оборудование является крайне дорогим и громоздким.