Биологические свойства изолятов ВИЧ-1, выделенных от пациентов с территорий СНГ

Актуальность проблемы. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) приводит к летальному заболеванию — синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД). По данным ВОЗ, в 1998;ой год человечество вступило с более, чем 30-тью миллионами ВИЧ-инфицированных пациентов. Из них большая часть (21 млн.) проживает на Африканском континенте (главным образом, в центральной и южной Африке) — 5.8 млн. — в Юго-Восточной Азии- 12 тыс. — в Австралии, Новой Зеландии и Океании- 1.2 млн. — в Латинской Америке- 860 тыс. — в США и Канаде- 480 тыс. — в Западной Европе- 180 тыс. — в Восточной Европеоколо 2 тыс. — в Беларусиоколо 10 тыс. — в России. Кумулятивная смертность от СПИДа составила 11.7 млн. В 1997 г. было выявлено 5.8 млн. новых случаев ВИЧ-инфекции, причем государства бывшего СССР уверенно лидируют по скорости развития эпидемии (ежегодный приростболее 100%). В контексте сложившейся эпидемиологической обстановки, исследования (включая данную работу), направленные на изучение биологических свойств различных вариантов ВИЧ и эффективности схем химиотерапии этой вирусной инфекции, представляются чрезвычайно актуальными.

Цель работы. Целью данной работы является изучение биологических свойств ряда первичных изолятов ВИЧ-1 in vitro, выделенных от инфицированных пациентов с территории СНГ, установление взаимосвязи между фенотипическими особенностями изолятов, стадией инфекции и клиническими характеристиками заболеванияразработка подходов к созданию индивидуальных схем химиотерапии ВИЧ-инфекции с учетом ее характеристик для конкретного пациента.

Научная новизна работы. Сегодня отсутствует общепризнанная классификация первичных изолятов ВИЧ на основании сравнения их фенотипических свойств. В данной работе проанализирована взаимосвязь между скоростью и уровнем репродукции ряда первичных изолятов ВИЧ-1 в различных клеточных системах. Впервые изучены биологические свойства вариантов ВИЧ-1 субтипа А, вызвавших резкую эпидемическую вспышку в г. Светлогорске (Гомельская обл. Беларуси). Предложена экспериментальная система для оценки эффективности химиопрепаратов на модели мононуклеаров периферической крови пациента in vitro.

Научно-практическое значение работы. Стоимость эффективной анти-ВИЧ химиотерапии (например, тройных комбинаций AZT+ЗТС+индинавир и т. п.), в настоящее время, чрезвычайно высока (такая терапия оценивается в 20−25 тыс. долларов США ежегодно на одного пациента). Эффективность различных химиопрепаратов ограничивается появлением резистентных вирусных вариантов. Выходом из этой ситуации мог бы оказаться доклинический анализ возможной химиотерапии in vitro. Поэтому развитый в данной работе подход по индивидуальному подбору схем химиотерапии имеет практическое значение.

Характеристики изученных изолятов ВИЧ-1 переданы лечащим врачам соответствующих пациентов в клинику Института иммунологии МЗ РФ, Клиническую инфекционную больницу № 2 г. Москвы, Районную поликлинику г. Светлогорска (Гомельская обл. Беларуси).

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 132 страницах машинописного текста, включая 5 таблиц, 22 рисунка, и состоит из разделов: Введение, Обзор литературы, Материалы и методы, Результаты и обсуждение, Выводы. Библиографический список включает 231 наименование.

1. Щелканов М. Ю., Сахурия И. Б., Полякова Е. Б., Бурунова В. В., Пашкова Т. А., Корнилаева Г. В., Карамов Э. В. Повышение качества МТТ-метода с помощью микродозаторных наконечников специальной конструкции // Иммунология. -1998, — N4. -С. 57−59.

2. Щелканов М. Ю., Цветков Ф. О., Сахурия И. Б., Пашкова Т. А., Бурунова В. В., Корнилаева Г. В., Карамов Э. В. Сменный нефрикционный мембранный фильтр для предотвращения контаминации клеточных культур // Клин. Лаб. Диагностика. 1998. — N 7. — С. 20.

3. Пашкова Т. А., Ярославцева Н. Г., Щелканов М. Ю., Папуашвили М. Н., Сахурия И. Б., Корнилаева Г. В., Карамов Э. В. Биологические свойствапервичных изолятов ВИЧ-1 различных серотипов//Вопросы вирусологии. -1998. -N 5.

4. Щелканов М. Ю., СахурияИ.Б., Буру нова В.В., Пашкова Т. А., АбэлянА.В., Павлова Т. В., Корнилаева Г. В., Карамов Э. В. Дегидрогеназная активность ВИЧ-инфицированных клеток при анализе результатов МТТ-теста // Иммунология. 1998. — N 6.

5. Карамов Э. В., СахурияИ.Б., Щелканов М. Ю., БуруноваВ.В., Ярославцева Н. Г., Павлова Т. В., Корнилаева Г. В. Новые подходы к химиотерапии ВИЧ-инфекции // ЖМЭИ. Принято в печать.

6. Абэлян A.B. Диссертационная работа на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. М.: НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН, 1997.

7. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимиков. М., 1983.

8. Анджапаридзе О. Г., Богомолова H.H. Моделирование и исследование хронических форм вирусных инфекций в культурах клеток. М., 1974.

9. Еремин В. Ф. Фенотипическая характеристика изолятов ВИЧ, выявленных на территории Республики Беларусь//Вопросы вирусологии. 1998. — Т. 43. -N3.-С. 113−116.

10. Карамов Э. В., Лукашов В. В. Резистентность к азидотимидину при инфекции вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) // Молекулярная биология. 1994. Т.28. С. 7−20.

11. Козлов А. П., Емельянов A.B., Веревочкин C.B., Карамов Э. В. Закономерности ранней фазы эпидемии ВИЧ/СПИД //Рус. Журн. «ВИЧ, СПИД и родственные проблемы». 1997. — Т. 1. — С. 5−28.

12. Краевский A.A., Тарусова Н. Б., Кин-Ю Жу. Новые 5'-фосфонаты модифицированных по сахарному остатку нуклеозидов как ингибиторы продукции ВИЧ //Молекулярная биология 1992. — Т.26. — С. 624−634.

13. Лимфоциты. Методы / Ред. Дж. Клаус. М.: Мир, 1990. — 400 с.

14. М. Ю. Щелканов., Н. Г. Ярославцева, А. Н. Юдин, Ю. А. Мирсков, В. Ф. Ерёмин, Л. П. Титов, П. Г. Рытик, Э. В. Карамов. Анализ серологических свойств ВИЧ-1 из очага эпидемии в Гомельской области Белоруссии (1996 г.) // Вопросы вирусологии. 1998. — N 5.

15. Носач В. В. Решение задач аппроксимации с помощью персональных компьютеров. М., 1994.

16. Пашкова Т. А. Диссертационная работа на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М.: НИИВ РАМН, 1996.

17. Пашкова Т. А., Ярославцева Н. Г., Щелканов М. Ю., Папуашвили М. Н., СахурияИ.Б., КорнилаеваГ.В., КарамовЭ.В. Биологические свойства первичных изолятов ВИЧ-1 различных серотипов//Вопросы вирусологии. -1998.-N 5.

18. Пирс Э. Гистохимия. М.: Мир, 1962. — 672 с.

19. Рубин Б. А., Воронков JT.A., Капустина Г. И. Биохимические изменения в инфицированной клетке //Биохимия. 1968. — Т. 33. — Вып. 1. — С. 121−125.

20. Сахурия И. Б., Щелканов М. Ю., Иванников Е. В., Юдин А. Н., Корнилаева Г. В., Горбачёва Э. С., Сойнов Л. А., Залунин В. В., Голиков В. А., Карамов Э. В. // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. 1997. -Т. 1. — N 1. -С. 141.

21. Соловьёв В. Д., Хесин Я. Е., Быковский А. Ф. Очерки по вирусной цитопатологии. М.: Медицина, 1979. — 197 с.

22. Хаитов Р. М., Игнатьева Г. А. СПИД. М.: Народная академия культуры и общечеловеческих ценностей, 1992. — 352 с.

23. Хаустов А. И., Гагаркин Н. И. Эпидемия ВИЧ/СПИД в Николаевской области//Русский журнал «ВИЧ/СПИД и Родственные Проблемы». 1997. -Т. 1. -N 1. — С. 127.

24. Хорлин A.A., Тарусова Н. Б., Краевский A.A. и др. Патент США N 5.043.438 Invention PCT/SU 88/271, приоритет от 29.09.1987.

25. Шагинян В. Р., Круглов Ю. В. Анализ территориального распределения уровней заболеваемости гепатитом В и ВИЧ-инфекцией//Русский журнал «ВИЧ/СПИД и Родственные Проблемы». 1997. — Т. 1. — N 1. — С. 127−128.

26. Щелканов М. Ю., Сахурия И. Б., Бурунова В. В., Пашкова Т. А., Абэлян Т. А., Павлова Т. В., Корнилаева Г. В., КарамовГ.В. Дегидрогеназная активность ВИЧ-инфицированных клеток при анализе результатов МТТ-теста // Иммунология. 1998. — N 6.

27. Щелканов М. Ю., Сахурия И. Б., Полякова Е. Б., Бурунова В. В., Пашкова Т. А., Корнилаева Г. В., Карамов Э. В. Повышение качества МТТ-метода с помощью микродозаторных наконечников специальной конструкции // Иммунология. -1998. -N 4. С. 57−59.

28. Щелканов М. Ю., Пашкова Т. А., Сахурия И. Б., Папуашвили М. Н., Карамов Э. В. Анализ биологических характеристик первичных изолятов ВИЧ-1 с помощью метода главных компонент//Вопросы вирусологии. 1998. — N 3. -С. 117−121.

29. Щелканов М. Ю. Серологические свойства V3-петли gpl20 вариантов ВИЧ-1, циркулирующих на территории бывшего СССР // Диссертационная работа на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М.: НИИВ РАМН, 1999.

30. Щелканов М. Ю., СойновЛ.А., ЗалунинВ.В., Славский A.A., Сахурия И. Б., Бурунова В. В., Ярославцева Н. Г., Карамов Э. В., Хаитов P.M. Определение дистантности спектров иммунореактивности при серотипировании ВИЧ // Иммунология. 1998. — N 6.

31. Щелканов М. Ю., ЮдинА.Н., Ерёмин В. Ф., Гадынская Н. И., ЯроелавцеваН.Г., Карамов Э. В. Увеличение серотипической гетерогенности ВИЧ-1 в Светлогорском очаге (1996) через год после начала вспышки эпидемии // Вопросы вирусологии. Принято в печать.

32. Щелканов М. Ю., Ярославцева Н. Г., Юдин А. Н., Бурунова В. В., Горбачёва А. П., Славский A.A., Ольшанский А. Я., Голиков В. А., Карамов Э. В. Серотипический профиль эпидемии ВИЧ-1 в Москве // Вопросы вирусологии. Принято в печать.

33. Щелканов М. Ю., Ярославцева Н. Г., Юдин А. Н., Мирсков Ю. А., Ерёмин В. Ф., Титов Л. П., Рытик П. Г., Карамов Э. В. Анализ серологических свойств ВИЧ-1 из очага эпидемии в Гомельской области Белоруссии (1996 г.) // Вопросы вирусологии. 1998. — N 6.

34. Ярославцева Н. Г., Лукашов В. В., Папуашвили М. Н., Прокопенко В. Д., Хаитов P.M., Карамов Э. В. УЗ-серотипы ВИЧ-1, представленные на территории России. Иммунология. 1996. — N 3. — С. 17−21.

35. Alkhatib G. et al. СС CKR5: a RANTES, MIP-la, MIP-ip receptor as a fusion cofaktor for macrophage-tropic HIV-1 // Science. 1996. — V. 272. — P. 1955;1958.

36. Almond N.M., Heeney J.L. AIDS vaccine development in primate model // AIDS. -1998. V. 12. — Suppl. A. — P. S133−140.

37. Apetrei C., Necula A., Holm-Hansen C., Loussert-Ajaka I., Pandrea I., Cozmei C., Streinu-Cercel A., Pascu F.R., Negut E., Molnar G., Duca M., Pecec M., Brun-Vezinet F., Simon F. HIV-1 diversity in Romania//AIDS. 1998. — V. 12. -P. 1079−1085.

38. Arthos J., Deen K., Chaikin M.A. // Cell. 1989. — V. 57. — P. 469−481.

39. Asjo A., Albert J., Karlsson A., Morfeldt-Manson L., Biberfeldt G., Fenyo E.M. Replicative properties of human immunodeficiency virus from patients with varying severity of HIV infection // Lancet. 1986. — ii. — P. 660−662.

40. Bachmann M.F., Zinkernagel R.M. The influence of virus structore on antibody responses and serotype formation// Imm. Today. 1996. — V. 17. — N 12. — P. 553 558.

41. Back N.K.T., Thiriart C., Delers A., Ramautarsing C., Bruck C., Goudsmit J. // J. Med. Virol. 1995. — V. 31. — P. 200−208.

42. Baldassarre F., Mallardo M., Mezza E., Scala G., Quinto I. Regulation of NF-kappa В through the nuclear processing of pi05 (NF-kappa Bl) in Epstein-Barrvirus-immortalized B cell lines // J. Biol. Chem. 1995. — V. 270. — P. 3 124 431 248.

43. Baltimore D. Viruses, polimerases and cancer// Science. 1976. — V. 162. — P. 632 636.

44. Barre-Sinoussi F., Chermann J.C., Rey F. and Monagnier L. Isolation of T-lymphotropic retrovirus from a patient at risk for aquired immune deficiency syndrome (AIDS) // Science. 1983. — V. 220. — P. 868−871.

45. Bastiani L., Laal S., Zolla-Pazner S., KimM. Host cell-dependent alterations in envelope components of HIV-1 virions // J. Virol. 1997. — V. 71. — P. 3444−3450.

46. Bates P.A., McGregor M.J., Islam S.A. et al. // Protein Engng. 1989. — V. 3. -P. 13−21.

47. Beckmann H., Kadesch T. The leucine zipper of TFE3 dictates helix-loop-helix dimerization specificity. // Genes Dev. 1991. -V. 5 P. 1057−1066.

48. Benn S. et al. Genomic heterogeneity of AIDS retroviral isolates from Noth America and Zaire // Science. 1985. — V. 230. — P. 949−956.

49. Berger E.A. Chemokine receptors and HIV entry//AIDS. 1997. — V. 11. -Suppl. A. — P. S5-S16.

50. Berkhout B., Jeang K.-T. Functional roles for the TATA promoter and enhancers in basal and Tat-induced expression of the HIV-1 long terminal repeat // J. Virol. -1992. V. 66. — P. 139−149.

51. Boucher C.A., O 5, 0Sullivan E., Mulder J.W. et al. Ordered appearanceof zidovudine (AZT) resistance mutations during treatment of 18 human immunodeficiency virus-positive subjects. // J. Infec. Dis. 1992. — V. 165. P. 105 110.

52. Boucher C.A., van Leeuwen R., Kellam P. et al. Effects of discontinution of zidovudine treatment on zidovudine sensitivity of human immunodeficiency virus type 1 isolates. //Antimicrob. Agents Chemother. 1993. — V. 37. — P. 15 251 530.

53. Boucher C.A.B., Tersmette M., Lange J.M.A. et al. // Lancet. 1990. — V.336. — P. 585−590.

54. Bou-Habib D.C., Roderiquez G., Oravecz T., Berman P.W., Lusso P., Norcross M.A. // J. Virol. 1994. — V. 68. — P. 6006−6013.

55. Brenneman D.E., Westbrook G.L., Fitzgerald S.P. Neuronal cell killing by the envelope protein of HIV and its prevention by vasoactive intestinal peptide //Nature. 1988. — Vol. 335. — P. 639−642.

56. Bukrinsky M.I., Syrsev V.A., Popov S.A., Barsov E.V., Chaplinskas S.A. and Karamov E.V. False-positive sera do not react with human immunodeficency virus (HIV) gag-encoded recombinant antigen//J. Med. Virol. 1989. — V. 7. -P. 72−75.

57. Camerini D., Seed B. // Cell. 1990. — V. 60. — P. 747−754.

58. Carpenter C.C.J., Fischl M.A., Hammer S.M. Antiretroviral therapy for HIV infection in 1997: updated recomendations of the International AIDS Society-USA panel. JAMA. — 1997. — V. 77. — P. 1962;1969.

59. CavertW., Notermans D.W., Staskus K. Kinetics of response in lymphoid tissues to antiretroviral therapy of HIV-1 infection// Science. 1997. — V. 276. — P. 960 964.

60. CDC. Pneumocystis pneumonia. Kaposi’s sarcoma and Pneumocystis pneumonia among homosexual men // MMWR. 1981. — V. 30. — P. 250−252, 305−308.

61. Cho M.W., Lee M.K., Carney M.C., BersonJ.F., Doms R.W., Martin M.A. Identification of detrminants on a dualtropic human immunodeficiency virus type 1 envelope glycoprotein that confer usage of CXCR4//J. Virol. 1988. — V. 72. -P. 2509−2515.

62. Clair M.H., Martin J.L., Tudor-Williams G. et al. Resistance to ddland sensitivity to AZT induced by a mutation in HIV-1 reverse transcriptase // Science. 1991. -V. 253.-P. 1557−1559.

63. Clavel F., Guetard D., BrunVezinet F. Isolation of a new human retrovirus of West-African patients with AIDS // Science. 1986. — V. 233. — P. 343−346.

64. Coney A.J., Tsai S.Y., O’Malley B. W., Tsai M.-J. Chiken ovalbumin upstream promoter transcription factor binds to a negative regulatory region in the HIV-1 long terminal repeat // J. Virol. 1991. — V. 65. — P. 2853−2860.

65. Cravcik S., Sahai J., KerrB. Nelfinavir mesylate (NFV) increases saquinavir-soft gel capsule exposure in HIV+ patients // 4th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections. Washington. — January, 1997. — Abstract 371.

66. Dalgleish A.G. et al. The CD4 (T4) antigen is an essential component of the receptor for the AIDS retrovirus //Nature. 1984. — V. 312. — P. 763−767.

67. De Clercq E. Strategy of anti-HIV therapy // Antiviral. Res. 1989. — Vol.12. -P. 1−20.

68. DeGruttola V., Hughes M., Gilbert P., Phillips A. Trial design in the era of highly effective antiviral drug combinations for HIV infection//AIDS. 1998. — V. 12. -Suppl. A.-P. S149-S156.

69. Dietrich U. et al. The epidemiology of HIV in India // Trends Microbiol. 1995. -V. 3. — P. 17−21.

70. Dittmar M.T., McKnight A., Simmons G., Clapham P.R., Weiss R.A., Simmonds P. Co-receptors for HIV-into-cell entry // Nature. 1997. — Vol. 385. — P. 495−496.

71. Diviacco S., Norio P, Zentilin L., et al. // Gene 1992. — V. 122. — P. 313−320.

72. DomsR.W., PeipertS.C. Unwelcomed guests with master keys: how HIV uses chemokine receptors for cellular entry // Virology. 1977. — V. 235. — P. 179−190.

73. Doranz B, J. et al. A dual-tropic primary HIV-1 isolate that users fusin and the beta-chemokine CKR-5, CKR-3, and CKR-2b as fusin cofactors // Cell. 1996. — V. 85. -P. 1149−1158.

74. Dragic T. et al., HIV-1 entry into CD4(+) cells is mediated by the chemokine receptor CC-CKR-5 //Nature. 1996. — V. 381. — P. 661−666.

75. Dynan W.S., Chervitz S.A. Characterization of a minimal simian virus 40 late promoter: enhancer elements in the 72-base-pair repeat not required // J. Virol. -1989. -V. 63. P. 1420−1427.

76. Endres M.J. et al. CD4-independent infection by HIV-2 is mediated by Fusin/CXCR4 // Cell. 1996. — V. 87. — P. 745−756.

77. Federsppiel B. et al. Molecular cloning of the cDNA and chromosomal localization of the gene for a putative seven-transmembrane segment (7-TMS) receptor isolated from human spleen // Genomics. 1993. — V. 16. — P. 707−712.

78. Feinberg M. Hidden dangers of incompletely suppressive antiretroviral therapy // Lancet. 1997. — V. 349. — P. 1408−1409.

79. Fenyo E.M. Biological phenotype in vitro // In: Abstract Book of Conference on AIDS. — 1996. — Berlin, Gemany — V. 1. — P. 1−7.

80. Fenyo E.M., Morfeld-Mansson L., Chiodi F., Lind B., von Gegerfelt A., Albert J., Olausson E., Asjo B. Distinct replicative and cytopathic characteristics of human immunodeficiency virus isolates // J. Virol. 1988. — V. 62. — P. 4414−4419.

81. Fiore J.R., Calabro M.L., Angarano G. HIV-1 variability and progression to AIDS: a longitudinal study // J. Med. Virol. 1990. — V. 32. — N 4. — P. 252−256.

82. Fitzgibbon J.E., Biron K.K., Keen M et al. Human immunodeficiency virus type 1 pol gene mutations which cause decreased susceptibility to 2', 3'-dideoxycytidine // Antimicrob. Agents Chemother. 1992. — V. 36. — P. 153−157.

83. Florino P.M. et al. Lymphadenopathy Assotiated virus infection of a blood donor-recipient pair with acquired immunodeficiency syndrom // Science. 1985. -V. 225. P. 69−72.

84. Foley G.M., Lazarus H., Farber S., Uzman B.G., Boone B.A., McCarthy R.E. Continuous culture of human lymphoblasts from peripheral blood of a child with acute leukemia // Cancer .- 1965. V. 18. — P. 522−529.

85. Furman P.A., Fyfe J.A., St. Clair M.H., Weinhold K., Rideout J.L., Freeman G.A., Nusinoff-Lehrman S., Bolognesi D.P., Broder S. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. — Vol. 83. — P. 8333−8337.

86. Gallo R.C. and Montanier L. The chronology of AIDS research// Nature. -1987.-V. 326.-P. 435−436.

87. Gallo R.C. et al. Isolation of Human T-cell Leucemia virus in acquired immunodeficiency syndrom // Science. 1983. — V. 220. — P. 865−868.

88. Gamier L., BowzardB., Wills J.W. Recent advances and remaining problems in HIV assembly // AIDS. 1998. — V. 12. — Suppl. A. — P. S5-S16.

89. Ghiara J.B., Stura E.A., Stanfield R.L., Profy A.T., Wilson I.A. Crystal structure of the principal neutralization site of HIV-1 // Science. 1994. — V. 264. -P. 82−85.

90. Gregor P.D., Sawadogo M., Roeder R.G. The adenovirus major late transcription factor USF is a member of the helix-loop-helix group of regulatory proteins and binds to DNA as a dimer // Genes Dev. 1990. — V. 4. — P. 17 301 740.

91. GulickR.M., Mellors J.W., HavlirD. Treatment with indinavir, zidovudine, and lamivudine in adults with human immunodeficiency virus infection and CD4 cell counts of 200 per cubic millimeter or less// New Engl. J. Med. 1997. -V. 337.-P. 734−739.

92. Hamers F.F., Downs A.M., InfusoA., Brunei J.-B. Diversity of HIV/AIDS epidemic in Europe // AIDS. 1998. — V. 12. — Suppl. A. — P. S63-S70.

93. Hammer S.M., Yeni P. Antiretroviral therapy: where are we? // AIDS. 1998. -V. 12.-Suppl. A. — P. S181-S188.

94. Harous J.M. et al. Inhibition of entry of HIV-1 in neural cell lines by antibodies against galactosyl ceramide // Science. 1991. — V. 253. — P. 320−323.

95. Harrich D., Ulich C., Garcia-Martinez L.F., Gaynor R.B.Tat is required for efficient HIV-1 reverse transcription // EMBO J. 1997. — V. 16. — P. 1224−1235.

96. Haseltine W.A. Molecular biology of the AIDS virus: ten years of discoveryhope for the future // In: Science Challenging AIDS. Basel: Karger, 1992. P. 71 106.

97. HauberJ., Perkins A., Heimer E.P. Gullen E.P. // Proc. Natl. Acad. Sei. US. 1987. — Vol. 284. — P. 6364−6386.

98. Havlir D.V., Lange J.M.A. New antiretrovirals and new combinations // AIDS.- 1998. V. 12. — Suppl. A. — P. S165-S174.

99. HerzongH. et al. Molecular cloning, characterization, and localization of the human homologe to the reported bovine NPY Y3 receptor: lack of NP // Genomics.- 1993. -V. 16. P. 700−706.

100. Hogervorst E., De Jong J., Van Mijk A., Bakker M., Valk M., Nara P., Goudsmit J. //J. Virol. 1995. — V. 69. — P. 6342−6351.

101. Hoggard P.G., Kewn S., Barry M.G., Khoo S.H., Back D.J. Effects of drugs on 2', 3 '-dideoxy2', 3 '-didehydrothymidinephosphorylation in vitro // Antimicrob. Agents Chemother. 1997. — V. 41. — V. 1231−1236.

102. Hu Y., Kazenwadel J., James R. Isolation and characterization of the murine homeobox gene Cdx-1. Regulation of expression in intestinal epithelial cells // J. Biol. Chem. 1993. — V. 268. — P. 214−225.

103. Human retroviruses and AIDS: compilation and analyses of nucleic and amino acid sequences / Ed. G. Myers. Theoretical Biology and Biophysics Group. Los Alamos National laboratory. New Mexico: Los Alamos, 1996.

104. Ivanoff L.A., Looney D.J., McDonal C. // AIDS Res. Hum. Retroviruses.1991.-V. 7.-P. 595−603.

105. Jankowski J.M., Dixon G.H. The GC box as a silencer // Biosci. Rep. 1987. -V. 7.-P. 955−963.

106. Javaherian K., Langlois A.J., LaRosa G.J., Profy A.T., Bolognesi D.P., Herlihy W.C., Putney S.D., Mattews T.J. // Science. 1990. — V. 250. — P. 1590−1593.

107. Jazin E.E. et al. A proposed bovine neuropeptide Y (NPY) receptor cDNA clone or its human homologue, confers neithe NPY binding sites nor NPY responsivention transfected cells // Regul. Pept. 1993. — V. 47. — P. 247−258.

108. Jones K.A., Kadonaga J.T., Luciw P.A., Tjian R. Activation of the AIDS retrovirus promoter by the cellular transcription factor, Spl // Science. 1986. — V. 232.-P. 755−759.

109. Jones K.A., Tjian R. Spl binds to promoter sequences and activates herpes simplex virus 'immediate-early' gene transcription in vitro // Nature. 1985. — V. 317.-P. 179−182.

110. Jong De J.J., De Ronde A., Keulen W., Tersmette M., Goudsmit J. // J. Virol.1992.-V. 66.-P. 6777−6780.

111. KalathoorS., Sinclair J., AndronL., SensionM.G., Highbarger H.C. Combination therapy with stavudine and didanosine // 4th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections. Washington, January 1997. — Abstract 552.

112. Kalyanaraman V.S. A new subtype of human T-cell Leukemia virus (HTLV-II) associated with a T-cell variant of hairy cell leukemia // Science. 1982. — V. 218. -P. 571−573.

113. Kan N.C., Franchini G. and Wong-Staal F. Identification of HIV sor gene product and detection of antibodies in human sera// Science. 1986. — V. 231. -P.1553−1555.

114. Kanter A.S., Spencer D.C., Steinberg M.H. Development of an HIV clinical and research database for South Africa//Methods Inf. Med. 1997. — V. 36. -P. 144−148.

115. Kellam P., Larder B.A., Boucher C.A. Fifth mutation in human immunodeficiency virus (HIV) type 1 reverse transcriptase contributes to the development of high-level resistance to zidovudine // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1992. -V. 89. P. 1934;1938.

116. Kellog S.E., Sninsky J.J., and Kwok S. // Analyt. Biochem. 1990. — V.189, p. 202−208.

117. Koot M., Vos A.H., Keet R.P., De Goede R.E., Dercksen M.W., Terpstra F.G., Coutinho R.A., Miedema F., Tersmette M. // AIDS. 1992. — V. 6. — P. 49−54.

118. Krayevsky A.A., Watanabe K.A. Modified nucleosides as anti-AIDS drugs: current status and perspectives. Moscow, 1993.

119. Lacey S.F., Larder B.A. A novel mutation (V75T) in the HIV-1 reverse transcriptase confers resistance to 2', 3'-didehydro-2', 3'-dideoxythymidine (D4T) in cell culture // Antimicrob. Agents Chemother. 1994. — V. 38. — P. 14 281 432.

120. Larder B. AZT resistance predicted by direct detection of mutation in DNA from HIV-infected lymphocytes // AIDS 1991. — V.5. — P. 137−144.

121. Larder B.A. 3'- Azido-3'-deoxythymidine resistance suppressed by a mutation conferring human immunodeficiency virus type 1 resistance to non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor // Antimicrob. Agents Chemother. 1992. V. 36. P. 2664−2669.

122. Larder B.A., Darby G., Richmann D.D. HIV with reduced sensitivity to zidovudine isolated during prolonged therapy // Science. 1989. — V. 243. — P. 1731−1734.

123. Letovsky J., Dynan W.S. Measurement of the binding of transcription factorSpl to a single GC box recognition sequence // Nucleic Acids Res. 1989. — V. 17. — P. 2639−2653.

124. Levy J.A. Pathogenesis of HIV infection // Microbiol. Rev. 1993. — V. 57. — P. 233−235.

125. Lifson J. D, Engelman E.G. // Immunol. Rev. 1989. — V. 109. — P. 93−117.

126. Lillie R.D. Histopathologic technic and practical histochemistry. -NY: McGraw-Hill Company, 1965. 439 p.

127. Loetsher M. et al. Cloning of all human seven-transmembrane domaine receptor, LESTR, that is highly expressed in leucocytes // J. Biol. Chem. 1994. -V. 269. — P. 232−237.

128. LoriF., MalykhA., Cara A. Hydroxyurea as an inhibitor of human immunodeficiency virus-type 1 replication // Science. 1994. — V. 266. — P. 801 805.

129. Lukashov V.V., Karamov E.V., Eremin V.F., Titov L.P., Goudsmit J. Extreme founder effect in an HIV type 1 subtype A epidemic among drug users in Svetlogorsk, Belarus// AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1998. — V. 14. — P. 12 991 303.

130. Mann D.L., O’Brein S.J., Gilbert D.A., Reid Y., Popovic M., Read-Connole E" Gallo R., Gazdar A. Origin of the HIV-susceptible human CD4+ cell line//AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1989. — V. 5. — P. 253−255.

131. McCaffrey P.G., Luo C" Kerppola T.K., Jain J., Badalian T.M., Ho A.M., Burgeon E., Lane W.S., Lambert J.N., Curran T. Isolation of the cyclosporin-sensitive T cell transcription factor NFATp // Science. 1993. V. 262. — P. 750 754.

132. McKnight A. Change in tropism upon immune escape by human immunodeficiency virus // J. Virol. 1995. — V. 69. — P. 3167−3170.

133. Merrill D.P., Manion D.J. Chou T.C., Hirsch M.S. Antagonism between human immunodeficiency virus type 1 protease inhibitors indinavir and saquinavir in vitro // J. Infect. Dis. 1997. — V. 176. — P. 265−268.

134. Mizukami T. Binding region for HIV and epitopes for HIV-sitedirected mutagenesis // PNAS US. 1988. — V. 85. — P. 9273−9277.

135. Mohri H., Ching W.T.W., Chang H.E. HIV-1 variants with reduced sensitivity to AZT // In: VI International Conference on AIDS, San Francisco, USA 1990. -V. 3. -Th.S.B.81.-P. 116.

136. Moore J.P., McKeating J.A., Huang Y.X., Ashkenazi A., Ho D.D. // J. Virol. -1992.-V. 66. P. 235−243.

137. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxity assay//J. Immunol. Methods. 1983. -V. 65. — P. 55−63.

138. Nara P.L. Neutralization of HIV-1: a paradox of humoral proporions // FASEB J. 1991. — V. 5. — N 10. — P. 2437−2455.

139. Nara P.L., Fischinger P.J. Quantitative infectivity assay for HIV-1 and HIV-2 //Nature. -1988. V. 322. — P. 469−470.

140. Nara P.L., Hatch W.C., Dunlop N.M., Robey W.G., Fischinger P.J. Simple, rapid quantitative, syncytium-forming microassay for the detection of human immunodeficiency virus neutralizing antibody // AIDS Res. Hum. Retroviruses. -1987. -V. 3. P. 283−302.

141. Niederman T.M., Garcia J.V., Hastings W.R., Luria S., Ratner L. Human immunodeficiency virus type 1 Nef protein inhibits NF-kappa B induction in human T cells // J. Virol. 1992. — V. 66. — P. 6213−6219.

142. Nomura H. Molecular cloning cDNAs encoding a LD78 receptor and putative leukocyte chemotactic peptide receptors // Int. Immunol. 1993. — V. 5. — P. 12 391 249.

143. Nunberg J.H. Viral resistance to human immunodeficiency virus type 1-specific pyridinone reverse transcriptase inhibitor // J. Virol. 1991. — V. 65. — P. 48 874 892.

144. Ovod V., Lagerstedt A., Ranki A. Immunological variation of immunohistochemical localization of HIV-1 Nef demonstrated with monoclonal antibodies // AIDS. 1992. — V. 6. — P. 25−34.

145. Pantaleo G., PerrinL. Can HIV be eradicated? II AIDS. 1998. — V. 12. -Suppl. A. — P. S175-S180.

146. Poiesz A.P. T-cell lines established from human T-lymphocytic neoplasias by direct response to T-cell growth factor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. -V. 77.-P. 6815−6819.

147. Popovic M., Read-Connole E., Gallo R. T4 positive human neoplastic cell lines susceptible to and permissive for HTLV-III // Lancet 1984. — V. ii. — P. 14 721 473.

148. Popovic M., Sarngadharan M.G., Read E., Gallo R. Detection, isolation, and continuos prodaction of cytopatic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and pre-AIDS // Science. 1984. — V. 224. — P. 497−500.

149. Preston B.D., Poiesz B.J., Loeb L.A. Fidelity of HIV-1 reverse transcriptase// Science. 1988. -V. 242. — P. 1168−1171.

150. Reed L., Muench H.//Amer. J. Hygiene. 1938. -V.27, P. 493−497.

151. Reed L., Muench H. A simple method of estimating 50% endpoints // Amer. J. Hygiene. 1938. — V. 27. — P. 493−497.

152. Richman D.D. // Antimicrob. Agents Chemot. 1993. — Vol. 37. — 1207−1213.

153. Roberts J.D., Katarzyna B., Thomas A.K. The accuracy of reverse transcriptase from HIV-1 // Science. 1988. — V. 242. — P. 63−65.

154. Roberts N.A., Jonson V., Merrill D. et al. Rationel design of peptide-based HIV proteinase inhibitors // Science 1990. — V. 248. — P. 358−361.

155. Robertson D.L., Sharp P.M., McCutchan F.E., Hahn B.H. Recombination in HIV-1 // Nature. 1995. — V. 374. — P. 124−126.

156. Saag M.S. Extensive variation of HIV-1 in vivo //Nature. 1988. — V. 334. — P. 440−444.

157. Sadaie M.R., Benter T., Wong-Staal F. Site-directed mutagenesis of two trans-regulatorygenes (tat III, trs) of HIV-1 // Science. 1988. — V. 239. — P. 910−913.

158. Satten tau O.J., Arthos J., Deen K. et al.// J. exp. Med. 1989. — V. 170. -P. 1319−1334.

159. Shaw J.P., Utz P.J., Durand D.B., Toole J.J., Emmel E.A., Crabtree G.R. Identification of a putative regulator of early T cell activation genes // Science. -1988. V. 241.-P. 202−205.

160. Shchelkanov M.Yu., Yudin A.N., Sakhuria I.B., Polyakova E.B., Pashkova T.A., Karamov E.V. // Abstract Book of 3-nd International Conference «AIDS, Cancer and Related Problems». 1995. — St.-Petersburg, Russia, May 22−26. -P. 74.

161. Shchelkanov M.Yu., YudinA.N., AntonovA.V., SoinovL.A., Zalunin V.V., VedenovA.A., KaramovE.V. Variability Analysis of HIV-1 gpl20 V3 Region: II. Hierarchy of taxons// J. Biomol. Struct. Dyn. 1997. — V. 15. — N2. — P. 231 241.

162. Simmons G. et al. Primary, syncytium-inducing human immunodeficiency virus type 1 isolates are dual-tropic most can use either LESTR or CCR5 as coreceptors for virus entry // J. Virol. 1996. — V. 70. — P. 8355−8360.

163. Skoog K.L., Nordenskjold Bo.A., Bjursell K.G. // Eur. J. Biochem. 1973. -Vol. 33.-P. 428−432.

164. Smith S.D., Shatsky M., Cohen P. S., Warnke R., Link M.P., Glader B.E. Monoclonal antibody and enzymatic profiles of human malignant T-lymphoid cell and derived cell lines // Cancer Res. 1984. — V. 44. — P. 5657−5660.

165. Smith S.D., Shatsky M., Cohen P. S., Warnke R., Link M.P., Glader B.E. Monoclonal antibody and enzymatic profiles of human malignant T-lymphoid cell and derived cell lines. Cancer Res. 1984. — Vol. 44. — P. 5657−5660.

166. Steinman R.M., Germain R.N. Antigen presentation and related immunological aspects of HIV-1 vaccines//AIDS. 1998. — V. 12. — Suppl. A. — P. S97-S112.

167. Stoff J., Shui-LokH. Vaccines and immunology//AIDS. 1998. — V. 12. -Suppl. A. — P. S95-S96.

168. Strebel K., Klimkait T. and Martin M.A. A novel gene of HIV-1, vpu, and its 16-kilodaltonproduct// Science. 1988. — V. 241. — P. 1221−1223.

169. Subert P.D., Larrick G.W. // Nature. 1992. — V. 359. — P. 557−558.

170. TakahashiH., Nakagawa Y., Pendleton C.D., Houghten R.A., Yokomuro K., Germain R.N., Berzofsky J.A. // Science. 1992. — V. 225. — P. 333−336.

171. Temin H. The DNA provirus hypothesis: the establishment and implications of RNA-directed DNA synttheses // Science. 1976. — V. 192. — P. 1075−1080.

172. Tersmette M., Gruters R.A., De Wolf F., De Goede R.E., Lange J.M., Schellekens P.T., Goudsmit J., Huisman H.G., Miedema F. // J. Virology. 1989. -V. 63.-P. 2118−2125.

173. Tersmette M., Koot M., de Gouede R.E.Y., Kootstra N., Schuitemaker H. / HIV: a practical approach // J. Karn. Oxford, 1995.

174. Vella S., Mildvan D. Clinical treatment // AIDS. 1998. — V. 12. — Suppl. 12. -P. S147-S148.

175. Virologische praxis / Herausgegeben von G. Starke. Jena: Veb Gustav Fischer Verlag, 1968. — 352 p.

176. Vistica D.T., Scehan P., Scudiero D., et al. Tetrazolium-based assay for cellular viability: a critical examination of selected parameters affecting formazan production. // Cancer Res. 1991. — V. 51. — P. 2515−2520.

177. Vogt G.M. Retroviral virions and genomes // In: Retroviruses / Ed. Coffin J.M., Hughes S.H., Varmus H. NY: Cold Spring Harbor Laboratory, 1997. — P. 27−70.

178. Vrang L., Basin H., Remaund G. eta al. // Antivir. Res. 1987. — V. 7. — P. 139 149.

179. Wei X., Ghosh S.K., Taylor M.E., Johnson V.A., Amini E.A., Deutch P., Lifson J.D., Bonhoeffer S., Nowak M.A., Hahn B.H., Saag M.S., Shaw G.M. // Nature. 1995. — Vol. 373. — P. 117−122.

180. Wilks D., Walker L., O’Brien J. et al.// Immunology. 1990. — V. 71. — P. 1015.

181. Wyatt R., Thali M., Tilley S., Pinter A., Posner M., Ho D., Robertson J., Sodroski J. // J. Virol. -1992. V. 66. — P. 6997−7004.

182. Yarchoan R., Mitsuya H., Myers C.E., Broder S. // New England J. Med. -1989.-Vol. 321.-P. 726−738.

183. Yolov A.A., Kozlova A.V., Yaroslavtseva N.G., Mednikov B.M., Karamov E.V. Quantitative PCR as a way to the gene-level monitoring of retroviral infection//Virus genes. 1995.-V. 10. — N 1. — P. 45−51.