Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Генетическая трансформация эмбриональных клеток кур с использованием ретровирусных векторов

Диссертация: Генетическая трансформация эмбриональных клеток кур с использованием ретровирусных векторов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Впервые исследованы механизмы доставки рекомбинантной ДНК в эмбриональные клетки кур посредством использования ретровирусных векторов, изучено влияние проводимых генно-инженерных манипуляций на эмбриогенез кур. Выявлены факторы, влияющие на эффективность генетической модификации эмбрионов кур in vivo. Дана характеристика паттернов интеграции и экспрессии рекомбинантных генов (lacZ, инсулин… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Особенности эмбрионального развития кур
    • 1. 2. Методы трансгенеза в птицеводстве
      • 1. 2. 1. Микроинъекция ДНК в цитоплазму зиготы
      • 1. 2. 2. Использование вирусных векторов для переноса экзогенной ДНК в эмбриональные клетки и органы птицы
      • 1. 2. 3. Использование эмбриональных стволовых клеток
      • 1. 2. 4. Использование примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) для получения трансгенной птицы
      • 1. 2. 5. Осеменение самок трансформированными спермиями
    • 1. 3. Ретровирусные векторы как эффективная система переноса чужеродных генов в клетки эукариот
      • 1. 3. 1. Биологические особенности ретровирусов
      • 1. 3. 2. Создание ретровирусных векторов
      • 1. 3. 3. Пакующие линии клеток
      • 1. 3. 4. Свойства ретровирусных векторных систем и их использование для генетической модификации сельскохозяйственной птицы
    • 1. 4. Применение трансгенных кур
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 2. 1. Материалы
      • 2. 1. 1. Реактивы и оборудование
    • 2. 2. Генные конструкции
    • 2. 3. Работа с культурой клеток
      • 2. 3. 1. Культивирование клеток
      • 2. 3. 2. Получение первичной культуры клеток эмбриона курицы
      • 2. 3. 3. Трансформация эмбриональных клеток кур in vitro ретровирусными векторами
      • 2. 3. 4. Введение ретровирусных векторов в в эмбрионы кур in vivo
    • 2. 4. Анализ на наличие генной конструкции
    • 2. 5. Анализ экспрессии рекомбинантных белков
      • 2. 5. 1. Имму ногистохимия
      • 2. 5. 2. Оценка экспрессии экзогенной [3-галактозидазы
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 3. 1. Результативность генетической трансформации эмбриональных клеток кур ретровирусными векторами в культуре in vitro
    • 3. 2. Изучение факторов, влияющих на результативность получения трансгенных кур
      • 3. 2. 1. Способ и стадия введения генных конструкций в эмбрионы
      • 3. 2. 2. Способ подготовки генных конструкций для инъекции и их концентрация
    • 3. 3. Эффективность использования ретровирусных векторов, содержащих целевые гены человека, для генетической трансформации эмбрионов кур in vivo
      • 3. 3. 1. Введение в эмбрионы кур генной конструкции рХ-RSVhgh
      • 3. 3. 2. Введение в эмбрионы кур генной конструкцииpX-ins
      • 3. 3. 3. Анализ эффективности интеграции генных конструкций в органах и тканях опытных кур
      • 3. 3. 4. Анализ экспрессии рекомбинантных белков в органах и тканях опытных кур
  • 4. ОБСУЖДЕНИЕ
  • 5. ВЫВОДЫ
  • 6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Генетическая трансформация эмбриональных клеток кур с использованием ретровирусных векторов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Создание генетически модифицированной птицы рассматривается в последние годы в качестве альтернативной технологии получения рекомбинатных белков человека, характеризующейся по сравнению с другими методами синтеза рекомбинатных белков (прокариотические и эукариотические клеточные системы, трансгенные животные биореакторы) относительно низкими материальными и временными затратами [Mizuarai S. et al., 2001; Harvey A. et ah, 2002; Mozdziak P. et ah, 2003; Kamihira M et a]., 2005; Kawabe Y. et al., 2006, Сураева H.M., 2008]. К важным преимуществам данной технологии производства рекомбинатных протеинов по сравнению с созданием животных-биореакторов следует отнести короткий генерационный интервал сельскохозяйственной птицы, позволяющий получать стадо продуцентов уже через полгода после получения родоначальников (для сравнения, получение стада продуцентов крупных сельскохозяйственных животных — коров, коз, свиней — требует до 3−5 лет), высокую белоксинтезирующую способность птицы, а также отсутствие патогенной микрофлоры в белке яйца. Вышеназванные преимущества обуславливают относительно невысокую стоимость получаемых рекомбинантных протеинов: затраты на производство 1 грамма рекомбинантного белка составляют около 10−25 центов, в то время как при использовании для этих целей молочной железы трансгенных животных стоимость возрастает до 100 долларов [Das R.C., 2001].

Однако традиционный метод получения трансгенных животных — микроинъекция ДНК в пронуклеус зиготы — является малоэффективным для получения трансгенной птицы, что связано, прежде всего, с особенностями ее воспроизводства и развития, а именно с трудностью в точности определения овуляции, большим количеством желтка в яйцеклетке, сильным уплотнением цитоплазмы около пронуклеусов. Все это требует поиска и разработки альтернативных методов переноса экзогенной ДНК, одним из которых является использование векторных систем на основе ретровирусов.

Цель и задачи исследований.

Исходя из вышеизложенного, целью диссертационной работы являлось изучение факторов, влияющих на результативность генетической трансформации эмбриональных клеток кур с использованием ретровирусных векторов.

Для достижения указанной цели были поставлены и решены следующие задачи:

1. Изучить компетентность эмбриональных клеток кур к рекомбинантным ретровирусным векторам in vitro.

2. Определить факторы, влияющие на результативность введения рекомбинантных ретровирусов в эмбриональные клетки кур (способ и период введения, концентрация и тип используемого препарата).

3. Изучить результативность генетической трансформации модифицированными ретровирусами эмбрионов кур in vivo.

4. Оценить влияние генно-инженерных манипуляций на развитие эмбрионов кур.

5. Провести анализ интеграции и экспрессии рекомбинантной ДНК в органах и тканях трансгенных кур.

Научная новизна.

Впервые исследованы механизмы доставки рекомбинантной ДНК в эмбриональные клетки кур посредством использования ретровирусных векторов, изучено влияние проводимых генно-инженерных манипуляций на эмбриогенез кур. Выявлены факторы, влияющие на эффективность генетической модификации эмбрионов кур in vivo. Дана характеристика паттернов интеграции и экспрессии рекомбинантных генов (lacZ, инсулин и гормон роста) в различных органах и тканях полученной трансгенной птицы.

Практическая значимость.

Усовершенствован метод получения трансгенных кур, основанный на использовании ретровирусных векторов. Предложен усовершенствованный способ введения ретровирусных векторов в эмбрионы кур in vivo. Оптимизированы отдельные этапы технологической цепочки создания трансгенной птицы, позволяющей получать трансгенных кур с интеграцией и экспрессией генов инсулина и гормона роста в ряде внутренних органов: сердце, печени, кишечнике, желудке, яйцеводе и репродуктивных органах, а также в мышечной ткани.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Опосредованный ретровирусами перенос генов как результативный способ генетической трансформации эмбриональных клеток кур in vitro и in vivo.

• Способ подготовки, состав инъекционного препарата, стадия введения ретровирусных векторов в эмбрионы кур in vivo как факторы, влияющие на результативность получения трансгенной птицы.

• Характер интеграции и экспрессии рекомбинантной ДНК в органах и тканях трансгенных кур.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на международных конференциях: «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2006, 2008гг.- «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, 2006 г.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 109 страницах, содержит 9 таблиц, 24 рисунка, 9 графиков, 1 схему. Библиографический список содержит 110 источников, в том числе 90 на иностранных языках.

5. ВЫВОДЫ.

1. Установлена компетентность эмбриональных клеток кур in vitro к рекомбинантным ретровирусам, полученным на основе векторов pBMN и рХ. Частота генетической трансформации клеток-мишеней варьировала от 8,6*10″ 4 до 5,9*10″ 3 в зависимости генной конструкции и метода трансфекции.

2. Выявлены факторы, влияющие на результативность генетической модификации эмбрионов кур in vivo рекомбинантными ретровирусами. С использованием генной конструкции pBMN-lacZ получены трансгенные цыплята с частотой интеграции экзогеннойй ДНК от 28,6 до 66,7% в зависимости от метода и стадии генно-инженерных манипуляций, а так же способа подготовки и концентрации генных конструкций.

3. Установлена высокая по сравнению с контролем эмбриональная смертность в опытных группах кур после проведения генно-инженерных манипуляций с эмбрионами. Максимальный процент гибели эмбрионов выявлен в первую неделю инкубации — от 10,0 до 50,0% при аналогичном показателе в контрольной группе 1,3%.

4. Усовершенствован метод введения ретровирусных генных конструкций в эмбриональные клетки кур, позволяющий получать трансгенную птицу с эффективностью до 8,8%. Максимальная результативность трансгенеза выявлена при введении клеток-упаковщиц в дорсальную аорту 2,5-дневных эмбрионов кур в концентрации 1000 клеток/эмбрион.

ДНК генных конструкций выявлены, преимущественно, в клетках сердца, печени, желудка, кишечника, репродуктивных органов, а также мышечной ткани. При введении генных конструкций в дорсальную аорту 2,5-дневных эмбрионов установлена трансформация репродуктивных органов у 25,042,9% полученных трансгенных цыплят в зависимости от концентрации вводимых генных конструкций.

6. Показана эффективность использования ретровирусных векторов, содержащих гены инсулина и гормона роста человека, для генетической трансформации эмбрионов кур in vivo. Интеграция генных конструкций выявлена у 53,5−61,8%) развившихся эмбрионов при общей эффективности получения трансгенных цыплят 7,0−8,0%). Экспрессия рекомбинантных белков установлена, преимущественно, в клетках кишечника, печени, яйцевода, репродуктивных органов, а так же мышечной ткани.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Лабораториям, занимающимся генной и клеточной инженерией животных, рекомендуем для эффективной трансформации органов и тканей кур in vitro и in vivo использовать генные конструкции на основе рекомбинантных ретровирусов.

Для получения трансгенных цыплят с эффективностью 7,0−8,0% рекомендуем осуществлять введение генных конструкций на основе рекомбинантных ретровирусов в дорсальную аорту 2,5-дневных эмбрионов в виде суспензии клеток-упаковщиц.

Показать весь текст

Список литературы

  1. И. К. Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих: автореф. диссер. канд. биол. наук.- Дубровицы. 2001. С. 22.
  2. . Ф. Инкубация яиц с основами эмбриологии сельскохозяйственной птицы / М.:КолосС. 2006. С. 248.
  3. Г., Зиновьева Н. А., Эрнст JI.K. Генные фермы новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными // Сельскохозяйственная биология. 1993. № 6. С.3−27.
  4. Г., Кройслих X., Штранцингер Г. Экспериментальная генетика в животноводстве /М.-РАСХН. 1995. С. 326.
  5. JI.A. Эффективность генетической трансформации соматических и эмбриональных клеток животных с использованием различных типов клеток «упаковщиц»: автореф. дисс. канд. биол. наук.-Дубровицы. 2005. С. 25.
  6. В. Ф., Сидорова М. В., Панов В. П. Морфология сельскохозяйственных животных. Анатомия и гистология с основами цитологии и эмбриологии / М.:Гринлайт. 2008. С. 510−516.
  7. Гистология / Под ред. Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юрина М.: Медицина, 2002. — 695с.
  8. Н. А., Эрнст JI. К., Брем Г. Трансгенные животные и возможности их использования: молекулярно-генетические аспекты трансгенеза в животноводстве // Дубровицы: ВИЖ. 2001.С. 128.
  9. Н. А., Эрнст JI.K. Проблемы биотехнологии и селекции сельскохозяйственных животных // Дубровицы: ВИЖ. 2004. С. 316.
  10. Микроскопическая техника: Руководство / под ред. Д. С. Саркизова, Ю. П. Перова. М.: Медицина, 1996. — 544 с.
  11. Новое в клонировании ДНК. Методы. / Под ред. Д. Гловера. М.: Мир, 1989. -368с.
  12. , Б. Микроскопическая техника / Б. Ромейс. Пер. с нем. В .Я. Александрова, З. И. Кроковой М.: Изд.-во иностр. лит.-ры, 1953. — 718с.
  13. Н. М., Самойлов А. В. Получение фармацевтических белков с помощью трансгенной птицы// Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. 2009. Т. 20, № 4. С. 19−23.
  14. В. Н. Вирусные болезни животных./ М.: ВНИТИБП, 1998. 363−460 с.
  15. B.C. Ретровирусные векторы эффективная система переноса и экспрессии чужеродных генов в клетках млекопитающих// Молекулярная биология. 1989. Т. 23, вып. 2. С. 8−12.
  16. В. А., Зиновьева Н. А., Волкова Н. А. Использование ретровирусных векторов для переноса генов в органы-мишени у сельскохозяйственных животных// Международная конференция. 2001. С. 90.
  17. JT. К., Зиновьева Н. А., Брем Г. Современное состояние и перспективы использования трансгенных технологий в животноводстве. М.: РАСХН, 2002. 341с.
  18. JI. К., Прокофьев М. И. Биотехнология сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1995. 192с.
  19. Chapman, Hu W., Ivarie R. Rapid and improved method for windowing eggs accessing the stage x chicken embryo// Mol. Reprod. 2005. Dev. 69:31−34.
  20. Barnard R., Elleder D., Young J. Avian sarcoma and leukosis virusvreceptor interactions: from classical genetics to novel insights into virus-cell membrane fusion// Virology. 2004. P. 25−29.
  21. Reconstitution of a chicken breed by inter se mating of germline chimeric birds/ M. Bednarczyk et al. Poult. Sci, 2002. 81, 1347−1353.
  22. Bednarczyk M., Lakota P., Siwek M. Improvement of hotchability of chicken eggs injected by biastodermal cells// Poult Sci. 2000. 79, 1823−1828.
  23. Borwornpinyo S., Brake J., Mozdziak P., Petitte J. Culture of chicken embryos in surrogate eggshells// Poult. Sci. 2005. 84, 1477−1482.
  24. Bosselman R., Hsu R., Boggs T, Hu S. Germline transmission of exogenous genes in the chicken // Science. 1989. 243, 533−535.
  25. Brinster R., Avarbock M. Germ line transmission of donor haplotype following spermatogonial transplantation// PNAS. 1994. 91, 11 303−11 307.
  26. Brasolot C., Chen H., Trumbauer M., Senear A., Warren R., Palmiter R. Somatic expression of herpes thymidine kinase in mice following injection of a fusion gene into eggs// Cell. 1991. 27, 223−231.
  27. Carsience R., Clark M., Verrinder Gibbins A., Etches R. Germline chimeric chickens from dispersed donor blastodermal cells and compromised recipient embryos // Development. 1993. 117, 669−675.
  28. Chang I., Jeong D., Hong Y., Park T. Production of germline chimeric chickens by transfer of cultured primordial germ cells// Cell Biol. Int. 1997. 21, 495−499.
  29. Clark A. J. Pharmaceuticals from transgenic livestock// Trends Biotechnol. 1997. 5, 20−24.
  30. Coffin J. Structure and classification of retroviruses// Plenum Press, NY. 1992. P. 19−49.
  31. DCosta S., Pardue S., Petitte J. Comparative development of avian primordial germ cells and production of germ line chimeras// Avian Poult Biol Rev. 2001. 12, 151−168.
  32. Das R. Production of therapeutic proteins from transgenic animals// Bio Business. 2001. P. 60−62.
  33. Ebara F., Fujihara N. Reproductive characteristics of transgenic (TG) chickens carrying an exogenous gene // Asian J Androl. 1999. Vol. 1. P. 139−144
  34. The receptor for the subgroup С avian sarcoma and leukosis viruses, Tvc, is related to mammalian butyrophilins, members of the immunoglobulin superfamily/ Elleder D. et al. Journal of Virology, 2005. 79, 10 408−10 419.
  35. Emery D, Friedemann Т., Yee J. Pseudotype formation of murine leukemia virus with the G protein of vesicular stomatitis virus// Journal of Virology. 1998. 65, 1202−1207.
  36. Fulton J., Delany M. Genetics. Poultry genetiresources—Operation rescue needed// Science. 2003. 300, 1667−1668.
  37. Gordon J., Scongos G., Plotkin D., Sorbose J. Genetic transformation of mouse embryos by microinjection of purified DNA// Proc Natl Acad Sci USA. 1996. 77, 7380−7384.
  38. Harvey A., Ivarie R. Validating the hen as a bioreactor for the production of exogenous proteins in egg white// Poult Sci. 2003. 82, 927−930.
  39. Harvey A., Speksnijder G., Bough L., Morris J. Consistent production of transgenic chickens using replication-deficient retroviral vectors and high throughput screening procedures // Poult Sci. 2002a. 81, 202−212.
  40. Harvey A., Speksnijder G., Bough L., Morris J. Expression of exogenous protein in the egg white of transgenic chickens// Nat Biotechnol. 2002b. 20, 396−399.
  41. Hajkova P., El-Maarri O., Engemann S., Oswald J. DNA-methylation analysis by the bisulfite-assisted genomic sequencing method // Methods in Molecular Biology. 2002. 200, 143−154.
  42. Han J., Park Т., Hong Y., Jeong D. Production of germline chimeras by transfer of chicken gonadal primordial germ cells maintained in vitro for an extended period//Theriogenology. 2002. 58, 1531−1539.
  43. Hejnar J., Ha’jkova P., Plachy J., Elleder D. CpG island protects Rous sarcoma virus-derived vectors integrated into nonpermissive cells from DNA methylation and transcriptional suppression // PNAS. 2001. 98, 565−569.
  44. Ivarie R. Avian transgenesis: progress towards the promise // Trends Biotechnol. 2003. 21, 14−19.
  45. The developmental origin of primordial germ cells and the transmission of the donor-derived gametes in mixed-sex germline chimeras to the offspring in the chicken / Kagami H. et al. Mol. Reprod. Dev, 1997. 48, 501 510.
  46. Kanatsu-Shinohara M., Ogonuki N., Inoue K., Miki H. Long-term proliferation in culture and germ line transmission of mouse male germline stem cells // Biology of Reproduction. 2003. 69, 612−616.
  47. Kanatsu-Shinohara M., Toyokuni S., Shinohara T. Transgenic mice produced by retroviral transduction of male germ line stem cells in vivo // Biology of Reproduction. 2004. 71, 1202−1207.
  48. Karagenc L. Origin of primordial germ cells in the prestreak chick embryo//Dev. Genet. 1996. 19, 290−301.
  49. Kawabe Y. Production of scFv-Fc Fusion Protein Using Genetically manipulated Quails //Biosciens and Bioengineering. 2006. Vol. 102. P. 297−303.
  50. Kalina J., S~enigl F., MicVkova' A., Mucksova' J., Blaz’kova’J., Yan H., Popls^tein M., Hejnar J., Trefil P. Retrovirus-mediated in vitro gene transfer into chicken male germ line cells // Reproduction. 2007. Vol. 134. P. 445 453.
  51. Kamihira, Pain S., Leibo M., Cochran M. Production of chicken chimeras from injection of frozen-thawed blastodermal cells // Poult. Sci. 2005. 76, 753−760.
  52. Kawabe, Coltey M., Le Douarin N. Postnatal development of a demyelinating disease in avian spinal cord chimeras // Cell. 2006. 45, 307−314.
  53. Retrovirus-mediated gene transfer and expression of EGFP in chicken/ B. Koo et al. Molecular Reproduction and Development, 2004. 68, 429−434.
  54. Kubota H., Avarbock M., Brinster R. Growth factors essential for selfrenewal and expansion of mouse spermatogonial stem cells // PNAS. 2004. 101, 16 489−16 494.
  55. Koo В., Koo В., Choi В., Lee H. Development of transgenic chickens expressing enhanced green fluorescent protein// Biochemical and Biophysical Research Communications. 2006. 320, 442−448.
  56. Efficient production by sperm-mediated gene transfer of human decay accelerating factor (hDAF) transgenic pigs for xenotransplantation // M. Lavitrano et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2002. 99, 14 230−14 235.
  57. Lavitrano M., Forni M., Bacci M., Di Stefano C. Sperm mediated gene transfer in pig: selection of donor boars and optimiza tion of DNA uptake // Mol Reprod Dev. 2003. 64, 284−291.
  58. Van de Lavoir M., Diamond J., Leighton P., Mather-Love C. Germline transmission of genetically modified primordial germ cells // Nature 2006. Vol. 44. P. 766−769.
  59. Li С., Song Y" Sha J., Wang N. Production of duck-chicken chimeras by transferring early biastodermal cells // Poult Sci. 1995. 81, 1360−1364.
  60. Lois C., Hong E., Pease S., Brown E. Germline transmission and tissue-specific expression of trans-genes delivered by lentiviral vectors // Science. 2002. 295, 868−895.
  61. Love J., Gribbin C., Mather C., Sang H. Transgenic birds by DNA microinjection//Biotechnology. 1994. 12, 60−63.
  62. McGrew M., Sherman A., Ellard F., Lillico S. Efficient production of germline transgenic chickens using lentiviral vectors // EMBO Reports. 2004. 5, 728−733.
  63. McGrew M., Sherman A., Ellard F., Lillico S. Efficient production of transgenic chickens using lentiviral vectors // Transgenic Animal Research Conference IV. University of California-Davis. 2003. P. 10−14.
  64. Meloun M., Militky J., Forina M. Retrovirusmediated gene delivery into male germ line stem cells // FEBS Letters. 2000. P. 7−10.
  65. Mikawa Т., Fischman D., Dougherty J., Brown A. In vivo analysis of a new lacZ retrovirus vector suitable for cell lineage marking in avian and other species/ / Exp Cell Res. 1991. 195, 516−523.
  66. Mizuarai S., Ono K., Yamaguchi K., Nishijima M. Production of transgenic quails with high frequency of germ-line transmission using VSV-G pseudotyped retroviral vector // Biochem Biophys Res Commun. 2001. 286, 456 463.
  67. Mozdziak P., Borwornpinyo S., McCoy DW., Petitte J. Development of transgenic chickens expressing bacterial beta-galactosidase // Dev Dyn. 2003. 226, 439−445.
  68. Mozdziak P., Angerman-Stewart J., Rushton В., Pardue S. Isolation of chicken primordial germ cells using fluorescence-activated cell sorting // Poult. Sci. 2005. 84, 594−600.
  69. Nagano M., Brinster C., Orwig K., Ryu B. Transgenic mouse produced by retroviral transduction of malegermline stem cells // PNAS. 2001. Vol. 99. P. 131−135.
  70. Nagano M., Ryu В., Brinster C., Avarbock M. Maintenance of mouse male germ line stem cells in vitro // Biology of Reproduction. 2003. 68, 22 072 214.
  71. Naito M., Nirasawa K., Oishi T. Development in culture of the chick embryo from fertilized ovum to hatching // J. Exp. Zool.1994. 254,322−326.
  72. Naldini, Perry M. Development in culture of the chick embryo from cleavage to hatch // Br. Poult. Sci. 1996. 30, 251−256.
  73. Naito M., Tajima A., Tagami Т., Yasuda Y. Preservation of chick primordial germ cells in liquid nitrogen and subsequent production of viable offspring// J. Reprod. Fertil. 1994a. 102, 321−325.
  74. Naito M., Tajima A., Tagami Т., Yasuda Y. Production of germline chimeric chickens, with high transmission rate of donor-derived gametes, produced by transfer of primordial germ cells // Mol. Reprod. Dev. 1994b. 39, 153−161.
  75. Опо Т., Machida Y. Immunomagnetic purification of viable primordial germ cells of japanese quail (Coturnix japonica) Сотр. Biochem. Physiol. Part A Mol. // Integr. Physiol. 1999. 122, 255−259.
  76. Опо Т., Wakasugi N. Mineral content of quail embryos cultured in mineral-rich and mineral-free conditions // Poult. Sci. 1994. 63,159−166.
  77. Pain В., Clark M., Shen M., Nakazawa H. Long-term in vitro culture and characterization of avian embryonic stem cells with multiple morphogenetic potentialities//Development. 1996. 122, 2339−2348.
  78. Park Т., Jeong D., Kim J., Song G. Improved germline transmission in chicken chimeras produced by transplantation of gonadal primordial germ cells into recipient embryos // Biol. Reprod. 2003. 68, 1657−1662.
  79. Pittoggi C., Beraldi R., complete culture system for the chick embryo //Nature. 2006. Vol. 331. P. 70−72.
  80. Petitte J., Liu G., Yang Z. Avian pluripotent stem cells // Mechanisms of Development. 2004. 121, 1159−1168.
  81. Petitte J., Clark M., Liu G., Etches R. Production of somatic and germline chimeras in the chicken by transfer of early blastodermal cells // Development. 1990. Vol. 108. P. 185−189.
  82. Petitte J., Mozdziak P. Production of transgenic poultry. In: Pinkert С A. editor. Transgenic technology: a laboratory handbook second edition // New York: Elsevier Science. 2002. P. 279−306.
  83. Reynaud G. The transfer of turkey primordial germ cells to chick embryos by intravascular injection // J. Embryol. Exp. Morphol. 1989. Vol. 21. P. 485−507.
  84. Sang H. Prospects for transgenesis in the chick // Mechanisms of Development. 2004. 121, 1179−1186.
  85. Salter, Carsience R., Etches R., Verrinder Gibbins A. The fate of female donor blastodennal cells in male chimeric chickens // Biochem. Cell. Biol. 1992. Vol. 70. P. 121−122.
  86. Simkiss K., Rowlett K., Bumstead N., Freeman B. Transfer of primordial germ cell DNA between embryos // Protoplasma. 1999. 151,164−166.
  87. Song Y., D’Costa S., Pardue S., Petitte J. Production of germline chimeric chickens following the administration of a busulfan emulsion // Mol. Reprod. Dev. 2005. Vol. 70. P. 438−444.
  88. Speksnijder G., Ivarie R. A modified method of shell windowing for producing somatic or germline chimeras in fertilized chicken eggs // Poult. Sci. 2000. 79, 1430−1433.
  89. Swift C. Origin and early history of primordial germ cells in the chick//Am. J. Physiol. 1994. Vol. 15. P.483−516.
  90. Thoraval P., Lasserre F., Coudert F., Dam brine G. Somatic and germline chicken chimeras obtained from brown and white leghorns by transfer of early blastodermal cells //Poult. Sci. 1995. Vol. 73. P. 189−191.
  91. Thurston R., Korn N. Spermiogenesis in comercial poultry species: anatomy and control // Poultry Science. 2000. 79, 1650−1668.
  92. Trefil P., Polak J., Poplstein M., Mikus M. Preparation of fowl tetstes as recipient organs to germ-line chimeras by means of g-radiation // British Poultry Science. 2003. Vol. 44. P. 643−650.
  93. L., Luke G., Simkiss K. 1993. Germ-line chimaeras can produce both strains of fowl with high efficiency after partial sterilization // J. Reprod. Fertil. 1993. Vol. 98. P. 637−641.
  94. Wei Q., Croy В., Etches R. Selection of genetically modified chicken blastodermal cells by magnetic-activated cell sorting // Poult. Sci. 2001. Vol. 80. P.161−168.
  95. Wentworth A., Tsai H., Hallett J., Gonzales D. Manipulation of avian primordial germ cells and gonadal differentiation // Poult. Sci. 1989. Vol. 68. P. 999−1010.
  96. Wentworth A., Wentworth B. The avian primordial germ cell. An enigma of germline evolution, development and immortality // Avian Poult. Biol. Rev. 2000. Vol. 11. P. 173−282.
  97. Yasuda Y., Tajima A., Fujimoto Т., Kuwana T. A method to obtain avian germ-line chimaeras using isolated primordial germ cells // J. Reprod. Fertil. 2001. Vol. 96. P. 521−528.
  98. Zhao D., Kuwana T. Purification of avian circulating primordial germ cells by nycodenz density gradient centrifugation // Br. Poult. Sci. 2003. Vol. 44. P. 30−35.
  99. Zhu L., van de Lavoir M., Albanese J., Beenhouwer P. 2005. Production of human monoclonal antibody in eggs of chimeric chickens // Nat. Biotechnol. 2005. Vol. 23. P. 115−119.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!