Разработка калориметрического метода и капиллярного титрационного калориметра для изучения биохимических реакций
Разработка методических основ и аппаратно-программных средств для реализации метода по теме диссертационной работы выполнена в рамках программы «Научное приборостроение РАН», объединяющей наиболее актуальные и перспективные разработки в биологии, биотехнологии, биохимии, физико-химической биологии, медицине и многих других областях науки и техники. Развитие фундаментальных и прикладных… Читать ещё >
Содержание
- Глава 1. Метод титрационной калориметрии для определения термодинамических параметров процессов связывания
- 1. 1. Определяемые параметры связывания и достоинства метода
- 1. 2. Алгоритмы определения параметров связывания
- 1. 3. Использование изотермической титрационной калориметрии в биотехнологии
- 1. 4. Использование титрационной калориметрии для определения параметров кинетики ферментативных реакций
- 1. 5. Титрационная калориметрия — универсальный метод для изучения молекулярных взаимодействий
- 1. 6. Первые установки и современные титрационные калориметры
- 1. 7. Тенденции в построении титрационных калориметров
- Глава 2. Разработка метода титрационной изотермической калориметрии для изучения биохимических реакций
- 2. 1. Метод выделения рабочего объема калориметрических камер в капиллярном калориметре
- 2. 2. Оценка точности выделения рабочего объема калориметрической камеры в капиллярном калориметре
- 2. 3. Экспериментальная проверка метода теплового шунтирования
- 2. 4. Смешивание реагентов в капиллярной калориметрической камере капиллярного калориметра
- 2. 5. Определение времени выравнивания концентрации титранта по образцу в рабочем объеме цилиндрической калориметрической камеры
- 2. 6. Определение коэффициента диффузии по времени выравнивания концентрации титранта в образце, заполняющем оптическую кювету спектрофотометра
- 2. 7. Тестирование капиллярного калориметра
- 2. 8. Ввод дозирующей иглы внутрь калориметрической камеры через активный тепловой шунт
- Глава 3. Капиллярный калориметр
- 3. 1. Обоснование построения капиллярного калориметра
- 3. 2. Описание конструкции капиллярного калориметра
- 3. 3. Программное обеспечение
- 3. 4. Системы автоматического регулирования температуры теплового экрана
- 3. 5. Калориметрические камеры капиллярного калориметра
- 3. 6. Аппаратные средства системы управления капиллярным калориметром
- Глава 4. Результаты исследований, полученные на капиллярном калориметре, и развитие метода титрационной калориметрии
- 4. 1. Капиллярный калориметр для исследований дисперсных систем
- 4. 2. Комплексы включения между додецилсульфатом натрия и циклодекстрин-содержащими трубками
- 4. 3. Капиллярный калориметр как основа для разработки многоканального капиллярного дифференциального калориметра
- 4. 4. Дифференциальный титрационный сканирующий калориметр
- Выводы
Разработка калориметрического метода и капиллярного титрационного калориметра для изучения биохимических реакций (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Актуальность темы
исследований.
Развитие фундаментальных и прикладных исследований по новым направлениям биологии и биотехнологии требует создания новых технических средств для оснащения работ в этой области, при этом титрационная калориметрия является ключевым направлением для биотехнологии, универсальным средством для измерения параметров кинетики ферментативных реакций.
Титрационная калориметрия представляет собой универсальный метод инженерной энзимологии при получении знаний условий и последовательности действий белковых ферментов в организме растений, животных и человека, в промышленных реакторах.
Метод титрационной калориметрии позволяет выполнять наиболее полно и точно термодинамическое описание процессов связывания. Титрационная калориметрия чрезвычайно информативна при изучении всех типов реакций связывания: антиген-антитело, белок-лиганд, белок-белок, ДНК-лекарственные препараты, рецептор-мишень — и обладает преимуществами перед традиционными методами, такими как равновесный диализ, динамический диализ, спектрофотометрия и потенциометрия, имеющими ограничения из-за недостаточной чувствительности, а также ограничения по виду и концентрации лиганда и по условиям эксперимента.
Разработка методических основ и аппаратно-программных средств для реализации метода по теме диссертационной работы выполнена в рамках программы «Научное приборостроение РАН», объединяющей наиболее актуальные и перспективные разработки в биологии, биотехнологии, биохимии, физико-химической биологии, медицине и многих других областях науки и техники.
Цель работы состоит в исследовании метода титрационной изотермической калориметрии для изучения биохимических реакций, обосновании и разработке аппаратно-программных средств для реализации метода.
Конкретными задачами исследования являются обоснование, разработка и исследование калориметрического метода для изучения биохимических реакций, обеспечивающего:
• выравнивание концентраций реагентов по объему калориметрической камеры;
• выделение рабочего объема с высокой точностью;
• введение реагентов без предварительного термостатирования;
• уменьшение количества используемых реагентов;
• создание капиллярного калориметра для реализации метода;
• классификацию титрационных калориметров по способности работать с минимальными концентрациями реагентов в исследуемых процессах на основании обоснованного критерия.
Выводы.
Обоснован, разработан и исследован калориметрический метод для изучения биохимических реакций, обеспечивший:
• построение титрационного калориметра, в котором калориметрические камеры впервые выполнены в виде капилляров, расположенных горизонтально;
• новое решение смешивания реагентов в капиллярной калориметрической камере методом концентрационной диффузии и перемешиванием колеблющейся дозирующей иглой при введении реагентов в калориметрическую камеру в виде тонкого жгута, распределенного по длине калориметрической камеры;
• выделение рабочего объема калориметрической камеры методом теплового шунтирования с погрешностью не более 0.2%, что на порядок меньше, чем у аналогов;
• введение реагентов в камеру без предварительного термостатирования;
• обоснование критерия сравнения титрационных калориметров по соотношению рабочего объема калориметрической камеры и уровня шума;
• классификацию титрационных калориметров по способности работать с минимальными концентрациями реагентов в исследуемых процессах на основании обоснованного критерия;
• измерение мощности длительных тепловых процессов, продолжительностью до 10 часов, при максимальной чувствительность капиллярного калориметра 10″ 8 Вт;
• разработку капиллярного калориметра, в котором уменьшено в 3 раза количество необходимых для эксперимента реагентов, и изготовление экспериментального образца капиллярного калориметра, на котором выполнены научные исследования;
• технические решения, которые могут быть запатентованы, позволят выпускать конкурентоспособные капиллярные калориметры для внутреннего и внешнего рынка и обеспечивают разработку новых перспективных калориметров.
Заключение
.
Предложенный калориметрический метод для изучения биохимических реакций обладает существенными новизной и достоинствами, такими как.
• возможность исследования дисперсных систем наряду с однородными жидкими образцами, благодаря совершенной системе перемешивания реагентов в камере;
• выделение рабочего объема калориметрических камер с погрешностью не более 0.2%;
• строгие изотермические условия проведения экспериментов без термостати-рования вводимых реагентов;
• уменьшение в 3 раза количества реагентов, необходимых для эксперимента. Метод оснащен созданным впервые капиллярным калориметром, который конкурентоспособен и перспективен для дальнейшего развития калориметрического метода. Выполнена классификация титрационных калориметров на основании предложенного критерия оценки способности этих приборов работать с минимальной концентрацией реагентов. Также предложены перспективные решения дальнейшего развития разработанного калориметрического метода.
Список литературы
- Бронштейн И.Н., Семендяев К. А. Справочник по математике для инженеров и учащихся втузов 13-е изд., исправленное .- М. гНаука, Гл. ред. физ.-мат. лит., 1986 544 с.
- Изерман Р. Цифровые системы управления: Пер. с англ.-М.Мир, 1984.-541с.
- Киппер А.И., Котельников Г. В., Эскин В. Е. Метод определения теплоемкости макромолекул в растворе // Высокомолекулярные соединения.-1976.-T.XIX, N5.-C.1173−1175.
- Комплексы включения, образуемые додецилсульфатом натрия и циклодекс-триновыми нанотрубками / Калашников Ф. А., Котельников Г. В., Моисеева С. П., Топчиева И. Н. // Коллоидный журнал.- 2004.-T.66,N5.- С.608−612.
- Котельников Г. В., Сидорович А. В. Микрокалориметр ДСМ-2М при исследовании полимеров // Высокомолекулярные соединения.-1983.-T.XXV, N12.-С.2622−2626.
- Кутателадзе С.С., Боришанский В. М. Справочник по теплопередаче.-М.:Энергоиздат, 1959.-416 с.
- Ю.Овчинников Ю. А. Биология и биотехнология: достижения и прогнозы // Химия жизни: Избранные труды .-М.:Наука, 1990 С.432−440
- Теория автоматического управления / Под ред. А. В. Нетушила. М.:Высшая школа, 1976 400 с.
- A New Ultrasensitive Scanning Calorimeter / Plotnikov V.V., Brandts J.M., Lin L.-N., Brandts J.F. // Anal. Biochem.-1997.-Vol.250,N2.-P.237−244.
- A twin titration micricalorimeter for the stude of biochemical reactions / McKinnon I.R., Fall L., Parody-Morreale A., Gill S.J. // Anal. Biochem.-1984.-Vol.139.-P. 134−139.
- An electrical impedance tomography measurement systen for experimental use / Savolainen Т., Kaipio J.P., Karjalainen P.A., Vauhkonen M. // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,N10.-P.3605−3609.
- An isothermal titration microcalorimeter / Christensen J.J., Gardner J.W., Eatough D.J., Izatt R.M., Watts P.J., Hart R.M. // Rev. Sci. Instrum.-1973.-Vol.44,N4.-P.481−484.
- Barcelo F., Ortiz-Lombardia M., Portugal J. Heterogeneous DNA binding modes of berenil //Biochim. et Biophys. Acta.-2001.-Vol.l519.-P.175−184.
- Bianconi M.L. Calorimetric determination of thermodynamic parameters of reaction reveals different enthalpic compensations of the yeast hexokinase isozymes//J. Biol. Chem.-2003.-Vol.278.-P. 18 709−18 713.
- BindWorks Data Modeling Software // Technical Information Brief .-Calorimetry Sciences Corp.:Spanish Fork, Utah, USA.-2000.-2p.
- Black C.B., Cowan J.A. A critical evaluation of metal-promoted Klenow 3b-5b exonuclease activity: calorimetric and kinetic analyses support a one-metal-ion mechanism // JBIC.-1998.-Vol.3.-P.292−299.
- Briggner L.E., Wadso I. Test and calibration processes for microcalorimeters, with special reference to heat conduction instruments used with aqueous systems // J. Biochem. Biophys. Methods.-1991.-Vol.22.-P.101-l 18.
- Christensen J J., Izatt R.M., Hansen L.D. New precision thermometric titration calorimeter//Rev. Sci. Instrum.-1965.-Vol.36,N6.-P.779−783.
- Christensen J.J., Johnston H.D., Izatt R.M. An isothermal titration calorimeter // Rev. Sci. Instrum.-1968.-Vol.39,N9.-P. 1356−1359.
- Clugston S.L., Yajima R., Honek J.F. Investigation of metal binding and activation of Escherichia coli glyoxalase I: kinetic, thermodynamic and mutagenesis studies 11 Biochem J.-2004.-Vol.377.-P.309−316.
- Complexation studies of zwitterionic amino acids with crown and guanidinium compounds using titration calorimetry / Czekalla M., Stephan H., Habermann В., Trepte J., Gloe K. and Schmidtchen F.P.// Thermochimica Acta.-1998.-Vol.313-P.137−144.
- Constantin F., Dumitru M., Korschinek G. Computer controlled high-voltage injector//Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,Nl.-P.l 61−164.
- CSC 5200 Jet Titration Calorimeter // Technical Information Brief.-Calorimetiy Sciences Corp.:Provo, Uta, USA.
- CSC Web page: www.calscorp.com
- CTD2156 is basis for the designing of Multi-channel capillary differential titration calorimeter / Kotelnikov G.V., Moiseyeva S.P., Mezhburd E.V., Maevsky E.I.,
- Grishina E.V. I I Proc. the 31st Annual Conference of the North American Thermal Analysis Society on Thermal Analysis and Applications, September 22−24, 2003, Albuquerque, New Mexico, USA .-M.J. Rich, Ed.-2003.- on CD-ROM.
- Demchenko A.P., Rusyn O.I., Saburova E.A. Kinetics of the lactate dehydrogenase reaction in high-viscosity media // Biochim. et Biophys. Acta.- 1989.-Vol.998.-P.l 96−203.
- Design and testing of a new microcalorimetric vessel for use with living cellular systems and in titration experiment / Gorman Nordmark M., Laynez J., Schon A., Suurkuusk J., Wadso I. // J. Biochem. Biophys. Methods.-1984.-Vol.l O.P.I 87−202.
- Determination of thermodynamic and kinetic parameters from isothermal heat conduction microcalorimetry: application to long-term-reaction studies / Willson R.J., Beezer A.E., Mitchell J.C., Watson Loh // J.Phys.Chem .- 1995 .- Vol.99.-P.7108−7113.
- Donnert J., Caruthers M.H.and Gill S.J. A calorimetric investigation of the interaction of the lac repressor with inducer // J. Biol. Chem.-1982.-Vol.257, N24.-P. 14 826−14 829.
- El Harrous M., Gill S.J. and Parody-Morreale A. Description of a new Gill titration calorimeter for the study of biochemical reactions. I: assembly and basic response of the instrument//Meas. Sci. Technol.- 1994.-Vol.5.-P. 1065−1070.
- Eli W., Chen W. and Xue Q. The association of anionic surfactants with |3-cyclodextrin. An isothermal titration calorimeter study // J. Chem. Thermodynamics." 1999 .-Vol.31 .-P. 1283 -1296
- Freire E. Thermodynamic-based algorithms in drug design. High affinity, selectivity and adaptibility // 2003 Current Trends in Microcalorimetry: Proc. of the Conference July 20−26 2003 Boston, MA.- MicroCal Inc.:Northampton, MA, USA.-2003
- Freire E., Mayorga O., Straume M. Isothermal Titration // Anal. Chem.- 1990.-Vol.62, N18.-P.950−959.
- Gaisford S., Buckton G. Potential applications of microcalorimetry for the study of physical processes in pharmaceuticals // Thermochimica Acta.-2001.-Vol.3 80.-P.185−198.
- Garcia-Fuentes L., Baron C. and Mayorga O.L. Influence of dynamic power compensation in an isothermal titration microcalorimeter // Anal. Chem.-1998.-Vol.70, N21-P.4615−4623.
- Green D.P., Balcom B.J., Lees T.J. Sensor measuremenr and experimental control in nuclear magnetic resonance imaging // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,Nl.-P.102−107.
- Gruen M., Prinz H., Gautel M. cAPK-phosphorylation controls the interaction of the regulatory domain of cardiac myosin binding protein С with myosin-S2 in an on-off fashion // FEBS Letters.-1999.-Vol.453.-P.254−259.
- Hansen L.D. Future projections from some past developments in calorimetric instruments and techniques at Brigham Young University, 1960−2000 // Thermochimica Acta.-2000.-Vol.355.-P.89−94.
- Haq I. Calorimetry in the fast lane: The use of ITC for obtaining enzyme kinetics constants // LLC application note.- Microcal, Inc. Northampton, MA, USA, 2002.-P.6.
- Harrous M.E., Mayorga O.L., Parody-Morreale A. Description of a new Gill titration calorimeter for the study of biochemical reactions. II'.operational characterization of the instrument//Meas. Sci. Technol.-1994.-Vol.5.-P. 1071−1077.
- Heat of protonation of endoglucanase V catalytic domain (EGV-core) from Humicola insolens / Galletto R., Attanasio F., Dossi E., Schulein M., Rialdi G. // Thermochimica Acta.-1998.-Vol.321 .-P.l 7−21.
- Holbrook J.J., Stinson R.A. The use of ternary complexes to study ionizations and isomerizations during catalysis by lactate dehydrogenase // Biochem. J.-1973.-Vol.131, N4.-P.739−748.
- Ikeda Т., Ooya Т., Yui N. Inclusion complexation of fractionated a-cyclodextrin molecular tube with sodium dodecyl sulfate // Polymers for Advanced Technologies.-2000.- Vol.11.-P. 830−836.
- Improved control and data-acquisition electronics for high-resolution electron energy loss spectroscopy / Xie J., Wang Y., Mitchell W.J., Felino A., Schick M., Weinberg W.H. //Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,N3.-P.710−714.
- Interaction of heparin with annexin V / Capila I., VanderNoot V.A., Mealy T.R., Seaton B.A., Linhardt R.J. // FEBS Letters.-1999.-Vol.446.-P.327−330.
- Karlsson R., Kullberg L. A computer method for simultaneous calculation of equilibrium constants and enthalpy changes from calorimetric data // Chemica Scripta.-1976.-Vol.9.-P.54−57.
- Kelley R.F., O’Connell M.P.Thermodynamic analysis of an antibody functional epitope // Biochemistry .-1993.-Vol.32,N27.-P.6828−6835.
- Kemp R.B., Lamprecht I.- La vie est done un feu pour la calorimetrie: half a century of calorimetry Ingemar Wadso at 70 // Thermochimica Acta.-2000.-Vol.348.-P.l-17
- Kinetic and structural characterization of a product complex of 6-hydroxymethyl-7,8-dihydropterin pyrophosphokinase from Escherichia coli / Garcon A., Bermingham A., Lian L.Y., Derrick J.P. // Biochem J.-2004.-Vol.380.-P.867−873.
- Kotelnikov G.V., Moiseyeva S.P., Krayev V.P. Calorimetric method for adjusting the mass of culture fluid in a bioreactor // Rev. Sci. Instrum.- 1998.- Vol.69, N5.-P.2137−2140.
- Lab View. User Manual.-National Instruments: Austin,'Texas, USA, 1998.-514P.
- Ladbury J. Isothermal titration calorimetry: application to structure-based drug design // Thermochimica Acta.-2001.-Vol.380.-P.209−215.
- Marquardt D. An Algorithm for least squares estimation of nonlinear parameters // SIAM J.Appl. Math.-1963.-Vol. 11 .-P.431−441.
- Method of separating the sensitive volume of calorimetric cells in a differential titration calorimeter / Kotelnikov G.V., Moiseyeva S.P., Mezhburd E.V., Krayev V.P. //J. Therm. Anal. Cal.-2000.-Vol.62.-P.39−50.
- More J.J. The Levenberg-Marquardt Algorithm: Implementation and Theory // Numerical Analysis. Lecture notes in mathematics .-Berlin: Springer-Verlag, 1977.-VoI.630.-P. 105−116.
- Morin P.E., Freire E. Direct calorimetric analysis of the enzymatic activity of yeast cytochrome с oxidase // Biochemistry.- 1991.- Vol.30.-P.8494−8500.
- Myers M., Mayorga O.L., Emtage J., Freire E. Thermodynamic characterization of interactions between ornithine transcarbamylase leader peptide and phospholipid bilayer membranes // Biochemistry.-1987.-Vol.26.-P.4309−4315.
- New isothermal titration calorimeter for investigations on very small samples. Theoretical and experimental studies / Kotelnikov G.V., Moiseyeva S.P., Mezhburd E.V., Krayev V.P. // J. Therm. Anal. Cal.-2002.-Vol.68.-P.803−818.
- Ohyama Т., Cowan J.A. An approach to the evaluation of RNA solution structure and metal coordination chemistry by titration calorimetry // JBIC.-1996.-Vol.l.-P.83−89.
- Ohyama Т., Cowan J.A. Influence of monovalent cations on magnesium binding to poly-RNA by solution titration calorimetry: an analysis of the salt dependence of binding enthalpies and entropies // JBIC.-1996.-Vol. 1.-P. 111−116.
- Okubo M., Suzuki Т., Sakauchi A. Microanalysis of the surface concentration of sulfate groups at polystyrene particle by isothermal titration calorimetry // Colloid Polym. Sci.-1999.-Vol.277.-P.579−582.
- OMEGA Data Analysis in Origin.-MicroCal, Inc.: Northampton, MA, USA.-1991.-71p.
- Ortiz-Salmeron E., Baron C., Garcia-Fuentes L. Enthalpy of captopril-angiotensin I-converting enzyme binding // FEBS Letters.-1998.-Vol.435.-P.219−224.
- Patent U.S. 2003/113 748 Int. CI.7: C12Q 1/70 Metods for determinig plasma free drug concentration by direct measurement of binding affinity of prorease inhibitors to plasma proteins / D. Xie, W. Cao, J.W.Erickson.-14p.:fig.
- Patent U.S. 3,899,918 Int.Cl.2 :G01K 17/00 Differential microcalorimeter / Privalov P.L., Makurin P. S., Plotnikov V.V., Koryagin V.V., Polpudnikov V.S., Stepanjuk G.P.-6p.:fig.
- Patent U.S. 4,112,734, Int.Cl.2: G01K 17/00 Differential Scanning Micro-calorimeter / Goryachev V.I., Kotelnikov G.V., Makurin P. S.-6p.:fig.
- Patent U.S. 5,707,149, Int.Cl.6: GO IK 017/00 Device and method for measuring the heat of reaction resulting from mixture of a plurality of reagents / Freire E., Privalov G.P., Privalov P.L. and Kavina V.V.-12p.:fig.
- Patent U.S. 5,967,659, Int.Cl.6: G02N 25/20 Ultrasensitive differential microcalorimeter with user-selected gain setting / Plotnikov V.V., Brandts J.F., Brandts M. J.- llp.:fig.
- Petit C.M., Koretke K.K. Characterization of Streptococcus pneumoniae thymidy-late kinase: steady-state kinetics of the forward reaction and isothermal titration calorimetry // Biochem. J.-2002.-Vol.363.-P.825−831.
- Pluschke G., Mutz M. Use of isothermal titration calorimetry in the development of molecularly defined vaccines // J. Therm. Anal. Cal.-1999.-Vol.57.-P.377−388.
- Poznanski J., Wszelaka-Rylik M., Zielenkiewicz W. Concentration dependencies of NaCl salting of lysozyme by calorimetric methods // Thermochimica Acta.-2004.-Vol.409.-P.25−32.
- Ramsay G., Prabhu R., Freire E. Direct measurement of the energetics of association between myelin basic protein and phosphatidylserine vesicles // Biochemistry.-1986.-Vol.25.-P.2265−2270.
- Rapid measurement of binding constants and heats of binding using a new titration calorimeter / Wiseman Т., Williston S., Brandts J.F. and Lin L. // Anal. Biochem.-1989.-Vol. 179.-P. 131−137
- Saboury A. New methods for data analysis of isothermal titration calorimetry // J. Therm. Anal. Cal.-2003 .-Vol.72.- P.93−103.
- Saboury A.A. Isothermal titration microcalorimetric method for studying the combined ligand binding with application to the binding of ethylurea and (N, N) dimethylurea on urease // Thermochimica Acta.-1998.-Vol.320.-P.97−100.
- Schon A., Freire E. Thermodynamics of intersubunit interactions in cholera toxin upon binding to the oligosacchride portion of its cell surface receptor, ganglioside GMi // Biochemistry.-1989.-Vol.28.-P.5019−5024.
- Spink C., Wadso I. Calorimetry as an analytical tool in bio-chemistry and biology // Methods Biochem. Anal.-1976.-Vol.23.-P.l-159.
- Spokane R.B.and Gill S J. Titration microcalorimeter using nanomolar quantities of reactants // Rev. Sci. Instrum.-1981.-Vol.52, N11-P. 1728−1733.
- Srinivas V.R., Reddy G.B., Surolia A. A predominantly hydrophobic recognition of H-antigenic sugars by winged bean acidic lectin: a thermodynamic study // FEBS Letters.-1999.-Vol.45O.-P. 181−185.
- Tellez-Sanz R., Garcia-Fuentes L., Baron C. Calorimetric analysis of lisinopril binding to angiotensin I-converting // FEBS Letters.- 1998.-Vol.423.-P.75−80.
- Thompson K.C. Pharmaceutical applications of calorimetric measurements in the new millennium // Thermochimica Acta.-2000.-Vol.355.-P.83−87.
- Time-resolved electron spectrum diagnostics for a free-electron laser / Gillespie W.A., MacLeod A.M., Martin P.F., van der Meer A.F.G., van Amersfoort P.W. // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,N3.-P.641 -648.
- Time-resolved fluorescence lifetime imaging microscopy using a picosecond pulsed tunable dye laser system / Periasamy A., Wodnicki P., Wang X.F., Kwon S., Gordon G.W., Herman B. // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,N10.-P.3722−3731.
- Todd M.J., Gomez J. Enzyme kinetics determined using calorimetry: A general assay for enzyme activity // Anal. Biochem.-2001.-Vol.296.-P.179−187.
- Use of isothermal titration calorimetry to measure enzyme kinetic parameters // ITC Application Note .- Microcal, Inc. Northampton, MA, US A, 2004 .-P.6
- Utzig E. Heat conduction microcalorimeter for thermokinetics and titration experiments //J. Therm. Anal. Cal.-1998.-Vol.54.-391−397.
- VP-ITC MicroCalorimeter User’s Manual.-Microcal, Inc.: Northampton, MA, USA, 2001.-P.93.
- Wadso I. Design and testing of a micro reaction calorimeter // Acta chemica scandinavica.-1968.-Vol.22.-P.927−937.
- Waldron T.T., Schrift G.L., Murphy K.P. Salt effects in Rnase-Ligand interaction: screening or competitive binding? // 2003 Current Trends in Micro-calorimetry: Proc. of the Conference July 20−26, 2003, Boston, MA.
- Wang W., He T. A high precision micropositioner with five degrees of freedom based on an electromagnetic driving principle // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,Nl .-P.312−317.
- Wartski L., Schwebel C., Aubert J. Radio frequency. Microwave, and electron cyclotron resonance ion sources for industrial application // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,N3 .-P. 895−900.
- Watt G.D. A microcalorimetric procedure for evaluating the kinetic parameters of enzyme-catalyzed reactions: kinetic measurements of the nitrogenase system // Anal. Biochem.-1990.-Vol. 187.-P. 141 -146.
- Wave form analysis of constant capacitance-voltage transient deep level transient spectroscopy using an iterative feedback system / Okamoto Y., Yonekura H., Morimoto J., Miyakawa T. // Rev. Sci. Instrum.-1996.-Vol.67,N3.-P.809−812.
- Williams B.A., Toone E.J. Calorimetric evaluation of enzyme kinetics parameters //J. Org. Chem.-1993.-Vol.58.-P.3507−3510.1. Основные обозначения
- ЕС 3.1.27.5- тип ХИ-А RS-232 интерфейс передачи данных
- VP-ITC изотермический титрационный калориметр, выпускаемый
- MicroCal, Inc. (США) АДФ аденозин-5-дифосфат
- АЦП аналого-цифровой преобразователь
- ДАСМ-1 дифференциальный адиабатический сканирующий микрокалориметр, выпускаемый СКБ БП АН СССР ПО программное обеспечение
- САР система автоматического регулирования1. Ср изобарная теплоемкость
- ЦАП цифро-аналоговый преобразователь
- ШИМ широтно-импульсная модуляция
- Выражаю свою признательность Романову Льву Степановичу за долголетнее творческое сотрудничество при создании капиллярного дифференциального титрационного калориметра.
- Благодарю всех сотрудников лаборатории разработки методов и приборов для исследований микроорганизмов ИБП РАН, оказавших помощь при выполнении работы.