Фармакотерапия болезней кожи собак полиэтиологичной природы

Актуальность темы

Одновременно возросла заболеваемость собакбешенством, туберкулёзом, лептоспирозом, дерматофитозами, токсоплазмозом, различными гельминтозами, арахноэнтомозами и др. (Е.Б. Никитин, 2005). Наиболее часто у собак регистрируют болезни кожи. В настоящее время более 34% случаев обращений владельцев собак к ветеринарным специалистам связано с заболеванием кожного покрова.

Основными причинами заболеваний кожного покрова собак могут быть различные травмы, бактерии, грибы, вирусы, эктопаразиты, аутоиммунные факторы и др. Согласно мнению Н. Г. Решетниковой (2006), В.1чГ.Саг1оШ (1999) и многих других, и поэтому этиология кожных болезней собак чаще многофакторная и, как правило, сочетанная. Поэтому если постановка клинического диагноза в этом случае не составляет особого труда, то выявление этиологического фактора бывает значительно затруднено.

Смешанные инфекции, проявляющиеся в виде дерматитов у собак, приобрели массовый характер и имеют тенденцию к росту.

Причинами этого служат:

— высокая устойчивость микроорганизмов, паразитов к лекарственным средствам и способность быстрого привыкания к новым химиотерапевтическим препаратам, используемым при лечении больных;

— способность стафилококков, грибов и клещей продуцировать большое количество факторов патогенности, особенно токсинов, каждый из которых способен воздействовать самостоятельно, что затрудняет использование средств специфической защиты и профилактики;

— очень сложное, многогранное и далеко не изученное воздействие возбудителя на иммунную систему организма хозяина, приводящее к крайне низкой сопротивляемости (Д.Г. Дерябин, 2000).

В связи с широким распространением кожных болезней собак, низкой лечебной эффективностью применяемых лекарственных средств и их высокой стоимостью изучение этиологических аспектов кожных болезней собак и изыскание новых эффективных препаратов комплексного воздействия при этих патологиях является актуальной проблемой современной ветеринарной науки и практики.

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является разработка, изучение фармако-токсикологических свойств и внедрение в ветеринарную практику нового комплексного препарата комбицид для лечения кожных заболеваний мелких домашних животных полиэтиологичной природы. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить распространение дерматитов смешанной этиологии у собак в г. Краснодаре;

2. Создать новый комплексный препарат, в виде крема, обладающий фунгицидным, акарицидным и антимикробным действием;

3. Изучить физико-химические свойства препарата;

4. Определить токсикологические параметры препарата;

5. Изучить фармакологическое действие препарата;

6. Определить лечебную эффективность препарата при заболеваниях кожи разной этиологии.

Научная новизна. В результате проведённых исследований разработан оригинальный комплексный препарат для лечения заболеваний кожи собак бактериальной, грибковой и паразитарной этиологии — крем комбицид. Изучены фармако-токсикологические параметры нового препарата. Разработаны показания к применению. Отработаны оптимальные схемы и дозы при лечении кожных заболеваний разной этиологии. Приоритетность исследований подтверждена положительным решением на выдачу патента на изобретение.

Практическая значимость. Для практической ветеринарии предложен новый комплексный препарат, обладающий высокой лечебной эффективностью при ассоциативных кожных заболеваниях мелких домашних животных.

Определены показания к применению данного препарата мелким домашним животным, установлены оптимальные дозы, кратность и интервалы между нанесениями. Препарат комбицид, разработан в виде мягкой лекарственной формы, смягчает и успокаивает поражённые участки кожи, обладая комплексным действием на болезнетворных агентов.

Практическая ценность препарата комбицид подтверждается положительными результатами производственных испытаний и временной инструкцией по применению крема комбицид в ветеринарии.

Внедрение результатов исследований. Разработка лекарственной формы крема комбицид освоена в лаборатории фармакологии Краснодарского НИВИ.

Апробация работы. Результаты экспериментальных и клинических исследований, являющихся основой диссертации, доложены, обсуждены и одобрены: на заседаниях Учёного совета Краснодарского НИВИ (2007;2011 гг.) — на VIII региональной научно-практической конференции молодых учёных «Научное обеспечение агропромышленного комплекса» Кубанского государственного аграрного университета (Краснодар, 2006) — на международной научно-практической конференции, посвящённой 135 -летию академии «Современные подходы развития АПК» (Казань, 2008) — на II сибирском ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2010) — на научно-практической конференции молодых учёных краснодарского края «У.М.Н.И.К.» (Краснодар, 2010).

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 5 научных статей, в том числе одна работа опубликована в изданиях рекомендованных ВАК Минобрнауки Российской Федерации. Получено положительное решение о выдаче патента на изобретение от 17 ноября 2010 г.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Распространение кожных заболеваний осложнённых паразитарными, грибковыми и бактериальными инфекциями

Дерматиты животных — распространенная зооантропонозная инфекция, которая является не только ветеринарной, но и социальной проблемой (Т.А. Белоусова, 2003. — [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://www.dermatolog4you.IWstat/rmj/derm atofitiiactprobl. html, — Загл. с экранаМашкиллейсон Л.Л., Спесивцева Н. А. — [Электронный ресурс] -Режим доступа: http://dic.academic.rii/dic.nsf/bse/109 099/, — Загл. с экрана).

За 2002;2003 годы в г. Москве более половины собак (55%), обращавшихся в клиники с дерматологическими проблемами, имели пиодермию как непосредственную причину кожного поражения и зуда. Немало пациентов оказались страдающими от демодекоза, однако, в большем числе случаев он осложнялся сильно выраженной пиодермией.

Наряду с выше описанными заболеваниями в ветеринарной практике встречается высокий процент заболеваемости собак пиодермией. По данным О. Б. Тереховой (2002) за 1998;2000 годы из 13 516 случаев обращения жителей города Краснодара по поводу заболеваний своих собак, около трети (27,67%) составляли кожные болезни. Было установлено, что пиодермиями поражаются от 6 до 10% городских собак. Из общего числа кожных болезней пиодермии составляют 20,65%, занимая второе место по распространенности.

В Ростовской области за 1996;1998 годы на долю стафилококкоза собак приходилось 21,75% среди инфекционной патологии. В сравнении с другими болезнями животных данного вида стафилококкоз составил в 1996 году 19,76%, в 1997 году — 22,01%", 1998 году — 23,81% и имеет тенденцию роста на 2,25−4,05% в сравнении с 1996 годом.

К заболеванию пиодермией предрасположены животные короткошерстных пород со складчатой или огрубевшей кожей. Наиболее глубокая пиодермия бывает у немецкой овчарки, у которой болезнь лишь частично поддаётся воздействию антибиотиков и нередко рецидивирует.

Акне чаще встречается у собак таких пород, как боксёр, доберман-пинчер, английский бульдог, датский дог, мастифф, ротвейлер в молодом возрасте (Л. Тилли, 2001). Заболевают преимущественно взрослые животные. В годовалом возрасте у 5,6% из них регистрировали пиогенную инфекцию кожив 2−3-летнем возрасте количество поражённых данной болезнью увеличивается в три раза. Пик поражения собак пиодермиями отмечен, когда животные достигают возраста 4−5 лет. До 7-летнего возраста процент встречаемости дерматитов бактериального характера остаётся высоким, в более зрелом возрасте пиодермии у собак проявляются реже (О.Б. Терехова, 2002). Для пиодермии характерно сезонное течение заболевания: наибольшее количество обращений за ветеринарной помощью приходится с апреля по май (25,6−27,8%) и с октября по ноябрь (15,4−24,9%). Больше всего животных, пораженных пиодермией, регистрируется в весенний период.

Клиническое проявление пиодермии определяется возбудителем заболевания и характером течения патологического процесса. Как правило, острая форма пиодермии у собак характеризуется внезапностью возникновения, гиперемией кожи, иногда обильной папулёзной сыпью. Область поражения имеет склонность к быстрому распространению, почти всегда отмечается сильный зуд. В большинстве случаев довольно быстро развивается экссудация из поражённых участков кожи (В.А. Соколовский и др., 1968; П. Е. Игнатов, 1995; Е. С>иас1го8, 1974).

На клиническое проявление пиодермии оказывают влияние и ферментативные свойства патогенных кокков. Как известно, одним из защитных факторов, предотвращающих распространение инфекции, является блокада лимфатических сосудов фибриновыми пробками. Они образуются примерно через 2 часа после проникновения микрорганизмов в лимфатическое русло и препятствуют их дальнейшему распространению. У стафилококков практически отсутствуют фибринолитические ферменты, поэтому очаг восполения быстро отграничивается (образуются узелки и гнойнички). У стрептококков, наоборот, фибролитические свойства развиты хорошо, в результате чего происходит быстрое распространение микрорганизмов по лимфатической системе, наблюдаются отёк кожи, обильная везикулёзно-пустулёзная сыпь (А.Д. Троицкая, 1958).

При стафилококковой пиодермии у собак на коже появляются корочки, струпья и очаговые выпадения волос (Б.Ф. Шуляк, 2003), которым предшествует стойкий зуд, имеющий тенденцию к усилению. Локализуется процесс, как правило, вдоль позвоночного столба, в области крестца и шеи (O.A. Верховский, 1996). Кожа в местах поражения гиперемирована, появляются плотные бугристые припухлости и язвы. На месте увеличивающихся аллопеций появляются струпья, и развивается мокнущая экзема (П.Е. Игнатов, 1995; А. Б. Селисский, 1963).

Поверхностная пиодермия проявляется влажной экземой, развитию которой способствует жаркая, сухая погода (К.С. Медведев, 1999). При этой форме болезни область поражения начинает значительно увеличиваться, охватывая зону паха, подгрудка, шеи и хвоста (П.Е. Игнатов, 1994). Затрудненная вентиляция кожных складок способствует развитию «intertrigo» — пиодермии кожных складок. Процесс сопровождается зловонным запахом, экссудативными выделениями, язвами и свищевыми ходами. Локализуется в области кожных складок губ, морды, тела, хвоста и в области межпальцевой щели.

При осложнении демодекоза пиодермией, кожа, как правило, опухшая, покрасневшая, толстая, морщинистая и влажная, часто с трещинами. Сопровождается сильным зудом и неприятным запахом.

Фолликулиты характеризуются покраснением, незначительной болезненностью, затем пораженный участок приобретает форму опухоли. Процесс прогрессирует, опухоль расширяется в диаметре, становится более болезненной, окружающие ткани отекают, и образуется фурункул с гнойно-некротическим стержнем. Однако нередко он не выделяется, что задерживает заживление. С удалением стержня симптомы воспаления затухают. При множественных фурункулах наблюдается повышение температуры тела (С.В. Старченков, 1999).

Остиофолликулиты и фолликулиты возникают главным образом там, где кожа травмируется намордником или поражена демодекозом, раздражена выделяющимся экссудатом (из глаз, носа и т. д.), разложившимся потом и т. п. (В.А. Соколовский, 1968).

При хроническом течении пиодермии отмечают различные по площади участки поражённой кожи, которая, как правило, утолщена, наблюдается папулёзно-пустулёзная сыпь и патологическая пигментация. Течение болезни длительное, вялое. Периоды ремиссии сменяются периодами обострения. Зуд выражен слабо или отсутствует (А.А. Соколовский и др., 1968; В. А. Лукьяновский, 1995; Е. Quadros, 1974).

В настоящее время практически нет ни одной страны, в которой не были бы зарегистрированы случаи микозов человека и животных. Распространению микозов способствуют широкая транспортировка животных из-за рубежа со скрытой формой заболевания, факторы внешней средыкроме того, показатели распространенности существенно зависят от применения эффективных средств их профилактики и лечения.

V. Vrzal, A. Rybnikar, J. Chumela, J. Lysak (1985) установили, что в связи с высокой концентрацией поголовья собак в ЧССР участились случаи дерматомикоза, вызванного в 82,5% случаев грибом Trichophyton в 10% -Tr.mentagrophytes и в 7% - Microsporum canis. Болеет в основном молодняк до 1 года и чаще осенью и зимой.

По данным N.C. NayakТ. ChakrabortyМ.К. Bhowmik (1989) в Индии в конце 1987 г. зарегистрировано 4 вспышки (564 случая) дерматомикоза. У больных животных на голове, носу, ушах, теле и конечностях появлялись поражения кожи округлой формы диаметр 5−8 мм серовато-белого цвета.

В странах Европы основным возбудителем микроспории является Microsporum canis, который у кошек составляет 65−98,7% и 45−88,3% - у собак. Поэтому особый интерес при грибковых заболеваниях животных занимает микроспория, которой принадлежит 90% всех кожных болезней (P.M. Гаскел, М. Беннет, 1999; Cats-портал-Маи.ги. — [Электронный ресурс] -Режим доступа: http://www.cats-portal.ru/pub/health/?p=illcatl, — Загл. с экрана).

В Англии, Северной Ирландии у 83,3% собак, больных дерматомикозами, возбудителем является зоофильный гриб Microsporum canis (J. Walker, 1950; [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://chelyaby1 priut.livejournal.com/8354.html, — Загл. с экрана. Во Франции у 80% собак причиной дерматомикозов является скрытая форма микроспории (D. N. Carlotti, 1999).

В Нидерландах у 27% домашних животных изолируют зоофильные грибы. К. С. Медведев (1999) и А. Бокарёв. — [Электронный ресурс] - Режим flOCTyna: http://www.ve^hoto.ni/modules/sections/index.php?op=viewarticle&arti d=9, — Загл. с экрана, считают, что гриб Microsporum canis хорошо адаптирован к кошкам и поэтому нередко болезнь протекает бессимптомно. От здоровых животных, ранее не болевших микроспорией, выделить возбудитель очень трудно, в то время как уровень носительства у переболевших животных достигает 100%.

Особенно опасным источником инфекции для людей являются животные с субклинической (скрытой) формой микроспории. Также дерматофиты изолируют из здоровой кожи собак и кошек. Важное место в распространении дерматомикозов занимают бездомные собаки и кошки (М.В. Яцуха, 1992; Животные и закон. — [Электронный ресурс] - Режим дocтyпa: http://vetdoctor.ru/lib/textreader.php?specialization=&categoryid=43&t extid=124, — Загл. с экрана.- С. Е. Горбовицкий, 1958).

В национальном ветеринарном институте, Осло, исследовано 2066 соскобов с кожи домашних животных (собаки — 38%, лошади — 29%, крупный рогатый скот — 16%, кошки — 14%). В 439 образцах обнаружены дерматофиты следующих видов: Mirosporum canis (собаки, кошки, крупный рогатый скот, лошади, свиньи, козы, кролики, хомячки), Microsporum equinum (собаки, лошади), М. gypseum (лошади), Trichophyton equinum (лошади, крупный рогатый скот), Т. mentagrophytes (собаки, кошки, крупный рогатый скот, лошади, морские свинки, кролики), Т. verrucosum (крупный рогатый скот), Epidermophyton floccosum (собаки) (Н. Stenwig, 1985).

Одной из наиболее частых патологий связанных с поражением кожного покрова, с которым приходится встречаться ветеринарным специалистамявляется демодекоз. A.A. Лисициной и Ф. И. Василевичем (1996) в Московской области было обследовано 638 собак с различными поражениями кожи, у 186 животных (29,2%) был диагностирован демодекоз. Чаще всего очаги поражений находились на голове, передних лапах и шее, т. е. в местах наибольшего контакта больных собак со здоровыми. Большинство больных собак были чистопородными (90,6%), короткошерстными (97 случаев). Максимальный процент заболеваемости отмечен у животных 6−12 мес. (42,1%). Самцы болеют чаще (61,9%) самок. Реже всего болеют щенята до 2 мес., т.к. в этом возрасте нет контакта с другими собаками и они защищены колостральным иммунитетом.

Т.С. Катаевой и М. А. Костылевой (2008) изучено распространение демодекоза собак в условиях г. Краснодара. Зараженность собак Demodex canis достигает 11%. Максимальная зараженность установлена у молодняка собак следующих пород: мопс, немецкая овчарка, ротвейлер и беспородных. Пик заболеваемости отмечают весной и осенью.

Ф.И. Василевич, А. К. Кириллов (1997) в период с 1983 по 1993 гг. в Москве и Московской области в результате микроскопического исследования соскобов кожи с губ, век, лба, щек, внутренней поверхности бедра, подмышечной впадины и вымени от 415 собак без видимых клинических признаков поражения кожи только у 36, или 8,6% обнаружили клещей D. canis. Кроме того, в 1994 г. была исследована кожа 25 собак после их смерти. При жизни признаков поражения кожи у них не было. В результате у 8% собак были обнаружены клещи D. canis, причем все собаки были старше 5-летнего возраста.

По данным L.D.B.B. Ferreira (1982) распространение демодекоза среди домашних животных в Португалии отмечал у 25% собак с проблемами кожного покрова.

С.В.Ларионов (1991) при обследовании 658 собак с поражением кожи у 226 (34%) обнаружил демодекоз. По данным М. В. Шустровой (1996) в г. Санкт-Петербурге из 1115 обследованных собак, диагностировали демодекоз У 725.

Несмотря на широкое распространение демодекоза, до настоящего времени мало изучены вопросы эпизоотологии и патогенеза, не разработаны эффективные меры борьбы с данной инвазией. Многие исследователи утверждают, что D. canis является нормальным обитателем кожи собак. В 1910 г. H. Gmeiner, основываясь на гистоморфологии кожи, установил, что клещи D. canis не встречаются у здоровых собак. В 1921 г. K. Trautwein гистологически исследовал 10 клинически здоровых собак в возрасте от 4 мес. до 8 лет, у 8 животных было обнаружено множество клещей. Автор делает вывод, что клещи могут паразитировать в волосяных сумках здоровых собак.

Ему возражает F. Lifka (1922). Он проверил 50 собак с «чистой кожей» и только у одного 2-х месячной бассета смог обнаружить клещей в пробе из верхней и нижней губы. Он предположил, что имеет дело с началом болезни. Автор делает вывод, что клещи не являются постоянными обитателями кожи здоровых собак. S.M. Gaafar (1958) проводил исследование 93 собак разных пород в возрасте от 2-х недель до И лет без клинических признаков поражения кожи. Материал брался из кожи верхнего века и из области виска. В 5 случаях был обнаружен клещ D. canis. F.R. Koutz (1955) исследовал кожу 204 здоровых собак в возрасте от 3 месяцев до 12 лет. Пробы брали из верхнего века, верхней и нижней губы, щек и др. У 108 собак был обнаружен клещ D. canis. F. Piotrowski (1979) в своих экспериментах брал пробы из тех же мест, что и F.R. Koutz. Из 100 подопытных собак у 39% обнаружили клещей D. canis. Возраст их был от 4 недель до 8 лет.

Ф.И. Василевич и А. К. Кириллов (1997) отмечают, что в период с 1983 по 1993 гт. в Москве и Московской области в результате микроскопического исследования соскобов кожи с губ, век, лба, щек, внутренней поверхности бедра, подмышечной впадины и вымени от 415 собак без видимых клинических признаков поражения кожи только у 36, или 8,6% обнаружили клещей D. canis. У 18 собак клещей находили на веках, у 9-на щеках, у 8-на губах, у 6 — на вымени, у 2 — на внутренней поверхности бедер. Собаки были, как правило, чистопородные: 16 собак были моложе 1 года, 9 — от 1 года до 3-х лет и 11-старше 3-х лет.

G.M. Gowing (1964) отмечает, что из 507 собак, пораженных демодекозом, представляли все возрастные группы в возрасте до 12 лет. Почти 2/3 его пациентов заболели в первый год жизни, доля собак старше 5 лет составила 35 случаев. С.Н. Olschewski (1988) считает, что старые собаки чаще болеют опухолями, их лечат кортикостероидами, которые ослабляют иммунную систему и они более подвержены заболеванию демодекозом. С. В. Ларионов (1991) отмечает, что из 226 собак, пораженных клещом D. canis, лишь 44 (19,5%) были старше 2-х лет. D.W.Scott (1995) четко выраженной возрастной динамики при данной инвазии не установил.

По данным Ф. И. Василевича (1997) из 61 обследованной собаки, зараженной демодекозом, максимальный процент заболеваемости отмечался у животных в возрасте от 6 мес. до 1 года — 42,3%, или 260 собак, в 191 случае (31%) демодекоз регистрировался в возрасте от 2 до 6 месяцев. В возрасте 13-х лет — 93 случая (35,1%), старше 3 лет — 61 случай (9,9%).

Высокая заболеваемость собак в возрасте до 1 года, вероятно, объясняется тем, что в это время животные подвергаются всевозможным стрессовым ситуациям (вакцинации, купирование ушей, смена зубов и др.)> что, безусловно, ослабляет защитные силы организма,

У 2,4% случаев наблюдался демодекоз у 1−2-х месячных щенков. В этом возрасте практически отсутствуют контакты с другими собаками, и не трудно предположить, что заражение произошло от больных демодекозом матерей.

Поражения кожи при демодекозе делят на сквамозную и пустулёзную.

При пустулезной форме демодекоза кожа, как правило, была опухшей, покрасневшей, на ней образовывались маленькие твердые узелки, которые возникали рядом с волосяными фолликулами и имели сине-красный оттенок. Узелки быстро превращались в гнойнички желтого, красно-коричневого, а иногда черноватого оттенка. Под легким нажатием из гнойничка выделялся сальный гной, иногда с кровью, в котором находились клещи на всех стадиях жизненного цикла. Вследствие вторичной инфекции возникает обширная пиодерма с образованием язвенных нарывов. Кожа становится толстой, морщинистой, влажной, часто трескается. Зуд часто бывает очень сильный, запах неприятный.

При пиодемодекозе почти во всех случаях наблюдается увеличение и болезненность подчелюстных лимфатических узлов, часто-гнойные флебиты конечностей, хромоту.

Папулы находились в области головы, спины, крестца, корня хвоста. Их размеры были от 2 до 7 мм в диаметре, очень плотные. При проколе стенки папулы в ее содержимом находили, как правило, мертвых клещей или их фрагменты (конечности, коксостернальный скелет, структуры гнатосомы и др.) На поверхности крупных папул, волос был несколько истончен, но сохранен.

Чаще всего встречалась смешанная форма демодекоза. Причем, при этой форме заболевание протекает наиболее тяжело. На облысевших участках кожа сильно сморщивается, что придает ей гофрированный вид. На месте вскрывшихся пустул часто образовываются язвы. Вследствие нарушения терморегуляции собака даже в теплом помещении испытывает озноб. Такие случаи, как правило, заканчиваются летальным исходом (Д.Н. Антипин, B.C.

Ершов, H.A. Золотарёв, В. А. Соляев, 1956; Ф. И. Василевич, A.A. Лисицина, В. А. Голубева, 1996).

Более половины всех случаев заболеваний кожи животных приходится на хронические зудящие дерматозы: экзему, нейродермит, атопический дерматит и другие. В большинстве случаев заболевания кожи бывают вызваны несколькими причинами, но большая часть этих заболеваний отражает нарушение деятельности внутренних органов. Наиболее частой причиной кожных заболеваний являются нарушения пищеварения. Основным субъективным симптомом является выраженный зуд. В результате частых расчесываний отмечается появление экскориаций, покрытых кровянистыми корочками. Ссадины вызывают новые приступы зуда и одновременно представляют собой благоприятные входные ворота для бактериальной инфекции и развития воспалительной реакции (A.B. Липин, и др., 2002).

6. выводы

1 .Результатами проведённых научных исследований и анализом регистрационных записей отдельных ветеринарных клиник г. Краснодара установлено, что кожные болезни широко распространены у мелких домашних животных. На долю кожных болезней приходится более 34% всех случаев. При этом идёт увеличение числа заболеваний ежегодно в среднем на 1,7%. Наибольшее распространение имеет трихофития, демодекоз, пиодермия и микроспория.

Установлена четкая сезонность динамики заболеваемости собак смешанными инфекциями кожи. Проведенный анализ данных позволил определить сезонность заболеваний, которая приходится на два периода года: с мая по сентябрь, с пиками заболеваемости в июне и сентябре, а в зимние месяцы происходит затухание болезни. Максимальное количество заболевших пиодермией отмечается в июне, когда заболевает — 23,7% животных от общего количества заболевших в течение всего года. Пик заболевания животных демодекозом приходится на июнь — июль месяцы, что составляет — 38,8% от общего количества заболевших животных. Дерматофитозы также как и пиодермии, достигают пика заболеваемости в июне — 23,5% и сентябре — 22,3%. Наиболее часто распространено смешанное течение кожных заболеваний, вызванное комплексом инфекционных агентов (чесоточные клещи, грибы, микрофлора), которые составляют — 69,67%.

2.Учитывая полиэтиологичность наиболее массовых заболеваний кожи разработан оригинальный отечественный комплексный препарат комбицид. Он представляет собой однородную, мазеобразную массу от серо-белого до светло-желтого цвета со специфическим запахом и вкусом. Активнодействующими компонентами крема комбицид являются препараты, относящиеся к группам авермектинов и полигексаметиленгуанидинов, в качестве формообразующего вещества взята жировая основа. Он стоек при хранении в обычных условиях в защищенном от света месте, не горюч, не огнеопасен.

Лабораторные исследования крови (морфологические и биохимические) доказывают, что использование крема комбицид в однократной и трёхкратной терапевтических дозах благотворно влияет на все основные биохимические процессы в организме животных, не причиняя вреда гомеостазу организма животных.

3 .Комбицид относится к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества) по ГОСТ 12.1.007−76 «Вредные вещества» Ы)5о=2270 мг/кг, не вызывает выраженного токсикоза в дозировках до 2550 мг/кг массы тела. Коэффициент кумуляции (Кк) при многократном применении препарата крем комбицид составил 2,07, что относит препарат к четвертой группе — слабо выраженная степень кумуляции. Длительное применение препарата в терапевтической и 3-х кратной терапевтической дозах, не оказывает негативного влияния на состояние животных и другие показатели их клинического статуса, не оказывает вредного местного действия, не влияет отрицательно на морфо-биохимические показатели крови, не нарушает функции и структуру жизненно важных органов, систем и тканей. При нанесении на кожу и видимые слизистые оболочки препарат не оказывает раздражающего и аллергезирующего действия.

4.Комбицид способен оказывать акарицидное, антимикотическое и антимикробное воздействие на болезнетворных агентов при наружном (локальном) применении против дерматитов бактериального, микозного и клещевого происхождения.

При изучении антимикробных, антимикозных и акарицидных свойств препарата комбицид в отношении условно-патогенной микрофлоры, дерматофитов и саркоптоидных клещей установлено, что препарат обладает выраженным распространённым действием в отношении комплексных заболеваний кожи.

При определении чувствительности условно-патогенной микрофлоры под воздействием крема комбицид зона задержки роста составила для Str. pyogenes — 44,0 мм, — St. aureus — 41,7ммSt.epidermidis — 39,6- St. intermedius — 31,3ммE.coli — 31,3ммP.aeragenosa — 33,4ммP.vulgaris — 35,7 мм.

Препарат комбицид по отношению к грибам проявлял себя следующим образом. Зона задержки роста при воздействии на Candida albicans кремом комбицид составила 37,3 ммк Microsporum canis — 27,3 и к Trichophyton mentagrophytes — 29,3 мм.

При определении акарицидной активности комбицида в сравнении с другими акарицидными препаратами, крем комбицид быстро вызывал гибель (через 5ч) клещей Psoroptes cuniculi находившихся в опыте.

5.Препарат обладает высокой терапевтической эффективностью- 82,8 -94,7%, характеризуется быстрой впитываемостью в поверхостные слои кожи, комплексностью действия и удобством в использовании. У больных животных, получавших лечение кремом комбицид существенно улучшалось общее состояние, на 3−10 день (в зависимости от наличия болезнетворных агентов) уменьшались гиперемия, зуд, раневая поверхность становилась светлее и сокращалась в диаметре, происходило формирование струпа, затем струп постепенно отделялся, и в местах поражения отмечали регенерацию кожного покрова, и появление новой здоровой шерсти.

Проведенные исследования показали, что комплексный препарат комбицид при заболеваниях кожи смешанной этиологии (саркоптоидные клещи, микрофлора и дерматофитозы) гораздо быстрее и качественнее оказывает терапевтический эффект, который составляет 80% на 10 день нанесения его на поражённые участки и 93,8% на 20 день применения, нежели традиционная схема лечения, применяемая в клиниках, которая, составляет в среднем около месяца и терапевтическая эффективность на 20 день достигает лишь 75%.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании полученных результатов разработаны показания к применению и схемы использования препарата комбицид в ветеринарной практике.

Для практической ветеринарии рекомендуется препарат комбицид, предназначенный для нормализации патологического процесса кожно-волосяного покрова, в качестве комплексного средства, для лечения мелких домашних животных, в частности собак с поражениями поверхности кожи. В качестве терапевтического средства при острых формах течения болезни, вызванной чесоточными клещами, гноеродной микрофлорой и спорами грибов.

Результаты исследований, изложенные в диссертации, рекомендуются для использования в учебном процессе на ветеринарных и биологических факультетах, при написании учебных пособий и монографий, а также при проведении научно-исследовательских работ. Результаты исследований могут быть включены в программу повышения квалификации ветеринарных специалистов.

Производство препарата освоено в ООО «КНИВИ-ФАРМ» (г. Краснодар). В условиях ветеринарных клиник г. Краснодара обеспечено его применение в качестве эффективного лечебного средства при острых ассоциативных заболеваниях кожи мелких домашних животных.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Причина большинства кожных болезней — потеря способности организма справиться с недугом за счет внутренних компенсационных резервов, внутренний сбой. Нарушение физиологического равновесия происходит по многим причинам: заболевания внутренних органов, зашлакованность организма, дисгармония в психоэмоциональной и гормональной сферах, заражение грибковыми и вирусными инфекциями.

Заболевания внешних покровов собак можно разделить на две группызаболевания собственно кожи и заболевания шерстного покрова. Более половины всех случаев заболеваний кожи у собак приходится на хронические зудящие бактериальные инфекции: пиодермия, дерматит, пиодермия кожных складок, импетиго, фолликулит, дерматофитоз, фурункулез, акне, пододерматит (межпальцевая зона) и другие. В других случаях эти заболевания являются последствиями нарушений деятельности внутренних органов, в частности пищеварения, к которым может присоединиться бактериальная инфекция (Ж-л: Зоосоветы любителям животных, 2008).

Болезни, общие для человека и животных, занимают первостепенное место среди всех известных ныне болезней. Кроме социальной опасности, инфекционные заболевания наносят значительный экологический ущерб (Т.В. Новикова, 2006).

Основным принципом лечения кожных заболеваний собак является комплексный подход к решению проблемы, воздействуя сразу на все виды патологических агентов. Это часто приводит к более быстрому выздоровлению, чем массированное воздействие высокоактивных субстанций.

На базе Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института разработан новый отечественный препарат — крем комбицид, представляющий собой комплексный препарат, состоящий из компонентов, способных оказывать акарицидное, антимикотическое и антимикробное воздействие на болезнетворных агентов. По внешнему виду крем комбицид представляет собой однородную, кремообразную массу от серо-белого до светло-желтого цвета с приятным специфическим запахом и вкусом.

Основными компонентами крема комбицид являются: препарат авермектинового ряда, полученный на основе продуктов жизнедеятельности почвенного гриба З^ерШтусез ауегтШНз обладает выраженным противопаразитарным действием на нематод и личинки подкожных, носоглоточных, желудочных оводов, а также на вшей, кровососок и возбудителей саркоптоидозов животных;

Биоцидный препарат, из группы полигексаметиленгуанидиновотносится к ограниченному кругу биоцидных препаратов, способных одновременно действовать как на аэробную, так и на анаэробную микрофлору, и грибы соответственно;

В качестве формообразующего вещества использована жировая основа, которая обладает выраженным противовоспалительным, противозудным, увлажняющим, ранозаживляющим эффектом при экземе, дерматите, псориазе, гнойничковых поражениях, опрелостях кожи. Устраняет кожный зуд. Увлажняет кожу и восстанавливает ее эластические свойства, предотвращает лихенизацию, восстанавливает проходимость протоков сальных желез.

Токсикологическая оценка крема комбицид проводилась на белых крысах и собаках. Проведенное, согласно общепринятым стандартам, изучение токсикологических свойств крема комбицид позволило нам установить его среднесмертельную дозу (1Т)5о=2270мг/кг).

В течение периода наблюдения крем комбицид не вызывал гибели и острой интоксикации животных, не влиял на их общее состояние и поведение. Рефлексы оставались сохраненными. Нарушения функциональной активности органов пищеварения и мочеотделения не наблюдали.

Токсикологические исследования на лабораторных и мелких домашних животных позволяют сделать вывод о том, что крем комбицид обладает некой токсичностью, вызывая явления токсического характера и гибели животных, в дозе начиная от 3,8 г/кг массы тела, и по ГОСТ 12.1.007−76 «Вредные вещества» относится к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества).

Изучение хронической токсичности на крысах показало, что животные хорошо переносили крем комбицид. Гибель крыс наблюдалась в группах во время опыта. Коэффициент кумуляции равен 2,07, что относит препарат к четвертой группе — слабо выраженная степень кумуляции. За всеми животными вели клинические наблюдения в течение всего срока назначения и семи дней после прекращения дачи препарата, обращая внимание на общее состояние, поведенческие реакции, аппетит, динамику прироста массы животных, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных.

Исследование крови подтвердило вывод о малой токсичности препарата. При этом все проанализированные показатели крови опытных животных существенно не отличались от таковых в контроле.

Средние значения полученных результатов содержания эритроцитов, лейкоцитов и лейкоформула характерны для физиологической нормы растущих животных.

В крови крыс опытных групп наблюдалось недостоверное незначительное увеличение гемоглобина, что вероятно, можно отнести к активизации обменных процессов, протекающих в организме.

При анализе данных хронического эксперимента на собаках, в ходе которого изучали влияние крема комбицид на состояние обмена веществ, функцию почек и пищеварительного тракта, получены данные, свидетельствующие о том, что физико-химические показатели мочи и фекалий животных опытных групп оставались в пределах физиологических норм, а все исследованные показатели крови были схожи с таковыми в контроле.

Местно-раздражающее действие крема комбицид изучали методом накожных аппликаций на морских свинках. Каких-либо изменений в клиническом статусе животных и на месте аппликации выявлено не было, как в период изучения препарата, так и после его прекращений.

Характерным в действии крема комбицид является быстрая впитываемость препарата в поверхностные слои кожи, биоразлагаемость, комплексность действия, удобная в использовании лекарственная форма и высокий терапевтический эффект.

Проведенные исследования показали, что нанесение крема комбицид на кожу собак и лабораторных животных способствует снятию зуда, шелушения и не вызывает раздражения кожного покрова.

При изучении антимикробных, антигрибных и акарицидных свойств крема комбицид в отношении условно-патогенной микрофлоры и саркоптоидных клещей, установлено, что препарат обладает достаточно выраженным действием.

Клиническими испытаниями установлено, что крем комбицид обладает выраженной терапевтической эффективностью при ассоциированных заболеваниях кожи мелких домашних животных.

Разработка показаний к применению и изучение эффективности крема комбицид проведена в нескольких сериях опытов на собаках.

Терапевтическую эффективность крема комбицид изучали при поражениях кожи у собак.

Крем комбицид обладает выраженным бактерицидным и бактериостатическим действием в разведении 1:32 по отношению к культурам Streptococcus pyogenes, Staphylococcus epidermidis и Entherococcus faecalis, a также в разведении 1:16 по отношению к культуре Escherichia coli, Citrobacter freundii, Shigella dysenteriae и Pseudomonas aeragenosa. МБцК для Staphylococcus intermedius, Klebsiella pneumonia и Proteus vulgaris составила 1:16, а МБсК для Staphylococcus aureus — 1:16 и 1:64 для Staphylococcus intermedius, Klebsiella pneumonia и Proteus vulgaris соответственно.

Наряду с бактерицидными и бактериостатическими свойствами, крем комбицид обладает также фунгистатической и фунгицидной способностью.

Анализируя полученные результаты исследований по определению чувствительности условно-патогенной микрофлоры к лекарственным препаратам, устанавливали, что наиболее активно препятствуют росту микрофлоры такие антибиотики, как ципрофлоксацин, энрофлоксацин, тетрациклиниз четвертичных аммонийных соединений — бромацидиз биоцидных препаратов — роксацин (полигексаметиленгуанидин) — из комплексных препаратов — анилокаин и крем комбицид. Антимикозным действием обладали роксацин, мазь «Ям» и крем комбицид.

В дальнейшем проведен опыт по определению сроков формирования устойчивости вариантов микроорганизмов к бромациду, роксацину, энрофлоксацину, ципрофлоксацину, крему комбицид. Проведено 20 пассажей семи тест-культур на питательных средах с вышеперечисленными препаратами.

Исследуемые виды культур микроорганизмов выявили устойчивость к препарату ципрофлоксацин уже в первом пассаже: максимально эффективная задержка роста составила 20,9±0,1 мм в культуре St.epidermidis.

Препараты бромацид и энрофлоксацин формировали устойчивость у Str. pyogenes в 10 пассажах, а роксацин и крем комбицид устойчивость у данного вида микрофлоры не вызывали.

Культура St. aureus-19,5±l, l теряла чувствительность к препарату энрофлоксацин к 15 пассажу, а к препаратам бромацид-23,4±-2,1 и роксацин-39,1±-0,5 чувствительность сохранялась.

St.intermedius формировал устойчивость к энрофлоксацину-17,6±-0,2 и ципрофлоксацину-18,8±-0,8 уже в первых пассажах, к препаратам бромацид-33,8±-0,4 и роксацин-27,8±-0,4 устойчивость не формировалась.

St.epidermidis-17,6±0,4 выявил устойчивость к энрофлоксацину в 20 пассаже и ципрофлоксацину-20,9±-0,1 уже в первом, к препаратам бромацид, роксацин, крему комбицид данный штамм был в достаточной степени чувствителен.

E.coli была чувствительна к роксацину и крему комбицид, к препарату бромацид-15,6±-0,3 устойчивость формировалась уже в 15 пассаже, к энрофлоксацину-18,6±-0,3 и ципрофлоксацину-0 — уже в первом.

P.aeragenosa выявила чувствительность к роксацину и крему комбицид, однако же, к препаратам: бромацид, эрофлоксацин, ципрофлоксацин данный штамм показал значительную устойчивость.

P.vuigaris-20,9±0,5 демонстрировал чувствительность к препарату бромацид в 1 пассаже, к препарату энрофлоксацин-19,5±-0,3 — в 5 пассажах, к препарату роксацин и крему комбицид — во всех проводимых пассажах.

При этом установлено, что формирование устойчивых вариантов Str. pyogenes-10,4±0,1, St. aureus-23,4±2,l, St. intermedius-24,1±2,2 к бромацидуStr. pyogenes-15,3±0,l, St. aureus-19,5±1,1, St. intermedius-7,8±0,2 к энрофлоксацинуStr. pyogenes-0, St. aureus-7,3±0,l, St. intermedius-13,9±0,1 к ципрофлоксацину происходило уже в 15-м пассаже, a Str. pyogenes-, E. coli, P. aeragenosa и P. vulgaris был устойчив к ципрофлоксацину с самого начала и энрофлоксацину уже в 10 пассаже. А именно — Str. pyogenes-18,4±0,3, E. coli-15,2±0,3, P. aeragenosa-15,2±0,6 и P. vulgaris-17,2±0,4. Все происследованные штаммы микроорганизмов были в достаточной степени чувствительны к крему комбицид, не формируя устойчивости в 20 пассажах.

Проведенные исследования позволяют сделать вывод, что препарат роксацин и крем комбицид не формировали устойчивости микрофлоры в 15 и даже, в 20 пассажах. Однако же крем комбицид вызывал более выраженную зону задержки роста практически у всех культур микроорганизмов во всех пассажах.

Препарат роксацин и крем комбицид не формировали устойчивости микрофлоры в 15 и даже в 20 пассажах. Характерно, что начальные уровни чувствительности патогенных и условно-патогенных бактерий также были заметно выше к препаратам роксацин и крем комбицид, чем к аналогам.

Таким образом, формирование резистентно-устойчивых штаммов микроорганизмов происходит гораздо быстрее к антибиотическим препаратам, нежели к препаратам, не содержащих их.

Акарицидное действие препаратов определяли на клещах Рзогор1ез сишсиИ, выделенных из соскобов некротических струпьев с внутренней поверхности ушей поражённых псороптозом кроликов. Выясняли следующим образом. Сначала выявляли неподвижных чесоточных клещей путём просветления корочек в соскобах кожи едкими щелочами. Соскоб эпидермиса помещали в чашку Петри или пробирку, заливали 5—10 частями 10% раствора едкого натрия или калия и подогревали в течение 10—20 минут, доводя жидкость до лёгкого кипения. Затем маленькими частицами корочки переносили на предметное стекло, тщательно расщепляя препаровальными иглами, накрывали препарат покровным стеклом и исследовали под микроскопом.

Уже через 30 минут воздействия лекарственных веществ на подкожных клещей, препарат авермектинового ряда: аверсект-2 в 1% и комбицид показали первые результаты. Под воздействием Аверсект-2 1% концентрации из 10 клещей, 7 живы, 2 парализованы, под воздействием крема комбицид — 8? кивых, 2 парализованых. Что касается препарата флювалинат 22%, то все 10 клещей из 10 по-прежнему живыи бромпропиолат 50% - лишь 1 клещ из 10 парализован.

По истечении 45 минут воздействия акарицидов на зудней: аверсект-2 1% — 5 живых, 3 парализованных и уже 2 обездвиженныхкомбицид — 1 парализован, 1 обездвиженфлювалинат 22% - по прежнему живы 10 из 10- и бромпропиолат 50% - 2 парализованы, 1 обездвижен и 1 погиб.

Спустя 1 час: аверсект-2 1% — 1 живой, 5 парализованы, 3 обездвижены и 1 погибшийкомбицид — 5 живых, 4 парализованы и 1 обездвиженфлювалинат 22% - 8 живых, 2 парализовано, обездвиженных и погибших нети бромпропиолат 50% — живых не зарегестрировано, 1 парализован, 3 обездвижены и 6 погибших.

При воздействии 1час 30 минут: аверсект-2 1% — живые отсутствуют, 3 парализованы, 2 обездвижены и 5 погиблокомбицид — 3 живых, 5 парализовано, 2 обездвиженыфлювалинат 22% — живых 7, 2 парализованы, 1 обездвижен и по прежнему ни одного погибшегои бромпропиолат 50% — также как и под воздействием аверсект-2 4% — погибли все 10 из 10.

Через 2часа: аверсект-2 1% — 5 обездвижено и 5 погибшихкомбицид — 1 живой, 6 парализованы, 3 обездвиженыфлювалинат 22% — 3 живых, 2 парализованы, 1 обездвижен и снова ни одного погибшего.

Спустя 2 часа 30 минут под воздействием препарата аверсект-2 1% все 10 клещей из 10 погибли. Комбицид — 5 парализованы, 4 обездвижены и 1 погибший. Гибель всех клещей при обработке кремом комбицид наступила через 5 ч экспозиции. А вот под воздействием препарата флювалинат 22% — 100% гибель наблюдалась лишь на исходе 4 часа эксперимента.

Клещи, которые находились в контрольной группе, помещённые на диск белой фильтровальной бумаги, пропитанной дистиллированной водой, сохраняли свою жизнедеятельность до 2 недель, и гибель первого из них зафиксирована только лишь через 72 часа, то есть на 4-е сутки.

Итак, исходя из проведённых опытов следует, что наиболее приемлемым акарицидным средством для комплексного препарата — крем комбицид является препарат аверсект-2 1%, потому что он достаточно быстро воздействует на паразитов на разных фазах жизненного цикла и имаго в том числе, не обладает резким специфическим запахом, легко растворим в воде, этиловом спирте, не накапливается в организме животных.

Анализируя полученные данные проведенных морфологических и биохимических исследований крови собак, показали, что при нанесении крема комбицид на кожный покров животных наблюдается спокойная картина крови не сильно отличающаяся от фоновых животных. В 2-й опытной группе животным наносили крем комбицид в трёхкратной терапевтической дозе, при этом в крови зарегестрирован эритроцитоз, по отношению к 1-й опытной группе, в которой животным наносили крем комбицид в однократной терапевтической дозе, который повысился в 1-й опытной группе в 1,1 раза, а во 2-й опытной группе в 1,2 раза по отношению к контролю. За счёт увеличения эритропоэза, повышается и уровень гемоглобина в 1-й группе на 1,2 раза, во 2-й опытной группе — в 1,5 раза. Повышение общего белка в 1-й опытной группе в 1,1 раза по сравнению со 2-й группой, в которой он составил 1,2 раза. Изменения в альбуминовых и глобулиновых фракциях белка не значительны, указывают на благотворное влияние опытного препарата — крем комбицид.

АлАТ и АсАТ во 2-й опытной группе быле выше по сравнению с группой отрицательного контроля, но всё равно находились в пределах физиологических норм собак. АсАТ в 1-й группе повышался в 1,8 раза, во 2-й опытной — в 2,0 раза, что касается АлАТ, то и в 1-й и во 2-й опытных группах увеличился одинаково в 2,5 раза.

Биллирубин, мочевина и креатинин также увеличивался практически равноценно в обеих опытных группах по отношению к контрольной. Итак билирубин вырос в 1,7 в 1-й опытной и в 1,9 раза во 2-й опытной группе соответственно. Мочевина увеличилась по отношению к контролю практически одинаково: в 1-й опытной в 1,7 раза, во 2-й опытной в 1,8 раза. Креатинин же равноценно, как в 1-й, так и во 2-й опытных группах увеличился в 1,2 раза по отношению к отрицательному контролю.

Что касается липидного обмена, в 1-й опытной группе произошло увеличение в 1,6 раза, вот во 2-й опытной группе — в 2,3 раза по отношению к группе отрицательного контроля.

В количественном отношении кальция и фосфора значительных изменений не наблюдалось.

Следовательно, проанализировав морфологические и биохимические данные мы можем сделать вывод, что использование крема комбицид в однократной и трёхкратной терапевтических дозах благотворно влияет на все основные биохимические процессы в организме животных, не причиняя вреда гомеостазу организма щенков.

Применение крема комбицид экономически выгодно, как по срокам, так и по затраченным средствам на лечение.

По материалам настоящих исследований фармакологических и токсикологических свойств крема комбицид, его эффективности при кожных заболеваниях и разработанному комплексному препарату — крем комбицид получено положительное решение на получение патента на изобретение.

Таким образом, препарат крем комбицид является малотоксичным и доступным по цене средством, обладающим разносторонним фармакологическим действием с выраженной лечебной эффективностью при ассоциированных заболеваниях кожи мелких домашних животных, вызванных микрофлорой, грибами и подкожными клещами.