Экспериментальное обоснование метода получения аутопротезов для восстановительной хирургии сосудов

Актуальность проблемы.

Проблема сосудистой патологии, в настоящее время, является одной из основных в современной медицине, что обусловливает поиск путей совершенствования и разработку принципиально новых подходов в лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Совершенствование хирургической техники, создание прецизионного инструментария позволяют производить вмешательства на артериях малого диаметра: коронарных, интракраниальных, брыжеечных, артериях голени [18, 11, 90, 127,22,201,199].

В клинической практике в настоящее время используется в основном ангиопластика артерий собственными сосудами организма — артерией молочной железы, внутренней грудной артерией, большой подкожной веной и др. [64, 106, 164, 177, 199], либо искусственными протезами [14, 65, 67, 63, 119, 110, 112]. При этом указываются и недостатки данных методов. J. НCampbell et al (1999) указывает на варикозно-дегенеративные изменения вен у больных преклонного возраста, которые приводят к формированию аневризм венозных трансплантатов в условиях воздействия на них артериального давления [141]. Аутовены в 25−30% случаев недоступны из-за анатомического строения и использования их в предыдущих операциях [11, 124]. Известно, что после аорто-коронарного шунтирования аутовеной уже через 2−5 лет остаются проходимыми лишь 6070% пересаженных трансплантатов [164]. Шунты из аутоартерий, как правило, атеросклеротически изменены, что ограничивает возможность их применения [106, 164, 199, 124].

В 80-е годы большой интерес вызывало использование ксенопротезов, получаемых при ферментативно-химической обработке артерий млекопитающих. Они обладают нулевой хирургической порозностью, адекватными пластическими и иммунологическими свойствами [15, 94, 36, 39, 69]. Простые ксенотранс-плантаты склонны к формированию аневризм и слабо резистентны к инфекции и тромботической индукции, не более 40% их остаются проходимыми в течение 6−8 месяцев [16- 11, 124]. Повышение противотромботических свойств протезов путем гепаринизации их внутренней поверхности не обеспечивает необходимого антиагрегантного потенциала [49, 15, 108, 30, 186]. Известны другие способы увеличить тромборезистентность и продолжительность функционированияксе-нопротеза [53, 40, 11, 186, 176].

Общеизвестно, что синтетические сосудистые протезы в отдаленные сроки после имплантации в артерии малого калибра тромбируются в 100% случаев [200]. Аутои аллотрансплантаты не могут решить проблему пластического материала в ангиологии [108]- Перспективны эксплантопротезы с эндотелиальным покрытием, чему посвящено очень много научных работ, особенно с начала 80-х годов как у нас, так и, в особенности, за рубежом [2, 200, 188- 187, 196, 174]. Эндотелиальное покрытие ангиоэксплантатов выполняли как аутологичными, так и культивируемыми алло — и ксенокультурами клеток интимы. Но при этом сразу же выяснилось, что выделение, и выращивание, эндотелиальных клеток in: vitro — дорогой и трудоемкий метод, а эндотелий таких ангиопротезов либо слущивается, либо подвергается иммунной атаке «организм против трансплантата», в относительно неотдаленные сроки [124, 166]: Поэтому в последние годы начаты работы по формированию сосудов из клеток разных тканевых культур.

В настоящее время значительное распространение в клинической практике и научныхисследованиях, посвященных проблеме ишемических заболеваний, получили методы, основанные на ангиогенезе за счет имплантаций стволовых клеток в ишемизированную ткань [150, 195, 127, 112, 154, 167, 168, 169, 170]. В основном такие методы имеют терапевтический подход, не являются методами истинной хируругической коррекции. До сих пор остается открытым вопрос о получении эффективного материала для протезирования и шунтирования артерий малого и среднего калибра [164, 177, 199]. Научно-практические разработки в этом направлении, освященные в литературе, осуществляются несколькими путями: покрытием внутренней поверхности основы культуройэндотелиальных клеток [2, 162, 203, 204], засеванием биополимерных каркасов культурой гладкомышечных клеток [162]- выращиванием протезов в организме, требующем ангиопластики, [124, 125]. Данные методы вызывают значительный научный интерес и требуют дальнейшего детального изучения. При этом остаются недостаточно изученными механизмы! формирования сосудистых аутопротезов in vivo, влияние регуляторных систем организма на этот процесс: В настоящее время огромный интерес ученых вызывают вопросы регуляции? на кле- / точном уровне, межклеточных взаимодействий^ регуляции) роста, дифференци-ровки и регенерации клеток с помощью факторов роста, которые вырабатыва-, ютсяспецифическими регуляторными клеткамиИсследована и описана данная функция у макрофагов, тучных и иммунокомпетентных клеток [109, 100-. 112, 115, 123, 136, 137] Эти разработки послужили теоретическим обоснованием созданию современных протезов для ангиопластики. ,.

Таким образом, имеющиеся недостатки уже разработанных методов послужили основанием для дальнейших исследований в этой области. Остается нерешеннымвопрос о подходящем материале для пластики артерий, малого и среднего калибра, а современные наработки в области использования стволовых клеток не являются путем решения хирургических проблемтребующих ангиопластики, а имеют терапевтический подход. Остаются недостаточно исследованными механизмы формирования сосудистых соединительнотканных аутопротезов и участие регуляторных систем организма в этом^п^.

Все вышеизложенное послужило основанием для" определения цели иосновных задач настоящего исследования.

Цель: получение искусственных сосудистых аутопротезов для реконструкций сосудов малого калибра.

Задачи исследования:

1) разработать метод получения сосудистых протезов на разных видах экспериментальных животных;

2) дать сравнительную характеристику аутопротезов для ангиопластики, полученных в организме крыс и кроликов;

3) дать сравнительную характеристику аутопротезов, полученных при' подкожном и внутрибрюшинном введении миллипоровых и полихлорвиниловых трубчатых имплантатов-:

4) дать характеристику механизмов регуляции в формировании сосудистых аутопротезов;

5) разработать метод ангиопластики сосудов, малого калибра, на экспериментальных животных, с использованием полученных аутопротезов;

6) оценить эффективность метода с помощью инструментальных и морфологических исследований.

Научная новизна;

Показана на экспериментальных животных возможность создания: соединительнотканных аутопротезов и использования их для пластики артерий малого и среднего калибраПроведена комплексная оценка эффективности полученных протезов при ангиопластике. Впервые продемонстрировано, что соединительнотканный протез, имплантируемый в артерии разного типа, обеспечивает в оперированном сосуде кровоток и служит основой для формирования элементов сосуда даннрго типа: Определены физические и биологические свойства протезов (прочность, гистологическое строение, состав клеточного' компонента и межклеточного вещества). Определено значение некоторых механизмов регуляции процесса формирования соединительнотканных аутопротезов in vivo.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Показано, что в условиях пластики полученными аутопротезами артерий малого и среднего калибра происходит дифференцировка соединительнотканных элементов и формирование структур сосудистой стенки — интимы, предшественников гладкомышечных клеток, медии и зрелых эластических структур внутренних и наружных эластических мембранДано научное обоснование возможности использования данных сосудистых аутопротезов в качестве пластического материала при — формировании артериовенозных фистул для гемодиализ-ных больных, в дальнейшем — для повторных аорто-коронарных шунтированийи вообще реконструкций артерий малого и среднего калибра.

Внедрение результатов исследования.

Результаты исследования используются при обучении студентов в курсе «Общая хирургия» на кафедре общей хирургии УГМА (зав. каф. д.м.н., профессор Ходаков В.В.).

Отработанные в процессе выполнения диссертации методические приемы используются в выполняемых в рамках НИР диссертационных и студенческих работах на кафедре общей хирургии УГМА (зав. каф. д.м.н., профессор Ходаков В.В.), а также внедрены в научные исследования, выполняемые на кафедре физиологии человека и животных УРГУ (зав. каф. д.м.н., профессор Юшков БЛ7.) и лаборатории Интститута иммунологии и физиологии УО РАН (зав. д.м.н, академик РАН, профессор Черешнев В. А.).

Получен патент на изобретение № 2 260 379 от 20.09.2005 г. Юшков Б. Г., Ходаков В. В., Крохин Д. И. «Способ получения аутопротезов для пластики органов и тканей».

Апробация работы и публикации.

По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на заседании Областного хирургического общества (Екатеринбург, 2004), на XXI международном съезде физиологов им. И. П. Павлова (Екатеринбург, 2004), на международном симпозиуме «Молекулярные механизмы регуляции функции клетки» (Тюмень-Тобольск, 2005), на IX итоговой научно-практической конференции молодых ученых с международным участием «Молодежь и медицинская наука в XXI веке» (Киров, 2005), на X Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2005), на XI межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2005).

ВЫВОДЫ.

1. В эксперименте на крысах и кроликах разработана методика и доказана возможность получения соединительнотканных протезов для ангиопластики, формирующихся в течение 5 недель при подкожном или внутрибрю-шинном введении полихлорвиниловых и целлюлозных трубчатых основ.

2. При гистологическом и морфометрическом исследовании соединительнотканных протезов у разных видов лабораторных животных^ полученных при подкожном введении полихлорвиниловой основы, определена динамика их формирования. Стенка аутопротезов у крыс и кроликов представлена рыхлой волокнистой соединительной тканью с воспалительной реакцией, при этом процесс формирования протезов проходит одинаковые этапы. С увеличением срока эксперимента уменьшается толщина стенки протеза, уменьшается количество элементов воспаления и фибробластов, нарастает число зрелых форм— фиброцитов, происходит созревание соединительной ткани с увеличением упорядоченно расположенных коллагеновых и эластических волокон. Однако у крыс процесс формирования аутопротезов протекает существенно быстрее.

3. При сравнительном анализе формирования структурных элементов стенки аутопротезов, полученных подкожно на целлюлозной и полихлорвиниловой основах, установлены общие закономерности. При этом аутопротезы на целлюлозной основе характеризуются более медленной динамикой созревания, более выраженной воспалительной реакцией, чем в протезах, полученных на полихлорвиниловых имплантатах, что делает последние более эффективными для формирования протезов для ангиопластики.

При исследовании соединительнотканных протезов, полученных при внутрибрюшинном введении трубчатых имплантатов, выявлены аналогичные этапы формирования структур, образующих их стенку. При этом длительно сохраняющийся отек стенки протеза, снижение темпов созревания соединительной ткани и сохранение воспалительной реакции в поздние сроки свидетельствовало о том, что внутрибрюшинное формирование соединительнотканных протезов характеризуется замедленной динамикойчто позволило считать подкожное моделирование аутопротезов для ангиопластики более ' предпочтительным-.

4: Среди различных механизмов регуляции, влияющих на процесс формирования сосудистого аутопротеза у крыс, определена зависимость темпов созревания протезов от функционального состояния макрофагов. Установлено, что подавление функции макрофагов каррагинаном тормозило формирование соединительнотканных аутопротезов, в то время как ее стимуляция та-меритом ускоряла этот процесс.

5. На основании морфологического исследования определено, что 5 не- ' ¦ дель — оптимальныйсрокдля формирования и использования протезов для ангиопластики, учитывая достаточное количество клеточного материала для его дальнейшей дифференцировки в новыхгемодинамических условиях артериального сосуда, минимально выраженную воспалительнуюреакцию, достаточные прочностные свойства протеза: Разработана методика ангиопластики 5-недельными аутопротезами сонной артерии крыс, бедренной артерии кролика.

6. На основании результатов ультразвукового дуплексного сканированияи рентгеноконтрастной артериографии доказана состоятельность анастомоза и проходимость аутопротеза у кроликов в течение 6 месяцев наблюдения. При гистологическом исследовании установлено, что при протезировании аутопротезом бедренной артерии кролика и сонной артерии крысы, через 6 месяцев эксперимента аутопротезы проходимы, в гемодинамических условиях артериимышечно-эластического типа происходит дифференцировка структурных элементов стенки протеза в виде четкого разделения на слои, соответствующие оболочкам артерии, формирования эластических мембран, эндотелиальных клеток, гладкомышечных элементов медии, васкуляризации наружной оболочки.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

В настоящее время значительное распространение в клинической практике и научных исследованиях, посвященных проблеме ишемических заболеваний, получили методы, основанные на ангиогенезе за счет имплантаций стволовых клеток в ишемизированную ткань (К. Hirata, 2002; Н. F. Tse, 2003; J. Chen, 2003; A. Al-Khaldi, 2003; Н. Kamihata, 2002). В основном такие методы имеют терапевтический подход, не являясь методами истинной хируруги-ческой коррекции. До сих пор остается открытым вопрос о получении эффективного материала для протезирования и шунтирования артерий малого и среднего калибра (Miller J. Н., 1984; Rankin J. S., 1986; Weinsehelbaum E. E., 1997).

Технологии, связанные с использованием стволовых клеток, для решения данной проблемы встречаются в единичных исследованиях. Одним из новых и перспективных подходов является выращивание аутопротезов необходимой длины и диаметра в организме хозяина (Campbell J. Н., 1999; Efendy J. L., 2000). В его основе лежит развитие воспалительной реакции (Маянский Д. Н., 1991; Маянский Д. Н., Пикуза О. И., 1993). Данные методы, вызывают значительный научный интерес и требуют, дальнейшего детального изучения. Остаются недостаточно исследованными механизмы формирования сосудистых соединительнотканных аутопротезов и участие регуляторных систем организма в этом процессе.

Использование стволовых клеток для получения новообразованных сосудов подвигло нас к созданию научной гипотезы о возможном применении таких технологий в хирургической практике. В этой связи целью настоящего исследования явилось получение сосудистых аутопротезов для пластики сосудов малого калибра.

Первоочередная задача исследования — разработка метода получения сосудистых протезов на разных видах экспериментальных животных. Лабораторным животным (крысам и кроликам) подкожно имплантировали: трубки из полихлорвинила или целлюлозы, служившие для формирования соединительнотканного протеза. В дополнительной серии эксперимента проводили внутрибрю-шинное введение целлюлозных трубчатых имплантатов. Извлечение имплантатов проводилось через 1, 2, 3, 4, 5, 6 недель. Уже к 2 неделям вокруг имплантатов наблюдали сформировавшиеся соединительнотканные капсулы, которыесвободно снимались с основы, сохраняя форму трубки. При макроскопической оценке они имели различную толщину и плотность, на разрезе внутренняя по- ! верхность протезов гладкая, без каких-либо утолщений и разрывов. Основа (полихлорвиниловая или целлюлозная трубка) удалялась, полученная соединительнотканная трубка-ангиоаутопротез подвергалась стандартной гистологической обработке для проведения микроскопической оценки- '.

В • проведенных нами экспериментах показана возможность образования на вшитой под кожу и внутрибрюшинно трубчатой основе соединительнотканных протезов. Последующие морфологические и морфометрические исследования f полученных протезов позволили определить структуру их стенки, этапы формирования, особенности их образования в различных условиях эксперимента.

Формирование аутопротезов для-ангиопластики, полученных при подкожном введении полихлорвиниловой основы, характеризовалось определенной динамикой. В соединительнотканных 2-недельных протезах наблюдалось преобладание клеточных элементов, с межклеточным веществом, что расценено как активная воспалительная реакция. на введенный имплантат. Стенка аутопротезов имела четкое разделение на внутренний, средний и наружный слои. Поздние сроки эксперимента характеризовались существенным снижением числа элементов воспаления, более упорядоченной морфоструктурной организацией в стенке протезов, таких как увеличение волокнистых структур, упорядоченное циркулярное и продольное их расположение.

Таким образом, проведенные исследования позволили предположить, что пятая неделя — оптимальный срок для использования протезов для ангиопластики, учитывая достаточное количество клеточного материала для его дальнейшей дифференцировки в уже изменившихся, новых условиях артериального сосудаминимально выраженную воспалительную реакцию. Достаточно развит в этих сроках и коллагеновый матрикс, что необходимо для прочностных свойств протеза.

Следующей задачей явилась сравнительная оценка динамики формирования аутопротезов у разных видовлабораторных животныхВ результате сравнительного гистологического и морфометрического анализа структур стенки аутопротезов у крыс и кроликов обнаружено, что процесс их формирования проходит одинаковые этапы. С увеличением: сроков эксперимента уменьшается толщина стенки протеза, уменьшается количество клеток на единицу площади за счет снижения числа элементов воспаления, уменьшения клеток фибробластического ряда, нарастает число зрелых форм — фиброцитов, — происходит созревание соединительной тканис образованием волокнистых, структур, ориентированных продольно. Однако с учетом морфометрических ' данных установлено, что у кроликов дольше сохраняются признаки воспаления^ замедлены тёмпьг созревания соединительной ткани, у крыс процесс: формирования аутопротез9 В протекает существенно быстрее.

Использование разных материалов при имплантации под кожу как основы для формирования соединительнотканных протезов (на примере: целлюлозы и полихлорвинила) показало, что имеются общие закономерности формирования структурных элементов образованных соединительнотканных капсул-протезов и различия по темпам созревания соединительной ткани и интенсивности воспалительной реакции. Приморфологическом и морфометри-ческом исследований аутопротезов, полученных при подкожном введении целлюлозных имплантатов выявлено, что при формировании аутопротезов имеетсяопределенная динамика, подобная полученной в эксперименте с, использованием ПХВ' имплантатов. С увеличением срока зрелости протезауменьшается толщина его стенки, в ее структуре происходит уменьшение клеточности за счет снижения числа элементов воспаления, фибробластов, 83 увеличивается количество зрелых фиброцитов и упорядоченных коллагено-вых и эластических волокон.

Для сравнительного анализа структурных элементов стенки аутопротезов, полученных на ПХВ и целлюлозной основах, проводилось сопоставление показателей протеза, зафиксированных на оптимальном сроке для его формирования — 5 недель эксперимента. При анализе морфометрических показателей 5-недельных протезов на основе ПХВ и целлюлозных имплантатов выявлен ряд особенностей. Аутопротезы на целлюлозной основе характеризуются большей толщиной стенки, в структуре которой более выражен клеточный компонент за счет фибробластов, более выражена воспалительная реакция- .чем в протезах, полученных на ПХВ имплантатах. Полученные данные позволили считать, что формирование аутопротезов при подкожном введении целлюлозных трубчатых имплантатов у крыс отличается более замедленной v динамикой по сравнению с ПХВ основами, что делает последние более привлекательными для формирования аутопротезов.

В проведенных экспериментах наряду с подкожным введением целлюлозных имплантатов* крысам проводилось и внутрибрюшинное введение основы с целью создания соединительнотканных протезов для ангиопластики. При исследовании-.соединительнотканных протезов,.полученных при внутри-брюшинном введении трубчатых имплантатов, выявлены аналогичные этапы формирования структур, образующих их стенку. С увеличением зрелости протеза увеличивается количество волокнистых структур, нарастает упорядоченное их расположение, уменьшается плотность клеточного компонента соединительной ткани его стенки. Динамика внутрибрюшинного формирования сосудистых аутопротезов имела ряд особенностей при морфологическом и морфометрическом анализе. С увеличением срока эксперимента не выявлено динамического уменьшения толщины стенки протеза за счет сохраняющегося отека, уменьшение фибробластов в ее структуре не сопровождалось увеличением числа зрелых фиброцитов, в более поздние сроки происходило снижение интенсивности воспалительной лимфоидной реакции по сравнению с подкожной имплантацией. Полученные данные свидетельствуют о том, что внутрибрюшинное формирование соединительнотканных протезов характеризуется более медленной динамикой, что позволяет считать подкожное моделирование аутопротезов для ангиопластики более предпочтительным.

Моделирование сосудистого протеза, проведенное нами в эксперименте, основано на привлечении и дифференцировке стволовых клеток соединительной ткани. В настоящее время чрезвычайно актуально изучение вопросов межклеточных взаимодействий, регуляции роста, дифференцировки и регенерации клеток с помощью факторов роста, которые вырабатываются специфическими регуляторными клетками. Ведущую роль в регуляции роста соматических клеток организма играют макрофаги, тучные и иммунокомпетентные. клетки (Бабаева А. Г., 1990; Маянский Д. I I., 1991; Маянский Д. II., Пикуза О. И., 1993; Донцов В. И., 1998; Шехтер А. Б-, Серов ВВ-, 1991; Черешнев В: А., { Юшков Б. Г., 2002; Cotran R. S., 1999).

Механизмы формирования: сосудистьк аутопротезов остаются недостаточ- ' • но изученными. При гистологическом исследовании в стенке протеза обнаружено значительное количество клеточных элементов, которое уменьшается и претерпевает качественные изменения в поздние сроки эксперимента. Среди клеток инфильтрата в стенке протеза выявляются? лимфоциты и макрофаги. В этой связи нам представлялось актуальным исследовать влияние функционального состояния макрофагов на динами^ формирования сосудистых аутопротезов.

В результате проведенного исследованиясреди различных механизмов регуляции, влияющих на процесс формирования сосудистого аутопротеза, показана важная роль системы фагоцитирующих мононуклеаров. По нашим данным, подавление функции макрофагов каррагинаном тормозило формирование соединительнотканных аутопротезов, в то время как ее стимуляция та-меритом ускоряла этот процесс. Следовательно, процесс формирования сосудистых аутопротезов зависит от функционального состояния макрофагов. Исходя из этого можно полагать, что темпы созревания аутопротезов для ангиопластики могут. модулироваться путем направленной фармакологической коррекции активности системы фагоцитирующих мононуклеаров организма.

Следующей важной задачей для осуществления поставленной цели явилась разработка метода ангиопластики на сосудах малого калибра на экспериментальных животных, с использованием полученных аутопротезов. С целью оценки возможности использования полученных протезов дляпластики сосудов 5-недельные. аутопротезы вшивали в рассеченную общую сонную артерию 10 крыс, из организма, которых они были извлечены через 6 месяцев после операции. Подобным образом проводили ангиопластику 5-недельными протезами резецированной бедренной артерии у 10 кроликов, извлеченными через 3 и 6 месяцев эксперимента. После проведенных операций состояние: лабораторных животных оставалось удовлетворительнымпризнаки ишеми-ческих расстройств отсутствовали на всех сроках наблюдения.

Особыйинтерес в нашей работе представляла оценка эффективности метода ангиопластики полученными в эксперименте аутопротезами с помощью инструментальных, и морфологических исследований. У крыс инстру- -ментальная оценка их проходимости не проводилась, эффективность протезирования оценивали тремя способами:

1) отсутствие церебральных нарушений свидетельствовало о проходимости протезапоскольку последние проявляются у крыс при закупорке сонных артерий- ,.

2) извлечение протезов начинали со стороны дистального конца анастомоза, и наличие кровотечения указывало на проходимость имплантата;

3) исследование гистологических препаратов.

У кроликов через 6 месяцев после ангиопластики бедренной артерии соединительнотканными? аутопротезами проводили оценку эффективности кровотока с использованием инструментальных методов исследования, а в последующем — гистологический анализ извлеченных аутопротезов и участков протезированной артерии.

По данным проведенного дуплексного исследования протезированной бедренной артерии экспериментального животного, выявлен активный артериальный кровоток, соответствующий нормальному по всем показателям исследованиястенка протеза и его просвет аналогичны нормальным интактным бедренным артериям животного через 6 месяцев после аутопротезирования.

По результатам проведенной рентгеноконтрастной ангиографии артерии экспериментального животного, установлен активный артериальный кровоток через протезированный участок сосуда и воспринимающих дистально лежащих артерий, соответствующий нормальному кровотокустенка протеза и его просвет аналогичны нормальным интактным бедренным артериям животного через 6 месяцев после аутопротезирования.

Таким образом, результаты проведенных инструментальных исследований кровотока (ультразвуковое дуплексное сканирование, рентгеноконтраст-ная артериография) свидетельствуют о состоятельности анастомоза и проходимости аутопротеза у всех экспериментальных животных в течение 6 месяцев наблюдения.

В результате проведенного гистологического исследования установлено, что при протезировании аутопротезом бедренной артерии кролика, относящейся к артерии мышечно-эластического типа, через 6 месяцев экспери- • мента у животных имплантат является проходимым, происходит дифферен-цировка структурных элементов его стенки! Наблюдается образование и упорядоченное расположение эластических волокон, формирование эластических мембран, определяется васкуляризация слоев наружной оболочки, имеется четкая дифференцировка стенки протеза на слои, обнаруживаются эндоте-лиоподобные клетки и миобласты.

С целью морфологической оценки динамики формирования структурных элементов стенки аутопротезов в гемодинамических условиях протезированной артерии группе животных проводилось оперативное извлечение и последующее гистологическое исследование 3-месячных аутопротезов и сегментов бедренной артерии. По данным гистологического исследования протезированных участков бедренных артерий кроликов, являющихся у этих животных артериями мышечно-эластического типа, зафиксировано формирование основных структур сосудов данного типа уже через 3 месяца после имплантации соединительнотканного протеза. На гистопрепаратах определяются формирующиеся эластические волокна и мембраны, просвет артерий проходим, нет четкой дифференцировки сосудистой стенки на слои.

У крыс в сроке 6 месяцев после имплантации соединительнотканных аутопротезов обнаруживается более высокая степень дифференцировки последних в сосуды того типа, в который были имплантированы. Кроме развитых эластических мембран и довольно четкой дифференцировкой на слои, обнаруживаются формирующийся эндотелий, а также скопления миобластов, что говорит о формировании гладкомышечных клеток.

Таким образом, в результате проведенного гистологического исследования показана возможность использования соединительнотканных аутопротезов в качестве материала для ангиопластики артерий мышечно-эластического типа. При гистологическом исследовании протеза у крыс и кроликов на 6 месяце наблюдения установлено, что при протезировании ау- ' топротезом бедренной артерии кролика и сонной артерии крысы, относящихся к артерии мышечно-эластического типа, протез является проходимым, происходит дифференцировка структурных элементов его стенки. Наблюдается образование и упорядоченное расположение эластических волокон, формирование эластических мембран, определяется васкуляризация слоев наружной оболочки, имеется четкая дифференцировка стенки имплантата на слои, обнаруживаются эндотелиоподобные клетки. В ряде случаев наблюдается врастание ткани протеза в просвет прилегающей артерии и формирование в этом протезе структур артерии — эндотелий, внутренняя и наружная эластическая мембраны, элементы средней оболочки. У крыс в сроке 6 месяцев после имплантации соединительнотканных аутопротезов обнаруживается более высокая степень дифференцировки структурных элементов их стенки, определяются эндотелиальные клетки в интиме и гладкомышечные элементы средней оболочки.