Практическое применение ИФА

ИФА нашел широкое применение в различных областях медицины и биологии благодаря относительной простоте и высокой чувствительности метода. ИФА успешно применяется для:

• * массовой диагностики инфекционных заболеваний (выявление различных специфических антигенов или антител к ним);
• * выявления и определения уровня гормонов и лекарственных препаратов в биологических образцах;
• * определения изотипов (IgG, IgM и другие) антител против конкретного антигена;
• * выявления иммунных комплексов;
• * выявления онкомаркеров;
• * определения белков сыворотки крови (ферритин, фибронектин и др.);
• * определения общего IgE и специфических IgE антител;
• * скрининга моиоклональных антител;
• * определения цитокинов в биологических жидкостях.

Чувствительность метода ИФА пришел на смену широко используемым ранее в клинической практике методам агглютинации, преципитации и РИА. По сравнению с вышеназванными методами, ИФА менее трудоемок и, менее продолжителен по времени, удобен для выполнения большого числа однотипных анализов.

В ИФА сочетается уникальная специфичность иммунохимического анализа с высокой чувствительностью определения ферментной метки. Чувствительность метода (под чувствительностью подразумевают минимальное выявляемое количество антител или антигена) определяется следующими факторами: аффинностью антител, предпочтительнее использование моноклональных антител; специфической активностью фермента; интенсивностью сигнала; чувствительностью учета сигнала. Различные варианты ИФА различаются по своей чувствительности. Отдельные варианты твердофазного ИФА позволяют выявлять в образце единичные молекулы. Средняя чувствительность ИФА — 10−9 — 10−12 моль.