Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Регуляция апоптоза и пролиферации клеток эпидермоидной карциномы А431 при действии эпидермального фактора роста

Диссертация: Регуляция апоптоза и пролиферации клеток эпидермоидной карциномы А431 при действии эпидермального фактора роста
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

При помощи РНК-интерференции мы однозначно доказали роль транскрипционного фактора STAT1 (но не STAT3) в проведении проапоптотического и антипролиферативного сигнала от EGF в клетках А431. STAT3 оказался не задействован ни в базальном выживании и пролиферации клеток А431, ни в проведении проапоптотического сигнала после обработки EGF, хотя он и участвовал в EGF-зависимом накоплении белков… Читать ещё >

Содержание

  • ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
  • ГЛАВА I. ВВЕДЕНИЕ
    • 1. 1. АКТУ алы юсть проблемы. ф 1.2. Цель и задачи исследования
  • ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 2. 1. Передача сигнала от рецептора EGF
      • 2. 1. 1. Факторы роста и их рецепторы
      • 2. 1. 2. Эпидермальный фактор роста (EGF), другие факторы EGF-семейства и рецепторы семейства ЕгЪВ. И
      • 2. 1. 3. Пути передачи сигнала от рецепторов факторов роста
        • 2. 1. 3. 1. Ras и МАР-киназа ERK
        • 2. 1. 3. 2. Стрессорные МАР-киназы
        • 2. 1. 3. 3. Фосфатидилинозитол-З-киназа (PI-3-киназа)
        • 2. 1. 3. 4. Фосфолииаза С у
        • 2. 1. 3. 5. Малые регуляторные ГТФазы семейства Rho
        • 2. 1. 3. 6. Нерецепторные тирозинкиназы
        • 2. 1. 3. 7. Транскрипционные факторы семейства NF>cB/ReI
        • 2. 1. 3. 8. Активные формы кислорода
        • 2. 1. 3. 9. Негативная регуляция передачи сигнала от факторов роста
      • 2. 1. 4. Активация сигнальных путей рецептором EGF
      • 2. 1. 5. Механизмы регуляции пролиферации клеток при действии факторов роста
        • 2. 1. 5. 1. Клеточный цикл
        • 2. 1. 5. 2. Методы исследования клеточного цикла
        • 2. 1. 5. 3. Сигнальные пути регуляции клеточного цикла факторами роста
      • 2. 1. 6. Механизмы регуляции апоптоза при действии факторов роста
  • И 2.1.6.1. Апоптоз
    • 2. 1. 6. 2. Методы исследования апоптоза
      • 2. 1. 6. 3. Сигнальные пути регуляции апоптоза факторами роста
      • 2. 1. 7. Рецепторы семейства Erb В в онкогенезе
    • 2. 2. Транскрипционные факторы семейства STAT
      • 2. 2. 1. Строение и активация транскрипционных факторов семейства STA Т
      • 2. 2. 2. Действие транскрипционных факторов семейства STA Т на клетку и транскрипционные мишени STAT-белков
      • 2. 2. 3. Дополнительные механизмы регуляции активности STA Т-белков
        • 2. 2. 3. 1. Активация фосфорилированием по тирозину
        • 2. 2. 3. 2. Регуляторное фосфорилирование по серину
        • 2. 2. 3. 3. Димеризация, взаимодействие с ДНК, активация транскрипции
        • 2. 2. 3. 4. 1 [егагивная регуляция STAT-нути
        • 2. 2. 3. 5. Другие механизмы регуляции
      • 2. 2. 4. Механизмы активации транскрипционных факторов семейства STA Трецептором EGF
      • 2. 2. 5. Регуляция пролиферации и апоптоза транскрипционными факторами семейства STA Т
    • 2. 3. Клетки эпидермоидной карциномы А
      • 2. 3. 1. Характеристика клеток А
      • 2. 3. 2. Действие EGF на клетки А
      • 2. 3. 3. Клональиые варианты клеток А431, устойчивые к действию EGF
      • 2. 3. 4. Другие EGF-чувствительные клеточные линии
    • 2. 4. Исследование функций белков методом РНК-интерференции
  • ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 3. 1. Культивирование клеток
    • 3. 2. плазмиды
    • 3. 3. Трансфекци и
    • 3. 4. Электрофорез и иммуноблоттинг
    • 3. 5. Антитела
    • 3. 6. Оценка жизнеспособности клеток (МТТ)
    • 3. 7. Подсчет числа клеток
    • 3. 8. Микроскопия
    • 3. 9. Анализ олигонуклеосомной фрагментации ДНК
    • 3. 10. Проточная цитометрия
  • ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ
    • 4. 1. EGF индуцирует остановку клеток A431 в фазах клеточного цикла G2 и G1 и последующую апоптотическую гибель (Бурова и ДР., 2001- Грудинким и др., 2003- Grudinkin et al., 2007)
    • 4. 2. Исследование клональных вариантов клеток А431, устойчивых к действию EGF
      • 4. 2. 1. В метках клональных вариантов 1а, 8а и 11а снижено количество и фосфорилирование транскрипционного фактора STAT1 (Грудинкин и др., 2003)
      • 4. 2. 2. Трансфекция STAT1 возвращает клеткам клонального варианта 8а чувствительность к действию EGF (Grudinkin et al., 2007)

      4.3. ингиьирование тирозинкиназы рецептора EGF и тирозинкиназ семейства src защищает клы ки А431 от действия EGF, а ингибирование МАР-киназы Р38 блокирует EGF-индуцируемый апоптоз при сохранении блоков клеточного цикла (василенко и др., 2001 б- grudinkin et al., 2007).

      4.4. Исследование роли транскрипционных факторов STAT1 и STAT3 в EGF-индуцируемом апоптозе клеток А431 методом РНК-интерференции.

      4.4.1. Направленное снижение количества STA Т1, но не STA ТЗ, значительно уменьшает чувствительность клеток А431 к проапоптотическому действию EGF (Grudinkin et al., 2007).

      4.4.2. В EGF-зависимое накопление ингибитора циклин-зависимых кииаз р2Га/' и ингибитора апоптоза Bcl-XL в клетках А431 вовлечен транскрипционный фактор STA ТЗ, по не STA Т1.

      ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ.

      5.1. Индукция апоптоза и остановка клеточного цикла в клетках А431 при действии EGF.

      5.2. Устойчивые к действию EGF клональные варианты клеток А431.

      5.3. Действие ингибиторов киназ на клетки А431.

      5.4. Уменьшение экспрессии транскрипционных факторов семейства STAT в клетках А431 методом РНК-интерференции.

      5.5. Предполагаемые механизмы индукции апоптоза при действии EGF на клетки А431.

Регуляция апоптоза и пролиферации клеток эпидермоидной карциномы А431 при действии эпидермального фактора роста (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

1.1. Актуальность проблемы.

Одной из важнейших задач молекулярной биологии и медицины является изучение механизмов опухолевой трансформации клеток. Понимание процессов, лежащих в основе превращения нормальной клетки в трансформированную, является базисом для поиска новых методов противораковой терапии. Особое значение имеют случаи, когда опухолевая клетка при трансформации приобретает особенности, позволяющие селективно индуцировать ее гибель. Примером является линия эпидермоидной карциномы человека А431, чувствительная к действию эпидермального фактора роста (epidermal growth factor, EGF).

Клеточная линия А431 — наиболее популярный объект исследования ученых, занимающихся передачей сигнала от EGF. Причиной этого служит повышенная экспрессия рецептора EGF (несколько миллионов молекул на клетку) вследствие амплификации кодирующего его гена (Haigler et al., 1978). Показано, что именно повышенное количество рецептора в сочетании с аутокринной секрецией одного из его лигандов, TGFa, является причиной бесконтрольной пролиферации клеток А431 (van de Vijver et al., 1991). В то же время, повышенная экспрессия рецептора EGF приводит к нетипичному ответу на EGF в высоких (наномолярных) концентрациях — ингибированию клеточного роста и гибели клеток. Подобное действие EGF известно для ряда линий трансформированных клеток, экспрессирующих повышенное количество рецептора EGF, и редко встречается среди других клеток. Исследование механизмов ответа клеток А431 на EGF позволит лучше понять механизмы опухолевой трансформации, пути возникновения «слабых мест» сигнальных систем опухолевых клеток, которые с необходимостью возникают в процессе трансформации и могут помочь в уничтожении опухоли, а также механизмы приобретения опухолевыми клетками вторичной устойчивости при селекции на противоопухолевом агенте.

Причины ингибирующего эффекта EGF не вполне ясны — литературе ука-. зывается на значение остановки клеточного цикла (MacLeod et al., 1986; Fan et al., 1995; Jakus, Yeudall, 1996; Ohtsubo et al., 1998) или апоптотической гибели' клеток (Gulli et al., 1996; Chin et al., 1997; Smida Rezgui et al., 2000; Anto et al., 2003; Morazzani et al., 2004) в этом процессе. He до конца выяснены и сигнальные пути, приводящие к реализации EGF-зависимого ингибирования прироста популяции клеток А431. Известно, что EGF передает сигнал за счет стимуляции тирозинкиназной активности рецептора EGF и последующей активации ряда сигнальных путей, включая ГТФазы семейств Ras и Rho, МАР-киназы, фосфо-липазу Су и различные изоформы протеинкиназы С, PI-3-киназу и PKB/Akt, ти-розинкиназы семейств Src, JAK и FAK, транскрипционные факторы STAT1, STAT3, STAT5 и NF-кВ (Schlessinger, 2000). Различные элементы передачи сигнала могут оказывать разное, подчас противоположное действие на пролиферацию или выживание клеток, и совокупный ответ определяется степенью активации сигнальных путей и их сочетанием. Имеются различные и достаточно противоречивые данные о роли этих компонентов верхних сигнальных путей в эффектах, оказываемых высокими концентрациями EGF на клетки А431. Так, есть сведения о значении киназы РКС 8 (Toyoda et al., 1998) и NF-кВ (Ohtsubo et al., 2000), однако наибольшее внимание исследователей привлекает транскрипционный фактор STAT1.

STAT-белки активируются фосфорилированием по тирозину и дополнительным фосфорилированием по серину, после чего димеризуются, транспортируются в ядро и активируют транскрипцию генов-мишеней (Bromberg, 2001). STAT1 чаще всего передает проапоптотический и антипролиферативный сигнал (Battle, Frank, 2002). Эксперименты с использованием доминантно-негативных конструкций (Bromberg et al., 1998а) и олигонуклеотидов-ловушек (Ohtsubo et al., 2000), а также корреляция между ингибирующим клеточный рост эффектом EGF и активацией STAT1 (Chin et al., 1996, 1997; Bromberg et al., 1998a) показали участие STAT1 в этом процессе. Тем не менее, использованные методы не позволили четко доказать роль STAT1, отделить его от других представителей семейства STAT и установить мишени действия STAT-белков, приводящие к реализации клеточного ответа в данной системе. Дифференциальный подход к изучению транскрипционных факторов семейства STAT важен еще и потому, что для другого представителя семейства, STAT3, доказана центральная роль в зависимой от рецептора EGF супрессии апоптоза, являющейся необходимым компонентом трансформированного фенотипа разнообразных опухолей, экспрессирующих повышенные количества рецептора EGF (Karni et al., 1999; Garcia et al., 2001; Rubin Grandis et al., 1998). Проверка универсальности данной модели и ее применимости к клеткам А431 также является неисследованной и актуальной задачей.

1.2.

Цель и задачи исследования

.

Цель работы состояла в изучении регуляции апоптоза и пролиферации клеток эпидермоидной карциномы А431 эпидермальным фактором роста.

В работе были сформулированы следующие экспериментальные задачи:

1. установить биологические эффекты, вызываемые эпидермальным фактором роста на клетки эпидермоидной карциномы А431 ;

2. идентифицировать сигнальные пути, необходимые для проявления про-апоп-тотического эффекта эпидермального фактора роста;

3. определить механизмы формирования устойчивости клеток к проапоп-тотиче-скому действию эпидермального фактора роста;

4. методом РНК-интерференции установить роль транскрипционных факторов STAT1 и STAT3 в ответе клеток А431 на действие эпидермального фактора роста;

5. исследовать участие STAT1 и STAT3 в накоплении регуляторов клеточного цикла и апоптоза при действии эпидермального фактора роста на клетки А431.

ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ВЫВОДЫ.

1. Эпидермальный фактор роста вызывает в клетках эпидермоидной карциномы А431 блоки клеточного цикла в фазах в2 и и дальнейшую апоп-тотическую гибель.

2. Ингибирование активности МАР-киназы р38 приводит к супрессии апоптоза, вызываемого эпидермальным фактором роста в клетках А431, при сохранении блоков клеточного цикла.

3. Для гибели клеток А431 в ответ на действие эпидермального фактора роста необходима активность тирозинкиназ семейства Бгс.

4. Устойчивость к действию эпидермального фактора роста в кло-нальных вариантах клеток А431 сопряжена с уменьшением количества и фос-форилирования транскрипционного фактора БТАП и утрачивается при эктопической экспрессии 8ТАТ1.

5. Транскрипционный фактор 8ТАТ1, но не 8ТАТЗ, необходим для проявления проапоптотического действия эпидермального фактора роста на клетки А431.

6. В накоплении ингибитора циклин-зависимых киназ р21таП и ингибитора апоптоза Вс1-Хь при действии эпидермального фактора роста в клетках А431 участвует транскрипционный фактор 8ТАТЗ.

БЛАГОДАРНОСТИ.

Автор выражает глубокую признательность своему научному руководителю Николаю Николаевичу Никольскому, коллегам и друзьям по работе, жене Ане Нелюдовой и своей маме, которая в течение многих лет стимулировала работу над диссертацией. Автор благодарит А. Б. Сорокина, Т. В. Поспелову, докторов Грина, Дэвис, Ларнера, Тернера и Хирано за любезно предоставленные клеточные линии, антитела и ДНК-конструкции.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. К. П. Василенко, П. С. Грудинкин, A.M. Арнаутов, Е. Б. Бурова, Н. Н. Никольский. Динамика взаимодействия транскрипционного фактора STAT1 с интернализованным рецептором EGF и кариоферинами б в ответ на стимуляцию клеток эпидермальным фактором роста. Цитология. 2001. 43(2). Стр. 204−211.

2. Е. Б. Бурова, П. С. Грудинкин, A.A. Бардин, И. А. Гамалей, H.H. Никольский. НгОг-индуцируемая активация транскрипционных факторов STAT1 и STAT3: роль рецептора EGF и тирозинкиназы JAK2. Цитология. 2001, 43(12). Стр. 1153−1161.

3. П. С. Грудинкин, В. В. Багаева, H.H. Никольский. EGF-индуцируемая передача сигнала в клонах клеток эпидермоидной карциномы линии А431. Цитология. 2003.45(2). Стр. 158−161.

4. P. S. Grudinkin, V.V. Zenin, A.V. Kropotov, V.N. Dorosh, N.N. Nikolsky. EGF-induced apoptosis in A431 cells is dependent on STAT1, but not on STAT3. Eur. J. Cell Biol. 2007. 86(10):591−603.

Тезисы сообщений на конференциях.

5. A.M. Арнаутов, П. С. Грудинкин, Н. Н. Никольский. Получение и характеристика антител к различным участкам кариоферина альфа. XIII Всероссийский симпозиум «Структура и функции клеточного ядра». Цитология. 2000. 42(3): 259.

6. К. П. Василенко, A.M. Арнаутов, П. С. Грудинкин, Е. Б. Бурова, Н. Н. Никольский. XIII Всероссийский симпозиум «Структура и функции клеточного ядра», 19−21. EGF-зависимое образование комплексов фосфорилиро-ванного STAT1 с кариоферином альфа. Цитология. 2000. 42(3). Стр. 269−270.

7. П. С. Грудинкин, В. В. Багаева, Н. Н. Никольский. Морфологические особенности ядер апоптотических клеток А431. XIV Всероссийский симпозиум «Структура и функции клеточного ядра». Цитология. 2002. 44 (9). Стр. 872−873.

8. П. С. Грудинкин, Н. Н. Никольский. Подавление экспрессии транскрипционных факторов семейства STAT в клетках А431 при помощи малых интерферирующих РНК. XV Всероссийское совещание «Структура и функции клеточного ядра». Цитология. 2005. 47(9). Стр. 806.

9. П. С. Грудинкин, Н. Н. Никольский. Различная роль транскрипционных факторов STAT1 и STAT3 при стимуляции клеток А431 эпидермальным фактором роста. Всероссийский симпозиум «Биология клетки в культуре». Цитология. 2006.48(9). Стр. 760.

ГЛАВА 6.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В настоящей работе показано, что EGF вызывает в клетках А431 как блоки клеточного цикла в фазах G2 и G1, так и апоптоз, причем индукция апоптоза, сопровождающаяся откреплением клеток от субстрата, оказывается определяющей для ингибирующего влияния EGF. Мы показали необходимость тиро-зинкиназной активности рецептора EGF и нерецепторных тирозинкиназ семейства Src (известных как активаторы транскрипционных факторов семейства STAT при действии EGF) для проявления проапоптотического и антипролифе-ративного эффекта EGF. Активность МАР-киназы р38 оказалась важна для EGF-зависимой стимуляции апоптоза клеток А431, но не для индукции блоков клеточного цикла при действии EGF. Анализ клональных вариантов клеток А431, устойчивых к EGF, показал, что механизмом приобретения клетками устойчивости к действию EGF является снижение экспрессии STAT1. Трансфек-ция функционально-активного STAT1 возвращала клеткам чувствительность к EGF.

При помощи РНК-интерференции мы однозначно доказали роль транскрипционного фактора STAT1 (но не STAT3) в проведении проапоптотического и антипролиферативного сигнала от EGF в клетках А431. STAT3 оказался не задействован ни в базальном выживании и пролиферации клеток А431, ни в проведении проапоптотического сигнала после обработки EGF, хотя он и участвовал в EGF-зависимом накоплении белков с антиапоптотической и антипро-лиферативной функцией, Bcl-XL и p21wafl, а также в разборке межклеточных контактов.

Полученные результаты закладывают основу для дальнейшего изучения молекулярных механизмов проапоптотического действия EGF при трансформации клеток, вызванной повышенной экспрессией рецептора EGF. Данные по механизмам индукции апоптоза могут быть полезны в разработке методов противоопухолевой терапии, а анализ причин устойчивости клональных вариантов позволяет прогнозировать возможные осложнения.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Е. Б, Гончар И.В, Никольский Н. Н. 2003. Активация транскрипционных факторов STAT1 и STAT3 при окислительном стрессе в клетках А431 включает Sre-зависимую трансактивацию рецептора EGF. Цитология. 45(5): 466−477.
  2. Е. Б, Грудинкин П. С, Бардин А. А, Гамалей И. А, Никольский Н. Н. 2001. НгОг-индуцируемая активация транскрипционных факторов STAT1 и STAT3: роль рецептора EGF и тирозинкиназы JAK2. Цитология 43 (12): 11 531 161.
  3. Е.Ю. 1999. Анализ методом проточной цитофлуориметрии лим-фобластоидных линий человека в процессе индуцированного апоптоза. Выпускная квалификационная работа бакалавра. Научный руководитель Зенин В. В. Санкт-Петербург, СПбГУ.
  4. П.А. 2001. Механизмы активации транскрипционного фактора STAT1. Выпускная квалификационная работа бакалавра. Научный руководитель Василенко К. П. Санкт-Петербург, СПбГУ.
  5. Василенко К. П, Бутылин П. А, Арнаутов А. М, Никольский H.H. 2001а. Роль тирозинкиназы Src в активации транскрипционного фактора STAT1. Цитология. 43(11): 1031−1037.
  6. Грудинкин П. С, Багаева В. В, Никольский H.H. 2003. EGF-индуцируемая передача сигнала в клонах клеток эпидермоидной карциномы линии А431. Цитология. 45(2): 158−161.
  7. Гудкова Д. А, Сорокин А. Б. 1989. Клеточные штаммы эпидермоидной карциномы А-431 с измененной рецепцией эпидермального фактора роста. Цитология. 31 (3): 319−323.
  8. Иванов Д. Б, Филиппова М. П, Ткачук В. А. 2001. Структура и функции классических кадгеринов. Биохимия. 66(10): 1450−1464.
  9. Копнин., Б.П. 2000. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрес-соров. Биохимия. 65(1): 2−27.
  10. Н.Н., Соркин А. Д., Сорокин А. Б. Эпидермальный фактор роста. 1987. Л. «Наука». 200 с.
  11. Н.Н., Василенко К. П. 2000. STAT-путь внутриклеточной сигнализации. Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 36: 502−506.
  12. А.Д., Богданова Н. П., Сорокин А. Б., Тесленко Л. В., Никольский Н. Н. 1989. Рециклирование EGF-рецепторных комплексов. Цитология. 31 (3): 300−311.
  13. А.А. 2003. Каспазы: регуляторы апоптоза и других клеточных функций. Биохимия, 68(4): 453−466.
  14. , П.М. 2000. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью. Биохимия. 65(1): 34−47.
  15. C.L., Courtneidge S.A. 2000. Src family tyrosine kinases and growth factor signaling. Exp. Cell. Res. 254: 1−13.
  16. Adler V., Yin Z., Tew K.D., Ronai Z. 1999. Role of redox potential and reactive oxigen species in stress signaling. Oncogene. 18: 6104−6111.
  17. Agrawal S., Agarwal M. L., Chatterjee-Kishore M., Stark G. R., Chisolm G. M. 2002. Stat 1-dependent, p53-independent expression of p21wafl modulates oxysterol-induced apoptosis. Mol. Cell. Biol. 22: 1981−1992.
  18. Alberts, A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, P. Walter. Cell Communication. Chapter 15 in: Molecular Biology of the Cell. 4th edition. New York and London: Garland Publishing, 2002.
  19. Andersen P, Pedersen MW, Woetmann A, Villingshoj M, Stockhausen MT, Odum N, Poulsen HS. 2008. EGFR induces expression of IRF-1 via STAT1 and STAT3 activation leading to growth arrest of human cancer cells. Int. J. Cancer. 122: 342−349.
  20. R.J., Venkatraman M., Karunagaran D. 2003. Inhibition of NF-kB sensitizes A431 cells to epidermal growth factor-induced apoptosis, whereas itsactivation by ectopic expression of RelA confers resistance. J. Biol. Chem. 278: 25 490−25 498.
  21. Armstrong DK, Kaufmann SH, Ottaviano YL, Furuya Y, Buckley JA, Isaacs JT, Davidson NE. 1994. Epidermal growth factor-mediated apoptosis of MDA-MB-468 human breast cancer cells. Cancer Res. 54: 5280−5283.
  22. A., Dixit V.M. 1998. Death receptors: signaling and modulation. Science. 281: 1305−1308.
  23. E.A., Aguet M., Schreiber R.D. 1997. The IFNy receptor: a paradigm for cytokine signaling. Annu. Rev. Immunol. 15: 563−591.
  24. Bae Y.S., Kang S.W., Seo M.S., Baines I.C., Tekle E., Chock P.B., Rhee S.G. 1997. Epidermal growth factor (EGF)-induced generation of hydrogen peroxide. Role in EGF receptor-mediated tyrosine phosphorylation. J. Biol. Chem. 272: 217−221.
  25. B., Avril S., Coqueret O. 2003. Opposite regulation of myc and p21wafl transcription by STAT3 proteins. J. Biol. Chem. 278: 2990−2996.
  26. Battle, T.E., Frank, D.A. 2002. The role of STATs in apoptosis. Curr. Mol. Med. 2:381−92.
  27. L.A., Gullick W.J. 2005. The epidermal growth factor receptor family. Endocr. Relat. Cancer. 12. Suppl. 1: S 17−27.
  28. Beguinot, L., Lyall, R.M., Willingham, M.C., Pastan, I. 1984. Down-regulation of the epidermal growth factor receptor in KB cells is due to receptor internalization and subsequent degradation in lysosomes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 81: 23 842 388.
  29. M. A., Shimizu N. 1985. Variant of A431 cells isolated by ricin A-conjugated monoclonal antibody directed to EGF receptor: phosphorylation of EGF receptor and phosphatidylinositol. Somat. Cell. Mol. Genet. 11: 579−591.
  30. F., Gasean H., Coqueret O. 2001. Cyclin D1 represses STAT3 activation through a Cdk4-independent mechanism. J. Biol. Chem. 276: 1 684 016 847.
  31. Biscardi J.S., Maa M.C., Tice D.A., Cox M.E., Leu T.H., Parsons S.J. 1999. c-Src-mediated phosphorylation of the epidermal growth factor receptor on Tyr845 and Tyr 1101 is associated with modulation of receptor function. J. Biol. Chem. 274: 8335−8343.
  32. A.L., Hall A. 2000. Rho GTPases and their effector proteins. Biochem. J. 348:241−255.
  33. M.V. 2007. Mitotic arrest and cell fate: why and how mitotic inhibition of transcription drives mutually exclusive events. Cell Cycle. 6: 70−74.
  34. C. 2005. ADAMs: key components in EGFR signalling and development. Nature Rev. Mol. Cell. Biol. 6: 32−43.
  35. Bromberg J. F., Fan Z., Brown C., Mendelsohn J., Darnell J. E. Jr. 1998a. Epidermal growth factor-induced growth inhibition requires Statl activation. Cell Growth Differ. 9: 505−512.
  36. Bromberg J.F., Horvath C.M., Besser D., Lathem W.W., Darnell J.E. Jr. 1998b. Stat3 activation is required for cellular transformation by v-src. Mol. Cell. Biol. 18: 2553−2558.
  37. Bromberg J.F., Wrzeszczynska M.H., Devgan G., Zhao Y., Pestell R.G., Al-banese C., Darnell J.E. Jr. 1999. STAT3 as an oncogene. Cell. 98: 295−303.
  38. Bromberg JF, Horvath CM, Wen Z, Schreiber RD, Darnell JE, Jr. 1996. Transcriptionally active Statl is required for the antiproliferative effects of both IFN-a and IFN-y. Proc. Natl. Acad. Sci. USA-93: 7673−7678.
  39. , J.F. 2001. Activation of STAT proteins and growth control. BioEssays. 23: 161−169.
  40. T.R., Bernards R., Agami R. 2002. A system for stable expression of short interfering RNAs in mammalian cells. Science. 296: 550−553.
  41. T. 2005. RNAi. Crit. Care. Med. 33: S441-S443.
  42. J. E., Kudlow J. E., Lazar C. S., Gill G. N. 1982. Altered epidermal growth factor (EGF)-stimulated protein kinase activity in variant A431 cells with altered growth responses to EGF. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 79: 2574−2578.
  43. Calin GA, Croce CM. 2006. MicroRNA signatures in human cancers. Nat. Rev. Cancer. 6:857−866.
  44. Cao L., Yao Y., Lee V., Kiani C., Spaner D., Lin Z., Zhang Y., Adams M. E., Yang B. B. 2000. Epidermal growth factor induces cell cycle arrest and apoptosis of squamous carcinoma cells through reduction of cell adhesion. J. Cell. Biochem. 77: 569−583.
  45. G. 2003. Nuclear localization and possible functions of receptor tyrosine kinases. Curr. Opin. Cell. Biol. 15: 143−148.
  46. Carpenter G., Ji Q. 1999. Phospholipase C-y as a signal-transducing element. Exp. Cell Res. 253: 15−24.
  47. N., Martin P. M., Cochet C., Berthois Y. 1996. Regulation of p42 mitogen-activated-protein kinase activity by protein phosphatase 2A under conditions of growth inhibition by epidermal growth factor in A431 cells. Eur. J. Biochem. 235: 97−102.
  48. N., Martin P. M., Pages G., Cochet C., Afdel K., Berthois Y. 1994. Relationship between the MAP kinase activity and the dual effect of EGF on A431 cell proliferation. Biochem. Biophys. Res. Commun. 203: 984−990.
  49. Chang E.H., Ridge J., Black R., Zou Z.Q., Masnyk T., Noguchi P., Harford J.B. 1987. Interferon-gamma induces altered oncogene expression and terminal differentiation in A431 cells. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 186: 319−326.
  50. Chatterjee-Kishore M., Wright K. L., Ting J. P., Stark G. R. 2000. How Statl mediates constitutive gene expression: a complex of unphosphorylated Statl and IRF1 supports transcription of the LMP2 gene. EMBO J. 19: 4111−4122.
  51. Chawla-Sarkar M., Linder D.J., Liu Y.-F., Williams B.R., Sen G.C., Silverman R. H, Borden E.C. 2003. Apoptosis and interferons: Role of interferon-stimulated genes as mediators of apoptosis. Apoptosis 8: 237−249.
  52. Chen J.K., Lin S.S. 1993. Stimulation or inhibition of A431 cell growth by EGF is directly correlated with receptor tyrosine kinase concentration but not with PLC y activity. Life Sci. 53: 635−642.
  53. Chen K.Y., Huang L.M., Kung H.J., Ann D.K., Shih H.M. 2004. The role of tyrosine kinase Etk/Bmx in EGF-induced apoptosis of MDA-MB-468 breast cancer cells. Oncogene. 23: 1854−1862.
  54. X., Zhao Y., Darnell J.E., Vinkemeier U., Jerusalmi D. D., Kuriyan J. 1998. Crystal structure of a tyrosine phosphorylated STAT1 dimer bound to DNA. Cell. 93: 827−839.
  55. Chin Y. E., Kitagawa M., Kuida K., Flavell R. A. and Fu X.-Y. 1997. Activation of the STAT signaling pathway can cause expression of caspase 1 and apoptosis. Mol. Cell. Biol. 17: 5328−5337.
  56. Chin Y. E., Kitagawa M., Su W.-C. S., You Z.-H., Iwamoto Y., Fu X.-Y. 1996. Cell growth arrest and induction of cyclin-dependent kinase inhibitor p21WAF,/CIP1 mediated by STAT. Science. 272: 719−722.
  57. J., Uchida E., Grammer T.C., Blenis J. 1997. STAT3 serine phosphorylation by ERK-dependent and -independent pathways negatively modulates its tyrosine phosphorylation. Mol. Cell. Biol. 17: 6508−6516.
  58. M.A., Sicinski P. 2005. Cell cycle in mouse development. Oncogene. 24:2877−2898.
  59. P. J., Kruijer W. 1995. EGF receptor deletions define a region specifically mediating STAT transcription factor activation. Biochem. Biophys. Res. Commun. 210: 74−81.
  60. S. 1962. Isolation of a mouse submaxillary gland protein acceleration incisor eruption and eyelid opening in the newborn animal. J. Biol. Chem. 237: 15 551 562.
  61. Cohen S., Levi-Montalcini R., Hamburger V. 1954. A nerve growth-stimulating factor isolated from sarcom AS 37 and 180. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 40: 1014−1018.
  62. O., Gascan H. 2000. Functional interaction of STAT3 transcription factor with the cell cycle inhibitor p21WAFl/CIPl/SDIl. J. Biol. Chem. 275: 1 879 418 800.
  63. S., Adams J.M. 2002. The Bcl-2 family: regulators of the cellular life-or-death switch. Nature Rev. Cancer. 2: 647−656.
  64. Cox A.D., Der C.J. 2003. The dark side of Ras: regulation of apoptosis. Oncogene. 22:8999−9006.
  65. Czauderna F, Santel A, Hinz M, Fechtner M, Durieux B, Fisch G, Leenders F, Arnold W, Giese K, Klippel A, Kaufmann J. 2003. Inducible shRNA expression for application in a prostate cancer mouse model. Nucleic Acids Res. 31: el27.
  66. Danielsen AJ, Maihle NJ. 2002. The EGF/ErbB receptor family and apoptosis. Growth Factors. 20: 1−15.
  67. Darnell J.E., Jr. STATs and gene regulation. 1997. Science. 277: 1630−1635.
  68. S.R., Brunet A., Greenberg M.E. 1999. Cellular survival: a play in three Akts. Genes Dev. 13(22): 2905−2927.
  69. M., Wond L., Flavell R., Thompson S. A., Wells A., Larner A. C., Johnson G. R. 1996. STAT activation by epidermal growyh factor (EGF) and am-phiregulin. J. Biol. Chem. 271: 9185−9188.
  70. Dawson J.P., Berger M.B., Lin C.C., Schlessinger J., Lemmon M.A., Ferguson K.M. 2005. Epidermal growth factor receptor dimerization and activation require ligand-induced conformational changes in the dimer interface. Mol. Cell. Biol. 25: 7734−7742.
  71. T., Kovarik P. 2000. Serine phosphorylation of STATs. Oncogene. 19: 2628−2637.
  72. I., Giordano S. 2003. Negative receptor signaling. Curr. Opin. Cell. Biol. 15: 128−135.
  73. , G.P. 2000. p2lWAFI/cipI: more than a break to the cell cycle? Biochim. Biophys. Acta. 1471: M43−56.
  74. A., Nethery D., Kern J.A. 2004. Combined inhibition of epidermal growth factor receptor and JAK/STAT pathways results in greater growth inhibition in vitro than single agent therapy. Mol. Cancer. Ther. 3: 459−463.
  75. J. 1997. Cell cycle: Routine role for Ras. Curr. Biol. 7: R2581. R260.
  76. T., Rudin C.M., Thompson C.B. 1998. Signal transduction pathways that regulate cell survival and cell death. Oncogene. 17: 3207−3213.
  77. W. 2002. Free radicals in the physiological control of cell function. Physiol Rev. 82: 47−95.
  78. Dutta J., Fan Y., Gupta N., Fan G., Gelinas C. 2006. Current insights into the regulation of programmed cell death by NF-kappaB. Oncogene. 25: 6800−68 016.
  79. P.R., Maity A. 2007. Cellular responses to EGFR inhibitors and their relevance to cancer therapy. Cancer Lett. 254: 165−177.
  80. D.M., Novina C.D., Sharp P.A. 2003. Killing the messenger: short RNAs that silence gene expression. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 4: 457−467.
  81. S.V., Reed S.I. 2000. Regulation of G1 cyclin-dependent kinases in the mammalian cell cycle. Curr. Opin. Cell. Biol. 12: 676−684.
  82. C., Littlewood T. 1998. A matter of life and cell death. Science. 281: 1317−1322.
  83. A.L., Guzhova I.V., Margulis B.A., Medvedeva N.D. 2004. Phospholipase C inhibitor, U73122, stimulates release of Hsp-70 stress protein from A431 human carcinoma cells. Cancer Cell. Int. 4, 2.
  84. A.L., Martynova M.G., Bystrova O.A., Guzhova I.V., Margulis B.A., Medvedeva N.D. 2005. The release of Hsp70 from A431 carcinoma cells is mediated by secretory-like granules. Eur. J. Cell. Biol. 85: 443−455.
  85. L., Lazebnik Y. 2000. Caspases disrupt the nuclear-cytoplasmic barrier. J.Cell. Biol. 151:951−959.
  86. Fan Z., Lu Y., Wu X., DeBlasio A., Koff A., Mendelsohn J. 1995. Prolonged induction of p21cipl/WAF,/CDK2/PCNA complex by epidermal growth factor receptor activation mediates ligand-induced A431 cell growth inhibition. J. Cell. Biol. 131: 235−242.
  87. Fan Z., Lu Y., Wu X., Mendelsohn J. 1994. Antibody-induced epidermal growth factor receptor dimerization mediates inhibition of autocrine proliferation of A431 squamous carcinoma cells. J. Biol. Chem. 269: 27 595−27 602.
  88. Fan Z., Shang B. Y., Lu Y., Chou J. L., Mendelsohn J. 1997. Reciprocal changes in p27KipI and p21Clpl in growth inhibition mediated by blockade or overstimulation of epidermal growth factor receptors. Clin. Cancer. Res. 3: 19 431 948.
  89. Fang M., Liu B., Schmidt M., Lu Y., Mendelsohn J., Fan Z. 2000. Involvement of p21Wafl in mediating inhibition of paclitaxel-induced apoptosis by epidermal growth factor in MDA-MB-468 human breast cancer cells. Anticancer Res. 20: 103 111.
  90. W.J., Johnson D.E., Williams L.T. 1993. Signalling by receptor tyrosine kinases. Annu. Rev. Biochem. 62: 453−481.
  91. J., Pollak M.N., Cairncross J.G., Buick R.N. 1985b. Amplified, overex-pressed and rearranged epidermal growth factor receptor gene in a human astrocytoma cell line. Biochem. Biophys. Res. Commun. 131: 207−215.
  92. Fire A, Xu S, Montgomery M.K., Kostas S. A, Driver S. E, Mello C.C. 1998. Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans. Nature. 391: 806−811.
  93. Fischer O. M, Hart S, Gschwind A., Ullrich A. 2003. EGFR signal transactiva-tion in cancer cells. Biochem. Soc. Transact. 31: 1203−1208.
  94. Fong W. F, Leung C. H, Lam W, Wong N. S, Cheng S.H. 2001. Epidermal growth factor induces Gadd45 (growth arrest and DNA damage inducible protein) expression in A431 cells. Biochim. Biophys. Acta. 1517: 250−256.
  95. A.J. 1992. Mammalian genes induced by radiation- activation of genes associated with growth control. Annu. Rev. Genet. 26: 505−524.
  96. Fritsche M, Mundt M, Merkle C, Jahne R, Groner B. 1998. p53 suppresses cytokine induced, Stat5 mediated activation of transcription. Mol. Cell. Endocrinol. 143:143−154.
  97. Fu X.-Y. 1992. A transcription factor with SH2 and SH3 domains is directly activated by an interferon alpha-induced cytoplasmic protein tyrosine kinase (s). Cell. 70(2):323−35.
  98. Fu X.-Y, Zhang J.J. 1993. Transcription factor p91 interact with the epidermal factor receptor and mediates activation of the c-fos gene promoter. Cell. 74: 11 351 145.
  99. Gadina M., Hilton D., Johnston J.A., Morinobu A., Lighvani A., Zhou Y.-J., Visconti R., O’Shea J.J. 2003. Signaling by Type I and II cytokine receptors: ten years after. Curr. Opin. Immunol. 13: 363−373.
  100. C., Kroemer G. 2004. Life’s smile, death’s grin: vital functions of apoptosis-executing proteins. Curr. Opin. Cell. Biol. 16: 639−646.
  101. A., Yaish P., Gilon C., Levitzki A. 1989. Tyrphostins I: synthesis and biological activity of protein tyrosine kinase inhibitors. J. Med. Chem. 32: 23 442 352.
  102. Gill, G.N., Lazar, C.S. 1981. Increased phosphotyrosine content and inhibition of proliferation in EGF-treated A431 cells. Nature. 293: 305−307.
  103. Goh K.C., Haque S.J., Williams B.R. 1999. p38 MAP kinase is required for STAT1 serine phosphorylation and transcriptional activation induced by interferons. EMBOJ. 18:5601−5608.
  104. B., Kramer I., Tatham P. 2002. Signal Transduction. Academic1. Press.
  105. K., Abbadie C. 2003. Involvement of Rel/NF-KB transcription factors in senescence. Exp. Gerontol. 38:1271−1283.
  106. Grad, J.M., Zeng, X.R., Boise, L.H. 2000. Regulation of Bcl-XL: a little bit of this and a little bit of STAT. Curr. Opin. Oncol. 12: 543−549.
  107. Green, D.R., Reed, J.C. 1998. Mitochondria and apoptosis. Science. 281: 13 091 312.
  108. R.I., Shiekhattar R. 2005. MicroRNA biogenesis and cancer. Cancer Res. 65:3509−3512.
  109. L.M., Stang E., Sorkin A., Madshus I.H. 2004. Direct interaction of Cbl with pTyr 1045 of the EGF receptor (EGFR) is required to sort the EGFR to lysosomes for degradation. Exp. Cell. Res. 300:388−395.
  110. P. S., Zenin V.V., Kropotov A.V., Dorosh V.N., Nikolsky N.N. 2007. EGF-induced apoptosis in A431 cells is dependent on STAT1, but not on STAT3. Eur. J. Cell. Biol. 86: 591−603.
  111. L.F., Palmer K.C., Chen Y.Q., Reddy K.B. 1996. Epidermal growth factor-induced apoptosis in A431 cells can be reversed by reducing the tyrosine kinase activity. Cell. Growth. Differ. 7: 173−178.
  112. Habib A.A., Hognason T., Ren J., Stefansson K., Ratan R.R. 1998. The epidermal growth factor receptor associates with and recruits phosphatidylinositol 3-kinase to the platelet-derived growth factor (3 receptor. J. Biol. Chem. 273: 68 856 891.
  113. Haigler H., Ash J. F., Singer S. J., Cohen S. 1978. Visualization by fluorescence of the binding and internalization of epidermal growth factor in human carcinoma cells A-431. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 75: 3317−3321.
  114. V.M. 1999. TUNEL assay for apoptotic cells. Methods. Mol. Biol. 115: 141−148.
  115. Heldin C.-H. 1995. Dimerization of cell surface receptors in signal transduction. Cell. 80: 213−223.
  116. R.S. 2004. Review of epidermal growth factor receptor biology. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 59: suppl., 21−26.
  117. M., Kobayashi M., Shimizu N. 1990. Reduced tyrosine phosphorylation and nonresponsiveness to EGF-mediated cytotoxicity in EGF receptor-hyperproducing UCVA-1 cells. Cell. Signal. 2: 245−252.
  118. T., Chatterjee S., Vartanian T., Ratan R.R., Ernewein K.M., Habib A.A. 2001. Epidermal growth factor receptor induced apoptosis: potentiation by inhibition of Ras signaling. FEBS Lett. 491: 9−15.
  119. T., Civenni G., Hynes N.E. 2003. The ErbB receptors and their role in cancer progression. Exp. Cell. Res. 284: 99−110.
  120. Horvai A.E., Xu L., Korzus E., Brard G., Kalafus D., Mullen T.-M., Rose D.W., Rosenfeld M.G., Glass C.K. 1997. Nuclear integration of JAK/STAT and Ras/AP-1 signaling by CBP and p300. Proc. Natl. Acad. Sci. 94: 1074−1079.
  121. Hoshino A., Saint Fleur S., Fujii H. 2006. Regulation of Statl expression by phelylalanine 172 in the coiled-coil domain. Biochem. Biophys. Res. Comm. 346: 1062−1066.
  122. S.R., Miller W.T. 2007. Receptor tyrosine kinases: mechanisms of activation and signaling. Curr. Opin. Cell Biol. 19: 117−123.
  123. S.R., Till J.H. 2000. Protein tyrosine kinase structure and function. Annu. Rev. Biochem. 69: 373−398.
  124. M. 2004. Multiple cell death pathways as regulators of tumour initiation and progression. Oncogene. 23: 2746−2756.
  125. Jain N., Zhang T., Fong S.L., Lim C.P., Cao X. 1998. Repression of Stat3 activity by activation of mitogen-activated protein kinase (MAPK). Oncogene. 17: 3157−3167.
  126. J., Yeudall W. A. 1996. Growth inhibitory concentrations of EGF induce p21WAFI/Cipl and alter cell cycle control in squamous carcinoma cells. Oncogene. 12: 2369−2376.
  127. M.B., Widmann C., Knall C., Schlesinger T.K., Gibson S., Yujiri T., Fanger G.R., Gelfand E.W., Johnson G.L. 1998. Anti-apoptotic versus proapoptotic signal transduction: checkpoints and stop signs along the road to death. Oncogene. 17: 1475−1482.
  128. A., Hidalgo M. 2005. Blockade of epidermal growth factor receptor (EGFR) activity. Crit. Rev. Oncol. Hematol. 53: 179−192.
  129. Jin F., Reynolds A.B., Hines M.D., Jensen P.J., Johnson K.R., Wheelock M.J.1999. Src induces morphological changes in A431 cells that resemble epidermal differentiation through an SH3- and Ras-independent pathway. J. Cell. Sci. 112: 29 132 924.
  130. Jo M., Stolz D.B., Esplen J.E., Dorko K., Michalopoulos G.K., Strom S.C.2000. Cross-talk between Epidermal Growth Factor Receptor and c-Met Signal Pathways in Transformed Cells. J. Biol. Chem. 275: 8806−8811.
  131. S.M., Kazlauskas A. 2000. Connecting signaling and cell cycle progression in growth factor-stimulated cells. Oncogene. 19: 5558−5567.
  132. M.R., Valentine C., Basilico C., Mansukhani A. 1998.FGF signaling activates STAT1 and p21 and inhibits the estrogen response and proliferation of MCF-7 cells. Oncogene. 16: 2647−2656.
  133. Kaplan DH, Shankaran V, Dighe AS, Stockert E, Aguet M, Old LJ, Schreiber RD. 1998. Demonstration of an interferon gamma-dependent tumor surveillance system in immunocompetent mice. Proc Natl Acad Sci USA. 95: 7556−7561.
  134. R., Jove R., Levitzki A. 1999. Inhibition of pp60c'Src reduces Bcl-XL expression and reverses the transformed phenotype of cells overexpressing EGF and HER-2 receptors. Oncogene. 18: 4654−4662.
  135. A.M., Lichtner R.B., Schirrmacher V., Khazaie K. 1996. Induction of apoptosis by EGF receptor in rat mammary adenocarcinoma cells coincides with enhanced spontaneous tumour metastasis. Oncogene. 13: 2349−58.
  136. Kawamoto T., Mendelsohn J., Le A., Sato G. H., Lazar C. S., Gill G. N. 1984. Relation of epidermal growth factor receptor concentration to growth of human epidermoid carcinoma A431 cells. J. Biol. Chem. 259: 7761−7766.
  137. S.M., Bellone C., Baldassare J.J. 2001. CDK2 nucleocytoplasmic translocation is regulated by extracellular regulated kinase (ERK). J. Biol. Chem. 276:22 404−22 409.
  138. Kerr J.F.R., Wyllie A.H., Currie A.R. 1972. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue. Br. J. Cancer. 26: 239−257.
  139. Kim G.Y., Mercer S.E., Ewton D.Z., Yan Z., Jin K., Friedman E. 2002. The stress-activated protein kinases p38 alpha and JNK1 stabilize p21c, pl by phosphorylation. J. Biol. Chem. 277: 29 792−29 802.
  140. Kim H.-H., Sierke S.L., Koland J.G. 1994. Epidermal growth factor-dependent association of phosphatidylinositol 3-kinase with the erbB3 gene product. J. Biol. Chem. 269: 24 747−24 755.
  141. Kim J.-S., He L., Lemasters J.J. 2003. Mitochondrial permeability transition: a common pathway to necrosis and apoptosis. Biochem. Biophys. Res. Commun. 304: 463−470.
  142. Kim T.K., Maniatis T. 1996. Regulation of interferon-y-activated STAT1 by the ubiquitin-proteasome pathway. Science. 273: 1717−1719.
  143. I.C., Sartorelli A.C. 1986. The relationship between epidermal growth factor receptors and the terminal differentiation of A431 carcinoma cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 140: 837−843.
  144. L., Hall A. 1999. Signaling to Rho GTPases. Exp. Cell. Res. 253: 166 179.
  145. J.D., Schreiber S., Crabtree G.R. 1998. Dimerization as a regulatory mechanism in signal transduction. Annu. Rev. Immunol. 16: 569−592.
  146. M.T., Laughlin K.K., Biscardi J.S., Boerner J.L., Parsons S.J., Silva C.M. 2003. STAT5b, a mediator of synergism between c-Src and the epidermal growth factor receptor. J. Biol. Chem. 278: 1671−1679.
  147. M., Feld F., Kruger K.D., Bahrenberg G., Roth R.A., Joost H.G., Heinrich P.C., Behrmann I., Barthel A. 2003. Akt modulates STAT3-mediated gene expression through a FKHR (FOXOla)-dependent mechanism. J. Biol. Chem. 278: 5242−5249.
  148. Krymskaya V., Hoffman R., Eszterhas A., Kane S., Ciocca V., Panettieri R.A.Jr. 1999. EGF activates ErbB-2 and stimulates phosphatidylinositol 3-kinase in human airway smooth muscle cells. Am. J. Physiol. 276 (Lung Cell. Mol. Physiol. 20): L246-L255.
  149. A., Commane M., Flickinger T.W., Horvath C.M., Stark G.R. 1997. Defective TNF-a-induced apoptosis in STATl-null cells due to low constitutive levels of caspases. Science. 278: 1630−1632.
  150. Kumar Pal S., Pegram M. 2005. Epidermal growth factor receptor and signal transduction: potential targets for anti-cancer therapy. Anticancer Drugs. 16: 483— 494.
  151. D., Stauffer D., Eftekhari S., Wilson E., Thayer M., Rotwein P. 2004. Gene disruption by regulated short interfering RNA expression, using a two-adenovirus system. Hum. Gene. Ther. 15:. 1287−1292.
  152. MacLeod C.L., Luk A., Castagnola J., Cronin M., Mendelsohn J. 1986. EGF induces cell cycle arrest of A431 human epidermoid carcinoma cells. J. Cell. Physiol. 127:175−182.
  153. Maher S.G., Romero-Weaver A.L., Scarzello A.J., Gamero A.M. 2007. Interferon: Cellular Executioner or White Knight? Curr. Med. Chem. 14: 1279−1289.
  154. L., Fussenegger M. 2004. Macrolide- and tetracycline-adjustable siRNA-mediated gene silencing in mammalian cells using polymerase II-dependent promoter derivatives. Biotechnol. Bioeng. 88: 417−425.
  155. C. 1999. How do small GTPase signal transduction pathways regulate cell cycle entry? Curr. Opin. Cell. Biol. 11: 732−736.
  156. Martinez-Gac L, Alvarez B, Garcia Z, Marques M, Arrizabalaga M, Carrera A.C. 2004. Phosphoinositide 3-kinase and Forkhead, a switch for cell division. Bio-chem. Soc. Transact. 32: 360−361.
  157. Masui H, Kawamoto T, Sato J. D, Wolf B, Sato G., Mendelsohn J. 1984. Growth inhibition of human tumor cells in athymic mice by anti-epidermal growth factor receptor monoclonal antibodies. Cancer Res. 44: 1002−1007.
  158. Matsukura S, Jones P. A, Takai D. 2003. Establishment of conditional vectors for hairpin siRNA knockdowns. Nucl. Acid Res. 31: e77.
  159. K.H. 1995. Epidermal growth factor from the mouse. Biochemistry. 24: 3783−3794.
  160. F., Manning A.M. 1999. NF-kB as a primary regulator of the stress response. Oncogene. 18: 6163- 6171.
  161. Miyagishi M, Taira K. 2002. U6 promoter-driven siRNAs with four uridine 3' overhangs efficiently suppress targeted gene expression in mammalian cells. Nat. Biotech. 19: 497−500.
  162. Mowen K. A, Tang J, Zhu W, Schurter B. T, Shuai K, Herschman H. R, David M. 2001. Arginine methylation of STAT 1 modulates IFNalpha/beta-induced transcription. Cell. 104:731−741.
  163. Nair J. S, DaFonseca C. J, Tjernberg A, Sun W, Darnell J.E. Jr, Chait B. T, Zhang J.J. 2002. Requirement of Ca2+ and CaMKII for Statl Ser-727 phosphorylation in response to IFN-gamma. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99: 5971−5976.
  164. Ndubuisi M.I., Guo G.G., Fried V.A., Etlinger J.D., Sehgal P.B. 1999. Cellular physiology of STAT3: Where’s the cytoplasmic monomer?. J. Biol. Chem. 274: 25 499−25 509.
  165. K.L., Rogers J.A., Bowman T.L., Jove R., Smithgall T.E. 1998. Activation of STAT3 by the c-Fes protein-tyrosine kinase. J. Biol. Chem. 273: 7072−7077.
  166. J., Chambers I., Taga T., Smith A. 2001. Physiological rationale for responsiveness of mouse embryonic stem cells to gpl30 cytokines. Development. 128: 2333−2339.
  167. Niu G, Bowman T, Huang M, Shivers S, Reintgen D, Daud A, Chang A, Kraker A, Jove R, Yu H. 2002. Roles of activated Src and Stat3 signaling in melanoma tumor cell growth. Oncogene. 21: 7001−10.
  168. H., Burdon T., Chambers I., Smith A. 1998. Self-renewal of pluripotent embryonic stem cells is mediated via activation of STAT3. Genes Dev. 12: 20 482 060.
  169. C.J., Zhivotovsky B. 2004. DNA damage-induced apoptosis. Oncogene. 23: 2797−2808.
  170. Nunez G., Benedict M.A., Hu Y., Inohara N. 1998. Caspases: the proteases of the apoptotic pathway. Oncogene. 17: 3237−3245.
  171. O’Shea J.J., Gadina M., Schreiber R.D. 2002. Cytokine signaling in 2002: new surprises in the Jak/Stat pathway. Cell. 109: S121-S131.
  172. Ohtsubo M., Gamou S., ShimizuN. 1998. Antisense oligonucleotide of WAF1 gene prevents EGF-induced cell-cycle arrest in A431 cells. Oncogene. 16: 797−802.
  173. M., Takanagi A., Gamou S., Shimizu N. 2000. Interruption of NFkB-STAT1 signaling mediates EGF-induced cell-cycle arrest. J. Cell. Physiol. 184: 131 137.
  174. M.A., Beuvink I., Horsch K., Daly J.M., Hynes N.E. 1999. ErbB receptor-induced activation of stat transcription factors is mediated by Src tyrosine kinases. J. Biol. Chem. 274: 17 209−17 218.
  175. M.A., Neve R.M., Lane H.A., Hynes N.E. 2000. The ErbB signaling network: receptor heterodimerization in development and cancer. EMBO J. 19: 31 593 167.
  176. Ormerod M.G., Paul F., Cheetham M., Sun X.M. 1995. Discrimination of apoptotic thymocytes by forward light scatter. Cytometry. 21: 300−304.
  177. Ozcan F., Klein P., Lemmon M.A., Lax I., Schlessinger J. 2006. On the nature of low- and high-affinity EGF receptors on living cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:5735−5740.
  178. P.J., Caudy A.A., Bernstein E., Hannon G.J., Conklin D.S. 2002. Short hairpin RNAs (shRNAs) induce sequence-specific silencing in mammalian cells. Genes Dev. 16: 948−958.
  179. C.P., Good P.D., Winer I., Engelke D.R. 2002. Effective expression of small interfering RNA in human cells. Nat. Biotech. 19: 505−508.
  180. T. 2004. Specificity in signal transduction: from phosphotyrosine-SH2 domain interactions to complex cellular systems. Cell. 116: 191−203.
  181. H., Haldosen L.A. 1998. EGF modulates expression of STAT5 in mammary epithelial cells. Exp. Cell. Res. 243: 347−358.
  182. Pfeffer L.M., Mullersman J.E., Pfeffer S.R., Murti A., Shi W., Yang C.H. 1997. STAT3 as an adapter to couple phosphatidylinositol 3-kinase to the IFNAR1 chain of the type I interferon receptor. Science. 276: 1418−1420.
  183. R. 1997. Convergence of TNFalpha and IFNgamma signalling pathways through synergistic induction of IRF-l/ISGF-2 is mediated by a composite GAS/kappaB promoter element. Nucleic. Acids. Res. 25: 4346−4354.
  184. D.R., Thompson C.B. 2005. Akt-dependent transformation: there is more to growth than just surviving. Oncogene. 24: 7435−7442
  185. K.M., Decker S.J. 1997. Cell cycle arrest mediated by the MEK/mitogen-activated protein kinase pathway. Proc. Natl. Acad. Sci. 94: 448−452.
  186. K.M., Boehm A.L., Grandis J.R. 2007. STAT-mediated EGFR signaling in cancer. J. Cell. Biochem. 102: 311−319.
  187. Ramana C.V., Grammatikakis N., Chernov M., Nguyen H., Chuan Goh K., Williams B.R.G., Stark G.R. 2000. Regulation of c-myc expression by IFN-y through Stat 1-dependent and -independent pathways. EMBO J. 19: 263−272.
  188. K., Sadzak I., Porras A., Pilz A., Nebreda A.R., Decker T., Kovarik P. 2002. p38 MAPK enhances STAT 1-dependent transcription independently of Ser-727 phosphorylation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99: 12 859−12 864.
  189. Reiss M., Brash D. E., Munoz-Antonia T., Simon J. A., Ziegler A., Vellucci V. F., Zhou Z. L. 1992. Status of the p53 tumor suppressor gene in human squamous carcinoma cell lines. Oncol. Res. 4: 349−357.
  190. Ren Y., Meng S., Mei L., Zhao Z.J., Jove R., Wu J. 2003. Roles of Gab 1 and SHP2 in paxillin tyrosine dephosphorylation and Src activation in response to epidermal growth factor. J Biol Chem. 279: 8497−8505.
  191. J., Muller J., Noguchi P., Chang E.H. 1991. Dynamics of differentiation in human epidermoid squamous carcinoma cells (A431) with continuous, long-term gamma-IFN treatment. In Vitro Cell. Dev. Biol. 27A: 417−424.
  192. M., Rieber M.S. 2005. Cyclin D1 overexpression induces epidermal growth factor-independent resistance to apoptosis linked to BCL-2 in human A431 carcinoma. Apoptosis. 11: 121−129.
  193. D.J. 2nd, Gallo R.M., Settleman J. 2007. Mutational activation of ErbB family receptor tyrosine kinases: insights into mechanisms of signal transduction and tumorigenesis. BioEssays. 29: 558−565.
  194. R.S., Horvath C.M., Matunis M.J. 2003. SUMO modification of STAT1 and its role in PIAS-mediated inhibition of gene activation. J. Biol. Chem. 278: 30 091−30 097.
  195. Roninson I.B., Broude E.V., Chang B.-D. 2001. If not apoptosis, then what? Treatment-induced senescence and mitotic catastrophe in tumor cells. Drug. Resist. Updat. 4: 303−313.
  196. M. 1988. Opposite effects of EGF on involucrin accumulation of A431 keratinocytes and a variant which is not growth-arrested by EGF. In Vitro Cell. Dev. Biol. 24: 1127−1132.
  197. M., Bernard B. A., Schmidt R., Darmon M. 1986. Incomplete epidermal differentiation of A431 epidermoid carcinoma cells. In Vitro Cell. Dev. Biol. 22: 295−300.
  198. Rubin Grandis J., Drenning S.D., Chakraborty A., Zhou M.Y., Zeng Q., Pitt A.S., Tweardy DJ. 1998. Requirement of Stat3 but not Statl activation for epidermal growth factor receptor-mediated cell growth in vitro. J. Clin. Invest. 102: 1385−1392.
  199. P., Ekman N., Sarvas K., Parker P., Alitalo K., Silvennoinen O. 1997. The Bmx tyrosine kinase induces activation of the Stat signaling pathway, which is specifically inhibited by protein kinase C5. Blood. 90: 4341−4353.
  200. , C.E. 2001. Antiviral actions of interferons. Clinical Microbiol. Rev. 14: 778−809.
  201. Santon J.B., Cronin M.T., MacLeod C.L., Mendelsohn J., Masui H., Gill G.N. 1986. Effects of epidermal growth factor receptor concentration on tumorigenicity of A431 cells in nude mice. Cancer Res. 46: 4701−4705.
  202. S.P., Murtie J., Koirala S., Patten B.A., Corfas G. 2006. Presenilin-dependent ErbB4 nuclear signaling regulates the timing of astrogenesis in the developing brain. Cell. 127: 185−197.
  203. K., Nagao T., Iwasaki T., Nishihira Y., Fukami Y. 2003. Src-dependent phosphorylation of the EGF receptor Tyr-845 mediates Stat-p21wafl pathway in A431 cells. Genes Cells. 8:995−1003.
  204. K., Nagao T., Kakumoto M., Kimoto M., Otsuki T., Iwasaki T., Tokmakov A.A., Owada K., Fukami Y. 2002. Adaptor protein She is an isoform-specific direct activator of the tyrosine kinase c-Src. J. Biol. Chem. 277: 29 568−29 576.
  205. K., Sato A., Aoto M., Fukami Y. 1995a. Site-specific association of c-Src with epidermal growth factor receptor in A431 cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 210: 844−851.
  206. K., Sato A., Aoto M., Fukami Y. 1995b. c-Src phosphorylates epidermal growth factor receptor on tyrosine 845. Biochem. Biophys. Res. Commun. 215: 1078−1087.
  207. M. 2006. Coupling receptor tyrosine kinases to Rho GTPases GEFs what’s the link. Cell. Signal. 18: 1834−1843.
  208. Schindler C., Shuai K., Prezioso V.R., Darnell J.E. Jr. 1992. Interferon-dependent tyrosine phosphorylation of a latent cytoplasmic transcription factor. Science. 257: 809−813.
  209. J. 2000. Cell signaling by receptor tyrosine kinases. Cell. 103: 211−225.
  210. Schulze A., Lehmann K., Jefferies H.B.J., McMahon M., Downward J. 2001. Analysis of the transcriptional program induced by Raf in epithelial cells. Genes Dev. 15: 981−994.
  211. M.A., Baron V. 1999. Interactions between mitogenic stimuli, or, a thousand and one connections. Curr. Opin. Cell. Biol. 11: 197−202.
  212. T., Imamoto N., Nakajima K., Hirano T., Yoneda Y. 1997. Extracellular signal-dependent nuclear import of STAT1 is mediated by nuclear pore-targeting complex formation with NPI-1, but not Rchl. EMBO J. 16: 706 777.
  213. J.J., Roth K.A. 2005. Regulation of neuronal cell death and neurodegeneration by members of the Bcl-2 family: therapeutic implications. Curr. Drug. Targets. CNS. Neurol. Disord. 4: 25−39.
  214. H., Cheng H.Y., Cook R.G., Tweardy D.J. 2003. Identification and characterization of signal transducer and activator of transcription 3 recruitment sites within the epidermal growth factor receptor. Cancer Res. 63: 3923−3930.
  215. C.J., Roberts J.M. 1999. CDK inhibitors: positive and negative regulators of G1-phase progression. Genes Dev. 13: 1501−1512.
  216. Shi C.-S., Kehrl J.H. 2004. Pyk2 Amplifies Epidermal Growth Factor and c-Src-induced Stat3 Activation. J. Biol. Chem. 279: 17 224−17 231.
  217. J.L., Fenton M.J. 2006. TLR2- and TLR4-dependent activation of STAT1 serine phosphorylation in murine macrophages is protein kinase C-8-independent. J. Endotoxin. Res. 12: 231−40.
  218. C.M. 2004. Role of STATs as downstream signal transducers in Src family kinase-mediated tumorigenesis. Oncogene. 23: 8017−8023.
  219. O., Schindler C., Schlessinger J., Levy D. E. 1993. Ras-independent growth factor signaling by transcription factor tyrosine phosphorylation. Science. 261: 1694−1695.
  220. D., Wharton W., Turkson J., Bowman T., Pledger W.J., Jove R. 2000. Induction of p21WAF1/CIP1 and cyclin D1 expression by the Src oncoprotein in mouse fibroblasts: role of activated STAT3 signaling. Oncogene. 19: 5419−5427.
  221. Smida Rezgui S., Honore S., Rognoni J. B., Martin P. M., Penel C. 2000. Up-regulation of a2pi integrin cell-surface expression protects A431cell from epidermial growth factor- induced apoptosis. Int. J. Cancer. 87: 360−367.
  222. SP. 2007. Rottlerin: an inappropriate and ineffective inhibitor of PKC8. Trends Pharmacol. Sci. 28: 453−458.
  223. L., Turkson J., Karras J.G., Jove R., Haura E.B. 2003. Activation of Stat3 by receptor tyrosine kinases and cytokines regulates survival in human non-small cell carcinoma cells. Oncogene. 22(27): 4150−4165.
  224. A., Kornilova E., Teslenko L., Sorokin A., Nikolsky N. 1989. Recycling of epidermal growth factor-receptor complexes in A431 cells. Biochim. Biophys. Acta. 1011: 88−96.
  225. Stancato L.F., David M., Carter-Su C., Larner A.C., Pratt W. B. 1996. Preassociation of STAT1 with STAT2 and STAT3 in separate signalling complexes prior to cytokine stimulation. J. Biol. Chem. 271: 4134−4137.
  226. Stancato L.F., Yu C.R., Petricoin 3rd E.F., Lamer A.C. 1998. Activation of Raf-1 by IFNy and oncostatin M requires expression of the STAT1 transcription factor. J. Biol. Chem. 273(30): 18 701−4.
  227. A., Latchman D.S. 2005. Opposing actions of STAT-1 and STAT-3. Growth Factors. 23: 177−182.
  228. C.M., Carpenter G. 1983. The biology of the A431 cell: a useful organism for hormone research. J. Cell. Biochem. 23: 191−202.
  229. D.R., Becker M., Liebetanz J., Lydon N.B. 1995. Src phosphorylation of the epidermal growth factor receptor at novel sites mediates receptor interaction with Src and P85 alpha. J. Biol. Chem. 270: 15 591−15 597.
  230. Strasser A., O’Connor L., Dixit V.M. 2000. Apoptosis signaling. Annu.1. Rev. Biochem. 69: 217−245
  231. Su W.C., Kitagawa M., Xue N., Xie B., Garofalo S., Cho J., Deng C., Horton W.A., Fu X.Y. 1997. Activation of Statl by mutant fibroblast growth-factor receptor in thanatophoric dysplasia type II dwarfism. Nature. 1997. 386: 288−292.
  232. Sui G., Soohoo C., Affar El Bachir, Gay F., Shi Y., Forrester W.C., Shi Y. 2002. A DNA vector-based RNAi technology to suppress gene expression in mammalian cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99: 5515−5520.
  233. Sun W.H., Pabon C., Alsayed Y., Huang P.P., Jandeska S., Uddin S., Platanias L.C., Rosen S.T. 1998. Interferon-y resistance in a cutaneous T-cell lymphoma cell line is associated with lack of STAT1 expression. Blood. 91: 570−576.
  234. J., Cross D.J. 2003. Regulated EGF receptor binding to F-actin modulatesreceptor phosphorylation. Biochem. Biophys. Res. Comm. 312: 930−936.
  235. Tang K., Nie D., Cai Y., Honn K.V. 1999. The (34 integrin subunit rescues A431 cells from apoptosis through a PI3K/Akt kinase signaling pathway. Biochem. Biophys. Res. Commun. 264: 127−132.
  236. N.A., Lazebnik Y. 1998. Caspases: enemies within. Science. 281: 1312−1322.
  237. D.A., Biscardi J.S., Nickles A.L., Parsons S.J. 1999. Mechanism of biological synergy between cellular Src and epidermal growth factor receptor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 96: 1415−1420.
  238. O., Carpenter G. 2005. Bax activation and translocation to mitochondria mediate EGF-induced programmed cell death. J. Cell. Sci. 118: 5681−5690,
  239. M., Gotoh N., Handa H., Shibuya M. 1998. Involvement of MAP kinase-independent protein kinase C signaling pathway in the EGF-induced p2. WAFi/cipi eXpression an? j gr0wth inhibition of A431 cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 250: 430−435.
  240. B., Leevers S.J., Ahmadi K., Timms J., Katso R., Driscoll P. C., Woscholski R., Parker P.J., Waterfield M.D. 2001. Synthesis and function of 3-phosphorylated inositol lipids. Annu. Rev. Biochem. 70: 535−602.
  241. M.L., Gilman M. 1999. Distinct mechanisms of activation of Statl and Stat3 by platelet-derived growth factor receptor in a cell-free system. Mol. Cell. Biol. 19: 3727−3735.
  242. Wang Y., Wu T.R., Cai S., Welte T., Chin Y.E. 2000. Statl as a component of tumor necrosis factor alpha receptor 1-TRADD signaling complex to inhibit NF-kappaB activation. Mol. Cell. Biol. 20:4505−4512.
  243. Statl and Stat3 requires both tyrosine and serine phosphorylation. Cell. 82: 241−250.
  244. C., Gibson S., Jarpe B., Johnson G.L. 1999. Mitogen-activated protein kinase: conservation of a three-kinase module from yeast to human. Phys. Rev. 79:143−180.
  245. Wong L.H., Sim H., Chatterjee-Kishore M., Hatzinisiriou I., Devenish R.J., Stark G., Ralph S.J. 2002. Isolation and characterization of a human STAT1 gene regulatory element. J. Biol. Chem. 277: 19 408−19 417.
  246. Wu X., Rubin M., Fan Z., DeBlasio T., Soos T., Koff A., Mendelsohn J. 1996. Involvement of p27K1P1 in Gj arrest mediated by an anti-epidermal growth factor receptor monoclonal antibody. Oncogene. 12: 1397−1403.
  247. Xi S., Zhang Q., Dyer K.F., Lerner E.C., Smithgall T.E., Gooding W.E., * Kamens J., Rubin Grandis J. 2003. Src kinases mediate STAT growth pathways insquamous cell carcinoma of the head and neck. J. Biol. Chem. 34: 31 574−31 583.
  248. Xie B., Zhao J., Kitagawa M., Durbin J., Madri J.A., Guan J.L., Fu X.Y. 2001. B Focal adhesion kinase activates Statl in integrin-mediated cell migration andadhesion. J. Biol. Chem. 276: 19 512−19 523.
  249. Xie W., Su K., Wang D., Paterson A.J., Kudlow J.E. 1997. MDA468 growth inhibition by EGF is associated with the induction of the cyclin-dependent kinase inhibitor p21WAF1. Anticancer Res. 17: 2627−2633.
  250. Xu X., Fu X.-Y., Plate J., Chong A. S. 1998. IFN-y induces cell growth inhibition by Fas-mediated apoptosis: requirement of STAT1 protein for upregulation of Fas and Fas-L expression. Canser Res. 58: 2832−2837.
  251. S., Park K., Turkson J., Arteaga C.L. 2007. Ligand-independent phosphorylation of Y869 (Y845) links mutant EGFR signaling to stat-mediated gene expression. Exp Cell Res. doi: 10.1016/j.yexcr.2007.09.002.
  252. Yang S.-H., Sharrocks A.D., Witmarsh A.J. 2003. Transcriptional regulation by the MAP kinase signaling cascades. Gene. 320: 3−21.
  253. J., Shaham S., Ledoux S., Ellis H.M., Horvitz H.R. 1993. The C. elegans cell death gene ced-3 encodes a protein similar to mammalian interleukin-1 beta-converting enzyme. Cell. 75: 641−652.
  254. X., Gureasko J., Shen K., Cole P.A., Kuriyan J. 2006. An allosteric mechanism for activation of the kinase domain of epidermal growth factor receptor. Cell. 125: 1137−1149.
  255. Zhang Y., Turkson J., Carter-Su C., Smithgall T., Levitzki A., Kraker A., Krolewski J.J., Medveczky P., Jove R. 2000. Activation of Stat3 in v-Src-transformed fibroblasts requires cooperation of Jakl kinase activity. J. Biol. Chem. 275: 2 493 524 944.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!