Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Регуляция метаболизма 2-оксоглутарата с помощью НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы в клетках растений и животных

Диссертация: Регуляция метаболизма 2-оксоглутарата с помощью НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы в клетках растений и животных
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

АсАТ к субстратам позволяет предположить, что положение реакции трансаминирования в цитоплазме растительной и животной клеток сдвинуто с сторону образования L-глутамата и оксалоацетата. Очевидно, необходимый субстрат для протекания АсАТ-реакции в цитоплазме — 2-оксоглутарат, образуется главным образом за счет функционирования цитоплазматической НАДФ-ИДГ. По-видимому, как митохондриальный, так… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Метаболизм 2-оксоглутарата и его роль в углеродном и азотном обмене в клетках высших растений и животных
      • 1. 1. 1. Метаболические превращения 2-оксоглутарата в тканях высших растений и животных
      • 1. 1. 2. Основные аспекты организации углеродного и азотного обмена в клетках растений и животных
      • 1. 1. 3. Взаимосвязь и сопряжение углеродного и азотного обмена на уровне ферментативных превращений 2-оксоглутарата
    • 1. 2. Изоцитратдегидрогеназа: формы, свойства и регуляция активности
      • 1. 2. 1. Реакция, катализируемая ферментом
      • 1. 2. 2. Распространение и участие в физиолого-биохимических процессах
      • 1. 2. 3. Изоформы и внутриклеточная локализация НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
      • 1. 2. 4. Очистка и физико-химические свойства НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
        • 1. 2. 4. 1. Очистка НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
        • 1. 2. 4. 2. Молекулярная масса и четвертичная структура фермента
      • 1. 2. 5. Кинетическое поведение и регуляция активности НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
        • 1. 2. 5. 1. Сродство к субстрату и кофакторам. Субстратная специфичность
        • 1. 2. 5. 2. Влияние температуры и рН среды на активность НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
        • 1. 2. 5. 3. Взаимодействие фермента с ионами металлов
        • 1. 2. 5. 4. Регуляция активности НАДФ-изоцитратдегидрогеназы под действием интермедиатов клеточного метаболизма
      • 1. 2. 6. Роль ковалентной модификации и аллостерических эффектов в регуляции активности НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
    • 1. 3. Субклеточная локализация, свойства и регуляция активности аспартатаминотрансферазы
      • 1. 3. 1. Реакция, катализируемая ферментом
      • 1. 3. 2. Распространение и участие ферментав физиологобиохимических процессах
      • 1. 3. 3. Тканевая и субклеточная локализация АсАТ
      • 1. 3. 4. Очистка и физико-химические свойства аспартатаминотрансферазы
        • 1. 3. 4. 1. Методы очистки фермента
        • 1. 3. 4. 2. Молекулярная масса и структура фермента
        • 1. 3. 4. 3. Исследования активного центра аспартатаминотрансферазы
      • 1. 3. 5. Кинетическое поведение и регуляция активности аспартатаминотрансферазы
        • 1. 3. 5. 1. Сродство к субстратам и коферментам
  • Субстратная специфичность
    • 1. 3. 5. 2. Влияние температуры и рН на активность фермента
      • 1. 3. 5. 3. Регуляция активности аспартатаминотрансферазы 62 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Объекты исследования
    • 2. 2. Выделение клеточных органелл
    • 2. 3. Определение активности ферментов
    • 2. 4. Определение количества белка
    • 2. 5. Выделение и очистка ферментов
      • 2. 5. 1. Экстракция
      • 2. 5. 2. Фракционирование белков с помощью сульфата аммония
      • 2. 5. 3. Гель-фильтрация
      • 2. 5. 4. Ионообменная хроматография
    • 2. 6. Исследование кинетических характеристик и регуляции активности ферментов
    • 2. 7. Аналитический электрофорез
    • 2. 8. Определение молекулярной массы
    • 2. 9. Статистическая обработка экспериментальных данных
  • ГЛАВА 3. СУБКЛЕТОЧНАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ, РАЗДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА РАЗЛИЧНЫХ ИЗОФОРМ НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ И АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В ТКАНЯХ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ И ЖИВОТНЫХ
    • 3. 1. Распределение активностей НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы в субклеточных фракциях гепатоцитов крысы
    • 3. 2. Субклеточная локализация НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы в Spirodela polyrhiza
    • 3. 3. Очистка различно локализованных форм НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы из печени крысы
      • 3. 3. 1. Очистка цитоплазматической и митохондриальной НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из печени крысы
      • 3. 3. 2. Очистка цитоплазматической и митохондриальной аспартатаминотрансферазы из печени крысы
    • 3. 4. Очистка различно локализованных форм НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы из Spirodela polyrhiza
      • 3. 4. 1. Очистка цитоплазматической и хлоропластной НАДФ-изоцитратдегидрогеназы из Spirodela polyrhiza
      • 3. 4. 2. Очистка цитоплазматической и хлоропластной аспартатаминотрансферазы из Spirodela polyrhiza
  • ГЛАВА 4. КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ КАТАЛИТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ И НЕКОТОРЫЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ И АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ ИЗ ТКАНЕЙ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ И ЖИВОТНЫХ
    • 4. Л Кинетические параметры каталитического действия различно локализованных форм ферментов
      • 4. 2. Некоторые физико-химические свойства изоформ ферментов
  • ГЛАВА 5. РЕГУЛЯЦИЯ МЕТАБОЛИЗМА 2-ОКСОГЛУТАРАТА НА УРОВНЕ НАДФ-ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗНОЙ И АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗНОЙ РЕАКЦИЙ
    • 5. 1. Метаболическая регуляция активности НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы из печени крысы
      • 5. 1. 1. Регуляции ферментативных превращений 2-оксоглутарата с помощью НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы под действием метаболитов азотного обмена
      • 5. 1. 2. Влияние интермедиатов углеводного метаболизма на ферментативные превращений 2-оксоглутарата под действием НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы
      • 5. 1. 3. Участие интермедиатов цикла Кребса в регуляции ферментативных превращений 2-оксоглутарата
      • 5. 1. 4. Влияние некоторых нуклеотидфосфатов на активность НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы из печени крысы
    • 5. 2. Регуляция активности НАДФ — изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы из Spirodela polyrhiza под действием клеточных метаболитов
      • 5. 2. 1. Участие интермедиатов азотного обмена в регуляции ферментативных превращений 2-оксоглутарата под действием НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы
      • 5. 2. 3. Регуляция метаболических превращений 2-оксоглутарата на уровне НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы под действием интермедиатов углеводного метаболизма
      • 5. 2. 4. Влияние ди- и три-карбоновых кислот на активность ферментов
      • 5. 2. 5. Исследование участия нуклеотидфосфатов в регуляции ферментативных превращений 2-оксоглутарата
  • ЗАКЛЮЧЕНИЕ
  • ВЫВОДЫ
  • СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
  • ПРИЛОЖЕНИЕ

Регуляция метаболизма 2-оксоглутарата с помощью НАДФ-изоцитратдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы в клетках растений и животных (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы. Важнейшим направлением современной биохимии является исследование сопряжения функционирования отдельных звеньев клеточного обмена веществ, что позволяет приблизиться к глубокому анализу регуляции метаболизма в целом на уровне живой клетки с выходом на более высокий организменный уровень. В этом плане многие аспекты организации метаболизма в клетке изучены крайне недостаточно. Это относится, в частности, к ферментативной регуляции и координации функционирования метаболических блоков клетки, обеспечивающих протекание углеродного и азотного обмена.

Необходимым условием для нормального протекания реакций азотного обмена является его взаимосвязь с процессом углеродного метаболизма, так как основным источником углеродных скелетов аминокислот, используемых для синтеза белка, служат интермедиаты гликолиза, цикла трикарбоновых кислот (ЦТК) и пентозофосфатного пути. Считают, что из всех интермедиатов, поставляющих углеродные скелеты для биосинтеза аминокислот, 2-оксоглутарат играет главную роль, так как является наиболее активным промежуточным акцептором аминных групп (Huppe et al., 1994; Galvez et al., 1999). От степени обеспечения процессов переаминирования данным метаболитом зависит скорость протекания реакций азотного обмена.

До настоящего времени конкретная ферментативная реакция, являющаяся основным источником 2-оксоглутарата, остается неизвестной, потому что существует многообразие 2-оксоглутаратсинтезирующих ферментов в отдельных клеточных компартментах в пределах одной клетки. Предполагается, что в образовании 2-оксоглутарата в клетках растений и животных главную роль могут играть реакции, катализируемые НАДФ-изоцитратдегидрогеназой (НАДФ-ИДГ, КФ 1.1.1.42) и аспартатаминотрансферазой (АсАТ, КФ 2.6.1.1) (Galvez et al., 1999).

Следовательно, на уровне функционирования данных ферментов может осуществляться сопряжение и регуляция углеродного и азотного метаболизма в клетке. Но, несмотря на наличие достаточно большого количества данных о структуре и каталитических свойствах НАДФ-ИДГ и АсАТ, их возможный вклад в стратегию координации процессов углеродного и азотного обмена путем регуляции метаболических превращений 2-оксоглутарата в различных субклеточных компартментах остается не выясненным. Это касается и участия клеточных метаболитов в согласованной регуляции этих метаболических блоков клетки. Данные литературы в этом отношении фрагментарны и необходимо комплексное исследование, чтобы выяснить факторы, оказывающие определяющее воздействие на образование и утилизацию 2-оксоглутарата и тем самым обеспечивающие причинно-следственные отношения между процессами азотного и углеродного обмена и их сопряжение. В настоящее время мало что известно о молекулярных механизмах, обеспечивающих возможные пути координации функционирования НАДФ-ИДГ и АсАТ, хотя, по всей видимости, такие механизмы должны существовать в клетке. В этой связи представляет значительный интерес сравнительная характеристика каталитических и регуляторных свойств данных ферментов, позволяющая выявить возможные механизмы координации их функционирования, что, в свою очередь, имеет существенное значение для понимания путей сопряжения и регуляции углеродного и азотного обмена в клетке.

Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы было исследование регуляции метаболизма 2-оксоглутарата на уровне функционирования НАДФ-ИДГ и АсАТ в клетках высших растений (на примере Spirodela polyrhizci) и животных (гепатоциты крысы, Rcittus rattus).

Исходя из цели были поставлены следующие задачи:

1. Оценка распределения активностей НАДФ-ИДГ и АсАТ в субклеточных компартментах растительной и животной клеток и получение высокочищенных ферментных препаратов различно локализованных форм ферментов.

2. Сравнительная характеристика кинетических параметров каталитического действия и некоторых физико-химических свойств НАДФ-ИДГ и АсАТ в субклеточных фракциях клеток растений и животных.

3. Исследование регуляции метаболизма 2-оксоглутарата с помощью интермедиатов азотного обмена на уровне НАДФ-ИДГи АсАТ — реакций в субклеточных фракциях Spirodela polyrhiza и гепатоцитов крысы.

4. Изучение влияния метаболитов углеводного обмена на реакции, катализируемые НАДФ-ИДГ и АсАТ в различных компартментах растительной и животной клеток.

5. Исследование участия интермедиатов ЦТК и нуклеотидфосфатов в регуляции метаболических превращений 2-оксоглутарата с помощью НАДФ-ИДГ и АсАТ.

6. Оценка вклада различно локализованных форм НАДФ-ИДГ и АсАТ в образование и утилизацию 2-оксоглутарата в субклеточных фракциях растительной и животной клеток. Разработка гипотетической схемы координации и сопряжения углеродного и азотного обмена с учетом особенностей регуляции метаболизма 2-оксоглутарата с помощью НАДФ-ИДГ и АсАТ.

Научная новизна. Впервые проведено системное исследование комплекса регуляторных характеристик и параметров каталитического действия НАДФ-ИДГ и АсАТ, определяющих особенности метаболизма 2-оксоглутарата в цитоплазматической и хлоропластной фракциях растительной клетки (Spirodela polyrhiza) и цитоплазматической и митохондриальной фракциях животной клетки (гепатоциты крысы). Показано, что основную роль в синтезе 2-оксоглутарата в клетках растений и животных играет цитоплазматическая НАДФ-ИДГ. В ходе каталитического действия цитоплазматической АсАТ происходит утилизация 2-оксоглутарата. Определенный вклад в пополнение клеточного фонда 2-оксоглутарата вносят также хлоропластные и митохондриальные формы ферментов. С использованием очищенных (в том числе гомогенных) ферментных препаратов различно локализованных форм НАДФ-ИДГ и АсАТ получена информация о характере изменений ферментативных превращений 2-оксоглутарата под действием ряда интермедиатов азотного и углеродного обмена. Продемонстрировано, что в регуляции метаболизма 2-оксоглутарата в клетках растений и животных имеются сходные черты (ингибирование НАДФ-ИДГ 2-оксоглутаратомхарактер влияния глутамата, глутамина и аспартата на скорость ИДГ-реакции и на смещение равновесия АсАТ-реакции в сторону образования или утилизации 2-оксоглутаратавысокая чувствительность НАДФ-ИДГ к концентрациям НАДФН и НАДН и отсутствие влияния данных метаболитов на активность АсАТподавление образования 2-оксоглутарата в ходе окислительного декарбоксилирования изоцитрата некоторыми интермедиатами углеводного метаболизма и стимуляция его синтеза за счет активации реакции обратного трансаминирования, катализируемого АсАТ). Установлено, что имеют место особенности процессов образования и утилизации 2-оксоглутарата в разных клеточных компартментах (различная чувствительность ферментов к концентрациям субстратов и кофакторов, чувствительность АсАТ к субстратному ингибированию, влиянию аденозинфосфатов).

Обосновывается положение о существовании сопряжения и координации процессов углеродного и азотного метаболизма под действием НАДФ-ИДГ и АсАТ. Показано, что контроль углеродного и азотного метаболизма в растительной и животной клетках может осуществляться путем распределения 2-оксоглутарата между различно локализованными формами НАДФ-ИДГ и АсАТ с помощью специфических путей регуляции активности ферментов посредством изменения концентраций субстратов, кофакторов, интермедиатов углеводного, азотного обмена, цикла трикарбоновых кислот, некоторых нуклеотидфосфатов. Установлено, что регуляция активности АсАТ и НАДФ-ИДГ имеет множественный и часто разнонаправленный характер, за счет чего возможна активация каталитического действия одного фермента при сопутствующем снижении уровня активности другого. Предложена гипотетическая схема сопряжения углеродного и азотного метаболизма в тканях растений и животных за счет регуляции метаболизма 2-оксоглутарата на уровне ИДГи АсАТ-реакций.

Практическая значимость. Полученные данные расширяют и углубляют фундаментальные представления об организации, регуляции и механизмах сопряжения углеродного и азотного обмена в клетке. Это имеет значение для реализации потенциальной продуктивности растений и понимания их адаптивных реакций на различные воздействия. Выяснение молекулярных механизмов координации протекания центральных метаболических путей также имеет значение для изыскания оптимальных путей коррекции состояний дезадаптации и развития патологии в организме млекопитающих.

Разработанные способы выделения и получения высокоочищенных препаратов НАДФ-ИДГ и АсАТ из печени крысы и Spirodela polyrhiza могут быть использованы для получения ферментных препаратов в производственных и лабораторных условиях, а также в научно-исследовательских работах, связанных с моделированием сопряженных ферментных систем in vitro.

Материалы работы используются в учебном процессе на биолого-почвенном факультете Воронежского государственного университета при чтении лекций по биохимии, а также в спецкурсах по энзимологии, кроме того, они используются при проведении практикумов и выполнении курсовых и дипломных работ.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на Всероссийской конференции «Клеточная биология на пороге XXI века» (Санкт-Петербург, 2000), 12-м Конгрессе Федерации Европейского биохимического общества физиологов растений (Будапешт, Венгрия, 2000), межрегиональной конференции «Физиология и психофизиология мотиваций» (Воронеж, 2000), 2-й Российской конференции «Физика и биология в медицине» (Екатеринбург, 2001), 27-й Конференции Федерации Европейских биохимических обществ (Лиссабон, Португалия, 2001), 5-й и 6-й Пущинских школах-конференциях молодых ученых «Биология — наука XXI века «(Пущино, 2001, 2002), II Международном симпозиуме «Проблемы биохимии, радиационной и космической биологии» (Москва, 2001), IV Международном симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования» (Пущино, 2001), 34-м Интернациональном конгрессе по физиологическим наукам (Новая Зеландия, 2001), Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимологии» (Москва, 2002), ежегодной научной отчетной конференции преподавателей и сотрудников Воронежского государственного университета (2002).

Публикации. Основные результаты настоящей диссертационной работы изложены в 20 публикациях — 9 статьях и 11 тезисах.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Анализ кинетических параметров каталитического действия (Km, Ksi) и распределения активностей НАДФ-ИДГ и АсАТ в различных клеточных компартментах растительной и животной клеток свидетельствуют, что основную роль в синтезе 2-оксоглутарата играет цитоплазматическая НАДФ-ИДГ. В ходе каталитического действия цитоплазматической АсАТ происходит утилизация 2-оксоглутарата. Определенный вклад в пополнение клеточного фонда 2-оксоглутарата вносят также хлоропластные и митохондриальные формы ферментов.

2. Исследования, проведенные на очищенных (в том числе гомогенных) ферментных препаратах НАДФ-ИДГ и АсАТ из Spirodela polyrhiza и печени крысы, показали, что контроль углеродного и азотного метаболизма в растительной и животной клетках может осуществляться путем распределения 2-оксоглутарата между различно локализованными формами НАДФ-ИДГ и АсАТ с помощью специфических путей регуляции активности ферментов посредством изменения концентраций субстратов, кофакторов, интермедиатов углеводного, азотного обмена, цикла трикарбоновых кислот, некоторых нуклеотидфосфатов.

3. Регуляция активностей АсАТ и НАДФ-ИДГ имеет множественный и часто разнонаправленный характер, за счет чего возможна активация каталитического действия одного фермента при сопутствующем снижении уровня активности другого, что, очевидно, может обеспечивать контроль распределения 2-оксоглутарата между различными метаболическими процессами.

4. Предложена гипотетическая схема сопряжения и координации углеродного и азотного обмена путем распределения потоков 2-оксоглутарата с помощью регуляторных эффектов, воздействующих на активности НАДФ-ИДГ и АсАТ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 207 страницах текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения результатов (5 глав), списка литературы (217 источников) и приложения. Иллюстрационный материал включает 36 рисунков и 19 таблицв приложении — 19 рисунков и 6 таблиц.

154 ВЫВОДЫ.

1. Исследования ряда физико-химических характеристик, проведенные на очищенных (в том числе гомогенных) ферментных препаратах различно локализованных форм НАДФ-ИДГ и АсАТ, показали, что наряду со сходными свойствами (молекулярные массы, близкие диапазоны оптимальных значений рН: 7,5−8,3, исключая митохондриальную АсАТ из печени крысы, рН-оптимум которой 6,8), изоформы ферментов обладают значительно различающимся сродством к субстратам, что, очевидно, имеет значение для регуляции процессов синтеза и утилизации 2-оксоглутарата в различных компартментах клетки.

2. Кинетические параметры каталитического действия (Km, KSj) и данные исследования субклеточной локализации НАДФ-ИДГ и АсАТ указывают, что основную роль в синтезе 2-оксоглутарата играет цитоплазматическая НАДФ-ИДГ, на долю которой приходится 82 и 86% от общей активности в растительной и животной клетках. В ходе каталитического действия цитоплазматической АсАТ (73 и 78% от общей активности) происходит утилизация 2-оксоглутарата. Определенный вклад в пополнение общего фонда 2-оксоглутарата в клетке вносят также хлоропластные и митохондриальные изоформы ферментов.

3. Характерным свойством АсАТ из печени крысы и Spirodela polyrhiza является ингибирование избытком субстратов, а также изменение сродства фермента к субстратам под действием некоторых интермедиатов ЦТК (изоцитрата, сукцината, фумарата, цитрата). На сродство НАДФ-ИДГ к изоцитрату глутамат, глутамин и аспартат влияния не оказывают.

4. В регуляции метаболизма 2-оксоглутарата на уровне НАДФ-ИДГи АсАТ-реакций принимают участие ключевые интермедиаты азотного обмена (глутамат, глутамин, аспартат). Показано, что возрастание скорости синтеза метаболического предшественника глутамата и глутамина — 2-оксоглутарата, в ИДГ-реакции наиболее значительно именно при их низких концентрациях. От концентрации данных аминокислот зависит состояние трансаминазного равновесия.

5. Метаболиты углеводного обмена (глюкоза, глюкозо-1-фосфат, глюкозо-6-фосфат, фосфоенолпируват, 3-фосфоглицерат) подавляют образование 2-оксоглутарата в ходе окислительного декарбоксилирования изоцитрата и стимулируют его синтез за счет активации реакции обратного трансаминирования, катализируемой АсАТ.

6. Регуляция метаболизма 2-оксоглутарата в растительной и животной клетках может осуществляться за счет изменений активностей НАДФ-ИДГ и АсАТ под действием интермедиатов ЦТК (цитрата, цис-аконитата, транс-аконитата, 2-оксоглутарата, сукцината, фумарата, оксалоацетата, малата) и некоторых нуклеотидфосфатов (НАДФН, НАДН, АТФ, АДФ).

7. Установлено, что для регуляции каталитического действия НАДФ-ИДГ и АсАТ из растительного и животного объектов характерны некоторые отличия. Это касается степени сродства НАДФ-ИДГ из печени крысы и.

2+ л.].

Spirodela polyrhiza к кофакторам (ионам Мп и Mg), чувствительности к регуляторному влиянию фумарата, глутамата, глутамина и аспартата. Для АсАТ из растительной и животной клеток характерны определенные различия в регуляции активности под действием фумарата, циси транс-аконитата.

8. Регуляция активностей АсАТ и НАДФ-ИДГ имеет множественный и часто разнонаправленный характер, за счет чего возможна активация каталитического действия одного фермента при сопутствующем снижении уровня активности другого. Очевидно, контроль углеродного и азотного метаболизма в растительной и животной клетках может осуществляться путем распределения 2-оксоглутарата между различными метаболическими процессами с помощью регуляторных механизмов, воздействующих на активности различно локализованными форм НАДФ-ИДГ и АсАТ. С учетом особенностей регуляции метаболизма 2-оксоглутарата на уровне НАДФ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Для организации клеточного обмена в живой клетке характерно, что на уровне метаболического узла, связанного с превращениями 2-оксоглутарата, имеет место пересечение путей углеродного и азотного обменов. 2-оксоглутарат является предшественником глутаминовой кислоты и основным акцептором азота в ферментативных системах, сопряженных с биосинтезом глутамата. Считают, что главную роль в образовании данного метаболита в растительной и животной клетках играют НАДФ-ИДГ и АсАТхотя в ходе АсАТ-реакции может происходить и утилизация 2-оксоглутарата (Galvez et al., 1999).

Полученные нами сведения об особенностях регуляции и каталитических свойствах НАДФ-ИДГ и АсАТ из различных клеточных компартментов дают возможность предложить гипотетическую схему механизма регуляции метаболических превращений 2-оксоглутарата на этапе данных ферментативных реакций (рис. 36).

Исследование субклеточной локализации показало существование двух основных фондов активностей НАДФ-ИДГ АсАТ в животной клетке: цитоплазматического и митохондриальногоа в растительной цитоплазматического и хлоропластного. В обоих случаях в количественном соотношении преобладающим является цитоплазматический фонд (73−86% от общей активности). По-видимому, именно реакции, катализируемые цитоплазматическими изоформами ферментов, являются основными локусами метаболических превращений 2-оксоглутарата.

С использованием высокоочищенных ферментных препаратов выявлены регуляторные особенности, обусловленные различной субклеточной локализацией изоформ ферментов. Так, установлено, что митохондриальная НАДФ-ИДГ из печени крысы и хлоропластная НАДФ-ИДГ из Spirodela polyrhiza проявляют большее сродство к субстрату и кофакторам, чем соответствующие им цитоплазматические формы фермента. Анализ сродства, а в, а «ававвввавваввва, а в в в в в в ацетид-СоА |.

-—-|цитрат|.

-|оксалоацетат| [мала^КИ X цис-аконитат|, д I транс-аконитат|™.

Углеводный метаболизм Цитоплазма глюкоза ¦ шюкозо-1-фосфат глюкозо-6-фосфат: 3-фосфоглицерат <Ш фосфоенолшфуват: > НАДФН"! НАДН-мяАТФю* — фумар! изоцитрат ^ущинат^у1 НАД-ИЖХ цис-аконитат M> транс-аконитат | изоци’гра1^м>|.

•<сукцина#&tradeУглеводный метаболизм|к глюкоза глюко ЗО-1-i глюкозо-6-фосфат ¦ 3-фосфоглицерат <Ц< :^ос (^оено1ширува'п.

А. га, цитрат цис-аконитат |транс-аконитат изоцитра^ш.

1Ф-ИДГ.

НАДФН-g | НАДН' кмАТФи<' мн, А ДФ км" сукцинат^ фумарат ОИ.

2-оксоглутарах 1сА1.

Щ Ь-глутамат|М>1oRcajloauelafB.

L-глутамин t^j¦

Азотный метаболизм.

Хлоропласт.

JT нтермедиаты ЦТК цитрт^ |цис-аконитат ")анс-аконитат сущинат «моксалоацетат&tradeизоцитрат.

НАДФН НАДН АТФ"^ ^АДФ.

2-оксощггарат Ь-аспартатЪ (AcAp^f оксалоацетат Ь-глутама^ш глюкозо-1-фосфат ii Ў. ^ гаюкозо-6-фосфат 5 А* Ь-гпутамин|^.

3-фосфоглицерат.

Углеводный метаболизм I.

Азотный метаболизм г’аетительниз г.- гка.

Рис. 36. Гипотетическая схема сопряжения и координации углеродного и азотного обмена путем распределения 2-оксоглутарата с помощью регуляторных эффектов, воздействующих на НАДФ-изоцитратдегидрогеназу и аспартатаминотрансферазу: смещение равновесия АсАТ-реакции в сторону прямого ^^ или обратного^^ трансаминирования- ¦§{}§ уменьшение сродства АсАТ к субстратам под влиянием клеточных метаболитов;

О) ингибирование АсАТ избыточными концентрациями субстратов— 4'> ингибирование или —активация НАДФ-ИДГ под влиянием метаболитов. Значками отмечены метаболиты, участвующие в регуляции активности АсАТ в ходе прямого или.

АсАТ к субстратам позволяет предположить, что положение реакции трансаминирования в цитоплазме растительной и животной клеток сдвинуто с сторону образования L-глутамата и оксалоацетата. Очевидно, необходимый субстрат для протекания АсАТ-реакции в цитоплазме — 2-оксоглутарат, образуется главным образом за счет функционирования цитоплазматической НАДФ-ИДГ. По-видимому, как митохондриальный, так и цитоплазматический пулы 2-оксоглутарата могут пополнятся за счет работы митохондриальной АсАТ, так как равновесие трансаминазной реакции в митохондриях сдвинуто в сторону образования данного метаболита. В этой связи следует подчеркнуть, что 2-оксоглутарат, образующийся в ходе протекания ИДГ-реакции в митохондриях, в основном подвергается превращению в ЦТК под действием 2-оксоглутаратдегидрогеназного комплекса и лишь небольшая часть через переносчик может поступать в цитоплазму (Chen et al., 1990). Известно, что оксалоацетат не может напрямую поступать из митохондрий в цитоплазму. В ходе каталитического действия митохондриальной АсАТ оксалоацетат превращается в 2-оксоглутарат, который затем транспортируется в цитоплазму, где под действием цитоплазматической формы фермента может вступать в реакцию с L-аспартатом, образуя оксалоацетат и L-глутамат. В хлоропластах растительной клетки равновесие АсАТ-реакции, вероятно, сдвинуто в сторону обратного трансаминирования. Фермент, тем самым, наряду с хлоропластной НАДФ-ИДГ, может вносить вклад в синтез 2-оксоглутарата, который необходим для нормального функционирования ГС/ГОГАТ-цикла, так как на него переносится амидная группа глутамина в ходе образования глутамата. Таким образом, различия в чувствительности ферментов к концентрациям субстратов и кофакторов могут иметь значение для обеспечения координации процессов метаболизма 2-оксоглутарата, протекающих в разных клеточных компартментах.

В тоже время, показано, что основные пути регуляции активности ферментов, которые могут существенно воздействовать на сопряжение процессов углеродного и азотного обмена на уровне метаболических превращений 2-оксоглутарата, являются, скорее всего, универсальными, поскольку имеют место в тканях растений и животных. Так, анализ кинетики АсАТ-реакции показал, что каждый из субстратов при избыточных концентрациях может выступать в роли конкурентного ингибитора фермента. Различная чувствительность изоформ фермента к ингибирующему влиянию субстратов, характеризующаяся разными величинами Ksi, вероятно, имеет значение для смещения трансаминазного равновесия в сторону образования или утилизации 2-оксоглутарата в различных клеточных компартментах. Существенное влияние на положение равновесия трансаминазной реакции могут оказывать структурные аналоги субстратов — некоторые интермедиаты ЦТК и ряд аминокислот. Так, глутамат и глутамин замедляют скорость протекания прямой аспартатаминотрансферазной реакции, в то время как аспартат оказывает ингибирующее, а глутамин — активирующее действие на АсАТ в ходе обратного трансаминирования. Под действием некоторых интермедиатов ЦТК (в том числе и изоцитрата — субстрата ИДГ-реакции) происходит снижение сродства АсАТ к субстратам.

Исследование влияния ряда аминокислот (глутамата, глутамина, аспартата) на кинетику протекания ИДГ-реакции показало, что данные метаболиты не изменяют значения Кт по субстрату для НАДФ-ИДГ, но увеличивают Vmax. Причем, возрастание скорости синтеза метаболического предшественника глутамата и глутамина — 2-оксоглутарата, в ИДГ-реакции наиболее значительно именно при их низких концентрациях. При повышении концентрации данных метаболитов в клетке происходит торможение ферментативной активности НАДФ-ИДГ. Вероятно, это взаимосвязано со смещением равновесия АсАТ-реакции в сторону обратного трансаминирования. Аспартат, наоборот, при низких концентрациях практически не оказывает влияния на ИДГ-реакцию, а при более высоких концентрациях стимулирует каталитическое действие НАДФ-ИДГ, что, вероятно, связано со сдвигом равновесия АсАТ-реакции в сторону прямого трансаминирования, в результате чего происходит утилизация 2-оксоглутарата и увеличение скорости окислительного декарбоксилирования изоцитрата, так как 2-оксоглутарат, является сильным конкурентным ингибитором НАДФ-ИДГ. Конкурентный тип ингибирования 2-оксоглутаратом показан также для НАДФ-ИДГ из ряда других объектов (Chen et al., 1990; Попова, 1993). Очевидно, ингибирование 2-оксоглутаратом осуществляется по принципу обратной связи и является универсальным механизмом регуляции активности фермента у различных организмов. Другой субстрат АсАТ-реакцииоксалоацетат, также является конкурентным ингибитором НАДФ-ИДГ. Но его ингибирующее действие проявляется при более высоких концентрациях, чем 2-оксоглутарата. Вероятно, при повышении концентрации оксалоацетата в клетке происходит ускорение синтеза 2-оксоглутарата за счет обратной АсАТ реакции и подавление его образования в ходе ИДГ-реакции.

Таким образом, регуляция активности АсАТ и НАДФ-ИДГ в клетке имеет множественный и часто разнонаправленный характер. Это характерно и для влияния интермедиатов углеводного метаболизма (глюкозо-1-фосфата, глюкозо-6-фосфата, фосфоенолпирувата, 3-фосфоглицерата), под действием которых происходит подавление образования 2-оксоглутарата в ходе окислительного декарбоксилирования изоцитрата и стимуляция его синтеза за счет активации реакции обратного трансаминирования, катализируемого АсАТ.

В ряде случаев активность одного из исследуемых ферментов изменяется под действием определенного клеточного метаболита, тогда как активность другого остается неизменной. Так, НАДФН и НАДН оказывают сильный ингибирующий эффект на скорость окислительного декарбоксилирования изоцитрата, в то время как на скорость ферментативных превращений 2-оксоглутарата с помощью АсАТ-реакции данные метаболиты не влияют. Высокая чувствительность НАДФ-ИДГ к концентрациям НАДФН и НАДН, очевидно, имеет существенное физиологическое значение и позволяет ферменту в оптимальном режиме выполнять функцию генерирования восстановительных эквивалентов. Интересно отметить, что НАДФН и 2-оксоглутарат оказывают синергичное ингибирующее действие на НАДФ-ИДГ.

Таким образом НАДФН может оказывать влияние и на сопряжение углеродного и азотного метаболизма на уровне ИДГ-реакции.

В то же время выявлены некоторые отличительные черты регуляции каталитического действия НАДФ-ИДГ и АсАТ в клетках растений и животных. Так, цитоплазматическая НАДФ-ИДГ из растительного объекта проявляет большее сродство к кофакторам (Кт к ионам Мп2+ и Mg2+ примерно в 2 раза меньше), чем фермент из печени крысы. Различны характер влияния некоторых интермедиатов ЦТК (фумарата, циси транс-аконитата) и чувствительность к регулирующему воздействию метаболитов азотного обмена (глутамата, глутамина и аспартата) на активность ферментов.

Обнаруженные эффекты свидетельствуют о возможности координации функционирования АсАТ и НАДФ-ИДГ под действием интермедиатов клеточного метаболизма. По-видимому, возможна активация каталитического действия одного фермента при сопутствующем снижении уровня активности другого. Выявленные особенности регуляции активности НАДФ-ИДГ и АсАТ, очевидно, вносят существенный вклад в регуляцию метаболизма 2-оксоглутарата, что в свою очередь имеет значение для сопряжения важнейших блоков клеточного метаболизма — углеродного и азотного обмена. По-видимому, различно локализованные формы НАДФ-ИДГ и АсАТ специфически воздействуют на углеродный и азотный обмен путем распределения потоков 2-оксоглутарата как между различными клеточными компартментами, так и между протекающими в них метаболическими путями. При этом приоритетными механизмами регуляции, скорее всего, являются эффекты изменения ферментативных активностей под действием ключевых интермедиатов азотного метаболизма (глутамата, глутамина, аспартата), интермедиатов ЦТК, особенно изоцитрата, 2-оксоглутарата, сукцината и оксалоацетата, ряда метаболитов углеводного обмена (глюкозо-1-фосфата, глюкозо-6-фосфата, фосфоенолпирувата, 3-фосфоглицерата) и некоторых нуклеотидфосфатов (НАДФН, НАДН, АТФ). Таким образом, стратегия сопряжения и координации углеродного и азотного обмена, направленная на.

153 поддержание клеточного гомеостаза, очевидно, связана с распределением 2-оксоглутарата через регуляторные механизмы, воздействующие на активности НАДФ-ИДГ и АсАТ.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Н.Д. Взаимосвязь процесса усвоения азота и фотосинтеза в клетке листа С3-растений / Н. Д. Алехина, Т. Е. Кренделева, О. Г. Полесская // Физиология растений. 1996. — Т. 43, № 1. — С.136−148.
  2. Т.Ф. Метаболизм углерода и азота при фотосинтезе и фотодыхании / Т. Ф. Андреева // Азотное и углеродное питание растений и их связь при фотосинтезе. Пущино: НЦБИ, 1987. С. 20−38.
  3. А.Е. Процессы и ферменты клеточного метаболизма / А. Е. Браунштейн. М.: Наука, 1987. — 552 с.
  4. В.Ф. Большой практикум по физиологии растений / В. Ф. Гавриленко, М. Е. Ладыгина, Л. М. Хандобина. М.: Высш. шк., 1975. -392 с.
  5. Гепатоцит: Функционально-метаболические свойства / Ред. кол.: П. В. Гулак, A.M. Дубченко, В. В. Зайцев и др. М.: Наука, 1985. — 270 с.
  6. A.M. Краткий справочник по физиологии растений / A.M. Гродзинский, Д. М. Гродзинский. Киев: Наукова думка, 1973. — 273 с.
  7. Г. Гель-хроматография / Г. Детерман. М.: Мир, 1970. — 252с.
  8. Э. Ферменты / Э. Диксон, М. Уэбб. М.: Мир, 1982. — 1117с.
  9. З.Г. Глутаматсинтазный цикл у растений / З. Г. Евстигнеева // Прикл. биохимия и микробиология. 1993. — Т. 29. -Вып. 1,-С. 5−17.
  10. , Т.Н. Попова, А.Т. Епринцев и др. // Физиология растений.- 1987. Т. 34, Вып. 3. — С. 499−507.
  11. Ф.И. Биохимические методы исследования в клинике / Ф. И. Комаров, Б. Ф. Коровкин, В. В. Меньшиков. Л.: Медицина, 1976. -С.41−47.
  12. Г. А. Практическое руководство по энзимологии / Г. А. Кочетов. М.: Высш. шк, 1980. — 272 с.
  13. В.М. Изменения конформации кофактора в комплексе АсАТ с D-аспартатом / В. М. Кочкина, С. В. Королев, А. Л. Кузин // Молек. биол.- 1995.-Т.56, № 5.-С.1168−1171.
  14. В.М. Линейный дихроизм кристаллов аспартатаминотрансферазы / В. М. Кочкина // Биохимия. 1995. — Т.60, № 11, — С.1785−1789.
  15. Н.П. Практикум по биохимии / Н. П. Мешкова, С. Е. Северин. -М.: Мир, 1979. -430 с.
  16. Э.Р. Влияние пиридоксальфосфата на активность аминотрансфераз в различных структурно-функциональных отделах головного мозга кроликов при лучевой болезни / Э. Р. Нагиев, В. В. Цыбульский // Укр. биохим. ж. 1993. — Т. 65, № 5. — С.63−69.
  17. О.М. Физиологические основы ферментативного катализа / О. М. Полторак, Е. С. Чухрай. М., 1971. — С.130−140.
  18. Т.Н. Регуляция активности и каталитические свойства гомогенной изоцитратдегидрогеназы (NADP) из гороха / Т. Н. Попова,
  19. JI.А. Землянухин, А. Т. Епринцев и др. // Биохимия. 1986. — Т.51, № 6. -С.952−957.
  20. Т.Н. Выделение, очистка и исследование физико-химических свойств НАДФ±специфичной изоцитратдегидрогеназы из сахарной свеклы / Т. Н. Попова, А. А. Землянухин // Физиология и биохимия культурных растений. -1990. Т. 22, № 3. — С. 305−310.
  21. Т.Н. Каталитические свойства NADP-изоцитратдегидрогеназы листьев гороха в реакции восстановительного карбоксилирования / Т. Н. Попова, А. А. Землянухин, А. У. Игамбердиев и др. // Биохимия. -1990. Т. 55, № 11. — С. 2011−2018.
  22. Т.Н. Изоцитратдегидрогеназы: формы, локализация, свойства и регуляция / Т. Н. Попова // Биохимия 1993. — Т. 58, № 126. — С. 18 611 879.
  23. Т.Н. Исследование NADP-специфичной изоцитратдегидрогеназы в высших растениях: Дис. докт. биол. наук / Т. Н. Попова. М., 1994. — 338 с.
  24. Т.Н. Каталитические свойства NAD-изоцитратдегидрогеназы из семядолей тыквы / Т. Н. Попова, А. Ю. Подопригора // Биохимия. -1997. Т. 60, № 11. — С. 1790−1797.
  25. В.П. Цикл азота в организме млекопитающих и принцип цикличности / В. П. Реутов // Биохимия. 2002. — Т. 67, № 3. — С. 353 376.
  26. С.Е. Практикум по биохимии / С. Е. Северин, Г. А. Соловьева. -М.: Изд-во МГУ, 1989. 509 с.
  27. Справочник по прикладной статистике / Под ред. Э. Ллойда, У. Ледермана. М.: Фин. и стат., 1990. — 525 с.
  28. С.А. Очистка и некоторые свойства гиалоплазматической NADP-зависимой изоцитратдегидрогеназы из надпочечников кролика / С. А. Струмило, М. М. Викторович, В. В. Виноградов // Биохимия. -1984. Т.43, Вып.2. — С.240−245.
  29. С.А. Особенности кинетических свойств высокоочищенной НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы из надпочечников кролика / С. А. Струмило, Н. М. Викторович, В. В. Виноградов // Докл. АНБССР. -1984.-Т. 28, № 3,-С. 268−271.
  30. Н.И. Очистка и свойства NADP-зависимой изоцитратдегидрогеназы из коры надпочечников быка / Н. И. Таранда, В. В. Виноградов, С. А. Струмило // Укр. биохим. ж. 1987. — Т. 59, № 1. — С. 24−29.
  31. Ю.М. Аспартат-трансаминада: структурно динамические аспекты механизма действия / Ю. М. Торчинский, Э. Г. Арутюнян, В. Н. Малашкевич и др. // Киев: 5 Всес. биохим. съезд. Тез. симп. докл. -1986. — V.I. — С.23−24.
  32. Н.Ю. Состояние системы глутатионпероксидазы-глутатионредуктазы в стимулированном к регенерации органе и ее роль в клеточной пролиферации: Дис. канд. биол. наук / Н. Ю. Федорова. ВГУ, Воронеж, 1999. — 186 с.
  33. М. Генетический контроль клубенек-стимулируемой аспартатаминотрансферазы-2 из симбиотический клубеньков гороха (Pisum sativum. L.) / М. Федотова, А. Борисов, В. Цыганов и др. // 9 Бах. Коллок. По азотфиксации, посвягц. Памяти чл.-кору РАН
  34. B.Л.Кретовича, Москва, 24−26 янв., 1995: Тез. докл. Пущино, 1995.1. C. 46.
  35. Abrunzese F. Lack of correlation between m-RNA expression and enzymatic activity of the aspartate aminotransferase isoenzymes in various tissues of the rat / F. Abrunzese, M. Geco, E. Perlino et al. // FEBS Lett. -1995. V.366, № 2−3. — P.170−172.
  36. Ali B.R.S. Pyridoxal arsenate as a prosthetic group for aspartate aminotransferase / B.R.S. Ali, H.B.F. Dixon // Biochem. 1992. — V.284, № 2. — P.349−352.
  37. Allen B.W. Cauliflower curds of different cultivars show distinct isoenzyme in asid phosphatases and aspartate aminotransferase / B.W. Allen, P.W. Goodenough, J.S.C. Lee et al. // Biochem. Soc. Trans. 1986. — V.14, № 2. — P.455−456.
  38. Appenroth K.J. Photophysiology of turion formation and germination in Spirodela polyrhiza / K.J. Appenroth, S. Teller, M. Horh // Biologia plantarum 3S (1). 1996. — P. 95−106.
  39. Arrio-Dupont M. Interactions between aspartate aminotransferase promoters observed during holoenzyme reconstitution / M. Arrio-Dupont, I. Cournil // Biochem. and Biophys. 1975. — V.64, № 4. — P. 1119−1125.
  40. Aslam M. Role of Nitrate and Nitrite in the Induction of Nitrite Reductase in Leaves of Barley Seedlings / M. Aslam, R.C. Huffaker // Plant Physiol. -1989. V. 91,№ 3.-P. 1 152−1156.
  41. Beevers L. Nitrate and Nitrite Reduction / L. Beevers, R.H. Hageman // The Biochemistry of Plants. A Comprehensive Treatise. Amino Acids and Derivatives / Ed. Miflin B.J. N.Y., L., etc.: Acad. Press, 1980. V. 5. — P. 115−168.
  42. Bell J.L. Subcellular distribution of the isoenzymes of NADP isocitrate dehydrogenase in rat liver and heart / J.L. Bell, D.N. Baron // Enzymol. biol. et clin. 1968. — V. 9, № 5. — P. 393−399.
  43. Birdo L. The active site of Sulfolobus solfataricus aspartate aminotransferase / L. Birdo, M.A. Arnone, M.V. Cubellis et al. // Biochim. et Biophys. acta. Protein Struct, and Mol. Enzymol. 1991. — V. 1080, № 3. -P. 198−204.
  44. Boiffm V. Eucalypt NADP-dependent isocitrate dehydrogenase: cDNA cloning and expression in ectomycorrhiza / V. Boiffin // Plant Physiol. -1998. -V. 117. P. 939−948.
  45. Borthwick A.C. The phosphorylation of Escherichia coli isocitrate dehydrogenase in intact cells / A.C. Borthwick, W.H. Holms, H.G. Nimmo 11 Biochem. J. 1984. — V. 222, № 4. — P. 797−804.
  46. Bossa F. Identifications di residue aminoacidici nel centra attivo dell aspartato aminotransferasi solubile del coure di maiall / F. Bossa, D. Barra // Asta vitaminol. et enzymol. 1974. -V.28, № 6. — P.253−257.
  47. Brouquisse R. Characterization of a cytosolic aconitase in higher plant cells / R. Brouquisse, M. Nishimura, J. Gaillard et al. // Plant Physiol. 1987. — V. 84.-P. 1402−1407.
  48. Bryan K.K. Advances in the biochemistry of amino acid biosynthesis / K.K. Bryan // In Advances in Nitrogen Assimilation, ed. B.J.Miflin, P.J.Lea. San Diego: Academic, 1990. P. 161−195.
  49. Burke Z.A. Isocitrate and oxoglutarate dehydrogenase activities of murinedystrophic skeletal muscle / Z.A. Burke, J.J. Heffron // Biochem. Soc. Trans. 1987. — V.15, № 2. — P. 233−234.
  50. Busquets M. Effect of phosphate and other inorganic anions on the activity of chicken liver cytosolic aspartate aminotransferase / M. Busquets, A. Cortes, J. Bozal // Int. J. Biochem. 1985. — V.17, № 8. — P.931−936.
  51. Campbell W.H. Nitrate Reductase and Its Role in Nitrate Assimilation in Plants / W.H. Campbell // Physiol. Plantarum. 1988. V. 74, № 1. — P. 214 219.
  52. Carlier M.F. Etude physicochimigul d, une isocitrate dehydrogenase. Modulation de 1, activity enzymatigue par les substratis et les coenzymes / M.F. Carlier // Muse doct. sei. phys. Paris. Univ. Pari-sud. 1976. — P. l 18.
  53. Carry R.A. Purification, properties and kinetic observations of the isoenzymes of maize / R.A. Carry, L.P. Ting // Arch. Biochem. and Biophys. -1979. V. 176, № 2. — P. 501−509.
  54. Cascante M. Purification and comparative studies of several mitochondria aspartate aminotransferases from avian liver / M. Cascante, A. Cortes, J. Bozal // Int. J. Peptide and Protein Res. 1987. — V.30, № 5. — P.668−675.
  55. Chatterjee S.R. Regulation of Nitrate Assimilation in Higher Plants under Light-dark Conditions / S.R. Chatterjee, M.S. Naik // Proc. Indian Natn. Sci. Acad. 1993. — V. B59, № ¾. — P. 209−218.
  56. Chen R.-D. Chromatographic and immynological evidence thet chloroplastic and cytosolic pea NADP-IDHs are distinct isoenzymes / R.-D. Chen, E. Bismuth // Planta. 1989. — V. 17, № 8. — P. 157−163.
  57. Chen R.-D. Do the mitochondria provide the 2-oxoglutarate needed for glutemete synthesis in higher plant chloroplasts? / R.-D. Chen, P. Gadal // Plant Physiol Biochem. 1990. — V. 28. — P. 141−145.
  58. Chen R.-D. Purification and comparation properties of the cytosolic isocitrate dehydrogenase (NADP) from pea (Pisum sativum) roots and green leaves / R.-D. Chen, P. Marchal, J. Vidal et.al. // Eur. J. Biochem. 1988. -V. 175, № 3. — P. 565−572.
  59. Chen R.-D. Structure, functions and regulation of NAD and NADP dependent isocitrate dehydrogenases in higher plants and in other organisms / R.-D. Chen, P. Gadal // Plant Physiol Bioghem. 1990. — V. 28.-P. 411 427.
  60. Christ N. Studies on the stereospecificity of hydrogen transfer by NAD (P) analogues / N. Christ, D. Rakow, H. Cooper // Z. Anal. Chem. 1976. — V. 279, № 2.-P. 159−163.
  61. Ciereszko A. Isdation and characteristics of aspartate aminotransferase from boar spermatozoa / A. Ciereszko, J. Strezek // Int. J.Biochem. 1989. — V. 21, № 12. -P.1343−1351.
  62. Colman R.F. Binding of substrates by native and chemically modified isocitrate dehydrogenase / R.F. Colman // Biochim. et. biophys acta. 1969. -V. 191, № 2. — P. 469−472.
  63. Cooper T.G. Mitochondria and glyoxysomes from castor been endosperm / T.G. Cooper, H. Beevers //J. Biol. Chem. 1969. — V. 244. — P. 3507−3513.
  64. Corpas F.J. Peroxisomal NADP-dependent isocitrate dehydrogenase. Characterization and activity regulation during natural senescence / F.J. Corpas, J.B. Barroso, L.M. Sandalio et al. // Plant Physiol. 1999. — V. 121, № 3. — P. 921−928.
  65. Cozzone A.J. Les volte-face des bacteries / A.J. Cozzone // La Recher-che. -1986.-№ 183.-P. 1587−1588.
  66. Cremel G. Simultaneous purification by affinity chromatography of rat liver mitochondrial and malate dehydrogenase and electrophoretic properties / G. Cremel, D. Filliol, A. Waksman // Anal. Biochem. 1985. — V.150, № 2. -P.232−336.
  67. Cronin C.N. Role of arginine-292 in the substrate specificity of aspartate aminotransferase as examined by site-directed mutagenesis / C.N. Cronin, J.I. Kirsch // Biochemistry. 1988. — V.27. — P.4572−4579.
  68. Czerwinski E.W. Apreliminary cristallografic study of isocitrate dehydrogenase from Azotobacter vinelanii / E.W. Czerwinski, P.M. Bethge, F.S. Mathens et. al. // J.Mol.Biol. 1977.-V. 166, № l.-P. 181−187.
  69. Das Sudipta. Tissue distribution of alanine and aspartate aminotransferases in an indian air-breathing fish, Channa punctatus (Bloch) / Das Sudipta, Samantaray Kasturi, Das Asit Baran 11 Proc. Indian Nat. Sci. Acad. 1986. -V.52, № 5. — P. 637−641.
  70. Davis В.J. Disk electrophoresis. II. Method and application to human serum proteins/ B.J. Davis //N. Y. Acad. Sci. 1964. -V. 121. — P. 404−407.
  71. Dean A.M. Phosphorylaion inactivates Escherichia coli isocitrate dehydrogenase by preventing isocitrate binding / A.M. Dean, Melissa H.J. Lee, D.E. Koshland // J. Biol. Chem. 1989. — V. 264, № 34. — P. 2 048 220 486.
  72. Dean A.M. Electrostatic and steric contributions to regulation the active site of isocitrate dehydrogenase / A.M. Dean, D.E. Koshland // Science. 1990. -V. 249, № 4972. — P. 1044−1046.
  73. Elias B.A. Alpha-ketoglutarate supply for amino acid syntesis in higher plant chloroplast. Intrachloroplastic localization of NADP-specific isocitrate dehydrogenase / B.A. Elias, G.V. Givan // Plant Physiol. 1977. — V. 59, № 4. — P. 738−740.
  74. Fan C.C. Studies of a reactive histidine of diphosphopyridine nucleotide -linked isocitrate dehydrogenase from bovine heart / C.C. Fan, W.J. Stegeman, G.W.E. Plaut // Arch. Biochem. and Biophys. 1977. — V. 184, № 1.-P. 125−134.
  75. Farnham M.W. Aspartate aminotransferase in Alfa alfa root nodules. Immunological distinction between two forms of the enzyme / M.W. Farnham, S.S. Miller, S.M. Griffith et al. // Plant Physiol. 1990. — V.93, №>2. P. 603−610.
  76. Fatania H.R. Intracellular distribution of NADP-linker isocitrate dehydrogenase, fumarase and citrate synthase in bovine heart muscle / H.R. Fatania, K. Dalziel // Biochim. et biophys. acta. 1980. — V. 631, № 1. — P. 11−19.
  77. Fieuw S. Cloning and expression analysis of the cytosolic NADP-dependent isocitrate dehydrogenase from potato / S. Fieuw // Plant Physiol. 1995. — V. 107. — P. 905−913.
  78. Finer-Moore J. Access to phosphorylation in isocitrate dehydrogenase may occur by domain shifting / J. Finer-Moore, S.E. Tsutakawa, D.B. Cherbavaz et al. // Biochemistry. 1997. — V. 36, № 45. — P. 13 890−13 896.
  79. Friga G.M. Isolation and properties of an isocitrate dehydrogenase from Anacystis nidulans / G.M. Friga, G.L. Farlcas // Arh. Microbiol. 1981. -V.129, № 5. — P.331−334.
  80. Gallardo F. Changes in NADP-linked isocitrate dehydrogenase during fruit ripening. Characterization of the predominant cytosolic enzyme from green and ripe pericarp / F. Gallardo // Planta. 1995. — V. 196. — P. 148−154.
  81. Galvez S. Purification and characterization of chloroplastic NADP-isocitrate dehydrogenase from mixotrophic tobacco cells / S. Galvez, E. Bismuth, C. Sarda et al. // Plant Physiol. 1994. — V. 105. — P. 593−600.
  82. Galvez S. Identification of tobacco cDNA encoding a cytosolic NADP-isocitrate dehydrogenase / S. Galvez // Plant Mol. Biol. 1996. — V. 30. — P. 307−320.
  83. Galvez S. Are isocitrate dehydrogenases and 2-oxoglutarate involved in the regulation of glutamate synthesis? / S. Galvez, M. Lancien, M. Hodges // Trends Plant Sci. 1999. — V. 4. — P. 484−490.
  84. Garnak M. Phosphorylation of isocitrate dehydrogenase of Escherichia coli / M. Garnak, M.C. Reeves // Sciens. 1979. — V.203. — P. 1111−1112.
  85. Gehring H. Syncatalic sulfhydryl group modification in mitochondrial aspartate aminotransferase from chicken and pig heart / H. Gehring, P. Christen // Biochem. and Biophys. 1975. — .63, № 2. — P.441−447.
  86. Gianini I. Fast conformational chenge at the active site of aspartate aminotransferase /1. Gianini, V. Baroncelli, G. Boccalon et al. // FEBS Lett. 1975. — V.54, № 3. — P.307−310.
  87. Gil M. Intramitochondrial location and some characteristics of chicken liver aspsrtate amitransferase / M. Gil, M. Cascante, A. Cortes et al. // Int. J. Biochem. 1987. — V.19, № 4. — P. 355−363.
  88. Griffith S.M. Aspartate aminotransferase in Alfa alfa root nodules. Purification and partial characterization / S.M. Griffith, C.P. Vance // Plant Physiol. 1989. — V.90, № 4, — P.1622−1629.
  89. Goebell H. Die intracellulare verteilung von DPN- und TPN-specifichen isocitrate dehydrogenase / H. Goebell, D. Pette // Enzymol. biol. et clin. -1967. -V. 8, № 3. P. 161−175.
  90. Gray Gordon R. The role of mitichondrial NADP-isocitrate dehydrogenase in alternative pathway respiration / R. Gray Gordon, Mcintosh Lee // Plant Physiol. 1997. — V. 114, № 3. — P. 203−204.
  91. Gupta R.C. Isocitrate dehydrogenase of soybeans / R.C. Gupta, R. Naragan // Indian.G.Biochem. and Biophys. 1974. — V. 11, № 1. — P. 89−90.
  92. Henderson N.S. Isozymes of isocitrate dehydrogenase: subunit structure and intracellular location / N.S. Henderson // J.Exp. Zool. 1965. -V. 158, № 3. -P.263.
  93. Henson C.A. Characterizacion of NADP± isocitrate dehidrogenase from the host plant of lucerne (Medicago) root nodules / C.A. Henson, H.S. Duke, M. Collins // Physiol.Plant. 1986. — V. 67. — P. 538−544.
  94. Herzberg G.R. Blood amino acids and the distribution of alanine and aspartate amino transferases in fed and fasted murres (Uria aalge) / G.R. Herzberg 11 Сотр. Biochem. and Physiol. A. 1991. — V. 98, № 3−4. — P. 563−566.
  95. Higashi I. Studies on the isocitrate dehydrogenase. Some properties of isocitrate dehydrogenase of beef heart muscle /1. Higashi, E. Maruyama, I. Otani et al. // Biochem. 1965. — Y. 57, № 6. — P. 793−798.
  96. Huppe H.C. Integration of Carbon and Nitrogen Metabolism in Plant and Algal Cells / H.C. Huppe, D.H. Turpin // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1994.-V. 45.-P. 577−607.
  97. Hurley J.H. Structure of a bacterial enzyme regulated by phosphorylation isocitrate dehydrogenase / J.H. Hurley, P.E. Thorsness, V.
  98. Ramalingam et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. — V. 86, № 22. — P. 8635−8639.
  99. Hurley J.H. Structure of diphosphorydine nucleotide phosphate specific isocitrate dehydrogenase Escherichia coli / J.H. Hurley, A.M. Dean, S.K. Sohl et al. // Science. 1990. — V. 249, № 4972. — P. 1012−1016.
  100. Imperial S. Cytosolic aspartate aminotransferases from different chicken tissues purification and characterization of their multiple forms / S. Imperial, M. Busguets, A. Cortes et al. // Prep. Biochem. 1989. — V.19, № 2. — P. 113−127.
  101. Ingebretsen O.S. Properties of the nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-specific isocitrate dehydrogenase from Blastocladiella emersoni / O.S. Ingebretsen //J. Bacterial. 1975. — V.124, № 1. — P.65−72.
  102. Ioshiharu Y. A simple preparation method for apoaspartate aminotransferase from Escherichia coli B, and its pyridoxamine -5-phosphate / Y. Ioshiharu, K. Jun, V. Sinpei et al. // J. Biochem. 1985. -V.98,№ 4. -P.921−926.
  103. Ioshiharu Y. Distribution of aspartate aminotransferase activity in yeasts, and purification a Rhodotorula marina / Y. Ioshiharu, S. Masafumi, V. Sinpei //J. Biochem. 1990. — V. 107, № 1.- P. 151−159.
  104. Isshiki Shiro. Inheritance of glutamate oxaloacetate transaminase isozymes in kekiri (Cucumus melo kekiri group) / Isshiki Shiro, Ohmi Chie, Okubo Hiroshi // J. Fac. Agr. Kyushu Univ. 1991. — V.36, № 1−2. — P. 7982.
  105. Jennigs G.T. Purification and properties of NADP-dependent isocitrate dehydrogenase from the corpus lureum / G.T. Jennigs, J.W. Sadleir, P.M. Stevenson // Biochem. et biophys. acta. Gen. Subj. 1990. — V. 1034, № 2.-P. 219−227.
  106. Jton Hajime. Differential determination of GOT isoenzymes in sera and organs of experimental animals by the immunochemical method / Jton
  107. Hajime, Aolci Voshikazu, Teranishi Hirogasu // Jap. J Clin. Chem. 1986. -V.15, № 3. — P. 174−181.
  108. Jung K. Der Einflub von Piridoxal- 5- phosphataufdas Temperaturverhalten der Aspartataminotranfe rase -Isoenzyme / K. Jung, B. Ludtke, E. Egger // Z. lclin. Chem. und klin. Biochem. — 1975 — V.13, № 5. -P.179−181.
  109. Kintanar A. NMR observation of exchangeable protons of pyridoxal phosphate and histidine residues in cytosolic aspartate aminotransferase // A. Kintanar, C.M. Metzler, D.E. Metzler et al. // J. Biol. Chem. 1991. — V. 266, № 26. — P. 17 222−17 229.
  110. Kleber M.P. Control of NADP-specific isocitrate dehydrogenase from Acinetobacter calcoaceticus durch nukkodide / M.P. Kleber, H. Aurick // Eryeb. exp. und. 1977. — № 24. — P. 107−109.
  111. Kleinhofs A. Advances in nitrogen assimilation / A. Kleinhofs, R.L. Warner // In Intermediary Nitrogen Metabolism / Ed. Miflin B.J., Lea P.J. San Diego: Acad. Press., 1990. P. 89−120.
  112. Kornberg A. Di-anel triphosphopyridine nucleotide isocitrate dehydrogenase in yeast / A. Koruberg, W.E. Pricer // Biol.Chem. 1951. -V. 189, № 1. — P. 123−136.
  113. Kornberg A. Di-anel triphosphopyridine nucleotide isocitrate dehydrogenase in yeast / A. Koruberg, W.E. Pricer // Biol.Chem. 1951. -V. 256, № 1. — P. 335−342.
  114. Krasnuk M. Electrophoretic studies of several dehydrogenase on relation to the cold toleranse of alfalfa / M. Krasnuk, G.A. Jung, F.M. Witham // Cryobiology. 1976. — V.13, № 3. — P. 375−393.
  115. Krawetz S.A. Kinetics of pyridine nucleotide transhydrogenase from Chlorella / S.A. Krawetz, C.F. Israelstam // Plant Sci. Lett. 1978. — V. 12, № 3,-P. 323−326.
  116. Kruse A. Antisense inhibition of cytosolic NADP-dependent isocitrate dehydrogenase in transgenic potato plants / A. Kruse // Planta. 1998. — V. 205. — P. 82−91.
  117. Kulkarni A.P. Estimation of molecular parameters of proteins by gel chromatography on Sephadex G-150 / A.P. Kulkarni, K.N. Mehrotra // Anal. Biochem. 1970. — V. 38, N 1. — P. 285−288.
  118. Kumar A. Urinary aspartate transaminase (AST) activity and detection of its inhibitors in normal human urine / A. Kumar, H.N. Pandey, G. Sharma et al. // Indian J. Physiol. And Pharmacol. 1987. — V.31, № 1. -P. 12−18.
  119. Lambing S.L. Buffers for the reconstitution of aspartate aminotransferase / S.L. Lambing, L.C. Foster, D.J. Kearney et al. // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1988. — V. 151, № 2. — P. 693−700.
  120. Lancien M. Simultaneous expression of NAD-dependent isocitrate dehydrogenase and other Krebs cycle genes after nitrate re-supply to short-term starved Nicotiana tabacum / M. Lancien // Plant Physiol. 1999. — V. 117. — P. 717−726.
  121. Lee Su Min. Radiation sensitivity of an Escherichia coli mutant lacking NADP-dependent isocitrate dehydrogenase / Lee Su Min, Koh Ho-Jin, Huh Tae-Lin et al. // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1999. — Y. 254, № 3.- P. 647−650.
  122. Lieberman M. Respiratory electron trasport / M. Lieberman, J.E. Bacer//Annual Rev. Plant Physiol. 1965. -№ 16. — P. 343−365.
  123. Lillo С. Light Regulation of Nitrate Reductase in Green Leaves of Higer Plants / C. Lillo // Physiol. Plantarum. 1994. — V. 90, № 4. — P. 616 620.
  124. Loftus T.M. Isolation, characterization, and disruption of the yeast gene encoding cytosolic NADP-specific isocitrate dehydrogenase / T.M. Loftus, L.V. Hall, S.L. Anderson et al. // Biochemistry. 1994. — V. 33, № 32.-P. 9661−9667.
  125. Loulakakis K.A. The seven NAD (H)-glutamate dehydro-genase isoenzymes exhibit similar anabolic and catabolic activities / K.A. Loulakakis, K.A. Roubelakis Angelakis // Phisiol.Plant. 1996. — V. 96. — P. 29−35.
  126. Lowry O. Protein measurement with the Folin-phenol reagent / O. Lowry, N. Rosebrough, A. Farr et al. // J. Biol. Chem. 1951. — V. 194. — P. 265−275.
  127. Magar E. The subsnits of porcine heart TPN-linked isocitrate dehydrogenase / E. Magar, J.E. Robbins // Biochem. et Biophys. Acta. -1969. V. 191, № 1. — p. 173−176.
  128. Malashkevich V.V. Crystal structure of the closed from of chicken cytosolic aspartate aminotransferase at 1,9°A resolution / V.V. Malashkevich, B.V. Strokopytov, V.V. Borisov et al. // J. Mol. Biol. 1995. — V. 247, № 1. — P. 111−124.
  129. MaiT J.J. Concerted inhibition of NADP-specific isocitrate dehydrogenase and the implications for metabolic regulation / J.J. Marr, M.M. Weber // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1969(a). — V.35, № 1. -P.12−19.
  130. McCormik A. Aspartate aminotransferase from ribbed mussel gill tissue: reactivity with p-L-cysteinesulfinic acid and other properties / A. McCormik, T. Payntep Kennedy // Сотр. Biochem., and Physiol. 1986. -V.84, № 2. — P.163−166.
  131. Mesecar A.D. Orbital steering in the catalytic power of enzymes: Small structural changes with larg catalytic consequences / A.D. Mesecar, B.K. Stoddard, D.E. Koshland // Science. 1997. — V. 277, № 5323. — P. 202−206.
  132. Miyarawa Meiji. Construction of aminotransferase chimeras and analysis of their substrate specificity / Miyarawa Meiji, Kawaguchi Shinichi, Okamoto Akihiro et al. // Biochem. 1994. — V. l 15, № 3. — P.568−577.
  133. Munilla-Moran R. Biochemical studies in marine species II. NADP-dependent isocitrate dehydrogenase from turbot (Scophthalmus maximus L.) larvae / R. Munilla-Moran // Compar. Biochem. and Physiol. B. — 1994. — V. 107, № 1. — P. 61−68.
  134. Muro-Pastor M.I. Purification and properties of NADP-isocitrate dehydrogenase from the inicellular cyanobacterium Synechocystis sp PCC6803 / M.I. Muro-Pastor, F.J. Florencio // Eur. J. Biochem. 1992. — V. 203, № l.-P. 99−105.
  135. Naguib M.I. Interaction of heavy metals with growth and enzymatic activities in melon seedlings / M.I.Naguib, M.S.Khalil // Egypt. J. Physiol. Sci. 1986. — V. 13, № 1−2. — P.11−18.
  136. Nero T.L. Aspartate aminotransferase: Investigation of the active sites / T.L. Nero, M.G. Wong, S.W. Oliver et al. // J. Mol. Graph. 1990. — V. 8, № 2. -P. 111−115.
  137. Niblock A.E. Serum aspartate aminotransferase storage and the pyridoxal phosphate / A.E.Niblock, F.Y.Leung, A.R.Henderson // J. Lab. and Clin. Med. 1986. — Y. 108, № 5. — P. 461−465.
  138. Noriyuki F. Purification and characterization of monomeric isocitrate dehydrogenase with NADP-specificity from Vibrio norahaemolyticus Y-4 / F. Noriyuki, I. Sigeki, S. Takehiko et al. // J. Biochem. 1992. — V. 112, № 6.-P. 849−855.
  139. Oaks A. Efficiency of Nitrogen Utilization in C3 and C4 Cereals / A. Oaks // Plant Physiol. 1994. — V. 106, № 2. — P. 407−414.
  140. Paminehi Kao V.L. Protein interaction assisted purification of mitochondrial aspartate aminotransferase from human plasma, and thestructural comparison with ints tissue from / Kao V.L. Paminehi, Tom R.C. Boyale // Biochem. 1993. — V. 17. — P.48.
  141. Panteghini M. Evaluation of an immunochemical method for determination of aspartate aminotransferase isoenzymes in human serum / M. Panteghini, A. Malchiodi//LAB. 1985. — V.12, № 1.-P.43−47.
  142. Panteghini M. Automated measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase by selective proteolysis with proteinase-K / M. Panteghini, R. Bonora, F. Pagani // Clin. Chem. 1993. — V.39, № 10. — P.2199−2200.
  143. Passarella S. The roll of metal ions in the uptake of aspartate aminotransferase and dehydrogenase into isolated rat liver mitochondria in vitro / S. Passarella, E. Marra, A. Atlante et al. // FEBS Lett. 1985. -V.189, № 2. — P.235−240.
  144. Petcu L.G. NADP-specific isocitrate dehydrogease in regulation of urea synthesis in rat hepatocytes / L.G. Petcu, G.W.E. Plaut // Biochem. J. -1980. -V. 190. P. 581−592.
  145. Pfister K. Conformational changes in aspartate aminotransferase. Effect of active site ligands or peptide hydrogen-deuterium exchange / K. Pfister, E. Sandmeier, W. Berchtold et al. // Biol. Chem. 1985. — V260, № 21.-P.11 414−11 421.
  146. Plaut G.W.E. Substrate activity of structural analogs of isocitrate for isocitrate dehydrogenases from bovine heart / G.W.E. Plaut, R.L. Beach, J. Aogaichi // Biochemistry. 1975. — V. 14, № 12. — P. 2581−2588.
  147. Popova T.N. Citrate and isocitrate in plant metabolism / T.N. Popova, M.A.A. Pinheiro de Carvalho // Biochim. et Biophys. Acta 1364. 1998. -P.307−325.
  148. Quiroga C. Separation and kinetic properties of the molecular forms of chicken liver cytoplasmis aspartate aminotransferase / C. Quiroga, M. Busguets, A. Cortes et al. // Int. J. Biochem. 1985. — V. 17, № 11. — P. 1185−1190.
  149. Rafalowska U. Charakterystyka niektorych wlasnosci izocytrynianowej dehydrogenazy NADP zaleznej w morgu szezure / U. Rafalowska, A. Pastuszko, A. Gronuk // Neurol, i neurochir. pol. 1974. — V. 8, № 5. — P. 673−676.
  150. Raiser W.M. Posttranslational Regulation of Nitrate Reductase in Higher Plants / W.M. Raiser, S.C. Huber // Plant Physiol. 1994. — V. 106, № 3 3.-P. 817−821.
  151. Rajasekhar V.K. Regulation of Induction of Nitrate Reductase and Nitrite Reductase in Higher Plants / V.K. Rajasekhar, R. Oelmuller // Physiol. Plantarum. 1987. — V. 71, № 4. — P. 517−521.
  152. Robinson J.M. Carbon Dioxide and Nitrite Photoassimilatory Processes Do Not Intercompete for Reducing Equivalents in Spinach and Soybean Leaf Chloroplasts / J.M. Robinson // Plant Physiol. 1986. — V. 80, № 3. — P. 676−684.
  153. Robinson S.A. The role of glutamate dehydrogenase in plant metabolism / S.A. Robinson, A.P. Slade, G.G. Fox et al. // Plant Physiol. -1991. V. 89.-P. 1190−1195.
  154. Romestant M. Aspartate aminotransferase isoenzymes in Leptosphaeria michotii. Properties and intracellular location / M. Romestant,
  155. Zerebroff, J. Noal lac-Depegre et al. // J. Biochem. -1989. V.180, № 1. — P. 153−159.
  156. Roos E.E. Isocitric dehydrogenase and isocitric liase in heterotic and nonheterotic maize (Zea mays L.) / E.E. Roos // Crop. Sci. 1968. — V. 8, № 6.-P.683.
  157. Ryo-Hei Y. Slow and tight-binding inhibition of aspartate minotransferase by a-hudrazinosuccinate / Y. Ryo-Hei, W. Yasuo, I. Akio et al. // Biochem. et Biophys acta: Protein Struct, and Mol. Enzymol. -1985. V.831,№ 1. — P.82−88.
  158. Saidman B.O. Isoenzymatic studies of alcohol dehydrogenase and glutamate oxalacetate transaminase in four south American species of Prosopis and their natural hybrids / B.O. Saidman // Silvae genet. 1986. -V. 35, № 1. — P. 3−10.
  159. Saton Y. Isocitrate degydrogenase from the maturing castor bean seeds / Y. Saton, V. Yamada // Sci.Pap.Coll.Gen.Educ.Univ.Tokyo. 1970. -V. 20, № 1.-P.83−91.
  160. Scandurra R. Role of SH groups in mitochondrial aspartate aminotransferase from beef kidney / R. Scandurra, J.E. Churchich, L. Politi // Acta vitaminol. et enzymol. 1974. — V.28, № 6. — P.290−292.
  161. Scheible W-R. Nitrate acts as a signal to induce organic acid metabolism in tobacco / W-R. Scheible // Plant Cell. 1997. — V. 9. — P. 783 798.
  162. Schrader L.E. Nitrate Uptake, Reduction and Transport in The Whole Plant / L.E. Schrader, R.J. Thomas // Nitrogen and Carbon Metabolism / Ed. Bewley J.D. The Hague, Boston, L.: Martinus Nijhoff / Dr W. Junk Publisher, 1981. P. 49−93.
  163. Seery P. Physicochemical properties of isocitrate dehydrogenase from lactating bovine mammary gland: effect of substrates and cofactors / P. Seery, H.M. Farrell // Arch. Biochem. Biophys. 1989. — V. 274, № 2. — P. 453−462.
  164. Shimeno S. Enzymatic properties of NADP-dependent isocitrate dehydrogenases from liver of Septola qutnomezadiata / S. Shimeno, T. Gotoh, Y. Kimura // Bull. Mar.Sci. and Fish. 1995. — № 15. — P. 59−65.
  165. Singh K. Studies on serum aspartate aminotransferase and serum L-alanine aminotransferase of common frog Rana tigrina / K. Singh, R. Singh //J. Cuit. Biosci. 1984. — V. 1, № 1. — P. 45−49.
  166. Sloble W. Domain structure of isocitrate dehydrogenase from Azotobacter vinelandii / W. Sloble, G. Voordouw // Eur. J. Biochem. 1981. -V. 120, № 1. — P. 15−20.
  167. Smith C.M. Activities of NAD- and NADP-specific isocitrate dehydrogenase in rat liver mitochondria / C.M. Smith, G.W.E. Plaut // Eur. J. .Biochem. 1979. -V.97, № 1. — P. 283−295.
  168. Solomonson L.P. Assimilatory Nitrate Reductase: Functional Properties and Regulation / L.P. Solomonson, M.J. Barber // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1990. -V. 41. — P. 225−253.
  169. Steen I.H. Biochemical and phylkogenetic characterization of isocitrate dehydrogenase from a hyperthermophilic archaeon, Archaeoglobus fulgidus / I.H. Steen, T. Lien, N.-L. Berkeland // Arch. Microbiol. 1997. — V. 168, № 5. — P. 412−420.
  170. Stitt M. Nitrate regulation of metabolism and growth / M. Stitt // Curr. Opin. Plant Biol. 1999. — V. 2. — P. 178−186.
  171. Suzuki A. Glutamate synthase: physiochemical and functional properties of different forms in higher plants and other organisms / A. Suzuki, P. Gadal // Physiol. Veg. 1984. — V. 22. — P. 461 -471.
  172. Toney M.D. Tyrosine 70 increases the coenzyme affinity of aspartate aminotransferase. A site-directed mutagenesis study / M.D. Toney, J.F. Kirsch // J. Biol. Chem. 1987. — V. 262, № 26. — P. 12 403−12 405.
  173. Torchinski Y.M. Vitamin B6Pyridoxal Phosphate / Y.M.Torchinski // Chem. Biochem. and Med. aspectes. Pt. B. New York ea., 1986. — P. 169 221.
  174. Toshiharu Y. Distribution and cellular localization of aspartate aminotransferase isoenzymes in rise / Y. Toshiharu, M. Kazunari, Y. Shinpei // Biosci., Biotechnol. and Biochem. 1993. — V.57, № 12. -P.2081−2084.
  175. Toshiharu Y. Purification and characterization of aspartate aminotransferase isoenzymes from rice bran / Y. Toshiharu, S. Masayuki, M. Shinya et al. // Biosci., Biotechnol. and Biochem. 1993. — V.37, № 12. — P.2074−2080.
  176. Turano F.J. Rapid purification and thermostability of the cytoplasmic aspartate aminotransferase from carrot suspension cultures /F.J. Turano, B.J. Wilson, B.F. Matthews // Plant Physiol. 1991. — V. 97, № 2. — P. 606 612.
  177. Turpin D.H. Integration between Photosynthesis, Respiration and Nitrogen Assimilation / D.H. Turpin, H.G. Weger // Plant Physioligy, Biochemistry and Molecular Biology / Eds. Dennis D.T., Turpin D.H. N.Y.: Longman Sci. Techn, 1992. P. 423−433.
  178. Uhr M.L. The kinetics of pig heart triphosphopyridine nucleotide-isocitrate, end product inhibition, and isotope exchange studies / M.L. Uhr, V.W. Thompson, W.W. Cleland // J. Biol. Chem. 1974. — V. 249, № 9. — P. 2920−2927.
  179. Vance K. Molecular features of N and С metabolism in Alfalfa root nodules / K. Vance, S. Gantt, M. Farnham et al. // International Symbiosis Congress. 1991. P. 53.
  180. Varela I. Photoaffmity labelling shows that Escherichia coli isocitrate dehydrogenase kinase/phosphatase contains a single ATP binding site / I. Varela, FI.G. Nimmo//FEBS Lett. 1988. -V. 231, № 3. — P. 361−365.
  181. Vatal M. Effect of lithium carbonate on serum glutamate oxaloacetate transaminase, glutamate pyruvate transaminase and lactate dehydrogenase of rats / M. Vatal, A.S. Aiyar // Indian J. Exp. Biol. 1988. — V. 26, № 10. — P. 801−803.
  182. Vessal M. Partial purification and kinetic properties of human placental cytosolic aspartate transaminase / M. Vessal, M. Taher // Compar. Biochem. and Physiol. B. 1995. — V. l 10, № 2. — P.431−437.
  183. Wallsgrove R.M. Photosynthesis, Photorespiration and Nitrogen Metabolism / R.M. Wallsgrove, A.J. Keys, P.J. Lea et al. // Plant Cell Environ. 1983. — V. 6. — P. 301−309.
  184. Walsh K. Branch point control by the phosphorylation state of isocitrate dehydrogenase. A qualitative examination of fluxes during a regulatory transition / K. Walsh, D.E. Koshland // J. Biol. Chem. 1985. — V. 260, № 11.-P. 8430−8437.
  185. Wang Y. Human erythrocytic NADP-dependent isocitrate dehydrogenase / Y. Wang, E.J. Van // Internal. Biochem. 1977. — V. 8, № 11. — P. 795−799.
  186. Winfield C.S. Evolutionary analysis of aspartate aminotransferase / C.S. Winfield, K.Y. Farnden, P.H. Reenolds et al. // Mol. Evol. 1995. -V40, № 4. — P.455−463.
  187. Winter H.C. Specificity of aspartate aminotransferase from leguminow plants for 4-substituted glutamic acids / H.C. Winter, E.E. Dekker // Plant Physion. 1989. — V.89, № 4, — P. 1122−1128.
  188. Yadav R.N. Brain isocitrate dehydrogenase and regulation by estradiol in femate rats of varios ages / R.N. Yadav, S.N. Singh // Biochem. Med. 1981. — V. 26, № 2. — P. 258−263.
  189. Yamanaka H. Assay of serum glutamic-oxaloacetic transaminase using malate dehydrogenase preparation obtained from Streptomyces aureofaciens / H. Yamanaka, C. Laluce, Oliveira-Neto G. de // Anal. Lett. -1995,-V. 28, № 13.-P. 2305−2316.
  190. Yaoi Т. Substrate recognition of isocitrate dehydrogenase and 3-isopropylmalate dehydrogenase from Thermus thermophilus HB8 / T. Yaoi, K. Miyazaki, T. Oshima // Biochem. 1997. — V. 121, № 1. — P. 77−81.
  191. Zemlyanukhin A. Isoforms of NADP-dependent pea leaf isocitrate dehydrogenase and ther properties / A. Zemlyanukhin, T. Popova, A. Eprintsev et. al. //Plenum Publishing Corporation. 1987. — P.401−407.
  192. Zhao Wen-Ning. Expression and gene disruption analysis of the isocitrate dehydrogenase family in yeast / Zhao Wen-Ning, McAlister-Henn Lee // Biochemistry. 1996. — V. 35, № 24. — P. 7873−7878.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!