Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Физико-химические свойства надфн-адренодоксин редуктазы и ее роль в гидроксилировании стероидов

Диссертация: Физико-химические свойства надфн-адренодоксин редуктазы и ее роль в гидроксилировании стероидов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Обнаружены конформационные изменения, сопровождающие химическую модификацию триптофановых остатков и проявляющиеся в изменении среднего расстояния между триптофанами и НАДФН-свя-зываодим центром фермента. Методом флуоресценции подтверждено образование комплекса адренодоксин-редуктаза — адренодоксин в стехиометрии 1:1. Связывание субстрата (адренодоксина) вызывает изменение полярности окружения… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • I. Митохондриалъные системы гидроксилировалия
    • 2. Свойства адренодоксина
    • 3. Свойства флавопротеинов .II
    • 4. Свойства адренодоксин-редуктазы
  • , 5. Взаимодействие адренодоксин-редуктазы с субстратами
    • 6. Реконструкция митохондриальной системы гидроксилировалия
  • ГЛАВА. Л.МЕГОДИЧЕСКАЯ ЧАСТ
    • I. Реактивы
    • 2. Приборы
    • 3. Методы исследования
    • 4. Выделение и очистка белковых препаратов
      • 4. 1. Получение митохондрий из коры надпочечников
      • 4. 2. Очистка адренодоксина
      • 4. 3. Очистка цитохрома с
      • 4. 4. Приготовление адренодоксин-сефарозы
      • 4. 5. Очистка адренодоксин-редуктазы
      • 4. 6. Выход белковых препаратов
      • 4. 7. Получение апоформы адренодоксин-редуктазы
      • 4. 8. Получение апоформы адренодоксина
  • ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
    • I. Реконструкция гидроксилирущей цепи
    • 2. Свойства адренодоксина и его взаимодействие с детергентами
    • 3. Физико-химические свойства адренодоксин-редуктазы
    • 4. Определение триптофановых остатков адренодоксин-редуктазы
    • 5. Исследование структуры адренодоксш-редуктазы методом селективного тушения флуоресценции
    • 6. Влияние НАДФН на триптофановую флуоресценцию адренодоксин-редуктазы
    • 7. Взаимодействие адренодоксин-редуктазы с адренодоксином
  • ГЛВА 1У. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  • ВЫВОДЫ

Физико-химические свойства надфн-адренодоксин редуктазы и ее роль в гидроксилировании стероидов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Флавинсодержащие ферменты принадлежат к наиболее распространенным в природе оксидоредуктазам. Они способны катализировать как терминальные, так и нетерминальные окислительно-восстановительные процессы, являясь компонентами электронтранспортных цепей.

НАДФН-адренодоксин редуктаза (E.C.I.6.7.I.), катализирующая восстановление одноэлектронного переносчика (адренодоксина) двух-электронным субстратом (НАДФН), является флавиновым ферментом. Она локализована во внутренней мембране митохондрий ряда органов (печень, почки, надпочечники, семенники, яичники), в которых осуществляются реакции гидроксилирования стероидных соединений.

Изучение механизма функционирования адренодоксин-редуктазы в гидроксилирующей цепи стало актуальным, поскольку адренодоксин-редуктаза катализирует скорость-лимитирующую реакцию электронного переноса в гидроксилирующей цепи. В связи с этим, перед нами была поставлена задача изучения свойств адренодоксин-редуктазы из митохондрий коры надпочечников с целью реконструкции цепи и получения более подробных данных о механизме электронного транспорта между адренодоксин-редуктазой и ее субстратами.

Для решения этой задачи необходимо было располагать высоко-очшценными препаратами всех компонентов митохондриальной системы гидроксилирования, в том числе, кроме адренодоксин-редуктазы, ад-ренодоксином и цитохромом Р-450, который является терминальным акцептором электронов данной системы.

С использованием аффинной хроматографии были получены высо-коочшценные препараты всех компонентов электрон-транспортной цепи. Подробно изучены физико-химические свойства адренодоксин-редуктазы, и в особенности ее оптические магнитные и люминесцентные свойства.

Для изучения роли флавиновой прост етической группы и трип-тофановых остатков в процессе переноса электронов, мы использовали люминесцентные методы исследования этого фермента в сочетании с химической модификацией его триптофановых групп. В ходе проведенных исследований было показано комплексообразование между компонентами цепи и обнаружено, что скорость электронного I транспорта в реконструированной системе лимитируется процессами комплексообразования между компонентами. Выявлены кинетические различия при использовании в качестве терминальных акцепторов цитохромов с и Р-450, изучено влияние среды на скорость электронного транспорта в реконструированной системе митохондриаль-ного гидроксилирования и определена локализация субстрат-связы-вающих участков на адренодоксин-редуктазе.

вывода.

1. Из митохондрий коры надпочечников выделены и очищены компоненты системы гидроксилирования стероидов, состоящей из адренодоксин-редуктазы, адренодоксина и цитохрома Р-450. Достигнута реконструкция в системе in vitro гидроксилирующей цепи, использующей в качестве донора электронов НАДФН, а в качестве терминального компонента цитохром с или цитохром Р-450.

2. Исследование процесса переноса электронов в реконструированной цепи показало, что для проявления активности адренодоксин-редуктазы необходимо ее комплексообразование со специфическим субстратом, адренодоксином. Показано, что образование комплекса происходит главным образом благодаря электростатическим взаимодействиям между ферментом и субстратом. Скорость восстановления конечных акцепторов (цитохромов с и Р-450) в реконт-струированной системе зависит от ионной силы, рН среды, а также концентрации и соотношений электронных переносчиков.

3. Установлено, что восстановление цитохромов с и Р-450 в реконструированной системе протекает по различным механизмам. Цитохром с оказывает ингибирующее влияние на восстановление цитохрома Р-450 в реконструированной системе, тогда как цитохром Р-450 активирует восстановление цитохрома с.

4. Изучены физико-химические свойства адренодоксин-редуктазы (молекулярная масса, содержание флавина, изоэлектрическая точка, спектральные, ЭПР и люминесцентные характеристики). Титрование с помощью J[ -бромсукцинимида показало, что фермент содержит 10 триптофановых остатков.

5. Методом селективного тушения флуоресценции определены константы тушения, степени доступности триптофановых остатков и простетической группы (ФАД) в нативном и денатурированном состояниях. Определено среднее расстояние между НАДФН-связыва-ющим центром фермента и триптофановыми остатками. Показано, что содержащиеся в ферменте триптофановые остатки подразделяются на три группы по степени удаленности от центра связывания НАДФН.

6. Обнаружены конформационные изменения, сопровождающие химическую модификацию триптофановых остатков и проявляющиеся в изменении среднего расстояния между триптофанами и НАДФН-свя-зываодим центром фермента. Методом флуоресценции подтверждено образование комплекса адренодоксин-редуктаза — адренодоксин в стехиометрии 1:1. Связывание субстрата (адренодоксина) вызывает изменение полярности окружения триптофановых остатков и ФАД, приводящее к изменению флуоресцентных свойств адренодоксин-редуктазы.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Hayano М., Dorfman R.J. On the mechanism of 11 p -hydroxi-lation of steroids. J.Biol.Chem., 1954, v. 211, N 1, p. 227−235.
  2. Cooper D.Y., Estabrook R.W., Rosenthal R.O. The stoichiomet-ry of C21-hydroxilation of steroids by adrenocortical mitochondria. J.Biol.Chem., 1963, v. 238, N 4, p. 1320−1323.
  3. Tomkins G.M., Michael P.J., Currant J.F. Studies of the nature of steroid 11 j} -hydroxilation. Biochim.Biophys.Acta, 1957, v. 27, N 2, p. 655−656.
  4. Tomkins G.M., Currant J.P., Michael P.J. Further studies of enzymatic adrenal 11 ji -hydroxilation, Biochim.Biophys.
  5. Acta, 1958, v. 28, N 2, p. 449−450.
  6. Omura Т., Sato R., Cooper D.Y., Rosenthal R.O., Estabrook R.W. Function of cytochrome P-450 of microsomes. Fed.Proc., 1965, v. 24, U 5, part 1, p. 1181−1189.
  7. Suzuki H., Kimura T. An iron protein as a component of steroid 11? -hydroxilation complex. Biochem.Biophys.Res.Com-mun., 1965, v. 19, N 3, p. 340−345.
  8. Ohashi M., Omura T. Presence of NADPH-cуtochrome P-450 reductase system in liver and kidney mitochondria. J.Biochem., 1978, v. 83, N1, p. 249−260.- 125
  9. Ghazarian J.G., Weber J.L., Sealy J.L. Solubilization of a chick kidney microsomal cytochrome P-450: Electron paramagnetic resonance studies of ligand interactions. FEBS Lett., 1978, v. 86, N 2, p. 213−219.
  10. Kimura Т., Ohno H. Preparation of testis non-heme iron protein and substitution for adrenodoxin by various non-heme proteins in steroid 11 p -hydroxilation. J.Biochem., 1968, N 6, p. 716−720.
  11. Kimura Т., Suzuki H. Components of the electron transport system in adrenal steroid hydroxilase. J.Biol.Chem., 1967, v. 242,1. N 3, p. 485−491.
  12. Kimura Т., Suzuki H., Padmanabhan R., Samejima Т., Tarutani 0., Ui N. Studies of steroids hydroxilase. Molecular properties of adrenal iron-sulphur protein. Biochemistry, 1969, v. 8, N 10, p. 4027−4031.
  13. Tanaka M., Hanui M., Yasunobu K. f Kimura T. The amino acid sequence of bovine adrenodoxin. J.Biol.Chem., 1973, v. 248, N 4, p. 1141−1157.
  14. Huang J.J., Kimura T. Studies of adrenal steroids hydroxilases. Oxidation-reduction properties of adrenal iron-sulfur protein (adrenodoxin). Biochemistry, 1973, v. 12, N 3, p. 406−409.
  15. Tagawa K., Arnon D.I. Ferredoxins as electron carriers in photosynthesis and in the biological production and consumption of hydrogen gas. Nature (London), 1962, v. 195, N 4841, p. 537 543.
  16. Horio Т., Yamashita T. Some properties of photosynthetic pyridine nucleotide reductase from spinach. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1962, v. 9, N 1, p. 142−149.
  17. Gibson J.P., Hall D.O., Thomley J.H.M., Whatlay W.R. Spinach ferredoxin complexes.- Proc.Natl.Acad.Sci. of USA, 1966, v. 56, N 5, p. 987−990.
  18. Kimura Т., Huang J.J. Studies of adrenal steroid hydroxilases. Optical absorption spectroscopy of adrenal iron-sulfur protein (adrenodoxin) and its apoproteins. Arch.Biochem.Biophys., 1970, v. 137, U 2, p. 357−364.
  19. С.С., Налбандян P.M. Кристаллический препарат адренодоксина железо-серного белка из коры надпочечников. — Биохимия, 1975, т.40, & I, с.48−53.
  20. Suhara К, Takemori Sh#, Katagiri М. Improved purification of bovine adrenal iron-sulfur protein. Biochim.Biophys.Acta, 1972, v. 263, N 1, p. 272−278.
  21. Ohnishi Т., Salerno J.C., Winter D.B., Lim J., Yu C.A., Yu L., King Т.Е. Thermodinamic and EPR characteristics of two ferre-doxin type iron-sulfur centres in the succinate ubuquinone reductase. J.Biol.Chem., 1976, v. 251, N 7, p. 2094−2104.
  22. Shleyer H., Cooper D.Y., Rosenthal 0. EPR studies of adrenocortical 11 p -hydroxilase system. In: — Magnetic resonance in Biological Research., (ed. C. Francom, Gordon-Breack Sci. Publ, N.Y.- London Paris), 1971, p. 247−264.
  23. Kimura Т., Ting J.J. Anomalous tyrosine emission at 331 nm in adrenal two iron and two labile sulfur protein (adrenodoxin): a possible tyrosine exciplex. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1971, v. 45, Я 5, p. 1227−1232.
  24. Kimura Т., Ting J.J., Huang J.J. Studies of adrenal steroid hydroxilases. Anomalous fluorescence of a tyrosyl residue in adrenal iron-sulfur protein (adrenodoxin). J.Biol.Chem., 1972, v. 247, N 14, 4476−4479.
  25. C.C., Демин Ю. Н., Налбандян P.M. Флуоресцентные свойства ферредоксина. Биохимия, 1977, т.42, № 6, с.1024−1030.- 127
  26. Cornog J.L., Jr., Adams W.R. The fluorescence of tyrosine in alkaline solutions. Biochim.Biophys.Acta, 1963, v.66, N 2, p. 356−365.
  27. Padmanabhan R., Kimura T. Extrinsic properties of optical activity in adrenal iron-sulfur protein (adrenodoxin). Bioche. Biophys.Res.Commun., 1968, v. 37, N 2, p. 363−368.
  28. Padmanabhan R., Kimura T. Studies on adrenal steroid hydroxi-lases.Extrinsic properties of the optical activity in adrenal iron-sulfur protein (adrenodoxin). J.Biol.Chem., 1970, v. 245, N 10, p. 2468−2475.
  29. Kieorell H. Modern trends in flavoprotein research. Proc. 4-th Int. Congr. Biochem., 1958, v. 8, p. 167−176.
  30. Massey V., Hemmerich P. Active site probes of flavoproteins.-Biochem .Soc.Trans., 1980, v. 8, N 3, p. 246−257.
  31. Mayhew S.G., Ludwig M. Plavodoxins and electron-transferring flavoproteins. Enzymes, 1975, v. 12, N 1, p. 57−118.
  32. Iyanagi Т., Mason H.S. Some properties of hepatic reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-cytochrome с reductase. Biochemistry, 1973, v. 12, N 12, p. 2297−2308.
  33. Vermilion J.L., Coon M.J. Highly purified detergent-solubili-zed NADPH-cytochrome P-450 reductase from liver microsomes.-Biochem.Biophys.Res.Commun., 1974, v. 60, N 4, p. 1315−1322.
  34. Vermilion J.L., Coon M.J. Properties of highly purified deter-gent-solubilized NADPH-cytochrome P-450 reductase from liver microsomes. In: Flavins and Flavoproteins, (ed. T.P.Singer, Amsterdam, Elsevier), 1976, 674−678.
  35. Suelter C.H., Metzler D.E. The oxidation of reduced puridine nucleotide analogy of flavin. Biochim.Biophys.Acta, 1960, v. 44, N 1, p. 23−33*
  36. Wu F. Y-H., MacKenzie R.E., McCormick D.B. Kinetics and mechanism of oxidation-reduction reactions between puridine nucleotide and flavins. Biochemistry, 1970, v. 9, N11, p. 22 192 224.
  37. Fisher J., Spencer R., Walsh C# Ensyme catalized redox reactions with the flavin analogues} 5-deazariboflavin, 5-deasari-boflavin 5-phosphate, and 5 deazariboflavin 5-diphosphate 5-adenosine ester. Biochemistry, 1975, v. 15, N 5, p.1054−1064.
  38. Jorns M.S., Hersh L.B. N-Methylglutamate synthetase: Substrate flavin hydrogen reactions probed with deazaflavin mononucleotide. J.Biol.Chem., 1975, v. 250, N 10, p. 3620−362'.
  39. Blankenborn G. Intermolecular coraplexis between N-methyl-1,4-dehydronicotinamide and flavins. Biochemistry, 1975, v. 14, N 15, p. 3172−3176.
  40. Porter D.G.T., Bright H.J. Oxidation of dihydronicotinamides by flavin in enzyme and model reactions. -J.Biol.Chem., 1980, v. 255, N 15, p. 7362−7370.
  41. Strittmater P., Rogers M.J., Spatz L. The binding of cytochrome b^ to liver microsomes. J.Biol.Chem., 1972, v. 247,1. N 22, p. 7188−7194.
  42. Yasukochi Y., Peterson J.A., Masters B.S.S. NADPH-cytochrome с (P-450) reductase. Spectrophotometry and stopped flow kinetic studies on the formation of reduced flavoprotein intermediates. J.Biol.Chem., 1979, v. 254, И 15, p. 7094−7104.
  43. Capeillere-Blandin C., Iwastubo M., Labeyrie F., Bray R.C. Flavocytochrome b2: Studies on intramolecular electron exchange between proBthetic groups. In: Flavins and Flavopro-teins, (ed. T.P.Singer, Amsterdam, Elsevier), 1976, p. 621−633.
  44. Lambeth J.D., Kamin H. Adrenodoxin-reductase adrenodoxin complex: Flavin to iron-sulfur electron transfer as the rate limiting step in NADPH-cytochrome c reduction reaction. J.Biol. ChemN, 1979, v. 254, N 8, p. 2766−2774.
  45. Murphy M.J., Siegel L.M. Siroheme and sirohydrochlorin: The basis for a new type porphyrin related prosthetic group common to both assimilatory and dissimilatory sulfite reductase. -J.Biol.Chem., 1973, v. 248, N 19, p. 6911−6919.
  46. Olson J.C., Ballou D.P., Palmer G., Massey V. The mechanism of action of xantine oxidase.- J.Biol.Chem., 1974, v. 249, N 14, p. 4363−4382.
  47. Aleman V., Handled P. Dehydroorotate dehydrogenase. 1. General properties. J.Biol.Chem., 1976, v. 242, N 18, p. 4087−4096.
  48. Davis K.A., Hatefi Y. Succinate dehydrogenase. 1. Purification, molecular properties and substructure. Biochemistry, 1971, v. 10, N 13, p. 2509−2516.
  49. Ragan C.Y., Racker E. Resolution and reconstitution of themitochondrial electron transport system. J.Biol.Chem., 1973, v. 248, Ж 19, p. 6876−6884.
  50. Tyson C.A., Lipscomb J.D., Gunsalus I. C, The roles of putida-redoxin and P-450eTn in methylene hydroxilation. J.Biol.Chem., 1. С 6Л11 972, v. 247, Л 18, p. 5777−5784.
  51. Foust G.P., Miayew S.G., Massey V. Complex formation between ferredoxin tryphosphopyridine nucleotide reductase and electron transfer proteins. J.Biol.Chem., 1969, v. 244, N 4, p. 964−970.
  52. Ueda Т., Coon M.J. Enzymatic oj oxidation. VII. Reduced di-phosphopyridine nucleotide rubredoxin reductase. Properties and function as an electron carrier in u) hydroxilation. J. Biol.Chem., 1972, v. 247, N 16, p. 5010−5016.
  53. Chu J-W., Kimura T. Studies on adrenal steroid hydroxilation. Complex formation of the steroid hydroxilase component. J. Biol.Chem., 1973, v. 248, N 14, p. 5183−5187.
  54. Sugiyama Т., Yamano T. Purification and crystallization of NADPH-adrenodoxin reductase from bovine adrenocortical mitochondria. FEBS Lett., 1975, v. 52, N 1, p. 145−148.
  55. Kido Т., Kimura T. The formation of binary and ternary complexes of cytochrome Р-450алчл with adrenodoxin-reductase adseerenodoxin complexes. J.Biol.Chem., 1979, v. 254, N 23, p. 11 806−11 815.
  56. Suhara K., Nakayama K., Takikawa 0., Katagiri M. Two forms of adrenodoxin-reductase from mitochondria of bovine adrenal cortex. Eur.J.Biochem., 1982, v. 125, N 3, p. 659−664.
  57. Chu J-W., Kimura T. Studies on adrenal steroid hydroxilases. Molecular and catalitical properties of adrenodoxin reductase. (A flavoprotein). J.Biol.Chem., 1973, v. 248, IT 6, p. 20 892 094.
  58. Foster R.P., Wilson L.D. Purification and characterization of adrenodoxin-reductase from bovine adrenal cortex. Biochemistry, 1975, v. 14, N 7, p. 1477−1484.
  59. Suhara K., Ikeda Y., Takemori S., Katagiri M. The purification and properties of NADPH-adrenodoxin reductase from bovine adrenocortical mitochondria. FEBS Lett., 1972, v. 28, N 1, p. 45−48.
  60. Mayew S.G., Foust G.P., Massey V. Oxidation-reduction properties of flavodoxin from Peptostreptococcus elsdenii. J.Biol.
  61. Chem., 1969, v. 244, N 4, p. 803−810.
  62. Massey V., Curti B,, Gunther H. A temperature dependent conformational change in D-amino acid oxidase and its effect on catalysis. J.Biol.Chem., v. 241, N 10, p. 2347−2357.
  63. Ichikawa Y., Hiwatashi A. Isolation and properties of reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-hepatoredoxin reductase of rabbit liver mitochondria.-Biochem.Biophys.Res. Commun., 1977, v.79t N 2, p. 443−450.
  64. Shin M. Complex formation by ferredoxin-NADP+ reductase and ferredoxin or NADP+. Biochim.Biophys.Acta, 1973, v. 193, N 1, p. 13−19.
  65. Kimura Т., Chu J-W., Parcells J, Adrenodoxin-reductase:Fluorescence properties and the effect of the salts on its catali-tic activities. In: Flavins and Flavoproteins, (ed. T.P. ' Singer, Amsterdam, Elsevier), 1976, p. 637−646.
  66. Massey V., Curti B. A new method of preparation of D-amino acid oxidase apoprotein and a conformational change alter its combination with flavin adenine dinucleotide. J.Biol.Chem., 1966, v. 241, N 14, p. 3417−3423.
  67. A.A., Бовдей Н. И., Мороз И. Н., Репин В. А., Шкуматов В. М., Чащин В. Л. Физико-химические характеристики и структурная организация адренодоксин-редуктазы из митохондрий коры надпочечников. ДАН СССР, 1980, т.250, № 3, с.757−761.
  68. Merrill А.Н., Jr., Lambeth J.D., Edmondson D.E., McCormick D.B. Formation and mode of action of flavoproteins. Ann. Rev.Nutr., 1981, v.1, IT 2, p. 281−317.
  69. Singer T.P., Kearney E.B., The non-enzymatic reductionn of cytochrome с by pyridine nucleotides and its catalyzis byvarious flavins. J.Biol.Chem., 1950, v. 183, N 2, p.409−429.
  70. Bruice T.P., Main L., Smith S., Bruice Р.У. Preequilibration complex formation and nucleophilic addition (and its position) as factors in flavin catalyzed oxidations. JACS., 1972, v. 93, N 26, p. 7327−7328.
  71. Bructlein M., Bruice T.P. Demonstration of a direct hydrogen transfer between NADH and deazaflavin. JACS., 1972, v. 94, N 18, p. 6548−6549.
  72. Blankenhom G., Plavin-nicotinamide biscoenzymes. Models for interaction between NADH (NADPH) and flavin in flavoenzymes. -Eur.J.Biochem., 1975, v. 50, N 2, p. 351−356.
  73. Massey V., Palmer G. Charge transfer complexes of lipoyl dehydrogenase and free flavins. J.Biol.Chem., 1962, v. 237, N 7, p. 2347−2358.
  74. Strifcland S., Massey V. The mechanism of action of the flavo-protein meliotate hydroxilase. J.Biol.Chem., 1973, v. 248, N 8, p. 2953−2962.
  75. Howell L.G., Spector Т., Massey V. Purification and properties of p-hydroxibenzoate hydroxilase from Pseudomonas fluorescence. J.Biol.Chem., 1972, v. 247, N 13, p. 4340−4350.
  76. Lambeth J.D., Kamin H. Adrenodoxin-reductase:Properties of the complexes of reduced enzyme with NADP+ and NADPH. -J. Biol.Chem., 1976, v. 251, N 14, p. 4299−4306.
  77. Sakamoto H., Ichikawa Y., Yamano Т., Takagi T. Circulardichroic studies on the interaction between reduced nicotinami' de adenine dinucleotide phosphate-adrenodoxin reductase and adrenodoxin. J.Biochem., 1981, v. 90, N 5, p. 1445−1452.
  78. Lambeth J.D., McCaslin R.R., Kamin H. Adrenodoxin-reductase -adrenodoxin complex. Catalithic and thermodinamic properties.-J.Biol.Chem., 1976, v. 251, N 23, p. 7545−7550.
  79. Lambeth J.D., Kamin H. Adrenodoxin-reductase and adrenodoxin. Mechanism of reduction of ferricyanide and cytochrome -J.Biol.Chem., 1977, v. 252, N 9, p. 2908−2917.
  80. Lambeth J.D., Seybert D.W., Kamin H. Adrenodoxin-reductase -adrenodoxin complex. Rapid formation and breakdown of the complex and slow coformational change in the flavoprotein.-J.Biol.Chem., 1981, v. 256, N 10, p. 4667−4672.
  81. Kimura Т., Taniguchi T. Some insight into intramolecular electron transfer of an adrenodoxin molecule. In: Iron and copper proteins, (eds. K.T. Yasunobu, H.F.Mower, 0. Hayaishi), 1976, New York, Acad. Press, p. 45−56.
  82. Lim B.T., Kimura T. Conformation prediction and spectral studies on adrenodoxin. The accessibility of tyrosine residue at position 82 in the polypeptide. J.Biol.Chem., 1981, v. 256, N 10, p. 4400−4406.
  83. Cowgill R.W. Fluorescence and protein structure. Fluorescence quenching by disulfide and sulfhydril group. -Biochim.Biophys. Acta, 1967, v. 140, N 1, p. 37−44.
  84. Gowgill R.W. On the mechanism of peptide quenching. Biochim* Biophys. Acta, 1975, v. 200, N 1, p. 18−25.
  85. Lambeth J.D., Lancaster J.R., Kamin H. Steroidogenic electron transport by adrenodoxin-reductase and adrenodoxin. Use of acetylated cytochrome? as a mechanistic probe of electron transfer. J.Biol.Chem., 1981, y. 256, N 8, p. 3674−3678.
  86. Salerno P.P. Structure and function of cytochrome ?. Ann.Rev. Biochem., 1977, v. 46, N 2, p. 299−329.
  87. Colosimo A., Brunou M., Antonini E. Electron transfer between soluble and immobilized mamalian cytochrome ?. Equilibrum and kinetic studies of immobilized cytochrome ?. Biochem. J., 1976, v. 153, N 3, P. 657−661.
  88. С.С., Саркисова Е. Г., Осипова Е. А., Григорян Н. А., Налбандян P.M. Цитохром с из коры надпочечников крупного рогатого скота. Биохимия, т.41, $ 2, 1976, с.223−227.
  89. Lambeth J.D., Seybert D.W., Kamin Н. Ionic effects on adrenalsteroidogenic electron transport. The role of adrenodoxin as an electron shuttle. J.Biol.Chem., 1979, v. 254, Ж 15, p. 7255−7264.
  90. Geren L. M, Millet P. Interaction between adrenodoxin and cytochrome c. J.Biol.Chem., 1981, v. 256, N 10, p.4851−4855.
  91. Geren L.M., Millet P. Fluorescence energy transfer studies of the interaction between adrenodoxin and cytochrome ?. -J.Biol. Chem., 1981, v. 256, N 20, p. 10 485−10 489.
  92. Seybert D.W., Lambeth J.D., Kamin H. The participation of a second molecule of adrenodoxin in cytochrome Р-450-catalyzed 11? -hydroxilation. -J.Biol.Chem., 1978, v. 253, N 23, p. 8355−8358.
  93. Nabi Ж., Omura Т. In vitro synthesis of adrenodoxin and adrenodoxin reductase"Existence of a putative large precussior form of adrenodoxin. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1980, v. 97, N 2, p. 680−686.
  94. Lowry 0., Rosenbrough N., Parr A., Randall R. Protein measur-ment with the Polin phenol reagent. J.Biol.Chem., 1951, v.193, N 1, 265−275.
  95. Gornall A.G., Bardawill C.J., David M.D. Determination of serum proteins by means of biuret reaction. J.Biol.Chem., 1949, v. 177, Ж 2, p. 751−766.
  96. Omura Т., Sato R. The carbon monooxide-binding pigment of liver microsome. 1. Evidence for its hemoprotein nature. -J.Biol.Chem., 1964, v. 239, N 7, p. 2370−2378.
  97. Burch H.B. Pluorimetric measurement of oxidized and reduced triphosphopyridine nucleotides in tissues containing hemoglobin. Ins Meth. in Enzymol., (eds. McCormick D.B., Weight L.D., Acad. Press, New York), 1971, v. XVIII, part В., p.11−17.
  98. Dupuy В., Puchant E., Vitello S." Jensen R., Bagdiantz A., Blanquet P. Tryptophan and neutral amino acid concentrations in serum of rat after salmon calcitonin injection, Experi-entia, 1983, v. 39, N 3, p. 294−297.
  99. Koziol J. Pluorimetric analyses of riboflavin and its coenzymes. In: Meth. in Enzymol., (eds. McCormick D.B., Weight L.D., Acad. Press, New York), 1971, v. XVIII, part B, p. 253 285.
  100. Davis B. Disc electrophoresis. II. Method and application to human serum albumin. Ann.N.Y.Acad.Sci., 1964, v. 121, N 2, p. 404−427.
  101. Schleyer H., Cooper D.Y., Rosenthal 0. Preparation of the- 137 heme protein P-450 from adrenal cortex and some its properties. J.Biol.Chem., 1972, v. 247, N 10, p. 6103−6110.
  102. Weber K., Osborn M. The reliability of molecular weight determination by dodecylsulfate-polyacrilamide gel electrophoresis. J.Biol.Chem., 1969, v. 244, N 16, p. 4406−4412.
  103. Andrews P. The gel filtration behaviour of protein related to their molecular weight over a wide range. Biochem.J., 1965, v. 99, IT 3, p. 595−606.
  104. Spande Т., Witkop B. Determination of the tryptophan content of proteins with N-bromosuccinimide. In: Meth. in Enzymol., (ed. Hirs Cfl.W., Acad. Press, New York), 1967, v. XI, p. 498 506.
  105. Э.А. Люминесценция белковых хромофоров. Итоги науки и техники. Биофизика, М., изд. ВИНИТИ, 1976, т.6, 213 с.
  106. Lehrer S.S. Solute quenching of protein fluorescence. In: Meth. in Enzymol., (ed. Hirs C.H.W., Acad. Press, New York), 1978, v. XLIX, part P, p. 222−236.
  107. Rayner D.M., Szabo A.G. Time resolved fluorescence of aqueous tryptophan. Can.J.Biochem., 1978, v. 56, N 5, p. 543−545.
  108. Chen R., Yurck G, Alexander N. Flurescence decay times: Proteins coenzymes and other compounds in water. Science, 1967, v. 156, Ж 3777, p. 949−951.
  109. Forster Th. Delocalized extitation and extinction energy transfer. In: Modern Quantum Chemistry, (ed. Sinacogly H., Acad. Press, New York), 1956, part III, p. 93−137.
  110. Guatrecassas P. Protein purification by affinity chromatography derivatization and polyacriamide beads.- J.Biol.Chem., 1970, v. 245, N12, p. 3059−3065.
  111. K., Kanayama K., Takemori S., Karagiri M. (Ichikawa). Bovine adrenal hydroxilase system. III. Reconstitution of adrenal iron-sulfur protein. Biochim.Biophys.Acta, 1974, v. 336, N 2, p. 309−318.
  112. Mardanyan S.S., Nalbandyan R.M. The destruction of chromopho-ric group of adrenodoxin in water-puridine medium. Studia biophys., 1974, v. 47, N 3, p. 229−233.
  113. Wicramasinghe R.H. The regulation of corticosteroid hydroxi-lations. I. An effect of inorganic ions in regulating iron-sulphur protein-dependent electron transport. J.Bioenerg., 1973, v. 5, N 3, P. 151−161.
  114. Mardanyan S.S., Grigorian N.A., Nalbandyan R. M, The effect of detergent on bovine adrenal ferredoxin. Biochem.J., 1976, v. 153, N 5, p. 725−727.
  115. Д. Электронный парамагнитный резонанс в биологии. (Изд. Мир, М., 1972, 296 е.).
  116. Hatefi Y., Stiggall D.L. Metalcontaining flavoprotein dehydrogenases. Enzymes, 1976, v. 13, N 1, p. 175−197.
  117. С.С., Налбандян P.M. Электронные переносчики митохондрий коры надпочечников. Терминальные системы. Биохимия, 1979, т.44, Is7, с.1203−1212.
  118. Guerra P., Peron P.G., McCarthy J.L. Further studies ofcorticosteroidogenesis. III. Effect of biological substrates and electron transport dependence in rat. Biochim.Biophys. Acta, 1966, v. 117, N 2, p. 433−449.
  119. Manabe Т., Kimura T. A complex formation of the adrenal iron-sulfur protein (adrenodoxin) with cytochrome? and the decomposition of the iron-sulfur center. FEBS Lett., 1974, v. 47, N 1., p. 113−116.
  120. Kamin H., Lambeth J.D., Siegel L.S. The role of flavins in electron transfer between two-electrn donors and one-electron acceptors. In: Flavins and Flavoproteins, (ed. Yagi K., Yamano Т., JaP. Sci. Press, Tokyo), 1980, p. 341−348.
  121. Nonaka Т., Sugiyama Т., Yamano T. ATginyl residues of adrenodoxin reductase as the anion recognition site for 2-phos-phate group of NADP+, J.Biochem., v. 92, N 6, 1982, p. 1693−1701.
  122. Prough R.A., Barke M.D. The role of NADPH-cytochrome с reductase in microsomal hydroxilation. Arch.Biochim.Biophys., 1975, v. 170, N 1, p. 160−168.
  123. Iyanagi Т., Makino R., Anan K., Studies on the microsimal mixed function oxudase system. Mechanism of action of hepathic NADPH-cytochrome P-450 reductase. Biochemistry, 1981, v. 20, N 7, p.1722−1730.
  124. MakCenzie R., Fory W., McCormick D. Flavinyl peptides: II. Intramolecular interaction in flavinyl aromatic amino acidpeptides. Biochemistry, 1969, v. 8, N 5, p. 1839−1844.
Заполнить форму текущей работой

На отлично!