Диплом, курсовая, контрольная работа
Помощь в написании студенческих работ

Эффекторы свертывания крови из сапропеля: влияние на плазменный, тромбоцитарный гемостаз и некоторые жизненные функции лабораторных животных (экспериментальное исследование)

Диссертация: Эффекторы свертывания крови из сапропеля: влияние на плазменный, тромбоцитарный гемостаз и некоторые жизненные функции лабораторных животных (экспериментальное исследование)
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Актуальность проблемы. Система гемостаза выполняет в организме ряд жизненно важных функций — поддерживает кровь в жидком состоянии, препятствует тромбообразованию и блокаде микроциркуляции в органах, предотвращает кровоточивость и обеспечивает купирование уже развившихся геморрагий, несет ограничительную и защитную функции, препятствуя распространению из очагов поражения микрофлоры, а также… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. АНТИКОАГУЛЯНТЫ ПРЯМОГО ДЕЙСТВИЯ 8 (Обзор литературы)
    • 2. 1. Гепарин и гепариноиды
    • 2. 2. Гирудин и гирудиноиды
    • 2. 3. Пептидные ингибиторы самосборки фибрина
    • 2. 4. Ингибиторы агрегации тромбоцитов
      • 2. 4. 1. GP IIb/lIIa-рецепторы тромбоцитов
      • 2. 4. 2. Моноклональные антитела
      • 2. 4. 3. Непептидные ингибиторы IIb/IIIa-рецепторов тромбо- 36 цитов
      • 2. 4. 4. Пептидные ингибиторы IIb/Illa-рецепторов тромбоци- 38 тов
  • 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • 4. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 4. 1. Выделение эффекторов свертывания из экстракта сапро- 47 пеля
    • 4. 2. Действие эффекторов из сапропеля на плазмокоагуляцию
    • 4. 3. Влияние эффекторов из сапропеля на агрегационную 74 функцию тромбоцитов
    • 4. 4. Противосвертывающее действие экстракта из сапропеля 82 в опытах на животных
    • 4. 5. Токсикологическая характеристика экстракта фракции 87 сапропеля

Эффекторы свертывания крови из сапропеля: влияние на плазменный, тромбоцитарный гемостаз и некоторые жизненные функции лабораторных животных (экспериментальное исследование) (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы. Система гемостаза выполняет в организме ряд жизненно важных функций — поддерживает кровь в жидком состоянии, препятствует тромбообразованию и блокаде микроциркуляции в органах, предотвращает кровоточивость и обеспечивает купирование уже развившихся геморрагий, несет ограничительную и защитную функции, препятствуя распространению из очагов поражения микрофлоры, а также гетерои аутотоксинов (Кузник Б.И., Скипетров В. П., 1974; Гаврилов O.K., 1981; Баркаган З. С., 1988; Зубаиров Д. М., 2000). Нарушения в этой системе предопределяют развитие геморрагий, тромбогеморрагий, ишемических изменений в органах.7 создают предрасположенность к тромбозам. Все эти нарушения, как известно, являются промежуточным звеном патогенеза многих заболеваний, характеризующихся повреждением внутренней выстилки сосудов, нарушением взаимодействия эндотелия с клетками крови и плазменными ферментными системами, сдвигами реологии крови.

Независимо от этиопатогенеза тромбоэмболических осложнений одним из средств их предупреждения и коррекции являются антикоагулянты, введением которых достигается либо угнетение синтеза прокоагулянтов (антибиотики, цитостатики), либо ограничение по-стрибосомального формирования прокоагулянтов (антивитамины К).

Эти группы антикоагулянтов (антикоагулянты непрямого действия) используются для создания медленно развивающейся стабильной гипокоагулемии. Однако практическая медицина нуждается, как правило, в быстром эффекте, который обеспечивается антикоагулянтами прямого действия. Среди них чаще других применяется гепарин, отличающийся сильным, но кратковременным эффектом (Кудряшов Б.А., 1992). Хотя гепарин и является средством выбора, он отличается рядом недостатков. К важнейшим из них можно отнести способность вызывать агрегацию тромбоцитов (Bertele е.а., 1983; Cimo, 1979) и громбоцитопению (Ansell J., Deykin D., 1980; Borg J.Y. e.a., 1986). Известны данные и о существовании гепаринорезистентности (Баркаган З.С. и соавт., 1982; 1988). Нередко отмечаются тромбоэмболические осложнения после отмены гепарина, связанные с так называемым «эффектом бумеранга» .

К числу применяемых антикоагулянтов прямого действия относятся гирудин и гирудиноиды, выделенные из тканей сосущих животных (Ена Я.М., 1992) и обладающие антитромбиновым действием (Markwardt, 1985; Kaiser, Markwardt, 1988). Практического применения гирудин и его производные не нашли из-за сложной технологии получения и дороговизны (Баскова И.П., 1986; 1991).

В отношении ограничения агрегации тромбоцитов общая картина выглядит еще более удручающей, поскольку истинных эффекторов агрегации тромбоцитов, имеющих практическое применение, не существует, а применяемые антагонисты этой функции тромбоцитов помимо агрегации изменяют многие другие параметры систем организма (Бышевский А.Ш. и соавт., 1996). К ним прежде всего относится ацетилсалициловая кислота, которая необратимо ингибирует циклоок-сигеназу тромбоцитов (Jaffe, Weksler, 1979), синтез тромбоксана А2 и простациклина (Vane, 1971; Burch e.a., 1978; Fuster, Jang, 1994). Однако поскольку эндотелиальные клетки способны к регенерации циклоокси-геназы, ингибирующее действие аспирина на эндотелиальный проста-циклин кратковременно, а агрегация тромбоцитов может происходить даже в присутствие аспирина, поскольку он мало влияет на другие важные активаторы тромбоцитов типа тромбина и АДФ. В то же время длительное применение аспирина в высоких дозах вызывает негативные явления — образование желудочных язв, внутричерепные и желудочно-кишечные геморрагии и др.

Из экстракта сапропелевых грязей выделены эффекторы свертывания крови, влияющие, как это показано ранее, (Чирятьев Е.А. и соавт., 2001; Чирятьев Е. А., Калинин Е. П., 2001) на плазменный и тромбоцитарный гемостаз. Однако эти исследования не затрагивали подробного исследования тромбоцитарного компонента свертывания крови, хотя известно, что фибриноген — ключевой субстрат заключительной фазы свертывания, участвует в процессах агрегации и адгезии тромбоцитов, взаимодействуя с рецепторами тромбоцитарных мембран (Панчепко Е.П., 1997). Кроме этого, не исследовалось наличие токсичности в эксперименте (белые беспородные крысы) изучаемых эффекторов и недостаточно исследовано их влияние на основные функции организма. ^.

Учитывая выше сказанное, и принимая во внимание неограниченность сырьевых запасов сапропелей, представляется интересным их изучение, как альтернативных источников антикоагулянтов прямого действия.

Цель исследования — изучить основные механизмы ограничения процесса плазмокоагуляции очищенными фракциями экстракта С, в частности, перехода ФГ в ФБ. Установить механизм влияния фракций на ТЦ-гемостаз. Определить острую и хроническую токсичность экстракта из С при введении разных доз лабораторным животным.

Задачи исследования. 1. Разработать способ получения из С индивидуальных соединений с антикоагулянтной активностью. 2. Изучить их механизм действия на плазмокоагуляцию. 3. Изучить влияние эффекторов из С на агрегационную функцию ТЦ in vitro и in vivo. 4. Дать общую токсикологическую характеристику экстракта в эксперименте на лабораторных животных.

Научная новизна. Из С выделены два высокоочищенпых соединения, ограничивающих гемокоагуляцию. Впервые установлено что эффекторы из С тормозят BP при использовании плазмы, дефицитной 5 по ф. II, что свидетельствует о их влиянии на заключительный этап каскада свертывания крови — превращение ФГ в ФБ под действием ТР. Установлено, что полученные эффекторы из С угнетают АДФи адре-налин-индуцированную агрегацию ТЦ in vitro, причем механизмы ограничения агрегации ТЦ различаются между собой. Установлено, что при внутримышечном и внутрибрюшинном введении эффекторов лабораторным животным проявлений токсичности не наблюдается. Установлены минимальная эффективная доза и доза, составляющая LD50.

Практическая ценность. Разработан способ получения антикоагулянтов из сапропеля — дешевого сырья с неограниченными запасами, позволяющий получать индивидуальные эффекторы свертывания — в количествах, достаточных для их изучения в лабораторных условиях.

Эффекторы из сапропеля способны эффективно ограничивать как плазменный, так и тромбоцитарный компоненты гемостаза in vivo и in vitro, и не обладают острой и хронической токсичностью в эксперименте, что обусловливает их ценность, как перспективных средств коррекции гемостаза.

Полученные данные могут быть использованы научными учреждениями, занимающимися проблемами свертывания крови и поиском новых средств воздействия на гемостаз. Основные положения, выносимые на защиту.

1. В сапропеле содержатся эффекторы свертывания крови, которые могут быть получены в индивидуальном виде.

2. Механизм ограничения плазмокоагуляции исследуемыми эффекторами отличен от механизма известных прямых антикоагулянтов и реализуется преимущественно на заключительном этапе свертывания крови — коагуляционном превращении фибриногена.

3. Эффекторы из сапропеля способны ингибировать агрегацию тромбоцитов при ее индуцировании растворами АДФ и адреналина.

4. Эффекторы из сапропеля не обладают острой и хронической токсичностью при внутримышечном и внутрибрюшинном введении лабораторным животным, и отличаются широким терапевтическим диапазоном действия.

Апробация и публикации. Материалы работы опубликованы в журналах: «Медицинская наука и образование Урала», «Медицинская наука и образование Урала и Сибири», «Современные наукоемкие технологии», «Успехи современного естествознания», опубликованы на сайтах РАЕ.

Объем и структура работы. Материалы исследования, включая указатель литературы, изложены на 147 страницах машинописного текста. В работе содержатся 30 рисунков, 1 схема и 13 таблиц: Диссертация состоит из введения, обзора литературы (представленным 120 отечественными и 235 зарубежными авторми), главы (содержащей 5 подразделов), в которой изложены результаты собственных исследований, заключения и выводов.

6. выводы.

1. Из сапропеля озер Тюменской области получены 2 фракции, обладающие антикоагулянтной активностью. Выделены и максимально очищены индивидуальные носители, представляющие собой молекулы средней массы.

2. Антикоагулянтная активность реализуется преимущественно на уровне III фазы свертывания крови — коагуляционном превращении фибриногена в фибрин.

3. Носители антикогуляционной активности ограничивают процесс взаимодействия тромбина с фибриногеном и скорость аутопо-лимеризациифибрина путем образования малоактивных комплексов с фибринмономерами и полимерами ранней степени зрелости.

4. Эффекторы из сапропеля угнетают агрегацию тромбоцитов, угнетая высвобождение внутренних факторов агрегации.

5. Эффективная доза антикоагулянта ниже токсической в 15 раз. При повторных введениях экстракт проявляет минимальные кумулятивные свойства и не влияет на активность тканевого тромбопласти-на внутренних органов.

6. Сочетание высокой противосвертывающей активности с малой токсичностью, отсутствие компенсаторной гиперкоагулемии свидетельствуют о целесообразности дальнейшего изучения экстракта по схеме, предусмотренной Фармакологическим Комитетом для антикоагулянтов прямого действия.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Недостаточность арсенала противосвертывающих средств, высокая потребность в них, связанная с ростом частоты заболеваний, осложняющихся тромбозами, определяет необходимость дальнейшего поиска антикоагулянтов, в том числе антикоагулянтов прямого действия, так как последние представлены по существу только гепарином и его производными.

Из большого количества веществ, изучающихся как модификаторы свертывающей активности «крови, для нас наибольший интерес представляют соединения с низкой молекулярной массой (от 500 до.

10 ООО Да), сообщения о которых появились-в-последние-10—1−5-лет:——.

Некоторые из них находятся на стадии доклинических и клинических испытаний. Это прежде всего Antistasin, ТАР и Yagin, получаемые из мексиканской пиявки (Haementeria officinalis), из мягкого клеща (Ornihtodoros moubata) и слюны медицинской пиявки (Hirudo medici-nalis) (Sitko е.a., 1992; Vlasuk, 1993; Fioravanti e.a., 1993; Mao e.a., 1995; Lynch e.a., 1995; Kornowski e.a., 1996). Все вышеуказанные препараты являются антифакторами Ха.

В литературе имеются данные, свидетельствующие о том, что пептидные биорегуляторы все активнее задействуются в регуляции свертывания крови. Так, приводятся сведения о выделении из слюны летучей мыши (Desmodus rotundus) гликопептида, который ингибирует фактор IXa (Fernandez e.a., 1998), пептида из морской звезды (Асап-thaster planci), получившего название Plancinin, который ограничивает скорость взаимодействия фактора Ха и протромбина (Коуата е.а., 1998).

Из слюнной железы пиявки Haementeria ghilianti получен новый пептидный ингибитор фактора XHIa Trigenin, имеющий молекулярную массу 7,3 кДа и состоящий из 66 аминокислот. По свидетельству авто.

93 ров — это наиболее мощный избирательный ингибитор фактора XHIa из описанных, при этом Trigenin не оказывает влияния на предыдущие этапы свертывания крови.

Нельзя не отметить серию работ, посвященных клиническим испытаниям препаратов Argatroban и Novastan — низкомолекулярных прямых ингибиторов тромбина, изучающихся как альтернатива гепарину, и, по сведениям автором, по ряду параметров существенно его превосходящих (Lewis е.а., 1997; Hantgan, Jerome, Hursting, 1998; Walenga е.a., 1999; Jang e.a., 1999). Argatroban имеет молекулярную массу около 500 Да. Он задерживает взаимодействие фибриногена с тромбином и активацию тромбина, способен ограничивать агрегацию тромбоцитов у пациентов с гепарин-индуцированной тромбоцтрпе.-нией, усиливает фибринолитическую активность.

Процесс коагуляционного превращения фибриногена ограничивает гепарин и его комплексы с многочисленными биологически активными веществами (Кудряшов Б.А. и соавт., 1970 — 1988; Розенфельд М. А. и соавт., 1973; Литвинова Р. И. и соавт., 1981). Эти комплексы характеризуются однотипным действием: тормозят превращение фибриногена в фибрин на стадии самосборки и лизируют нестабилизирован-ный фибрин. Однако вопрос о физиологическом значении гепарина и его комплексов в ограничении самосборки фибрина остается открытым. Доказано лишь, что гепарин, в количестве, во много раз превышающем физиологическое, тормозит самосборку in vitro (Михалева И.В., 1988).

Ингибиторы самосборки фибрина могут появляться в кровотоке при некоторых заболеваниях, сопровождающихся активацией иммунной системы организма: возникающие антитела способны непосредственно вмешиваться в процесс полимеризации (Weinstein, Deikin, 1978; Hoots e.a., 1981; Gabriel e.a., 1983) и агрегации фибрина (Galanakis e.a.,.

1978), или ограничивать скорость высвобождения фибринопептидов (Marciniak, Greenwood, 1979).

В литературе имеются указания на возможность тормозить в организме заключительный этап коагуляционных превращений фибриногена синтетическими пептидами (Kuyas, Doolittle, 1983), которые активно изучаются как перспективные антикоагулянты прямого действия (Miraglia, Greirberg, 1985).

Этот тип пептидов не только тормозит самосборку, но и инги-бирует взаимодействие фибриногена с тромбоцитами, что предотвращает их агрегацию (Васильева Г. А. и соавт., 1983), являются вазоак-тивными агентами, улучшая микроваскулярную проницаемость (Цей-тин В.М. и соавт.,, 1982). ———— — ;

Недостатком короткоцепочечных пептидов как антикоагулянтов прямого действия является их быстрая элиминация из кровотока (Чипенс Г. И., 1982).

Е.А. Чирятьевым и соавт. (1990) обнаружены и изолированы пептиды из плазмы крови человека и животных, тормозящие процесс самосборки фибрина in vitro и in vivo. Определена их физиологическая роль и значение. Установлено, что обнаруженные пептидные ингибиторы являются наиболее древними регуляторами коагуляционного превращения фибриногена: их уровень в крови и тканях животных уменьшается по мере филогенетического и онтогенетического «старения», т. е. по мере уменьшения удельной значимости коагуляционного превращения фибриногена в цепи реакций, ведущих к образованию фибрина. Это согласуется с теорией о том, что биологически активные пептиды относятся к наиболее древним регуляторам многих биохимических и физиологических процессов, протекающих в организме в целом и отдельной живой клетке (Ашмарин И.П. 1979, 1982; Климов П. К., 1984).

В то же время, использование пептидов животного происхождения с целью фармакологической коррекции гемостаза не представляется возможным: развивающаяся после инъекции пептидов гипокоагу-лемия чрезвычайно кратковременна в силу быстрой элиминации их из кровотока.

В литературе существует достаточно сведений о попытках использования в качестве прямых антикоагулянтов препаратов растительного происхождения. Растения и их действующие начала продолжают исследоваться как потенциальные источники препаратов с анти-коагулянтными свойствами. При этом в качестве «носителя» антикоа-гулянтной активности рассматриваются различные химические компоненты растений. Низкая токсичностьбольшинства из них, широкий-спектр биологического действия, делает их ценными для медицинской практики (Барабой В.А., 1984; Хушбактова З. А. и соавт., 1987). Однако, следует подчеркнуть, что большинство публикаций на эту тему носят фрагментарный характер, не позволяющий составить однозначное представление о влиянии тех или иных извлечений из растительного материала на свертывание крови.

В поисках антикоагулянтов с гепариноподобной активностью внимание исследователей привлекли красные морские водоросли, содержащие сульфатированные полисахариды (Ефимов B.C. и соавт., 1983). Из морской бурой водоросли (Laminaria sacharina L.) выделен сульфатированный полисахарид ламинарин, который подобно гепарину, снижает общую свертывающую активность и замедляет агрегацию тромбоцитов (Турова А.Д. и соавт., 1983; Deacon-Smith е.а., 1985).

Свойствами антикоагулянта обладает отвар из мелиссы лекарственной (Melissa officinalis L.): внутривенное введение отвара животным увеличивает время рекальцификации, тромбиновое время, уменьшает толерантность плазмы к гепарину и изменяет параметры тромбоэластограммы (Багинская А.И. и соавт., 1985).

Изучен эффект полисахаридов, полученных из драконовой крови — красного смолистого выделения из плодов различных видов Dae-monorops и из пыльцы Typha angustata Bory et Chaud. Их действие двояко: с одной стороны это прокоагулянты, активирующие фактор Хагемана, с другой — антикоагулянты, задерживающие высвобождение фибринопептидов под действием тромбина и ингибирующие полимеризацию фибрина (Gibbs е.а., 1984).

Настойка клубеньков стахиса (Stachis Sicboldi Mig.) при внутривенном и пероральном введении животным вызывает гипокоагуля-цию, которая выявляется по увеличению времени рекальцификации, удлинению параметров тромбоэластограммы, уменьшению максимальной амплитуды ее и снижением числа тромбоцитов (Трумпе-Т.Е. и-соавт., 1985).

Антикоагулянтный эффект обнаружили в первые часы после введения суммы гликозидов и из аралии манчжурской (Aralia mand-shurica rupr.): удлиняется время рекальцификации, снижается толерантность плазмы к гепарину и общая свертывающая активность. (Колхир В.Е., 1983).

Внимательному изучению подвергаются растения, издавна используемые для предупреждения тромбообразования в традиционной китайской медицине, обладающие антикоагулянтным эффектом. Это в частности Salvia miltirrhizabge, Rheum palmatum (Kosuge e.a., 1984).

При изучении водного экстракта репейничка волосистого японского (Argimonia piloza Ledeb subsp. Japonica (Mig)) отмечали, что при его внутривенном введении белым крысам увеличивается время свертывания крови. Экстракт не влияет на уровень тромбина и фибриногена в плазме, но существенно замедляет активированное тромбиновое время (Wang е.а., 1984).

Изучение отвара корня шалфея (Salvia sclacea L.) в эксперименте показало, что при его внутривенном введении увеличивается активированное тромбиновое время, причем ингибирующий эффект не зависит от уровня антитромбина III, также он существенно подавляет и активность плазмина. Выделен носитель ингибиторной активноститермостабильное соединение с молекулярной массой 5000 Да (Stremberger е.а., 1983).

Как мы отметили выше, большинство работ не имело логического завершения, тем более, не акцентировалось внимание на этапе коагуляционного превращения фибриногена.

O.A. Русаковой (2000) были получены сведения о том, что экстракты из нонеи темной, окопника лекарственного, кривоцвета полевого, медуницы мягчайшей обладают антикоагулянтной активностью. Выяснено, что носителями активности являются соединения глико-пептидной природы с массой около 3 000 Да.

Исходя из того, что сырьевые ресурсы растений с высоким содержанием прямых антикоагулянтов существенно ограничены, мы обратились к группе сине-зеленых водорослей. Этот шаг продиктован и тем, что по данным Н. В. Яковлевой (1998) основные характеристики антикоагулянтов из растений (в том числе и сине-зеленых водорослей) и из плазмы крови и тканей животных совпадают между собой.

Известно, что сине-зеленые водоросли после отмирания естественным образом концентрируются в иловых донных отложениях некоторых озер — в сапропелях. По сведениям Н. В. Кордэ (1960) до 80% органической фазы сапропелей может быть обусловлено сине-зелеными водорослями. В связи с этим источником антикоагулянтов мы избрали сапропель, как концентрат сине-зеленых водорослей.

Основываясь на ранее разработанных принципах выделения антикоагулянтов из растений (Русакова O.A., 2000; Русакова и соавт.,.

2001; Поле И. Э. и соавт., 2001), мы разработали способ получения.

98 фракций сапропеля, заключающийся в следующем (схема 1).

Схема 1.

Антикоагулянтная активность элюировалась в виде двух отдельных пиков, свидетельствующих о присутствии в полученной фракции минимум двух индивидуальных носителей (I и II), отличных по молекулярной массе (Чирятьев Е.А. и соавт., 2001; Калинин Е. П. и соавт., 2001).

Мы проводили подробное изучение каждого из пептидов в отдельности, полагая, что в плане создания на их основе нового средства фармакологической коррекции гемостаза наиболее оптимальной является их сочетанная комбинация. Поэтому в дальнейшем мы использовали комплекс ингибиторов в их естественном соотношении.

Нами также показано, что изучаемый эффектор практически в равной степени реализует свою активность, независимо от-того,-проте———-кает ли свертывание по внешнему или по внутреннему пути. Следовательно, вероятнее всего, антикоагулянт оказывает преимущественное влияние на этапах, следующих за образованием тромбина. Тем не менее, мы провели серию экспериментов по выяснению влияния ингибитора на различные этапы плазмокоагуляции, используя в качестве субстрата фактор-дефицитные плазмы, а именно плазмы дефицитные по факторам II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII и кининам. Оказалось, что эффективность торможения скорости соответствующих реакций свертывания достоверно различается только в случае использования в качестве субстратных плазм, дефицитных по фактору II и кининам, а эффект ингибитора не зависит от активности факторов V, VII, VIII, IX, X, XI и XII (различия в контрольных и опытных тестах не достоверны).

Выраженная зависимость степени эффективности торможения изучаемой фракцией экстракта от концентрации протромбина и отсутствие подобного эффекта в случае использования других фактор-дефицитных плазм (за исключением плазмы, дефицитной по кининам), дополнительно свидетельствует в пользу ранее высказанного предположения о преимущественном влиянии носителя ингибиторной актив.

100 ности на заключительную фазу процесса плазмокоагуляции — тромбин-зависимое превращение фибриногена: недостаток образующегося тромбина приводит к удлинению процесса свертывания фибриногена и, следовательно, увеличению времени, в течение которого ингибитор может реализовать свой эффект.

Что касается существенного увеличения степени торможения при использовании в эксперименте плазмы, дефицитной по кининам, то в данной работе эти сведения мы восприняли на уровне констатации факта, без попытки детального исследования механизма происходящего.

Далее мы более подробно изучили влияние эффекторов I и II на свертывание крови. Для этого сначала исследовали-процесс свертыва-— ния плазмы крови в присутствии эффекторов равной степени активности с помощью электрокоагулографа, что позволило получить общее представление о процессе свертывания от момента его инициации и до ретракции и фибринолиза в цифровом выражении.

Уже на этом этапе исследований стало ясно, что влияние изучаемых эффекторов на свертывание крови различно. Эффектор I почти по всем определяемым показателям оказался активнее эффектора II. Так, эффектор I увеличивает латентный период до начала свертывания в 2 раза, эффектор II его не изменяет. Эффектор I в 4,5 раза увеличивает продолжительность свертывания (эффектор II — только в 1,4 раза). Эффектор I в 4 раза снижает скорость свертывания (эффектор II — в 1,2 раза). Различие во влиянии на свертывание подтверждается и коагуло-граммой, записанной в присутствии суммы эффекторов 1 и И: она существенно отличается от предыдущих электрокоагулограмм.

Выше мы показали, что чем архитектурно сложнее тест свертывания, тем больше требуется эффектора для достижения одной и той же эффективности торможения. Следовательно, не исключена возможность действия эффекторов на этапах, предшествующих коагуляцион.

101 ному превращению фибриногена, на которых происходит потребление части эффекторов. В противном случае их концентрации в различных тестах были бы равны, или, по крайней мере, сопоставимы. Это сомнение усиливается тем, что, по данным электрокоагулограмм, эффектор I удлиняет период до начала формирования фибринового сгустка.

Для разрешения данного вопроса мы использовали методику, позволяющую вычленить из общего каскада реакций свертывания процесс коагуляционного превращения фибриногена. Суть этой методики заключается в том, что пулированную донорскую плазму освобождают от фибриногена путем мягкой тепловой денатурации (56°С, 3 мин). Если к такой дефибринированной плазме прибавить фибриноген, эффекторы и затем провоцировать свертывание, .то эффекторы могут-влиять — на любой из этапов плазмокоагуляции. Если же в дефибринированной плазме сначала инициировать активацию каскада свертывания, а после сформирования тромбина прибавить фибриноген и эффекторы, то последние могут оказать влияние только на коагуляционное превращение фибриногена.

Результаты такого эксперимента показали, что эффективность торможения в обоих вышеописанных случаях практически равна между собой при использовании как эффектора I, так и эффектора II. Следовательно, первоначальное предположение о том, эффекторы реализуются на уровне коагуляционного превращения фибриногена, оказалось верным, а различия в механизме влияния эффекторов на свертывание наблюдаются именно на этапе превращений фибриногена.

Для подтверждения этого вывода мы определили эффективность торможения реакции взаимодействия тромбина с фибриногеном эффекторами' порознь и их суммой, сопоставляя при этом ожидаемый эффект (расчитан по Уэбб Л., (1966) и полученный фактически. Ожидаемый (теоретический) эффект был существенно ниже (в среднем на.

70%), что говорит о синергизме эффекторов. Одновременно эти данные.

102 свидетельствуют и о том, что механизм влияния исследуемых эффекторов на коагуляционное превращение фибриногена различен: в случае одинакового механизма мы наблюдали бы суммацию эффектов при недостатке эффекторов в системе, или антагонизм — при перенасышении системы эффекторами.

Еще более объективные сведения о различии в механизме действия эффекторов мы получили, наблюдая процесс коагуляционного превращения фибриногена с помощью нефелометра с автоматической регистрацией этапов этого процесса.

Эффектор I, по сравнению с контролем, в среднем всего на 9,7% задерживает формирование олигомеров и на 81% увеличивает время, необходимое для формирования фибринового сгустка. Так как агрегация протофибрилл — это практически мгновенный процесс, то эффектор I в основном тормозит аутополимеризацию достаточено зрелых олигомеров. В отличие от этого эффектор II преимущественно блокирует сборку мономеров и олигомеров — на нефелограмме нет фазы увеличения агрегатов до критического значения. Однако при этом время формирования фибринового сгустка увеличивается в среднем на 70% по отношению к контролю.

Мы провели исследования влияния эффекторов (в равных концентрациях) из сапропеля на агрегационную функцию тромбоцитов. В качестве индукторов использовали АДФ (2,5 и 10 мкг/мл) и адреналин (раствор Тоногена), так как результаты значений интенсивности агрегации, вызываемые вышеуказанными индукторами, наиболее удовлетворительны, причем интенсивность агрегации, вызываемая АДФ, хорошо коррелирует с интенсивностью агрегации, вызываемой адреналином (АуепагшБ, ОешЬагс!^ 1980).

Оба изучаемых эффектора в этих условиях ингибируют агрегацию тромбоцитов, но их механизм действия, как и влияние на процесс коагуляционного превращения фибриногена, существенно различается.

Так, при использовании АДФ в концентрации 2,5 мкг/мл эффекторы I и II практически не изменяют первую волну агрегации, характеризующую агрегацию тромбоцитов под влиянием индуктора, но заметно угнетают вторую волну, характеризующую высвобождение внутренних медиаторов агрегации. Максимальные величины второй волны агрегации для эффекторов I и II практически не отличаются между собой и меньше контрольного значения на 33,8 и 37,5% соответственно. Эффекторы I и II укорачивают время, необходимое для достижения максимальной величины второй волны, но с разной интенсивностью — на 62,5 и 37,5% соответственно. Кроме этого, эффектор I активирует процесс дезагрегации, а эффектор II на него не влияет.

Существенные различия ¡-^механизме антиагрегационного-дей-~ ствия наблюдаются при повышении концентрации индуктора до 10 мкг/мл. В этом случае в контроле первой волны агрегации не наблюдается. Нет ее и в присутствии эффектора II, но первая волна агрегации появляется в присутствии эффектора I.

Максимальные величины второй волны агрегации для эффекторов I и II меньше контрольного значения на 46,9 и 33,2% соответственно. Эффектор II существенно не изменяет время наступления максимальной величины второй волны, а эффектор I увеличивает его в среднем на 17%.

При использовании в качестве индуктора адреналина эффектор I сглаживает первую волну агрегации, вполовину уменьшает максимальную величину второй и на 12,7% удлиняет время достижения ее максимума. В отличие от этого, эффектор II, не изменяя величины максимума первой волны агрегации, в два раза увеличивает время, необходимое для его достижения, на 50,4% уменьшает максимальную величину второй и на 20,6% удлиняет время достижения ее максимума.

При расшифровке механизма ограничения свертывающей активности плазмы крови прежде всего мы с помощью объективного.

104 способа (регистрация процесса свертывания плазмы в динамике коагу-лографом Ы 334) убедились, что полученные нами фракции сапропеля обладают выраженной антикоагулянтной активностью. При этом в качестве субстрата использовали пулированную донорскую плазму, а в качестве эффекторов — I и II совместно и порознь. При этом выявилось некоторые различия во влиянии носителей на рекальцификацию плазмы крови, особенно отражающиеся в изменении времени до начала свертывания, а также в скорости ретракции и фибринолиза.

Различия выявились и при исследовании влияния ингибиторов на процесс коагуляционного превращения фибриногена другим объективным способом — с помощью нефелометра: I меньше влияет на ранние стадии формирования протофибрилл, а тормозит преимуществено аутополимеризацию достаточно зрелых олигомеров. II, наоборот, обладает выраженным ингибирующим действием на ранние стадии полимеризации. При их совместном влиянии на коагуляцию фибриногена наблюдается синергизм эффектов, что подтверждает вышесказанное о различии в механизмах действия.

Таким образом, основной точкой приложения изучаемой антикоагулянтной активности можно считать заключительную фазу свертывания с преимущественным влиянием эффектора на самосборку мономерного фибрина.

В заключительной серии экспериментов мы попытались оценить состояние гемокоагуляции при внутривенном введения фракции сапропеля, содержащей антикоагулянт, лабораторным животным. Но прежде мы выразили количество антикоагулянта в весовых единицах, что необходимо для проведения экспериментов на животных и при оп-ределениия острой токсичности.

Следует оговориться, что в данном случае мы не пытались детально проанализировать состояние плазмокоагуляции в ответ на внутривенное ведение экстракта из сапропеля, полагая, что при позитивных.

105 предварительных результатах, указывающих на перспективность дальнейшего изучения новых антикоагулянтов, подобная работа должна быть проведена как самостоятельное исследование. В связи с этим мы определяли лишь те показатели, которые интегрально отражают общую свертывающую активность плазмы крови (время рекальцифика-ции), скорость взаимодействия тромбина с фибриногеном (тромбино-вое время) и аутополимеризации мономерного фибрина (время самосборки фибрина в плазме).

Предварительные исследования показали, что ингибитор из сапропеля обладает противосвертывающим действием не только in vitro, но и в организме животных и что заметный эффект достигается при введении его в дозе, не обнаруживающей 1шдамшр токсического^влия—ния. В связи с этим, обоснованным представилось изучить изменения вышеуказанных показателей плазмокоагуляции в зависимости от вводимой дозы. Оказалось, что при дозе вводимого эффектора свертывания 5,0 мг/кг массы тела животного время рекальцификации по сравнению с контролем увеличивается в 1,9 раза, тромбиновое время — в 1,7 и время самосборки — в 3,6 раза. При увеличении дозы антикоагулянта до 10,0 мг/кг (в 1,4 раза) эти же показатели становятся выше контрольных значений в 2,1, 3,3 и 4, 8 раза. При дальнейшем увеличении дозы вводимого эффектора до 50,0 мг/кг массы тела животного время рекальцификации по сравнению с контролем возрастает в 3,9 раза, тромбиновое время — в 3,4 и время самосборки мономерного фибрина в плазме крови — в 8,2 раза.

Ежедневное введение антикоагулянта из сапропеля в течении.

14 дней в той же дозе и отборе проб крови через 6 ч после инъекции, сдвига изучаемых показателей относительно друг друга практически не наблюдается и составляют не более 11−14%. Это свидетельствует о том, что динамика гипокоагулемии оказалась примерно одинаковой как после первой единичной инъекции, так и после инъекции, выпол.

106 ненной в четырнадцатый раз.

Высокая эффективность фракции экстракта из сапропеля проявилась и его выраженным протективным действием при активации тромбиногенеза. Так, при внутривенных инъекциях тромбопластина в дозе 40 мг/кг, вызывающей гибель 70% подопытных животных, предварительное введение экстракта в дозе 7,0 мг/кг снизило частоту гибели животных на 73,4%, предварительное введение экстракта в дозе 9,2 мг/кг до инъекции тромбопластина вызывало гибель уже только 6,6% подопытных животных, т. е. в 10,5 раза меньшую в сравнении с контролем. Таким образом, экстракт можно рассматривать как эффективное средство предупреждение тромбозов путем его введения перед воздействием, сопровождающимся тромбопластинемией —.

Таким образом, наши исследования свидетельствуют, что сапропель содержит антикоагулянты прямого действия пептидной природы, сходные по структуре и практически идентичные по механизму действия с пептидами растительного происхождения. Пептиды растительного происхождения и пептиды из сапропеля принципиально отличаются от применяющихся в настоящее время в медицинской практике антикоагулянтов прямого действия, а в эксперименте на животных даже превосходят их.

Все вышесказанное свидетельствует о целесообразности дальнейшего изучения новых антикоагулянтов прямого действия из сапропеля и растительного сырья, и служит обоснованием необходимости их детального исследования согласно рекомендациям Фармакологического Комитета для антикоагулянтов прямого действия.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Д.Д., Абдуллаев Ш. Г. Гирудинотерапия больных хроническим простатитом. Баку, 1987. — 7 с.
  2. Л.А. Антикоагулянты прямого действия на основе химически модифицированных природных полисахаридов: Дисс.. канд. мед. паук. -М., 1990. С. 140.
  3. Л.А., Сятковский В. А., Капуцкий Ф. Н., Торгашев В. И. Механизмы противосвертывающей активности новых полусинтетических гепариноидов// Гематология и трансфузиология. -1991. Т. 36, № 4. — С. 23−25.
  4. В.М., Анисимова И. А., Нугманова Ф. Р. Случай острого— гепатита от гепарина//Казапский мед. жури. 1983. — № 3. — с. 220.
  5. И.П. Нейромедиаторы и нейромодуляторы. Эволюция соединений и эволюция гипотез//Журн. эвол. биохим. и физиол. 1979.-№ 3.-С. 278−282.
  6. И.П. Регуляторные пептиды, происхождение и иерар-хия//Журн. эвол. биохим. и физиол. 1982. — № 1. — С. 3−10.
  7. В.П., Баркаган З. С., Гольдберг Е. Д. и др. Лабораторные методы исследования гемостаза. Томск. — 1980. — 315 с.
  8. В.А. Растительные фенолы и здоровье человека. М., Наука. — 1984. — 160 с.
  9. З.С. Геморрагические заболевания и синдромы. М.: Мед., 1988.-528 с.
  10. П.Баркаган З. С. О применении фраксипарина для профилактики и лечения тромбоэмболии- с индуцированной гепарином тромбоци-топенией/ЛГер. арх. 1993. — Т. 65. — № 10. — С. 77−82.
  11. З.С., Лычев В. Г., Бишевский K.M. и др. Механизмы ге-паринорезистентности и их клиническое значение//Терапевт. арх.- 1982. Т. 54, № 8.-С. 77−82.
  12. П.Баркаган З. С., Сердюк П. В. Невынашиваемость беременности и нарушения в системе гемостаза/ЛГематология и трансфузиология.- 1999. -№ 4.- С. 3−8.
  13. И.П. Биологически активные вещества, продуцируемые медицинской пиявкой (Н.т.) и механизмы их действия: Автореф. дисс^.&bdquo- докт. биол. наук. М., 1986.^46 с.
  14. И.П. Механизмы регуляции гемостаза и фибринолиза секретом слюнных желез медицинской пиявки. Биохимия животных и человека: Респуб. межвед. сб. науч. трудов /А.Н.Украины, 1991. — С. 28−39.
  15. И.П., Миссельвид Ф., Никонов Г. И. и др. Секрет слюнных желез медицинской пиявки // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1984.-Т. 97, № 6.-С. 696−697.
  16. A.C. Низкомолекулярные гепарины//Эксперим. и клин, фармакология. 1993. № 4. — С. 66−76.
  17. M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963. — С. 34−38.
  18. Ю.В., Моисеев B.C., Лепахин В. К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. Руководство для врачей. М.: Универсум, 1993.
  19. B.C. Математическая статистика в клинической, профилактической и экспериментальной медицине. М.: Медицина, 1967.-303 с.
  20. В.Г. Диагностика и лечение сепсиса//Воен. мед.110журн. 1983. — № 5. — С. 35−40.
  21. С.М. Новые данные о гепарине//Вопросы мед. химии. -1981. Т. 27. — № 6. — С. 726−736.
  22. А.Ш., Галян C.J1., Дементьева И. А., Нелаева A.A., Соловьев В. Г. Тромбоциты. Тюмень, 1996. — 250 с.
  23. А.Ш., Галян С. Л., Левен П. И. и др. Регуляция коагу-ляционных превращений фибриногена. Свердловск: Средне-Уральское кн. изд-во, 1987. 205 с.
  24. А.Ш., Кожевников В. А. Свертываемость крови при реакции напряжения. Свердловск: Средне-Уральское кн. изд-во, 1986.- 174 с.
  25. Валиев-Б.Н., Сабирова P.C. Нарушения гепаринового обмена-при-острой пневмонии у детей раннего возраста//Вопросы детской пульмонологии и аллергических заболеваний у детей. Ташкент. 1980.-Вып. 2.-С- 18−22.
  26. Г. В., Свиридова С. И. Синтез физиологически активного аналога цепи фибрина и его производпых//У1 Всесоюз. симп. по химии белков и пептидов: Тез. докл. Рига, 1983. — С. 344−345.
  27. И.Г. Вариационные ряды и их характеристика. М.: Статистика, 1970.- 158 с.
  28. Я.И., Воробель A.B. Влияние гепарина на кининовую систему при остром внутрисосудистом гемолизе//Система свертывания крови и фибринолиз. Саратов, 1975. — С. 345.
  29. O.K. Проблемы и гипотезы в учении о свертывании крови. М., 1981.
  30. Л.В., Майле-Августинович С.Г., Черненко Ю. П. Влияние гепарина на щитовидную железу // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1983. — Т. 85, Вып. 8. — С. 57−61.
  31. A.A. Молекулярные основы взаимодействия гирудина с тромбином: Обзор // Биополимеры и клетки. 1992. — Т. 8, № 1. — С. 5−22
  32. В.В. Гепаринотерапия ДВС крови при гнойно-воспалительных заболеваниях у детей // Анестезиология и реаниматология. 1991. -№ 1.- С. 69−72.
  33. H.H. Механизмы антикоагулянтного действия сернокислого эфира хитозана // Вопр. мед. химии. 1992. — Т. 38, № 5. — С. 12−14.
  34. Ена Я. М. Всесоюзное совещание, посвященное применению пиявки // Врачебное дело. 1992. — № 5. — С. 115−117.
  35. K.JI., Розенфельд М. А., Тер-Макарян А.Г.идр.Спек-трофотометрические исследования реакции комплексообразова-ния фибриногена с антикоагулянтом гепарином // Изв. АН СССР, сер. Биол. 1974. — № 6. — С. 920−924.
  36. B.C., Румянцева А. Г. Нежелательные эффекты длительного применения гепарина и подходы к их устранению // Эксперим. и клин, фармакол. 1992. — Т. 55, № 6. — С. 73−76.
  37. B.C., Усов А. И., Ольский Т. С. Сравнительное исследование антикоагулянтной активности сульфатированных полисахаридов красных морских водорослей //Фармакология и токсикология. 1983. — № 3. — С. 61−67.
  38. A.B., Давидович Ю. А., Рогожин C.B. Синтез аналога N-концевого пептида ос-цепи фибрина с последовательностью Gly-Pro-Arg // VI Всесоюз. симп. по химии белков и пептидов: Тез. докл. Рига, 1983. — С. 342−343.
  39. Г. С. Влияние гир.удотерапии-на-агрегацию -тромбоцитов у больных с острым инфарктом миокарда // Кровообращение. 1991.-Т. 24, № 3.-С. 32−34.
  40. Г. С. Изменение некоторых показателей крови при ги-рудино-терапии // Эксперим. и клин, медицина. 1989. — Т. 29, № 2.-С. 107−111.
  41. Е.П., Русакова O.A., Поле И. Э. Получение прямых низкомолекулярных антикоагулянтов из сапропеля. Тез. докл. 2 окружной конф. мол. уч. ХМАО. Сургут, 2001. — С. 171−172.
  42. В.И., Ардемасова З. А., Розенфельд М. А. Антикоагу-лянтные свойства синтетических пептидов // Докл. VI Всесоюзн. симп. по химии белков и пептидов: Тез. докл. Рига, 1983. — С. 391−392.
  43. Ю.Я. Пиявки (гирудо-терапия). С-Петерб. мед. центр культуры здоровья им. А. С. Залманова, 1993. — 17 с.
  44. H.JI. Опыт использования гирудотерапии в акушерской практике // Современные методы диагностики и лечения. -Казань, 1993. С. 252−253.
  45. Ю.Л. Тест толерантности плазмы к гепарину в диагно113стике тромбофилии // Лаб. дело. 1981. — № 7. — С. 411−414.
  46. Кириченко JT. J1. Лечение гепарином // Кардиология. 1986. — № 9. -С. 119−123
  47. П.К. Современное состояние исследований по физиологии пептидов//Система мозговых и внемозговых пептидов. Л., 1984.-С. 3−4.
  48. М.М. Синантрин. Киев: Наукова Думка, 1974. — 128 с.
  49. В.К. Исследование влияния некоторых тритерпеновых гликозидов на свертывающую систему крови//В кн.: Физиологически активные вещества в медицине. Ереван, 1983. — С. 148.
  50. И.Д., Логинов Л. Ф. К вопросу о молекулярной массе гуминовых кислот //В кн.: Гуминовые препараты: TraMeHcjoril сельскохозяйственный институт. Научные труды, том XIV. -Тюмень, 1971. С. 125−130.
  51. Н.В. Биостратификация и типология русских сапропелей. Издательство Академии Наук СССР. — М. — 1960. — 219 с.
  52. .А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и ее свертывания. М.: Медицина, 1975. — С. 487 491.
  53. .А. Фибринолитические и антикоагулянтные комплексы низкомолекулярного гепарина с тафцином // Бюлл. экспе-рим. биол. и мед. 1992. — Т. 114, № 12. — С. 609−611.
  54. .А., Ляпина JI.A. Комплекс гепарин-мочевина и его физико-химические свойства // Вопр. мед. химии. 1975. — № 2. -165−168.
  55. .А., Ляпина Л. А. Физиологические свойства комплекса гепарин-тромбопластин // Физиол. журн. СССР. 1979. -№ 6. -С. 771−776.
  56. .А., Ляпина Л. А., Григорьева Е. А. Взаимодействие гепарина с фибринмономером и комплексом фибринмономер-фибриноген // Вопр. мед. химии. 1980. — № 3. — С. 318−321.
  57. .А., Ляпина Л. А., Пасторова В. Е. Значение комплекса антитромбин III-гепарин-тромбин в защитной реакции противо-свертывающей системы // Вопр. мед. химии. 1988. — №. 2. — С. 38−42.
  58. .А., Ляпина Л. А., Ульянов A.M. Наличие активного комплекса фибриноген-гепарин в суммарной фракции продуктов деградации плазмы крови//Биохимия. 1977. — № 3. — С. 451−459.
  59. .И., Скипетров В. П. Форменные элементы крови. М.: Медицина, 1974. — С. 17.
  60. .И., Цибиков H.H., Арушанян Л. Г. Полипептиды как регуляторы микроциркуляторного гемостаза//Актуальные вопросы нарушений гемодинамики и регуляции микроциркуляции в клинике и эксперименте. М., 1984.-С. 185−186.
  61. Н.Г., Клейменов A.M., Петросян М. Т., Розенфельд М. А. и др. Влияние низкомолекулярных пептидов на процесс перехода фибриногена в фибрин // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1987. -№ 8. — С. 190−192.
  62. Н.Г., Петросян М. Т., Розенфельд М. А. Антикоагулянт-ные свойства низкомолекулярных пептидов // Перспективы биоорганической химии в создании новых лекарственных препаратов. Рига, 1982. — С. 38−39.
  63. Р.И., Слабанов Ю. Д., Зубаиров Д. М. О механизме неферментативного фибринолиза// Вопр. мед. химии. 1981. — № 4. -С. 478−481.
  64. ЛукинЕ.И. Фауна СССР.-Пиявки. Т. 1.-Пиявки-пресных-и солоноватых водоемов. Новая серия № 109 зоолог, инс-та АН СССР. -Л., 1976.
  65. В.Г. Диагностика и лечение ДВС крови. М.: Медицина, 1993. — 114 с.
  66. Л.А. Влияние ингибиторов протеиназ и блокаторов гепарина на фибринолитические свойства комплексов гепарина // Вестн. Московского ун-та. 1980. — № 2. — С. 60−63.
  67. Л.А. Свойства продуктов лизиса нестабилизированного фибрина комплексом адреналин-гепарин // Вестн. Московского ун-та. 1981. -№ 3. — С. 42−46.
  68. A.B., Саргин К. Е. Клиническое применение гепарина и его низкомолекулярных фракций // Кардиология. 1986. — Т. 26, № 9. — С. 122−124.
  69. Н.М. Основы клинической фармакологии и фармакотерапии в кардиологии. М.: Медицина, 1988. — С. 194−195.
  70. H.H., Козлов В. А. Антикоагулянтная и тромболи-тическая терапия в хирургии. М.: Медицина, 1976. — 426 с.
  71. A.A. Физиология свертывания крови. М.: Медицина, 1 161 966.-464 с.
  72. В.И. Справочник кардиолога по клинической фармакологии. М.: Медицина, 1987. — С. 280−287.
  73. И.В. Тканевой тромбопластин ингибитор гепарина, механизм действия, биологическое значение: Автореф. дис.. канд. биол. наук. — Ленинград, 1988. — 29 с.
  74. В.Г. Лекарственные средства, влияющие на гемостаз // Акушерство и гинекология. 1993. — № 2. — С. 52−53.
  75. В.И., Ефимов B.C., Деканбаева С. А. Принципы гепари-нотерапии при гломерулонефрите у детей // Актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики болезней почек у детей. -Куйбышев, 1985. С. 70−7,4
  76. В.З., Амосова E.H., Гирина Л. А. и др. Противотром-ботическая терапия в клинической практике, новое в терапии, диагностике и лечении. М.: Медицина, 1982. — 87 с.
  77. С.Е., Чехова Е. И., Фастовский ВЛ. Аллергические гепариновые инфильтраты и некрозы кожи, вызванные применением гепарина//Тер. архив. 1984. — № 6. — С. 48−51.
  78. С.Е., Шитикова Б. Д. Аллергический гепариновый инфильтрат при подкожном введении // Актуальные проблемы онкологии и мед. радиологии. Минск, 1980. — Вып. IX. — С. 82−85.
  79. С.А. Новое о взаимоотношении гепарин-кровяные пластинки // Функциональное состояние тромбоцитов в норме и при патологических состояниях. Обнинск, 1975. — С. 65.
  80. Г., Понеску Э. Современная медикаментозная патология. М.: Медицина, 1976.
  81. Е.П. Ингибиторы Ilb/IIIa рецепторов тромбоцитов -новое направление в антитромботической терапии //Терапевтический архив 1997. — № 9. — С. 66−71.
  82. В.Д., Рузга Б. А., Самойлов О.Б. Влияние гепарина на
  83. ДНК // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1985. — № 3. — С. 298−301.
  84. М.Т., Розенфельд М. А., Петров А. К. и др. Антикоагу-лянтные свойства пептидов аналогов N-концевого участка цепи фибрина // Система мозговых и внемозговых пептидов. — JL, 1984. — С. 67−68.
  85. И.Э., Русакова O.A., Кортусов В. Л. Новые прямые антикоагулянты растительного происхождения. Мат. 2 междунар. науч.-практ. 2 конф. «Здоровье и образование в 21 веке». М., 2001. -С. 149.
  86. К. Локализованная и рассеянная внутрисосудистая коагуляция: Пер. с франц. М.: Медицина, 1974. — 17 с.
  87. Радзевич И.М.,-Ходорова -Е.Л. Получение- фибринмономера из-------нефракционированной плазмы крови//Укр. биохим. журн. 1969. -№ 4.-С. 367−370.
  88. М.А., Ерзинкян К. Л., Пирузян Л. А. Исследование молекулярного механизма реакции комплексообразования фибриногена с гепарином // Докл. АН СССР. 1975. — № 3. — С. 419 427.
  89. М.Я., Левина М. Н., Каменева Н. С. и др. Изучение механизма антикоагулянтного действия фукоиданов // Фармакология и токсикология. 1989. — № 3. — С. 48−51.
  90. O.A. Антикоагулянты растительного происхождения: природа и механизм действия: Дис.. канд. мед. наук. Тюмень, 1993. — С. 63−64.
  91. O.A., Поле И. Э., Калинин Е. П. Прямые низкомолеку118лярные антикоагуляпты растительного происхождения. Природа и механизм действия. Там же. — С. 196−198.
  92. .А. Влияние гепарина на реакцию образования фибрина // Вестн. Московского ун-та. 1970. — № 2, — С. 76−80.
  93. B.C., Яблоков Е. Г., Кириенко А. И. Тромбоэмболия легочной артерии. М.: Медицина, 1989. — С. 263.
  94. И.В. Методы определения токсичности и опасности химических веществ. М.: Медицина, 1970. — 343 с.
  95. В.П. Тканевое звено физиологической регуляции агрегатного состояния крови и клеточных структур // Усп. физиол. науки. 1986. — Т. 17. — С. 65−79.103Стрельников Ю.Е., Лабикова Н. П., Милевский Е. И- и-дрг
  96. Сравнительное исследование биологических свойств ряда бактериальных полисахаридов // Радиобиология. 1986. — № 3. — С. 323−328.
  97. С.И. Продолжительность самосборки фибрина при изменениях гемостатического потенциала: Автореф. дис.. канд. биол. наук. Ленинград, 1987. — 20 с.
  98. А.Д., Сапожникова Э. Н. Лекарственные растения СССР и их применение. М.: Медицина, 1983. — С. 288.
  99. Т.П., Белицер В. А. Исследование равновесной системы фибрин-фрагмент Д-протектор//Укр. биохим. журн. 1978. — № 3. -С. 357−363.
  100. A.M., Ляпипа Л. А. Образование комплекса фибриноген-гепарин при взаимодействии комплекса адреналин-гепарин ифибриногена in vitro и in vivo/УНаучн. докл. высш. школы. Биологические науки. 1973. -№ 9. — С. 44−49.
  101. М. Проблемы и перспективы клинического применения гепарина// Кардиология. 1981. — № 8. — С. 28−31.
  102. М., Фермилен Ж. Тромбозы. М.: Медицина, 1986.
  103. А.Е., Орлов Б. И. Физиологическая роль гепарина: Учебное пособие по специальному курсу «Современные проблемы физиологии и биохимии крови». Горький, 1987. — С. 77.
  104. З.А., Сыряв В. Н., Джухарова М. Х. и др. Исследования гиполипидемических свойств"полисахаридов, выделенных-из флоры Средней Азии//Хим.фарм. журн. 1987. — № 11. — С. 13 481 352.
  105. Е.И., Лакин K.M. Антикоагулянты и фибринолитиче-ские средства. М.: Медицина, 1977.
  106. Г. И. Дизайн лекарственных препаратов на базе пептидов // Перспективы биоорганической химии в создании новых лекарственных препаратов: Сб. трудов. Рига: Изд-во ун-та, 1982. — С. 7−9.
  107. Е.А. Пептидные ингибиторы коагуляционного превращения фибриногена: Автореф. дис.. докт. биол. наук. М., 1990.
  108. Е.А., Калинин Е. П. К вопросу о различиях в механизме действия ингибиторов свертывания крови из сапропеля. В кн.:
  109. Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. Мат.120конф. биохимиков Урала, Поволжья и Зап. Сибири. Ижевск. 2001. -С. 142−143.
  110. Е.А., Калинин Е. П., Русакова OA. Способ получения антикоагулянта из сапропеля. Патент на изобретение № 2 175 552 от 10 ноября 2001 г.
  111. Е.А., Поле И. Э., Калинин Е. П., Кортусов В. Л., Платонов Е. В., Русакова О. А. Некоторые свойства антикоагулянтов из сапропеля //Тромбоз, гемостаз и реололгия. 2001. — № 1 (5). — С. 140 141.
  112. Н.В. Антикоагулянтная активность фракции сапропеля. Получение, природы и механизм действия//Дис.. канд. биол. наук.--=Тюмень.--^-1998.---141-с. — ---------
  113. Abilgaard U. Inhibition of the thrombin-fibrinogen reaction by heparin in the absense of cofactor//Scand. J. Haemotol. 1968. — N 6. -P. 432−439.
  114. Achyuthman K., Dobson J., Greenberg Ch. Gly-Pro-Arg modifies the glutamine residues in the a- and y-chain in fibrinogen: inhibitor of transglutaminase cross-linking//Biochem. Biophys. Acta. -1986.-№ 3. P. 261−268.
  115. Alderman M.D., Hansen A.G. Effects of naturally occurring and synthetic thrombin inhibitors // Arch. Intern. Med. 1986. — Vol. 148. — P. 1400−1407.
  116. Ansell J., Deykin D. Heparin-induced thrombocytopenia and recurrent thromboembolism // Amer. J. Hemat. 1980. — Vol. 8. — P. 325−332.
  117. Asch A.S., Barnwell J., Silverstein R.L., Nachman R.L. Isolation of the thrombospondin membrane receptor //J. Clin. Invest. -1987. Vol. 79, N 4. — P. 1054−61.
  118. Avenarius H.J., Deinhardt J. Durchfuhrung und Auswertung von Aggregationstesten // Prakt. Anwend. Thrombozytenfunktionsdi-agn. Stuttgart — New York, 1980. — P. 57−68.
  119. Bagdy D., Diozegi M., Sebestyent J. e.a. A D-Phe-Pro-Arg-A anticoagulants lemezlce funktio ot gatlo Lataso in vivo//Kiserl. Or-voshud. 1984. — № 1. — P. 26−46.
  120. Banssillion V., Besson L., Azzar D et al. Fraxiparine Analytical and Structural Data, Pharmacology, Clinical Trials. Paris, 1987. P.13.
  121. Barker P.L., Bullens S., Bunting S., Burdick D.J., Chan K.S., Deisher T., Eigenbrot C., Gadek T.R., Gantzos R., Lipari M.T., et all Cyclic RGD peptide analogues as antiplatelet antithrombotics //J. Med. Chem. 1992. -Vol.35, N. 11.- P.2040−8.
  122. Barradas M.A., Milchailidis D.P., Epemolu O. et al. Comparison of the platelet proaggregatory effect of conventional unfraction-ated heparins and low molecular weight heparin fraction (CY-222) // Brit. J. Haemost. 1987. — Vol. 67, N 4. — P. 451−458.
  123. Barrowchiffe T.W., Merton R.E., Gray E., Thomas D.P. Heparin // Thrombos. Haemostas. 1988. — Vol. 60, N 3. — P. 434−436.
  124. Bennett J.S. Structural biology of glycoprotein Ilb-IIIa //Trends. Cardiovasc. Med. 1996. — Vol.6, N.l. -P.31−36
  125. Bergquist D., Frisell J., Haibook T. et al. Anticoagulant effect of low molecular weight heparin // Thromb. Haemost. 1987. — Vol. 57, Suppl. 1. — P. 1339a.
  126. Bergquist D., Hedner U., Siorin E. et al. Anticoagulant effects of two types of low molecular weight heparin administered subse- -quently//-Thromb.-Res. -1983. N-3.—P.-381−391.
  127. Berkowitz S.D., Harrington R.A., Rund M.M., Tcheng J.E. Acute profound thrombocytopenia after C7E3 Fab (abciximab) therapy //Circulation 1997. — Vol.95, N.4 — P.809−13.
  128. Bertele V., Roncaglioni M.C., Donati M.B., Caetano G. Heparin conteracts the antiaggregating effect of prostacyclin by potentiating platelet aggregation // Thrombos. Haemost. 1983. — Vol. 49, N 2. -P. 81−83.
  129. Bick R.L. Disorders of haemostasis and thrombosis. Principles of clinical practice. New York, 1985.
  130. Boeckel A.A., Best M., Petiton M. et al. Pentasaccharides and tetrasaccharides antithrombotic activity. Патент 4 841 041 США. Опубл. 20.06.88. НКИ 536/1 18.
  131. Borg J.Y., Flecht В., Legendve M. et al. Heparin and low molecular weight heparins-induced thrombocytopenias // Thromb. Res. -1986. Suppl. 6. — P. 96.
  132. Bottiger L.E. The heparin story. To search of the early history of heparin // Acta Med. Scand. 1987. — Vol. 222, N 3. — P. 195−200.
  133. Bousgust E., Doutremepuich C., Gestrean S., e.a. Activity thrombolutique de heparine et d’une fraction de las poids molecu-lar//Therapic. 1985. — № 1. — P. 13−16.
  134. Brase L.D., Fareed J. Heparin-induced platelet aggregation (HIPA) dose/response weight heparin preparations // Thromb. and Haemost. 1987. — Vol. 58, N 1. — P. 18.
  135. Browse N.L., Burnard K.G., Thomas M.L. Diseases of the veins. Pathology, diagnosis and treatment. London: Edward Arnold, 1988.
  136. Burch J.W., Stanford N., Majerus P.W. Inhibition of platelet prostaglandin synthetase by oral aspirin //J. Clin. Invest. 1978. -Vol.61, N.2. — P314−9.
  137. Calvete J.J. Clues for understanding the structure and function of a prototypic human integrin: the platelet glycoprotein Ilb/IIIa complex //Thromb. Haemost. 1994. — Vol.72, N1. — P. 1−15.
  138. Calvete J.J., Schafer W., Mann K. Mass spectrometric analysis state of human platelet GP Ilia //Platelets. 1995.- 6.- 5.
  139. Caranobe C., Barret A., Gabaig A. et al. Disappearance of circulating anti-Xa acting after intravenous injection of standart heparin and of low molecular weight heparin (CY-216) // Thromb. Res. -1985. -N 1. P. 129−133.
  140. Carrigan J.J.Jr. Heparin therapy in bacterial septicemia // J. Pediatric. 1987. — Vol. 41. — P. 695−704.
  141. Carteaux J.P., Steiner B., Roux S. Ro 44−9883, a new nonpeptidic GPIIb-GPIIIa antagonist prevents platelet loss in a guinea pig124model of extracorporeal circulation //Thromb. Haemost. 1993. -Vol.70, N.5-P.817−21.
  142. Changeng R., Qingyn W.U., Wanga Z. et al. Antithrombotic effects of dextran sulfate // Med. J. Aust. 1986. — Vol. 44. — P. 17−21.
  143. Chong B.H., Ismail F., Cade J. et al. Heparin-induced thrombocytopenia: studies with a new low molecular weight heparinoid, Opg. 10 172//Blood. 1989.-Vol. 73, N6.-P. 1592−1596.
  144. Cimo P.L., Moake J.L., Weiniger R.S. et al. Heparin-induced thrombocytopenia: association with platelet aggregation and arterial thrombosis // Amer. J. Hemat. 1979. — Vol. 6. — P. 125−133.
  145. Cines D.B., Tomaski A., Tannenbaum S. Immune endothelialcells-injury- in-heparin-associated throbocytopenia // New Engl—Jt^
  146. Med. 1987. — Vol. 316, N 10. — P. 581−589.
  147. Cockar D.L., Pezz H.A., Gzaham M.F. Heparin induced specific protein release from human intestinal smooth muscle cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. — Vol. 142, N 2. — P. 542 551.
  148. Cohen M. Heparin-induced thrombocytopenia and the clinical use of low molecular weight heparins in acute coronary syn-dromes//Semin. Haematol. 1999. -V. 36. -N. 1. — P. 33−36.
  149. Collen D., Lijnen H.R. Molecular basis of fibrinolysis, as relevant for thrombolytic therapy //Thromb. Haemost. 1995. — Vol.74, N. l -P.167−71.
  150. Coller B.S. A new murine monoclonal antibody reports an activation-dependent change in the conformation and/or microenvironment of the platelet glycoprotein Ilb/IIIa complex //J. Clin. Invest. -1985.-Vol.76, N. l -P.101−8.
  151. Coller B.S. Blockade of platelet GP Ilb/IIIa receptors as an antithrombotic strategy //Circulation 1995. — Vol.92,N.9. — P.2373−2380.
  152. Coller B.S. GP II r III antagonists: pathophysiologic and thera-b a peutic insights from studies of c7E3 Fab //Thromb. Haemost. -1997. Vol.78, N.l. — P.730−735.
  153. Copplestone A-, OscierD.G.Heparinrinducedthrombocyto-penia in pregnancy // Br. J. Haematol. 1987. — Vol. 56, N 2. — P. 248.
  154. Cox D., Aoki T., Seki J., Motoyama Y., Yoshida K. The pharmacology of the integrins //Med. Res. Rev. 1994. — Vol.14, N2. -P.195−228.
  155. Daves F. Heparin. New biochemical and medical aspects // Proceeding of the simposium 29 june 1 july 1981.- 1983. — N 4. — P. 4561.
  156. Deacon-Smith R., Lee-Potter., Rogers D. Platelet agregation in the presense of extracts of Britich marine algae//Med. Lab. Sch. -1985.-N4.-P. 404−405.
  157. Dennis S., Wallace A., Hofsteenge J., Stone S.R. Use of fragments of hirudin to investigate thrombin-hirudin interaction //Eur. J. Biochem. 1990. — Vol. 188, N. 1. — P.61−6.
  158. Dodt J., Schmitz Th., Schafen Th., Bergman C. Expression, secretion and processing of hirudin in E. coli using the alkaline phosphatase signal sequence // FEBS Letter. 1986. — Vol. 202. — P. 373 377.
  159. Dunn F., Soria C., Thomaidis A. et al. Interaction of platelet — —with-standart-heparin-and-low molecular—weight-fractions-//-Nouv.
  160. Rev. Franc. Hemat. 1984. — Vol. 26. — 249 p.
  161. Engelberg H. The effect of heparin on oxygen transport from blood to tissues in heparin-structur function, and clinical implication // Adv. Experim. Med. Biol. N.W., 1975. — Vol. 52. — P. 299−306.
  162. Engelberg H., Brown K.D. Heparin: metabolism, physiology and clinical application. Springfield, 1983. — 77 p.
  163. Fareed J. A prospect of firther developments of low molecular weight heparin in the 1990's // International Symposium on Low Molecular Weight Heparin and Related Polysaccharides. Munich, 1991. — P. 29.
  164. Fareed J., Walenga J.M. Molecular composition of low molecular weight heparins: relevance to biochemical and pharmacologic effects // Fraxiparine. Second International Symposium. Monte Carlo, 1989. — P. 30−31.
  165. Farrell D.H., Thiagarajan P. Binding of recombinant fibrinogen mutants to platelets //J. Biol. Chem. 1994. — Vol.269, N1. — P.226−31.
  166. Farrell D.H., Thiagarajan P., Chung D.W., Davie E.W. Role of fibrinogen alpha and gamma chain sites in platelet aggregation //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. — Vol.89, N22. — P. 10 729−32.
  167. J.J. 3rd EPILOG and CAPTURE trials halted because of positive interim results news. //Circulation 1996. — Vol.93, N4. -P. 637.
  168. Ficker A.M., Mauzac M. Studies on the site of action of prothrombin biosynthesis // Biomaterials. 1985. — Vol. 6. — P. 198 202.
  169. Fioravanti C., Burkholder D., Francis B., Siegl P., Gibson R. Antithrombotic activity of recombinant tick anticoagulant peptide and heparin in a rabbit model of venous thrombosis//Thromb. Res. 1993. -V. 71.-N4.-P. 317−324.
  170. Fitzgerald D.J. Platelet inhibition with an antibody to GP Ilb/IIIa//Circulation. 1989. — 80. — 6.-P. 1918−1919.
  171. Frohlish E.D., Alderman S.A. Heparin: chemistry and clinical usage // Lancet. 1988. — N 4. — P. 1349−1354.
  172. Fuster V., Jang I-K. Role of platelet-inhibitor agents in coronary artery disease. In: Topol EJ, editor. Textbook of interventional cardiology. Philadelphia: W.B. Saunders- 1994. p. 3−22.
  173. Gabriel D., Smith L., Folda J. The influence of immunoglobulin on the assembly of fibrin gels//J. Lab. Clin. Med. 1983. — N 4. — P. 545−552.
  174. Galanakis D., Ginzler E., Fikring S. Monoclonal Ig G anticoagulants delaying fibrin aggregation in two patients with systemic lupus erythematosus//Blood. 1978.-V. 52.-P. 1037−1046.
  175. Ganzer D., Gutezeit A., Mayer G. Prevention of thromboembolism as a cause of thromboembolic complications. A study of theincidence~ofheparin induced thrombocytopenia type-II//Z.-Orthop —1.re Grenzgeb. 1997. — V. 135. — N 6. — P. 543−549.
  176. Gartner T.K., Bennett J.S. The tetrapeptide analogue of the cell attachment site of fibronectin inhibits platelet aggregation and fibrinogen binding to activated platelets //J. Biol. Chem. 1985. -Vol.260, N22. -P.l 1891−4.
  177. Gibbs A., Green G., Doctor V. Isolation and anticoagulant properties of polysaccharides of Typha angustata and Daemonorops species//Thromb. Res. 1984. — N. 3. — P. 97−108.
  178. Girdwood R.H. Metabolism of antithrombin III (heparin cofac-tor) // Clinical pharmacology. London, 1985. — P. 474−479.
  179. Girdwood R.H. Metabolism of antithrombin III (heparin cofac-tor) // Clinical pharmacology. London, 1985. — P. 474−479.
  180. Gonault-Helimann M., Huet Y., Adnof S. et al. Low molecular weight heparin fractions as an alternative therapy in heparin-induced thrombocytopenia//Haemostasis. 1987. — Vol. 17. — P. 134−140.
  181. Grotemeyer K.H., Scharafinski H.W., Husstedt I.W. Two-year follow-up of aspirin responder and aspirin non responder. A pilotstudy including 180 post-stroke patients //Thromb.Res.- L9931. Vol.71, N.5.-P.397−403.
  182. Gruel Y., Leroy J., Guerous C. et al. Thrombopenie et thrombose sour heparine. Neoessite destests d’agregation avant le traitement par l’heparine de las poids moleculaire // Presse med. 1985. -Vol. 14. — P. 166−167.
  183. Haas S., Blumel G. Prophylaxis of thromboembolism with various low molecular weight heparins // Haemostasis. 1988. — Vol. 18, Suppl. 3. — P. 82−87.
  184. Hand E.L., Gilbert J.D., Yuan A.S., Olah T.V., Hichens M. Determination of MK-383, a non-peptide fibrinogen receptor antagonist, in human plasma and urine by radioimmunoassay //J. Pharm. Biomed. Anal. 1994. — Vol.12, N.8. — P.1047−53.
  185. Hantgan R., Jerom W., Hursting M. No effects of clot age or thrombolysis on Argatrobans inhibition of thrombin//Blood. 1998. -V. 92,-N6.-P. 2064−2074.
  186. Harrington R.A. Design and methodology of the PURSUITtrial: evaluating eptifibatide for acute ischemic coronary syndromes.
  187. Platelet Glycoprotein Ilb-IIIa in Unstable Angina: Receptor Suppres130sion Using Integrilin Therapy //Am. J. Cardiol. 1997. — Vol.80, N.4A. — P.34B-38B.
  188. Henschen A., Lottspeich E. Amino acid sequence of human fibrin. Frelitminary note on the y-chein sequence//Hoppe-Seulers Zeitschrift fur Physiologisch Chemie. 1977. — V. 358. — P. 935−938.
  189. Hirano S., Kinngava J., Nishioka A. International Conference of Chitin and Chitosan, 3-rd: Proceedings. Ancoma, 1985. — P. 461 -467.
  190. Hirsh J., Levine M.N. Low molecular weight heparin // Blood. -1992. Vol. 79, N 1. — P. 1−17.
  191. Hoffman A., Markwardt F. Inhibition of the thrombin-platelet reaction by hirudin // Haemostasis. 1984. — Vol. 14, N 7. — P. 164 169.
  192. Hoots W., Carrel N., Wagner R., Cooper H., McDonagh G. A naturally occuring antibody that inhibits fibrin polymerization//New Engl. J. Med. 1981.-N 15.-P. 857−861.
  193. Horellon M.H., Conrad J., Zecrulier C. et al. Persistent heparin-induced thrombocytopenia despite therapy with low molecular weight heparin//Thrombos. Haemost. 1984. — Vol. 51. — P. 134.
  194. Hsiech K., Mudd M., Wilner G. Fibrin polymerization. 1. Alkylating peptide Inhibitors of fibrin polymerization//.!. Mtd. Chem. -1981.-V. 24. P. 322−327.
  195. Huang T.F., Holt J.C., Kirby E.P., Niewiarowski S. Trigramin: primary structure and its inhibition of von Willebrand factor binding to glycoprotein Ilb/IIIa complexion human platelets //Biochemistry-- — 1989.-Vol.28, N2.-P.661−6.
  196. Huang T.F., Niewiarowski S. Disintegrins: the naturally-occurring antagonists of platelet fibrinogen receptor //J. Toxicol. Toxin Rev. 1994.-Vol.13 -P.253−273.
  197. Fluisse M.G. Thrombopenie incluite par l’heparine standard. Tentative therapeutique a l’aide il’une heparine de bas moleculaire // Press med. 1983. — Vol. 12. — P. 643−645.
  198. Huisse M.G., Guillin M., Bereaud A. et al. Heparin-associated thrombocytopenia in vivo effects of different molecular weight heparin fractions // Ibid. 1982. — N 4. — P. 485−490.
  199. Huul R.S. Therapeutic use of low molecular weight heparins: the knowledge to date and their application to therapy // International Symposium on Low Molecular Weight Heparins and Related Polysaccharides. Munich, 1991. — P. 21.
  200. Hynes R.O. Integrins: a family of cell surface receptors //Cell. -1987.-Vol. 48, N4.-P. 549.
  201. Jaffe E.A., Weksler B.B. Recovery of endothelial cell prostacyclin production after inhibition by low doses of aspirin //J. Clin. Invest. 1979. — Vol.63, N.3. — P.532−5.
  202. Jaques L. The new underrstanding of drug heparin//Chest. — 1985.-V. 88.-N5.-P. 751−754.
  203. Kaiser B., Markwardt F. Antithrombotic and haemorrhagic effects of the naturally occuring thrombin inhibitor hirudin // Folia Haemat. 1988. — Vol. 115, N 1−2. — P. 41−46.
  204. Kelton J., Levine M. Heparin-induced thrombocytopenia // Sem. Thrombosis and Haemostasis. 1986. — Vol. 12, N 1. — P. 59−62.
  205. Kelton J.G. Acute thrombocytopenia and thrombosis. Heparin-induced thrombocytopenia and thrombotic thrombocytopenic purpura // Amer. N.-Y. Acad. Sci. 1987. — Vol. 509. — P. 205−211.
  206. Kher A., Bara L., Samama M. Les heparines de bas poid moleculaire // Pathol, biol. 1986. — Vol. 34, N 1. — P. 61−69.
  207. King D.L., Kelton J.G. Heparin-associated thrombocytopenia // Ann. Intern. Med. 1984. — Vol. 100. — P. 535−540.
  208. Krupinski K., Breddin H.K., Casu B. Anticoagulant and antithrombotic effects of chemically modified heparins and pentosanpoly-sulfate // Haemostasis. 1990. — Vol. 20, N 2. — P. 81−92.
  209. Kuyas C., Doolittle R. A syntetic Gly-Pro-Arg derivative that binds to plasma albumin and inhibits fibrin formation//Thromb. Haemost. 1983.-N l.-P. 356−356.
  210. Lam S. C.-T., Plow E.F., Ginsberg E.H. Platelet membrane GP lib heavy chain forms a complex with GP Ilia that binds Arg-Gly-Asp peptides//Blood. 1989. — 733. — 6. — P. 1513−1518.
  211. Laudano A., Doolittle R. Syntetic pptide derivates that bing fibrinogen and prevent the polymerization of fibrin monomers//Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1978. — N 7. — P. 3085−3098.
  212. Leake L.D. The leeches as a scientific tool // Endevour. 1983. -N7.-P. 88−93.
  213. Leger D., Karniguian A., Soria J. Inhibition of some activaties of thrombin by a collagen-derived octapeptide//Haemostasis. 1985. -N 5.-P. 293−299.
  214. Lerou J., Leelers M.H., Delahousse B. et al. Treatment of heparin associated thrombocytopenia and thrombosis with low molecular weight heparin (CY-216) // Semin. Thrombos. Haemost. 1985. -Vol. 11, N 3. — P. 326.
  215. Leung L., Bennett J.S., Schwartz B. New antithrombotic agents //ASH Educational Materials 1998. — P.136−153.
  216. Levine M. Low molecular weight heparin // Agressologie. -1989. Vol. 30, N 6. — P. 347−348.
  217. Lewis B., Grassman E., Wrona L., Rangel Y. Novastan anticoagulation during renal stent implant in a patient with heparin-induced thrombocytopenia//Blood Coagulation And Fibrinolysis. 1997. — V. 8. — N. l.-P. 54−58.
  218. Lewis S., Higgins D., Shafer J. Effect of EDTA, Gly-Pro-Arg-Pro and aminoacid replecement on the thrombin catalysed release of fibrinopeptides//Molecular biology of fibrinogen and fibrin. New York. — 1983.-P. 669−670.
  219. Liem T.K., Teel R., Shulcla S., Silver D. The glycoprotein Ilb/IIIa antagonist c7E3 inhibits platelet aggregation in the presence of heparin-associated antibodies //J. Vase. Surg. 1997. — Vol.25, N. 1- P. 124−30.
  220. Losito R., Losito C. Molecular weight of heparin versus biologic activity. Some additional considerations // Semin. thrombosis and hemostasis. 1985. — Vol. 11, N 1. — P.29−33.
  221. Lynch J., Sitko G., Lehman E., Vlasuk G. Primary prevention of coronary arterial thrombosis with the factor Xa inhibitor rTAP in a canine electrolytic injuri model//Thromb. Haemost. 1995. — V. 74. -N2.-P. 640−645.
  222. Machin S.J., Verstrate M. Clinical Usage of heparin. Present and future frends // Scand. J. Haematol. 1980. — Vol. 25. — P. 188.
  223. Mahadoo J. Endothelial sequestration of heparin administered136by the intrapulmonary route 11 Atherosclerosis. 1981. — Vol. 38, N 7. -P. 197−200.
  224. Mao S., Huang J., Welebob C., Neeper M., Garsky V., Shafer J. Identification and characterization of variants of tick anticoagulant peptide with increased inhibitory potency toward human factor Xa//Biochemistry. 1995.-V. 34.-N 15.-P. 5098−5103.
  225. March N., Gaffney P., Stiff G. The effect of pentosan polysul-phate (SPSU) on the fibrinolytic enzyme system // Haemostasis. -1984.-Vol. 14, N 1.-P. 36−38.
  226. Martin P.D., Robertson W" Turk D., Huber R., Bode W., Edwards B.F. The structure of residues 7−16 of the A alpha-chain of human fibrinogen bound to bovine thrombin at 2.3-A resolution //J. Biol. Chem. 1992. — Vol.267, N. l 1.-P.7911−20.
  227. Massonef-Castel S., Pelissier E., Dreyfus G. et al. Prophylaxic thromboembolism of low molecular weight heparin // Lancet. 1984. -Vol. 1. -P. 1182−1183.
  228. McKay D., Laurell C. The interaction of heparin with plasma proteins. Demonstration of different binding sites for antithrombin III complex and clinical//Med. 1980. -V. 95.-N 11.-P. 69−80.
  229. Meraihi Z., Lutz O., Frey A., Buch A.C. Heparin: biochemical acts // Arch. Int. Pharmac. 1989. — Vol. 297. — P. 286−293.
  230. Miale J., Mende T. A syntetic iodinated polypeptides that inhibits polymerization of fibrinogen//Blut. 1971. — N 2. — P. 76−79.
  231. Miraglia C., Greenberg C. Measurement of blood coagulation137factor XHIa formation in plasma containing Gly-Pro-Arg-Pro // Anal. Biochem. 1985. -N 1. — P. 165−171.
  232. Morin Y. Fraxiparine: analytical and structural data. Pharmacology, clinical trials. Paris, 1987. — 14 p.
  233. Mousa S.A., De Grado W.F., Mu D.X., Kapil R.P., Lucchesi B.R., Reilly T.M. Oral antiplatelet, antithrombotic efficacy of DMP 728, a novel platelet GPIIb/IIIa antagonist //Circulation 1996. -Vol.93, N.3.-P.537−43.
  234. Newman P.J., Allen R.W., Kahn R.A. et al. Quantitation of membrane GP Ilia on intact human platelets using the monoclonal antibody // Blood. 1985. — 65. — 1. — P. 227−232.
  235. Niewiarowski S., McLane M.A., Kloczwiak M., Stewart G.J. Disintegrins and other naturally occurring antagonists of platelet fibrinogen receptors //Semin. Hematol. 1994. — Vol.31, N.4. — P.289−300.
  236. Nugaent D.J., Kunicki T.J., Berglund C. et al. A human monoclonal autoantibody recognizes a neoantigen on GP IIIA expressed on stored an activated platelets // Blood. 1987. — 70. — 1. — P. 16−22.
  237. Okamoto S., Hijikata A., Kinjo K., Kikumoto R. A novel series of synthetic thrombininhibitors kaving extremeli potent and highly selective action// Kobe J. Med. Sci. 1977. — Vol. 21. — P. 43−51.
  238. O’Toole T.E., Katagiri Y., Faull R.J., Peter K., Tamura R., Quaranta V., Loftus J.C., Shattil S.J., Ginsberg M.H. Integrin cytoplasmic domains mediate inside-out signal transduction //J. Cell. Biol.- 1994.-Vol.124, N.6- P. 1047−59.
  239. Patrono C. Aspirin as an antiplatelet drug //N. Engl. J. Med. -1994. Vol.330, N. 18. — P.1287−1294.
  240. Perutelli P., Pisano E., Mon P. Gr Inhibizione recettore specific della funzione piastrinica antagonisti delle GP Ilb/IIIa: Una rassegna // Gaslini. 1994. — 26. — 3. — P. 162−169.
  241. Phillips D.R., Charo I.F., Parise L.V., Fitzgerald L.A. The platelet membrane glycoprotein Ilb-IIIa complex //Blood 1988. -Vol. 71 N4. -P. 831−43.
  242. Phillips D.R., Scarborough R.M. Clinical pharmacology of epti-fibatide //Am. J. Cardiol. 1997. — Vol.80, N.4A. — P. l 1B-20B.
  243. Pierschbacher M.D., Ruoslahti E. Cell attachment activity of fi-bronectin can be duplicated by small synthetic fragments of the molecule //Nature 1984. — Vol.309, N5963. — P30−33.
  244. Plow E.F., D’Souza S.E., Ginsberg M.H. Ligand binding to GPIIb-IIIa: a status report //Semin. Thromb. Hemost. 1992. -Vol.18, N3.-P.324−32.
  245. Plow E.F., Ginsberg M.H. Specific and saturable binding of plasma fibronectin to thrombin-stimulated human platelets // J. Biol. Chem. 1981. — Vol. 256, N18, — P. 9477−9482.
  246. Plow E.F., Srouji A.H., Meyer D., Marguerie G., Ginsberg M.H. Evidence that three adhesive proteins interact with a common recognition site on activated platelets //J. Biol. Chem. 1984. -Vol.259, N9.-P.5388−91.
  247. PRISM Study Investigators: Platelet Receptor Inhibition in Ischemic Syndrome Management. A comparison of aspirin plus ti-rofiban with aspirin plus heparin for unstable angina //N. Engl. J. Med. 1998. — Vol.338, N.21. — P.1498−505.
  248. Root-Bernstein R., Westall R. Fibrinopeptide A binds Gly-Pro-Arg-Pro//Proc. Nat. Acad.Sci. USA. 1980. — V. 81. — P. 4339−4342.
  249. Rostin M., Moutestruc J., Monin G. et al. Fraxiparine clinical applications // Fundam. Clin. Pharmacol. — 1990. — N 4. — P. 17−23.
  250. Ruoslahti E., Pierschbacher M.D. New perspectives in cell adhesion: RGD and integrins //Science 1987.-Vol.238, N.4826. -P.491−7.
  251. Samama M., Hemker H.C. Low molecular weight heparin -clinical use // Haemostasis. 1988. — Vol. 26, N 4. — P. 4−14.
  252. Sandercock P. Antiplatelet therapy with aspirin in acute ischeamic stroke //Thromb. Haemost. 1997. — Vol.78, N.l. — P. 180 182.
  253. Sass G., Pepper D.S., Cashi J.D. Investigation on antithrombin in normal plasma and serum // Brit. J. Haematol. 1979. — Vol. 30, N 6. — P. 265−272.
  254. Schafer A.I. The hypercoagulable state // Ann. Later. Med. -1985. Vol. 102, N 6. — P. 814−828.
  255. Schraden J. Nidermolekulare heparine // Arzmimittel therapie. -1988.-Bd. 6, N5.-S. 147−155.
  256. Schror K. Antiplatelet drugs. A comparative review //Drugs -1995. Vol.50, N. 1 — P.7−28.
  257. Shafer J., Higgins D., Lewis S. Study steit kinetic parameters for the thrombin catalyzed conversion of human fibrinogen to fi-brin//Thromb. a. Haemost. 1983.-N 1.-P. 186−186.
  258. Smith R., Green J. Actions and interactions of antithrombin and heparin//Brit. J. Haemotol. 1987. — V. 66, N 2. — P. 415−421.
  259. Stein R., Preiss D.U. Antikoagulatien // Krankenhous Arzt. -1984. Bd. 57. — S. 24−32.
  260. Stremberger A., Stohr R., Ziegler L., Blumel G. Actionof radix Salvia milthiorrhizae decoctions on cjagulation and fibrinoly-sis//Thromb. Haemost. 1983. -V. 50. -N 1. — P. 198−198.
  261. Takagi K., Suzuki S. Anticoagulant peptides jbtained from human fibrinogen degradation products by plasmin//Thromb. Res. -1979.-N 16.-P. 737−746.
  262. Tanaka S., Tomoike H. Antithrombotic and haemorrhagic effects of hirudin// Jpn. Heart J. 1988. — Vol. 29. — P. 77−79.
  263. Tandon N.N., Kralisz U., Jamieson G.A. Identification of glycoprotein IV-(CD36) as-a-primary receptor for platelet-collagenjidiie^ sion //J. Biol. Chem. 1989. — Vol. 264, N 13. — P. 7576−83.
  264. Teng C.M., Huang T.F. Snake venom constituents that affect platelet function //Platelets 1991. — Vol.2 — P.77−87.
  265. The CAPTURE Study: Randomised placebo-controlled trial of abciximab before and during coronary intervention in refractory unstable angina//Lancet 1997. — Vol.349, N.9063 — P. 1429−35.
  266. The EPIC Investigation. Use of a monoclonal antibody directed against the platelet glycoprotein Ilb/IIIa receptor in high-risk coronary angioplasty //N. Engl. J. Med. 1994. — Vol.330,N14. — P. 956−61.
  267. The EPILOG Investigators: Platelet glycoprotein Ilb/IIIa receptor blockade and low-dose heparin during percutaneous coronary revascularization //N. Engl. J. Med. 1997. — Vol.336, N.24 — P. 168 996.
  268. Thomas D.P., Merton R.E. Effects of low molecular weight--heparins // Thrombos. Res. 1985. — Vol. 44, N 6. — P. 234−238^
  269. Tsao P.W., Bozarth J.M., Jackson S.A., Forsythe M.S., Flint S.K., Mousa S.A. Platelet GPIIb/IIIa receptor occupancy studies using a novel fluoresceinated cyclic Arg-Gly-Asp peptide //Thromb. Res. -1995. Vol.77, N.6 — P.543−56.
  270. Uszynsky M. Anticoagulant activity peptides from the human placenta//Thromb. Res. 1979. — V. 16. — P. 689−694.
  271. Van Ryn Me Kenna J., Ofosu F., Hirsh J., Buchman M. Anti144thrombotic effects of glycosaminoglycans with different degrees of sulphation//Brit. J. Haematol. 1989. — Vol. 71, N 2. — P. 265−269.
  272. Van Zyl W.B., Pretorius G.H., Hartmann M., Kotze H.F. Production of a recombinant antithrombotic and fibrinolytic protein, PLATSAK, in Escherichia coli //Thromb. Res. 1997. — Vol.88, N.5. — P.419−26.
  273. Vane J.R. Inhibition of prostaglandin synthesis as a mechanism of action for aspirin-like drugs //Nat. New. Biol. 1971. — Vol.231, N.25. — P.2352−6.
  274. Verstrate M. Clinical usage of heparin // Triangle. 1984. — Vol. 23, N2.-P. 49−55.
  275. Verstrate M., Machin S.J. Clinical Usage of heparin. Present and future frends // Scand. J. Haematol. 1980. — Vol. 25. — P. 188.
  276. Vlasuk J. Structural and functional characterization of tick anticoagulant peptide (TAP): a potent and selective inhibitor of blood coagulation factor Xa//Thromb. Haemost. 1993. — V. 70. — N 1. — P. 212−216.
  277. Vun C., Evans S., Chong B. Cross-reactivity study of low molecular weight heparins and heparinoid in heparin-induced thrombo-cytopenia//Thromb. Res. 1996. -V. 81. -N 5. — P. 525−532.
  278. Walenga J., Fasanella A., Iqbal O., Hoppensteadt D., Ahmad S., Wallis D., Bakhos M. Coagulation laboratory testing in patients treated with argatroban//Semin. Thromb. Haemost. 1999. — V. 25. -Suppl. l.-P. 61−66.
  279. Walenga J.M., Fareed J., Hoppensteadt D et al. / Fraxiparine Recent Pharmacological and Clinical Data. Stuttgart, 1990. — P. 103 118.
  280. Wang J., Hsu M., Tery C. Antihemostatic effect of Hsien-Ho-Tsao (Agrimonia pilosa) // Amer. J. Clin. Med. 1984. — Vol. 12, N 1−4.-P. 116−121.
  281. Watt K., Cotrell B., Strong D., Doolittle R. Amino acid sequence studies on the a-chein of human fibrinogen//Biochemistry. -1979.-N24.-P. 5410−5416.
  282. Wehmeier A., Schneider W. Platelet volume parameters as a diagnostic tool: the influence of anticoagulation and storage conditions on platelet impedance volume //Klin. Wochenschr. 1989. -Vol.67, N19,-P.980−4.
  283. Weinstein M., Deykin D. Quantitative abnormality of an a-Chain molecular weight from in the fibrinogen of cirrhotic pa-tients//Brit. J. Haematol. 1978. -V. 40. — P. 617−630.
  284. Weisel J.W., Nagaswami C., Vilaire G., Bennett J.S. Examination of the platelet membrane glycoprotein Ilb-lila complex and its interaction with fibrinogen and other ligands by electron microscopy //J. Biol. Chem. 1992. — Vol.267, N23. — P. 16 637−43.
  285. Wenkel-Drace J.D. Evidence for a cycking receptor pool // Amer. J. Pathol. 1990. — 136. -1. — P. 61−70.
  286. Yeh C.H., Peng H.C., Yih J.B., Huang T.F. A new short chain RGD-containing disintegrin, accutin, inhibits the common pathway of human platelet aggregation //Biochim. Biophys. Acta. 1998. -Vol. 1425, N.3.-P.493−504.
  287. AT III антитромбин III BP — время рекальцификации ВС — время самосборки фибрина Г — гепарин1. ЕА единицы активности1. С сапропель1. ТВ тромбиновое время1. ТЦ тромбоциты1. ТП тромбопластин1. ФБ фибрин1. ФГ фибриногенi эффективность торможения
Заполнить форму текущей работой

На отлично!