Физиологические особенности иммунного статуса и микрофлоры влагалища и кишечника в норме и при урогенитальной инфекции

Оценка физиологического состояния иммунного статуса, микробиоценоза кишечника и влагалища у здоровых женщин представляет собой важный аспект исследований, так как является отправным моментом для сравнения данных показателей при патологии.

На современном этапе микрофлору кожи, желудочно-кишечной, урогенитальной систем рассматривают как один из основных факторов, обеспечивающих стабильность гомеостаза организма [51].

Нарушения качественного и/или количественного содержания представителей нормальной микрофлоры организма, происходящие под воздействием различных факторов, влекут за собой адаптивные или необратимые изменения в соответствующем микроэкологическом звене, именуемые термином «дисбиоз» или «дисбактериоз» .

Система антиинфекционной устойчивости (резистентности) организма обязательно включает не только микробный, но и иммунный статус. Однако до сих пор вопрос о состоянии этих систем, как у здоровых женщин, так и у пациентов с воспалительными заболеваниями генитального тракта, несмотря на большое количество исследований, остается не решенным [3,93,156,168].

Широкое распростронение дисбиотических состояний и воспалительных заболеваний репродуктивного тракта и дисбиозов кишечника, вызываемых условно — патогенной микрофлорой делает необходимым контроль за состоянием нормальной микрофлоры и коррекцию нарушенного микробиоценоза как важный этап профилактики воспалительных заболеваний генитального тракта.

В связи с этим оценка физиологического состояния иммунного статуса, микробиоценоза влагалища и толстого кишечника у здоровых женщин представляет важный и актуальный аспект исследований.

Цель и задачи исследования

.

Целью исследования явилось изучение физиологических особенностей состояния иммунного статуса и микроэкологии (влагалища, толстого кишечника) у здоровых женщин, женщин группы риска и женщин с воспалительными заболеваниями генитального тракта. Обоснование комплексной немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений в данных системах гомеостаза.

Исходя из цели, данной работы, нами были определены следующие задачи исследования:

1. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса здоровых женщин;

2. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин составивших группу риска;

3. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин с урогенитальными инфекциями;

4. дать оценку эффективности немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений у женщин группы риска.

Научная новизна работы.

Впервые дана комплексная оценка особенностей иммунологических (иммунный статус) и микробиологических показателей (влагалища и кишечника) у здоровых женщин.

Произведен сочетанный анализ иммунологических и микробиологических показателей (влагалища и кишечника) у женщин имеющих специфические условия труда (группа риска).

Доказана и научно обоснована необходимость немедикаментозной профилактики микробиоценоза влагалища и кишечника у женщин имеющих специфические условия труда (группа риска).

Произведена оценка и сравнение этих показателей у здоровых женщин и женщин с урогенитальной инфекцией. Показаны изменения микробиологической и иммунологической защиты организма у женщин с урогенитальной инфекцией.

На основании определения комплекса бактериологических исследований доказана необходимость оценки состояния микробиологических показателей (влагалища и кишечника) у женщин с урогенитальной инфекцией.

На основании проведенных микробиологических исследований, впервые установлена прямая положительная корреляционная связь между дисбалансом микрофлоры влагалища и кишечника у женщин группы риска и женщин с урогенитальной инфекцией.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Результаты проведенных исследований позволяют производить сравнительную оценку состояния иммунного и микробного статуса организма здоровых женщин и женщин, страдающих урогенитальной инфекцией.

Результаты исследований являются обоснованием для немедикаментозной коррекции микробиологических и иммунных расстройств у женщин группы риска.

Результаты работы могут быть использованы практическими врачами для применеия коррекции микробиологических и иммунологических расстройств женщин группы риска.

Полученные данные могут представлять интерес для научно-практических учреждений, занимающихся проблемами профилактики и коррекции функциональных растройств организма в целом.

Данные исследований могут быть использованы в образовательных программах и курсах при чтении лекций по физиологии для студентов и врачей на биологических и медицинских кафедрах.

Подготовлены материалы для широкого круга слушателей (студентов, населения).

Апробация диссертационного материала.

Материалы исследования доложены на семинарах кафедры нутрициологии РУДН (2001;2004г.) — научно-практической конференции «Современные аспекты интегральной медицины», г. Судак (2002г.) — научно-практической конференции «Фитотерапия и курортология», г. Симферополь (2002г.) — семинаре «Вопросы инфектологии в акушерстве и гинекологии», г. Севастополь (2002г.) — семинаре «Репродуктивное здоровье женщин», г. Севастополь (2002г.) — научно-практической конференции «Здоровое питание населения России», г. Москва (2003г.) — 5-ом Славяно-Балтийском национальном форуме, г. Санкт-Петербург (2003г.) — научно-практической конференции «Современные технологии фитонутрициологии в акушерстве, гинекологии и педиатрии», РУДН, г. Москва (2003г.). 1-ой международной конференции «Современные аспекты реабилитации в медицине», Ереван (2003г.), журнале «Вопросы питания» (2005г.).

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 121 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, результатов работы, заключения и выводов, списка литературы. Изложение материала проиллюстрировано 18 таблицами, 5 рисунками.

ВЫВОДЫ.

1. Сравнительный анализ физиологических особенностей иммунитета и микробиоценоза влагалища и кишечника выявил различия в этих системах у здоровых женщин, женщин группы риска и женщин с урогенитальной инфекцией.

2. Показана зависимость состава микрофлоры влагалища от состава микрофлоры кишечника. Установлено, что у практически здоровых женщин состояние нормального биоценоза влагалища наблюдается в 51,1% случаев, биоценоз промежуточного типа (который также считается нормой) у 48,9%. Показано, что в составе биоценоза влагалища доминируют лактобактерии в 88,8% случаев (7,2+0,14 lg КОЕ/мл) по сравнению с бифидобактериями, найденными у 50% женщин (5,6+0,11 lg КОЕ/мл), патогенные бактерии по количеству не превышали предельно допустимых норм.

3. Установлено, что в кишечнике здоровых женщин содержание бифидобактерий преобладало над лактобациллами и выявлялось у 100% женщин (количество бифидобактерий 9,07+0,24 lg КОЕ/г, количество лактобацилл 7,9+0,22 lg КОЕ/г). Уровень условно патогенной микрофлоры соответствовал нормативным показателям. По сравнению с уровнями промышленных регионов и урбанизированных городов количественные величины лактои бифидобактерий у женщин были выше.

4. Исследование биоценоза влагалища женщин группы риска выявило высокую частоту (90%) выделения лактобактерий, среднее количество лактобактерий составило 6,14+0,17 lg КОЕ/мл, бифидобактерии обнаруживались у 40% женщин в количестве 4,24+0,18 lg КОЕ/мл, что достоверно ниже, чем у практически здоровых женщин основной группы (р<0,05). Имелась тенденция к повышению условно патогенных бактерий.

5. Показаны заметные изменения биоценоза кишечника женщин группы риска по сравнению с группой здоровых женщин: невысокая численность лактобактерий до 7,06+0,12 lg КОЕ/г, снижение уровня бифидобактерий (8,03+0,20 lg КОЕ/г) и стрептококков до 3,33+0,8 lg КОЕ/г (р<0,01), повышение концентрации энтерококков до 5,20+0,14 lg КОЕ/г (р<0,05), увеличение грамположительных спорообразующих палочек рода Clostridium (5,51+0,12 lg КОЕ/г, р<0,05) и грибов рода Candida 3,26±0,16 lg КОЕ/г.

6. Найдена прямая положительная корреляция между нарушениями в микробиоценозах влагалища и кишечника у женщин группы риска (коэффициент корреляции 0,8, р< 0,01).

7. Установлено, что в лейкограмме здоровых женщин содержание лимфоцитов, лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов эозинофилов соответствовали норме. Показано, что иммунорегуляторный индекс здоровых женщин соответствовал 1,30+0,09, уровни субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+) соответствовали также варианту нормы. Выяснено состояние гуморального звена иммунитета у здоровых женщин: IgA 1,65+0а1,6г/л, IgM 1,08±0,13г/л, IgG 12,2±0,41г/л. Исследование аналогичных показателей у женщин группы риска не выявило заметных отклонений в гуморальном и клеточном звеньях иммунитета от нормы.

8. Установлены сдвиги иммунного статуса (гуморального и клеточного) у женщин с урогенитальной инфекцией по сравнению с теми же показателями женщин группы риска. Выявлены изменения микрофлоры влагалища и кишечникам в сторону дисбиоза при УГИ, так нормоценоз наблюдался у 25,6% женщин, промежуточный тип микробиоценоза — у 26,7% женщин, дисбиоз влагалища — у 32,2% женщин. Воспалительные проявления со стороны влагалища в форме вагинита были выявлены у 15,5% обследованных женщин.

9. Показана целесообразность использования препарата «Коллоидное серебро» «Флоралдофилус» для коррекции микрофлоры влагалища и кишечника женщин группы риска, поскольку данные системы в первую очередь подвержены влиянию неблагоприятных факторов (профессиональных, стрессовых, экологических и т. д.). Установлено увеличение количества бифидобактерий в кишечнике с 8,03±0,20 lg КОЕ/г до 9,82±0,12 lg КОЕ/г, лактобактерий с 7,06±0,12 lg КОЭ/г до 8,06±0,22 lg КОЕ /г, количество эшерихий, энтерококков, стафилококков, клостридий. Дрожжеподобных грибов p. Candida значительно снижалось, т. е. микрофлора кишечника в группе риска характеризовалась как нормальная.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В заключении необходимо отметить важность проведения исследования физиологического состояния микробиоценоза влагалища, кишечника и иммунного статуса у здоровых женщин в условиях определенного региона с целью определения варианта нормативных показателей.

Целью исследования явилось изучение физиологических особенностей состояния иммунного статуса и микроэкологии (влагалища, толстого кишечника) у здоровых женщин, женщин группы риска и женщин с воспалительными заболеваниями генитального тракта, для определения варианта нормативных показателей. Обоснование комплексной немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений в данных системах гомеостаза.

В задачи данного исследования входило:

1. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса здоровых женщин;

2. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин составивших группу риска;

3. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин с урогенитальными инфекциями;

4. дать оценку эффективности немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений у женщин группы риска.

Для решения поставленных задач были применены адекватные методы исследования, состоящие из микроскопических и микробиологических исследований микрофлоры влагалищамикробиологических методов исследования микрофлоры кишечникаметодов исследования параметров иммунологического статусакомплексный анализ на наличие возбудителя Chl. Trachomatis в организме женщин, состоящий из иммунофлюоресцентного, иммуноферментного и цитологического исследований.

В ходе исследования были получены результаты, которые будут способствовать профилактике патологических изменений в организме женщин.

Под наблюдением находилось 210 женщин, из них 90 человек — здоровые женщины, они составили основную группу, 30 человек — женщины группы риска и 90 человек — женщины, составившие группу с УГИ (урогенитальные инфекции).

Наши исследования показали, что биоценоз влагалища у здоровых небеременных женщин репродуктивного возраста (основная группа), характеризовавшийся доминированием лактобацилл, отсутствием грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов, наличием единичных лейкоцитов и «чистых» эпителиальных клеток, наблюдали в 51,1% Подобная картина отражала типичное состояние нормального биотопа влагалища.

Биоценоза влагалища, характеризовавшийся умеренным или незначительным количеством лактобацилл, наличием грамположительных кокков, грамотрицательных палочекс наличием незначительной лейкоцитарной реакцией, обнаружением моноцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, наблюдали в 48,9% случаев и определили как промежуточный тип, который является пограничным типом и часто наблюдается у здоровых женщин, редко сопровождаясь субъективными жалобами и клиническими проявлениями.

При исследовании видового состава влагалищной микрофлоры у женщин основной группы выяснено, что в микрофлоре доминируют молочнокислые бактерии и главным образом — лактобациллы у 80 из 90 обследованных (88,8%) и бифидобактерии — у 45 (50%), которые также относятся к представителям нормального микробиоценоза влагалища или рассматриваются как компенсирующие микроорганизмы при снижении уровня лактофлоры. Концентрации молочнокислых бактерий, в сравнении с литературными данными, были выше и составили соответственно 7,2*0,14 lg КОЕ/мл и 5,6*0,11 lg КОЕ/мл.

Концентрации высеваемых условнопатогенных микроорганизмов достоверно были ниже показателей приводимых в литературе. Так из факультативных анаэробов и аэробов чаще всего обнаруживались стафилококки (30%) в концентрации 2,8*0,23 lg КОЕ/мл, стрептококки высевались у 21,6% в концентрации 2,38*0,28 lg КОЕ/мл. Также у женщин наиболее часто во влагалище обнаруживались непатогенные коринебактерии (47,7%) в концентрации 2,65*0,33 lg КОЕ/мл. Из грамотрицательных бактерий были высеяны эшерихии — у 8 обследованных (8,8%) на уровне 2,72*0,25 lg КОЕ/мл. Сравнительно редко (у 16,6% обследованных) обнаруживали грибы p. Candida, в концентрации 2,69*0,16 lg КОЕ/мл.

Гарднереллы (G. Vaginalis) у здоровых женщин не обнаружены, однако в литературе имеются данные, что у 6−60% женщин гарднереллы могут обнаруживаться в количествах <4 lg КОЕ/мл [50,127].

Результаты, полученные нами в этой группе, свидетельствуют, что нормальная микрофлора влагалища представлена различными анаэробными и аэробными видами микроорганизмов, среди которых преобладают анаэробные виды лактобацилл. У некоторой части женщин встречаются бифидобактерии, кишечная палочка, стафилококки и другие виды, составляющие нормальный биоценоз влагалища, обеспечивающий, прежде всего антагонистическую функцию против чужеродных бактерий.

Сравнительный анализ показателей микроценоза влагалища здоровых женщин и данными, приведенными в литературе.

1,8,91 618,34,44,52,61,166,176 182], выявил некоторые особенности, которые выражались в увеличении концентрации лактобактерий, снижении концентрации стафилококков, коринебактерий и отсутсвии гарднерелл.

На количественные показатели молочнокислых бактерий в микрофлоре кишечника в значительной степени влияет характер используемой диеты. Изучение диет обследуемых женщин показало доминирование в рационе питания кисломолочных и растительных продуктов над мясными. Так, при исследовании микрофлоры кишечника женщин основной группы среди индигенной флоры бифидобактерии преобладали над лактобациллами и выявлялись у 100% женщин (в количествах соответственно 9,07*0,24 lgKOE/r и 7,9*0,22 lgKOE/r). Данные показатели не противоречили нормам, приведенным в литературе [19,38,173], однако, были достоверно выше по сравнению с уровнями данных микроорганизмов у жительниц промышленных регионов и крупных урбанизированных городов.

Таким образом, достаточно высокие уровни молочнокислых бактерий можно обьяснить с одной стороны особенностями питания женщин в условиях региона, с другой — более благоприятными экологическими условиями данного региона.

Дальнейшее изучение микрофлоры кишечника также демонстрирует влияние кисломолочно-растительного рациона питания, выражающееся в сниженой концентрации клостридий по сравнению с литературными данными [38,64] (соответственно 4,6*0,09 lgKOE/r, 6−7 lgKOE/r), хотя процент выявляемое&tradeсоставляет 30%, что выше данных приведенных в литературе, это не противоречит тому, что повышение численности клостридий происходит при несбалансированной диете с преобладанием в пищевом рационе мясной пищи. Уровни грамположительных кокков — стрептококков и стафилококков, входящих в состав факультативной микрофлоры, соответствовали нормальным показателям приводимым в литературе. Обнаружение дрожжеподобных грибов p. Candida в составе микрофлоры кишечника обследуемых женщин в 48,8% соответствовало уровню 2,72*0,11 lgKOE/r, что так же является вариантом нормы, хотя процент выявляемоси был достоверно выше данных приведенных в литературе [38,39,43,60].

Показатели лейкоформулы соответствовали значениям, приводимым в литературе: леикоциты 6,01*0,18 '10 лимфоциты 1,63*0,23 «10 7л (30,33* 4,7%), нейтрофилов 60,3*4,9%, моноциты 5,57* 2,3%, эозинофилы 3,4* 0,85%.

Процент фагоцитирующих нейтрофилов составил 77,13*3,4%, фагоцитарный индекс (ФИп) — среднее число фагоцитированных бактерий в одном нейтрофиле — был 6,7*0,72. Таким образом, процент нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз, способность нейтрофилов к поглощению и перевариванию чужеродных веществ явились выражением полноценной защитной реакции организма со стороны фагоцитарного звена.

При изучении клеточного и гуморального звеньев иммунитета средние уровни данных параметров не выходили за границы рекомендуемых пределов приведенных в литературе [115,121], хотя большинство показателей были приближены к нижним значениям данных пределов.

Общее содержание Т-лимфоцитов (CD3+) соответствовало — 1,29+0,14″ 10 7л и 56,2+3,42%- субпопуляции Т-лимфоцитов — Т-хелперы (CD4+) 0,65+0,1*10 7л и 35,2+2,6%- Т-супрессоры (CD8+) — 0,58±0,09 т07л, 28,0±2,77%- В-лимфоциты (CD22+) — 0,20+0,5'109/л, 12,65+1,81%. Уровни сывороточных имуноглобулинов, характеризующих функциональную активность В-лимфоцитов составили: JgA 1,65+0,16 г/л> JgM 1,08+0,13 г/л, JgG 12,2+0,41 г/л. Помимо определения численности популяций и субпопуляций, важное значение придается вычислению показателя CD4+/ CD8+ - так называемого хелперно-супрессорного отношения, в группе здоровых женщин данный показатель соответствовал 1,30+0,09.

У женщин группы риска, по результататам микроскопических исследований, ключевые клетки не обнаружены. Подсчет в мазках лейкоцитов показал: лейкорея (количество лейкоцитов в содержимом влагалища от 10 до 100) установлена у 10 (38,6%) женщин группы риска и у 67 (81,1%) женщин группы с УГИ. У женщин группы риска, как во влажных мазках, так и в препаратах, окрашенных по Граму во всех наблюдениях (100%) обнаруживаются эпителиальные клетки, характерные для конкретной фазы менструального цикла, и длинные прямые палочки, по своему морфологическому строению напоминающие типичные формы лактобактерий (93,4%).

У женщин группы риска истинный нормоценоз отмечался у 26,6%, еще 46,6% женщин имели незначительные сдвиги в составе микрофлоры влагалища, не затрагивающие основных ее представителей (лактобацилл) и не сопровождающиеся клиническими симптомами патологического процесса, что позволило определить данное состояние как промежуточный тип вагинального биоценоза и отнести его к варианту нормы. У 26,7% обследованных женщин обнаружен дисбиоз влагалища, характерным признаком которого было исчезновение или резкое снижение количественного содержания лактобацилл в содержимом влагалища и отсутствие симптомов воспалительного процесса.

Таким образом, у 73,3% женщин группы риска наблюдали нормальную картину влагалищного микробиоценоза. Однако выявленный дисбиоз у 26,7% указывает на то, что практически здоровые женщины должны проходить диспансерное обследование у гинеколога не реже 1 раза в полгода, для возможной наиболее ранней диагностики и выявления различных гинекологических заболеваний.

При более глубоком изучении вагинального микроценоза установлено, что у женщин группы риска наблюдается высокая частота (90%) выделения лактобактерий — микроорганизмов доминирующих в вагинальной микрофлоре. Среднее количество лактобактерий составило 6,14+0,17 lg КОЕ/мл, что было достоверно ниже чем в основной группе (р<0,05), у 10% женщин группы риска количество лактобактерий было менее 5 lg КОЕ/мл. Бифидобактерии обнаруживались в 40% (до 4,24+0,18 lg КОЕ/мл), что было достоверно ниже чем у женщин основной группы (р<0,05). Стрептококки обнаружены у 23,3% женщин в концентрации 2,67+0,35 lg КОЕ/мл. У 26,7% обследованных женщин группы риска из содержимого влагалища были выделены стафилококки (до 3,40+0,4 lg КОЕ/мл), в 13,3% случаев обнаруживались в невысоких количествах (до 3,55+0,08 lg КОЕ/мл) коринеподобные микроорганизмы, энтерококки — 10% (до 2,33+0,62 lg КОЕ/мл), эшерихии в 10% (до 2,07+0,8 lg КОЕ/мл). Относительно часто обнаруживались дрожжеподобные грибы рода Candida (70%), в концентрации превышающую концентрацию у женщин основной группы (3,24+0,19 lg КОЕ/мл).

Таким образом, исследование влагалищного микробиоценоза у женщин группы риска показало доминирование нормальных уровней защитной флоры над условно-патогенными бактериями (хотя уровни защитной микрофлоры были достоверно ниже таковых в основной группе) и достоверное увеличение концентраций стафилококков, коринебактерий и грибов p.Candida.

При изучении микрофлоры кишечника установлено, что почти каждая вторая (49,6%) обследованная пациентка имела изменения кишечного биоценоза.

Изучение микробиоценоза толстого кишечника женщин группы риска выявило снижение уровня защитной флоры по бифидобактериям (8,03+0,20 lg КОЕ/г) у 100% обследуемых.

Для лактобактерий была характерна высокая частота выявления (100%), однако численность их была не высокой (до 7,06+0,12 lg КОЕ/г lg). В 12,2% случаев в кишечнике женщин группы риска присутствовали в больших количествах (5,51+0,12 lgKOE/r) грамположительные спорообразующие палочки рода Clostridium. Увеличение концентрации бактерии рода Clostridium (р<0,05), по-видимому, связано со снижением концентрации молочнокислых бактерий. Дрожжеподобные грибы рода Candida в данной группе встречались в 100% случаев (3,26+0,16 КОЕ/г). Обнаружение у всех женщин увеличенного роста грибов рода Candida так же свидетельствует о нарушениях межвидовых соотношений микроорганизмов в кишечнике женщин группы риска.

В результате проведенного микробиологического скрининга установлено, что у 26,7% женщин наблюдались отклонения от нормального состава микрофлоры влагалища, а у 49,6% диагностированы изменения кишечного биоценоза. При этом 26,7% женщин имели сочетанные изменения микрофлоры влагалища и кишечника. Эубиотическое состояние соответствующих микроценозов обнаружено только 50,4% из общего числа обследованных женщин группы риска.

Анализ результатов изучения микробиоценоза кишечника и влагалища у одних и тех же обследованных группы риска показал, что существует корреляционная зависимость между изменениями микробных популяций в этих экологических нишах (коэффициент корреляции 0,8, р<0,01).

Таким образом, результаты, полученные в проведенных исследованиях, позволяют сделать следующие выводы:

— у женщин группы риска наблюдаются изменения со стороны микробиоценоза влагалища и кишечника;

— имеется прямая корреляция между эубиозом влагалища и желудочно-кишечного тракта. Микрофлора кишечника является более чувствительной и динамичной экологически чистой по сравнению с микрофлорой влагалища, она раньше реагирует на неблагоприятные факторы, воздействующие на организм женщины.

Вследствие неоднородности полученных результатов возникла необходимость выделения факторов, оказывающих наибольшее влияние на состояние микробной системы у женщин группы риска.

Учитывая, что группу риска составили женщины, работающие в инфекционной больнице, то дисбактериальное изменение микрофлоры в этой группе, по-видимому, можно объяснить с точки зрения профессиональной вредности (работа с антибиотиками, хлорной известью и другими препаратами, оказывающими угнетающее действие на микрофлору).

Изучение иммунологических параметров у женщин группы риска не выявило каких-либо существенных особенностей от соответствующих показателей в основной группе.

Так в лейкограмме не было достоверных различий между показателями содержания лейкоцитов 5,77*0,24 109/л, абсолютного количества лимфоцитов 1,78*0,1109/л и эозинофилов 3,23−0,17%. В отношении относительного количества лимфоцитов 40,8*3,7% можно говорить о достоверном увеличении клеток у женщин группы риска (р<0,01). Относительное и абсолютное содержание нейтрофилов (2,18*0,9 10 9/л и 59,7*5,2%) имело тенденцию к снижению по сравнению с показателями у женщин основной группы. Процентное содержание моноцитов было достоверно ниже (3,47 * 0,25%), чем в основной группе (р<0,05). Изучение иммунологических параметров у женщин группы риска не выявило каких-либо существенных особенностей от соответствующих показателей в основной группе. Абсолютная концентрация Т-лимфоцитов (CD3+) не имела достоверных различий в обеих группах. Относительное содержание этих клеток имело тенденцию к незначительному снижению в группе риска. Содержание CD4+ соответствовало уровням в основной группе, что свидетельствует о нормальной хелперной активности Т-лимфоцитов. Уровень супрессорных клеток (CD8+) в группе риска имел тенденцию к снижению, но существенно не отличается от показателей основной группы (0,51*0,13 109/л и 0,58*0,08 109/л, соответственно). Соотношение концентраций CD4+ и CD8+, которое характеризует иммунорегуляторный индекс (ИРИ) было практически одинаково в обеих группах (1,30*0,09 и 1,31*0,04 соответственно). Абсолютное и относительное содержание В — лимфоцитов (CD22+) не имело значимых различий, по сравнению с показателями в основной группе. Содержание сывороточного JgA в группе риска было увеличено до 2,1*0,07 г/л (в основной группе 1,65*0,16 г/л), в то же время показатели содержали JgG и JgM в группе риска не имели существенных различий с показателями в основной группе.

Таким образом, показатели клеточного и гуморального иммунитета у женщин составивших группу риска существенно не отличались от показателей основной группы. Однако имелись особенности, которые нельзя отнести к патологическим изменениям, поскольку они находились в пределах допустимых норм и не всегда были статистически достоверными.

Полученные результаты микробиологических и иммунологических показателей у женщин группы риска сравнивали с результатами обследований женщин с урогенитальной инфекцией (группа с УГИ), с целью отграничения норм от патологии.

Индикацию C. trachomatis, как возбудителя и причины урогенитальной инфекции у обследуемых женщин мы проводили одновременно цитологическим, иммуноферментным, иммунофлюоресцентным методами.

Диагноз хламидийной инфекции устанавливали, на основании клинической картины заболевания и данных лабораторных методов исследований, врачи женских консультаций (Огнева С.И., Булатова Э. А., Виноградова Н.А.).

Стабильное обнаружение нейтрофилов во влагалище женщин группы с УГИ показывает, что инфекция является воспалительным процессом. Лейкорея может быть объяснена усиленной транссудацией лейкоцитов через дистрофически измененную слизистую оболочку влагалища. У женщин группы с УГИ также в 100% случаев в мазках обнаруживались эпителиальные клетки, соответствующие фазе менструального цикла, но лактобактерии наблюдали только в 59 (65,6%) случаях. У14(15,5%) пациенток в группе женщин с УГИ были обнаружены ключевые клетки.

У обследуемых женщин группы с УГИ нормоценоз влагалища обнаружен у 25,6%, промежуточный тип у 26,7% незначительное повышение количества лейкоцитов (10−30 в поле зрения). У 32,2% обнаружен дисбиоз влагалища. Следует отметить, что у 15,5% женщин с вагинитом бактериоскопическим методом регистрировали сплошное поле зрение лейкоцитов, значительный дефицит эпителиальных клеток и бактерий.

У 3 (3,3%) женщин обнаружены трихомонады, дрожжеподобные грибы выявлены у 17 (18,8%) пациенток.

Полученные данные говорят о том, что у женщин с УГИ (в данном случае хламидийная инфекция) может наблюдаться нормальный (физиологический) микробиоценоз влагалища.

Сравнительный анализ вагинальной микрофлоры в группе женщин с УГИ показал наличие нарушений в её составе по сравнению с данными показателями в группе риска.

Лактобактерии выявлялись только в 50% случаев, а их концентрация составила лишь 4,6+0,19 lg КОЕ/мл исследуемого материала (р<0,05). Бифидобактерии выявлялись у 21,1% женщин, но в незначительных количествах (2,24+0,14 lg КОЕ/мл) (р<0,05). В то же время повышались количество и частота выявления бактерий, относящихся к категории условно-патогенных микроорганизмов. У 21,1% значительно увеличивалось количество энтерококков до 4,16+0,23 lg КОЕ/мл (р<0,05), у 26,7% высевались коринебактерии. Выявлялись, характерные для бактериальных вагинозов, грамотрицательные не спорообразующих анаэробные бактерии — гарднереллы (у 15,5%). Грибы рода Candida выявлялись у 63,3% женщин в концентрациях достоверно превышающие таковые в группе риска (соответственно 4,6+0,13 lg КОЕ/мл и 3,2410,19 lg КОЕ/мл) (р<0,05).

Анализ микрофлоры репродуктивного тракта женщин группы с УГИ показал, что патологический материал у 25 (27,7%) женщин наряду с хламидиями включал одного клинически значимого представителя условно-патогенной микрофлоры. У 64 (71,1%) на фоне хламидийной инфекции выявлялось более 2 видов условно-патогенных возбудителей, обычно присутствующей во влагалище здоровых женщин. В норме их концентрация очень не велика, а вирулентность низкая. В связи с этим для проявления их патогенных свойств необходимы высокие концентрации, которые обычно превышают Ю4КОЕ на 1мл влагалищного отделяемого.

У 14(15,5%) женщин микробные ассоциации кроме хламидий включали G. Vaginalis, частота выделения генитальных микоплазм составила 7,7%. У женщин группы риска микоплазмы не обнаружены. Нами выделялись два вида генитальных микоплазм: Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum.

Таким образом, микроэкология репродуктивного тракта при урогенитальных инфекциях в отличие от здоровых женщин и женщин, составивших группу риска, характеризовалась снижением обсемененности влагалища лактобациллами — основными представителями нормальной микрофлоры — и, как следствие, снижением колонизационной резистентности. В результате увеличивалось количество условно-патогенных бактерий. Данные наблюдения совпадают с исследованиями других авторов, освещенными в литературе. Полученные результаты указывают на целесообразность и необходимость коррекции дисбиотических нарушений урогенитальной микрофлоры при инфекции.

При определении содержания представителей эубиоза кишечника установлены как количественные, так и качественные изменения состава кишечной микрофлоры у обследуемых женщин.

Анализируя состояние микробиоценоза кишечника женщин группы с УГИ было выявлено выраженное снижение уровня защитной флоры по бифидо-у.

100% и лактобактериям у 67,7% женщин (соответственно до 7,10*0,09 lg КОЕг и до 5,52*0,11 lg КОЕ/г, р<0,01), с одной стороны, и повышение концентрации условно патогенных бактерй: энтерококков у 10% женщин (до 8,11*0,06 lg КОЕ/г), стафилококков у 100% (4,46*0,14 lg КОЕ/г) (р<0,01), клостридий у 77,8% (до 6,25*0,41 lg КОЕ/г), грибов рода Candida у 46,7% (до 4,05*0,15 lg КОЕ/г) — с другой.

Проведенные исследования показали, что в лейкограмме обследуемых женщин обнаружены различия в абсолютном количестве лимфоцитов (группа риска — 1,78*0,1г/л, группа с УГИ — 2,28*0,17г/л), нейтрофилов (соответственно 2,18*0,9 и 3,55*0,31%, р<0,05) и эозинофилов (соответственно 2,23*0,17%, 4,51*0,13%, р<0,05).

Процент нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз, достоверно был ниже, чем в группе риска (62,01*1,32 и 79,86*2,9 соответственно) (р<0,01). При анализе фагоцитарного числа, выяснилось, что оно превышало таковое в группе риска (10,8*0,46 и 7,61*0,65 соответственно) (р<0,01). Сниженная способность нейтрофилов к завершению фагоцитоза демонстрировалась индексом бактерицидности, который в основной группе составлял лишь 69,51*1,06%, а в группе риска — 90,9*6,65% (р<0,01).

В группе с УГИ имелась тенденция к снижению абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов (CD3+). Содержание CD4+, также было сниженным, что свидетельствует о снижении хелперной активности Т-лимфоцитов. Абсолютный уровень супрессорных клеток (CD8+) в группе с УГИ был снижен, но существенно не отличается от показателя группы риска (0,49*0,18 109/л и 0,51*0,13 109/л, соответственно). Иммунорегуляторный индекс (ИРИ) был снижен по сравнению с данными показателями в группе риска (1,01*0,1 и 1,31*0,04. соответственно). Абсолютное и относительное содержание Влимфоцитов (CD22+) не имело значимых различий, по сравнению с показателями в обследуемых группах. Содержание сывороточного.

JgA в группе с УГИ было снижено 1,55*0,13 г/л (в группе риска 2,1 *0,07 г/л), в то же время показатели содержали JgG в группе с УГИ были выше чем в группе риска (14,2*0,37 г/л и 12,2*1,58 г/л соответственно), уровень JgM так же имел тенденцию к повышению 1,33*0,12 г/л (в группе риска 1,18 *0,2 Г/Л).

При определении содержания представителей эубиоза кишечника установлены как количественные, так и качественные изменения состава кишечной микрофлоры у обследуемых женщин.

Данные изменения в микроэкологии репродуктивного тракта у женщин с урогенитальной инфекцией, вероятно, изначально являются предрасполагающим фактором, как для размножения патогенной микрофлоры, так и для проникновения и размножения возбудителя Chi. trachomatis в организм женщины.

Таким образом, микрофлора кишечника является более чувствительной и динамичной по сравнению с микрофлорой влагалища, она раньше реагирует на неблагоприятные факторы, воздействующие на организм женщины.

Дабы предотвратить возникновение инфекционного процесса, связанного с нарушениями в данных системах гомеостаза у практически здоровых женщин группы риска необходимо проводить профиллактическую коррекцию измененных параметров микрофлоры влагалища и кишечника.

Вышеизложенное определило актуальность поиска нетоксичных, «природных», препаратов для коррекции дисбиотических нарушений микрофлоры влагалища и кишечника и восстановление измененных параметров иммунного ответа у женщин группы риска, т. е. использование немедикаментозных методов.

С этой целью, нами в совместной работе с кафедрой Клинической нутрициологии Российского Университета Дружбы Народов и врачами женских консультаций Огневой С. И., Булатовой Э. А., Виноградовой Н. А., был использован двухэтапный метод коррекции, основным принципом которого является создание оптимальных физиологических условий восстановления микрофлоры влагалища, кишечника и иммунитета.

С этой целью были использованы препараты «Коллоидное серебро», «Флоралдофилус», изготовленные по рецептуре кафедры Клинической нутрициологии Российского Университета Дружбы народов, фирмой «Альтера-Холдинг» (Россия) (per. № 5.10/28 275 от 25.12.2001 и № 5.08.07/2842 от 17.05.2001, выданные МОЗ).

Пациентки принимали «Коллоидное серебро» как бактерицидное средство по одной чайной ложке один раз в день во время еды, разведенное в воде или соке.

Второй этап предусматривал использование бактерийного биологического препарата для коррекции вагинальной и кишечной микрофлоры. В данной работе мы применяли капсулированный препарат «Флоралдофилус» по 1 капсуле 2 раза в день, в течение месяца.

После проведенной коррекции было проведено повторное лабораторное обследование. Обследование проводили по критериям, которые имели отклонения. В микробиоценозе влагалища до профилактической коррекции у 70% женщин группы риска были обнаружены повышенные концентрации грибов p. Candida 3,24±0,19 lg КОЕ/мл, в повторном исследовании уровень данного показателя составил 2,10±0,14 lg КОЕ/мл (р<0,05). Увеличивалось количество лактобактерий до 6,9±0,2 lg КОЕ/мл (до коррекции 6,14±0,17 lg КОЕ/ мл), снижались концентрации 2,7±0,26 lg КОЕ/мл коринебактерий (до коррекции 3,55*0,8 lg КОЕ/мл), стафилококков до 3,0±0,9 lg КОЕ/г (до коррекции 3,40*0,4 lg КОЕ/мл) (рис. 1).

Применение препаратов «Коллоидное серебро», «Эхинацея «и «Флоралдофилус» позволило восстановить у женщин группы риска нормальный микробный статус кишечника.

Так, увеличивалось количество бифидобактерий (9,82±0,12 lg КОЕ/г, до коррекции 8,03±0,20 lg КОЕ/г) (р<0,01), лактобактерий (8,06±0,22 lg КОЕ/г, до коррекции 7,06±0,12 lg КОЕ/г). Количество стрептококков — увеличивалосьэнтерококков наоборот, значительно уменьшалось после проведенной немедикаментозной коррекции. Снижалось количество дрожжеподобных грибов p. Candida до 2,37*0,18 КОЕ/г (до коррекции 3,26±0,16 lg КОЕ/г). В целом, после завершения приема препарата — синбиотика IV поколениямикрофлора кишечника в группе риска стала соответствовать уровням, принимаемым за норму (основная группа).

Полученные результаты позволяют сделать вывод о целесообразности проведения профилактической коррекции влагалищного и кишечнного биоценоза препаратами «Коллоидное серебро» и «Флоралдофилус» у практически здоровых женщин группы риска с целью предупреждения возникновения заболеваний, связанных с нарушениями в данных системах гомеостаза.