Π”ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, курсовая, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°
ΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² написании студСнчСских Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚

ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ исслСдованиС свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°, спСцифичного ΠΊ сСрдСчной ΠΈΠ·ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΌΠ΅ Ρ‚Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° I

Π”ΠΈΡΡΠ΅Ρ€Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΡΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² Π½Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈΠ£Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΠΌΠΎΠ΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹

Π’ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΎ сравнСниС свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 со ΡΠ²ΠΎΠΉΡΡ‚Π²Π°ΠΌΠΈ исходного ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅, Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π±Ρ‹Π»ΠΈ созданы Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ с Ρ†Π΅Π»ΡŒΡŽ увСличСния аффинности ΠΈΡ… Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡ‚вия с Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½ΠΎΠΌ. Для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° влияния ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ Π½Π° Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» Π±Ρ‹Π» ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ ΡΡ€Π°Π²Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· иммунохимичСских… Π§ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π΅Ρ‰Ρ‘ >

Π‘ΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅

  • Бписок ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Ρ… сокращСний
  • ΠžΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹
  • 1. ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΊΠ°ΠΊ Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΉ инструмСнт опрСдСлСния Ρ‚Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° I Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ
  • 2. АнтитСла: строСниС, Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΈ, Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ΅ созрСваниС Π² ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ΅, практичСскоС ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅
    • 2. 1. Π‘Ρ‚Ρ€ΠΎΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΡƒΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠ²
    • 2. 2. Π€ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΈ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΡƒΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠ²
    • 2. 3. АффинноС созрСваниС Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» Π² ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ΅
    • 2. 4. Бпособы получСния ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΊΡ‚ичСскоС ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
  • 3. Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°: ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Π΅ ΠΈ Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹, ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ получСния, практичСскоС Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅
    • 3. 1. Π’ΠΈΠΏΡ‹ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
    • 3. 2. Бпособы получСния Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» ΠΈ ΠΈΡ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ²
      • 3. 2. 1. Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ² Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
      • 3. 2. 2. Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» ΠΈ ΠΈΡ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² de novo
      • 3. 2. 3. ЭкспрСссия Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
    • 3. 3. ΠŸΡ€Π°ΠΊΡ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
  • 4. Π£Π²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ аффинности Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
    • 4. 1. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ случайного ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π°
      • 4. 1. 1. НСнаправлСнный ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·
      • 4. 1. 2. Π£Π²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ аффинности Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π° ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ
    • 4. 2. НаправлСнный ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·
      • 4. 2. 1. ΠŸΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Ρ‹ для Π²Ρ‹Π±ΠΎΡ€Π° Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‰ΠΈΡ… мишСнСй ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π°
      • 4. 2. 2. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π°
  • ΠœΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Ρ‹ ΠΈ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹
  • 5. ΠœΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Ρ‹
    • 5. 1. Π Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Ρ‹ ΠΈ ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Ρ‹ для молСкулярно-биологичСских Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚
    • 5. 2. Π Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Ρ‹ ΠΈ ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Ρ‹ для биохимичСских Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚
    • 5. 3. Π Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Ρ‹ ΠΈ ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Ρ‹ для ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ-биологичСских исслСдований
  • 6. ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ исслСдования
    • 6. 1. ΠœΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»ΡΡ€Π½ΠΎ-биологичСскиС ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹
      • 6. 1. 1. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ‚ΠΎΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ РНК ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π³ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ΄ΠΎΠΌΡ‹, ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 6. 1. 2. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ РНК ΠΈ Π”ΠΠš
      • 6. 1. 3. ΠžΠ±Ρ€Π°Ρ‚Π½Π°Ρ транскрипция
      • 6. 1. 4. ΠŸΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Π½Π°Ρ цСпная рСакция
      • 6. 1. 5. РСакция рСстрикции
      • 6. 1. 6. ΠžΡ‚Ρ‰Π΅ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ² с Π²Ρ‹ΡΡ‚ΡƒΠΏΠ°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ½ΠΈΡ‚Π΅Π²Ρ‹Ρ… ΠΊΠΎΠ½Ρ†ΠΎΠ² Π”ΠΠš («Π·Π°Ρ‚ΡƒΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π»ΠΈΠΏΠΊΠΈΡ… ΠΊΠΎΠ½Ρ†ΠΎΠ²»)
      • 6. 1. 7. РСакция лигирования
      • 6. 1. 8. Врансформация ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈ Π²Ρ‹Ρ€Π°Ρ‰ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€
      • 6. 1. 9. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π”ΠΠš ΠΈΠ· Π½ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Ρ‹
      • 6. 1. 10. ЭкспрСссия Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Fab ΠΈ scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… Π•. col
    • 6. 2. БиохимичСскиС ΠΈ ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ-биологичСскиС ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹
      • 6. 2. 1. ΠŸΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†ΠΎΠ² для ДБН элСктрофорСза
      • 6. 2. 2. ДБН элСктрофорСз Π² ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ°ΠΊΡ€ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΌ Π³Π΅Π»Π΅
      • 6. 2. 3. БпСктрофотомСтричСскоС ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° (OD280)
      • 6. 2. 4. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΏΠΎ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρƒ Π›ΠΎΡƒΡ€ΠΈ
      • 6. 2. 5. ΠšΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π³ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ΄ΠΎΠΌΡ‹, ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 6. 2. 6. Π’Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 6. 2. 7. РСнатурация Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 6. 2. 8. Аффинная очистка Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 6. 2. 9. Π“Π΅Π»ΡŒΡ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π½Π°Ρ хроматография
      • 6. 2. 10. ΠšΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ± ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈ Π΅Π³ΠΎ Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ²
      • 6. 2. 11. ΠšΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ носитСля Sulfolink с ΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠΌ Tn
    • 6. 3. Π˜ΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΡ…ΠΈΠΌΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹
      • 6. 3. 1. Π˜ΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ±Π»ΠΎΡ‚Ρ‚ΠΈΠ½Π³
      • 6. 3. 2. Π˜ΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΡ„Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹ΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· (ИЀА)
      • 6. 3. 2. Π€Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½Π½Ρ‹ΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· (ЀИА) «ΡΡΠ½Π΄Π²ΠΈΡ‡"-Ρ‚ΠΈΠΏΠ°
      • 6. 3. 3. Π‘ΠΈΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π», ΠΈΡ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΈ Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½Π°
      • 6. 3. 4. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Fab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΈΠ· ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΎΠ»ΠΈΠ·Π° ΠΏΠΎΠ΄ дСйствиСм ΠΏΠ°ΠΏΠ°ΠΈΠ½Π°
      • 6. 3. 5. Π˜Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ΠΎΠ² связывания Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΈ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 с Ρ‚Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠ½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ комплСксом ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ повСрхностного ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ рСзонанса (SPR)
      • 6. 3. 6. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ rFab, eFab ΠΈ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 6. 4. ΠœΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ in silico ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π° Fv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 6. 5. Π€Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ дисплСй
      • 6. 5. 1. НаращиваниС ΠΈ Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… частиц
      • 6. 5. 2. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… частиц
      • 6. 5. 3. Π Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ способы ΠΎΡ‚Π±ΠΎΡ€Π° ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ дисплСя
  • Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹ ΠΈ ΠΈΡ… ΠΎΠ±ΡΡƒΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅
  • 7. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈΠ· Ρ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΡ‹ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π•. col
    • 7. 1. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦ ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 7. 2. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ молСкулярно-гСнСтичСских конструкций для экспрСссии Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦ ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 7. 3. ЭкспрСссия ΠΈ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… Π•. coli ΡˆΡ‚Π°ΠΌΠΌΠ° BL21pLysS
      • 7. 3. 1. ЭкспрСссия Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… Π•. coli ΡˆΡ‚Π°ΠΌΠΌΠ° BL21pLysS
      • 7. 3. 2. Π˜Π·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦ ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 7. 4. ВосстановлСниС Π³Π΅Ρ‚Π΅Ρ€ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠΉ структуры rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ€Π΅Π½Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ
      • 7. 4. 1. ДСнатурация Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦ ΠΈ Ρ€Π΅Π½Π°Ρ‚урация rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 7. 4. 2. ΠžΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ условий Ρ€Π΅Π½Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 7. 4. 3. ΠžΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Π°Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΉ Ρ…Ρ€ΠΎΠΌΠ°Ρ‚ΠΎΠ³Ρ€Π°Ρ„ΠΈΠΈ ΠΈ Ρ…арактСристика ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚Π°
  • 8. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈΠ· ΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°Ρ‚ичСского пространства ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π•. col
    • 8. 1. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ молСкулярно-гСнСтичСской конструкции для экспрСссии rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 Π² ΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°Ρ‚ичСском пространствС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π•. col
    • 8. 2. ΠžΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ количСства Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎ-Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΈ пСриплазматичСской экспрСссии
    • 8. 3. ΠžΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΉ Ρ…Ρ€ΠΎΠΌΠ°Ρ‚ΠΎΠ³Ρ€Π°Ρ„ΠΈΠΈ ΠΈ Ρ…арактСристика ΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚Π°
  • 9. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ€Π΅Π½Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈΠ· Π’Π’ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π•. col
    • 9. 1. ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ молСкулярно-гСнСтичСских конструкций для экспрСссии scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 9. 2. ЭкспрСссия ΠΈ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡ scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ… Π•. col
    • 9. 3. ВосстановлСниС структуры scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ€Π΅Π½Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈ ΠΈΡ… ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Π°Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΉ Ρ…Ρ€ΠΎΠΌΠ°Ρ‚ΠΎΠ³Ρ€Π°Ρ„ΠΈΠΈ
  • 10. ИсслСдованиС биохимичСских ΠΈ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΡ…имичСских свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 10. 1. Анализ элСктрофорСтичСской подвиТности Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 10. 2. ИсслСдованиС иммунохимичСских свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ ЀИА ΠΈ Π˜Π€Π
    • 10. 3. ИсслСдованиС ΠΊΠΈΠ½Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΠΈ взаимодСйствия rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈ hcTnl ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ повСрхностного ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ рСзонанса
    • 10. 4. Π‘Ρ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈ ΠΈΡ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ²
    • 10. 5. Π˜Π·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ способности ΠΊ ΡΠΎΡ€Π±Ρ†ΠΈΠΈ Π½Π° ΠΏΠΎΠ²Π΅Ρ€Ρ…ности ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Π° Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 Π² ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ с ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ ЀИА
  • 11. НаправлСнноС Π±ΠΈΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈ ΠΈΡ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΈ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ сорбционных свойств Π±ΠΈΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»
    • 11. 1. ΠŸΠΎΠ΄Π±ΠΎΡ€ условий для эффСктивного биотинилирования rFab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 11. 2. Π‘Ρ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ способности ΠΊ ΡΠΎΡ€Π±Ρ†ΠΈΠΈ Π½Π° ΠΏΠΎΠ²Π΅Ρ€Ρ…ности ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Π° Π±ΠΈΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈ ΠΈΡ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ²
  • 12. ΠœΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 12. 1. ΠžΡ‚Π±ΠΎΡ€ in silico ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
    • 12. 2. ΠžΡ‚Π±ΠΎΡ€ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ дисплСя
      • 12. 2. 1. ΠšΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π±ΠΈΠ±Π»ΠΈΠΎΡ‚Π΅ΠΊΠΈ ΠΌΡƒΡ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Π³Π΅Π½ΠΎΠ² scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… частиц
      • 12. 2. 2. ΠŸΠΎΠ΄Π±ΠΎΡ€ условий ΠΈ ΠΎΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΡ‚Π±ΠΎΡ€Π° ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ дисплСя
    • 12. 3. Π₯арактСризация ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΎΠ² ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘
      • 12. 3. 1. Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹ сравнСния аффинности ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚ΠΎΠ² scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, прСдсказанных in silico
      • 12. 3. 2. Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹ сравнСния аффинности ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, ΠΎΡ‚ΠΎΠ±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ дисплСя
  • Π’Ρ‹Π²ΠΎΠ΄Ρ‹

ΠŸΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ исслСдованиС свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°, спСцифичного ΠΊ сСрдСчной ΠΈΠ·ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΌΠ΅ Ρ‚Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° I (Ρ€Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚, курсовая, Π΄ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ)

Π‘Π΅Ρ€Π΄Π΅Ρ‡Π½ΠΎ-сосудистыС заболСвания ΠΎΡΡ‚Π°ΡŽΡ‚ΡΡ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΈΡ‡ΠΈΠ½ΠΎΠΉ высокой смСртности Π² Π ΠΎΡΡΠΈΠΈ ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… ΠΈΠ½Π΄ΡƒΡΡ‚Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎ-Ρ€Π°Π·Π²ΠΈΡ‚Ρ‹Ρ… странах. Они ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΈΠΌΠΈ ΠΈΠ· Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ распространСнных ΠΈ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ опасных Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ Π² ΠΌΠΈΡ€Π΅. По Π΄Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌ ВсСмирной ΠžΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ ЗдравоохранСния Π² 2008 Π³ΠΎΠ΄Ρƒ сСрдСчно-сосудистыС заболСвания ΠΏΡ€ΠΈΠ²Π΅Π»ΠΈ ΠΊ ΡΠΌΠ΅Ρ€Ρ‚ΠΈ 17.3 ΠΌΠΈΠ»Π»ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ² Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ составило 30% всСх случаСв смСрти Π² ΠΌΠΈΡ€Π΅. Из Π½ΠΈΡ… 6.2 ΠΌΠΈΠ»Π»ΠΈΠΎΠ½Π° Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ ΡƒΠΌΠ΅Ρ€Π»ΠΈ ΠΎΡ‚ ΠΈΠ½Ρ„Π°Ρ€ΠΊΡ‚Π° ΠΌΠΈΠΎΠΊΠ°Ρ€Π΄Π°. ΠžΡΠ½ΠΎΠ²Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ диагностики Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ сСрдца ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ физичСскоС обслСдованиС, элСктрокардиография ΠΈ ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ биохимичСских ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠ΅Ρ€ΠΎΠ² поврСТдСния ΠΌΠΈΠΎΠΊΠ°Ρ€Π΄Π°.

Π˜ΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΡ…ΠΈΠΌΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΌ диагностичСским инструмСнтом опрСдСлСния Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠ΅Ρ€ΠΎΠ² Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ. ΠžΡ‚ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° получСния ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» с ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π³ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ΄ΠΎΠΌΠ½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠšΠ΅Π»Π»Π΅Ρ€ΠΎΠΌ ΠΈ ΠœΠΈΠ»ΡŒΡˆΡ‚Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠΌ Π² 1975 Π³ΠΎΠ΄Ρƒ ΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΎ ΠΎΠ³Ρ€ΠΎΠΌΠ½ΠΎΠ΅ влияниС Π½Π° Ρ€Π°Π·Π²ΠΈΡ‚ΠΈΠ΅ Ρ„ΡƒΠ½Π΄Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Π½Π°ΡƒΠΊΠΈ ΠΈ ΠΊΠ»ΠΈΠ½ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΠΏΡ€Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠΊΠΈ. Благодаря ΡƒΠ½ΠΈΠΊΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌΡƒ свойству спСцифично ΠΈ Ρ Π²Ρ‹ΡΠΎΠΊΠΈΠΌ сродством Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡ‚Π²ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ с Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½Π°ΠΌΠΈ, ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π° Π½Π°Ρ‡Π°Π»ΠΈ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ для Π½Π°ΡƒΡ‡Π½Ρ‹Ρ… исслСдований ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€Π°ΠΏΠΈΠΈ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ. На ΡΠ΅Π³ΠΎΠ΄Π½ΡΡˆΠ½ΠΈΠΉ дСнь, Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π° ΡΠΎΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈΠ±Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΠ΄Π½Ρƒ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ‚ΡŒ ΠΎΡ‚ ΠΎΠ±Ρ‰Π΅Π³ΠΎ количСства Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Ρ… Π² Ρ‚Π΅Ρ€Π°ΠΏΠΈΠΈ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ Π² Ρ€Π°Π·Π²ΠΈΡ‚Ρ‹Ρ… странах [1].

Π˜Π·ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΌΠ° Ρ‚Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° I ΠΈΠ· ΡΠ΅Ρ€Π΄Ρ†Π° Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° (hcTnl) прСдставляСт собой Ρ€Π°Π½Π½ΠΈΠΉ ΠΈ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ спСцифичСский ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠ΅Ρ€ поврСТдСния ΠΊΠ°Ρ€Π΄ΠΈΠΎΠΌΠΈΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ², ΡΠΎΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠΆΠ΄Π°ΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ΅Ρ€ΡŒΠ΅Π·Π½Ρ‹Π΅ сСрдСчно-сосудистыС заболСвания, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈΠ½Ρ„Π°Ρ€ΠΊΡ‚ ΠΌΠΈΠΎΠΊΠ°Ρ€Π΄Π° ΠΈ Π½Π΅ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ стСнокардия. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ уровня Ρ‚Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° I Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ΡΡ для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ риска ослоТнСний с ΠΎΡΡ‚Ρ€Ρ‹ΠΌ ΠΊΠΎΡ€ΠΎΠ½Π°Ρ€Π½Ρ‹ΠΌ синдромом ΠΈ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π»Π΅Ρ‡Π΅Π±Π½Ρ‹Ρ… мСроприятий. Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΈ ΡƒΡΠΎΠ²Π΅Ρ€ΡˆΠ΅Π½ΡΡ‚Π²ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΡƒΠΆΠ΅ ΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… диагностичСских систСм, основанных Π½Π° ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ hcTnl Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ, являСтся ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ· Π°ΠΊΡ‚ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ биомСдицинской Ρ…ΠΈΠΌΠΈΠΈ.

МоноклональноС Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΎ 19Π‘7 (ΠœΠΡ‚ 19Π‘7) с Π²Ρ‹ΡΠΎΠΊΠΎΠΉ Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ распознаСт hcTnl ΠΈ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ использовано для создания ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ… систСм диагностики ΠΈΠ½Ρ„Π°Ρ€ΠΊΡ‚Π° ΠΌΠΈΠΎΠΊΠ°Ρ€Π΄Π°, основанных Π½Π° ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ hcTnl Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ. Однако Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°, ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π΅ΠΌΡ‹Π΅ Π³ΠΈΠ±Ρ€ΠΈΠ΄ΠΎΠΌΠ½Ρ‹ΠΌ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π°Π΅ΠΌΡ‹Π΅ ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ Π½Π° Ρ…роматографичСских носитСлях с ΠΈΠΌΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠΌ, А ΠΈΠ· Staphylococcus aureus, содСрТат примСси ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΡƒΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠ² ΠΌΡ‹ΡˆΠΈ, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡ‚Π²ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ с Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠΌΠΈ Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π² Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Ρ… Тидкостях, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΏΡ€ΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΊ Π»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌ Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Π°ΠΌ Π΄Π΅Ρ‚Π΅ΠΊΡ†ΠΈΠΈ исслСдуСмого Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½Π°.

ΠΠ»ΡŒΡ‚Π΅Ρ€Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹ΠΌ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ получСния Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» являСтся созданиС ΠΈΡ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ². Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄ позволяСт ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Ρ‚ΡŒ высокоочищСнныС ΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚Ρ‹ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΡƒΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠ², Π»ΠΈΡˆΠ΅Π½Π½Ρ‹Π΅ примСсСй. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, свойства Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» ΠΈ ΠΈΡ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½Ρ‹ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π³Π΅Π½Π½ΠΎ-ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ². Для измСнСния свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ Π²ΠΈΠ΄Ρ‹ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π°, Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ созданиС ΠΎΠ³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ количСства ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΎΡ€ΠΌ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° структуры комплСкса Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΎ: Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½, Π»ΠΈΠ±ΠΎ созданиС Π±ΠΎΠ»ΡŒΡˆΠΈΡ… Π±ΠΈΠ±Π»ΠΈΠΎΡ‚Π΅ΠΊ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΎΡ€ΠΌ, ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… Π² Ρ…ΠΎΠ΄Π΅ дальнСйшСй Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΎΡ‚Π±ΠΈΡ€Π°ΡŽΡ‚ Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚Ρ‹ с ΡƒΠ»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ свойствами. К Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠΌ модификациям ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ отнСсти ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ аффинности, ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ числа Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½-ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… участков, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ состава Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½ΠΎΠ², пространствСнной ΠΎΡ€ΠΈΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ участков связывания с Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½ΠΎΠΌ, молСкулярного вСса, изоэлСктричСской Ρ‚ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ†ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ иммуногСнности. Π•Ρ‰Π΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΈΠΌ прСимущСством Π³Π΅Π½Π½ΠΎ-ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΉ являСтся Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ создания Ρ€Π°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π», ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹ ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π»Π΅Π³Ρ‡Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ½ΠΈΠΊΠ°Ρ‚ΡŒ Π² Ρ‚ΠΊΠ°Π½ΠΈ, Ρ‡Π΅ΠΌ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»Ρ‹ ΠΈΠΌΠΌΡƒΠ½ΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΡƒΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠ². Π­Ρ‚ΠΈ прСимущСства особСнно Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ для создания тСрапСвтичСских Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» ΠΈ ΠΈΡ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ².

Π’ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΎ сравнСниС свойств Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 со ΡΠ²ΠΎΠΉΡΡ‚Π²Π°ΠΌΠΈ исходного ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅, Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π±Ρ‹Π»ΠΈ созданы Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ с Ρ†Π΅Π»ΡŒΡŽ увСличСния аффинности ΠΈΡ… Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡ‚вия с Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½ΠΎΠΌ. Для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° влияния ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ Π½Π° Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π» Π±Ρ‹Π» ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ ΡΡ€Π°Π²Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· иммунохимичСских свойств ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΎΡ€ΠΌ.

ΠžΠ±Π·ΠΎΡ€ Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹.

Π’Ρ‹Π²ΠΎΠ΄Ρ‹.

1. ΠžΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π° нуклСотидная ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π°Ρ Π›Π¦ ΠΈ Ρ„Π’Π¦. Π‘Ρ‹Π»ΠΈ созданы молСкулярно-гСнСтичСскиС конструкции для экспрСссии Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv ΠΈ Fab-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°, ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ условия для экспрСссии ΠΈ ΠΎΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠΈ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ².

2. Показано, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹ ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 ΠΈ ΠΈΡΡ…ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ΅ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΎ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‚ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ иммунохимичСскими свойствами ΠΈ ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π°ΠΌΠΈ связывания ΠΊΠ°ΠΊ с ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ hcTnl, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ Ρ hcTnl Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°.

3. ΠŸΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΎ in silico ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ всСх Π²ΠΈΠ΄ΠΎΠ² ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 с ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈ ΠΈΠ·Π±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π΄Π²ΠΎΠΉΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ мутациями Π² Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½-ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… участках, ΠΈ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»Π΅ΠΉ рассчитана энСргия связывания этих ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΎΡ€ΠΌ с Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½ΠΎΠΌ.

4. Из Π΄Π΅ΡΡΡ‚ΠΈ ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΎΡ€ΠΌ scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, для ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… Π±Ρ‹Π»Π° прСдсказана in silico увСличСнная Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ, ΡƒΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡŒ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€Π΅ иммунохимичСски Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Π΅ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹. Ни ΠΎΠ΄Π½Π° ΠΈΠ· ΡΡ‚ΠΈΡ… ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ„ΠΎΡ€ΠΌ Π½Π΅ ΠΈΠΌΠ΅Π»Π° Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π²Ρ‹ΡˆΠ΅, Ρ‡Π΅ΠΌ Ρƒ Π΄ΠΈΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ρ‚ΠΈΠΏΠ°.

5. Π‘ΠΎΠ·Π΄Π°Π½Π° Π±ΠΈΠ±Π»ΠΈΠΎΡ‚Π΅ΠΊΠ° Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… частиц, нСсущих Π½Π° ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΉ повСрхности scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹, содСрТащиС ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΠΈ CDR-H3, ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ ΠΎΡ‚Π±ΠΎΡ€ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… частиц Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΈΡ… ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΊ ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°Π½ΠΈΡŽ Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½Π°. НайдСны аминокислотныС ΠΏΠΎΠ·ΠΈΡ†ΠΈΠΈ Π² CDR-H3 ΠœΠΡ‚ 19Π‘7 (Н97, Н102, Н100, Н101, Н98) ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ (YH97 °F, YH97Q, AH100N, YH102V, YH102D), ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ прСдставлСны срСди ΠΎΡ‚ΠΎΠ±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚ΠΎΠ².

6. Π‘Ρ‹Π»Π° осущСствлСна экспрСссия восьми ΠΌΡƒΡ‚Π°Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚ΠΎΠ² scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠœΠΡ‚ 19Π‘7, ΠΎΡ‚ΠΎΠ±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ дисплСя. Π”Π²Π° ΠΈΠ· Π½ΠΈΡ… (YH97 °F ΠΈ AH100N+YH97F) ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π»ΠΈ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π°Ρ„Ρ„ΠΈΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΏΠΎ ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с scFv-Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°ΠΌΠΈ Π΄ΠΈΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ρ‚ΠΈΠΏΠ°.

Благодарности.

Автор Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ°Π΅Ρ‚ Π³Π»ΡƒΠ±ΠΎΠΊΡƒΡŽ ΠΏΡ€ΠΈΠ·Π½Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ своСму Π½Π°ΡƒΡ‡Π½ΠΎΠΌΡƒ Ρ€ΡƒΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŽ, Π΄ΠΎΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρƒ биологичСских Π½Π°ΡƒΠΊ, ΠšΠ°Ρ‚Ρ€ΡƒΡ…Π΅ А. Π“. Π·Π° Ρ‡ΡƒΡ‚ΠΊΠΎΠ΅ руководство, ΠΊΠΎΠ»Π»Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Ρƒ Π»Π°Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠΈ ΠΈ ΠΊΠ°Ρ„Π΅Π΄Ρ€Ρ‹ Π·Π° Π½Π΅ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠΌΡƒΡŽ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΠΊΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΈ, Π² ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, БСрСбряной Π”. Π’. ΠΈ ΠŸΠΎΡΡ‚Π½ΠΈΠΊΠΎΠ²Ρƒ А. Π‘. Π·Π° ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ ΠΈ ΡƒΡ‡Π°ΡΡ‚ΠΈΠ΅ Π² Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π΅ Π½Π° Π²ΡΠ΅Ρ… Π΅Π΅ ΡΡ‚Π°ΠΏΠ°Ρ….

Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π°Π²Ρ‚ΠΎΡ€ Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ°Π΅Ρ‚ свою ΠΏΡ€ΠΈΠ·Π½Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π›Π°ΠΌΠ°Π½Ρƒ А. Π“. ΠΈ Π›ΠΎΠΌΠ°ΠΊΠΈΠ½Ρƒ Π―. А. Π·Π° ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΡ‡ΠΈΡΠ»Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΏΠΎ ΠΎΡ‚Π±ΠΎΡ€Ρƒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ Ρ„Π°Π³ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ дисплСя ΠΈ Π‘Π°Π·Ρ‹ΠΊΠΈΠ½Ρƒ Π“. А. Π·Π° ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ ш 5/7/со ΠΌΡƒΡ‚Π°Π³Π΅Π½Π΅Π·Π°.

ΠŸΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚ΡŒ вСсь тСкст

Бписок Π»ΠΈΡ‚Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹

  1. Hagemeyer Π‘.Π•., von Zur Muhlen Π‘., von Elverfeldt D., and Peter K. Single-chain antibodies as diagnostic tools and therapeutic agents. Thromb. Haemost., 2009. 101(6): p. 1012−1019.
  2. Filatov V.L., Katrukha A.G., Bulargina T.V., and Gusev N.B. Troponin: structure, properties, and mechanism of functioning. Biochemistry, 1999. 64(9): p. 969−985.
  3. Cummins Π’., Auckland M.L., and Cummins P. Cardiac-specific troponin-I radioimmunoassay in the diagnosis of acute myocardial infarction. Am. Heart J., 1987. 113(6): p. 1333−1344.
  4. Ilva Π’., Lund J., Porela P., Mustonen H., Voipio-Pulkki L.M., Eriksson S., Pettersson K., Tanner P., and Pulkki K. Early markers of myocardial injury: cTnl is enough. Clin. Chim. Acta, 2009.400(1−2): p. 82−85.
  5. Sundberg E.J. Structural basis of antibody-antigen interactions. Methods Mol. Biol., 2009. 524: p. 23−36.
  6. Thygesen K., Alpert J.S., Jaffe A.S., Simoons M.L., Chaitman B.R., and White H.D. Third Universal Definition of Myocardial Infarction. Circulation, 2012.126(16): p. 2020−2035.
  7. Apple F.S. and Collinson P.O. Analytical characteristics of high-sensitivity cardiac troponin assays. Clin. Chem., 2012. 58(1): p. 54−61.
  8. Tate J.R., Bunk D.M., Christenson R.H., Katrukha A., Noble J.E., Porter R.A., Schimmel H., Wang L., and Panteghini M. Standardisation of cardiac troponin I measurement: past and present. Pathology (Phila). 2010. 42(5): p. 402−408.
  9. Ylikotila J., Hellstrom J.L., Eriksson S., Vehniainen M., Valimaa L., Takalo H., Bereznikova A., and Pettersson K. Utilization of recombinant Fab fragments in a cTnl immunoassay conducted in spot wells. Clin. Biochem., 2006. 39(8): p. 843−850.
  10. J. (2009) Highly functional binding surface for miniaturised solid-phase immunoassays. A spot story. URL: http://www.doria.fi/handle/10 024/43773.
  11. Saul F.A. and Alzari P.M. Crystallographic studies of antigen-antibody interactions. Methods Mol. Biol, 1996. 66: p. 11−23.
  12. Katrukha A., Bereznikova A., Filatov V., and Esakova T. Biochemical factors influencing measurement of cardiac troponin I in serum. Clin. Chem. Lab. Med., 1999. 37(11−12): p. 1091−1095.
  13. Eriksson S., Halenius H., Pulkki K., Hellman J., and Pettersson K. Negative interference in cardiac troponin I immunoassays by circulating troponin autoantibodies. Clin. Chem., 2005. 51(5): p. 839−847.
  14. Schroeder H.W., Jr. and Cavacini L. Structure and function of immunoglobulins. J. Allergy Clin. Immunol., 2010. 125(2 Suppl 2): p. S41−52.
  15. Volkov V., Kayushina R., Lapuk V., Shtykova E., Varlamova E., Malfois M., and Svergun D. Solution structures of human immunoglobulins IgG and IgM and rheumatoid factor IgM-RF. Crystallography Reports, 2003.48(1): p. 98−105.
  16. Padlan E.A. Anatomy of the antibody molecule. Mol. Immunol, 1994. 31(3): p. 169−217.
  17. Sundberg E.J. Structural basis of antibody-antigen interactions. Methods Mol Biol, 2009. 524: p. 23−36.
  18. Kashmiri S.V., De Pascalis R., Gonzales N.R., and Schlom J. SDR grafting—a new approach to antibody humanization. Methods, 2005. 36(1): p. 25−34.
  19. Padlan E.A., Abergel C., and Tipper J.P. Identification of specificity-determining residues in antibodies. FASEBJ., 1995. 9(1): p. 133−139.25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,
  20. Raghavan M. and Bjorkman P.J. Fc receptors and their interactions with immunoglobulins. Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 1996. 12: p. 181−220.
  21. Jung D., Giallourakis C., Mostoslavsky R., and Alt F.W. Mechanism and control of V (D)J recombination at the immunoglobulin heavy chain locus. Annu. Rev. Immunol., 2006. 24: p. 541−570.
  22. Chowdhury P. S. Engineering hot spots for affinity enhancement of antibodies. Methods Mol. Biol., 2003. 207: p. 179−196.
  23. Ho M. and Pastan I. In vitro antibody affinity maturation targeting germline hotspots. Methods Mol. Biol., 2009. 525: p. 293−308, xiv.
  24. Tomlinson I.M., Walter G., Jones P.T., Dear P.H., Sonnhammer E.L., and Winter G. The imprint of somatic hypermutation on the repertoire of human germline V genes. J. Mol. Biol., 1996. 256(5): p. 813−817.
  25. Maynard J. and Georgiou G. Antibody engineering. Annu. Rev. Biomed. Eng., 2000. 2: p. 339−376.
  26. Foote J. and Eisen H.N. Kinetic and affinity limits on antibodies produced during immune responses. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1995. 92(5): p. 1254−1256.
  27. Batista F.D. and Neuberger M.S. Affinity dependence of the B cell response to antigen: a threshold, a ceiling, and the importance of off-rate. Immunity, 1998. 8(6): p. 751−759.
  28. Cauerhff A., Goldbaum F.A., and Braden B.C. Structural mechanism for affinity maturation of an anti-lysozyme antibody. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2004. 101(10): p. 3539−3544.
  29. Ho M., Kreitman R.J., Onda M., and Pastan I. In vitro antibody evolution targeting germline hot spots to increase activity of an anti-CD22 immunotoxin. J. Biol. Chem., 2005. 280(1): p. 607−617.
  30. Thorpe I.F. and Brooks C.L., 3rd Molecular evolution of affinity and flexibility in the immune system. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2007. 104(21): p. 8821−8826.
  31. Davies D.R. and Padlan E.A. Twisting into shape. Curr. Biol., 1992.2(5): p. 254−256.
  32. Braden B.C. and Poljak R.J. Structural features of the reactions between antibodies and protein antigens. FASEBJ., 1995. 9(1): p. 9−16.
  33. Acierno J.P., Braden B.C., Klinke S., Goldbaum F.A., and Cauerhff A. Affinity maturation increases the stability and plasticity of the Fv domain of anti-protein antibodies. J. Mol. Biol, 2007. 374(1): p. 130−146.
  34. Cowell L.G. and Kepler T.B. The nucleotide-replacement spectrum under somatic hypermutation exhibits microsequence dependence that is strand-symmetric and distinct from that under germline mutation. J. Immunol., 2000. 164(4): p. 1971−1976.
  35. Li Y., Li H., Yang F., Smith-Gill S.J., and Mariuzza R.A. X-ray snapshots of the maturation of an antibody response to a protein antigen. Nat. Struct. Biol., 2003. 10(6): p. 482−488.J
  36. Masuda K., Sakamoto K., Kojima M., Aburatani T., Ueda T., and Ueda H. The role of interface framework residues in determining antibody V (H)/V (L) interaction strength and antigen-binding affinity. FEBSJ., 2006.273(10): p. 2184−2194.
  37. Wedemayer G.J., Patten P.A., Wang L.H., Schultz P.G., and Stevens R.C. Structural insights into the evolution of an antibody combining site. Science, 1997. 276(5319): p. 1665−1669.
  38. Bartal A.H. and Hirshaut Y. Methods ofhybridoma formation. 1987: Humana Press.
  39. Engvall E. and Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G. Immunochemistry, 1971. 8(9): p. 871−874.
  40. Van Weeman B. and Schuurs A. Immunoassay using antigen-enzyme conjugates. FEBS Lett., 1971. 15: p. 232−235.
  41. Towbin H., Staehelin T., and Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1979. 76(9): p. 4350−4354.
  42. Katrukha A., Bereznikova A., and Pettersson K. New approach to standardisation of human cardiac troponin I (cTnl). Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl., 1999. 230: p. 124−127.
  43. Koshkina E.V., Krasnosel’skii M., Fedorovskii N.M., Goriacheva E.V., Polupan A.A., Arefev A.A., and Katrukha A.G. Diagnostic value of cardiac troponin T increase in critically ill patients. Anesteziol. Reanimatol., 2009(6): p. 42−46.
  44. J.E., 3rd, Bodor G.S., Davila-Roman V.G., Delmez J.A., Apple F.S., Ladenson J.H., and Jaffe A.S. Cardiac troponin I. A marker with high specificity for cardiac injury. Circulation, 1993. 88(1): p. 101−106.
  45. Vaidya H.C. Myoglobin: an early biochemical marker for the diagnosis of acute myocardial infarction./. Clin. Immunoassay, 1994. 17(1): p. 35−39.
  46. Filatov V.L., Katrukha A.G., Bereznikova A.V., Esakova T.V., Bulargina T.V., Kolosova O.V., Severin E.S., and Gusev N.B. Epitope mapping of anti-troponin I monoclonal antibodies. Biochem. Mol. Biol. Int., 1998.45(6): p. 1179−1187.
  47. Krishnamurti U. and Steffes M.W. Glycohemoglobin: a primary predictor of the development or reversal of complications of diabetes mellitus. Clin. Chem., 2001. 47(7): p. 1157−1165.
  48. Clark P.M. Assays for insulin, proinsulin (s) and C-peptide. Ann. Clin. Biochem., 1999. 36 (Pt 5): p. 541−564.
  49. Ludwig J.A. and Weinstein J.N. Biomarkers in cancer staging, prognosis and treatment selection. Nat. Rev. Cancer, 2005. 5(11): p. 845−856.
  50. Arthur J.M., Janech M.G., Varghese S.A., Almeida J.S., and Powell T.B. Diagnostic and prognostic biomarkers in acute renal failure. Contrib. Nephrol., 2008.160: p. 53−64.
  51. Nakamura R.M. and Binder W.L. Current concepts and diagnostic evaluation of autoimmune disease. Arch. Pathol. Lab. Med., 1988.112(9): p. 869−877.
  52. Ekins R. The free hormone hypothesis and measurement of free hormones. Clin. Chem., 1992. 38(7): p. 1289−1293.
  53. Shivaraj G., Prakash B.D., Sonal V., Shruthi K., Vinayak H., and Avinash M. Thyroid function tests: a review. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci., 2009.13(5): p. 341−349.
  54. Cummings M.C., Lukehart S.A., Marra C., Smith B.L., Shaffer J., Demeo L.R., Castro C., and McCormack W.M. Comparison of methods for the detection of treponema pallidum in lesions of early syphilis. Sex. Transm. Dis., 1996.23(5): p. 366−369.
  55. Stamm W.E., Cole B., Fennell C., Bonin P., Armstrong A.S., Herrmann J.E., and Holmes K.K. Antigen detection for the diagnosis of gonorrhea. J. Clin. Microbiol., 1984. 19(3): p. 399−403.
  56. Black C.M. Current methods of laboratory diagnosis of Chlamydia trachomatis infections. Clin. Microbiol. Rev., 1997.10(1): p. 160−184.
  57. Safford J.W., Abbott G.G., Craine M.C., and MacDonald R.G. Automated microparticle enzyme immunoassays for IgG and IgM antibodies to Toxoplasma gondii. J. Clin. Pathol., 1991. 44(3): p. 238−242.
  58. Malomgre W. and Neumeister B. Recent and future trends in blood group typing. Anal. Bioanal. Chem., 2009. 393(5): p. 1443−1451.
  59. Cole L.A. Human chorionic gonadotropin tests. Expert Rev. Mol. Diagn., 2009. 9(7): p. 721−747.
  60. Donzeau M. and Knappik A. Recombinant monoclonal antibodies. Methods Mol. Biol., 2007. 378: p. 14−31.
  61. Wark K.L. and Hudson P.J. Latest technologies for the enhancement of antibody affinity. Adv. Drug Deliv. Rev., 2006. 58(5−6): p. 657−670.
  62. Hust M., Jostock T., Menzel C., Voedisch B., Mohr A., Brenneis M., Kirsch M.I., Meier D., and Dubel S. Single chain Fab (scFab) fragment. BMC Biotechnol., 2007. 7: p. 14.
  63. Jain M., Kamal N., and Batra S.K. Engineering antibodies for clinical applications. Trends Biotechnol., 2007. 25(7): p. 307−316.
  64. Chowdhury P. S. and Vasmatzis G. Engineering scFvs for improved stability. Methods Mol. Biol., 2003.207: p. 237−254.
  65. Conrad U. and Scheller J. Considerations on antibody-phage display methodology. Comb. Chem. High Throughput Screen., 2005. 8(2): p. 117−126.
  66. Telleman P. and Junghans R.P. The role of the Brambell receptor (FcRB) in liver: protection of endocytosed immunoglobulin G (IgG) from catabolism in hepatocytes rather than transport of IgG to bile. Immunology, 2000. 100(2): p. 245−251.
  67. Lo B.K.C. ed. Antibody engineering. Methods and protocols. 2004, Humana Press.
  68. Benhar I. and Pastan I. Cloning, expression and characterization of the Fv fragments of the anti-carbohydrate mAbs B1 and B5 as single-chain immunotoxins. Protein Eng., 1994. 7(12): p. 1509−1515.
  69. Wlad H., Ballagi A., Bouakaz L., Gu Z., and Janson J.C. Rapid two-step purification of a recombinant mouse Fab fragment expressed in Escherichia coli. Protein Expr. Purif., 2001. 22(2): p. 325−329.
  70. Saviranta P., Haavisto Π’., Rappu P., Karp M., and Lovgren T. In vitro enzymatic biotinylation of recombinant fab fragments through a peptide acceptor tail. Bioconjug. Chem., 1998. 9(6): p. 725−735.
  71. Presta L.G. Selection, design, and engineering of therapeutic antibodies. J. Allergy Clin. Immunol., 2005. 116(4): p. 731−736- quiz 737.
  72. Winter G., Griffiths A.D., Hawkins R.E., and Hoogenboom H.R. Making antibodies by phage display technology. Annu. Rev. Immunol., 1994. 12: p. 433−455.
  73. Smith G.P. Filamentous fusion phage: novel expression vectors that display cloned antigens on the virion surface. Science, 1985. 228(4705): p. 1315−1317.
  74. Hanes J. and Pluckthun A. In vitro selection and evolution of functional proteins by using ribosome display. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1997. 94(10): p. 4937−4942.
  75. Liu R., Barrick J., Szostak J.W., and Roberts R.W. Optimized synthesis of RNA-protein fusions for in vitro protein selection. Methods Enzymol., 2000. 1(317): p. 268−293.
  76. Daugherty P. S., Chen G., Olsen M.J., Iverson B.L., and Georgiou G. Antibody affinity maturation using bacterial surface display. Protein Eng., 1998. 11(9): p. 825−832.
  77. Boder E.T., Midelfort K.S., and Wittrup K.D. Directed evolution of antibody fragments with monovalent femtomolar antigen-binding affinity. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2000. 97(20): p. 10 701−10 705.
  78. Boder E.T. and Wittrup K.D. Optimal screening of surface-displayed polypeptide libraries. Biotechnol. Prog., 1998.14(1): p. 55−62.
  79. Boder E.T. and Wittrup K.D. Yeast surface display for screening combinatorial polypeptide libraries. Nat. Biotechnol., 1997.15(6): p. 553−557.
  80. Siegel R.W. Antibody affinity optimization using yeast cell surface display. Methods Mol. Biol., 2009. 504: p. 351−383.
  81. Odegrip R., Coomber D., Eldridge B., Hederer R., Kuhlman P.A., Ullman C., FitzGerald K., and McGregor D. CIS display: In vitro selection of peptides from libraries of proteinDNA complexes. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2004. 101(9): p. 2806−2810.
  82. E.C. (2010) Evolution of Bioaffinity Reagents by Phage Display. URL: http://www.doria.fi/handle/10 024/62387.
  83. Hoogenboom H.R. and Chames P. Natural and designer binding sites made by phage display technology. Immunol. Today, 2000. 21(8): p. 371−378.
  84. Barderas R., Desmet J., Timmerman P., Meloen R., and Casal J.I. Affinity maturation of antibodies assisted by in silico modeling. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2008. 105(26): p. 9029−9034.
  85. Pluckthun A., Schaffitzel C., Hanes J., and Jermutus L. In vitro selection and evolution of proteins. Adv. Protein Chem., 2000. 55: p. 367−403.
  86. Hanes J., Schaffitzel C., Knappik A., and Pluckthun A. Picomolar affinity antibodies from a fully synthetic naive library selected and evolved by ribosome display. Nat. Biotechnol., 2000. 18(12): p. 1287−1292.
  87. Tabuchi I., Soramoto S., Nemoto N., and Husimi Y. An in vitro DNA virus for in vitro protein evolution. FEBSLett., 2001. 508(3): p. 309−312.
  88. Matsuura T. and Yomo T. In vitro evolution of proteins. J. Biosci. Bioeng., 2006. 101(6): p. 449−456.
  89. Ulrich H.D., Patten P.A., Yang P.L., Romesberg F.E., and Schultz P.G. Expression studies of catalytic antibodies. Proc. Natl Acad. Sci. U. S. A., 1995. 92(25): p. 11 907−11 911.
  90. Levin A.M. and Weiss G.A. Optimizing the affinity and specificity of proteins with molecular display. Mol Biosyst., 2006.2(1): p. 49−57.
  91. Hawkins R.E., Russell S.J., and Winter G. Selection of phage antibodies by binding affinity. Mimicking affinity maturation. J. Mol. Biol, 1992. 226(3): p. 889−896.
  92. Yang W.P., Green K., Pinz-Sweeney S., Briones A.T., Burton D.R., and Barbas C.F., 3rd CDR walking mutagenesis for the affinity maturation of a potent human anti-HIV-1 antibody into the picomolar range. J. Mol Biol, 1995. 254(3): p. 392−403.
  93. Verma R., Boleti E., and George A.J. Antibody engineering: comparison of bacterial, yeast, insect and mammalian expression systems. J. Immunol. Methods, 1998. 216(1−2): p. 165−181.
  94. Dimitrov D.S. and Marks J.D. Therapeutic antibodies: current state and future trends—is a paradigm change coming soon? Methods Mol Biol, 2009. 525: p. 1−27, xiii.
  95. Dubel S. Recombinant therapeutic antibodies. Appl. Microbiol Biotechnol, 2007. 74(4): p. 723−729.
  96. Stemmer W.P.C. Searching sequence space. Nat. Biotechnol., 1995. 13(6): p. 549−553.
  97. Honegger A. Trobleshooting antibody fragments. 2003- Available from: http://www.bioc.uzh.ch/antibodv/IntroductionA^irtualSeminars/AE2003/source/slide01 .ht m.
  98. Lippow S.M., Wittrup K.D., and Tidor B. Computational design of antibody-affinity improvement beyond in vivo maturation. Nat. Biotechnol., 2007. 25(10): p. 1171−1176.
  99. Crameri A., Raillard S.A., Bermudez E., and Stemmer W.P. DNA shuffling of a family of genes from diverse species accelerates directed evolution. Nature, 1998. 391(6664): p. 288−291.
  100. Stemmer W.P. Rapid evolution of a protein in vitro by DNA shuffling. Nature, 1994. 370(6488): p. 389−391.
  101. Cline J., Braman J.C., and Hogrefe H.H. PCR fidelity of pfu DNA polymerase and other thermostable DNA polymerases. Nucleic Acids Res., 1996. 24(18): p. 3546−3551.
  102. Martineau P. Error-prone polymerase chain reaction for modification of scFvs. Methods Mol. Biol., 2002. 178: p. 287−294.
  103. Fujii I. Antibody affinity maturation by random mutagenesis. Methods Mol. Biol., 2004. 248: p. 345−359.
  104. Low N.M., Holliger P.H., and Winter G. Mimicking somatic hypermutation: affinity maturation of antibodies displayed on bacteriophage using a bacterial mutator strain. J. Mol. Biol., 1996. 260(3): p. 359−368.
  105. Greener A., Callahan M., and Jerpseth B. An efficient random mutagenesis technique using an E. coli mutator strain. Methods Mol. Biol., 1996. 57: p. 375−385.
  106. Irving R.A., Kortt A.A., and Hudson P.J. Affinity maturation of recombinant antibodies using E. coli mutator cells. Immunotechnology, 1996. 2(2): p. 127−143.
  107. Lantto J., Jirholt P., Barrios Y., and Ohlin M. Chain shuffling to modify properties of recombinant immunoglobulins. Methods Mol. Biol., 2002.178: p. 303−316.
  108. C.M., ΠœΠΈΠ½Π³Π°Π·Π΅Ρ‚Π΄ΠΈΠ½ΠΎΠ²Π° C.P., ЧСмСрис A.B., and Π’Π°Ρ…ΠΈΡ‚ΠΎΠ² B.A. Π­Π²ΠΎΠ»ΡŽΡ†ΠΈΡ in vitro Π΅ΡΡ‚ΡŒ Π»ΠΈ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π» ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°ΠΌ «ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Ρ‚асовки» Π³Π΅Π½ΠΎΠ²? УспСхи соврСмСнной Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, 2009. 129(4): Ρ€. 323−335.
  109. Pogulis R.J., Vallejo A.N., and Pease L.R. In vitro recombination and mutagenesis by overlap extension PCR. Methods Mol. Biol., 1996. 57: p. 167−176.
  110. Zhao H., Giver L., Shao Z., Affholter J .A., and Arnold F.H. Molecular evolution by staggered extension process (StEP) in vitro recombination. Nat. Biotechnol., 1998. 16(3): p. 258−261.
  111. Sivasubramanian A., Sircar A., Chaudhury S., and Gray J.J. Toward high-resolution homology modeling of antibody Fv regions and application to antibody-antigen docking. Proteins, 2009. 74(2): p. 497−514.
  112. Essen L.O. and Skerra A. The de novo design of an antibody combining site. Crystallographic analysis of the VL domain confirms the structural model. J. Mol. Biol., 1994. 238(2): p. 226−244.
  113. Schiweck W. and Skerra A. Fermenter production of an artificial fab fragment, rationally designed for the antigen cystatin, and its optimized crystallization through constant domain shuffling. Proteins, 1995. 23(4): p. 561−565.
  114. Marvin J.S. and Zhu Z. Computation-based design and engineering of protein and antibody therapeutics. Drug Design Reviews Online, 2005. 2(6): p. 419−425.
  115. Teng S., Michonova-Alexova E., and Alexov E. Approaches and resources for prediction of the effects of non-synonymous single nucleotide polymorphism on protein function and interactions. Curr. Pharm. Biotechnol., 2008. 9(2): p. 123−133.
  116. Yue P., Li Z., and Moult J. Loss of protein structure stability as a major causative factor in monogenic disease. J. Mol. Biol., 2005. 353(2): p. 459−473.
  117. Ng P.C. and Henikoff S. SIFT: Predicting amino acid changes that affect protein function. Nucleic Acids Res., 2003. 31(13): p. 3812−3814.
  118. РамСнский Π’. and БюняСв Π¨. Π’Ρ‹Ρ‡ΠΈΡΠ»ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠΎΡ€Ρ„ΠΈΠ·ΠΌ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠ° Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°. ΠœΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»ΡΡ€Π½Π°Ρ биология, 2009.43(2): Ρ€. 286−294.
  119. Sunyaev S., Ramensky V., and Bork P. Towards a structural basis of human non-synonymous single nucleotide polymorphisms. Trends Genet., 2000. 16(5): p. 198−200.
  120. S., Ramensky V., Koch I., Lathe W., 3rd, Kondrashov A.S., and Bork P. Prediction of deleterious human alleles. Hum. Mol. Genet., 2001. 10(6): p. 591−597.
  121. Ramensky V., Bork P., and Sunyaev S. Human non-synonymous SNPs: server and survey. Nucleic Acids Res., 2002. 30(17): p. 3894−3900.
  122. Bromberg Y. and Rost B. SNAP: predict effect of non-synonymous polymorphisms on function. Nucleic Acids Res., 2007. 35(11): p. 3823−3835.
  123. Teng S., Madej Π’., Panchenko A., and Alexov E. Modeling effects of human single nucleotide polymorphisms on protein-protein interactions. Biophys. J., 2009. 96(6): p. 2178−2188.
  124. Boas F.E. and Harbury P.B. Design of protein-ligand binding based on the molecular-mechanics energy model. J. Mol. Biol., 2008. 380(2): p. 415−424.
  125. Reumers J., Schymkowitz J., Ferkinghoff-Borg J., Stricher F., Serrano L., and Rousseau F. SNPeffect: a database mapping molecular phenotypic effects of human non-synonymous coding SNPs. Nucleic Acids Res, 2005. 33(Database issue): p. D527−532.
  126. Karchin R., Diekhans M., Kelly L., Thomas D.J., Pieper U., Eswar N., Haussler D., and Sali A. LS-SNP: large-scale annotation of coding non-synonymous SNPs based on multiple information sources. Bioinformatics, 2005.21(12): p. 2814−2820.
  127. Capriotti E., Fariselli P., and Casadio R. I-Mutant2.0: predicting stability changes upon mutation from the protein sequence or structure. Nucleic Acids Res., 2005. 33(Web Server issue): p. W306−310.
  128. Chowdhury P. S. Targeting random mutations to hotspots in antibody variable domains for affinity improvement. Methods Mol. Biol., 2002.178: p. 269−285.
  129. Yau K.Y., Dubuc G., Li S., Hirama Π’., Mackenzie C.R., Jermutus L., Hall J.C., and Tanha J. Affinity maturation of a V (H)H by mutational hotspot randomization. J. Immunol. Methods, 2005.297(1−2): p. 213−224.
  130. Chowdhury P. S. and Pastan I. Improving antibody affinity by mimicking somatic hypermutation in vitro. Nat. Biotechnol., 1999. 17(6): p. 568−572.
  131. Marvin J.S. and Lowman H.B. Redesigning an antibody fragment for faster association with its antigen. Biochemistry, 2003. 42(23): p. 7077−7083.
  132. Selzer Π’., Albeck S., and Schreiber G. Rational design of faster associating and tighter binding protein complexes. Nat. Struct. Biol., 2000. 7(7): p. 537−541.
  133. A. (2007) НовыС успСхи Π² ΠΏΡ€Π΅Π΄ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΈΠΈ пространствСнной структуры Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². URL: http://biomolecula.ru/content/l 89.
  134. А. (2008) ВорТСство ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ²: прСдсказаниС строСния Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². URL: http://biomolecula.ru/content/264.
  135. Guo J.T., Ellrott К., and Xu Y. A historical perspective of template-based protein structure prediction. Methods Mol. Biol., 2008.413: p. 3−42.
  136. Xu J., Jiao F., and Yu L. Protein structure prediction using threading. Methods Mol. Biol., 2008. 413: p. 91−121.
  137. Eswar N., Webb Π’., Marti-Renom M.A., Madhusudhan M.S., Eramian D., Shen M.Y., Pieper U., and Sali A. Comparative protein structure modeling using Modeller. Curr. Protoc. Bioinformatics, 2006. Chapter 5: p. Unit 5 6.
  138. Schwede T., Kopp J., Guex N., and Peitsch M.C. SWISS-MODEL: An automated protein homology-modeling server. Nucleic Acids Res., 2003. 31(13): p. 3381−3385.
  139. Zhang Y. I-TASSER server for protein 3D structure prediction. BMC Bioinformatics, 2008.9: p. 40.
  140. Bates P.A., Kelley L.A., MacCallum R.M., and Sternberg M.J. Enhancement of protein modeling by human intervention in applying the automatic programs 3D-JIGSAW and 3D-PSSM. Proteins, 2001. Suppl 5: p. 39−46.
  141. Lambert C., Leonard N., De Bolle X., and Depiereux E. ESyPred3D: Prediction of proteins 3D structures. Bioinformatics, 2002. 18(9): p. 1250−1256.
  142. Kelley L.A. and Sternberg M.J. Protein structure prediction on the Web: a case study using the Phyre server. Nat. Protoc., 2009.4(3): p. 363−371.
  143. Lund O., Frimand K., Gorodkin J., Bohr H., Bohr J., Hansen J., and Brunak S. Protein distance constraints predicted by neural networks and probability density functions. Protein Eng., 1997. 10(11): p. 1241−1248.
  144. Qian B., Raman S., Das R., Bradley P., McCoy A.J., Read R.J., and Baker D. Highresolution structure prediction and the crystallographic phase problem. Nature, 2007. 450(7167): p. 259−264.
  145. Zhang Y. and Skolnick J. Automated structure prediction of weakly homologous proteins on a genomic scale. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2004. 101(20): p. 7594−7599.
  146. Martin A.C.R. and Allen J. Bioinformatics Tools for Antibody Engineering, in Handbook of Therapeutic Antibodies. 2007.
  147. Wu T.T. and Kabat E.A. An analysis of the sequences of the variable regions of Bence Jones proteins and myeloma light chains and their implications for antibody complementarity. J. Exp. Med., 1970. 132(2): p. 211−250.
  148. Kabat E.A., Wu T.T., Bilofsky H., Reid-Milner M., and Perry H. Sequences of Proteins of Immunological Interest. 1983, Washington, DC: Public Health Service, NIH.
  149. Al-Lazikani B., Lesk A.M., and Chothia C. Standard conformations for the canonical structures of immunoglobulins. J. Mol. Biol., 1997. 273(4): p. 927−948.
  150. Chothia C. and Lesk A.M. Canonical structures for the hypervariable regions of immunoglobulins. J. Mol. Biol., 1987.196(4): p. 901−917.
  151. Chothia C" Lesk A.M., Tramontano A., Levitt M., Smith-Gill S.J., Air G" Sheriff S., Padlan E.A., Davies D., et al. Conformations of immunoglobulin hypervariable regions. Nature, 1989. 342(6252): p. 877−883.
  152. Martin A.C., Cheetham J.C., and Rees A.R. Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1989. 86(23): p. 9268−9272.
  153. Honegger A. and Pluckthun A. Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool. J. Mol. Biol, 2001. 309(3): p. 657−670.
  154. MacCallum R.M., Martin A.C., and Thornton J.M. Antibody-antigen interactions: contact analysis and binding site topography. J. Mol. Biol, 1996.262(5): p. 732−745.
  155. Bruccoleri R.E. Ab initio loop modeling and its application to homology modeling. Methods Mol. Biol, 2000. 143: p. 247−264.
  156. Martin A.C., Cheetham J.C., and Rees A.R. Molecular modeling of antibody combining sites. Methods Enzymol., 1991. 203: p. 121−153.
  157. Whitelegg N.R. and Rees A.R. WAM: an improved algorithm for modelling antibodies on the WEB. Protein Eng., 2000.13(12): p. 819−824.
  158. Whitelegg N. and Rees A.R. Antibody variable regions: toward a unified modeling method. Methods Mol. Biol, 2004. 248: p. 51−91.
  159. Marcatili P., Rosi A., and Tramontano A. PIGS: automatic prediction of antibody structures. Bioinformatics, 2008. 24(17): p. 1953−1954.
  160. Sircar A., Kim E.T., and Gray J.J. RosettaAntibody: antibody variable region homology modeling server. Nucleic Acids Res., 2009. 37(Web Server issue): p. W474−479.
  161. Wiehe K., Peterson M.W., Pierce B., Mintseris J., and Weng Z. Protein-protein docking: overview and performance analysis. Methods Mol. Biol, 2008.413: p. 283−314.
  162. Comeau S.R., Gatchell D.W., Vajda S., and Camacho C.J. ClusPro: an automated docking and discrimination method for the prediction of protein complexes. Bioinformatics, 2004. 20(1): p. 45−50.
  163. Sternberg M.J., Gabb H.A., Jackson R.M., and Moont G. Protein-protein docking. Generation and filtering of complexes. Methods Mol. Biol, 2000. 143: p. 399−415.
  164. Chaudhury S. and Gray JJ. Conformer selection and induced fit in flexible backbone protein-protein docking using computational and NMR ensembles. J. Mol. Biol, 2008. 381(4): p. 1068−1087.
  165. Goodsell D.S., Morris G.M., and Olson A.J. Automated docking of flexible ligands: applications of AutoDock. J. Mol. Recognit., 1996. 9(1): p. 1−5.
  166. Ewing T.J., Makino S., Skillman A.G., and Kuntz I.D. DOCK 4.0: search strategies for automated molecular docking of flexible molecule databases. J. Comput. Aided Mol. Des., 2001. 15(5): p. 411−428.
  167. Rarey M., Kramer B., Lengauer T., and Klebe G. A fast flexible docking method using an incremental construction algorithm. J. Mol. Biol., 1996.261(3): p. 470−489.
  168. Halgren T.A., Murphy R.B., Friesner R.A., Beard H.S., Frye L.L., Pollard W.T., and Banks J.L. Glide: a new approach for rapid, accurate docking and scoring. 2. Enrichment factors in database screening. J. Med. Chem., 2004.47(7): p. 1750−1759.
  169. Verdonk M.L., Cole J.C., Hartshorn M.J., Murray C.W., and Taylor R.D. Improved protein-ligand docking using GOLD. Proteins, 2003. 52(4): p. 609−623.
  170. Dominguez C., Boelens R., and Bonvin A.M. HADDOCK: a protein-protein docking approach based on biochemical or biophysical information. J. Am. Chem. Soc., 2003. 125(7): p. 1731−1737.
  171. Totrov M. and Abagyan R. Flexible protein-ligand docking by global energy optimization in internal coordinates. Proteins, 1997. Suppl 1: p. 215−220.
  172. Wriggers W. and Birmanns S. Using situs for flexible and rigid-body fitting of multiresolution single-molecule data. J. Struct. Biol., 2001. 133(2−3): p. 193−202.
  173. Sousa S.F., Fernandes P.A., and Ramos M.J. Protein-ligand docking: current status and future challenges. Proteins, 2006. 65(1): p. 15−26.
  174. Skerra A. Engineered protein scaffolds for molecular recognition. J. Mol. Recognit., 2000. 13(4): p. 167−187.
  175. Sidhu S.S., Li B., Chen Y., Fellouse F.A., Eigenbrot C., and Fuh G. Phage-displayed antibody libraries of synthetic heavy chain complementarity determining regions. J. Mol. Biol., 2004. 338(2): p. 299−310.
  176. Bostrom J., Lee C.V., Haber L., and Fuh G. Improving antibody binding affinity and specificity for therapeutic development. Methods Mol. Biol., 2009. 525: p. 353−376, xiii.
  177. Lee C.V., Liang W.C., Dennis M.S., Eigenbrot C., Sidhu S.S., and Fuh G. High-affinity human antibodies from phage-displayed synthetic Fab libraries with a single framework scaffold. J. Mol. Biol., 2004. 340(5): p. 1073−1093.
  178. Schier R., Balint R.F., McCall A., Apell G., Larrick J.W., and Marks J.D. Identification of functional and structural amino-acid residues by parsimonious mutagenesis. Gene, 1996. 169(2): p. 147−155.
  179. Brorson K., Thompson C., Wei G., Krasnokutsky M., and Stein K.E. Mutational analysis of avidity and fine specificity of anti-levan antibodies. J Immunol, 1999. 163(12): p. 66 946 701.
  180. Jackson T., Morris B.A., Martin A.C., Lewis D.F., and Sanders P.G. Molecular modelling and site-directed mutagenesis on a bovine anti-testosterone monoclonal antibody. Protein Eng., 1992. 5(4): p. 343−350.
  181. Liu Y. and Kuhlman B. RosettaDesign server for protein design. Nucleic Acids Res., 2006. 34(Web Server issue): p. W235−238.
  182. Yuan L., Kurek I., English J., and Keenan R. Laboratory-directed protein evolution. Microbiol. Mol. Biol. Rev., 2005. 69(3): p. 373−392.
  183. Wells J.A. Additivity of mutational effects in proteins. Biochemistry, 1990. 29(37): p. 8509−8517.
  184. Riechmann L. and Weill M. Phage display and selection of a site-directed randomized single-chain antibody Fv fragment for its affinity improvement. Biochemistry, 1993. 32(34): p. 8848−8855.
  185. Foote J. and Winter G. Antibody framework residues affecting the conformation of the hypervariable loops. J. Mol. Biol., 1992. 224(2): p. 487−499.
  186. Chen C., Roberts V.A., and Rittenberg M.B. Generation and analysis of random point mutations in an antibody CDR2 sequence: many mutated antibodies lose their ability to bind antigen. J. Exp. Med., 1992. 176(3): p. 855−866.
  187. Chomczynski P. and Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Anal. Biochem., 1987. 162(1): p. 156−159.
  188. Chung C.T., Niemela S.L., and Miller R.H. One-step preparation of competent Escherichia coli: transformation and storage of bacterial cells in the same solution. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1989. 86(7): p. 2172−2175.
  189. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 1970. 227(5259): p. 680−685.
  190. Lowry O.H., Rosebrough N J., Farr A.L., and Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951. 193(1): p. 265−275.
  191. Wibbenmeyer J.A., Xavier K.A., Smith-Gill S.J., and Willson R.C. Cloning, expression, and characterization of the Fab fragment of the anti-lysozyme antibody HyHEL-5. Biochim. Biophys. Acta, 1999. 1430(2): p. 191−202.
  192. Frey A., Meckelein B., Externest D., and Schmidt M.A. A stable and highly sensitive 3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine-based substrate reagent for enzyme-linked immunosorbent assays. J. Immunol. Methods, 2000. 233(1−2): p. 47−56.
  193. Adamczyk M., Gebler J.C., and Wu J. Papain digestion of different mouse IgG subclasses as studied by electrospray mass spectrometry. J. Immunol. Methods, 2000. 237(1−2): p. 95 104.
  194. Guerois R., Nielsen J.E., and Serrano L. Predicting changes in the stability of proteins and protein complexes: a study of more than 1000 mutations. J. Mol. Biol., 2002. 320(2): p. 369−387.
  195. Saito R. and Tomita M. On negative selection against ATG triplets near start codons in eukaryotic and prokaryotic genomes. J. Mol. Evol., 1999. 48(2): p. 213−217.
  196. Sharp A.J. and Slater R.J. Mung-Bean Nuclease 1 (EC 3.1.30.1). Methods Mol Biol, 1993. 16: p. 253−261.
  197. Buchner J. and Rudolph R. Renaturation, purification and characterization of recombinant Fab-fragments produced in Escherichia coli. Biotechnology. (N. Y). 1991. 9(2): p. 157−162.
  198. Mayer M. and Buchner J. Refolding of Inclusion Body Proteins, in Methods Mol. Med. 2004, Humana Press Inc. Totowa, NJ. p. 239−254.
  199. Kiefhaber T., Rudolph R., Kohler H.H., and Buchner J. Protein aggregation in vitro and in vivo: a quantitative model of the kinetic competition between folding and aggregation. Biotechnology. (N. Y). 1991. 9(9): p. 825−829.
  200. Schein C.H. and Noteborn M.H.M. Formation of soluble recombinant proteins in Escherichia coli is favored by lower growth temperature. Biotechnology, 1988. 6(291−294).
  201. Lilie H., Schwarz E., and Rudolph R. Advances in refolding of proteins produced in E. coli. Curr. Opin. Biotechnol., 1998. 9(5): p. 497−501.
  202. Arora D. and Khanna N. Method for increasing the yield of properly folded recombinant human gamma interferon from inclusion bodies. J. Biotechnol., 1996. 52(2): p. 127−133.
  203. Buchner J., Pastan I., and Brinkmann U. A method for increasing the yield of properly folded recombinant fusion proteins: single-chain immunotoxins from renaturation of bacterial inclusion bodies. Anal. Biochem., 1992. 205(2): p. 263−270.
  204. De Bernardez Clark E., Schwarz E., and Rudolph R. Inhibition of aggregation side reactions during in vitro protein folding. Methods Enzymol., 1999. 309: p. 217−236.
  205. Chalmers J.J., Kim E., Telford J.N., Wong E.Y., Tacon W.C., Shuler M.L., and Wilson D.B. Effects of temperature on Escherichia coli overproducing beta-lactamase or human epidermal growth factor. Appl. Environ. Microbiol., 1990. 56(1): p. 104−111.
  206. Lee M.H., Park T.I., Park Y.B., and Kwak J.W. Bacterial expression and in vitro refolding of a single-chain fv antibody specific for human plasma apolipoprotein B-100. Protein Expr. Purif., 2002. 25(1): p. 166−173.
  207. Lei S.P., Lin H.C., Wang S.S., Callaway J., and Wilcox G. Characterization of the Erwinia carotovora pelB gene and its product pectate lyase. J. Bacteriol., 1987. 169(9): p. 43 794 383.
  208. Pugsley A.P. and Possot O. The general secretory pathway of Klebsiella oxytoca: no evidence for relocalization or assembly of pilin-like PulG protein into a multiprotein complex. Mol. Microbiol., 1993. 10(3): p. 665−674.
  209. Arbabi-Ghahroudi M., Tanha J., and MacKenzie R. Prokaryotic expression of antibodies. Cancer Metastasis Rev., 2005. 24(4): p. 501−519.
  210. Lee N., Holtzapple C.K., and Stanker L.H. Cloning, expression and characterization of recombinant Fab antibodies against dioxin. J. Agric. Food Chem., 1998. 1(46): p. 33 813 388.
  211. Maeda F., Nagatsuka Y., Ihara S., Aotsuka S., Ono Y., Inoko H., and Takekoshi M. Bacterial expression of a human recombinant monoclonal antibody fab fragment against hepatitis B surface antigen. J. Med. Virol, 1999. 58(4): p. 338−345.
  212. Desogus A., Burioni R., Ingianni A., Bugli F., Pompei R., and Fadda G. Production and characterization of a human recombinant monoclonal Fab fragment specific for influenza A viruses. Clin. Diagn. Lab. Immunol, 2003.10(4): p. 680−685.
  213. Diamandis E.P. and Christopoulos T.K. The biotin-(strept)avidin system: principles and applications in biotechnology. Clin. Chem., 1991. 37(5): p. 625−636.
  214. Santala V. and Lamminmaki U. Production of a biotinylated single-chain antibody fragment in the cytoplasm of Escherichia coli. J. Immunol. Methods, 2004. 284(1−2): p. 165−175.
  215. Smith G.P. and Petrenko V.A. Phage Display. Chem. Rev., 1997. 97(2): p. 391−410.
  216. Benhar I. and Reiter Y. Phage display of single-chain antibody constructs. Curr Protoc Immunol, 2002. Chapter 10: p. Unit 10 19B.
  217. Rojas G. Seleccion de fragmentos de anticuerpo especificos a partir de bibliotecas en fagos filamentosos. URL: http://elfosscientiae.cigb.edu.cu/PDFs/Muestras/chapterl 1 .pdf.
  218. Yu H., Dong X.Y., and Sun Y. An alternating elution strategy for screening high affinity peptides from a phage display peptide library. Biochemical engineering journal, 2004. 18(3): p. 169−175.
  219. Thomas W.D. and Smith G.P. The case for trypsin release of affinity-selected phages. Biotechniques, 2010. 49(3): p. 651−654.
  220. Lee C.M., Iorno N., Sierro F., and Christ D. Selection of human antibody fragments by phage display. Nat Protoc, 2007. 2(11): p. 3001−3008.
  221. Marks J.D. and Bradbury A. Selection of Human Antibodies from Phage Display Libraries. Antibody Engineering: Methods and Protocols, 2003. 248: p. 161.
  222. Hoogenboom H.R. Designing and optimizing library selection strategies for generating high-affinity antibodies. Trends Biotechnol., 1997. 15(2): p. 62−70.
Π—Π°ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒ Ρ‚Π΅ΠΊΡƒΡ‰Π΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΎΠΉ