Материалы и методы

Дизайн исследования и выборка. Дизайн исследования — «случай-контроль» [3] В исследование было включено 206 ранее переболевших или больных рожей (случаи) и 422 человека с исключенным диагнозом рожи (контроли). Все участники исследования были лица казахской национальности. Отбор в группу случаев с диагностированной рожей проводился из поступивших больных в инфекционную больницу г. Семей последовательно за период с сентября 2013 года по сентябрь 2015 года. Дополнительно набор больных проводился в семейно-врачебных амбулаториях (№ 1, 2, 3, 9, 11, 16, 17) и поликлиниках (№ 4 смешанного типа, консультативно-диагностическая № 3,г. Семей, Казахстан) за тот же период. Информация о лицах, ранее переболевших рожей, была взята из архивных данных историй болезней больных рожей, находившихся на стационарном лечении в Инфекционной больнице города Семей с января 2008 года по август 2013 года. Контрольная группа была сформирована из лиц, проходивших профилактические осмотры в вышеуказанных семейно-врачебных амбулаториях и поликлиниках, и у которых диагноз рожи был исключен. Диагноз рожи был поставлен на основании клинических и анамнестических данных согласно коду МКБ-10 (Международная классификация болезней — 10).

Критериями включения в группу случаев являлись: установленный диагноз рожи, возраст 18 лет и старше, казахская национальность, эритематозная и эритематозно-буллезные формы заболевания, проживание на территории г. Семей.

Критериями исключения были генетические заболевания в анамнезе, онкологические заболевания, хронические вирусные гепатиты, бруцеллез, иммунодефицитные состояния в анамнезе, заболевания почек, сердечно-сосудистой системы, печени, крови в терминальной стадии и гнойные осложнения рожи в виде абсцесса, флегмоны, некротического фасциита.

Критериями включения для контрольной группы были: исключенный диагноз рожи и отсутствие заболевания в анамнезе, возраст 18 лет и старше, казахская национальность, проживание на территории г. Семей. Критерии исключения были аналогичны таковым в группе случаев.

Сбор данных. Выделение геномной ДНК из крови проводилось при помощи наборов QIAamp DNA Mini Kit (QIAGEN, Germany) в соответствии с инструкцией изготовителя. Концентрации ДНК были измерены при помощи Nanophotometer P330 (Implen). Генотипирование ДНК проводилось на амплификаторе CFX96™ Real-Time PCR (Bio-Rad). Программа амплификации включала предварительную денатурацию при 94? в течение 3 минут, далее 50 циклов 94? в течение 10 секунд и 58? в течение 50 секунд. Исследования проводились на базе Республиканского Государственного предприятия (РГП) «Национальный центр биотехнологий», г. Астана.

Статистическая обработка данных. Сравнение частот встречаемости аллелей и генотипов полиморфизма гена ИЛ10 между группой случаев и группой контролей проводили с помощью критерия ч2 Пирсона и отношений шансов (ОШ) с 95% доверительными интервалами (ДИ). Сравнения проводились в группе больных рожей и здоровых лиц, далее в подгруппах больных (первичной и рецидивирующей) с лицами контрольной группы. Соотношение частот генотипов и аллельных вариантов генов проверялось на соответствие закону Харди-Вайнберга. Статистические расчеты проводились на калькуляторе для генетических расчетов по программе Ген Эксперт. (http://gen-exp.ru/calculator_or.php).

Протокол исследования был разработан и утвержден на заседании Этического комитета Государственного медицинского университета города Семей (протокол № 2 от 13.11.2013 года). Все участники исследования были информированы о цели и методах исследова-ния и дали письменное согласие на участие.